СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ НАГНОИВШЕЙСЯ ПОСТНЕКРОТИЧЕСКОЙ ПСЕВДОКИСТЫ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ Российский патент 2016 года по МПК G01N33/533 

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии.

Известны критерии диагностики постнекротической псевдокисты поджелудочной железы: по уровню глутатиона, мочевой кислоты, малонового диальдегида в эритроцитах и плазме, содержанию олигопептидов в эритроцитах и плазме (Морозов С.В. Клинико-патогенетическое обоснование диагностики, лечения и прогнозирования при остром панкреатите и его осложнениях (клинико-экспериментальное исследование). - Дисс. докт. мед. наук. - Омск, 2006).

Известны лабораторные критерии диагностики при нагноившейся постнекротической псевдокисте поджелудочной железы: изменения субпопуляционного состава лимфоцитов, содержания провоспалительных цитокинов, некроза опухоли (THF-α), который увеличивается в крови при нагноении постнекротической кисты (Тропина И.В. Клинико-патофизиологические аспекты в диагностике и лечении больных с постнекротическими псевдокистами поджелудочной железы. - Автореф. канд. мед наук. - Омск, 2007; Морозов С.В., Полуэктов В.Л., Долгих В.Т., Рейс А.Б., Ершов А.В., Рейс Б.А. Иммунные нарушения у больных с постнекротическими кистами поджелудочной железы //Антибиотики и химиотерапия. - 2012. - №11-12. - С. 22-25; Ершов А.В., Долгих Т.И., Морозов С.В., Рейс А.Б., Тропина И.В. Прогнозирование инфекционных осложнений постнекротических псевдокист поджелудочной железы // Омский научный вестник. - 2013. - №1(118). - С. 57-59 (прототип изобретения)

Недостатком известного способа диагностики нагноения постнекротической псевдокисты поджелудочной железы является то, что он не достаточно точен, не характеризует активность фагоцитов, с которыми непосредственно связаны инфекционные, гнойные осложнения.

Задача изобретения - повышение точности, эффективности диагностики нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы.

Поставленная задача достигается тем, что способ диагностики нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы осуществляют путем исследования в крови больного лейкоцитов и отличается тем, что с целью повышения точности диагностики, методом проточной цитометрии на приборе «CYTOMICS FC-500», определяют активность фагоцитов по уровню экспрессии CD 14⁺/HLA-DR⁺, используют современный точный статистический метод ROC-анализ, и если содержание CD14⁺/HLA-DR⁺ ниже 85%, диагностируют нагноившуюся постнекротическую псевдокисту поджелудочной железы.

В контрольной группе практически здоровых лиц (20) уровень клеток, экспрессирующих CD 14⁺/HLA-DR⁺ составил 88,4±2,2%.

Способ осуществляют следующим образом. У больного с постнекротической псевдокистой поджелудочной железы производят забор пробы крови, в которой на проточном питометре «CYTOMICS FC-500» определяют субпопуляционный состав лимфоцитов, относительное содержание CD14⁺/HLA-DR⁺.

Оценку маркеров клеточной дифференцировки проводили на проточном цитометре (CYTOMICS FC 500, Beckman Coultr, США) с использованием видоспецифических моноклональных антител (Beckman Coulter, США). Определяли количество CD 14⁺/HLA-DR⁺ клеток в крови.

Определение субпопуляционного состава лимфоцитов на проточных цитометрах является наиболее точным и современным методом диагностики. С помощью проточной цитометрии определяют активность фагоцитов по плотности, однако при уменьшении или отсутствии молекул HLA-DR на поверхности мембран моноциты не могут выполнять свою антиген-презентутощую функцию и не обладают способностью продуцировать воспалительные медиаторы в ответ на соответствующие стимулы (Wolk К. Comparison of monocyte functions after LPS- or IL-10-induced reorientation: importance in clinical immunoparalysis // Pathobiology. - 1999. - Vol.67. - P. 253- 256; Pitton С.Different regulation TNF-a and IL-1 ra synthesis in LPS-tolerant human monocytes // Prog. Clin. Biol. Res. - 1995. - Vol.392. - P. 523-528).

Для оценки эффективности диагностики используют референтные данные. Вычисляют следующие расчетные показатели.

Чувствительность (Se) - определяется как доля больных, у которых выявляется снижение содержания CD14⁺/HLA-DR⁺. Чем выше процент чувствительности, тем лучше тест для диагностики изучаемого критерия.

Специфичность (Sp) - это частота отсутствия изменений данного показателя у здоровых людей. Чем больше процент специфичности изучаемого теста, тем выше уровень доказательности для более качественной диагностики изучаемой величины (Власов В.В. Введение в доказательную медицину // М.: Медиа Сфера, 2001. - 392 с.; Власов В.В. Что такое ежегодный справочник «Доказательная медицина» и как им пользоваться // Междунар. журнал медицинской практики. - 2002. - №1. - С. 5-8).

В настоящее время наиболее полным и современным методом оценки информативности и точности диагностического теста является ROC-анализ (Receiver Operating Characteristic analysis) - характеристическая кривая взаимной зависимости чувствительности и специфичности тестов с использованием взвешенной линейной регрессии. Информативность диагностического теста определяется тем, насколько высоко лежит его характеристическая кривая. Чем ближе площадь под кривой (AUC) к площади квадрата (условно принятую за 1), тем эффективнее диагностический тест. Чем ближе кривая к диагонали, тем ниже эффективность диагностического метода (О.Ю. Реброва. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. - Издательство Медиа Сфера, 2006).

Если содержание CD14⁺/HLA-DR⁺ ниже 85%, то диагностируют нагноившуюся постнекротическую псевдокисту поджелудочной железы.

Пример 1. Больной М., при поступлении клинический диагноз: постнекротическая псевдокиста поджелудочной железы. У больного производят забор пробы крови, который помещают в контейнер проточного цитометра «CYTOMICS FC-500» и определяют субпопуляционный состав лимфоцитов, относительное содержание CD 14⁺/HLA-DR⁺. В данном случае оно составило 89%, что исключает диагноз нагноившаяся постнекротическая псевдокиста поджелудочной железы. Больному была проведена трансгастральная цистогастростомия на наружном дренаже из мини-доступа. Выписан в удовлетворительном состоянии через 14 дней.

Пример 2. Больной Ж., при поступлении клинический диагноз: постнекротическая псевдокиста поджелудочной железы. У больного производят забор пробы крови, который помещают в контейнер проточного цитометра «CYTOMICS FC-500» и определяют субпопуляционный состав лимфоцитов, относительное содержание CD14⁺/HLA-DR⁺. В данном случае оно составило 84%, что соответствовало критерию нагноившейся постнекротической псевдокисты. Больному была выполнена операция: наружное дренирование псевдокисты поджелудочной железы. Выписана в удовлетворительном состоянии на 28 день.

Предложенным способом обследованы 20 практически здоровых пациентов (группа I), 25 больных с неосложненной постнекротической псевдокистой поджелудочной железы (подгруппа II₁) и 24 больных, у которых наблюдались нагноения (подгруппа II₂). Была построена ROC-кривая. Результаты представлены в таблице 1.

Согласно нашим данным использование в качестве критерия оценки нагноившейся кисты поджелудочной железы CD 14⁺/HLA-DR⁺ имеет высокую прогностическую силу (доверительный интервал AUC 0,9-1,0) (табл. 1).

Таким образом, диагностика нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы может осуществляться с высокой частотой положительных результатов с помощью такого показателя, как содержание в крови CD14⁺/HLA-DR⁺.

Технический результат: способ диагностики обладает высокой прогностической силой, позволяет более точно определять тактику ведения таких больных, осуществлять правильный выбор оперативного вмешательства.

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано для диагностики нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы. Для этого в крови больного определяют активность фагоцитов по уровню экспрессии CD 14⁺/HLA-DR⁺ методом проточной цитометрии и статистического ROC-анализа. При содержании CD14⁺/HLA-DR⁺ ниже 85% диагностируют нагноившуюся постнекротическую псевдокисту поджелудочной железы. Использование данного способа позволяет диагностировать нагноившуюся постнекротическую псевдокисту поджелудочной железы, что позволяет определять тактику ведения таких больных и осуществлять выбор оперативного вмешательства. 2 пр., 1 табл.

Способ диагностики нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы включает исследование в крови больного лейкоцитов и отличается тем, что определяют активность фагоцитов по уровню экспрессии CD 14⁺/HLA-DR⁺, при этом используют метод проточной цитометрии и статистический метод ROC-анализ, и если содержание CD14⁺/HLA-DR⁺ ниже 85%, то диагностируют нагноившуюся постнекротическую псевдокисту поджелудочной железы.