СПОСОБ ПРОГНОЗА НЕЙТРОПЕНИИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С, ПОЛУЧАЮЩИХ КОМБИНИРОВАННУЮ ПРОТИВОВИРУСНУЮ ТЕРАПИЮ Российский патент 2015 года по МПК A61B8/00 G01N33/48 

Описание патента на изобретение RU2570342C1

Изобретение относится к области медицины, а именно инфекционным болезням, и может быть использовано для прогноза нейтропении, развивающейся у больных хроническим гепатитом С (ХГС) в результате проведения комбинированной противовирусной терапии (КПТ).

ХГС является, как известно, одним из наиболее распространенных инфекционных заболеваний человека и характеризуется выраженной склонностью к формированию цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы [1]. Лишь применение современной КПТ с использованием препаратов интерферона-α (ИФН-α) и рибавирина позволяет добиться у многих пациентов полной элиминации вируса гепатита С (HCV) и обеспечить тем самым предупреждение неблагоприятных исходов заболевания [2, 8]. Актуальной проблемой противовирусной терапии ХГС остается, однако, развитие такого нежелательного явления как КПТ-ассоциированная нейтропения [3, 7, 9].

Объективным показателем, позволяющим оценить у лиц, страдающих хронической HCV-инфекцией, степень тяжести КПТ-ассоциированной нейтропении, является минимальное абсолютное число нейтрофилов (АЧНmin) в крови, зафиксированное у больного за весь период проведения КПТ [7].

Для своевременной профилактики развития КПТ-ассоциированной нейтропении необходим эффективный способ ее прогноза. В настоящий момент известны лишь отдельные прогностически неблагоприятные признаки развития нейтропении в ходе КПТ, к которым относят исходно низкую массу тела пациента [4] и проведение противовирусного лечения с использованием препаратов пегилированного ИФН-α [10, 11].

Из патентной литературы известны два способа прогноза развития КПТ-ассоциированной нейтропении у больных ХГС [5, 6]. Первый предлагаемый способ основан на использовании метода кожного «окна» in vivo. У больных ХГС непосредственно перед назначением КПТ в мазках-отпечатках кожи ладонной поверхности правого и левого предплечья проводят определение спонтанного и индуцированного апоптоза нейтрофилов. В качестве индуктора апоптоза нейтрофилов (ИАН) используют 2-3 капли жидкости, состоящей из 0,2 г ребетола и 1700000 ME альтевира, разведенных в 1,0 л изотонического раствора. Показатель индуцированного апоптоза ≥40% свидетельствует о высоком риске развития нейтропении у данной категории лиц при проведении им в дальнейшем КПТ [5].

(См. патент России №2444998, опубл. 20.03.2012, по кл. МПК А61В 10/00; G01N 33/68)

Второй способ прогноза построен на использовании ИАН у больных ХГС in vitro. Для этого 0,08 мл крови пациента вносят в пробирку, содержащую 0,02 мл 5%-ного водного раствора цитрата натрия, далее в эту же пробирку добавляется 0,02 мл водного раствора ИАН. Одновременно ставится контрольный опыт: в пробирку с 0,08 мл крови того же больного добавляют 0,04 мл 5%-ного раствора цитрата натрия, но уже без ИАН. Обе пробирки помещают в термостат на 2 часа при температуре 37°C. Затем готовят мазки с окраской по Романовскому-Гимза и под иммерсионным увеличением проводят расчет показателя повреждаемости нейтрофилов (ППН) по формуле: (H1-Нк)/100, где H1 - количество поврежденных клеток в опыте, Нк - количество поврежденных в контроле, 100 - количество сосчитанных клеток. Значение ППН ≥0,26±0,01 свидетельствует о высоком риске развития нейтропении у данной категории лиц при проведении им в дальнейшем КПТ [6].

(См. Патент России №2449278, опубл. 27.04.2012, по кл. МПК G01N 33/48)

Однако, существенным недостатком предложенных способов является их высокая трудоемкость, а также отсутствие количественных критериев, позволяющих учитывать степень тяжести прогнозируемой КПТ-ассоциированной нейтропении.

Технический результат заявленного изобретения заключается в повышении точности прогноза при одновременном сокращении времени и трудозатрат на его проведение.

Поставленная задача достигается тем, что способ прогноза нейтропении у больных хроническим гепатитом С (ХГС), получающих комбинированную противовирусную терапию (КПТ), отличается тем, что у больных ХГС непосредственно перед началом КПТ определяют в сыворотке крови уровень вирусной нагрузки (ВН, (ME/мл), генотип HCV (genHCV), абсолютное число нейтрофилов (АЧНисходн х109/л), проводят непрямую фиброэластографию печени, по результатам которой определяют уровень фиброза (F, кПа) и рассчитывают прогнозируемое значение минимального абсолютного числа нейтрофилов (АЧНmin (x109/л) в крови с помощью метода множественной линейной регрессии по формуле:

где genHCV=1,0 для пациентов с 1-м генотипом HCV и genHCV=0,0 для пациентов со 2-м и 3-м генотипами HCV; и устанавливают, что прогнозируемые значения АЧНmin≤1,3×109/л свидетельствуют о наличии риска развития нейтропении у больных ХГС, получающих КПТ; причем расчетные значения АЧНmin от 1,0×109/л до 1,3×109/л позволяют прогнозировать в данном случае развитие легкой, от 0,75×109/л до 0,99×109/л - умеренной, от 0,5×109/л до 0,74×109/л - тяжелой и <0,5×109/л - крайне тяжелой степени нейтропении.

По сравнению с предложенными ранее способами [5, 6], заявляемый имеет ряд преимуществ: во-первых, он позволяет не только прогнозировать у больных ХГС риск развития нейтропении, но и количественно оценивать при этом степень ее тяжести; во-вторых, более прост технически и, в-третьих, после выполнения несложных расчетов обеспечивает немедленное получение результата.

Заявляемый способ осуществляют следующим образом. У больных ХГС, которым планируется проведение КПТ, непосредственно перед ее началом необходимо выполнить определение прогнозируемого значения АЧНmin (×109/л) в соответствии с представленной ниже математической формулой:

где ВН - уровень вирусной нагрузки (МЕ/мл), F - уровень фиброза по результатам непрямой фиброэластографии печени (кПа), genHCV - генотип HCV (genHCV = 1,0 для пациентов с 1-м генотипом HCV и genHCV = 0,0 для пациентов со 2-м и 3-м генотипами HCV), АЧНисходн - абсолютное число нейтрофилов в крови перед началом КПТ (×109/л).

Полученные значения АЧНmin≤1,3×109/л с достоверностью p<0,05 свидетельствуют о наличии риска развития нейтропении у больных ХГС в ходе КПТ; причем расчетные значения АЧНmin от 1,0×109/л до 1,3×109/л позволяют спрогнозировать в данном случае развитие легкой, от 0,75×109/л до 0,99×109/л - умеренной, от 0,5×109/л до 0,74×109/л - тяжелой и <0,5×109/л - крайне тяжелой степени нейтропении.

Основные параметры, характеризующие статистическую значимость разработанного нами способа, отражены в таблице.

Практическая реализуемость изобретения иллюстрируется следующими клиническими примерами.

Больная М., 57 лет, поступила в Гепатологический центр г. Ростова-на-Дону с верифицированным диагнозом - ХГС, генотип HCV - 1b, для проведения начального этапа противовирусной терапии. Исходные показатели (до начала лечения) оказались равны: уровень вирусной нагрузки - 2 790 000 МЕ/мл; результат непрямой фиброэластографии печени - 12,3 кПа, что соответствовало индексу фиброза F3. Исходная величина АЧН - 1,6×109/л. С помощью предложенной нами математической формулы у пациентки непосредственно перед началом курса противовирусной терапии было рассчитано прогнозируемое значение АЧНmin:

Учитывая полученный показатель прогнозируемого АЧНmin, равный 0,72×109/л, у больной в ходе противовирусного лечения ожидалось развитие тяжелой КПТ-ассоциированной нейтропении. Далее пациентке была назначена КПТ по схеме: ребетол - 1200 мг в сутки перорально, пегасис - 180 мкг в неделю подкожно. Планируемая продолжительность лечения - 48 недель. Минимальный уровень АЧН был выявлен у больной уже через 8 недель от начала лечения и оказался равен 0,69×109/л, что не имело достоверных отличий с рассчитанным ранее показателем прогнозируемого АЧНmin (p>0,05). Таким образом, у пациентки в ходе КПТ наблюдалось развитие тяжелой степени нейтропении, что в соответствии с заявленным способом и было спрогнозировано нами с достоверным уровнем значимости.

Больной Б., 25 лет, поступил в Гепатологический центр г. Ростова-на-Дону с верифицированным диагнозом - ХГС, генотип HCV - 3а, для проведения начального этапа противовирусной терапии. Исходные показатели (до начала лечения): уровень вирусной нагрузки - 210 000 МЕ/мл; результат непрямой фиброэластографии печени - 5,3 кПа, что соответствовало индексу фиброза F0. Исходная величина АЧН оказалась равна 5,1×109/л. С помощью предложенной нами математической формулы у пациента непосредственно перед началом курса противовирусной терапии было рассчитано прогнозируемое значение АЧНmin:

Учитывая полученный показатель прогнозируемого АЧНmin, равный 3,02×109/л, у больного в ходе противовирусного лечения ожидалось отсутствие развития КПТ-ассоциированной нейтропении. Далее пациенту была назначена КПТ по схеме: ребетол - 800 мг в сутки перорально и альтевир - по 3 млн ME, подкожно, три раза в неделю. Продолжительность курса противовирусного лечения составила 24 недели. Минимальный уровень АЧН был выявлен у больного через 12 недель от начала лечения и оказался равен 2,9×109/л, что не имело достоверных отличий с рассчитанным ранее показателем прогнозируемого АЧНmin (p>0,05). Таким образом, у данного пациента в ходе КПТ наблюдалось отсутствие развития нейтропении, что в соответствии с заявленным способом и было спрогнозировано нами с достоверным уровнем значимости.

Список использованной литературы

1. Авдеева М.Г. Вирусные гепатиты - стратегия и тактика терапии, организация медицинской помощи: пособие для врачей / М.Г. Авдеева, В.Н. Городин, Е.Н. Редько и др. - Краснодар: Изд-во «Качество», 2009. - 262 с.

2. Авдеева М.Г., Колесникова Н.В., Котова Н.В., Городин В.Н., Зотов С.В., Полянский А.В. Способ раннего прогнозирования исходов противовирусной терапии хронического вирусного гепатита «С»//Патент России №2480526. 2013. опубл. 27.04.2013. Бюл. №12.

3. Бакунин, И.Г. Гематологические нежелательные явления при проведении противовирусной терапии у больных хроническим гепатитом С / И.Г. Бакунин, Ю.Г. Сандлер, А.С.Шарабанов // Гепатологический форум. - 2011. - №4. - С. 2-14.

4. Буеверов, А.О. Профилактика и коррекция гематологических побочных эффектов противовирусной терапии хронического гепатита С / А.О. Буеверов // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2009. - Т. 19, №3. - С. 76-81.

5. Васильева И.И., Донцов Д.В., Амбалов Ю.М., Пройдаков М.А. Способ прогноза интерферон-рибавирининдуцированной нейтропении у больных хроническим гепатитом С, получающих комбинированную противовирусную терапию /Патент России №2444998. опубл. 20.03.2012. Бюл. №8.

6. Васильева И.И., Донцов Д.В., Амбалов Ю.М., Пройдаков М.А. Способ прогноза развития нейтропении, вызванной комбинированной противовирусной терапией у больных хроническим гепатитом С // Патент России №2449278. опубл. 27.04.2012. Бюл. №12.

7. Донцов Д.В., Амбалов Ю.М., Мамедова Н.И. Нейтропения у больных хроническим гепатитом С, получающих комбинированную противовирусную терапию. Клинические проявления. Особенности патогенеза // Современные проблемы науки и образования. - 2014. - №5; URL: http://www.science-education.ru/117-13272 (дата обращения: 13.10.2014).

8. Ивашкин В.Т. Современные схемы лечения больных хроническим гепатитом С / В.Т. Ивашкин, М.В. Маевская, М.А. Морозова // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2012. - №1. - С. 36-44.

9. Bakulin I.G., Sharabanov A.S. The frequency and grade of leukopenia and neutropenia in patients with chronic hepatitis С during different combinations of antiviral therapy. Hepatol. Int., 2011, 5 (Suppl.), A. 253.

10. Manns M.P., McHutchison J.G., Gordon S.C. et al. Peginterferon alfa-2b plus ribavir in compared with interferon alfa-2b plus ribavirin for initial treatment of chronic hepatitis С: a randomised trial. Lancet, 2001, 358, 958-965.

11. Soza, A. Neutropenia during combination therapy of interferon alfa and ribavirin for chronic hepatitis С / A. Soza, J.E. Everhart, M.G. Ghany // Hepatology. - 2002. - №36. - P. 1273-1279.

Похожие патенты RU2570342C1

название год авторы номер документа
СПОСОБ ПРОГНОЗА ТРОМБОЦИТОПЕНИИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С, ПОЛУЧАЮЩИХ КОМБИНИРОВАННУЮ ПРОТИВОВИРУСНУЮ ТЕРАПИЮ 2014
  • Амбалов Юрий Михайлович
  • Донцов Денис Владимирович
  • Пройдаков Михаил Андреевич
  • Заруцкий Владислав Александрович
  • Левина Лидия Дмитриевна
  • Коваленко Анна Петровна
  • Мамедова Нонна Ильясовна
  • Перепечай Светлана Дмитриевна
  • Хоменко Ирина Юрьевна
RU2567818C1
СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ НЕЙТРОПЕНИИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С, ПОЛУЧАЮЩИХ КОМБИНИРОВАННУЮ ПРОТИВОВИРУСНУЮ ТЕРАПИЮ 2014
  • Амбалов Юрий Михайлович
  • Донцов Денис Владимирович
  • Пройдаков Михаил Андреевич
  • Малибашев Александр Владимирович
  • Левина Лидия Дмитриевна
  • Коваленко Анна Петровна
  • Мамедова Нонна Ильясовна
  • Перепечай Светлана Дмитриевна
  • Хоменко Ирина Юрьевна
RU2568894C1
СПОСОБ ПРОГНОЗА АНЕМИИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С, ПОЛУЧАЮЩИХ КОМБИНИРОВАННУЮ ПРОТИВОВИРУСНУЮ ТЕРАПИЮ 2014
  • Амбалов Юрий Михайлович
  • Донцов Денис Владимирович
  • Пройдаков Михаил Андреевич
  • Заруцкий Владислав Александрович
  • Левина Лидия Дмитриевна
  • Коваленко Анна Петровна
  • Мамедова Нонна Ильясовна
  • Перепечай Светлана Дмитриевна
  • Хоменко Ирина Юрьевна
RU2577446C1
СПОСОБ ПРОГНОЗА ИНТЕРФЕРОН-РИБАВИРИНИНДУЦИРОВАННОЙ НЕЙТРОПЕНИИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С, ПОЛУЧАЮЩИХ КОМБИНИРОВАННУЮ ПРОТИВОВИРУСНУЮ ТЕРАПИЮ 2011
  • Васильева Ирина Игоревна
  • Донцов Денис Владимирович
  • Амбалов Юрий Михайлович
  • Пройдаков Михаил Андреевич
RU2444998C1
СПОСОБ ПРОГНОЗА РАЗВИТИЯ НЕЙТРОПЕНИИ, ВЫЗВАННОЙ КОМБИНИРОВАННОЙ ПРОТИВОВИРУСНОЙ ТЕРАПИЕЙ, У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С 2011
  • Васильева Ирина Игоревна
  • Донцов Денис Владимирович
  • Амбалов Юрий Михайлович
  • Пройдаков Михаил Андреевич
RU2449278C1
СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ТРОМБОЦИТОПЕНИИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С, ПОЛУЧАЮЩИХ КОМБИНИРОВАННУЮ ПРОТИВОВИРУСНУЮ ТЕРАПИЮ 2014
  • Амбалов Юрий Михайлович
  • Донцов Денис Владимирович
  • Пройдаков Михаил Андреевич
  • Малибашев Александр Владимирович
  • Левина Лидия Дмитриевна
  • Коваленко Анна Петровна
  • Мамедова Нонна Ильясовна
  • Перепечай Светлана Дмитриевна
  • Хоменко Ирина Юрьевна
RU2568593C1
СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ АНЕМИИ, У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С, ПОЛУЧАЮЩИХ КОМБИНИРОВАННУЮ ПРОТИВОВИРУСНУЮ ТЕРАПИЮ 2014
  • Амбалов Юрий Михайлович
  • Донцов Денис Владимирович
  • Пройдаков Михаил Андреевич
  • Малибашев Александр Владимирович
  • Левина Лидия Дмитриевна
  • Коваленко Анна Петровна
  • Мамедова Нонна Ильясовна
  • Перепечай Светлана Дмитриевна
  • Хоменко Ирина Юрьевна
RU2578409C1
СПОСОБ НЕИНВАЗИВНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ УРОВНЯ ВИРУСНОЙ НАГРУЗКИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С 2011
  • Васильева Ирина Игоревна
  • Донцов Денис Владимирович
  • Амбалов Юрий Михайлович
  • Романова Елена Борисовна
  • Хоменко Олег Игоревич
  • Дубина Наталья Владимировна
  • Засорина Наталья Владимировна
  • Пройдаков Михаил Андреевич
  • Кузнецова Галина Витальевна
RU2468743C2
СПОСОБ ЛЕЧЕБНОГО ПИТАНИЯ БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С, ПОЛУЧАЮЩИХ КОМПЛЕКСНУЮ ПРОТИВОВИРУСНУЮ ТЕРАПИЮ 2008
  • Амбалов Юрий Михайлович
  • Васильева Ирина Игоревна
  • Ткачев Александр Васильевич
  • Донцов Денис Владимирович
  • Брусняк Виктор Сергеевич
  • Халявкина Инна Олеговна
  • Кузнецова Галина Витальевна
  • Дубина Наталья Владимировна
  • Алексеева Наталья Николаевна
  • Исламова Индира Имамовна
RU2373952C1
СПОСОБ ЭКСПРЕСС-ОЦЕНКИ СТЕПЕНИ АКТИВНОСТИ ХРОНИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА С У БОЛЬНЫХ ХГС 2011
  • Донцов Денис Владимирович
  • Амбалов Юрий Михайлович
  • Васильева Ирина Игоревна
  • Романова Елена Борисовна
  • Хоменко Ирина Юрьевна
  • Дубина Наталья Владимировна
  • Данильченко Мария Александровна
  • Курдин Алексей Александрович
  • Засорина Наталья Викторовна
RU2474817C1

Реферат патента 2015 года СПОСОБ ПРОГНОЗА НЕЙТРОПЕНИИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С, ПОЛУЧАЮЩИХ КОМБИНИРОВАННУЮ ПРОТИВОВИРУСНУЮ ТЕРАПИЮ

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, и может быть использовано для прогноза нейтропении у больных хроническим гепатитом С (ХГС), получающих комбинированную противовирусную терапию (КПТ). У больных ХГС перед началом КПТ определяют в сыворотке крови уровень вирусной нагрузки (ВН, (МЕ/мл), генотип HCV (genHCV), абсолютное число нейтрофилов (АЧНисходн ×109/л). Проводят непрямую фиброэластографию печени, по результатам которой определяют уровень фиброза (F, кПа). Рассчитывают прогнозируемое значение минимального абсолютного числа нейтрофилов (АЧНmin ×109/л) в крови с помощью метода множественной линейной регрессии по формуле. Устанавливают, что прогнозируемые значения АЧНmin≤1,3×109/л свидетельствуют о наличии риска развития нейтропении. Значения АЧНmin от 1,0×109/л до 1,3×109/л позволяют прогнозировать развитие легкой, от 0,75×109/л до 0,99×109/л - умеренной, от 0,5×109/л до 0,74×109/л - тяжелой и <0,5×109/л - крайне тяжелой степени нейтропении. Способ позволяет точно, быстро и просто провести прогноз за счет оценки наиболее значимых показателей. 1 табл., 2 пр.

Формула изобретения RU 2 570 342 C1

Способ прогноза нейтропении у больных хроническим гепатитом С (ХГС), получающих комбинированную противовирусную терапию (КПТ), отличающийся тем, что у больных ХГС непосредственно перед началом КПТ определяют в сыворотке крови уровень вирусной нагрузки (ВН, (МЕ/мл), генотип HCV (genHCV), абсолютное число нейтрофилов (АЧНисходн ×109/л), проводят непрямую фиброэластографию печени, по результатам которой определяют уровень фиброза (F, кПа) и рассчитывают прогнозируемое значение минимального абсолютного числа нейтрофилов (АЧНmin ×109/л) в крови с помощью метода множественной линейной регрессии по формуле:

где genHCV=1,0 для пациентов с 1-м генотипом HCV и genHCV=0,0 для пациентов со 2-м и 3-м генотипами HCV; и устанавливают, что прогнозируемые значения АЧНmin≤1,3×109/л свидетельствуют о наличии риска развития нейтропении у больных ХГС, получающих КПТ; причем расчетные значения АЧНmin от 1,0×109/л до 1,3×109/л позволяют прогнозировать в данном случае развитие легкой, от 0,75×109/л до 0,99×109/л - умеренной, от 0,5×109/л до 0,74×109/л - тяжелой и <0,5×109/л - крайне тяжелой степени нейтропении.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2015 года RU2570342C1

СПОСОБ ПРОГНОЗА РАЗВИТИЯ НЕЙТРОПЕНИИ, ВЫЗВАННОЙ КОМБИНИРОВАННОЙ ПРОТИВОВИРУСНОЙ ТЕРАПИЕЙ, У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С 2011
  • Васильева Ирина Игоревна
  • Донцов Денис Владимирович
  • Амбалов Юрий Михайлович
  • Пройдаков Михаил Андреевич
RU2449278C1
СПОСОБ ПРОГНОЗА ИНТЕРФЕРОН-РИБАВИРИНИНДУЦИРОВАННОЙ НЕЙТРОПЕНИИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С, ПОЛУЧАЮЩИХ КОМБИНИРОВАННУЮ ПРОТИВОВИРУСНУЮ ТЕРАПИЮ 2011
  • Васильева Ирина Игоревна
  • Донцов Денис Владимирович
  • Амбалов Юрий Михайлович
  • Пройдаков Михаил Андреевич
RU2444998C1
0
SU82836A1
БАКУЛИН И.Г
Клиническое значение лейко- и нейтропении у пациентов хроническим гепатитом с при проведении различных режимов противовирусной терапии
Кипятильник для воды 1921
  • Богач Б.И.
SU5A1
Прибор с двумя призмами 1917
  • Кауфман А.К.
SU27A1
ROTMAN Y
Low weight predicts neutropenia and

RU 2 570 342 C1

Авторы

Амбалов Юрий Михайлович

Донцов Денис Владимирович

Пройдаков Михаил Андреевич

Заруцкий Владислав Александрович

Левина Лидия Дмитриевна

Коваленко Анна Петровна

Мамедова Нонна Ильясовна

Перепечай Светлана Дмитриевна

Хоменко Ирина Юрьевна

Даты

2015-12-10Публикация

2014-12-24Подача