СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ НАСТУПЛЕНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ У ЖЕНЩИН С ТРУБНО-ПЕРИТОНЕАЛЬНЫМ БЕСПЛОДИЕМ В ПРОГРАММЕ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОГО ОПЛОДОТВОРЕНИЯ Российский патент 2014 года по МПК G01N33/53 

Описание патента на изобретение RU2523401C1

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования наступления беременности у женщин с трубно-перитонеальным бесплодием в результате лечения методом экстракорпорального оплодотворения.

Актуальность предлагаемого способа определяется тем, что трубно-перитонеальный фактор занимает ведущее место в структуре бесплодного брака (35-60%) и в значительной степени препятствует восстановлению репродуктивной функции (Кулаков В.И., Корнеева И.Е. Практическая гинекология. - М.: 2002). Общепризнанным, перспективным способом преодоления бесплодия у женщин с трубно-перитонеальным фактором является метод экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). Тем не менее, эффективность данного метода остается низкой: частота наступления беременности в расчете на один перенос составляет 32,4%, по данным European IVF-Monitoring Program, 2006. В связи с этим, особую актуальность приобретает поиск методов, позволяющих прогнозировать наступление беременности после ЭКО. Широкое внедрение этих способов в практическое здравоохранение поможет существенно повысить эффективность этого метода лечения. Однако в настоящее время надежные прогностические критерии наступления беременности у пациенток с трубно-перитонеальным фактором немногочисленны.

Известен способ прогнозирования наступления беременности, заключающийся в том, что в фолликулярной жидкости определяют свободнорадикальную активность и при показателях общей антиоксидантной активности 0,05 и выше прогнозируют наступление беременности с вероятностью более 50% (патент RU №2357673. Способ прогнозирования результатов лечения бесплодия методом экстракорпорального оплодотворения / Потехина Ю.П., Щербатюк Т.Г., Хрулева Н.В. - Изобретения. Полезные модели. - 2009. - №16).

Однако этот способ имеет ряд недостатков:

1. Способ имеет высокий риск возникновения осложнений, так как забор фолликулярной жидкости возможен только при проведении трансвагинальной пункции фолликулов под общим обезболиванием и может осложниться кровотечением.

2. Использование способа происходит во время протокола ЭКО - пункции фолликулов, т.е. на том этапе, когда уже невозможно изменить тактику стимуляции суперовуляции яичников пациентки (наиболее затратный этап ЭКО).

3. Предложенный способ имеет низкую точность - 50%.

В качестве параметра, позволяющего прогнозировать наступление беременности у женщин с трубным фактором бесплодия, у которых отсутствует гидросальпинкс, предлагают использовать показатель уровня жидкости в полости матки, определяемый с помощью ультразвукового исследования в день забора ооцитов, и при значениях этого показателя в передне-заднем размере, равном или больше 3,5 мм, прогнозируют неблагоприятный исход программы ЭКО и ПЭ (Не R.H., Gao H.J., Li Y.Q., Zhu Х.М. The associated factors to endometrial cavity fluid and the relevant impact on the IVF-ET outcome// Reprod. Biol. Endocrinol.- 2010. - Vol.14, №8. - P.46).

Однако этот способ имеет ряд недостатков:

1. Использование способа происходит во время протокола ЭКО - пункции фолликулов, т.е. на том этапе, когда уже невозможно изменить тактику стимуляции суперовуляции яичников пациентки (наиболее затратный этап ЭКО).

2. Данный способ применим лишь у женщин с трубным фактором бесплодия, которые не имеют даже признаков гидросальпинкса.

3. Отсутствуют данные о точности способа.

Наиболее близким по техническому решению к заявляемому способу является способ прогнозирования наступления беременности в программе ЭКО у женщин, в том числе с трубно-перитонеальным бесплодием, по определению экспрессии в ткани эндометрия фактора, ингибирующего лейкемию (leukemia inhibitory factor, LIF). Метод заключается в том, что у женщины проводят биопсию эндометрия в лютеиновую фазу менструального цикла, предшествующего началу протокола овариальной гиперстимуляции, оценивают уровень экспрессии LIF методом иммуногистохимического окрашивания и при наличии интенсивного окрашивания срезов на LIF прогнозируют наступление беременности (Serafini P., Rocha A.M., Osorio СТ., da Silva I., Motta E.L., Baracat E.C. Endometrial leukemia inhibitory factor as a predictor of pregnancy after in vitro fertilization// Int. J. Gynaecol. Obstet- 2008. - Vol.102, №1. -P.23-27).

Данный способ был выбран нами в качестве прототипа. Однако он имеет ряд недостатков:

1. При проведении иммуногистохимического окрашивания нередко отмечается плохая воспроизводимость результатов в связи с погрешностями при приготовлении срезов, неоднородным по интенсивности окрашиванием тканей, особенностями микроскопии (Иммунологические методы / Под ред. Х.Фримеля. - М.: Мир, 1979. - 518 с).

2. Высокие трудозатраты и длительное время проведения иммуногистохимического окрашивания срезов (5-6 часов).

3. Известно, что LIF является индикатором рецептивности эндометрия у фертильных женщин, однако у женщин с бесплодием данные о характере экспрессии LIF в эндометрии противоречивы и некоторые авторы считают, что для оценки имплантационного потенциала эндометрия недостаточно определять только экспрессию LIF (Aghajanova L. Update on the role of leukemia inhibitory factor in assisted reproduction// Curr Opin Obstet Gynecol. - 2010. - Vol.22, №3. -P.213-219.).

4. Отсутствуют данные о точности, чувствительности и специфичности способа.

Указанные недостатки предлагается устранить в заявляемом способе.

Техническим результатом является повышение точности, чувствительности и специфичности способа прогнозирования наступления беременности у женщин с трубно-перитонеальным бесплодием в программе ЭКО.

Заявленный технический результат достигается тем, что у женщин с трубно-перитонеальным бесплодием, перед программой ЭКО определяют относительное содержание CD95+макрофагов в лейкоцитарном инфильтрате эндометрия, полученным путем биопсии в лютеиновую фазу менструального цикла. При значении относительного содержания CD95+макрофагов, равного 48,8% или более, прогнозируют наступление беременности, а при значении менее 48,8% - отсутствие наступления беременности, с точностью 80%).

Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается прогнозировать наступление беременности при проведении ЭКО у женщин с бесплодием, обусловленным трубно-перитонеальным фактором, по определению относительного содержания CD95+ макрофагов в лейкоцитарном инфильтрате эндометрия.

Ранее было показано, что уровень CD95+ макрофагов значительно повышен в перитонеальной жидкости больных с почечной недостаточностью, находящихся на перитонеальном диализе и имеющих осложнения в виде перитонита (Chen C.Y., Wu C.Y., Tsai Т.С., Lin W.T., Lee W.J., Su C.C., Chen H.C., Chiang HC. Fas expression on peritoneal macrophages during continuous ambulatory peritoneal dialysis peritonitis// Ren Fail. - 2008. - Vol.30, №3. - P. 297-301). Кроме того, есть данные о том, что экспрессия CD95+молекул значительно усиливается на поверхности резидентных альвеолярных макрофагов в случаях острого повреждения легкого (Janssen W.J., Barthel L., Muldrow A., Oberley-Deegan R.E., Kearns M.T., Jakubzick C, Henson P.M. Fas determines differential fates of resident and recruited macrophages during resolution of acute lung injury// Am J Respir Crit Care Med. - 2011. - Vol.184, №5. - P. 547-560). Было также установлено, что в лейкоцитарном инфильтрате децидуальной оболочки зрелых плацент, полученных от женщин с синдромом задержки развития плода, также повышен уровень СБ95-позитивных макрофагов (Роль иммунной системы в формировании задержки внутриутробного развития плода/ А.В. Кудряшова, Н.Ю. Сотникова, Л.В. Посисеева и др. - Иваново: ЮАО Издательство «Иваново», 2009. - 240 с.). Для прогнозирования наступления беременности у женщин с трубным фактором бесплодия в программе ЭКО этот показатель ранее не применяли.

Известно, что наличие мембранной экспрессии молекулы CD95+(или Fas) свидетельствует либо о готовности Fas-позитивной клетки к вступлению в апоптоз, либо является показателем повышенной активации клетки (Барышников А.Ю., Шишкин Ю.В. Иммунологические проблемы апоптоза. - М.: Эдиториал УРСС, 2002. - 320 с.). Есть данные о том, что макрофаги эндометрия играют важную роль в регуляции процессов имплантации и последующего развития тканей плаценты, в частности они активно взаимодействуют с клетками трофобласта, препятствуя их неограниченной инвазии, способствуют тканевому ремодулированию, и секретируют большое количество цитокинов (Мог G., Abrahams V. Potential role of macrophages as immunomodulators of

pregnancy//Reprod.Biol.Endocrinol. - 2003. - Vol I. - P. 119). По-видимому, высокое содержание CD95+ макрофагов в лейкоцитарном инфильтрате эндометрия пациенток с трубным фактором бесплодия отражает адекватную активацию макрофагов, которая является необходимым условием имплантации и дальнейшего развития беременности после программы ЭКО.

Способ осуществляется по стандартной методике следующим образом:

1. Перед программой ЭКО из биоптатов эндометрия, полученных в лютеиновую фазу менструального цикла путем пайпель-биопсии, выделяют клетки мононуклеарного инфильтрата стандартным механическим способом (Chernyshov V.P., Slukvin I.I., Bondarenko G.I. Phenotypic characterization of CD7+, CD3+, and CD8+lymphocytes from first trimester human decidua using two-color flow cytometry// Am.J.Reprod.Immunol. - 993. - Vol.29, №1. - P. 5-16). Для этого ткань эндометрия макроскопически измельчают и фильтруют через стальное сито. Полученную суспензию эндометриальных клеток осаждают центрифугированием в течение 10 мин в Среде 199, а затем проводят выделение обогащенной популяции мононуклеарных клеток эндометрия стандартным методом скоростного центрифугирования в двойном градиенте плотности фиколл-верографина (d=l,06 и d=l,078) в течение 30 мин при 1500 об/мин (Boum A. Isolation of mononuclear cells and granulocytes from human blood and bone marrow// Scand. J. Clin. Invest. - 1968. - Vol.21, №97. - P.77).

2. Суспензию мононуклеарных клеток дважды отмывают физраствором, доводят концентрацию клеток до 1х106кл/мл. К 0,1 мл полученной суспензии одновременно добавляют 20 мкл моноклональных антител анти-С095, коньюгированных с флюоресцеинизотионатом (ООО «Сорбент», Москва). Клетки инкубируют в течение 30 мин при комнатной температуре в темноте, отмывают в 1 мл физраствора. 3. Определяют относительное (процентное) количество CD95+ клеток в макрофагальном гейте на проточном цитометре.

Использование предлагаемого способа позволяет с высокой точностью 80% прогнозировать наступление беременности у женщин с трубно-перитонеальным фактором бесплодия, участвующих в программе эко.

Отличительными признаками способа являются: установлен прогностический параметр относительного содержания CD95+ макрофагов в лейкоцитарном инфильтрате эндометрия при значении которого, равном 48,8% или более, прогнозируют наступление беременности, а при значении менее 48,8% - отсутствие наступления беременности.

Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами.

Пример 1. Больная Б., 33 года, впервые обратилась в отделение ВРТ Центра планирования семьи и репродукции в январе 2011 года с диагнозом: вторичное бесплодие, трубно-перитонеальный фактор, состояние после двухсторонней тубэктомии. Длительность бесплодия 6 лет. При обследовании гормонального статуса патологии не выявлено. При ультразвуковом исследовании органов малого таза констатирован нормальный фолликулярный резерв. Спермограмма мужа: нормозооспермия. На 25-й день менструального цикла перед программой ЭКО взята пайпель биопсия эндометрия, для определения уровня экспрессии CD95+макрофагов. По данным иммунологического обследования по заявляемому способу установлено, что содержание в лейкоцитарном инфильтрате эндометрия CD95+ макрофагов составило 59,3%, что выше заявленного параметра (48,8%). Дан благоприятный прогноз. Стимуляция суперовуляции проводилась по короткому протоколу с использованием диферелина, менопура и гонала. В результате трансвагинальной пункции получено 6 ооцитов. На 3-и сутки произведен перенос двух эмбрионов высокого качества. В результате программы ЭКО наступила одноплодная беременность. Прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Пример 2. Больная Л., 28 лет, проходила обследование и лечение в отделении ВРТ Центра планирования семьи и репродукции с диагнозом: вторичное бесплодие, трубно-перитонеальный фактор, состояние после двухсторонней тубэктомии. Длительность бесплодия 5 лет. При гормональном обследовании отклонений не выявлено. При ультразвуковом исследовании органов малого таза констатирован нормальный фолликулярный резерв. Спермограмма мужа: нормозооспермия. На 22-й день менструального цикла перед программой ЭКО взята пайпель биопсия эндометрия для определения уровня экспрессии CD95+ макрофагов. По данным иммунологического обследования по заявляемому способу установлено, что содержание в эндометрии CD95+ макрофагов составило 45,1%, что ниже заявленного параметра (48,8%). Дан неблагоприятный прогноз. Стимуляция суперовуляции проводилась по длинному протоколу с использованием диферелина, менопура и гонала. В результате трансвагинальной пункции получено 5 ооцитов. На 3-и сутки произведен перенос одного эмбриона высокого качества, и на 5-е сутки произведен селективный перенос одной ранней бластоцисты. Несмотря на хорошие показатели качества эмбрионов, спермограммы, в результате программы ЭКО беременность не наступила. Прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Пример 3. Больная К., 31 год, проходила обследование и лечение в отделении экстракорпорального оплодотворения Центра планирования семьи и репродукции с диагнозом: бесплодие вторичное, трубно-перитонеальный фактор, состояние после тубэктомии справа, окклюзия маточной трубы слева. Длительность бесплодия 7 лет. При гормональном обследовании отклонений не выявлено. При ультразвуковом исследовании органов малого таза констатирован нормальный фолликулярный резерв. Спермограмма мужа: нормозооспермия. На 21-й день менструального цикла, за цикл до программы ЭКО взята пайпель биопсия эндометрия для определения уровня экспрессии CD95+ макрофагов. По данным иммунологического обследования по заявляемому способу установлено, что содержание в эндометрии CD95 макрофагов составило 48,8%, что сопоставимо с заявленным параметром (48,8%). Дан благоприятный прогноз. Стимуляция суперовуляции проводилась по длинному протоколу с использованием диферелина, менопура и гонала. В результате трансвагинальной пункции получено 10 ооцитов. На 3-и сутки произведен перенос двух эмбрионов высокого качества. В результате программы ЭКО наступила беременность. Прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Указанным способом обследовано 25 женщин с бесплодием, обусловленным трубно-перитонеальным фактором. Данные исследований приведены в таблице 1.

Таблица 1 Показатель Количество обследованных женщин Всего женщин 25 истинно-положительный результат 8 ложно-положительный результат 3 истинно-отрицательный результат 12 ложно-отрицательный результат 2 Итого: точность заявляемого способа - 80%, чувствительность заявляемого способа -80%, специфичность заявляемого способа - 80%.

Преимущества заявляемого способа:

1. Высокая точность - 80%, чувствительность - 80%, специфичность - 80%.

2. Хорошая воспроизводимость методики и небольшие временные трудозатраты (1,5 часа).

3. Применение способа позволит до начала проведения программы ЭКО прогнозировать неудачу наступления беременности и своевременно назначить, при необходимости, проведение дополнительных лечебных мероприятий.

Похожие патенты RU2523401C1

название год авторы номер документа
СПОСОБ ОЦЕНКИ РЕЦЕПТИВНОСТИ ЭНДОМЕТРИЯ В ПЕРИОД "ИМПЛАНТАЦИОННОГО ОКНА" 2017
  • Мелкозерова Оксана Александровна
  • Башмакова Надежда Васильевна
  • Есарева Алена Валерьевна
  • Чистякова Гузель Нуховна
  • Барлит Ольга Германовна
  • Гиниятова Айгуль Адиповна
RU2651762C1
СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ИМПЛАНТАЦИИ В ПРОГРАММАХ ВРТ У ЖЕНЩИН СТАРШЕГО РЕПРОДУКТИВНОГО ВОЗРАСТА С ТРУБНО-ПЕРИТОНЕАЛЬНЫМ ФАКТОРОМ БЕСПЛОДИЯ 2020
  • Чухнина Елена Галиевна
  • Воропаева Екатерина Евгеньевна
  • Казачков Евгений Леонидович
  • Казачкова Элла Алексеевна
RU2735218C1
Способ оценки рецептивности эндометрия в секреторную фазу у женщин с первичным бесплодием, обусловленным гипоплазией эндометрия 2020
  • Чистякова Гузель Нуховна
  • Гришкина Анастасия Александровна
  • Ремизова Ирина Ивановна
  • Мелкозерова Оксана Александровна
RU2731203C1
Способ оценки имплантационной состоятельности эндометрия при пролиферативно-воспалительных нарушениях в эндометрии при эндометриозе, ассоциированном с эндометриальным фактором бесплодия 2020
  • Оразов Мекан Рахимбердыевич
  • Михалева Людмила Михайловна
  • Хамошина Марина Борисовна
  • Волкова Снежана Владимировна
  • Хованская Татьяна Николаевна
  • Шустова Виктория Борисовна
  • Абитова Марианна Заурбиевна
RU2724384C1
Способ оценки рецептивности эндометрия при эндометриоз-ассоциированном бесплодии 2020
  • Оразов Мекан Рахимбердыевич
  • Михалева Людмила Михайловна
  • Хамошина Марина Борисовна
  • Волкова Снежана Владимировна
  • Хованская Татьяна Николаевна
  • Шустова Виктория Борисовна
  • Абитова Марианна Заурбиевна
RU2724381C1
СПОСОБ ОЦЕНКИ ИМПЛАНТАЦИОННОГО ПОТЕНЦИАЛА ЭНДОМЕТРИЯ ПРИ ЭНДОМЕТРИОЗ-АССОЦИИРОВАННОМ БЕСПЛОДИИ 2020
  • Оразов Мекан Рахимбердыевич
  • Краснопольская Ксения Владиславовна
  • Михалева Людмила Михайловна
  • Хамошина Марина Борисовна
  • Волкова Снежана Владимировна
  • Хованская Татьяна Николаевна
  • Шустова Виктория Борисовна
  • Абитова Марианна Заурбиевна
RU2734840C1
Способ оценки имплантационной состоятельности эндометрия при повторных неудачах имплантации, ассоциированных с хроническим эндометритом 2021
  • Оразов Мекан Рахимбердыевич
  • Михалева Людмила Михайловна
  • Хамошина Марина Борисовна
  • Силантьева Елена Сергеевна
  • Орехов Роман Евгеньевич
  • Лагутина Елена Владимировна
  • Семёнов Павел Александрович
RU2746644C1
СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ИМПЛАНТАЦИИ И РОДОВ В ПРОГРАММАХ ВРТ У ЖЕНЩИН СТАРШЕГО РЕПРОДУКТИВНОГО ВОЗРАСТА С ТРУБНО-ПЕРИТОНЕАЛЬНЫМ ФАКТОРОМ БЕСПЛОДИЯ НА ОСНОВАНИИ УРОВНЯ ЭНДОМЕТРИАЛЬНОЙ ЭКСПРЕССИИ НОХА 11 2021
  • Чухнина Елена Галиевна
  • Воропаева Екатерина Евгеньевна
  • Казачков Евгений Леонидович
  • Казачкова Элла Алексеевна
RU2770288C1
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ИММУННОГО СТАТУСА ЭНДОМЕТРИЯ У ПАЦИЕНТОК С ПОВТОРНЫМИ ПОТЕРЯМИ БЕРЕМЕННОСТИ ПОСЛЕ ВСПОМОГАТЕЛЬНЫХ РЕПРОДУКТИВНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ 2022
  • Толибова Гулрухсор Хайбуллоевна
  • Траль Татьяна Георгиевна
  • Коган Игорь Юрьевич
RU2783849C1
СПОСОБ ОЦЕНКИ ИМПЛАНТАЦИОННОЙ СОСТОЯТЕЛЬНОСТИ ЭНДОМЕТРИЯ НА ОСНОВАНИИ ЭНДОМЕТРИАЛЬНОЙ ЭКСПРЕССИИ VDR, HOXA 11 В ПРОГРАММАХ ВРТ У ЖЕНЩИН СТАРШЕГО РЕПРОДУКТИВНОГО ВОЗРАСТА С ТРУБНО-ПЕРИТОНЕАЛЬНЫМ ФАКТОРОМ БЕСПЛОДИЯ 2021
  • Чухнина Елена Галиевна
  • Воропаева Екатерина Евгеньевна
  • Казачков Евгений Леонидович
  • Казачкова Элла Алексеевна
  • Шамаева Татьяна Николаевна
RU2765639C1

Реферат патента 2014 года СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ НАСТУПЛЕНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ У ЖЕНЩИН С ТРУБНО-ПЕРИТОНЕАЛЬНЫМ БЕСПЛОДИЕМ В ПРОГРАММЕ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОГО ОПЛОДОТВОРЕНИЯ

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования наступления беременности у женщин с трубно-перитонеальным бесплодием в результате лечения методом экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). Сущность способа заключается в том, что перед программой ЭКО у пациентки в лютеиновую фазу цикла проводят биопсию эндометрия и определяют относительное содержание CD95+макрофагов в лейкоцитарном инфильтрате эндометрия. При значении относительного содержания CD95+макрофагов, равном 48,8% или более, прогнозируют наступление беременности, а при значении менее 48,8% - отсутствие наступления беременности. Заявляемый способ расширяет арсенал прогностических средств, повышает точность, чувствительность и специфичность прогнозирования наступления беременности у женщин с трубно-перитонеальным бесплодием перед проведением программы ЭКО. Использование способа позволит определять дальнейшую тактику ведения пациентки, своевременно назначить дополнительные лечебные мероприятия. 1 табл., 3 пр.,

Формула изобретения RU 2 523 401 C1

Способ прогнозирования наступления беременности у женщин с трубно-перитонеальным бесплодием путем исследования биоптатов эндометрия, полученных в лютеиновую фазу менструального цикла перед программой ЭКО, отличающийся тем, что определяют относительное содержание CD95+ макрофагов в лейкоцитарном инфильтрате эндометрия и при значении, равном 48,8% или более, прогнозируют наступление беременности, а при значении менее 48,8% - отсутствие наступления беременности.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2014 года RU2523401C1

SERAFINI P., ROCHA AM
Endometrial leukemia inhibitory factor as a predictor of pregnancy after in vitro fertilization
Int J Gynaecol Obstet
Станок для изготовления деревянных ниточных катушек из цилиндрических, снабженных осевым отверстием, заготовок 1923
  • Григорьев П.Н.
SU2008A1
СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ НАСТУПЛЕНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ В ПРОГРАММЕ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОГО ОПЛОДОТВОРЕНИЯ И ПЕРЕНОСА ЭМБРИОНОВ В СТАНДАРТНОМ ДЛИННОМ ПРОТОКОЛЕ СТИМУЛЯЦИИ СУПЕРОВУЛЯЦИИ 2010
  • Савельева Галина Михайловна
  • Шимановский Николай Львович
  • Клименко Петр Афанасьевич
  • Карева Елена Николаевна
  • Каппушева Лаура Магомедовна
  • Сукновалова Мария Владимировна
  • Крамаренко Мария Петровна
RU2430379C1
САЛМИНА А
Б
Вероятность наступления имплантации у женщин с разными формами бесплодия при лечении методом ЭКО
Пробл
репродукции
Топчак-трактор для канатной вспашки 1923
  • Берман С.Л.
SU2002A1
Топка с несколькими решетками для твердого топлива 1918
  • Арбатский И.В.
SU8A1
Переносная печь для варки пищи и отопления в окопах, походных помещениях и т.п. 1921
  • Богач Б.И.
SU3A1
C.

RU 2 523 401 C1

Авторы

Богатова Ирина Константиновна

Анциферова Юлия Станиславовна

Бойцова Алиса Витальевна

Даты

2014-07-20Публикация

2013-02-20Подача