СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЖИРОВОГО ГЕПАТОЗА КОШЕК Российский патент 2014 года по МПК A61K39/395 A61P1/16 

Изобретение относится к ветеринарии, в частности ветеринарной терапии, и может быть использовано для лечения жирового гепатоза кошек.

В ветеринарной медицине известно несколько разных способов лечения жирового гепатоза кошек.

Известен способ лечения жирового гепатоза кошек, включающий кроме патогенетической терапии использование препарата эссенциале форте в инъекционной форме. Препарат вводят внутривенно в следующих дозировках: 0,05-0,1 мл на 1 кг живого веса. Курс лечения составляет 5-7 дней.

Недостатком данного способа является отсутствие доказательной базы эффективности эссенциале форте при лечении жирового гепатоза у кошек.

Существует способ лечения жирового гепатоза кошек, заключающийся в применении препарата «Гепатовет». Препарат включает в себя фосфолипиды, метионин, L-орнитин, экстракт Расторопши пятнистой и травы Бессмертника. Гепатовет назначают внутрь в дозе 0,3 мл/кг массы тела кошкам за 30 минут до кормления. Гепатовет применяют три раза в день в течение 30 дней. Недостатком данного способа является длительный курс лечения [1].

Известен способ лечения жирового гепатоза кошек с применением препарата Гептрал. Его рекомендуется назначать внутримышечно или внутривенно в суточной дозе 100-200 мг. Длительность интенсивной терапии гептралом 2-3 недели лечения. Недостатком данного способа является длительный курс лечения, а также высокая стоимость препарата [2].

Целью изобретения является повышение эффективности специфического лечения жирового гепатоза кошек. Это достигается тем, что в комплекс патогенетической терапии включают препарат, с предложенным нами названием: «Геприм для кошек», который вводят животным однократно подкожно в область холки в дозе 0,45-1,1 мл на 1 кг живой массы тела. Доза введения была определена экспериментальным путем.

Препарат представляет прозрачную, слегка опалесцирующую, соломенно-желтую с красноватым оттенком жидкость, содержащую в 1 мл 0,9-1,15 титровочных единиц антигепатотоксической и антиспленотоксической сывороток по реакции связывания комплемента.

Проверка соответствия заявленного способа требованию новизны показывает, что из уровня техники не известны аналогичные способы лечения жирового гепатоза кошек. Заявленный способ соответствует требованию изобретательского уровня, так как для специалиста он явным образом не следует из уровня техники. Введение препарата, полученного по принципу изготовления цитотоксической сыворотки [3] из крови животных-доноров, путем гипериммунизации их антигеном, приготовленным из тканей печени и селезенки, не очевидно для специалиста. Применение препарата оказывает стимулирующее воздействие не только на печеночную ткань, но, что особенно важно, на иммунную систему организма.

Данное изобретение можно использовать при лечении жирового гепатоза кошек.

Технология получения препарата «Геприм для кошек» основывается на принципе получения цитотоксической сыворотки из крови животных-доноров путем гипериммунизации антигенами, приготовленными из тканей печени и селезенки.

Схема получения препарата «Геприм для кошек» состоит из следующих этапов:

1. Получение антигена из печени. Для приготовления антигена из печени используют печень кошки. Кусочки печени 4-6 раз отмывают от крови 10-кратным объемом изотонического раствора натрия хлорида. Кусочки измельчают, растирают в ступке со стеклом и разводят 0,85% раствором натрия хлорида до 10%-ной концентрации. Полученную суспензию центрифугируют 9-10 минут при 2500-3000 об/мин и в качестве антигена используют надосадочную жидкость. Антиген осветляют пятикратным замораживанием и оттаиванием с последующим центрифугированием при 7000-8000 об/мин в течение 10 минут. Хранят антиген в замороженном состоянии.

2. Получение антигена из селезенки. Для приготовления антигена из селезенки используют селезенку кошки. Кусочки селезенки 4-6 раз отмывают от крови 10-кратным объемом изотонического раствора натрия хлорида. Кусочки измельчают, растирают в ступке со стеклом и разводят 0,85% раствором натрия хлорида до 10%-ной концентрации. Полученную суспензию центрифугируют 9-10 минут при 2500-3000 об/мин и в качестве антигена используют надосадочную жидкость. Антиген осветляют пятикратным замораживанием и оттаиванием с последующим центрифугированием при 7000-8000 об/мин в течение 9-10 минут. Хранят антиген в замороженном состоянии.

3. Выбор животных-доноров. Для приготовления «Геприм для кошек» в качестве доноров пригодны следующие виды животных: лошади, кролики, крупный и мелкий рогатый скот. Доноры должны быть свободны от инфекционных заболеваний и пройти карантинирование.

4. Получение антигепатотоксической сыворотки. Антигепатотоксическую сыворотку получают путем гипериммунизации доноров по схеме: первое введение антигена проводят подкожно в области левой лопатки и правой подколенной ямки; второе введение - через 6-8 дней - подкожно в области правой лопатки и левой подколенной ямки; третье введение проводят через такой же срок, как и второе, - внутривенно и подкожно в вышеперечисленные выше точки. Через 6-8 дней после третьего введения антигена делают пробный забор крови и определяют титр полученной антигепатотоксической сыворотки в реакции связывания комплемента. При наличии титра не менее 1:160-1:200 проводят забор крови. Полученную кровь помещают в термостат на 29-30 минут при 37-38°C, затем в стерильных условиях отделяют сгусток от стенок и оставляют пробирку в холодильнике для лучшей ретракции сгустка до следующего дня. Образовавшуюся сыворотку отсасывают и консервируют фенолом до 0,5%-ной концентрации вещества в сыворотке.

5. Получение антиспленотоксической сыворотки. Антиспленотоксическую сыворотку получают путем гипериммунизации доноров по схеме: первое введение антигена проводят подкожно в области левой лопатки и правой подколенной ямки; второе введение - через 6-8 дней - подкожно в области правой лопатки и левой подколенной ямки; третье введение проводят через такой же срок, как и второе, - внутривенно и подкожно в перечисленные выше точки. Через 6-8 дней после третьего введения антигена делают пробный забор крови и определяют титр полученной антиспленотоксической сыворотки в реакции связывания комплемента. При наличии титра не менее 1:160-1:200 проводят забор крови. Полученную кровь помещают в термостат на 29-30 минут при 37-38°C, затем в стерильных условиях отделяют сгусток от стенок и оставляют в холодильнике для лучшей ретракции сгустка до следующего дня. Образовавшуюся сыворотку отсасывают и консервируют фенолом до 0,5%-ной концентрации вещества в сыворотке.

6. Получение средства для лечения гепатоза у кошек. Для получения средства для лечения гепатоза у кошек антигепатотоксическую, антиспленотоксическую сыворотки смешивают со стерильным физиологическим раствором, консервированным фенолом до 0,5%-ной концентрации с таким расчетом, чтобы в 1,0 мл его содержалось по 0,9-1,15 титровочных единиц антигепатотоксической и антиспленотоксической сывороток по реакции связывания комплемента.

Пример выполнения:

Для изучения эффективности способа лечения жирового гепатоза кошек на базе ветеринарной клиника города Магнитогорска «Биовет» провели опыт. Для этого из поступивших с жировым гепатозом кошек было сформировано 2 группы по 10 животных. В первой группе, являющейся контрольной, все животные получали общепринятую схему лечения при жировом гепатозе печени. В нее входили:

1. Поддерживающая терапия - внутривенные инфузии:

a. Солевые растворы: Физиологический раствор, Рингера раствор из расчета 10-20 мл/кг в зависимости от степени дегидратации.

b. Питательные растворы: Раствор глюкозы 5%, Дюфалайт из расчета 6-20 мл/кг в зависимости от степени истощения.

2. Витаминотерапия: катозал - из расчета 0,5-2,5 мл на животное в зависимости от индивидуального состояния, аскорбиновая кислота в дозе 0,05-0,1 мл/кг.

3. Гепатопротективная терапия - Эссенциале форте Н в дозе 0,05 мл/кг, внутривенно струйно.

4. Антибиотикотерапия - амоксициллин (Кламоксил LA) из расчета 1 мл на 10 кг веса.

5. Противорвотные препараты при необходимости - церукал из расчета 0,05 мл/кг.

Схема лечения во второй группе животных (опытная) отличалась от первой (контрольная) заменой гепатопротектора Эссенциале форте Н на разработанный препарат для лечения жирового гепатоза «Геприм для кошек»

Физиологическое состояние печени оценивали по биохимическим показателям сыворотки крови. Кровь брали при поступлении в клинику и через месяц. Оценивали такие показатели как: содержание глюкозы, АлАТ, АсАТ, билирубин общий, щелочная фосфатаза, креатинин, мочевина и альфа-амилаза. Кроме того, оценивали общий период лечения, а также время наступления улучшений.

Период лечения у животных контрольной группы в среднем составил 10,9 суток, а наступление улучшений - на 5,8 сутки. В то время у животных опытной группы эти периоды составили 8,6 и 4,1 суток соответственно. Следовательно, период выздоровления у животных опытной группы на 26,7% был короче, чем у животных контрольной группы. Кроме того, в контрольной группе 2 животных не отреагировали на лечение и скончались на 7 и 12 день, что составило 20%. В то время как в опытной группе летальных исходов отмечено не было.

Вторая группа животных являлась опытной и помимо общей схемы лечения, описанной выше (кроме Эссенциале форте), получала в виде специфического лечения «Геприм для кошек». Препарат вводили однократно подкожно в область холки в дозе 0,5 мл на 1 кг живого веса.

Далее представлены данные биохимических исследований сыворотки крови обеих групп животных.

1. Первичные результаты биохимических исследований сыворотки крови животных контрольной группы

Показатель Норма Среднее значение у группы животных Аланинаминотрансфераза, Ед/л 20-85 416,9±85,91 Аспартатаминотрансфераза, Ед/л 10-50 289,9±42,47 Билирубин общий, мкмоль/л 0,5-10 42,7±8,19 Креатинин, мкмоль/л 50-160 132,9±8,21 Мочевина, ммоль/л 5,5-11 10,7±1,05 Щелочная фосфатаза, Ед/л 13-150 588,1±38,37 Глюкоза, ммоль/л 2,6-8,4 6,7±0,65 Альфа-амилаза, Ед/л 531-1660 1506,9±225,93

2. Вторичные результаты биохимических исследований сыворотки крови животных контрольной группы

Показатель Норма Среднее значение у группы животных Аланинаминотрансфераза, Ед/л 20-85 233,0±45,61 Аспартатаминотрансфераза, Ед/л 10-50 156,1±18,13 Билирубин общий, мкмоль/л 0,5-10 23,3±2,99 Креатинин, мкмоль/л 50-160 124,0±8,95 Мочевина, ммоль/л 5,5-11 9,7±0,52 Щелочная фосфатаза, Ед/л 13-150 338,8±24,07 Глюкоза, ммоль/л 2,6-8,4 6,8±0,43 Альфа-амилаза, Ед/л 531-1660 1383,5±203,41

Из таблиц 1 и 2 видно, что произошло общее снижение всех показателей. Так, значение аланинаминотрансферазы снизилось в 1,8 раза, значение аспартатаминотрансферазы - в 1,9 раза, значение билирубина - в 1,8 раза, щелочной фосфатазы - 1,7 раза. Значение креатинина снизилось на 7,2%, значение мочевины - на 10,3%, альфа-амилазы - на 8,9%. Уровень глюкозы и в первом, и втором случае имеет одинаковые показатели.

3. Первичные результаты биохимических исследований сыворотки крови животных опытной группы

Показатель Норма Среднее значение у группы животных Аланинаминотрансфераза, Ед/л 20-85 577,7±89,88 Аспартатаминотрансфераза, Ед/л 10-50 357,9±43,67 Билирубин общий, мкмоль/л 0,5-10 53,6±9,59 Креатинин, мкмоль/л 50-160 135,5±8,89 Мочевина, ммоль/л 5,5-11 9,9±0,49 Щелочная фосфатаза, Ед/л 13-150 815,7±180,00 Глюкоза, ммоль/л 2,6-8,4 6,8±0,32 Альфа-амилаза, Ед/л 531-1660 2559,0±224,40

4. Вторичные результаты биохимических исследований сыворотки крови животных опытной группы

Показатель Норма Среднее значение у группы животных Аланинаминотрансфераза, Ед/л 20-85 225,6±17,31 Аспартатаминотрансфераза, Ед/л 10-50 152,8±15,02 Билирубин общий, мкмоль/л 0,5-10 21,6±2,66 Креатинин, мкмоль/л 50-160 141,4±8,43 Мочевина, ммоль/л 5,5-11 10,7±0,76 Щелочная фосфатаза, Ед/л 13-150 250,1±30,07 Глюкоза, ммоль/л 2,6-8,4 6,0±0,28 Альфа-амилаза, Ед/л 531-1660 2465,0±188,15

Из результатов таблиц 3 и 4 видно, что значение следующих показателей значительно снизилось: аланинаминотрансфераза в 2,6 раза, аспартатаминотрансфераза - в 2,3 раза, билирубина - в 2,5 раза, щелочная фосфатаза - в 3,3 раза. Значение альфа-амилазы снизилось на 3,8%. В свою очередь показатели работы почек, такие как креатинин и мочевина, показали незначительный рост. Так, значение креатинина выросло на 4,4%, а мочевины на 8,1%. Уровень глюкозы крови упал на 13,3%.

Таким образом, применение препарата «Геприм для кошек» позволяет сократить период выздоровления на 26,7%. Кроме того, при его применении происходит значительное улучшение биохимических показателей сыворотки крови, отвечающих за работу печени, по сравнению со стандартной схемой лечения, применяемой в ветеринарной клинике. Это свидетельствует о том, что использование препарата «Геприм для кошек» при комплексной патогенетической терапии жирового гепатоза кошек повышает эффективность лечения.

Источники информации

1. Климов П.В., Федосова А.А. Эффективность использования нового гепатопротекторного препарата "Гепатовет" при лечении гепатоза у собак и кошек: Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии, 2011; N2. - С.42-44.

2. Gary D. Norsworthy The Feline Patient. Fourth Edition. Wiley-Blackwell. A John Willey & Sons, Inc., Publication 2010. - 1052 p.

3. Действие специфических цитотоксических сывороток на половые железы / Ю.А. Спасокукотский, Н.В. Ильчевич, Л.И. Барченко, О.В. Нищименко, Т.М. Зеленская, А.Г. Гоноровский. - Киев: Наукова думка, 1977. - 216 с.

(57) Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для лечения жирового гепатоза кошек. Изобретение позволяет повысить эффективность лечения жирового гепатоза кошек. Способ включает комплексную патогенетическую терапию. Дополнительно применяют специфический биологический препарат. Препарат готовят по принципу изготовления цитотоксической сыворотки из крови доноров путем гипериммунизации их антигенами, приготовленными из тканей печени и селезенки. Получают антигепатотоксическую сыворотку и антиспленотоксическую сыворотку. Их смешивают со стерильным физиологическим раствором, консервированным фенолом до 0,5%-ной концентрации из расчета содержания в 1,0 мл его 0,9-1,15 титруемых единиц антигепатотоксической и антиспленотоксической сывороток по реакции связывания комплемента. Препарат вводят животным однократно подкожно в область холки в дозе 0,45-1,1 мл на 1 кг живой массы. Способ обеспечивает более высокий иммунный статус организма животных и высокую эффективность лечения. 4 табл., 1 пр.

Способ лечения жирового гепатоза кошек, включающий комплексную патогенетическую терапию, отличающийся тем, что дополнительно применяют специфический биологический препарат, который готовят по принципу изготовления цитотоксической сыворотки из крови доноров путем гипериммунизации их антигенами, приготовленными из тканей печени и селезенки; получают антигепатотоксическую сыворотку и антиспленотоксическую сыворотку, их смешивают со стерильным физиологическим раствором, консервированным фенолом до 0,5%-ной концентрации из расчета содержания в 1,0 мл его 0,9-1,15 титруемых единиц антигепатотоксической и антиспленотоксической сывороток по реакции связывания комплемента, препарат вводят животным однократно подкожно в область холки в дозе 0,45-1,1 мл на 1 кг живой массы.