ЛИГАНДЫ СИГМА-РЕЦЕПТОРОВ ДЛЯ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ БОЛИ, ВЫЗВАННОЙ ХИМИОТЕРАПИЕЙ Российский патент 2015 года по МПК A61K31/5377 A61P25/02 A61K45/06 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к применению группы лигандов сигма-рецепторов для предупреждения или лечения боли, возникающей в результате химиотерапии. Настоящее изобретение также относится к комбинации лиганда сигма-рецептора и химиотерапевтического средства и ее применению при предупреждении или лечении боли, возникающей как следствие химиотерапии.

Уровень техники

Лечение болевых состояний является очень важным в медицине. В настоящее время по всему миру существует необходимость в дополнительной терапии боли. Острая потребность в специальном лечении подтверждается документально в большом количестве научных работ, которые появились недавно в области, связанной с применением анальгетиков.

Международной ассоциацией по изучению боли (IASP) БОЛЬ определяется как «неприятное сенсорное и эмоциональное переживание, связанное с истинным или потенциальным повреждением ткани или описываемое в терминах такого повреждения» (IASP, Classification of chronic pain, 2^nd Edition, IASP Press (2002), 210). Хотя боль всегда является субъективной, ее причины и синдромы можно классифицировать. Некоторыми наиболее важными подтипами боли являются невропатическая боль, аллодиния, гипералгезия и периферическая невропатия.

С другой стороны, рак и связанное с ним лечение являются некоторыми из самых больших проблем, вызывающих озабоченность в области здравоохранения. Химиотерапия, в комбинации или в качестве альтернативы хирургическому вмешательству, является методом, который выбирают в большинстве случаев для контролирования или помощи пациентам, пораженным карциномой.

Химиотерапия в общем смысле определяется как применение химических веществ для лечения рака, опухоли или злокачественного новообразования и, по данному изобретению, относится к применению цитотоксических или цитостатических лекарственных средств, называемых химиотерапевтическими агентами. В целом она является системной терапией. Химиотерапия при лечении рака состоит из персонализированной комбинации сильнодействующих химиотерапевтических средств, разработанных для замедления быстрого роста раковой опухоли, сокращения опухоли, уничтожения раковых клеток и предотвращения метастазирования рака. Химиотерапевтические средства не позволяют клеткам реплицироваться типичным для них неконтролируемым образом, которым злокачественные клетки делятся.

Периферическая нейротоксичность является клинически важным осложнением при химиотерапии рака. В случае нескольких наиболее эффективных лекарственных средств (например таксаны, винкаалкалоиды, цисплатин, бортезомиб, талидомид и леналидамид) нейротоксичность является дозозависимой и иногда вынуждает прекратить успешную в других случаях терапию (Polomano и Bennett, Pain Med., 2001, 2(1), 8-14; Park et al., Curr. Med. Chem, 2008, 15(29), 3081-94). Поскольку данные лекарственные средства выбирают для лечения большого числа гемобластозов и солидных опухолей, сотня из тысячи пациентов подвергается их действию ежегодно. Сенсорные нарушения в результате вызываемой противоопухолевыми средствами нейротоксичности варьируют от легкой парестезии или дисестезии у многих пациентов до хронической болезненной периферической невропатии у некоторых (Quasthoff и Hartung, J. Neurol., 2002, 249(1), 9-17). Возникновение и тяжесть невропатии зависят от интенсивности единичной дозы, длительности лечения, кумулятивной дозы, предварительного или одновременного лечения другими средствами против невропатии и сопутствующих состояний, таких как диабет или злоупотребление алкоголем (Alberts et al., Anticancer drugs, 1995, 6(3), 369-83; Postma et al., Ann. Oncol., 1995, 6(5), 489-94; Forsyth et al., J. Neurooncol., 1997, 35(1), 47-53; Quasthoff и Hartung, J. Neurol., 2002, 249(1), 9-17). Из уровня техники известно, что периферическая невропатия, сопровождаемая невропатической болью, аллодинией и гипералгезией, как результат химиотерапии развивается в значительном количестве случаев. Конкретные симптомы возникают из-за нейротоксичности химиотерапевтического средства. Лечение этих симптомов является важным для сохранения качества жизни пораженного болезнью пациента (Mielke et al., Eur. J. Cancer, 2006, 42(1), 24-30; Park et al., Curr. Med. Chem., 2008, 15(29), 3081-94; Argyriou et al., Blood, 2008, 112(5), 1593-9). К сожалению, пока еще не найдено эффективное лечение для вызванной химиотерапией периферической невропатии (Wolf et al., Eur. J. Cancer, 2008, 44(11), 1507-15).

Поэтому существует необходимость в обеспечении новой формы предупреждения и лечения боли, и особенно невропатической боли, аллодинии, гипералгезии и периферической невропатии, развивающихся после химиотерапии.

Сущность изобретения

Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили и продемонстрировали, что введение некоторых специфических лигандов сигма-рецепторов является высоко эффективным для предупреждения и лечения боли, возникающей как следствие химиотерапии. Они являются особенно полезными, когда боль представляет собой невропатическую боль, аллодинию или гипералгезию. Лиганды сигма-рецепторов являются высоко эффективными для лечения индуцированной химиотерапией невропатической боли при введении после противоопухолевого средства, когда боль уже возникла. Более того, удивительно, что совместное введение данных лигандов сигма-рецепторов и химиотерапевтического средства предупреждает развитие боли, которая обычно могла бы развиваться после химиотерапии. Вследствие этого, лиганды сигма-рецепторов являются эффективными как для лечения (лиганд сигма-рецептора вводиться после химиотерапевтического средства, когда боль уже возникла), так и предупреждения (совместное введение лиганда сигма-рецептора и химиотерапевтического средства) вызываемой химиотерапией невропатической боли.

Поэтому в одном аспекте настоящее изобретение относится к комбинации по меньшей мере одного лиганда сигма-рецептора и по меньшей мере одного химиотерапевтического средства для одновременного, раздельного или последовательного введения, где лиганд сигма-рецептора имеет следующую общую формулу (I):

где

R₁ выбирают из группы, содержащей водород, замещенный или незамещенный алкил, замещенный или незамещенный циклоалкил, замещенный или незамещенный алкенил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный арилалкил, замещенный или незамещенный неароматический гетероциклил, замещенный или незамещенный ароматический гетероциклил, замещенный или незамещенный гетероциклилалкил, -COR₈, -C(O)OR₈, -C(O)NR₈R₉, -CH=NR₈, -CN, -OR₈, -OC(O)R₈, -S(O)_t-R₈, -NR₈R₉, -NR₈C(O)R₉, -NO₂, -N=CR₈R₉ и галоген;

R₂ выбирают из группы, содержащей водород, замещенный или незамещенный алкил, замещенный или незамещенный циклоалкил, замещенный или незамещенный алкенил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный арилалкил, замещенный или незамещенный, ароматический или неароматический гетероциклил, замещенный или незамещенный гетероциклилалкил, -COR₈, -C(O)OR₈, -C(O)NR₈R₉, -CH=NR₈, -CN, -OR₈, -OC(O)R₈, -S(O)_t-R₈, -NR₈R₉, -NR₈C(O)R₉, -NO₂, -N=CR₈R₉ и галоген;

R₃ и R₄ независимо выбирают из группы, содержащей водород, замещенный или незамещенный алкил, замещенный или незамещенный циклоалкил, замещенный или незамещенный алкенил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный арилалкил, замещенный или незамещенный, ароматический или неароматический гетероциклил, замещенный или незамещенный гетероциклилалкил, -COR₈, -C(O)OR₈, -C(O)NR₈R₉, -CH=NR₈, -CN, -OR₈, -OC(O)R₈, -S(O)_t-R₈, -NR₈R₉, -NR₈C(O)R₉, -NO₂, -N=CR₈R₉ и галоген, или вместе они образуют необязательно замещенную конденсированную кольцевую систему;

R₅ и R₆ независимо выбирают из группы, содержащей водород, замещенный или незамещенный алкил, замещенный или незамещенный циклоалкил, замещенный или незамещенный алкенил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный арилалкил, замещенный или незамещенный, ароматический или неароматический гетероциклил, замещенный или незамещенный гетероциклилалкил, -COR₈, -C(O)OR₈, -C(O)NR₈R₉, -CH=NR₈, -CN, -OR₈, -OC(O)R₈, -S(O)_t-R₈, -NR₈R₉, -NR₈C(O)R₉, -NO₂, -N=CR₈R₉ и галоген, или вместе они образуют вместе с атомом азота, к которому они присоединены, замещенную или незамещенную, ароматическую или неароматическую гетероциклильную группу;

n выбирают из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 и 8;

t равно 1, 2 или 3;

R₈ и R₉ каждый независимо выбирают из водорода, замещенного или незамещенного алкила, замещенного или незамещенного циклоалкила, замещенного или незамещенного алкенила, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного, ароматического или неароматического гетероциклила, замещенного или незамещенного алкокси, замещенного или незамещенного арилокси и галогена;

или его фармацевтически приемлемая соль, изомер, пролекарство или сольват.

В другом аспекте, настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), описанному выше, или его фармацевтически приемлемой соли, изомеру, пролекарству или сольвату, применяемому для предупреждения или лечения боли, вызванной химиотерапией.

В другом аспекте, настоящее изобретение относится к комбинации, как описано выше, для ее применения при производстве лекарственного средства.

В другом аспекте, изобретение относится к комбинации, как описано выше, для ее применения при предупреждении или лечении боли, вызванной химиотерапией.

В другом аспекте, изобретение относится к способу лечения пациента, страдающего от боли, вызванной химиотерапией, или который может испытывать боль в результате химиотерапевтического лечения, который включает введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении или профилактике, терапевтически эффективного количества лиганда сигма-рецептора формулы (I), описанного выше.

Данные его аспекты и предпочтительные варианты осуществления также дополнительно определены в формуле изобретения.

Краткое описание чертежей

Фиг. 1: Динамика паклитаксел-индуцируемой холодовой аллодинии у мышей. Каждая точка и вертикальная линия означает среднее ± стандартную ошибку среднего показателей, полученных у по меньшей мере 12 мышей. Статистически достоверное различие между показателями для групп, которым инъецировали паклитаксел и носитель: *p<0,05; **p<0,01; и между показателями, полученными в день перед воздействием и в дни после воздействия: #p<0,05; ##p<0,01 (двухфакторный ANOVA с повторными измерениями с последующим сравнением по критерию Ньюмана-Кеулса).

Фиг. 2: Динамика воздействия однократной п/к инъекции Соединения 63 (32, 64 или 128 мг/кг) или физиологического раствора на продолжительность лизания/покусывания задней лапы (тест с ацетоном) у мышей на 10 день после введения паклитаксела. Каждая точка и вертикальная линия означает среднее ± стандартную ошибку среднего показателей, полученных у 14-22 животных. Статистически достоверное различие между группами, которым вводили соединение 63 и физиологический раствор, в тот же самый день после лечения: *p<0,05; **p<0,01; и между показателями, полученными в день перед воздействием и на 10 день в различное время после введения лекарственного вещества или физиологического раствора: #p<0,05; ##p<0,01 (двухфакторный ANOVA с повторными измерениями с последующим сравнением по критерию Ньюмана-Кеулса).

Фиг. 3: Динамика воздействия однократной п/к инъекции Соединения 63 (64 мг/кг) или физиологического раствора на продолжительность лизания/покусывания задней лапы (тест с ацетоном) у мышей на 10 день после введения носителя для паклитаксела. Каждая точка и вертикальная линия означает среднее ± стандартную ошибку среднего показателей, полученных у 11-14 животных. Статистически достоверное различие между двумя группами в любое время наблюдения не наблюдалось. Статистически достоверное различие между показателями, полученными в день перед воздействием и на 10 день в различное время после введения лекарственного вещества или физиологического раствора: ## p<0,01 (двухфакторный ANOVA с повторными измерениями с последующим сравнением по критерию Ньюмана-Кеулса).

Фиг. 4: Динамика воздействия совместного введения паклитаксел + соединение 63 (64 мг/кг) и паклитаксел + физиологический раствор на продолжительность лизания/покусывания задней лапы в тесте с ацетоном. Каждая точка и вертикальная линия означает среднее ± стандартную ошибку среднего показателей, полученных у 25-35 животных. Статистически достоверное различие по сравнению с паклитаксел + физиологический раствор: *p<0,05, **p<0,01 ; и между показателями, полученными в день перед воздействием и в дни после лечения: #p<0,05, ##p<0,01 (двухфакторный ANOVA с повторными измерениями с последующим сравнением по критерию Ньюмана-Кеулса).

Фиг. 5: Динамика воздействия на продолжительность лизания/покусывания задней лапы (тест с ацетоном) совместного введения носителя для паклитаксела + соединение 63 (64 мг/кг) и носителя для паклитаксела + физиологический раствор. Каждая точка и вертикальная линия означает среднее ± стандартную ошибку среднего показателей, полученных у 15-20 животных. Статистически достоверное различие между двумя группами в любое время наблюдения не наблюдалось, или в сравнении с их собственными показателями в день перед воздействием (двухфакторный ANOVA).

Фиг. 6: Динамика паклитаксел-индуцируемой холодовой аллодинии у нокаутированных по сигма-1 рецептору мышей и мышей дикого типа. Каждая точка и вертикальная линия означает среднее ± стандартную ошибку среднего показателей, полученных у 48 (дикого типа) и 21 (нокаутированных) животных. Статистически достоверное различие между нокаутированными по сигма-1 рецептору мышами и мышами дикого типа в один и тот же день после лечения: **p<0,01; и между показателями, полученными в день перед воздействием и в дни после лечения: #p<0,05; ##p<0,01 (двухфакторный ANOVA с повторными измерениями с последующим сравнением по критерию Ньюмана-Кеулса).

Фиг. 7: Динамика воздействия носителя для паклитаксела на продолжительность лизания/покусывания задней лапы в тесте с ацетоном у нокаутированных по сигма-1 рецептору мышей и мышей дикого типа. Каждая точка и вертикальная линия означает среднее ± стандартную ошибку среднего показателей, полученных у 31 (дикого типа) и 15 (нокаутированных) животных. Статистически достоверное различие между двумя группами в любое время наблюдения не наблюдалось, или в сравнении с их собственными показателями в день перед воздействием (двухфакторный ANOVA).

Фиг. 8: Динамика паклитаксел-индуцируемой механической аллодинии у мышей. Каждая точка и вертикальная линия означает среднее ± стандартную ошибку среднего показателей, полученных у 32-34 животных. Статистически достоверное различие между группами, которым инъецировали паклитаксел и носитель, в тот же самый день после лечения: **p<0,01; и между показателями, полученными в день перед воздействием и в дни после лечения: ## p<0,01 (двухфакторный ANOVA с повторными измерениями с последующим сравнением по критерию Ньюмана-Кеулса).

Фиг. 9: Динамика действия однократной п/к инъекции Соединения 63 (64 мг/кг) или физиологического раствора на пороговую силу давления для отдергивания задней лапы у мышей на 10 день после введения паклитаксела. Каждая точка и вертикальная линия означает среднее ± стандартную ошибку среднего показателей, полученных у 10-14 животных. Статистически достоверное различие между группами, которым вводили соединение 63 и физиологический раствор, в тот же самый день после лечения: **p<0,01; и между показателями, полученными в день перед воздействием и на 10 день в различное время после введения лекарственного вещества или физиологического раствора: #p<0,05; ##p<0,01 (двухфакторный ANOVA с повторными измерениями с последующим сравнением по критерию Ньюмана-Кеулса).

Фиг. 10: Динамика действия однократной п/к инъекции Соединения 63 (64 мг/кг) или физиологического раствора на пороговую силу давления для отдергивания задней лапы у мышей на 10 день после введения носителя для паклитаксела. Каждая точка и вертикальная линия означает среднее ± стандартную ошибку среднего показателей, полученных у 7-10 животных. Статистически достоверное различие между двумя группами в любое время наблюдения не наблюдалась, или в пределах каждой группы при сравнении с их собственными показателями, полученными в день перед воздействием (двухфакторный ANOVA).

Фиг. 11: Динамика паклитаксел-индуцируемой механической аллодинии у нокаутированных по сигма-1 рецептору мышей и мышей дикого типа. Каждая точка и вертикальная линия означает среднее ± стандартную ошибку среднего показателей, полученных у 18 (дикого типа) и 20 (нокаутированных) животных. Статистически достоверное различие между нокаутированными по сигма-1 рецептору мышами и мышами дикого типа в один и тот же день после воздействия: *p<0,05; **p<0,01 ; и между показателями, полученными в день перед воздействием и в дни после воздействия: ##p<0,01 (двухфакторный ANOVA с повторными измерениями с последующим сравнением по критерию Ньюмана-Кеулса).

Фиг. 12: Динамика воздействия носителя для паклитаксела на пороговую силу давления для отдергивания задней лапы у нокаутированных по сигма-1 рецептору мышей и мышей дикого типа. Каждая точка и вертикальная линия означает среднее ± стандартную ошибку среднего показателей, полученных у 12 животных. Статистически достоверное различие между двумя группами в любое время наблюдения или в сравнении с их собственными показателями в день перед воздействием и дни после воздействия не наблюдалось (двухфакторный ANOVA).

Фиг. 13: Профилактическое (принцип совместного введения) действие соединения 63 в отношении аллодинии на модели хронической оксалиплатин-индуцированной невропатии у крыс (Тест с ацетоном/Время реакции). Результаты представлены как время реакции отдергивания лапы (среднее ± стандартная ошибка среднего) в с/экспериментальной группе/день тестирования, рассчитанное из результатов измерений времени реакции для одной особи (средние значения из полученных для обеих задних лап времен реакции). ##; ###: p<0,01 и p<0,001 по сравнению с группой, которой вводили ГПМЦ/дистиллированную воду, тест Бонферрони после получения значимого различия в ранговом двухфакторном ANOVA. ***: p<0,001 по сравнению с группой, которой вводили 0,5% ГПМЦ/Оксалиплатин, тест Бонферрони после получения значимого различия в ранговом двухфакторном ANOVA.

Фиг. 14: Эффект соединения 63 в отношении аллодинии (введение после оксалиплатина) на модели хронической оксалиплатин-индуцированной невропатии у крыс (Тест с ацетоном/Время реакции). Результаты представлены как время реакции отдергивания лапы (среднее ± стандартная ошибка среднего) в с/экспериментальной группе/день тестирования, рассчитанное из результатов измерений времени реакции для одной особи (средние значения из полученных для обоих задних лап времен реакции). ##; ###: p<0,01 и p<0,001 по сравнению с группой, которой вводили ГПМЦ/дистиллированную воду, тест Бонферрони после получения значимого различия в ранговом двухфакторном ANOVA. ***, ** и *: p<0,001, p<0,01 и p<0,05 по сравнению с группой, которой вводили 0,5% ГПМЦ/Оксалиплатин, тест Бонферрони после получения значимого различия в ранговом двухфакторном ANOVA.

Фиг. 15: Профилактическое (принцип совместного введения) действие соединения 63 в отношении аллодинии на модели хронической оксалиплатин-индуцированной невропатии у крыс (Тест с ацетоном/Суммарный балл холодовой чувствительности). Результаты (Суммарный балл холодовой чувствительности) представлены как среднее ± стандартная ошибка среднего суммы из 6-ти оценок в баллах, полученных для обеих задних лап/экспериментальной группе/день тестирования. ###: p<0,001 по сравнению с группой, которой вводили ГПМЦ/дистиллированную воду, тест Бонферрони после получения значимого различия в ранговом двухфакторном ANOVA. ***: p<0,001 по сравнению с группой, которой вводили 0,5% ГПМЦ/Оксалиплатин, тест Бонферрони после получения значимого различия в ранговом двухфакторном ANOVA.

Фиг. 16: Эффект соединения 63 в отношении аллодинии (введение после оксалиплатина) на модели хронической оксалиплатин-индуцированной невропатии у крыс (Тест с ацетоном/Суммарный балл холодовой чувствительности). Результаты (Суммарный балл холодовой чувствительности) представлены как среднее ± стандартная ошибка среднего суммы из 6-ти оценок в баллах, полученных для обеих задних лап/экспериментальной группе/день тестирования. ###: p<0,001 по сравнению с группой, которой вводили ГПМЦ/дистиллированную воду, тест Бонферрони после получения значимого различия в ранговом двухфакторном ANOVA. *** и *: p<0,001 и p<0,05 по сравнению с группой, которой вводили 0,5% ГПМЦ/Оксалиплатин, тест Бонферрони после получения значимого различия в ранговом двухфакторном ANOVA.

Фиг. 17: Эффект неотложного лечения с помощью соединения 63 на модели хронической цисплатин-индуцированной невропатии у крыс. Цисплатин (1 мг/кг) вводили один раз в неделю в течение 5 недель и на 5 неделе (за 50 минут до тестирования) вводили соединение 63 (64 мг/кг).

Фиг. 18: Профилактическое действие соединения 63 на модели хронической цисплатин-индуцированной невропатии у крыс. Цисплатин (1 мг/кг) и соединение 63 (25 мг/кг) вводили совместно один раз в неделю в течение 5 недель.

Подробное описание изобретения

В контексте настоящего изобретения следующие термины имеют значение, подробно раскрываемое ниже.

«Алкил» относится к радикалу с прямой или разветвленной углеводородной цепью, состоящему из 1-12 атомов углерода, не содержащему ненасыщенные связи и который присоединен к остальной молекуле одинарной связью, например, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, н-пентил и так далее. Алкильные радикалы могут быть необязательно замещены одним или несколькими заместителями, такими как арил, галоген, гидрокси, алкокси, карбокси, циано, карбонил, ацил, алкоксикарбонил, амино, нитро, меркапто, алкилтио и так далее. В случае замещения арилом - это соответствует радикалу «арилалкил», такому как бензил и фенэтил. Предпочтительные алкильные радикалы имеют от 1 до 6 атомов углерода.

«Алкенил» относится к алкильному радикалу, состоящему из 2-12 атомов углерода и имеющему одну или несколько ненасыщенных связей.

«Циклоалкил» относится к стабильному 3-10-членному моноциклическому или бициклическому радикалу, который является насыщенным или частично насыщенным и который состоит только из атомов углерода и водорода, такому как циклогексил или адамантил. Если в описании конкретно не указано иное, термин «циклоалкил» предназначен охватывать циклоалкильные радикалы, которые необязательно замещены одним или несколькими заместителями, такими как алкил, галоген, гидрокси, амино, циано, нитро, алкокси, карбокси, алкоксикарбонил и так далее.

«Арил» относится к моноциклическим или полициклическим ароматическим радикалам, включая полициклические радикалы, которые содержат изолированные и/или конденсированные арильные группы. Типичные арильные группы содержат от 1 до 3 изолированных или конденсированных колец и от 6 до приблизительно 18 углеродных атомов в кольце, такие как фенильный, нафтильный, инденильный, фенантрильный или антрацильный радикалы. Арильный радикал может необязательно быть замещен одним или несколькими заместителями, такими как гидрокси, меркапто, галоген, алкил, фенил, алкокси, галогеналкил, нитро, циано, диалкиламино, аминоалкил, ацил, алкоксикарбонил и так далее.

«Гетероциклил» относится к стабильному 3-15-членному циклическому радикалу, который состоит из атомов углерода и от одного до пяти гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из азота, кислорода и серы, предпочтительно 4-8-членному циклу с одним или более гетероатомами, более предпочтительно, 5- или 6-членному циклу с одним или более гетероатомами. Он может быть ароматическим или неароматическим. Для целей настоящего изобретения гетероцикл может представлять собой моноциклическую, бициклическую или трициклическую кольцевую систему, которая может включать системы с конденсированными кольцами, и атомы азота, углерода или серы в гетероциклическом радикале могут быть необязательно окислены, атом азота может быть необязательно кватернизованным, а гетероциклический радикал может быть частично или полностью насыщенным или ароматическим. Примеры таких гетероциклов включают, в качестве неограничивающих примеров, азепины, бензимидазол, бензотиазол, фуран, изотиазол, имидазол, индол, пиперидин, пиперазин, пурин, хинолин, тиадиазол, тетрагидрофуран, кумарин, морфолин, пиррол, пиразол, оксазол, изоксазол, триазол, имидазол и так далее.

«Алкокси» относится к радикалу формулы -OR_a, где R_a представляет собой алкильный радикал, который определен ранее, например, метокси, этокси, пропокси и так далее.

«Амино» относится к радикалу формулы -NH₂, -NHR₃ или -NR_aR_b, необязательно кватернизованному, где R_a и R_b представляют собой, независимо, алкильный радикал, который определен ранее, например, метиламино, этиламино, диметиламино, диэтиламино, пропиламино и так далее.

Термин «галоген» относится к брому, хлору, йоду и фтору.

В настоящем описании под замещенными группами в соединениях по настоящему изобретению подразумевается определенный фрагмент, который может быть замещен по одному или нескольким соответствующим положениям одной или несколькими подходящими группами, например, галогеном, таким как фтор, хлор, бром и йод; циано; гидроксилом; нитро; азидо; алканоилом, таким как C_1-6 алканоильная группа, такая как ацил и тому подобное; карбоксамидо; алкильными группами, включая группы с 1 до приблизительно 12 атомами углерода или от 1 до приблизительно 6 атомами углерода и, более предпочтительно, 1-3 атомов углерода; алкенильной и алкинильной группами, включая группы с одной или несколькими ненасыщенными связями и от 2 до приблизительно 12 атомами углерода или от 2 до приблизительно 6 атомами углерода; алкокси группами с одной или несколькими связями с кислородом и от 2 до приблизительно 12 атомами углерода или от 1 до приблизительно 6 атомами углерода; арилокси, таким как фенокси; алкилтио группами, включая фрагменты с одной или несколькими тиоэфирными связями и от 1 до приблизительно 12 атомами углерода или от 1 до приблизительно 6 атомами углерода; алкилсульфинильными группами, включая фрагменты с одной или несколькими сульфинильными связями и от 1 до приблизительно 12 атомами углерода или от 1 до приблизительно 6 атомами углерода; алкилсульфонильными группами, включая фрагменты с одной или несколькими сульфонильными связями и от 1 до приблизительно 12 атомами углерода или от 1 до приблизительно 6 атомами углерода; аминоалкильными группами, такими как группы с одним или более атомами N и от 1 до приблизительно 12 атомами углерода или от 1 до приблизительно 6 атомами углерода; карбоциклическим арилом, имеющим 6 или более атомов углерода, особенно фенилом или нафтилом, и аралкилом, таким как бензил. Если не указано иное, в случае необходимости замещенная группа может иметь заместитель в каждом возможном для замещения положении группы, и каждое замещение является независимым от другого.

Термин «соль» следует понимать как любую форму активного соединения, применяемого согласно настоящему изобретению, в которой указанное соединение находится в ионной форме или является заряженным и связанным с противоионом (катионом или анионом) или находится в растворе. Данное определение также включает четвертичные аммониевые соли и комплексы активной молекулы с другими молекулами или ионами, в частности комплексы, образованные посредством ионных взаимодействий. Определение включает, в частности, физиологически приемлемые соли; данный термин следует понимать как эквивалентный «фармакологически приемлемым солям».

Термин «фармацевтически приемлемые соли» в контексте настоящего изобретения относится к любой соли, которая является физиологически переносимой (обычно означает, что является нетоксичной, в частности благодаря противоиону), когда используется соответствующим образом для лечения, применяется или используется, в частности, у людей и/или млекопитающих. Данные физиологически приемлемые соли, особенно когда используются у людей и/или млекопитающих, могут быть получены с катионами или основаниями и, в контексте настоящего изобретения, следует понимать, что соли формируются по меньшей мере одним соединением, используемым согласно изобретению, - обычно кислотой (депротонированной), таким как анион, и по меньшей мере одним физиологически приемлемым катионом, предпочтительно неорганическим. Особенно предпочтительными являются соли с щелочными и щелочноземельными металлами, а также соли с аммоний-катионами (NH₄ ⁺). Предпочтительными солями являются соли, образованные с одним или двумя ионами натрия, одним или двумя ионами калия, магнием или кальцием. Данные физиологически приемлемые соли, особенно когда используются у людей и/или млекопитающих, могут также быть получены с анионами или кислотами и, в контексте настоящего изобретения, следует понимать, что соли формируются по меньшей мере одним соединением, используемым согласно изобретению, - обычно протонированным, например по атому азота, таким как катион, и по меньшей мере одним физиологически переносимым анионом. Данное определение, в частности, охватывает, в контексте настоящего изобретения, соль, образованную физиологически переносимой кислотой, например, соли указанного активного соединения с физиологически переносимыми органическими и неорганическими кислотами, особенно когда используются у людей и/или млекопитающих. Примерами данного типа солей являются соли, образованные с хлороводородной кислотой, бромоводородной кислотой, серной кислотой, метансульфоновой кислотой, муравьиной кислотой, уксусной кислотой, щавелевой кислотой, янтарной кислотой, яблочной кислотой, винной кислотой, миндальной кислотой, фумаровой кислотой, молочной кислотой и лимонной кислотой.

Под термином «сольват», в соответствии с настоящим изобретением, следует понимать любую форму активного соединения согласно изобретению, в которой указанное соединение нековалентно связано с другой молекулой (обычно полярного растворителя), включая гидраты и алкоголяты, подобно, например, метаноляту. Предпочтительным сольватом является гидрат.

Любое соединение, которое является пролекарством соединения формулы I, также находится в пределах объема настоящего изобретения. Термин «пролекарство» используется в его самом широком смысле и охватывает все производные, которые в условиях in vivo превращаются в соединения по изобретению. Примеры пролекарств включают, в качестве неограничивающих примеров, производные и метаболиты соединений формулы I, которые включают биогидролизуемые фрагменты, такие как биогидролизуемые амиды, биогидролизуемые сложные эфиры, биогидролизуемые карбаматы, биогидролизуемые карбонаты, биогидролизуемые уреиды и биогидролизуемые фосфатные аналоги. Предпочтительно, пролекарства соединений с карбоксильными функциональными группами являются сложными эфирами карбоновой кислоты с низшими алкилами. Сложные эфиры карбоновых кислот традиционно получают путем этерификации любой из карбоксильных групп, присутствующих в молекуле. Пролекарства обычно могут быть получены с помощью хорошо известных способов, таких как описанные у Бургера (Burger) в «Medicinal Chemistry and Drug Discovery» 6^th ed. (Donald J. Abraham ed., 2001, Wiley) и в «Design and Applications of Prodrugs» (H. Bundgaard ed., 1985, Harwood Academic Publishers).

Используемые здесь термины «лечить», «лечащий» и «лечение» включает ликвидацию, снятие, возвращение к исходному состоянию до, ослабление, изменение, контролирование боли, вызванной химиотерапией, после возникновения боли.

Используемые здесь термины «предупреждение», «предупреждающий», «предупреждать» и профилактика относятся к способности терапевтического вещества не допускать, сводить до минимума или затруднять возникновение или развитие заболевания или состояния перед его началом, в данном случае вызванной химиотерапией боли.

Используемый здесь термин «химиотерапия» или «химиотерапевтическое средство» относится в общих чертах к применению химических средств для лечения рака, опухоли или злокачественного новообразования.

В соответствии с изобретением, «возникающая как следствие химиотерапии» определяется как: a) возникающая после или в начале химиотерапии и b) таким образом, совпадающая или следующая после применения химиотерапевтического средства. Следовательно, подвергаемый лечению симптом, вероятно, вызывается или является следствием токсичности, цитотоксичности или, в особенности, периферической нейротоксичности химиотерапевтического средства.

В предпочтительном варианте осуществления, R₁ в соединениях формулы (I) выбирают из H, -COR₈ и замещенного или незамещенного алкила. Более предпочтительно, R₁ выбирают из H, метила и ацетила. Более предпочтительным вариантом осуществления является вариант, когда R₁ представляет собой H.

В другом предпочтительном варианте осуществления, R₂ означает H или алкил, более предпочтительно метил.

В еще другом предпочтительном варианте осуществления изобретения, R₃ и R₄ находятся в мета- и пара-положениях фенильной группы, и предпочтительно, они выбираются независимо от галогена и замещенного или незамещенного алкила.

В особенно предпочтительном варианте осуществления изобретения, оба R₃ и R₄ вместе с фенильной группой образуют необязательно замещенную систему с конденсированными циклами, более предпочтительно, нафтильную циклическую систему.

Также в отношении настоящего изобретения предпочтительными являются варианты осуществления, где n выбирают из 2, 3, 4, более предпочтительно n равно 2.

В заключение, в другом варианте осуществления предпочтительным является, чтобы R₅ и R₆ представляли собой, каждый независимо, C_1-6алкил или вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образовывали группу мофолина, пиперидинила или пирролидинила. Более предпочтительно, R₅ и R₆ вместе образуют морфолин-4-ильную группу.

В предпочтительных вариантах осуществления комбинация согласно изобретению содержит лиганд сигма-рецептора формулы (I), выбранный из следующих:

[1] 4-{2-(1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси)этил}морфолина;

[2] 2-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси]-N,N-диэтилэтанамина;

[3] 1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-3-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-пиразола;

[4] 1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-3-[3-(пирролидин-1-ил)пропокси]-1H-пиразола;

[5] 1-{2-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси]этил}пиперидина;

[6] 1-{2-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси]этил}-1H-имидазола;

[7] 3-{1-[2-(1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси)этил]пиперидин-4-ил}-3H-имидазо[4,5-b]пиридина;

[8] 1-{2-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси]этил}-4-метилпиперазина;

[9] этил-4-{2-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси]этил}пиперазинкарбоксилата;

[10] 1-(4-(2-(1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси)этил)пиперазин-1-ил)этанона;

[11] 4-{2-[1-(4-метоксифенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси]этил}морфолина;

[12] 1-(4-метоксифенил)-5-метил-3-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-пиразола;

[13] 1-(4-метоксифенил)-5-метил-3-[3-(пирролидин-1-ил)пропокси]-1H-пиразола;

[14] 1-[2-(1-(4-метоксифенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси)этил]пиперидина;

[15] 1-{2-[1-(4-метоксифенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси]этил}-1H-имидазола;

[16] 4-{2-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-фенил-1H-пиразол-3-илокси]этил}морфолина;

[17] 1-(3,4-дихлорфенил)-5-фенил-3-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-пиразола;

[18] 1-(3,4-дихлорфенил)-5-фенил-3-[3-(пирролидин-1-ил)пропокси]-1H-пиразола;

[19] 1-{2-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-фенил-1H-пиразол-3-илокси]этил}пиперидина;

[20] 1-{2-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-фенил-1H-пиразол-3-илокси]этил}-1H-имидазола;

[21] 2-{2-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-фенил-1H-пиразол-3-илокси]этил}-1,2,3,4-тетрагидроизохинолина;

[22] 4-{4-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси]бутил}морфолина;

[23] 1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-3-[4-(пирролидин-1-ил)бутокси]-1H-пиразола;

[24] 1-{4-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси]бутил}пиперидина;

[25] 1-{4-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси]бутил}-4-метилпиперазина;

[26] 1-{4-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси]бутил}-1H-имидазола;

[27] 4-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси]-N,N-диэтилбутан-1-амина;

[28] 1-{4-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси]бутил}-4-фенилпиперидина;

[29] 1-{4-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси]бутил}-6,7-дигидро-1H-индол-4(5H)-она;

[30] 2-{4-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси]бутил}-1,2,3,4-тетрагидроизохинолина;

[31] 4-{2-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-изопропил-1H-пиразол-3-илокси]этил}морфолина;

[32] 2-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-изопропил-1H-пиразол-3-илокси]-N,N-диэтилэтанамина;

[33] 1-(3,4-дихлорфенил)-5-изопропил-3-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-пиразола;

[34] 1-(3,4-дихлорфенил)-5-изопропил-3-[3-(пирролидин-1-ил)пропокси]-1H-пиразола;

[35] 1-{2-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-изопропил-1H-пиразол-3-илокси]этил}пиперидина;

[36] 2-{2-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-изопропил-1H-пиразол-3-илокси]этил}-1,2,3,4-тетрагидроизохинолина;

[37] 4-{2-[1-(3,4-дихлорфенил)-1H-пиразол-3-илокси]этил}морфолина;

[38] 2-[1-(3,4-дихлорфенил)-1H-пиразол-3-илокси]-N,N-диэтилэтанамина;

[39] 1-(3,4-дихлорфенил)-3-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-пиразола;

[40] 1-{2-[1-(3,4-дихлорфенил)-1H-пиразол-3-илокси]этил}пиперидина;

[41] 1-(3,4-дихлорфенил)-3-[3-(пирролидин-1-ил)пропокси]-1H-пиразола;

[42] 1-{2-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси]этил}пиперазина;

[43] 1-{2-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-1H-пиразол-3-илокси]этил}пирролидин-3-амина;

[44] 4-{2-[1-(3,4-дихлорфенил)-4,5-диметил-1H-пиразол-3-илокси]этил}морфолина;

[45] 4-{2-[1-(3,4-дихлорфенил)-4,5-диметил-1H-пиразол-3-илокси]этил}морфолина;

[46] 2-[1-(3,4-дихлорфенил)-4,5-диметил-1H-пиразол-3-илокси]-N,N-диэтилэтанамина;

[47] 1-(3,4-дихлорфенил)-4,5-диметил-3-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-пиразола;

[48] 1-(3,4-дихлорфенил)-4,5-диметил-3-[3-(пирролидин-1-ил)пропокси]-1H-пиразола;

[49] 1-{2-[1-(3,4-дихлорфенил)-4,5-диметил-1H-пиразол-3-илокси]этил}пиперидина;

[50] 4-{4-[1-(3,4-дихлорфенил)-1H-пиразол-3-илокси]бутил}морфолина;

[51] (2S,6R)-4-{4-[1-(3,4-дихлорфенил)-1H-пиразол-3-илокси]бутил}-2,6-диметилморфолина;

[52] 1-{4-[1-(3,4-дихлорфенил)-1H-пиразол-3-илокси]бутил}пиперидина;

[53] 1-(3,4-дихлорфенил)-3-[4-(пирролидин-1-ил)бутокси]-1H-пиразола;

[55] 4-[1-(3,4-дихлорфенил)-1H-пиразол-3-илокси]-N,N-диэтилбутан-1-амина;

[56] N-бензил-4-[1-(3,4-дихлорфенил)-1H-пиразол-3-илокси]-N-метилбутан-1-амина;

[57] 4-[1-(3,4-дихлорфенил)-1H-пиразол-3-илокси]-N-(2-Метоксиэтил)-N-метилбутан-1-амина;

[58] 4-{4-[1-(3,4-дихлорфенил)-1H-пиразол-3-илокси]бутил}тиоморфолина;

[59] 1-[1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-3-(2-морфолинэтокси)-1H-пиразол-4-ил]этанона;

[60] 1-{1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-3-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-пиразол-4-ил}этанона;

[61] 1-{1-(3,4-дихлорфенил)-5-метил-3-[2-(пиперидин-1-ил)этокси]-1H-пиразол-4-ил}этанона;

[62] 1-{1-(3,4-дихлорфенил)-3-[2-(диэтиламино)этокси]-5-метил-1H-пиразол-4-ил}этанона;

[63] 4-{2-[5-метил-1-(нафталин-2-ил)-1H-пиразол-3-илокси]этил}морфолина;

[64] N,N-диэтил-2-[5-метил-1-(нафталин-2-ил)-1H-пиразол-3-илокси]этанамина;

[65] 1-{2-[5-метил-1-(нафталин-2-ил)-1H-пиразол-3-илокси]этил}пиперидина;

[66] 5-метил-1-(нафталин-2-ил)-3-[2-(пирролидин-1-ил)этокси]-1H-пиразола

или их фармацевтически приемлемых солей, стереоизомеров, сольватов или пролекарств.

В более предпочтительном варианте осуществления, лигандом сигма-рецептора формулы (I) является 4-{2-[5-метил-1-(нафталин-2-ил)-1H-пиразол-3-илокси]этил}морфолин. Данное конкретное соединение представлено в примерах настоящего изобретения как соединение 63.

В еще более предпочтительном варианте осуществления, лигандом сигма-рецептора формулы (I) является 4-{2-[5-метил-1-(нафталин-2-ил)-1H-пиразол-3-илокси]этил}морфолина гидрохлорид.

Любое упомянутое здесь соединение означает данное конкретное соединение, а также некоторые его вариации и формы. В частности, упомянутые здесь соединения могут иметь асимметрические центры и поэтому существуют в различных энантиомерных или диастереомерных формах. Таким образом, любое конкретное соединение, упомянутое здесь, означает любой из рацематов, одну или несколько энантиомерных форм, одну или несколько диастереомерных форм и их смеси. Подобным образом, также возможна стереоизомерия и геометрическая изомерия по двойной связи, поэтому в некоторых случаях молекула может существовать в виде (E)-изомера или (Z)-изомера (транс- и цис-изомеры). Если молекула содержит несколько двойных связей, каждая двойная связь будет иметь свою собственную пространственную изомерию, которая может быть той же самой или отличной от пространственной изомерии других двойных связей в молекуле. Более того, упомянутые здесь соединение могут существовать в виде атропоизомеров. Все стереоизомеры, включая энантиомеры, диастереоизомеры, геометрические изомеры и атропоизомеры, упомянутых здесь соединений и их смеси входят в объем настоящего изобретения.

Более того, любое упомянутое здесь соединение может существовать в виде таутомеров. Конкретно, термин таутомер относится к одному из двух или более структурных изомеров соединения, которые находятся в равновесии и легко переходят из одной изомерной формы в другую. Распространенными таутомерными парами являются амин-имин, амид-иминол, кетон-енол, лактам-лактим и так далее.

Если не указано иное, соединения по изобретению также охватывают изотопно-меченые формы, например соединения, которые отличаются только присутствием одного или нескольких изотопных атомов. Например, соединения, имеющие представленные структуры, за исключением замены по меньшей мере одного атома водорода на дейтерий или тритий или замены по меньшей мере одного углерода на ¹³C- или ¹⁴C-обогащенный углерод или замены по меньшей мере одного азота на ¹⁵N-обогащенный азот, находятся в пределах объема настоящего изобретения.

Соединения формулы (I) или их соли или сольваты находятся предпочтительно в фармацевтически приемлемой или по существу чистой форме. Под фармацевически приемлемой формой, среди прочего, подразумевается наличие фармацевически приемлемого уровня чистоты, за исключением традиционных фармацевтических добавок, таких как разбавители и носители, и отсутствие веществ, рассматриваемых как токсичные при обычных уровных доз. Уровень чистоты для лекарственной субстанции составлет предпочтительно выше 50%, более предпочтительно, выше 70%, наиболее предпочтительно выше 90%. В предпочтительном варианте осуществления он составляет выше 95% соединения формулы (I) или его солей, сольватов или пролекарств.

Соединения формулы (I) и их соли или сольваты могут быть получены, как описано в предшествующей заявке WO2006/021462.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения, боль вызывается химиотерапевтическим средством, выбранным из полученных из платины лекарственных средств, растительных алкалоидов, бортезомиба, талидомида и производных и терпенов (терпеноидов).

Более предпочтительно, лекарственными средствами, полученными из платины, являются коммерчески доступные цисплатин, карбоплатин или оксалиплатин.

«Растительные алкалоиды» (и терпеноиды) представляют собой алкалоиды, полученные из растений, которые блокируют деление клеток, препятствуя действию микротрубочек. Так как микротрубочки являются жизненно важными для клеточного деления, их ингибирование подавляет митоз клеток. Основными примерами растительных алкалоидов являются винкаалкалоиды и таксаны.

«Винкаалкалоиды» связываются с определенными сайтами у тубулина, ингибируя сборку тубулина в микротрубочки (М фаза клеточного цикла) Их выделяют из мадагаскарского винка, Catharanthus roseus (обычно известного как барвинок розовый). Предпочтительные винкаалкалоиды включают Винкристин, Винбластин, Винорелбин и Виндезин.

«Таксаны» выделяют из тиса тихоокеанского, Taxus brevifolia. Таксаны повышают стабильность микротрубочек, препятствуя расхождению хромосом во время анафазы. Предпочтительные таксаны в данном изобретении включают Паклитаксел и Доцетаксел.

Примерами химиотерапевтических средств (по их фирменным названиям), которые могут вызывать боль, которую можно предупреждать или лечить с помощью лигандов сигма-рецепторов формулы (I), являются следующие средства:

13-цис-Ретиноевая кислота, 2-CDA, 2-Хлордезоксиаденозин, 5-фторурацил, 5-ФУ, 6-Меркаптопурин, 6-МП, 6-ТГ, 6-Тиогуанин, Абраксан, Аккутан^®, Актиномицин-D, Адриамицин^®, Адруцил^®, Агрилин^®, Ала-Корт^®, Алдеслейкин, Алемтузумаб, Алимта, Алитретиноин, Алкабан A-Q^®, Алкеран^®, полностью трансретиноевая кислота, альфа интерферон, Алтретамин, Аметоптерин, Амифостин, Аминоглутетимид, Анагрелид, Анандрон^®, Анастрозол, Арабинозилцитозин, Ара-C, Аранесп^®, Аредиа^®, Аримидекс^®, Аромазин^®, Арранон^®, Триоксид мышьяка, Аспарагиназа, ATRA, Авастин^®, Азацитидин, БЦЖ, БХНМ (BCNU, бисхлорэтилнитрозомочевина), Бевацизумаб, Бексаротен, Бексар^®, Бикалутамид, БиКНУ, Бленоксан^®, Блеомицин, Бортезомиб, Бусулфан, Бусулфекс^®, C225 (цетуксимаб), кальция лейковорин, Кэмпат^®, Камптозар^®, Каптотецин-11, Капецитабин, Каракас^TM, Карбоплатин, Кармустин, Кармустин в пластинках, Касодекс^®, CC-5013, ЦХНМ (CCNU, циклогексилхлорэтилнитрозомочевина) (о), CDDP™, СииНУ™ (CeeNU), Церубидин™, Цетуксимаб, Хлорамбуцил, Цисплатин, Цитроворум-фактор, Кладрибин, Кортизон, Космеген™, CPT-11 (o), Циклофосфамид, Цитадрен™, Цитарабин, Цитарабин липосомальный, Цитозар-U™, Цитоксан^®, Дакарбазин, Dактиномицин, Дарбепоэтин альфа, Дауномицин, Даунорубицин, Даунорубицина гидрохлорид™, Даунорубицин липосомальный, Даунозом™, Декадрон, Делта-Кортеф™, Делтазон™, Денилейкин дифтитокс, DepoCyt™, Дексаметазон, Дексаметазона ацетат, Дексаметазона натрия фосфат, Дексазон™, Дексразоксан, DHAD (о), DIC™ (Имидазол-карбоксамид), Диодекс™ (Diodex™), Доцетаксел, Доксил™, Доксорубицин липосомальный, Droxia™ (гидроксикарбамид), ДТИК (DTIC, имидазол-карбоксамид), DTIC-Dome™ (имидазол-карбоксамид), Дуралон™, Эфудекс™, Элигард™, Элленс™, элоксатин™, Элспар™, Эмцит™, Эпирубицин, Эпоэтин альфа, Эрбитукс, Эрлотиниб, L-аспарагиназа Erwinia™, Эстрамустин, Этиол, Этопофос™, Этопозид, Этопозида фосфат™, Эулексин™, Эвиста™, Экземестан, Фарестон™, Фаслодекс™, Фемара^®, Филграстим, Флоксуридин, Флудара™, Флударабин, Флуороплекс™, фторурацил, фторурацил (крем), Флуоксиместерон, Флутамид, фолиновая кислота (о), FUDR™ (флоксуридин), Фулвестрант, Г-КСФ™, Гефитиниб, Гемцитабин, Гемтузумаб озогамицин, Гемзар™, Гливек^TM, Глиадел в пластинках™, ГМ-КСФ (o), Гозерелин, гранулоцитарный колониестимулирующий фактор™, Гранулоцито-макрофаго-колониестимулирующий фактор (o), Галотестин™, Герцептин™, Гексадрол™, Гексален™, Гексаметилмеламин™, HMM™, Гикамтин™, Гидреа™, Гидрокорт ацетат™, Гидрокортизон, Гидрокортизона натрия фосфат, Гидрокортизона натрия сукцинат, Гидрокортона фосфат™, Гидроксимочевина, Ибритумомаб, Ибритумомаб тиуксетан, Идамицин^®, Идарубицин Ифекс^®, IFN-альфа, Ифосфамид, ИЛ-11, ИЛ-2, иматиниба мезилат, Имидазолкарбоксамид, Интерферон альфа, Интерферон альфа-2b (ПЭГ-конъюгат) (o), интерлейкин-2™, интерлейкин-11 (o), Интрон A^® (интерферон альфа-2b), Иресса^®, Иринотекан, Изотретиноин, Kidrolase™ (аспарагиназа), Lanacort™ (гидрокортизона ацетат), L-аспарагиназа™, LCR (o) (винкристин), Ленолидомид (Леналидамид), Летрозол, Лейковорин, Лейкеран™, Лейкин™, Лейпролид, Лейрокристин (o), Лейстатин™, липосомальный Ара-C™, жидкий Пред™ (преднизон), Ломустин, L-PAM (o), L-сарколизин (o), Лупрон™, Лупрон Депо™, Матулан™, Максидекс™, Мехлоретамин, Мехлоретамина гидрохлорид, Медралон™, Медрол^®, Мегейс™, Мегестрол, Мегестрола ацетат (o), Мелфалан, Меркаптопурин, Месна, Меснекс™, Метотрексат, Метотрексат натрия (o), Метилпреднизолон, Метикортен™, Митомицин, Митомицин-C (o), Митоксантрон, M-Преднизол™, MTC (o), MTX (o) (метотрексат), Мустарген™, Мустин, Мутамицин™, Милеран™, Милоцел™, Милотарг™, Навельбин™, Неларабин, Неозар™, Невласта™, Неумега™, Нейпоген™, Нексавар^®, Ниландрон™, Нилутамид, Нипент^®, азотистый иприт (o), Новалдекс™, Новантрон™, Остреотид, Остреотида ацетат (o), Онкоспар™, Онковин™, Онтак™, Онксал™, Опревелкин, Орапред™, Оразон™, Оксалиплатин, Паклитаксел, Паклитаксел белок-связанный, Памидронат, Панретин™, Параплатин™, Педиапред™, ПЭГ-интерферон, Пэгаспаргаза, Пэгфилграстим, ПЭГ-Интрон™, ПЭГ-L-аспарагиназа, Пеметрексед, Пентостатин, производное иприта и фенилаланина (o), Платинол™, Платинол-AQ™, Преднизолон, Преднизон, Прелон™, Прокарбазин, Прокрит^®, Пролейкин™, полиферпросан 20 с имплантацией кармустина™, Пуринетол™, Ралоксифен, Ревлимид^®, Ревматрекс™, Ритуксан™, Ритуксимаб, Роферон-A^®, (интерферон альфа-2a) Рубекс™, Рубидомицина гидрохлорид™, Сандостатин^®, Сандостатин ЛАР™, Сарграмостим, Солу-Кортеф™, Солу-Медрол™, Сорафениб, STI-571 (иматиниба мезилат), Стрептозоцин, SU11248, Сунитиниб, Сутент^®, Тамоксифен, Тарцева^®, Таргретин™, Таксол^®, Таксотер™, Темодар^®, Темозоломид, Тенипозид, TESPA (o), Талидомид, Таломид^®, ТераЦис™, Тиогуанин, Тиогуанин таблетированный™, Тиофосфамид (o), Тиоплекс™, Тиотепа, TICE^® (вакцина БЦЖ), Toposar™ (этопозид), Топотекан, Торемифен, Тозитумомаб, Трастузумаб, Третиноин, Трексалл™ (метотрексат), Трисенокс™, TSPA (o), VCR (o), Велбан™, Велкад^®, Вепезид™, Весаноид™, Виадур™, Вайдаза™, Винбластин, Винбластина сульфат (o), Винкасар Pfs™, Винкристин, Винорелбин, Винорелбина тартрат (o), VLB (o) (тенипозид), VM-26 (o) (Вумон), VP-16™ (вепезид), Вумон™, Кселода^®, Ксиотакс, Занозар™, Зевалин^TM, Зинекард™, Золадекс^®, золедроновая кислота и Зомета^®.

Другими лекарственными средствами, используемыми при терапии рака (в основном химиотерапевтические средства), являются:

(Фирменные названия): Алдара, Алимта, Андрокур, Аримидекс, Бореа, Каеликс, Кампто, Касодекс, Декапептил, Элоксатин, Эутирокс, Фазлодекс, Фемара, Гемзар, Гонапептил, Грисетин, Герцептин, Изоворин, Лизодрен, Мегефрен, Метвикс, Навельбин, Новалдекс, Новантрон, Параплатин, Прокрин, Простакур, Прокрин, Простакур, Супрефакт, Тамоксифен Funk, Таксол, Таксотер, Тестекс, Элму Пролонгатум, Томудекс, Утефос, Вепезид, Кселода, Золадекс;

(активные субстанции): Анастрозол, Бикалутамид, Бусерелин, Капецитабин, Цисплатин, Карбоплатин, Дезоксорубицин, Доцетаксел, Этопозид, Фулвестрант, Гемцитабин, Гозерелин, Иринотекан, Летрозол, Лейпрорелин, Мегестрол, Митотан, Митоксантрон, Оксалиплатин, Паклитаксел, Пеметрексед, Ралтитрексед, Тамоксифен, Тегафур, Трипторелин, Винкристин, Винбластин, Винорелбин и Виндезин.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения, химиотерапевтические средства выбирают из таксанов, винкаалкалоидов, лекарственных средств, полученных из платины, бортезомиба или талидомида и их производных. Предпочтительно, химиотерапевтическое средство выбирают из паклитаксела, оксалиплатина, цисплатина, винкристина, бортезомиба, талидомида или леналидамида.

В более предпочтительном варианте осуществления изобретения, химиотерапевтическое средство представляет собой таксан, в частности Паклитаксел. Паклитаксел (Таксол®) является одним из наиболее эффективных и обычно используемых противоопухолевых лекарственных средств для лечения солидных опухолей. Он имеет два серьезных побочных эффекта - миелосупрессия и периферическая нейротоксичность. Гранулоцитарный колониестимулирующий фактор эффективно препятствует нейропении у большинства пациентов.

Однако не существует приемлемой терапии для предупреждения или сведения до минимума повреждения нервов, что делает нейротоксичность серьезным дозозависимым побочным эффектом (Rowinsky et al., Semin. Oncol., 1993a 29 4 Suppl. 3, 1-15; Rowinsky et al., J. Clin. Oncol., 1993b, 11 (10), 2010-20; Wasserheit et al., J. Clin. Oncol., 1996, 14(7), 1993-9; Gordon et al., J. Clin. Oncol., 1997, 15(5), 1965-73; Mielke et al., Eur. J. Cancer, 2006, 42(1), 24-30). Вызываемая паклитакселом нейротоксичность обычно проявляется сенсорной невропатией, причем наиболее распространенными жалобами являются онемение, покалывание, жгучая боль и холодовая аллодиния (Rowinsky et al., Semin. Oncol., 1993a 29 4 Suppl. 3, 1-15; Chaudhry et al., Ann. Neurol., 1994, 35(3), 304-11; Forsyth et al., J. Neurooncol., 1997, 35(1), 47-53; Dougherty et al., Pain, 2004, 109(1-2), 132-42). Симптомы нарушения чувствительности обычно возникают симметрично в ступнях, но иногда появляются одновременно в кистях рук и ступнях (Rowinsky et al., Semin. Oncol., 1993a 29 4 Suppl. 3, 1-15; Quasthoff and Hartung, J. Neurol., 2002, 249(1), 9-17; Mielke et al., Eur. J. Cancer, 2006, 42(1), 24-30). Клинически значимое число пациентов с индуцированной паклитакселом невропатией испытывают невропатическую боль. Например, при исследовании 27 пациентов, принимающих паклитаксел в дозах 135, 175 и 250-300 мг/м², невропатические симптомы встречались у 50, 79 и 100% пациентов, развитие дозозависимой нейротоксичности у 0, 21 и 71% пациентов, соответственно (Postma et al., Ann. Oncol., 1995, 6(5), 489-94).

В другом более предпочтительном варианте осуществления изобретения, химиотерапевтическое средство представляет собой содержащие платину лекарственные средства, в частности оксалиплатин или цисплатин. Данная химиотерапия содержащими платину средствами является основной для лечения солидных опухолей, особенно колоректального, но также рака яичника, яичка, мочевого пузыря и легкого, но их клиническое применение сильно ограничено из-за дозозависимой нейротоксичности. Нейротоксичность, вызываемая данным классом противоопухолевых средств, характеризуется дозозависимой болезненной периферической сенсорной невропатией, проявляющейся симптомами невропатической боли (например, онемением, покалыванием, жгучей болью, аллодинией и гипералгезией) в конечностях. Лечение оксалиплатином приводит к двум формам нейротоксичности: острой и хронической. Острая форма возникает у >90% пациентов и может начинаться во время инфузии или в течение нескольких часов после завершения, обычно протекающая без лечения, и может усиливаться при воздействии холода. Хроническая невропатия является кумулятивной и наиболее часто наблюдается у пациентов, которые получают общие дозы ≥540 мг/м². Хотя это является сенсорной невропатией, интенсивность может усиливаться до такой степени, что ослабляет физические функции, такие как удерживание предметов в руках и способность писать (Cersosimo RJ., Ann. Pharmacother., 2005, 39(1), 128-135).

Предпочтительные комбинации согласно изобретению включают комбинацию 4-{2-[5-метил-1-(нафталин-2-ил)-1H-пиразол-3-илокси]этил}морфолина (соединение 63) с химиотерапевтическим средством, выбранным из паклитаксела, оксалиплатина, цисплатина и винкристина.

Более предпочтительные комбинации согласно изобретению включают комбинацию 4-{2-[5-метил-1-(нафталин-2-ил)-1H-пиразол-3-илокси]этил}морфолина с паклитакселом, комбинацию 4-{2-[5-метил-1-(нафталин-2-ил)-1H-пиразол-3-илокси]этил}морфолина с оксалиплатином и комбинацию 4-{2-[5-метил-1-(нафталин-2-ил)-1H-пиразол-3-илокси]этил}морфолина с цисплатином.

В других предпочтительных примерах осуществления, предпочтения, описанные выше для различных групп и заместителей в формуле выше, а также для химиотерапевтического средства, суммируются. Настоящее изобретение также относится к таким комбинациям.

Комбинация по изобретению может быть составлена для ее одновременного, по отдельности или последовательного введения с по меньшей мере фармацевически приемлемым носителем, добавкой, адьювантом или наполнителем. Это подразумевает, что комбинация двух активных соединений может быть введена:

- как комбинация, которая является частью одного и того же медицинского средства, причем два активных соединения тогда вводятся всегда одновременно.

- как комбинация двух единиц дозирования, каждая с одной из активных субстанций, что дает возможность одновременного, последовательного или отдельного введения.

В конкретном примере осуществления, лиганд сигма-рецептора формулы (I) вводиться независимо от химиотерапевтического средства (например, в двух единицах дозирования), но в одно и то же время.

В другом конкретном варианте осуществления, сначала вводится лиганд сигма-рецептора формулы (I), а затем отдельно или последовательно вводится химиотерапевтическое средство.

Данные конкретные пути введения предпочтительно применяют для предупреждения боли, возникающей как следствие химиотерапии.

В еще другом конкретном варианте осуществления, химиотерапевтическое средство вводится первым, а затем вводится лиганд сигма-рецептора формулы (I), отдельно или последовательно, как указано здесь.

Данный конкретный путь введения предпочтительно применяют для лечения боли, возникающей как следствие химиотерапии.

Вспомогательные материалы и добавки могут быть выбраны среди носителей, эксципиентов, материалов для подложек, лубрикантов, наполнителей, растворителей, разбавителей, красителей, улучшающих вкус веществ, например подсластителей, антиоксидантов и/или связующих. В случае суппозиториев могут использоваться воски или сложные эфиры жирных кислот или консерванты, эмульгаторы и/или носители для парентерального применения. Выбор вспомогательных материалов и/или добавок и используемое количество будут зависеть от формы применения фармацевтической композиции.

Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может быть адаптирована под любую форму введения, например, энтеральную или парентеральную, через легкие, назальную, ректальную и/или внутривенную. Поэтому композиция согласно изобретению может быть адаптирована для местного или системного применения, в частности для нанесения на кожу, подкожного, внутримышечного, внутрисуставного, внутрибрюшинного, через легкие, буккального, сублингвального, назального, чрескожного, вагинального, энтерального или парентерального применения.

Подходящими средствами для энтерального применения являются таблетки, пилюли, жевательные резинки, капсулы, гранулы или сиропы.

Подходящими средствами для парентерального применения являются растворы, суспензии, ресуспендируемые лекарственные средства или спреи.

Комбинация по изобретению может быть составлена в виде осадков в растворенной форме или в патчах для чрескожного применения.

Накожное применение включает мази, гели, кремы, растворы, суспензии или эмульсии. Подходящими формами для ректального применения являются суппозитории.

Как упомянуто выше, соединение формулы (I) подходит для его применения при предупреждении или лечении боли, вызванной химиотерапией. Предпочтительно, боль индуцируется химиотерапевтическим средством, выбранным из таксанов, винкаалкалоидов, полученных из платины лекарственных средств, бортезомиба или талидомида и их производных. Предпочтительно, химиотерапевтическое средство выбирают из паклитаксела, оксалиплатина, цисплатина, винкристина, бортезомиба, талидомида или леналидамида, более предпочтительно, его выбирают из паклитаксела, оксалиплатина или цисплатина.

Кроме того, комбинация по меньшей мере одного соединения общей формулы (I) и по меньшей мере одного химиотерапевтического средства подходит для ее применения при предупреждении или лечении боли, возникающей как следствие химиотерапии. Данная комбинация для ее применения при предупреждении или лечении боли может быть введена одновременно, по отдельности или последовательно. Однократные или повторные введения рассматриваются для предупреждения или лечения боли, возникающей как следствие химиотерапии.

Вследствие этого, в другом аспекте, изобретение относится к комбинации, описанной выше, для ее применения при предупреждении или лечении боли, вызванной химиотерапией.

В конкретном варианте осуществления указанная комбинация применяется для предупреждения боли, вызванной химиотерапией.

В другом конкретном варианте осуществления, указанная комбинация используется при лечении боли, вызванной химиотерапией.

В конкретном варианте осуществления настоящего изобретения боль является периферической невропатической болью, аллодинией, каузалгией, гипералгезией, гиперестезией, гиперпатией, невралгией, невритом или невропатией. Более предпочтительно, боль является холодовой аллодинией или механической аллодинией.

«Невропатическая боль» определяется IASP как «боль, возникающая или вызываемая первичным повреждением или дисфункцией нервной системы» (IASP, Classification of chronic pain, 2^nd Edition, IASP Press (2002), 210). Для цели настоящего изобретения данный термин следует рассматривать как синоним «нейрогенной боли», которая определяется IASP как «боль, возникающая или обусловленная первичным повреждением, дисфункцией или преходящим расстройством в периферической или центральной нервной системе». Невропатическая боль согласно данному изобретению ограничивается невропатической болью, возникающей в результате химиотерапии, то есть вызываемой применением химиотерапевтического средства в химиотерапии. Наиболее вероятной причиной данной боли является нейротоксичность химиотерапевтического средства, и более конкретно, его периферическая нейротоксичность.

В соответствии с IASP «аллодиния» определяется как «боль вследствие воздействия раздражений, обычно ее не вызывающих» (IASP, Classification of chronic pain, 2nd Edition, IASP Press (2002), 210). В соответствии с IASP «периферическая невропатическая боль» определяется как «боль, возникающая или обусловленная первичным повреждением или дисфункцией периферической нервной системы», и «периферическая нейрогенная боль» определяется как «боль, возникающая или обусловленная первичным повреждением, дисфункцией или преходящим расстройством в периферической нервной системе» (IASP, Classification of chronic pain, 2^nd Edition, IASP Press (2002), 213).

В соответствии с IASP «каузалгия» определяется как «синдром, включающий длительную жгучую боль, аллодинию и гиперпатию, возникающий вследствие травматического повреждения нерва, часто в сочетании с вазомоторными и судомоторными расстройствами, а позднее с трофическими нарушениями» (IASP, Classification of chronic pain, 2^nd Edition, IASP Press (2002), 210).

В соответствии с IASP «гипералгезия» определяется как «повышенная реакция на стимул, который в норме является болевым» (IASP, Classification of chronic pain, 2^nd Edition, IASP Press (2002), 211).

В соответствии с IASP «гиперестезия» определяется как «повышенная чувствительность к раздражениям, исключая специальные случаи» (IASP, Classification of chronic pain, 2^nd Edition, IASP Press (2002), 211).

В соответствии с IASP «гиперпатия» определяется как «болевой синдром, характеризующийся необычно болезненной реакцией на раздражение, особенно повторяющееся раздражение, а также повышенным болевым порогом» (IASP, Classification of chronic pain, 2^nd Edition, IASP Press (2002), 212).

IASP очерчивает следующее различие между «аллодинией», «гипералгезией» и «гиперпатией» (IASP, Classification of chronic pain, 2^nd Edition, IASP Press (2002), 212):

Аллодиния Пониженный болевой порог модальности раздражения и ответа различные Гипералгезия Повышенный ответ Стимул и степень ответа одинаковые Гиперпатия Повышенный болевой порог
Повышенный ответ Стимул и степень ответа могут быть одинаковыми или различными

В соответствии с IASP «невралгия» определяется как «боль в зоне иннервации одного или нескольких нервов» (IASP, Classification of chronic pain, 2^nd Edition, IASP Press (2002), 212).

В соответствии с IASP «неврит» определяется как «воспаление одного или нескольких нервов» (IASP, Classification of chronic pain, 2^nd Edition, IASP Press (2002), 212).

В соответствии с IASP «невропатия/неврит» определяется как «нарушение функций или патологические изменения в нерве: в одном нерве - мононевропатия, в нескольких - множественная невропатия, в случае диффузного и двухстороннего поражения - полиневропатия» (IASP, Classification of chronic pain, 2^nd Edition, IASP Press (2002), 212).

В одном примере осуществления изобретения предпочтительно, чтобы соединение формулы (I) применялось в терапевтически эффективных количествах. Терапевт будет определять дозировку данных терапевтических агентов, которая будет наиболее подходящей и будет варьировать в зависимости от пути введения и конкретного выбранного соединения и, кроме того, будет изменяться в зависимости от пациента, подвергаемого лечению, возраста пациента, типа рака и боли, подвергаемой лечению. Как правило, он будет начинать лечение с малых доз, по существу меньших, чем оптимальная доза соединения, и повышать дозу небольшими порциями до достижения оптимального эффекта в данных условиях. Когда композиция вводится энтерально, требуются большие количества активной субстанции для получения такого же эффекта, как в случае меньших количеств, вводимых парентерально. Соединения могут применяться таким же образом, как аналогичные терапевтические агенты, и уровень дозировки имеет тот же порядок величины, который обычно применяется в случае указанных других терапевтических агентов.

Например, схема приема лекарственного средства, которое должно вводиться пациенту, будет зависеть от массы пациента, типа применения, состояния и тяжести заболевания. Предпочтительная схема приема включает введение соединения формулы (I) в пределах 0,5-100 мг/кг и химиотерапевтического средства от 0,15 до 15 мг/кг и введение осуществляется ежедневно в виде одной или нескольких доз.

Следующие примеры и чертежи представлены только с целью иллюстрации некоторых вариантов осуществления изобретения и не могут рассматриваться как ограничивающие его тем или иным образом.

Примеры

Пример 1. Синтез 4-{2-[5-метил-1-(нафталин-2-ил)-1H-пиразол-3-илокси]этил}морфолина (соединение 63) и его гидрохлорида

Соединение 63 может быть получено как описано в предшествующей заявке WO2006/021462. Его гидрохлорид может быть получен следующим способом:

Соединение 63 (6,39 г) растворяют в этаноле, насыщенном HCl, затем смесь перемешивают в течение нескольких минут и упаривают досуха. Остаток кристаллизуют из изопропанола. Маточный раствор от первой кристаллизации подвергают второй кристаллизации путем концентрирования. Общий выход от двух кристаллизаций составляет 5,24 г (63 %) соответствующего гидрохлорида (Т_пл=197-199°C.)

¹H ЯМР (DMSOd₆) δ м.д.: 10,85 (ушир.с, 1H), 7,95 (м, 4H), 7,7 (дд, J=2,2, 8,8 Гц, 1H), 7,55 (м, 2H), 5,9 (с, 1H), 4,55 (м, 2H), 3,95 (м, 2H), 3,75 (м, 2H), 3,55 -3,4 (м, 4H), 3,2 (м, 2H), 2,35 (с, 3H).

Чистота по ВЭЖХ: 99,8%.

Пример 2 . Оценка профилактического и лечебного действия соединения 63 в отношении аллодинии на модели паклитаксел-индуцированной невропатии у мышей.

Общие методики

Эксперименты осуществляли на мышах CD-1 (Charles River, США) с по меньшей мере n=10/эксперименальную группу. Паклитаксел-индуцированную болезненную периферическую невропатию вызывали путем введения в/б (внутрибрюшинно) паклитаксела один раз в день ежедневно в течение 5 дней. Контрольным животным вводили аналогичный объем растворителя (смесь этанола и кремофора EL).

Механическую аллодинию оценивали с помощью электронно-управляемых нитей фон Фрея (динамический подошвенный эстезиометр, Ugo Basile, Варезе, Италия), как описано ранее (Nieto et al., Pain, 2008, 137(3), 520-31), а холодовую аллодинию оценивали с помощью метода с использованием капли ацетона (Nieto et al., Pain, 2008, 137(3), 520-31). Инъецировали п/к (подкожно) лиганд сигма-рецептора соединение 63 (4-{2-[5-метил-1-(нафталин-2-ил)-1H-пиразол-3-илокси]этил}морфолин) либо за 30 минут до каждой инъекции паклитаксела для тестирования будет ли лиганд сигма-рецептора влиять на развитие болезненной периферической невропатии, либо на 10 день (когда инъекции паклитаксела завершены и невропатия полностью развилась). Кроме того, для оценки влияния сигма-1 рецептора в данном процессе определяли разницу в развитии аллодинии с применением мышей дикого типа и нокаутированных по сигма-1 рецептору мышей.

Использовали мышей массой 25-30 г. Животных размещали в групповых клетках, предоставляя им свободный доступ к пище и воде до экспериментов. Их содержали в комнатах с контролируемым температурным и световым режимом (22±1°C, свет включался в 8 часов утра и выключался в 20 часов, свежий воздух подавался каждые 20 мин). Тестирование проводили в светлое время суток (с 9 часов до 15 часов).

Паклитаксел растворяли в растворе, состоящем из 50% Кремофора EL и 50% абсолютного этанола, с получением концентрации 6 мг/мл. Данный раствор паклитаксела хранили при -20°C в течение максимум 14 дней и разбавляли физиологическим раствором (0,9% NaCl), непосредственно перед введением, до конечной концентрации 2 мг/10 мл. Носитель для паклитаксела разбавляли во время инъекции физиологическим раствором (0,9% NaCl) в той же пропорции, как раствор паклитаксела.

Паклитаксел (2 мг/кг) вводили внутрибрюшинно (в/б) в объеме 10 мл/кг один раз в день в течение пяти последовательных дней. Следовательно, кумулятивная доза составляла 10 мг/кг на мышь. В контрольной группе вводили носитель для паклитаксела, следуя аналогичной схеме. Аналогичные схемы инъекций паклитаксела также применяли, когда проводили тестирование групп нокаутированных по сигма-1 рецептору мышей по отношению к группам мышей дикого типа.

Соединение 63 растворяли в физиологическом растворе непосредственно перед введением и применяли в дозах 8, 16, 32 или 64 мг/кг подкожно.

Действие Соединения 63 на паклитаксел-индуцированную невропатическую боль оценивали двумя различными путями. Для оценки действия антагониста сигма рецептора Соединения 63 на развитие паклитаксел-индуцированной боли животные получали п/к инъекцию Соединения 63 за 30 мин перед каждой в/б инъекцией паклитаксела в течение пяти последовательных дней. Ответ животных на различные ноцицептивные стимулы проверяли далее в течение 2-4 недель, в зависимости от теста (смотри далее), без какого-либо дополнительного лечения. Каждое животное тестировали только в одной ноцицептивной модели. Для оценки влияния Соединения 63 на выраженность паклитаксел-индуцированной боли на 10 день - день максимальной выраженности механической аллодинии или холодовой аллодинии - осуществляли инъекцию одного соединения 63 (для получения более подробной информации смотри рисунки). Каждое животное получало только одну дозу Соединения 63 и тестировалось с применением только одной ноцицептивной модели.

Метод оценки холодовой аллодинии . Холодовую аллодинию оценивали по методу, описанному ранее у Нието с сотр. (Nieto et al., Pain, 2008, 137(3), 520-31), мягко прикасаясь к коже на подошве задних лап каплей ацетона, полученной с помощью шприца, соединенного с тонкой полиэтиленовой трубкой. Мышей помещали в прозрачные платиковые боксы (7×7×13 см) с сетчатым полом из проволоки и давали привыкнуть в течение 30 мин. После адаптационного периода производили аппликацию ацетона поочередно три раза на каждую лапу с интервалами 30 с и регистрировали продолжительность лизания или покусывания. Позади камер помещали маленькое заркало, что позволяло отчетливо видеть лапы. Время, затраченное на лизание или покусывание лапы, записывалось с помощью секундомера и выражалось как общее время лизания/покусывания из шести измерений. Поскольку в экспериментах продолжительность покусывания более 10 с была очень редкой, в каждом испытании использовали временное ограничение равное 10 с.

Для выявления у контрольных мышей динамики паклитаксел-индуцируемой холодовой аллодинии животных тестировали перед введением паклитаксела (показатель перед воздействием, за 3 дня перед первым введением паклитаксела) и в разные дни (7, 10, 14, 17, 21 и 24 дни) после первой инъекции паклитаксела или носителя.

Аналогичной процедуре следовали при сравнении нокаутированных по сигма-1 рецептору мышей и мышей дикого типа, выявляя, таким образом, у контрольных мышей динамику паклитаксел-индуцируемой холодовой аллодинии. Таким образом, животные (две равные группы нокаутированных по сигма-1 рецептору мышей и мышей дикого типа) были протестированы перед введением паклитаксела (показатель перед воздействием, за 3 дня перед первым введением паклитаксела) и в разные дни (7, 10, 14, 17, 21 и 24 дни) после первой инъекции паклитаксела или носителя.

Аналогичной процедуре следовали для тестирования действия Соединения 63 на развитие холодовой аллодинии, но в этом случае Соединение 63 или его носитель инъецировали п/к за 30 мин до каждой из 5 в/б инъекций паклитаксела. Вновь животных тестировали перед введением паклитаксела/соединения 63 (показатель перед воздействием, за 3 дня перед первым введением паклитаксела/соединения 63) и в разные дни (7, 10, 14, 17, 21 и 24 дни) после первой инъекции паклитаксела/соединения 63 или носителя для инъекции. Эффект Соединения 63 на выраженность паклитаксел-индуцируемой холодовой аллодинии оценивали на 10 день, поскольку в этот день наблюдали максимальную интенсивность аллодинии. По этой причине, на 10 день после периода привыкания к аппарату регистрировали исходную величину латентного периода, через 30 мин вводили п/к инъекцией соединение 63 или физиологический раствор и через 60, 120 и 180 минут после инъекции повторно оценивали латентный период отдергивания лапы. Около 33% контрольных животных, которым вводили паклитаксел, не демонстрировали холодовую аллодинию, поэтому в данном тесте проводили разделение на мышей, у которых развивается ответ на введение паклитаксела - «респондеров» - и мышей, у которых отсутствует ответ на введение паклитаксела - «нонреспондеров». Мыши «нонреспондеры» были легко идентифицированы, поскольку на 7 и 10 дни после введения паклитаксела они тратили менее 2 с на лизание/покусывание лапы, вызванное ацетоном. Животных «нонреспондеров» не использовали для тестирования действия Соединения 63 на выраженность холодовой аллодинии, поскольку они не демонстрировали достаточную интенсивность холодовой аллодинии.

Метод оценки механической аллодинии . Для оценки механической аллодинии определяли порог отдергивания лапы с помощью динамического подошвенного эстезиометра (Ugo Basile, Италия). В электронном устройстве по фон Фрею применяется жесткая нить, которая прикладывается с непрерывно увеличивающейся силой давления (от 0 до 10 г) к подошве задней лапы в течение 20 с. Сгибательный рефлекс автоматически выключает стимул и на экране прибора появляется значение пороговой величины, вызывающей ответ на механическое воздействие. В день эксперимента мышей помещали, каждую в отдельности, в боксы для испытаний (9×9×14 см) с сетчатым полом из проволоки и позволяли привыкнуть к ним в течение 2 ч. После привыкания с каждой мышью проводили тестирование поочередно три раза для каждой задней лапы.

Для выявления у контрольных мышей динамики паклитаксел-индуцируемой механической аллодинии животных тестировали перед введением паклитаксела (показатель перед воздействием; за 3 дня перед первым введением паклитаксела) и в разные дни (7, 10, 14 и 17 дни) после первой инъекции паклитаксела или носителя.

Аналогичной процедуре следовали при сравнении нокаутированных по сигма-1 рецептору мышей и мышей дикого типа, выявляя, таким образом, у контрольных мышей динамику паклитаксел-индуцируемой механической аллодинии. Таким образом, животные (две равные группы нокаутированных мышей и мышей дикого типа) были протестированы перед введением паклитаксела (показатель перед воздействием, за 3 дня перед первым введением паклитаксела) и в разные дни (7, 10, 14 и 17 дни) после первой инъекции паклитаксела или носителя.

Аналогичной процедуре следовали для тестирования действия Соединения 63 на развитие паклитаксел-индуцируемой механической аллодинии. В этом случае Соединение 63 или его носитель инъецировали п/к за 30 мин до каждой из 5 в/б инъекций паклитаксела. Вновь животных тестировали перед введением паклитаксела/соединения 63 (показатель перед воздействием, за 3 дня перед первым введением паклитаксела/соединения 63) и в разные дни (7, 10, 14 и 17 дни) после первой инъекции паклитаксела/соединения 63 или носителя для инъекции. Эффект Соединения 63 на выраженность паклитаксел-индуцируемой механической аллодинии оценивали на 10 день, поскольку в этот день наблюдали максимальное изменение порога чувствительности к механическому воздействию. По этой причине, на 10 день после периода привыкания к аппарату регистрировали исходную величину латентного периода, через 30 мин вводили п/к инъекцией соединение 63 или физиологический раствор и через 30, 60, 90, 120 и 180 минут после инъекции повторно оценивали латентный период отдергивания лапы. Большинство животных (96%), которым вводили паклитаксел, демонстрировали снижение порога чувствительности к механическому воздействию; тех животных, которые не домонстрировали механическую аллодинию, не использовали в тестировании действия Соединения 63 на выраженность паклитаксел-индуцируемой механической аллодинии.

Результаты, полученные при исследовании в отношении холодовой аллодинии

A) Динамика холодовой аллодинии, индуцируемой с помощью паклитаксела у контрольных мышей

Животным с 1 по 5 день ежедневно в/б вводили паклитаксел (2 мг/кг) или его носитель. Регистрировали продолжительность лизания/покусывания задней лапы в тесте с ацетоном за 3 дня до (Перед воздействием) и несколько дней после первой инъекции паклитаксела или его носителя. Каждое животное тестировали только в одной ноцицептивной модели. Значительного различия показателей, полученных в тесте с ацетоном в день перед воздействием у животных, которым вводили паклитаксель и которым вводили носитель, не наблюдалось. Введение в течение 5 дней носителя для паклитаксела не приводило к значительному изменению ответа у животных в тесте с ацетоном в любой из дней после воздействия по сравнению с показателем, полученным перед воздействием.

В тесте с ацетоном (Фиг. 1) введение паклитаксела (2 мг/кг, в/б) один раз в день ежедневно в течение 5 дней позволило различить две группы животных в зависимости от их ответа. У большинства животных (67%), которым вводили паклитаксел, значительно увеличивалось (p<0,01) время, затрачиваемое на стимулированное лизание/покусывание лапы (Фиг. 1), и частота лизания/покусывания лапы во все дни после воздействия по сравнению с показателем, полученным перед воздействием. Данные животные являются животными, отвечающими на паклитаксел (паклитаксел-респондерами). С другой стороны, 33% животных, которым вводили паклитаксел, не демонстрировали холодовую аллодинию и их ответ на ацетон не отличался от ответа животных, которым вводили носитель для паклитаксела (Фиг. 1). Когда сравнивали показатели продолжительности лизания/покусывания у различных групп, полученные в один и тот же день проведения оценивания, для каждого дня проведения оценивания после воздействия получали статистически достоверное различие между группой паклитаксел-респондеров и другими двумя группами (паклитаксел-нонреспондеров или носителя для паклитаксела) (Фиг. 1). Паклитаксел-индуцированная холодовая аллодиния была максимальной на 10-14 дни после первой инъекции противоопухолевого средства (Фиг. 1), поэтому действие Соединения 63 на выраженность холодовой аллодинии оценивали на 10 день.

B) Действие Соединения 63 на выраженность паклитаксел-индуцируемой холодовой аллодинии.

Животным с 1 по 5 день ежедневно один раз в день в/б вводили паклитаксел, а на 10 день проводили п/к инъекцию Соединения 63 или физиологического раствора. Регистрировали продолжительность лизания/покусывания задней лапы у каждого животного за 3 дня до (Перед воздействием) и 10 дней после первой инъекции паклитаксела. В этот день продолжительность лизания/покусывания задней лапы регистрировали немедленно (время 0) и через некоторое время (60, 120 и 180 мин) после инъекции Соединения 63 или физиологического раствора.

У всех групп животных, подвергаемых воздействию, продолжительность лизания/покусывания лапы на 10 день перед лечением с помощью тестируемого лекарственного вещества или физиологического раствора значительно отличалась от этого показателя, полученного в день перед воздействием. Как ожидалось, на 10 день после первой инъекции паклитаксел индуцировал холодовую аллодинию. Одна п/к инъекция физиологического раствора на 10 день существенно не изменяла выраженность паклитаксел-индуцируемой холодовой аллодинии. Неотложное лечение различными количествами Соединения 63 (32-128 мг/кг) уменьшало выраженность паклитаксел-индуцируемой холодовой аллодинии. Данный эффект Соединения 63 был дозозависимым и по существу отличным от такового для физиологического раствора (Фиг. 2).

C) Действие Соединения 63 на ответ в тесте с ацетоном у мышей, которым вводили носитель для паклитаксела.

Животные с 1 по 5 день ежедневно один раз в день в/б подвергались воздействию носителя для паклитаксела, а на 10 день получали п/к инъекцию Соединения 63 или физиологического раствора. Регистрировали продолжительность лизания/покусывания задней лапы у каждого животного за 3 дня до (Перед воздействием) и 10 дней после первой инъекции носителя для паклитаксела. В этот день, продолжительность лизания/покусывания задней лапы регистрировали немедленно (время 0) и через некоторое время (60, 120 и 180 мин) после инъекции Соединения 63 или физиологического раствора. Как ожидалось, у животных, подвергаемых воздействию носителя для паклитаксела, не развивалась холодовая аллодиния (например, продолжительность вызванного ацетоном лизания/покусывания лапы не увеличивалась), когда проводили оценивание в течение 10 дней после введения первой дозы носителя для паклитаксела (Фиг. 3).

Неотложное лечение с помощью Соединения 63 (64 мг/кг, п/к) не влияло на ответ контрольных животных (подвергаемых воздействию носителя для паклитаксела) в отношении ацетона (Фиг. 3).

D) Действие Соединения 63 на развитие паклитаксел-индуцируемой холодовой аллодинии.

Осуществляли п/к инъекцию Соединения 63 (64 мг/кг) или физиологического раствора мышам с 1 по 5 день ежедневно один раз в день за 30 мин. перед каждой в/б инъекцией паклитаксела (2 мг/кг). Регистрировали ответ у каждого животного за 3 дня до (Перед воздействием) и в разные дни после первой инъекции паклитаксел + соединение 63 или паклитаксел + физиологический раствор. В тесте с ацетоном показатели, полученные до воздействия, были аналогичными во всех экспериментальных группах (Фиг. 4).

Как ожидалось, когда проводили оценку в течение 24 дней после введения первой дозы паклитаксела, у группы животных с п/к введением физиологического раствора за 30 мин до каждой дозы паклитаксела развивалась холодовая аллодиния (проявляющаяся увеличением продолжительности вызванного ацетоном лизания/покусывания лапы) (Фиг. 4). Кроме того, максимальная холодовая аллодиния наблюдалась на 10-14 дни после первой дозы противоопухолевого средства (Фиг. 4).

Совместное введение паклитаксела (2 мг/кг, в/б) и антагониста σ₁ рецептора Соединения 63 (64 мг/кг, п/к) ингибировало развитие холодовой аллодинии, индуцируемой паклитакселем (Фиг. 4).

E) Действие совместного введения носителя для паклитаксела и Соединения 63 на ответ, вызванный в тесте с ацетоном.

С 1 по 5 день ежедневно один раз в день за 30 мин перед каждой в/б инъекцией носителя для паклитаксела (2 мг/кг) мышам осуществляли п/к инъекцию Соединения 63 (64 мг/кг) или физиологического раствора. Регистрировали ответ у каждого животного за 3 дня до (Перед воздействием) и в разные дни после первой инъекции носитель для паклитаксела + соединение 63 или носитель для паклитаксела + физиологический раствор. Как ожидалось, ни в одной группе животных, подвергаемых воздействию носителя для паклитаксела, не развивалась холодовая аллодиния (например, они не демонстрировали увеличение продолжительности вызванного ацетоном лизания/покусывания лапы), когда проводили оценивание в течение 24 дней после введения первой дозы носителя для паклитаксела.

Совместное введение носителя для паклитаксела и соединения 63 (64 мг/кг, п/к) незначительно изменяло вызванный ацетоном ответ у животных по сравнению с тем, который наблюдали у животных, которым совместно вводили носитель для паклитаксела и физиологический раствор (Фиг. 5).

F) Действие паклитаксела и носителя для паклитаксела у мышей дикого типа и нокаутированных по сигма-1 рецептору мышей.

Животным с 1 по 5 день ежедневно один раз в день в/б вводили паклитаксел (2 мг/кг). Регистрировали продолжительность лизания или покусывания задней лапы в тесте с ацетоном за 3 дня до (Перед воздействием) и несколько дней после первой инъекции паклитаксела. Продолжительность вызванного ацетоном лизания/покусывания лапы до воздействия с помощью паклитаксела (Перед воздействием) была аналогичной у мышей дикого типа и нокаутированных по сигма-1 рецептору мышей (Фиг. 6).

У мышей дикого типа ответ в тесте с ацетоном (продолжительность лизания/покусывания задней лапы) усиливался с 7 по 21 дни после первой дозы паклитаксела (Фиг. 6). В отличие от этого, у нокаутированных по σ₁ рецептору мышей продолжительность вызываемого ацетоном лизания/покусывания не изменялась при воздействии на них паклитаксела. Следовательно, у нокаутированных по σ₁ рецептору мышей не проявляется и/или не развивается паклитаксел-индуцированная холодовая аллодиния.

С другой стороны, у животных, которых подвергали воздействию носителя для паклитаксела холодовая аллодиния не развивалась (Фиг. 7) и ответ у животных, на которых воздействовали носителем для паклитаксела, в тесте с ацетоном был аналогичным ответу у мышей дикого типа и нокаутированных по σ₁ рецептору мышей (Фиг. 7).

Результаты, полученные при исследовании в отношении механической аллодинии

G) Динамика механической аллодинии, индуцируемой с помощью паклитаксела у контрольных мышей.

Животных с 1 по 5 день ежедневно один раз в день в/б подвергали воздействию паклитаксела (2 мг/кг) или его носителя. Регистрировали пороговую силу давления для отдергивания задней лапы с помощью динамического подошвенного эстезиометра за 3 дня до (Перед воздействием) и несколько дней после первой инъекции паклитаксела или его носителя. Введение паклитаксела (2 мг/кг, в/б, в течение 5 дней) индуцировало механическую аллодинию у мышей, так как на 10 день значительно снижалась величина пороговой силы давления для отдергивания лапы в тесте фон Фрея по сравнению как с величиной, полученной перед воздействием, так и с величиной, полученной в тот же день для животных, которым вводили носитель для паклитаксела (Фиг. 8). Вследствие этого, действие Соединения 63 на выраженность механической аллодинии тестировали на 10 день. В отличие от результатов, полученных в случае холодовой аллодинии, только около 4% мышей, которых подвергали воздействию паклитаксела, рассматривались как животные «нонреспонденты», например, в их случае на 10 день величины порога чувствительности к механическому воздействию были не ниже, чем их показатели перед воздействием (полученные за 3 дня до начала введения паклитаксела).

H) Действие Соединения 63 на выраженность паклитаксел-индуцируемой механической аллодинии.

Животные с 1 по 5 день ежедневно один раз в день в/б подвергались воздействию паклитаксела, а на 10 день получали п/к инъекцию Соединения 63 или физиологического раствора. Регистрировали пороговую силу давления для отдергивания задней лапы у каждого животного за 3 дня до (Перед воздействием) и 10 дней после первой инъекции паклитаксела. В этот день, регистрировали латентный период отдергивания лапы непосредственно перед (время 0) и через некоторое время (30, 60, 90, 120 и 180 мин) после инъекции Соединения 63 или физиологического раствора. Пороговая сила давления отдергивания лапы на 10 день, перед введением тестируемого лекарственного вещества или физиологического раствора, значительно отличалась от ее величины в день перед воздействием у всех групп животных, подвергнутых воздействию. Таким образом, паклитаксел индуцировал механическую аллодинию на 10 день после первой инъекции. Одна п/к инъекция физиологического раствора на 10 день существенно не изменяла выраженность паклитаксел-индуцируемой механической аллодинии (Фиг. 9).

Неотложное лечение с помощью Соединения 63 (64 мг/кг, п/к) уменьшало выраженность механической аллодинии, индуцируемой паклитакселем (Фиг. 9).

I) Действие Соединения 63 на пороговую силу давления для отдергивания задней лапы у мышей, которым вводили носитель для паклитаксела.

Животные с 1 по 5 день ежедневно один раз в день в/б подвергались воздействию носителя для паклитаксела, а на 10 день получали п/к инъекцию Соединения 63 или физиологического раствора. Регистрировали пороговую силу давления для отдергивания задней лапы у каждого животного за 3 дня до (Перед воздействием) и 10 дней после первой инъекции носителя для паклитаксела. В этот день, латентный период отдергивания лапы регистрировали немедленно (время 0) и через некоторое время (30, 60, 90, 120 и 180 мин) после инъекции Соединения 63 или физиологического раствора. Как ожидалось, у животных, подвергаемых воздействию носителя для паклитаксела, не развивалась механическая аллодиния (например, они не демонстрировали уменьшением пороговой силы давления, необходимой для отдергивания задней лапы), когда проводили оценивание в течение 10 дней после введения первой дозы носителя для паклитаксела (Фиг. 10).

Разовая п/к инъекция Соединения 63 (64 мг/кг, п/к) на 10 день после первой инъекции носителя для паклитаксела не влияла на ответ в отношении механического стимула у данных контрольных животных (Фиг. 10).

J) Действие паклитаксела и носителя для паклитаксела у мышей дикого типа и нокаутированных по сигма-1 рецептору мышей.

Животным с 1 по 5 день ежедневно один раз в день в/б вводили паклитаксел (2 мг/кг) или его носитель. Регистрировали пороговую силу давления для отдергивания задней лапы с помощью динамического подошвенного эстезиометра за 3 дня до (Перед воздействием) и несколько дней после первой инъекции паклитаксела или его носителя. Пороговая сила давления для отдергивания лапы до воздействия с помощью паклитаксела (Перед воздействием) была аналогичной у мышей дикого типа и нокаутированных по сигма-1 рецептору мышей (Фиг. 11).

У мышей дикого типа пороговая сила давления для отдергивания лапы значительно уменьшалась с 7 по 10 дни после первой дозы паклитаксела (Фиг. 11). В отличие от этого, у нокаутированных по σ₁ рецептору мышей пороговая сила давления для отдергивания лапы значительно не изменялась при введении им паклитаксела (Фиг. 11). Следовательно, у нокаутированных по σ₁ рецептору мышей не проявляется и/или не развивается паклитаксел-индуцированная механическая аллодиния.

Пороговая величина, вызывающая ответ на механическое воздействие, у мышей дикого типа и нокаутированных по σ₁ рецептору мышей значительно не отличалась до (Перед воздействием) и после введения носителя для паклитаксела (Фиг. 12). Эти данные указывают на то, что нокаутированные по σ₁ рецептору мыши отвечают нормально на механический точечный стимул.

Пример 3. Оценка профилактических и лечебных эффектов соединения 63 в отношении аллодинии на модели хронической оксалиплатин-индуцированной невропатии у крыс.

Общие методики

Использовали 60 самцов крыс линии Спраг Доули (CERJ, Франция), весивших 136-169 г в начале эксперимента (первое введение соединений в день Д-2). Животных содержали в комнатах с контролируемой температурой (19,5°C-24,5°C) и относительной влажностью (45%-65%) с чередованием по 12 часов света и темноты, предоставляя им свободный доступ к стандартному гранулированному лабораторному корму и воде во время исследования.

Животных размещали в клетках по 3 или 4 и наблюдали в течение четырехдневного периода акклиматизации перед любым тестированием. Каждую крысу опознавали по маркировке на хвосте.

В качестве носителя для оксалиплатина использовали дистиллированную воду. В качестве носителя для соединения 63 использовали 0,5% гидроксипропилметилцеллюлозу (ГПМЦ).

Основная система для обработки данных: программное обеспечение SigmaStat (версия 3.5, SPSS Science Software, Erkrath GmbH)

В данное исследование было включено шесть групп по 10 крыс в каждой:

• Группа 1: 0,5% ГПМЦ, в/б (носитель тестируемого соединения)/Дистиллированная вода, в/б (Носитель Оксалиплатина) (n=10)

• Группа 2: 0,5% ГПМЦ, в/б (носитель тестируемого соединения)/Оксалиплатин 3 мг/кг, в/б (n=10)

• Группа 3: 40 мг/кг Соединения 63, в/б (дважды в день×18)/3 мг/кг Оксалиплатина, в/б (n=10)

• Группа 4: 20 мг/кг Соединения 63, в/б (ежедневно×8)/3 мг/кг Оксалиплатина, в/б (n=10)

• Группа 5: 40 мг/кг Соединения 63, в/б (ежедневно×8)/3 мг/кг Оксалиплатина, в/б (n=10)

• Группа 6: 80 мг/кг Соединения 63, в/б (ежедневно×8)/3 мг/кг Оксалиплатина, в/б (n=10).

0,5% ГПМЦ, Соединение 63 и Оксалиплатин вводили внутрибрюшинной инъекцией (10 мл/кг). Когда это было возможно, все процедуры введения осуществляли в кодированном порядке.

Средство Соединения 63 ежедневно использовали свежеприготовленным и использовали средство в течение утра и времени после полудня для групп, которые обрабатывали дважды в день. Между двумя введениями средство хранили при +4°C.

Хроническую периферическую невропатию индуцировали путем повторных внутрибрюшинных инъекций Оксалиплатина (3 мг/кг, в/б) 3 раза в неделю в дни (Д) 0, 2, 4, 7, 9, 11 и 14 (7 инъекций, Общая доза=21 мг/кг, в/б).

Животных подвергали тестированию 2 раза в течение лечения соединением 63 (например Д8 и Д15) и один раз через 24 ч после завершения лечения соединением 63 (например Д16).

Для оценки профилактического действия Соединения 63 соединение вводили внутрибрюшинно (10 мл/кг), начиная с 2 дней до первой внутрибрюшинной инъекции Оксалиплатина 3 мг/кг (Д-2) и до дня после последней инъекции Оксалиплатина (Д15).

Для оценки терапевтического действия Соединения 63 соединение вводили внутрибрюшинно (10 мл/кг), начиная с первого дня тестирования (Д8) и до дня после последней инъекции Оксалиплатина (Д15).

Группе животных, которым вводили Оксалиплатин, ежедневно дозировано вводили носитель для соединения 63 (0,5% ГПМЦ, 10 мл/кг), начиная с первого дня тестирования (Д8) и до дня после последней инъекции Оксалиплатина (Д15).

При осуществлении ежедневного воздействия соединение 63 и 0,5% ГПМЦ вводили утром, в то время как Оксалиплатин вводили после полудня.

Что касается группы животных, которым дважды в день вводили соединение 63, время между двумя введениями составляло 8 часов. В день введения Оксалиплатина животным за 30 мин до инъекции Оксалиплатина дозировано вводили соединение 63.

В дни тестирования (например Д8, Д15) соединение 63 и 0,5% ГПМЦ вводили за 30 мин до тестирования.

Холодовую аллодинию оценивали путем измерения ответов в отношении термальной неноцицептивной стимуляции (тест с ацетоном) в Д8, Д15 и Д16.

Холодовую аллодинию оценивали с помощью теста с ацетоном. В этом тесте, определяли латентный период отдергивания лапы после нанесения капли ацетона на подошву обоих задних лап (время реакции) и оценивали интенсивность ответа в баллах (холодовая чувствительность в баллах).

Время реакции на эффект охлаждения, вызванный ацетоном, определяли в течение 20 с (конечная точка) после аппликации ацетона. Ответы на действие ацетона оценивали по следующей четырехбалльной шкале: 0 (нет ответа); 1 (быстрое отдергивание, легкий удар лапой); 2 (замедленное отдергивание или более отчетливый удар лапой); 3 (повторяющийся удар лапой с лизанием и покусыванием).

Для каждой экспериментальной группы результаты представляли как:

- Время реакции, определяемое как время в секундах, требуемое для получения реакции лапки (среднее из 6 измерений для каждой крысы ± стандартная ошибка среднего).

- Суммарный балл холодовой чувствительности, определяемый как сумма баллов из шести измерений для каждой крысы ± стандартная ошибка среднего. Минимальный результат составляет 0 (нет ответа в любом из 6 испытаний) и максимально возможный результат составляет 18 (повторяющиеся удары и лизание или покусывание лап в каждом из 6 испытаний).

Статистически значимое различие между группами, подвергаемыми воздействию, и группой, которой вводили носитель, определяли с помощью рангового двухфакторного ANOVA с повторными измерениями с последующим, в случае статистически значимого значения F, post-hoc-сравнением (критерий Бонферрони) с применением программного обеспечения SigmaStat. Уровень значимости составлял p<0,05. Статистический анализ был проведен с помощью программного обеспечения SigmaStat.

Результаты исследования в отношении оксалиплатин-индуцированной холодовой аллодинии

A) Тест с ацетоном/Время реакции

Как представлено на Фиг. 13 и 14, о развитии Оксалиплатин-индуцированной холодовой аллодинии у группы с воздействием 0,5% ГПМЦ/Оксалиплатин свидетельствует значительное сокращение времени реакции отдергивания лапы после аппликации ацетона. Это сокращение было нарастающим и значительным от Д8 (-19%, p<0,01 ) до Д15 (-37%, p<0,001 ) и D16 (-36%, p<0,001 ) по сравнению с группой с воздействием ГПМЦ/дистиллированная вода.

A.1.) Профилактика с помощью соединения 63

Соединение 63, вводимое внутрибрюшинно дважды в день при 40 мг/кг с Д-2 до Д15, давало положительный эффект в течение периода действия, как представлено на Фиг. 13. На Д8 этот эффект был менее выраженным, но оставался статистически значимым на Д15 и D16, 24 часа спустя после завершения лечения соединением 63.

A.2.) Неотложное лечение соединением 63

Животным первый раз вводили внутрибрюшинно дозу 20 мг/кг, 40 мг/кг и 80 мг/кг соединения 63 в первый день тестирования Д8 и затем они получали лечение ежедневно до Д15 (последнее введение). В данных экспериментальных условиях (Фиг. 14) наблюдали дозозависимое действие. Действительно, самая низкая доза (например 20 мг/кг, в/б) давала слабый эффект в течение исследования. Однако средняя доза (например 40 мг/кг, в/б) давала средний эффект в течение исследования.

Что касается самой высокой дозы (например 80 мг/кг, в/б), то наблюдали высоко значимое увеличение времени реакции отдергивания лапы по сравнению с группой, которой вводили 0,5% ГПМЦ/Оксалиплатин, (19,1±0,3 с по сравнению с 14,7±0,9 с, p<0,001). Положительный эффект, наблюдаемый во время Д8, оставался значимым на Д15 (17,5±0,5 с по сравнению с 11,5±1,6 с, p<0,01) и на D16 (15,5±1,0 с по сравнению с 11,5±0,9 с, p<0,05).

B) Тест с ацетоном/Суммарный балл холодовой чувствительности

Как показано на Фиг. 15 и 16, на Д8 Оксалиплатин вызывал значительное увеличение суммарного балла холодовой чувствительности, что хорошо коррелирует с уменьшением времени реакции отдергивания лапы. В результате продолжения введения Оксалиплатина суммарный балл холодовой чувствительности достигал максимального значения на Д15 (7,0±1,2 по сравнению с 1,4±0,4, p<0,001) и оставался статистически значимым на D16 (6,7±0,9 по сравнению с 1,3±0,4, p<0,001).

B.1.) Профилактика с помощью соединения 63

Как наблюдалось для времени реакции отдергивания лапы, соединение 63, вводимое внутрибрюшинной инъекцией дважды в день при 40 мг/кг с Д-2 до Д15, давало положительный эффект в отношении значений суммарного балла холодовой чувствительности (2,3±0,6 на Д8; 3,0±0,6 на Д15 и 3,5±0,7 на D16), более близких значениям, наблюдаемым в случае групп, которым вводили ГПМЦ/дистиллированную воду, чем значениям, полученным в случае групп, которым вводили ГПМЦ/Оксалиплатин (Фиг. 15).

B.2.) Неотложное лечение соединением 63

Соединение 63, вводимое внутрибрюшинно при 20 мг/кг, 40 мг/кг и 80 мг/кг с Д8 по Д15, также приводило к дозозависимому действию в отношении суммарного балла холодовой чувствительности (Фиг. 16).

В то время как самая низкая доза Соединения 63 (например 20 мг/кг, в/б) на Д8 давала слабый эффект (4,3±0,6), самая высокая доза (например 80 мг/кг, в/б) вызывала высоко значимое уменьшение суммарного балла холодовой чувствительности (1,0±0,4 против 5,0±0,8, p<0,001 по сравнению с группой, которой вводили 0,5% ГПМЦ/Оксалиплатин). Эффект в отношении аллодинии оставался на уровне самой высокой дозы на Д15 (1,8±0,3, p<0,001) и уменьшался только на D16, 24 часа спустя после последней инъекции Соединения 63 (3,1±0,6, p<0,05).

Что касается средней дозы (например 40 мг/кг, в/б), она давала средний эффект со значениями суммарного балла холодовой чувствительности, находящимися между значениями, полученными для группы, которой вводили ГПМЦ/дистиллированную воду, и значениями, полученными для группы, которой вводили ГПМЦ/Оксалиплатин, что согласуется с наблюдениями по времени реакции отдергивания лапы (Фиг. 16).

Пример 4. Оценка профилактических и лечебных эффектов соединения 63 в отношении аллодинии на модели хронической цисплатин-индуцированной невропатии у крыс.

Общие методики

Самцов крыс линии Вистар (250-300 г) получали от фирмы Harlan-Iberica (Барселона, Испания). По прибытии в лабораторию животных содержали в стандартных клетках для перевозки (40×28×25 см) в контролируемых окружающих условиях (температура=20°C; влажность=60%) с чередованием по 12 часов света и темноты (свет включали между 08:00 и 20:00). Животным предоставляли свободный доступ к водопроводной воде и стандартному гранулированному лабораторному корму (Harlan-Iberica, Барселона, Испания).

До эксперимента крыс приучали к изолированности. Крысам вводили путем внутрибрюшинных инъекций один раз в неделю в течение 5 недель цисплатин (1 мг/кг) + носитель (контрольная группа для неотложного лечения) или цисплатин (1 мг/кг) + соединение 63 (25 мг/кг). На последней неделе (день 36) контрольной группе однократно вводили 64 мг/кг Соединения 63.

Оценку механической аллодинии проводили до введения цисплатина (исходное состояние) и в конце каждой экспериментальной недели (н1, н2, н3, н4). Для оценки неотложной помощи с помощью Соединения 63 (н5), оценку механической аллодинии осуществляли через 50 минут после введения лекарственного вещества. В эти дни крыс помещали порознь в прозрачную пластиковую клетку на высоко расположенную в ней железную сетку и давали адаптироваться к условиям проведения испытаний в течение по меньшей мере 10 мин. Приучение к данным условиям также проводили за два дня до проведения оценки. К подошвенной стороне каждой задней лапы снизу сетчатого дна прикладывали калиброванные нити фон Фрея (0,9, 1,4, 2,1, 2,5, 3, 4, 5,5, 7,5, 8, 10,5, 13, 14, 15, 17, 25, 27, 32 и 40 г). Каждый стимул апплицировали в течение приблизительно 1 с, с интервалами между стимулами приблизительно 3 с. Регистрировали только сильные и немедленные ответы в форме отдергивания. Результат рассматривали как положительный тогда, когда 3 или более ответа в форме отдергивания получали из 5 последовательных испытаний с каждой нитью. Механическую аллодинию определяли как значительное уменьшение пороговой величины, вызывающей ответ на механический стимул в тесте с нитями фон Фрея.

Результаты исследования в отношении цисплатин-индуцированной механической аллодинии

Неотложное лечение Соединением 63

Как ожидалось, введение один раз в неделю цисплатина вызывало нарастающее значительное уменьшение давления нитей фон Фрея, вызывающего ответ в контрольной группе, которое было очевидным на 3 и 4 неделе. Однократное введение 64 мг/кг Соединения 63 на 5 неделе изменяло состояние, вызванное цисплатином, возвращая его к исходному уровню (Фиг. 17).

Профилактика с помощью соединения 63

Цисплатин вводили один раз в неделю в течение 5 недель, индуцируя уменьшение давления нитей фон Фрея, вызывающее ответ. После последнего введения цисплатина на 5 неделе этот параметр возвращался к исходному уровню на 8 неделе. Интересно, что совместное введение 25 мг/кг Соединения 63 дважды в день в те же самые дни, когда вводился цисплатин, предотвращало развитие механической аллодинии под действием цисплатина. Представленные результаты демонстрируют, что соединение 63 предупреждает развитие механической аллодинии, индуцированное цисплатином, у крыс в модели периферической нейропатии (Фиг. 18).

Изобретение относится к комбинации лиганда сигма-рецептора формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, изомера или сольвата и химиотерапевтического средства, выбранного из группы, образованной таксанами, винкаалкалоидами, лекарственными средствами на основе платины и талидомидом. В формуле (I) радикалы R₁-R₆ имеют значения, указанные в формуле изобретения, и n выбирают из 2, 3 и 4. Заявленная комбинация может применяться для профилактики или лечения боли, вызванной вышеуказанными химиотерапевтическими средствами, при одновременном, раздельном или последовательном введении. 4 н. и 11 з.п. ф-лы, 18 ил., 4 пр.

1. Комбинация по меньшей мере одного лиганда сигма-рецептора и по меньшей мере одного химиотерапевтического средства для одновременного, раздельного или последовательного введения, где лиганд сигма-рецептора имеет следующую общую формулу (I):

где
R₁ выбирают из группы, содержащей водород, С₁-С₆алкил и
-СО(С₁-С₆алкил);
R₂ выбирают из группы, содержащей водород, С₁-С₆алкил и фенил;
R₃ и R₄ независимо выбирают из группы, содержащей водород, О(С₁-С₆алкил) и галоген, или вместе они образуют конденсированную кольцевую систему;
R₅ и R₆ независимо выбирают из группы, содержащей водород, С₁-С₆алкил, или R₅ и R₆ образуют вместе с атомом азота, к которому они присоединены, гетероциклильную группу, где гетероциклический радикал относится к устойчивому 3-15-членному ароматическому или неароматическому кольцевому радикалу, включающему от 1 до 5 гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из азота, кислорода и серы;
n выбирают из 2, 3 или 4;
или его фармацевтически приемлемая соль, изомер или сольват
и
химиотерапевтическое средство выбирают из группы, образованной таксанами, винкаалкалоидами, лекарственными средствами на основе платины и талидомидом,
для профилактики или лечения боли, вызванной вышеуказанными химиотерапевтическими средствами.

2. Комбинация по п. 1, где R₁ выбирают из Н, метила, этила, н-пропила, изопропила, н-бутила, трет-бутила и н-пентила.

3. Комбинация по п. 1 или 2, где R₂ представляет собой Н или метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил и н-пентил.

4. Комбинация по п. 1 или 2, где R₃ и R₄ вместе образуют конденсированную нафтильную кольцевую систему.

5. Комбинация по п. 1 или 2, где R₅ и R₆ вместе образуют морфолин-4-ильную группу.

6. Комбинация по п. 1 или 2, где лигандом сигма-рецептора формулы (I) является 4-{2-[5-метил-1-(нафталин-2-ил)-1Н-пиразол-3-илокси]этил}морфолин или его фармацевтически приемлемая соль, изомер или сольват.

7. Комбинация по п. 1 или 2, где лигандом сигма-рецептора формулы (I) является 4-{2-[5-метил-1-(нафталин-2-ил)-1Н-пиразол-3-илокси]этил}морфолина гидрохлорид.

8. Комбинация по п. 1 или 2, где химиотерапевтическое средство выбирают из группы, содержащей паклитаксел, оксалиплатин, цисплатин, винкристин или талидомид.

9. Комбинация по п. 1 или 2, где комбинация содержит 4-{2-[5-метил-1-(нафталин-2-ил)-1Н-пиразол-3-илокси]этил}морфолин и химиотерапевтическое средство, выбранное из паклитаксела, оксалиплатина или цисплатина.

10. Применение комбинации по любому из пп. 1-9 для производства лекарственного средства для предупреждения или лечения боли, вызванной таксанами, винкаалкалоидами, лекарственными средствами на основе платины и талидомидом.

11. Применение по п. 10, где боль выбирают из периферической невропатической боли, аллодинии, каузалгии, гипералгезии, гиперестезии, гиперпатии, невралгии, неврита и невропатии.

12. Применение соединения формулы (I), описанного в любом из пп. 1-7, или его фармацевтически приемлемой соли, изомера или сольвата для производства лекарственного средства для лечения или предупреждения боли, вызванной таксанами, винкаалкалоидами, лекарственными средствами на основе платины и талидомидом.

13. Применение соединения по п. 12 или его фармацевтически приемлемой соли, изомера или сольвата для производства лекарственного средства для предупреждения боли, вызванной таксанами, винкаалкалоидами, лекарственными средствами на основе платины и талидомидом.

14. Применение соединения по п. 12 или 13, где боль выбирают из периферической невропатической боли, аллодинии, каузалгии, гипералгезии, гиперестезии, гиперпатии, невралгии, неврита и невропатии.

15. Способ лечения пациента, страдающего от боли, вызванной таксанами, винкаалкалоидами, лекарственными средствами на основе платины и талидомидом, или который может испытывать боль в результате химиотерапевтического лечения таксанами, винкаалкалоидами, лекарственными средствами на основе платины и талидомидом, который включает введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении или профилактике, терапевтически эффективного количества лиганда сигма-рецептора формулы (I), описанного в любом из пп. 1-7.