СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ СТЕПЕНИ ТРЕМАТОЦИДНОЙ АКТИВНОСТИ В ОТНОШЕНИИ ЭКСЦИСТИРОВАННЫХ ЛИЧИНОК FASCIOLA HEPATICA У РАСТЕНИЙ Российский патент 2015 года по МПК G01N33/00 

Изобретение относится к ветеринарной паразитологии, касается способа прогнозирования степени трематоцидной активности против экцистированных личинок Fasciola hepatica у растений и может быть использовано для скрининга среди луговых растений на предмет трематоцидной активности для отбора с целью интродукции (как профилактических антгельминтиков) в очаги фасциолезной инвазии на выпасных площадках пастбищ.

Химический состав растений отличается большим разнообразием и включает многие десятки биологически (фармакологически) активных веществ.

Эти биологически активные вещества вырабатываются в процессе жизнедеятельности растения и накапливаются в его органах. Они представляют собой такие химические соединения, которые оказывают на животный организм определенное физиологическое и фармакологическое действие, способное останавливать у больного животного развитие того или иного патологического процесса, повышать его общую резистентность, возвращать к нормальной физиологической жизнедеятельности.

Спектр биологической активности лекарственных трав определяется составом биологически активных веществ, которые присутствуют в лекарственном растении (эфирные масла, флавоноиды, полифенолы, полисахариды и пр.). Количество веществ в лекарственных растениях может колебаться от десятков до сотен.

Всем этим обусловлено доминирование того или иного фармакологического эффекта (эффектов) конкретного растения и его осмысленный выбор при назначении с лечебными или профилактическими целями.

Задачей изобретения является способ прогнозирования степени трематоцидной активности в отношении к экцистированных личинок Fasciola hepatica у растений.

Технический результат - скрининг среди луговых растений на предмет трематоцидной активности для отбора с целью интродукции (как профилактических антгельминтиков) в очаги фасциолезной инвазии на выпасных площадках пастбищ.

Задача решается тем, что проводят фитохимический анализ растений на выявление биологически активных веществ и при выявлении определенных классов действующих веществ прогнозируют высокую, среднюю или низкую/нулевую степень трематоцидной активности в отношении экцистированных личинок Fasciola hepatica.

Экспериментальными исследованиями выявлены основные и вспомогательные действующие вещества, обусловливающие лярвофасциолоцидную активность растений (таблица 1).

Нами установлено, что при наличии в растительном сырье основных действующих веществ 2 классов (класса фенолкарбоновых кислот, класса высших жирных кислот) и аскорбиновой кислоты (витамина С) и вспомогательных действующих веществ 2-3 классов (класса ароматических карбоновых кислот, класса липидных кислот, класса тритерпеновых кислот, класса сесквитерпеновых кислот, класса органических кислот, класса дубильных веществ), аминокислоты канаванин и никотиновой кислоты прогнозируют высокую (≥40%), при наличии основных действующих веществ 1-2 классов и аскорбиновой кислоты (витамина С) и вспомогательных действующих веществ 1-2 классов (класса ароматических карбоновых кислот, класса липидных кислот, класса тритерпеновых кислот, класса органических кислот и класса дубильных веществ) - среднюю (20-39%), а при наличии/отсутствии аскорбиновой кислоты (витамина С) и вспомогательных действующих веществ 0-2 класса (класса ароматических карбоновых кислот, класса тритерпеновых кислот и класса органических кислот) - низкую/нулевую (19%-0) степень трематоцидной активности в отношении экцистированных личинок Fasciola hepatica.

Способ поясняется примерами.

Пример 1. Провели фитохимический анализ репешка аптечного {Agrimonia eupatoria L.). В химическом составе репешка аптечного выявлены фенолкарбоновые кислоты, высшие жирные кислоты, аскорбиновая кислота (витамин С) /основные действующие вещества 2 классов + аскорбиновая кислота (витамин С)/, ароматические карбоновые кислоты, тритерпеновые кислоты, органические кислоты, дубильные вещества и никотиновая кислота /вспомогательные действующие вещества 4 классов + никотиновая кислота/. Прогноз - высокая степень трематоцидной активности в отношении экцистированных личинок Fasciola hepatica. Прогноз подтверждали на классической лабораторной модели - кроликах породы серый великан 3-4-месячного возраста. Заражение животных проводили путем двукратного с интервалом в 14 дней скармливания с кормом инвазионного материала. Разовая доза составляла 50 экз. двухмесячных адолескариев Fasciola hepatica. Во время опытов исключалось неконтролируемое заражение животных фасциолой обыкновенной через корма и воду. Контрольным кроликам в период эксперимента, а опытным в период ожидания скармливали сено злаковых с суходольного сенокоса, где не выпасался скот и не было зарегистрировано при обследовании очагов фасциолезной инвазии. Траву скармливали за день до заражения, в день заражения и на следующий день после заражения из расчета разовой суточной дозы 100 г. Продолжительность опыта - 72 дня (после первого заражения) - до достижения фасциолами половозрелого возраста, а период роста трематод от второго заражения составлял 58 дней. Изучали печень на наличие подросших гельминтов из подвергшихся антгельминтному воздействию экцистированных личинок Fasciola hepatica гельминтолярво-скопическими методами по К.И. Скрябину (1948). Интенсэффективность составила 58,83%.

Пример 2. Провели фитохимический анализ лядвенца рогатого {Lotus corniculatus L.). В химическом составе лядвенца рогатого выявлены фенол-карбоновые кислоты, высшие жирные кислоты, аскорбиновая кислота (витамин С) /основные действующие вещества 2 классов + аскорбиновая кислота (витамин С)/, тритерпеновые кислоты, дубильные вещества, никотиновая кислота, аминокислота канаванин /вспомогательные действующие вещества 2 классов + никотиновая кислота + аминокислота канаванин/. Прогноз - высокая степень трематоцидной активности в отношении экцистированных личинок Fasciola hepatica. Прогноз подтверждали, как в примере 1. Интенсэффективность составила 55,89%.

Пример 3. Провели фитохимический анализ козлятника восточного (Galega orietalis L.). В химическом составе козлятника восточного выявлены фенолкарбоновые кислоты, высшие жирные кислоты, аскорбиновая кислота (витамин С) /основные действующие вещества 2 классов + аскорбиновая кислота (витамин С)/, никотиновая кислота, тритерпеновые и органические кислоты, дубильные вещества /вспомогательные действующие вещества 3 классов + никотиновая кислота/. Прогноз - высокая степень трематоцидной активности в отношении экцистированных личинок Fasciola hepatica. Прогноз подтверждали, как в примере 1. Интенсэффективность составила 41,18%.

Пример 4. Провели фитохимический анализ лисохвоста лугового (Alo-pecurus pratensis L.). В химическом составе лисохвоста лугового не выявлены основные и вспомогательные действующие вещества. Прогноз - низкая/нулевая степень трематоцидной активности в отношении экцистированных личинок Fasciola hepatica. Прогноз подтверждали, как в примере 1. Интенсэффективность - 0,0%.

Пример 5. Провели фитохимический анализ райграсса высокого (Arrenatherum elatius М.). В химическом составе райграсса высокого выявлена аскорбиновая кислота (витамин С) /основное действующие вещество/ и ароматические карбоновые кислоты /вспомогательные действующие вещества 1 класса/. Прогноз - низкая/нулевая степень трематоцидной активности в отношении экцистированных личинок Fasciola hepatica. Прогноз подтверждали, как в примере 1. Интенсэффективность - 0,0%.

Пример 6. Провели фитохимический анализ мятлика лугового (Роа pratensis L.). В химическом составе мятлика лугового выявлена аскорбиновая кислота (витамин С) /основное действующее вещество/ тритерпеновые кислоты и аминокислота канаванин /вспомогательные действующие вещества 1 класса + аминокислота канаванин/. Прогноз - низкая/нулевая степень трематоцидной активности в отношении экцистированных личинок Fasciola hepatica. Прогноз подтверждали, как в примере 1. Интенсэффективность - 2,95%.

Пример 7. Провели фитохимический анализ эспарцета скального (Onobrychis petraea D.C.). В химическом составе эспарцета скального выявлены фенолкарбоновые кислоты, высшие жирные кислоты, аскорбиновая кислота (витамин С) /основные действующие вещества 2 классов + аскорбиновая кислота (витамин С)/ и ароматические карбоновые и органические кислоты /вспомогательные действующие вещества 2 классов/. Прогноз - средняя степень трематоцидной активности в отношении экцистированных личинок Fasciola hepatica. Прогноз подтверждали, как в примере 1. Интенсэффективность - 28,57%.

Пример 8. Провели фитохимический анализ клевера лугового {Trifo-lium pratense L.). В химическом составе клевера лугового выявлены фенолкарбоновые кислоты, высшие жирные кислоты, аскорбиновая кислота (витамин С) /основные действующие вещества 2 классов + аскорбиновая кислота (витамин С)/, а также липидные кислоты, дубильные вещества /вспомогательные действующие вещества 2 классов/. Прогноз - средняя степень трематоцидной активности в отношении экцистированных личинок Fasciola hepatica. Прогноз подтверждали, как в примере 1. Интенс- эффективность - 28,58%.

В таблицах 2 и 3 приведены результаты наших исследований по изучению трематоцидной активности лекарственных и кормовых растений в отношении экцистированных личинок Fasciola hepatica для подтверждения осуществимости заявленного способа прогнозирования.

Проведенные исследования подтвердили, что комплекс биологически активных веществ, включающий основные действующие вещества 2 классов (класса фенолкарбоновых кислот, класса высших жирных кислот) и аскорбиновую кислоту (витамина С) и вспомогательные действующие вещества 2-3 классов (класса ароматических карбоновых кислот, класса липидных кислот, класса тритерпеновых кислот, класса сесквитерпеновых кислот, класса органических кислот, класса дубильных веществ), аминокислоту канаванин и никотиновую кислоту, обеспечивает высокую (≥40%), основные действующие вещества 1-2 классов и аскорбиновой кислоты и вспомогательные действующие вещества 1-2 классов (класса ароматических карбоновых кислот, класса липидных кислот, класса тритерпеновых кислот, класса органических кислот и класса дубильных веществ) - среднюю (20-39%), а наличие/отсутствие аскорбиновой кислоты и вспомогательных действующих веществ 0-2 класса (класса ароматических карбоновых кислот, класса тритерпеновых кислот и класса органических кислот) - низкую/нулевую (19%-0) степень трематоцидной активности в отношении экцистированных личинок Fasciola hepatica. Аскорбиновая кислота, входящая в группу основных действующих веществ, оказывает детоксикационное действие на организм животных, что снижает отрицательное воздействие на организм дубильных веществ, органических и фенолкарбоновых кислот, что обеспечивает безвредность растительных антгельминтных средств для животных.

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для прогнозирования степени трематоцидной активности растений. Способ включает фитохимический анализ растений. При выявлении основных действующих веществ (ОДВ) 2 классов (класса фенолкарбоновых кислот, класса высших жирных кислот) и аскорбиновой кислоты и вспомогательных действующих веществ (ВДВ) 2-3 классов (класса ароматических карбоновых кислот, класса липидных кислот, класса тритерпеновых кислот, класса сесквитерпеновых кислот, класса органических кислот и класса дубильных веществ), никотиновой кислоты и канаванина прогнозируют высокую (≥40%), при выявлении ОДВ 1-2 классов и аскорбиновой кислоты и ВДВ 1-2 классов (класса ароматических карбоновых кислот, класса липидных кислот, класса тритерпеновых кислот, класса органических кислот и класса дубильных веществ) - среднюю (20-39%), а при наличии/отсутствии аскорбиновой кислоты и ВДВ 0-2 класса (класса ароматических карбоновых кислот, класса тритерпеновых кислот и класса органических кислот) - низкую/нулевую (19%-0) степень трематоцидной активности. Использование изобретения позволяет провести скрининг среди луговых растений на предмет трематоцидной активности для отбора с целью интродукции в очаги фасциолезной инвазии. 3 табл., 8 пр.

Способ прогнозирования степени трематоцидной активности в отношении экцистированных личинок Fasciola hepatica у растений, включающий фитохимический анализ растений на выявление действующих веществ, отличающийся тем, что при выявлении основных действующих веществ 2 классов (класса фенолкарбоновых кислот, класса высших жирных кислот) и аскорбиновой кислоты (витамина С) и вспомогательных действующих веществ 2-3 классов (класса ароматических карбоновых кислот, класса липидных кислот, класса тритерпеновых кислот, класса сесквитерпеновых кислот, класса органических кислот и класса дубильных веществ), никотиновой кислоты и аминокислоты канаванин прогнозируют высокую (≥40%), при выявлении основных действующих веществ 1-2 классов и аскорбиновой кислоты (витамина С) и вспомогательных действующих веществ 1-2 классов (класса ароматических карбоновых кислот, класса липидных кислот, класса тритерпеновых кислот, класса органических кислот и класса дубильных веществ) - среднюю (20-39%), а при наличии/отсутствии аскорбиновой кислоты (витамина С) и вспомогательных действующих веществ 0-2 класса (класса ароматических карбоновых кислот, класса тритерпеновых кислот и класса органических кислот) - низкую/нулевую (19%-0) степень трематоцидной активности в отношении экцистированных личинок Fasciola hepatica.