СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ПАЦИЕНТОВ С ХРОНИЧЕСКОЙ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИЕЙ Российский патент 2015 года по МПК A61K31/41 A61P25/32 

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии и неврологии, и может быть использовано в коррекции патологических состояний головного мозга, вызванных алкоголизмом.

На сегодняшний день алкоголизм является актуальной социальной и медицинской проблемой, требующей поиска новых путей решения. Алкоголь - третий фактор в рейтинге рисков смерти, второй - среди причин смертности населения трудоспособного возраста и первый - в среде молодых людей 25-40 лет. Состояние зависимости представляет сложнейшую область медицины, в которой тесно переплетены нейрохимические, генетические, психологические, социальные и культурные факторы. В структуре большого наркоманического синдрома психическая (психологическая) зависимость от психоактивных веществ (ПАВ) отличается наибольшей продолжительностью. Она может сопутствовать явлениям физической зависимости, развивающимся вслед за прекращением действия ПАВ, сохраняться длительное время после ослабления и исчезновения синдрома физической зависимости. Известно, что систематическое употребление этанола приводит к развитию токсической энцефалопатии. В наибольшей степени уязвимы для нейротоксичных веществ нейроны.

Известно, что одним из звеньев патогенеза хронической алкогольной интоксикации является гиперпродукция активных форм кислорода и азота биоэнергетическими и нейрохимическими системами головного мозга. Избыток этих молекул в условиях антиоксидантной недостаточности приводит к развитию нитрозирующего стресса - нитрозилированию по S-, N-, О-элементам тиольных, фенольных, гидроксильных и аминогрупп белковой части ферментов, рецепторов, ионных каналов, мембранных фрагментов митохондрий, необратимо окисляя их. Под действием интермедиатов нитрозирующего стресса в клетке происходит активация экспрессии редокс-чувствительных генов, одни из которых необходимы для защиты клеток от токсических эффектов алкогольной интоксикации, а другие при избытке цитотоксических дериватов оксида азота инициируют апоптическую гибель нейрональной клетки.

В настоящее время для лечения алкогольной энцефалопатии предпочтение отдается следующим препаратам: бензодиазепинам, антидепрессантам, нейролептикам, антиконвульсантам. Большой интерес в этом отношении представляют ноотропы. Однако несовершенство существующих концепций лекарственной терапии морфо-функциональных нарушений при хронической алкогольной интоксикации делает необходимым поиск и разработку новых, более эффективных способов фармакокоррекции, направленных на торможение апоптоза нейронов головного мозга и нитрозирующего стресса.

Известен способ лечения алкоголизма, заключающийся в приеме фармакологических препаратов 1-2 раза в день на протяжении 2-3 дней. Пациенту последовательно назначают бензонал с никотиновой кислотой (0,1 г), с запиванием 200 мл переваренной охлажденной воды, через 30-40 минут - раствор мочевины (10 г на 200 мл воды), рибоксин (0,2 г) и аланин (1,0 г), еще через 30-40 минут - ацетилсалициловую кислоту (0,5 г), пирацетам (0,4 г), пироксан (0,03 г) и циннаризин (0,05 г), с запиванием 200 мл переваренной охлажденной воды (Патент Украины №72687, «Способ лечения алкоголизма», опубл. 15.03.2005, бюл. №3). Этот способ мы принимаем за прототип.

Общим существенным признаком прототипа и заявляемого изобретения является назначение фармакотерапии.

Однако при таком способе лечения не учитывается наличие таких патологических процессов, имеющих место при хронической алкогольной интоксикации, как нейроапоптоз и нитрозирующий стресс, и они никак не корректируются, что снижает эффективность проводимой терапии, т.к. воздействие осуществляется не на все звенья патогенеза. Кроме этого при таком лечении когнитивно-мнестические функции ЦНС улучшаются в недостаточной степени.

В основу изобретения поставлена задача усовершенствования способа лечения хронической алкогольной интоксикации путем фармакокоррекции препаратом тиоцетам апоптоза нейронов головного мозга и снижения нитрозирующего стресса, которые имеют место при хронической алкогольной интоксикации, и усиления действия, направленного на улучшение когнитивно-мнестических функций, что обеспечит положительное воздействие на патогенетические механизмы, на которые в известных схемах лечения воздействие не оказывалось, и это, в свою очередь, повысит качество лечения пациентов с хронической алкогольной интоксикацией.

Поставленная задача решается тем, что в способе лечения пациентов с хронической алкогольной интоксикацией, заключающемся в проведении фармакотерапии, новым является то, что снижают апоптоз нейронов головного мозга и уменьшают нитрозирующий стресс путем назначения комбинированного препарата тиоцетам в дозе 100 мг/кг в сутки в пересчете на пирацетам в течение 14 дней.

Причинно-следственная связь между совокупностью существенных признаков и достигаемым результатом заключается в следующем.

Тиоцетам - комбинированный лекарственный препарат группы цереброактивных лекарственных средств. Тиоцетам имеет широкий спектр фармакологической активности, обладает выраженным ноотропным, противоишемическим, мембраностабилизирующим и антиоксидантным действием. Кроме того, препарат улучшает реологические свойства крови и стимулирует синтез некоторых нейромедиаторов центральной нервной системы. В состав препарата входят два активных компонента - тиотриазолин и пирацетам, которые взаимно усиливают фармакологические эффекты друг друга. Соотношение активных компонентов в препарате составляет 1:4 соответственно.

В процессе проведения экспериментальных исследований нами были выявлены новые, особые свойства тиоцетама, которые дают возможность использовать этот препарат в лечении хронической алкогольной интоксикации, воздействуя на определенные звенья этого заболевания, а именно на нитрозирующий стресс и нейроапоптоз.

Хотя ранее было известно, что тиоцетам можно использовать для устранения абстинентного синдрома, это не могло быть основанием для назначения этого препарата с целью коррекции апоптоза нейронов головного мозга и уменьшения нитрозирующего стресса, поскольку коррекция абстинентного синдрома направлена на уменьшение психосоматического комплекса, не имеющего отношения к активации нитрозирующего стресса и нейроапоптоза, и относится к сфере психиатрии.

Для уменьшения неврологических и когнитивных нарушений при алкогольной интоксикации назначение тиоцетама неочевидно, т.к. пусковые механизмы нейродеструкции при алкогольной интоксикации отличаются от таковых при, например, ишемии мозга.

Способ осуществляется следующим образом.

Комбинированный препарат тиоцетам, содержащий тиотриазолин и пирацетам в соотношении 1:4 соответственно, назначают в дозе 100 мг/кг в сутки в пересчете на пирацетам в течение 14 дней. Препарат можно назначать в таблетках или в виде инъекций.

Доказательство того, что тиоцетам обладает неизвестным ранее и неизученным действием, которое дает возможность использовать его в лечении алкогольной интоксикации по определенной, разработанной нами в результате проведенных экспериментальных исследований схеме, а также высокой его эффективности представлены в приведенных ниже примерах.

Пример 1. Антиапоптическое действие тиоцетама

В опытах использовали 40 белых беспородных крыс-самцов с массой тела 180-220 г и возрастом 4,5 месяцев, которые содержались в виварии при свободном доступе к пище (стандартный гранулированный корм) и воде, при естественной смене дня и ночи; животные получены из питомника ГУ «Институт фармакологии и токсикологии АМН Украины». Все экспериментальные процедуры осуществляли в соответствии с «Положением об использовании животных в биомедицинских исследованиях».

Хроническую алкогольную интоксикацию (ХАИ) вызывали ежедневным внутрижелудочным введением первые 10 дней 15% раствора этанола в дозе 4 г/кг, следующие 10 дней - 15% раствора этанола в дозе 6 г/кг и последующие 10 дней крысам вводили 25% раствор этанола в дозе 4 г/кг. С 30 суток прекращали алкоголизацию и проводили экспериментальную терапию изучаемыми препаратами, продолжали наблюдение в течение 14 дней. Все крысы разделены на 4 группы по 10 животных в каждой:

1 группа получала в течение 30 дней этанол, а с 31 по 44 сутки - тиоцетам внутрижелудочно с помощью металлического зонда в дозе 100 мг/кг (в пересчете на пирацетам) в виде таблеточной массы (таблетки «Тиоцетам» производства корпорации «Артериум», Украина);

2 группа получала в течение 30 дней этанол, а с 31 по 44 сутки - референс-препарат Пирацетам внутрижелудочно в виде таблеточной массы (таблетки «Пирацетам» производства корпорации «Артериум», Украина) с помощью металлического зонда в дозе 250 мг/кг в пересчете на действующее вещество;

3 группа получала в течение 30 дней этанол, а с 31 по 44 сутки - физиологический раствор внутрижелудочно с помощью металлического зонда (контроль);

4 группа - интакт (вместо этанола получала физиологический раствор).

На 45 сутки животные выводились из эксперимента под тиопенталовым наркозом (40 мг/кг). Антиапоптическое действие Тиоцетама оценивали по снижению плотности нейронов с признаками апоптоза в СА-1 зоне гиппокапма с помощью микроскопа Axioskop (Ziess, Germany), видеокамеры COHU - 4922 (USA) и системы цифрового анализа изображения VIDAS - 386 (Kontron Elektronic, Germany), а также содержания антиапоптического белка bcl-2, определяемого методом иммуноблотинга в цитозольной фракции гомогената коры головного мозга.

В ходе эксперимента было установлено, что в цитозольной фракции гомогената головного мозга животных после ХАИ развивался дефицит антиапоптотического белка Всl-2 (снижение концентрации на 88%) (табл. 1). Белок Всl-2 защищает нейроны от гибели по типу апоптоза, вызванной активацией NOS, повышением NO-ассоциированной нейротоксичности (появление избытка токсических дериватов NO). Морфометрические исследования выявили в СА-1 зоне гиппокампа животных, перенесших ХАИ, значительное появление апоптически и деструктивно измененных нейронов (повышение плотности клеток в 5,6 раз). Курсовое введение тиоцетама в течение 14 суток животным после ХАИ приводило к достоверному снижению плотности апоптических и деструктивно измененных нейронов СА-1 зоны гиппокампа на 33% и увеличение концентрации bcl-2 на 352,7% по сравнению с группой контроля и группой животных, получавших курсом пирацетам (табл. 1).

Пример 2. Влияние тиоцетама на активность нитрозирующего стресса в головном мозге крыс, подвергнутых хронической алкогольной интоксикации

В опытах использовали 40 белых беспородных крыс-самцов с массой тела 180-220 г и возрастом 4,5 месяцев, которые содержались в виварии при свободном доступе к пище (стандартный гранулированный корм) и воде, при естественной смене дня и ночи; животные получены из питомника ГУ «Институт фармакологии и токсикологии АМН Украины». Все экспериментальные процедуры осуществляли в соответствии с «Положением об использовании животных в биомедицинских исследованиях».

Хроническую алкогольную интоксикацию (ХАИ) вызывали ежедневным внутрижелудочным введением первые 10 дней 15% раствора этанола в дозе 4 г/кг, следующие 10 дней - 15% раствора этанола в дозе 6 г/кг и последующие 10 дней крысам вводили 25% раствор этанола в дозе 4 г/кг. С 30 суток прекращали алкоголизацию и проводили экспериментальную терапию изучаемыми препаратами, продолжали наблюдение в течение 14 дней. Все крысы разделены на 4 группы по 10 животных в каждой:

1 группа получала в течение 30 дней этанол, а с 31 по 44 сутки - Тиоцетам внутрижелудочно с помощью металлического зонда в дозе 100 мг/кг (в пересчете на пирацетам) в виде таблеточной массы (таблетки «Тиоцетам» производства корпорации «Артериум», Украина);

2 группа получала в течение 30 дней этанол, а с 31 по 44 сутки - референс-препарат Пирацетам внутрижелудочно в виде таблеточной массы (таблетки «Пирацетам» производства корпорации «Артериум», Украина) с помощью металлического зонда в дозе 250 мг/кг в пересчете на действующее вещество;

3 группа получала в течение 30 дней этанол, а с 31 по 44 сутки - физиологический раствор внутрижелудочно с помощью металлического зонда (контроль);

4 группа - интакт (вместо этанола получала физиологический раствор).

На 45 сутки животные выводились из эксперимента под тиопенталовым наркозом (40 мг/кг). Влияние Тиоцетама на нитрозирующий стресс в головном мозге экспериментальных животных оценивали по содержанию маркера этого патологического процесса - нитротирозина в цитозольной и митохондриальных фракциях гомогената головного мозга. Цитозольную и митохондриальные фракции головного мозга животных выделяли методом дифференциального центрифугирования на центрифуге Sigma 3-30k (Германия). Содержание нитротирозина определяли с помощью ELISA-набора NITROTYROSINE, который представляет собой твердофазный энзим-связывающий иммуносорбентный набор, работающий по принципу «сэндвича».

В результате проведенных исследований было установлено, что хроническая алкогольная интоксикация (ХАИ) приводит к инициированию нитрозирующего стресса в мозге экспериментальных животных, о чем свидетельствовало повышение нитротирозина в цитозоле и митохондриях на 332% и 361% соответственно в группе контроля по сравнению с группой здоровых животных (интакт) (табл. 2). Проводимая экспериментальная терапия в течение 14 суток животных после ХАИ приводила к снижению уровня нитротирозина как в митохондриях, так и цитозоле мозга животных.

Как видно из таблицы 2, наибольшая депрессия этого маркера нитрозирующего стресса регистрировалась в группах, получавших тиоцетам в дозе 100 мг/кг (57,2% - цитозольная и 61,5% - митохондриальная фракции) по сравнению с группой нелеченных животных и с группой, которой вводили пирацетам.

Пример 3. Влияние тиоцетама на когнитивно-мнестические нарушения у крыс, подвергнутых хронической алкогольной интоксикации

В опытах использовали 40 белых беспородных крыс-самцов с массой тела 180-220 г и возрастом 4,5 месяцев, которые содержались в виварии при свободном доступе к пище (стандартный гранулированный корм) и воде, при естественной смене дня и ночи; животные получены из питомника ГУ «Институт фармакологии и токсикологии АМН Украины». Все экспериментальные процедуры осуществляли в соответствии с «Положением об использовании животных в биомедицинских исследованиях».

Хроническую алкогольную интоксикацию (ХАИ) вызывали ежедневным внутрижелудочным введением первые 10 дней 15% раствора этанола в дозе 4 г/кг, следующие 10 дней - 15% раствора этанола в дозе 6 г/кг и последующие 10 дней крысам вводили 25% раствор этанола в дозе 4 г/кг. С 30 суток прекращали алкоголизацию и проводили экспериментальную терапию изучаемыми препаратами, продолжали наблюдение в течение 14 дней. Все крысы разделены на 4 группы по 10 животных в каждой:

1 группа получала в течение 30 дней этанол, а с 31 по 44 сутки - тиоцетам, внутрижелудочно с помощью металлического зонда в дозе 100 мг/кг (в пересчете на пирацетам) в виде таблеточной массы (таблетки «Тиоцетам» производства корпорации «Артериум», Украина);

2 группа получала в течение 30 дней этанол, а с 31 по 44 сутки - референс-препарат Пирацетам внутрижелудочно в виде таблеточной массы (таблетки «Пирацетам» производства корпорации «Артериум», Украина) с помощью металлического зонда в дозе 250 мг/кг в пересчете на действующее вещество;

3 группа получала в течение 30 дней этанол, а с 31 по 44 сутки - физиологический раствор внутрижелудочно с помощью металлического зонда (контроль);

4 группа - интакт (вместо этанола получала физиологический раствор).

На 44 сутки у животных оценивали когнитивно-мнестические фунукции ЦНС по сохранности у крыс аверсивного стимула в тесте условной реакции пассивного избегания (УРПИ). Животных обучали в двухкамерной установке, состоящей из двух отсеков - светлого и темного. Крысу помещали в темный отсек, фиксировали латентное время захода в темный отсек, где крыса получала удар током и выбегала в светлый отсек. Воспроизведение УРПИ проверяли через 24 часа. О сохранности когнитивно-мнестических функций ЦНС судили по изменению латентного времени захода крысы в темный отсек по сравнению с контролем.

После 30-дневной алкоголизации у крыс наблюдалось уменьшение латентного периода захода в темный отсек, характеризующее подавление когнитивно-мнестических функций ЦНС (таблица 3).

После проведенного лечения в группе животных, получавших тиоцетам, отмечается значительное увеличение латентного периода захода в темный отсек (на 226% достоверно выше по отношению к контролю), пирацетам показал увеличение латентного периода на 81%. По данному показателю улучшению когнитивно-мнестических функций ЦНС тиоцетам достоверно превосходил пирацетам.

Таким образом, в результате проведенных нами экспериментальных исследований были выявлены новые, ранее неизвестные свойства тиоцетама, а именно способность корректировать апоптически измененные нейроны, устранять нитрозирующий стресс и значительно эффективнее улучшать когнитивно-мнестические функции при хронической алкогольной интоксикации по сравнению с референс-препаратом. Такая эффективность тиоцетама именно при алкогольной хронической интоксикации и в предложенной нами дозировке 100 мг/кг в сутки на протяжении 14 дней не является очевидной, т.к. при некоторых патологических состояниях она может проявляться, при некоторых - препарат в этом отношении не будет эффективным. Это было неочевидно для специалиста и требовало проведения экспериментальных исследований, которые подтвердили предположения о такой активности препарата. На основании вышеизложенного мы можем считать, что наш способ является новым, имеет изобретательский уровень и может быть с высокой эффективностью использован в лечении пациентов с хронической алкогольной интоксикацией.

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии и наркологии, и может быть использовано для лечения пациентов с хронической алкогольной интоксикацией. Для этого вводят комбинированный препарат тиоцетам в дозе 100 мг/кг в сутки в пересчете на пирацетам в течение 14 дней. Способ позволяет улучшить когнитивно-мнестические функции за счет корректировки апоптически измененных нейронов и устранении нитрозирующего стресса. 3 табл., 3 пр.

Способ лечения пациентов с хронической алкогольной интоксикацией путем проведения фармакотерапии, отличающийся тем, что снижают апоптоз нейронов головного мозга и уменьшают нитрозирующий стресс путем назначения комбинированного препарата тиоцетам в дозе 100 мг/кг в сутки в пересчете на пирацетам в течение 14 дней.