СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ТКАНЕЙ ПАРОДОНТА НА РАЗНЫХ СТАДИЯХ Российский патент 2016 года по МПК G01N21/00 G01N33/487 

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для диагностики заболеваний тканей пародонта на разных стадиях.

Заболевания пародонта имеют деструктивный характер. Чаще всего люди заболевают гингивитом, пародонтитом, пародонтозом, которые различаются скоростью, агрессивностью и глубиной протекания деструктивных процессов в тканях пародонта.

При гингивите происходит поверхностное воспаление десны без нарушения целостности соединений зубов и десен. Пародонтит представляет собой воспалительное заболевание, которое воздействует на пародонт очень агрессивно (Барер Г.М. Терапевтическая стоматология: учебник: в 3 ч. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. - 4.2. - Болезни пародонта. - 224 с.: 236 ил.).

Пародонтит может стремительно прогрессировать и за короткий срок (несколько лет) привести к выпадению всех или части зубов (Безрукова А.П. Пародонтология. - М., 1999. - 332 с. )

Воспаление десны характеризуется разрушением коллагена - основного белка соединительной ткани, что, без сомнения, приводит к увеличению в слюне уровня такой аминокислоты как оксипролин, свойственной исключительно коллагену (Вавилова Т.П. Биохимия тканей и жидкостей полости рта. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008, с. 215)

Однако в специальной стоматологической литературе по диагностике заболеваний пародонта нам не удалось найти сведений об использовании в качестве маркера этих заболеваний величины концентрации оксипролина в слюне. Известно, что диагностику заболеваний пародонта проводят, основываясь на субъективной оценке состояния пародонта самим пациетом, например кровоточивость десен во время чистки зубов или болевые ощущения при приеме пищи. Но это уже продвинутая стадия гингивита.

Известен способ диагностики заболеваний пародонта путем определения содержания гликогена на поверхности десен (проба Шиллера-Писарева). Для этого слизистую оболочку десны окрашивают раствором Люголя. По изменению цвета в различных зонах после окрашивания судят о наличии воспалительного процесса.

Известен также способ оценки метаболизма коллагена (Патент на изобретение №:2214596; Подковкин В.Г., Бондаренко Л.М., Власов М.Ю., Аввакумова Н.П., Грибкова О.В.), относящийся к клинико-диагностическим исследованиям, основанный на определении содержания в слюне свободного и белково-связанного оксипролина в динамике заживления гастродуоденальных язв.

Способ оценки метаболизма коллагена включает забор биологической жидкости, выделение из нее свободного и белково-связанного оксипролина экстракцией этиловым спиртом и центрифугированием, где свободный оксипролин выделяют из надосадочной жидкости. Для выделения белково-связанного оксипролина используют гидролизат гидроксид бария с последующей ионообменной хроматографией. Концентрацию оксипролина определяют колориметрически при длине волны 540 нм в кювете 0,5 см путем добавления реактива Эрлиха. В качестве биологической жидкости используют слюну обследуемого человека в количестве 4 мл. Добавляют к ней 16 мл этилового спирта, перемешивают, центрифугируют в течение 15 мин при скорости 3000 об/мин. Выделение белково-связанного оксипролина осуществляют на хроматографической колонке диаметром 3 мм, высотой заполнения ионообменной смолой КРС-8п 6 мм, со скоростью движения нейтрализата, равной 0,2 мм в минуту. Оксипролин элюируют 1 мл 1н. раствора соляной кислоты, после чего солянокислый элюат нейтрализауют 5н. раствором гидроксида натрия, при этом оценку распада коллагена и процесса его биосинтеза проводят по возрастанию концентрации свободного или белково-связанного оксипролина соответственно.

Известен способ диагностики воспалительных заболеваний тканей пародонта (Патент на изобретение №2329509; Житков М.Ю., Емиленко Е.А. и др.), сущность которого в определении содержания кальция, фосфора, активности щелочной фосфатазы, общей и тетратрезистентной кислой фосфатазы в смешанной нестимулированной слюне. Однако способ является более трудоемким и дорогостоящим, требующим специального оборудования.

Технический результат предлагаемого способа заключается в повышении точности диагностики с минимальными затратами времени за счет определения концентрации свободного оксипролина в слюне, что является объективной оценкой стадии воспалительного процесса в полости рта, причем выполняется на оборудовании, которое имеется в любой клинической лаборатории.

В нашем способе концентрацию свободного оксипролина в слюне пациентов, которые обратились на прием к стоматологу, в том числе и с жалобами на кровоточивость десен и подвижность зубов, определяли спектрофотометрически с помощью модифицированного метода С.С. Тетянец, который используется для определения свободного оксипролина в сыворотке крови (С.С. Тетянец. Метод определения свободного оксипролина в сыворотке крови. Лабораторное дело, 1985, N 1, стр. 61-62).

За 10 минут до забора слюны рот тщательно прополаскивался теплой водой для удаления остатков пищи, механические средства для очистки полости рта перед забором слюны не использовались. Проведенные исследования дают основания полагать, что определение оксипролина в слюне может являться методом диагностики и профилактики заболеваний тканей пародонта.

Для проведения анализа 0,25 мл слюны наливали в пробирки, прибавляли 1 мл абсолютного этанола, центрифугировали 10 минут при 3000 об/мин. Всю надосадочную жидкость переносили в мерные центрифужные пробирки. При перемешивании добавляли 0,25 мл раствор хлорамина Т в ацетатном буфере (1:4). Добавляли 0,25 мл изопропилового спирта. Через 4 мин приливали 0,75 мл реактива Эрлиха. Общий объем раствора доводили этиловым спиртом до 2,5 мл. После перемешивания пробирки закрывали пробками и термостатировали при 60°C 30 мин. Затем охлаждали до 20°C. На спектрофотометре СФ 2000 определяли оптическую плотность при длине волны 558 нм против холостой пробы, в которой биологическая жидкость заменяласть водой.

Содержание оксипролина в каждой пробе определяли по калибровочной прямой в координатах , где D - оптическая плотность раствора биологической жидкости.

Поставленная задача решается тем, что в способе используется величина объективного показателя концентрации свободного оксипролина в слюне, который позволяет диагностировать воспалительный процесс на объективной основе. Результаты исследований приведены в таблице, где показано, что концентрации свободного оксипролина в слюне пациентов изменяются в определенных нами пределах. Пациентам со здоровыми тканями пародонта соответствует интервал концентраций свободного оксипролина <0,80 мг/л; пациентам с острым катаральным гингивитом - 0,80-1,00 мг/л; пациентам с хроническим гингивитом - 1,01-1,50 мг/л; пациентам с пародонтитом >1,50 мг/л.

Клинические примеры.

1. Пациент Иванников 1999 г. р. обратился к стоматологу с целью профессиональной гигиены полости рта.

Жалобы: на наличие налета на зубах.

Объективно: Слизистая оболочка маргинальной десны бледно-розового цвета, умеренно увлажненная.

При клиническом обследовании полости рта выявлено небольшое количество мягкого зубного налета на язычной поверхности жевательных зубов. Зубодесневое соединение не нарушено. Изменений на ортопантомограмме нет.

С помощью клинических индексов (КПУ 18%, ИГРУ 0.4, РМА 0) проводится объективная оценка состояния зубов и десен.

Результаты исследования слюны:

Свободный оксипролин 0,65 (мг/л)

Заключение: признаки воспаления и деструкции твердых тканей зубов отсутствуют. Здоров.

Диагноз: К 03.66 Зубной налет.

2. Пациент Назаров 1983 г. р. обратился к стоматологу с целью профессиональной гигиены полости рта.

Жалобы: на появившуюся кровоточивость десен при чистке зубов и откусывании твердой пищи.

Объективно: Слизистая оболочка маргинальной десны слабо гиперемированная, розовая, умеренно увлажненная.

При клиническом обследовании полости рта выявлен мягкий зубной налет на всех группах зубов. При зондировании зубодесневой борозды отмечается незначительная кровоточивость. Зубодесневое соединение не нарушено. На ортопантомограмме изменений нет.

С помощью клинических индексов (КРУ 28%, ИГРУ 0,8, РМА 8) проводится объективная оценка состояния зубов и десен.

Результаты исследования слюны:

Свободный оксипролин - 0,93 (мг/л)

Заключение: присутствуют признаки воспаления без деструкции твердых тканей зубов.

Диагноз К05.1 Острый катаральный гингивит.

3. Пациентка Наменасенко 1987 г. р. обратилась к стоматологу с целью профессиональной гигиены полости рта.

Жалобы: на кровоточивость десен во время чистки зубов и откусывании твердой пищи.

Объективно: слизистая оболочка маргинальной десны слабо гиперемированная, умеренно увлажненная.

При клиническом обследовании полости рта выявлен наддесневой зубной камень на зубах 3.1, 4.1. При зондировании зубодесневой борозды отмечается кровоточивость. Зубодесневое соединение не нарушено. На ортопантомограмме изменений нет.

С помощью клинических индексов (КПУ 25%, ИГРУ 0.6, РМА 2) проводится объективная оценка состояния зубов и десен.

Результаты исследования слюны:

Свободный оксипролин - 1,23 (мг/л)

Заключение: присутствуют признаки воспаления без деструкции твердых тканей зубов.

Диагноз К05.1 Хронический гингивит.

4. Пациентка Мартиросян 1987 г. р. обратилась на прием к стоматологу - гигиенисту.

Жалобы: на кровоточивость десен при чистке зубов и откусывании твердой пищи.

Объективно: слизистая оболочка маргинальной десны бледно-розового цвета, слабо гиперемированная, умеренно увлажненная.

При клиническом обследовании полости рта наблюдается небольшое количество пигментированного зубного налета на аппроксимальных поверхностях зубов. При зондировании зубодесневой борозды определяется кровоточивость. Зубодесневое соединение не нарушено. На ортопантомограмме изменений нет.

С помощью клинических индексов (КПУ 39%, ИГРУ 0, РМА 2) проводится объективная оценка состояния зубов и десен.

Результаты исследования слюны:

Свободный оксипролин - 1,01 (мг/л)

Заключение: присутствуют признаки воспаления без деструкции твердых тканей зубов.

Диагноз К05.1 Хронический гингивит.

5. Пациентка Ивонина 1974 г. р. обратилась на прием к стоматологу-гигиенисту.

Жалобы: на эстетический дефект, зубной налет, неприятный запах изо рта.

Объективно: слизистая оболочка маргинальной десны цианотичная, отечная, умеренно увлажненная. При клиническом обследовании полости рта наблюдается наддесневой и поддесневой зубной камень 3.3, 3.2, 3.1, 4.1, 4.2, 4.3., пигментированный налет на всех группах зубов. При зондировании пародонтальные карманы глубиной 3,5 мм, рецессия десны 1-2 мм. На ортопантомограмме наблюдается разрушение кортикальной пластинки межзубных перегородок.

С помощью клинических индексов (КПУ 50%, ИГРУ 1,3 РМА 0) проводится объективная оценка состояния зубов и десен.

Свободный оксипролин - 1,77(мг/л)

Заключение: присутствуют признаки воспаления

Диагноз К05.3 Хронический пародонтит. Легкая степень тяжести.

6. Пациентка Ларчикова 1986 г. р. обратилась на прием к стоматологу-гигиенисту с целью профессиональной гигиены.

Жалобы: на зубной налет, запах изо рта.

Объективно: слизистая оболочка маргинальной десны слабо гиперемированная, отечная, умеренно увлажненная.

При клиническом обследовании выявлен наддесневой и поддесневой зубной камень на зубах 3.3, 3.2, 3.1, 4.1, 4.2, 4.3, пигментированный налет на всех группах зубов, при зондировании пародонтальные карманы глубиной 3,5 мм. На ортопантомограмме наблюдается разрушение кортикальной пластинки межзубных перегородок.

С помощью клинических индексов (КПУ 47%, ИГРУ 0,8, РМА 5) проводится объективная оценка состояния зубов и десен.

Свободный оксипролин - 2,70(мг/л)

Заключение: присутствуют признаки воспаления

Диагноз К05.3 Хронический пародонтит. Легкая степень тяжести.

7. Пациент Соболев 1978 г. р. обратился к стоматологу с целью профессиональной гигиены полости рта. Жалобы: на наличие зубных отложений, запах изо рта.

Объективно: слизистая оболочка маргинальной десны гиперемированная, отечная, умеренно увлажненная.

При клиническом обследовании полости рта выявлен наддесневой и поддесневой зубной камень в области 3.3, 3.2, 3.1, 4.1, 4.2, 4.3, пигментированный налет на всех группах зубов. При зондировании зубодесневой борозды отмечается кровоточивость. Пародонтальные карманы глубиной 4-5 мм. На ортопантомограмме наблюдается разрушение кортикальной пластинки, резорбция вершин межзубных перегородок на 1/3-1/2 высоты.

С помощью клинических индексов (КПУ 50%, ИГРУ 1,2, РМА 12) проводится объективная оценка состояния зубов и десен.

Результаты исследования слюны:

Свободный оксипролин - 3,31 (мг/л)

Заключение: присутствуют признаки воспаления.

Диагноз К05.3 Хронический пародонтит. Средняя степень тяжести.

8. Пациентка Бобятинская И.Ю. 1991 г. р. обратилась к стоматологу с жалобами на эстетический дефект, наличие зубного налета.

При клиническом обследовании отмечены слабо гиперемированная, умеренно увлажненная слизистая оболочка маргинальной десны, мягкий налет в области шеек всех групп зубов, наддесневой зубной камень на зубах 3.2, 3.1, 4.1, 4.2. При зондировании десневой борозды наблюдается кровоточивость десен. Зубодесневое соединение не нарушено. Изменений на ортопантомограмме нет.

Диагноз К05.1 Острый катаральный гингивит

С помощью клинических индексов (КПУ 62% ИГРУ 1,8 РМА 3) проводится объективная оценка состояния зубов и десен.

Результаты исследования слюны:

Свободный оксипролин - 1,00 (мг/л)

Заключение: присутствуют признаки воспаления без деструкции твердых тканей зубов.

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для диагностики заболеваний тканей пародонта на разных стадиях. Для осуществления способа исследуют слюну, в качестве показателя воспалительного процесса определяют концентрацию свободного оксипролина спектрофотометрическим методом. При значениях <0,80 мг/л диагностируют отсутствие патологии тканей полости рта; при значениях 0,80 - 1,00 мг/л диагностируют острый катаральный гингивит; при значениях 1,01 - 1,50 мг/л диагностируют хронический гингивит; при значениях >1,50 мг/л диагностируют пародонтит. Использование способа позволяет более точно, в короткие сроки на доступном для всех клинических лабораторий оборудовании диагностировать заболевания тканей пародонта. 1 табл., 8 пр.

Способ диагностики заболеваний тканей пародонта на разных стадиях, включающий исследование слюны спектрофотометрическим методом, отличающийся тем, что в качестве показателя воспалительного процесса определяют концентрацию свободного оксипролина и при значениях <0,80 мг/л диагностируют отсутствие патологии тканей полости рта; при значениях 0,80-1,00 мг/л диагностируют острый катаральный гингивит; при значениях 1,01-1,50 мг/л диагностируют хронический гингивит; при значениях >1,50 мг/л диагностируют пародонтит.