БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНАЯ ДОБАВКА С ТРЕМАТОЦИДНОЙ АКТИВНОСТЬЮ ДЛЯ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА Российский патент 2013 года по МПК A23K1/16 

Изобретение относится к ветеринарной гельминтологии, касается биологически активной добавки на основе лекарственного растительного сырья и может быть использовано в качестве профилактического средства от фасциолеза крупного рогатого скота.

В настоящее время основным звеном в борьбе с паразитарными болезнями животных является использование химиотерапевтических препаратов [1]. Применение синтетических лекарств часто сопровождается значительными экономическими затратами из-за стоимости препаратов (фенасал, пирантел, празиквантел, клосантел и др.), многие из них длительное время сохраняются в организме животных, нередко попадая с продуктами питания (молоком, мясом, куриными яйцами) в пищу людям, некоторые препараты обладают побочными действиями из-за высокой токсичности для животных (сульфат меди, мышьякосодержащие препараты, битионол, клосантел и др.) и их потомства (производные бензимидазола). Недостаточно изучено влияние метаболитов этих препаратов на живые организмы.

Наиболее щадящим методом профилактики и лечения различных заболеваний, включая паразитарные, является фитотерапия, заключающаяся во введении в организм биологически активных веществ в их естественном виде и в наиболее усвояемых формах. Кроме того, фитопрепараты не токсичны или мало токсичны, что дает возможность применять их более длительное время без риска возникновения побочных явлений.

Исследования по изучению действия некоторых растений in vitro на инвазионных личинок гельминтов и половозрелых паразитов животных показали, что в свежем соке хрена огородного, веха ядовитого, щавеля конского, луковиц дикого чеснока, цветков черемухи обыкновенной наступало обездвиживание личинок трихостронгилид через 3-11 часов, их гибель - через 4-16 часов; в соке из травы и цветков подснежника - через 10 и 11-19 часов; в соке из полыни горькой, хвои и молодой коры ели - через 16-20 и 14-20 часов; в соке из свежих листьев березы - через 13 и 15-30 часов; в соке из коры молодой осины, зрелых плодов рябины обыкновенной - через 20-35 и 34-48 часов соответственно. В отваре из травы и цветков (взятых поровну) борщевика Сосновского, травы с плодами тмина обыкновенного, травы чабреца ползучего, мяты перечной, хвоща полевого, кровохлебки лекарственной, цветков полыни горькой, корня девясила высокого, веха ядовитого, плодов каштана конского, шишкоягод можжевельника обыкновенного, семян укропа огородного личинки трихостронгилид обездвиживались через 14-24 часа, а погибали через 18-38 часов, в отваре из цветков цмина песчаного (бессмертника), желудей дуба зубчатого - через 27-36 и 30-52 часа соответственно. Установлено, что при скармливании свиньям клевера красного по 2 кг в день на голову в течение месяца с одновременным выпасом животных на клеверо-тимофеечной смеси зараженность их трихоцефалами и стронгилоидами снижается на 66,6%, аскаридами - на 28,6%. Подкормка свиней белым клевером снижает зараженность трихоцефалами на 38,5%, аскаридами - на 23,9%. Кормовой люпин после месячного скармливания его свиньям по 2 кг в день освобождал 28,5% животных от аскарид и 19,3% животных - от трихоцефал. Скармливание свиньям по 1 кг хвои ели в день приводило к освобождению 35,7% свиней от аскарид и 33,3% от стронгилоидов. После месячного скармливания редьки из расчета 1 кг на голову экстенсивность заражения свиней трихоцефалами снизилась на 30,7%, аскаридами - на 18,1%. При введении в корм свиньям на протяжении месяца силоса из свекловичной ботвы из расчета 1 кг в день на голову 25% животных освобождались от кокцидий при снижении интенсивности выделения ооцист на 61,5%. Препараты папоротника мужского действуют на ленточных червей. Семена тыквы обыкновенной и голосемянной используют для дегельминтизации и профилактики паразитоносительства различных цестод птиц и собак. Скармливание плодов тыквы свиньям и курам снижает их инвазированность нематодами. Чеснок эффективно применяют при гетеракидозе, капиллярозе, аскаридозе и сингамозе кур. Скармливание поросятам свежеприготовленной муки из хвои сосны из расчета 3-10 г/кг живой массы 3 раза в день в течение 1-3 месяцев эффективно при аскариозе, а кроликам из расчета 100-200 г/кг корма - при эймериозе. Алколоид эритрицин золототысячника зонтичного эффективен против многих нематод, а алантолактон эфирного масла девясила высокого - против аскарид. Душица эффективна при аскаридозах животных в виде настоя. Зверобой продырявленный эффективен при нематодозах свиней (эзофагостомозе, аскариозе, трихоцефалезе) в виде настоя (1:100), который применяют после 12-часовой диеты в дозе 0,010 г/кг живой массы в течение 3 дней. Тмин обыкновенный эффективен против некоторых нематод животных (нематодиры, остертагии, трихостронгилиды, буностомы и др.). Подснежник испытан при гемонхозе, буностомозе, диктиокаулезе, трихоцефалезе. Инжир обладает выраженными аскаридоцидными свойствами. Настой ромашки аптечной применяют при парамфистоматозах животных, ягоды голубики - при нематодозах и цестодозах серебристо-черных лисиц, скипидар очищенный - при стронгилоидозах лошадей и оксиурозе, черемшу - при аскаридиозе кур, настой из листьев и коры осины - при параскаридозе лошадей, ветки осины и сосны - при эймериозе кроликов, веники из ивы - при кокцидиозе, гемонхозе, буностомозе, диктиокаулезе и трихоцефалезе жвачных.

Выраженными антгельминтными свойствами обладает пижма обыкновенная, настой которой эффективен при стронгилятозах овец (доза - 3 мл/кг живой массы 2 раза в день в течение 3 дней подряд), при телязиозе крупного рогатого скота (1:10-1:20 в дозе 50 мл в оба глаза под конъюктивальный мешок двукратно с интервалом в 4 дня), при эймериозе кроликов (доза - 10 мл), при аскаридозах и стронгилятозах желудочно-кишечного тракта лошадей и собак (доза 0,5 мл/кг живой массы в течение 2 дней), при токсокарозе и токсаскаридозе собак, кошек и пушных зверей (1:5 в дозе 2 мл/кг живой массы 1-2 раза в день в течение 3 дней подряд), при токсокарозе песцов (1:10 с фаршем из расчета 3 мл/кг живой массы 3 дня подряд).

Препараты на основе полыни горькой и зверобоя продырявленного эффективны при паразитозах желудочно-кишечного тракта животных. Настой травы полыни горькой назначают при аскаридозе, эзофагостомозе и трихоцефалезе свиней, стронгилоидозе, стронгилятозах желудочно-кишечного тракта, мониезиозе крупного рогатого скота и овец (1:10 в дозе 3,5-4,0 мл/кг живой массы 2 раза в день в течение 3 дней подряд), при трихонематозах лошадей (1:20 в дозе 1 мл/кг живой массы 1 раз в день в течение 3 дней подряд), при эймериозе кроликов (доза 2 мл на животное 2 раза в день), при бовиколезе крупного рогатого скота (1:10 из расчета 1 л на животное наносят мелкодисперсным способом 2 раза с интервалом в 12 дней). Трава зверобоя продырявленного в форме настоя в дозе 3-5 мл/кг живой массы, настойки в дозе 0,5 мл/кг живой массы, жидкого экстракта в дозе 3-5 мл/кг живой массы, сухого экстракта в дозе 20-25 мл/кг живой массы эффективна при стронгилятозах желудочно-кишечного тракта овец [2].

В качестве ближайшего аналога нами рассматривается экстракт корневища папоротника мужского. В корневище содержатся производные флороглюцина (фоликсовая и флаваспидовая кислоты), аспидинол, альбампидин. Кроме них, в растении найдены эфирное масло, флавоноиды, жирное масло, дубильные вещества, горечи, крахмал. Основным действующим началом корневища является фоликсовая кислота, обладающая свойством мышечного яда. Она вызывает паралич мускулатуры ленточных гельминтов (кишечных цестод, некоторых трематод, анкилостом) и их отторжение от стенок кишечника. Полной гибели паразитов при этом не наступает, они могут вновь присосаться к слизистой оболочке кишечника. Поэтому вместе с препаратом назначают слабительное. Известны эфирный экстракт из корневища папоротника мужского и два препарата, полученные от него - филицилен и филиксан. Однако экстракт папоротника мужского очень токсичен (побочные явления: рвота, понос, ослабление сердечной деятельности и др.). Полужидкая тягучая консистенция препарата затрудняет точность его дозирования при лечебном назначении, что может привести к отравлению и гибели животных. При отравлении животных необходимо промыть желудок (преджелудки у жвачных), внутрь солевые слабительные, слизистые и обволакивающие вещества, симптоматическое лечение. Кроме того, препараты папоротника мужского эффективны против половозрелых форм фасциол, паразиты в недоразвившемся до имагинальной стадии состоянии остаются живыми и продолжают отрицательно воздействовать на организм [3].

Основная задача, на решение которой направлено предлагаемое изобретение, состоит в расширении арсенала спектра содержащих природные компоненты, биологически активных добавок, обладающих антгельминтным действием на юные личинки фасциол до или в начальный период инвазии и до возникновения патологического процесса у дефинитивного хозяина.

Цель изобретения - создание эффективной и экологически чистой биологически активной добавки с использованием биологически активных растительных компонентов для профилактики фасциолеза крупного рогатого скота, эффективной против экцистированных личинок фасциол, обладающей хорошей поедаемостью и переносимостью.

Технический результат достигается с помощью биологически активной добавки, включающей крупный порошок из высушенных надземных частей растений козлятника восточного (Galega orientalis L.) и репешка обыкновенного или аптечного (Agrimonia eupatoria L.), взятых в соотношении 5:1.

Козлятник восточный (Galega orientalis L.) семейства бобовые - многолетнее корнеотпрысковое травянистое растение. Распространен в европейской части России и на Кавказе. Растет по берегам рек и каналов, ручьев, возле дорог, по балкам, среди кустарников, в горных степях, буковых лесах, на опушках лесов и влажных субальпийских лугах. Козлятник восточный отличается холодостойкостью и морозоустойчивостью, хорошо переносит суровые зимы с температурой до -25°С, а при достаточном снежном покрове - до -40°С, весенние заморозки - до -4-5°С, а накопление массы идет вплоть до наступления заморозков. Высокая облиственностъ козлятника и его биологическая особенность сохранять листья при провяливании в отличие от других бобовых культур, которые при сушке теряют значительное количество листовой части, содержащей легкодоступные питательные вещества, позволяют использовать его на сено, кормовое для всех видов сельскохозяйственных животных. Зеленую массу растения используют для приготовления травяной муки, силоса, сенажа. Корма, приготовленные из козлятника, отличаются повышенным содержанием энергии и питательных веществ. Медонос. Надземная часть козлятника содержит углеводы, алкалоиды (галегин), дубильные вещества, флавоноиды, витамины, сапонины, фенолкарбоновые кислоты и их производные, азотсодержащие вещества, жирное масло и высшие жирные кислоты (пальмитиновую и линоленовую). Активно действующим веществом является алкалоид галегин (содержание в траве до 0,5%, в козлятнике сорта «Гале» - 0,12-0,17%, в сене - следы). Основное действие: гипогликемическое. Под влиянием галегина уровень сахара в крови у кроликов понижается на 50-60% под влиянием дозы в 75 мг/кг массы тела, наблюдается значительное увеличение бета-клеток в лангергансовых островках, коррелирующих с понижением уровня сахара в крови. У добровольцев с нормогликемией установлено, что галегин вызывает в дозе 2-4 мг/кг понижение сахара в крови, наступающее спустя 3-4 часа и длящееся около 9 часов, поэтому в медицине его назначают лишь при легких формах диабета. Экспериментально установлено, что алкалоид галегин при местном применении вызывает сужение зрачка, а при внутривенном повышение артериального давления, сужение сосудов, легкое угнетение моторной функции кишечника и усиление секреции молока. Настой травы обладает потогонным, антибактериальным и слабым мочегонным действием. В народной медицине используют как антгельминтное средство, в ветеринарии - лактогенное.

Репешок обыкновенный или аптечный (Agrimonia eupatoria L.) семейства розоцветные - многолетнее травянистое растение. Распространен в европейской части России и на Кавказе. Растет в светлых лесах, на опушках, лугах, пастбищах, вдоль полей, по краям дорог, от равнин до среднегорного пояса. Репешок обыкновенный (аптечный) не относится к группе ядовитых растений /И.А.Гусынин, 1951; A.M.Вильнер, 1974; Б.Н.Орлов, 1990/. Кормовые характеристики A. eupatoria, по большинству сведений, положительные /И.В.Ларин, 1937/, в начале цветения хорошо поедается крупным рогатым скотом, овцами и козами. В медицине используют надземную часть растения. Трава содержит углеводы: глюкозу, фруктозу, сахарозу, полисахариды (19,5%), в гидролизате - глюкозу, фруктозу, галактозу, арабинозу, рамнозу, ксилозу, рибозу; органические кислоты: лимонную, яблочную, щавелевую, винную, хинную (2,77%); стероиды; азотосодержащие соединения: холин, никотиновую кислоту; витамин С; фенолкарбоновые кислоты и их производные: кофейную, хлорогеновую, эллаговую; кумарины; дубильные вещества (1,5-8,91%); катехины; флавоноиды (1,2-1,6%): кверцетин, гиперозид, кверцитрин, рутин, лютеолин, 7-глюкозид лютеолина, 7-глюкозид апигенина; высшие алифатические углеводы; высшие алифатические спирты; воск: пальмитат и стеарат церилового спирта; жирные кислоты: масляную, пальмитиновую, стеариновую, линолевую, линоленовую. Обладает вяжущим, желчегонным, антибактериальным и противовоспалительным действием. В народной медицине настой травы репешка обыкновенного (аптечного) применяют при болезнях печени и желчного пузыря как желудочное средство и противоядие при отравлениях, а также при диарее, глистах, геморрое, бородавках, кровохаркании, почечных и маточных кровотечениях, воспалении мочевого пузыря, ночном недержании мочи и отеках. Как наружное средство растение используют при воспалительных процессах. В ветеринарной практике репешок обыкновенный (аптечный) применяют: при мокрице у лошадей; с мареной для профилактики мочекаменной болезни у кошек и собак. Медонос.

Биологически активную добавку готовят смешиванием крупных порошков (размер частиц - 1-3 мм), полученных измельчением сена из козлятника восточного и репешка обыкновенного (аптечного), высушенных в тени под навесом до влажности 12-14%, в соотношении 5:1 с дополнительной сушкой смеси до влажности 8-10%. Биологически активную добавку хранят в упакованном виде в сухом помещении. Срок годности - 2 года.

Определение острой токсичности (ЛД₅₀ и ЛД₁₀₀) биологически активной добавки проводили методом формирования подгрупп, введением им добавки при контролируемых условиях.

ЛД₅₀ добавки исследовали при внутрижелудочном введении половозрелым беспородным белым мышам (20 самцов с массой тела 26,51±0,48 г и 20 самок с массой тела 25,41±0,57 г). Значение ЛД₅₀ составило 5344±143 мг/кг.

ЛД₁₀₀ добавки исследовали при внутрибрюшинном введении половозрелым беспородным белым крысам (20 самцов с массой тела 200,00±3,54 г, 20 самок с массой тела 180,00±3,87 г). Значение ЛД₁₀₀ составило 10250±248 мг/кг.

Полученные данные по оценке токсических свойств заявленной биологически активной добавки указывают на ее слабую токсичность. Установленные дозы ЛД₅₀ и ЛД₁₀₀, составляющие 5344±143 мг/кг и 10250±248 мг/кг соответственно, позволяют по ГОСТ 12.1.007-76 отнести ее к 4 классу безопасности (вещества малоопасные).

В день скармливания животным биологически активной добавки ее смешивают с отрубями и теплой (35-40°С) питьевой водой в пропорции 1:1:1 до образования влажной мешанки.

Сущность изобретения поясняется примерами.

Пример 1. Антгельминтную активность отдельных компонентов и биологически активной добавки определяли на кроликах породы серый великан 3-4-месячного возраста, распределенных на 3 опытные (по 5 голов) и 1 контрольную группы. Заражение животных проводили путем скармливания с кормом инвазионного материала. Разовая доза личинок F.hepatica составляла для кроликов 50 экз. двухмесячных адолескариев F. hepatica. Продолжительность опыта - 72 дня - до достижения выжившими фасциолами половозрелого возраста, что облегчало поиск, подсчет и определение интенсэффективности испытуемых средств. Препараты задавали животным в смеси с отрубями и питьевой водой в пропорции 1:1:1 в виде влажной мешанки в течение 3 дней (за день до заражения, в день заражения и на следующие сутки после попадания адолескарий в желудочно-кишечный тракт кроликов). Во время опытов исключалось неконтролируемое заражение животных фасциолой обыкновенной через корма и воду. Контрольной группе кроликов в период эксперимента, а опытным в период ожидания скармливали сено злаковых с суходольного сенокоса, где не выпасался скот и не было зарегистрировано при обследовании очагов фасциолезной инвазии. Результаты представлены в таблице 1.

Как видно из таблицы 1, заявляемая биологически активная добавка, включающая естественные растительные компоненты, обладает выраженной фасциолоцидной активностью, и совместное воздействие ее ингредиентов значительно (в 2,0-2,3 раза) превосходило воздействие отдельно взятых входящих в ее состав компонентов.

Пример 2. Для изучения уровня антгельминтной активности заявляемой биологически активной добавки при ее неоднократном применении формировали две группы кроликов (по 5 голов) породы серый великан 4-месячного возраста. Животных обеих групп заражали двукратным с интервалом в 14 дней пероральным введением двухмесячных адолескариев F.hepatica из расчета - разовой дозой 50 экз. на животное. За день до заражения, в день заражения и на следующие сутки опытным животным скармливали заявляемую биологически активную добавку. Суточная доза - 60 г. Кролики контрольной группы в период всего эксперимента и опытной группы в период ожидания получали сено злаковых, свободное от гельминтов. Продолжительность опыта - 72 дня (после первого заражения) - до достижения фасциолами половозрелого возраста, а период роста трематод от второго заражения составлял 58 дней, что давало возможность достоверно их дифференцировать по размерам и определить интенсэффективность воздействия испытуемых препаратов при каждой даче в зависимости от кратности применения. Печень животных исследовали на наличие подросших гельминтов из подвергшихся антгельминтному воздействию экцистированных личинок F.hepatica. Результаты представлены в таблице 2.

Как видно из таблицы 2, заявляемая биологически активная добавка эффективна против экцистированных личинок F.hepatica: количество гельминтов на одну печень в опыте в 6,8 раза меньше, чем в контроле. Кроме того, при неоднократном применении заявляемой добавки в период попадания в желудочно-кишечный тракт кроликов адолескарий F.hepatica ее эффективность сохранялась, о чем свидетельствовало соотношение количества подросших трематод после первого и второго заражения.

Пример 3. Антгельминтную активность заявляемой биологически активной добавки при экспериментальном заражении сельскохозяйственных животных адолескариями F.hepatica изучали на бычках крупного рогатого скота черно-пестрой породы 5-месячного возраста, дважды обследованных на наличие гельминтов с отрицательными результатами, распределенных на 2 группы по 5 голов в каждой: опытную и контрольную. Животных обеих групп заражали двукратным с интервалом в 14 дней пероральным введением двухмесячных адолескариев F.hepatica из расчета - разовой дозой 125 экз. на животное. За день до заражения, в день заражения и на следующие сутки опытным животным скармливали биологически активную добавку, которую перед применением смешивали с отрубями (ржаными или пшеничными), заливали теплой литьевой водой (35-40°С) до образования влажной мешанки в соотношении 1:1:1. Разовая суточная доза БАД - 180 г.(т.е. 1,5 г БАД на 1 кг живой массы тела бычков крупного рогатого скота). Остальной корм по возрастной норме: 50% суточного рациона составляли концентраты и сено злаковых, заготовленное с суходольных участков. Боксовое содержание, условия кормления и водопоя исключали возможность неконтролируемого заражения животных фасциолами. Продолжительность опыта - 72 дня после первого экспериментального заражения и 58 дней после второго заражения. Гельминтолярвоскопическими методами по К.И.Скрябину изучали печень на наличие фасциол. Результаты представлены в таблице 3.

Как видно из таблицы 3, заявляемая биологически активная добавка оказала выраженное трематоцидное воздействие против экцистированных личинок F.hepatica: количество гельминтов на одну печень в опыте в 3,2 раза меньше, чем в контроле. Кроме того, при неоднократном применении в период попадания в желудочно-кишечный тракт бычков адолескарий F.hepatica ее эффективность сохранялась, о чем свидетельствовало соотношение количества подросших трематод после первого и второго заражения.

Проведенные исследования подтвердили, что заявленная биологически активная добавка обладает антгельминтным действием против юных личинок F. hepatica до или в начальном периоде инвазии и до возникновения патологического процесса у дефинитивного хозяина.

Предлагаемая биологически активная добавка является профилактическим, вспомогательным и оздоровительным средством природного происхождения, приготовлена из доступного, высокопитательного, дешевого и экологически чистого сырья, не имеет побочных эффектов для организма. Ее использование позволяет:

- воздействовать на экцистированных личинок F.hepatica, находящихся в начале инвазии в пищеварительном тракте дефинитивного хозяина, которые временно обездвиженные или убитые транзитом выводятся с каловыми массами;

- исключить специфическое воздействие паразитов на организм животных и, следовательно, возникновение у них стрессов и аллергических реакций и других побочных действий;

- снизить отрицательное влияние гельминтов на продуктивность сельскохозяйственных животных;

- обеспечить хорошую поедаемость.

Источники информации

1. Субботин В.М., Субботина С.Г., Александров И.Д. Современные лекарственные средства в ветеринарии. - Ростов-на-Дону: Феникс, 2001. - С.479-494.

2. Липницкий С.С. Фитотерапия в ветеринарной медицине Беларусь, 2006, 286 с.

3. Червяков Д.К. и др. Лекарственные средства в ветеринарии. Справочник. Изд. 2-е, М.: Колос, 1977. С.352

Изобретение относится к ветеринарной гельминтологии и может быть использовано в качестве профилактического средства от фасциолеза крупного рогатого скота. Биологически активная добавка с трематоцидной активностью для крупного рогатого скота включает крупный порошок из высушенных надземных частей растений козлятника восточного Galega orientalis L. и репешка обыкновенного или аптечного Agrimonia eupatoria L., взятых в соотношении 5:1. Биологически активная добавка обладает антигельминтным действием против юных личинок F.hepatica до или в начальном периоде инвазии и до возникновения патологического процесса у дефинитивного хозяина, хорошей поедаемостью и переносимостью. 3 табл., 3 пр.

Биологически активная добавка с трематоцидной активностью для крупного рогатого скота, включающая высушенное растительное сырье в виде крупного порошка, отличающаяся тем, что в качестве растительного сырья используют надземные части козлятника восточного Galega orientalis L. и репешка обыкновенного или аптечного Agrimonia eupatoria L. в соотношении 5:1.