СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ КОЖНЫХ РАН У МЛЕКОПИТАЮЩИХ С ПОМОЩЬЮ ТРОМБОЦИТАРНОЙ АУТОПЛАЗМЫ Российский патент 2016 года по МПК A61M37/00 A61K35/16 A61P17/02 

Изобретение относится к области ветеринарии, может быть применено при лечении ран млекопитающих.

Использование тромбоцитарной аутоплазмы в медицине берет свое начало из аутогемотерапии. Широкое применение этого метода основано на том, что тромбоциты содержат различные факторы роста: тромбоцитарный, эпидермальный, фактор роста фибробластов, инсулиноподобный и многие другие. Повышенная концентрация этих факторов в месте инъекции стимулирует регенеративные процессы. Кроме того, тромбоцитарная аутоплазма не обладает иммуннореактивным и токсичным действием в отношении организма, не вызывает аллергических реакций.

Тромбоцитарная аутоплазма успешно применяется во многих областях гуманной медицины: травматологии, стоматологии, гинекологии, косметологии, с целью ускорения регенерации тканей [2, 3]. Об эффективности применения тромбоцитарной аутоплазмы в лечении людей с различными патологиями травматического характера свидетельствуют многочисленные научные публикации разработчика метода «Плазмолифтинг™», д.м.н. Р.Р. Ахмерова [1].

Так, из уровня техники известен способ лечения ран кроликов с помощью метода «Плазмолифтинг™» [5]. Перед нанесением на рану осуществляли взятие крови у кроликов в объеме 8 мл из ушной вены и вены сафена в специальные пробирки «Плазмолифтинг™» (Россия) с разделительным гелем. Центрифугирование осуществляли на центрифуге СМ-6 со скоростью 2500 об/мин. Тромбоцитарную аутоплазму получали в объеме 3 мл и сразу вводили в место ранения. Подопытным кроликам осуществляли инъекции тромбоцитарной аутоплазмы по периферии раны внуткрикожно (4 инъекции) и в центр раны (1 инъекция). На одну инъекцию приходилось 0,3 мл, а всего на рану приходилось 1,5 мл. Иглу вводили на глубину 1-2 мм. Инъекции осуществляли 1 раз в 5 дней. Ежедневно раны орошали 0,05% раствором хлоргексидина, в объеме 2 мл. Указанные процедуры повторяли через 5 суток, всего было выполнено 4 процедуры.

Раны контрольной группы кроликов орошали 0,05% раствором хлоргексидина в объеме 2 мл и наносили мазь «Левомеколь» ежедневно. И дополнительно осуществляли инъекции препарата «Травматин» по 0,5 мл подкожно в холку, первые 10 дней ежедневно, затем через 1 день. Всего 20 дней.

Однако в ходе исследований было установлено, что такой режим введения и дозировка тромбоцитарной аутоплазмы не является эффективным для всех млекопитающих. Данное исследование показало, что подбор оптимальной дозировки и режима введения для любого вида млекопитающего непосредственно зависит от конкретных размеров площади раны или диаметра раны.

Техническим результатом данного способа является повышение эффективности лечения ран у любого вида млекопитающих, ускорение процесса заживления, профилактика и лечение гнойного процесса в ране.

Указанный технический результат реализуется за счет выполнения следующих действий. Так, непосредственно перед лечением, перед приготовлением тромбоцитарной аутоплазмы, осуществляют измерение площади раны. И при получении конкретных значений площади раны готовят необходимое количество тромбоцитарной аутоплазмы. Так, при ранах до 5 см² тромбоцитарную аутоплазму вводят в объеме 3 мл под дно раны в одну точку, при этом игла вводится максимально близко к раневой поверхности; при ранах от 5 до 10 см² тромбоцитарную аутоплазму вводят в объеме 6 мл, при этом необходимый для введения объем тромбоцитарной аутоплазмы делят на 2 инъекции. Для этого рану делят на 2 части и инъецируют тромбоцитарную аутоплазму в середину каждой части раны. Инъекции осуществляют максимально близко к дну раны, не извлекая иглы полностью, для предотвращения причинения дополнительного дискомфорта животному; при ранах 10-20 см² тромбоцитарную аутоплазму вводят в объеме 1 мл на 1 см², при этом полученный объем тромбоцитрной аутоплазмы делят на 4 инъекции и вводят необходимый объем тромбоцитарной аутоплазмы на границе раневой поверхности со здоровой кожей на глубину 0,5-1 см; для обширных ран более 20 см² определение вводимого объема тромбоцитарной аутоплазмы осуществляют по следующему принципу: измеряют диаметр раны в самой широкой ее части и готовят столько тромбоцитарной аутоплазмы в мл, сколько получился диаметр в см, при этом полученный объем тромбоцитарной аутоплазмы делят на 4-5 инъекций, которые вводят в одну точку на границе раневой поверхности со здоровой кожей. Например, при ранах 15 см = 15 мл тромбоцитарной аутоплазмы, 15 мл / 4 инъекции = 3,75 мл в одну точку. Полученное число округляем до удобного.

Раны обрабатывают 1 раз в 3, 5 или 7 суток, кратность введения составляет от 3 до 6 раз, что определяется индивидуально лечащим врачом в зависимости от состояния раны: отечности вокруг раны, наличия гнойного экссудата и скорости эпителизации.

Прекращать введение тромбоцитарной аутоплазмы рекомендуется после полного завершения стадии эпителизации, если косметический дефект для животного не важен. Или до появления шерстного покрова, если важно быстрее устранить и косметический дефект в том числе.

Способ приготовления тромбоцитарной аутоплазмы осуществляют следующим образом. Делают замер площади раны. В зависимости от площади раны выполняют забор крови у млекопитающего, имеющего рану, в пробирки «Плазмолифтинг™» (Россия) в необходимом объеме для приготовления тромбоцитарной аутоплазмы. Пробирки «Плазмолифтинг™» центрифугируют на центрифуге СМ-6 со скоростью 1500 об/мин 5 минут. После центрифугирования тромбоцитарную аутоплазму сразу извлекают в шприц и вводят в место ранения, по описанным выше способам, с целью предотвращения агрегации тромбоцитов.

Пример конкретного выполнения. В опыте использовали две группы лошадей: подопытную и контрольную, в каждой группе по 3 лошади. У лошадей были равноразмерные раны в средней трети шеи. Фигура 1. Лошадь с раной на латеральной стороне шеи (А - открытая рана, В - закрытая салфеткой).

После чего осуществляли замер площади раны, при этом площадь раны у всех лошадей по 5 см². Кровь брали в 1 пробирку «Плазмолифтинг™» (Россия) для приготовления тромбоцитарной аутоплазмы. После чего пробирки «Плазмолифтинг™» центрифугировали на центрифуге СМ-6 со скоростью 1500 об/мин 5 минут. Тромбоцитарную аутоплазму сразу после получения вводили под дно раны, в объеме по 3 мл в одну точку под дно раны. Лошадям подопытной группы тромбоцитаную аутопалазму вводили 4 раза с интервалом в трое суток: на 1-е, 4-е, 7-е, 10-е сутки. Состояние ран оценивали через сутки после введения тромбоцитарной аутоплазмы: на 2-е, 5-е, 8-е, 11-е сутки, а также дополнительно на 24-е и 32-е сутки лечения. Дополнительно животным на раны ежедневно наносили мазь «Левомеколь». У животных контрольной группы на раны ежедневно наносили мазь «Левомеколь». Изменения площади ран у контрольной и подопытной групп лошадей представлены на нижеследующих фигурах. Фигура 2. Первые сутки. Раны лошадей до обработок. Вид ран после иссечения кожи и остановки кровотечения. А - опыт, В - контроль. Фигура 3. 8-е сутки лечения (через 24 часа после третьей инъекции тромбоцитарной аутоплазмы). А - опыт, В - контроль. У подопытной группы лошадей отмечено уплотнение струпа, струп плотно прилегает по всей поверхности раны. Консистенция струпа очень плотная. В то время как у контрольной группы лошадей заметно прогрессирование стадии гидратации: струп влажный, легко отсоединяется в центре и по периферии. Под струпом находился гнойный экссудат. Струп легко разрушается, крошится.

Фигура 4. 11-е сутки лечения (через 24 часа после четвертой инъекции тромбоцитарной аутоплазмы). А - опыт, В - контроль.

У подопытной группы лошадей ярко заметно начало краевой эпителизации и уменьшение диаметра ран. Струп плотный, сухой. У контрольной группы лошадей заметно уменьшение ран в диаметре, прогрессирование стадии гидратации: струп более «рыхлый», местами отслаивается и крошится. Отмечено начало краевой эпителизации. Но у подопытной группы лошадей визуально площадь краевой эпителизации значительно больше, чем у контрольной группы животных.

Фигура 5. 32-е сутки лечения. А - опыт, В - контроль.

Раны подопытной группы лошадей зажили. По большей части поверхности выражен рост шерсти. У контрольной группы лошадей краевая эпителизация занимала 50% площади от всей раны. Струп плотный и сухой.

Применение для лечения ран тромбоцитарной аутоплазмы совместно с мазью «Левомеколь» в подопытной группе лошадей способствовало более быстрому заживлению ран по сравнению с группой лошадей, где применялась только мазь «Левомеколь».

Согласно полученным данным до лечения различия в площади ран у лошадей контрольной и подопытной групп статистически не значимы. На 2-е, 5-е, 8-е и 11-е сутки лечения тромбоцитарной аутоплазмой установили, что диаметр ран был достоверно (р≤0,05) меньше у лошадей подопытной группы по сравнению с контрольной группой лошадей.

Заживление ран у лошадей происходит по гнойно-ферментативному типу. Характеризуется оно гнойно-экссудативными явлениями, протекающими при выраженной гидратации в виде воспалительного отека. На этом фоне развивается гнойно-ферментативный процесс, в результате которого происходит ферментативное разжижение мертвых тканей, подавление роста микробов, выведение во внешнюю среду инородных предметов и других загрязнений вместе с гнойным экссудатом [4]. Такую картину мы наблюдали у лошадей контрольной группы. У лошадей подопытной группы заживление ран происходило нетипично: стадии гидратации и формирования гнойного экссудата носили невыраженный характер.

На наш взгляд, применение тромбоцитарной аутоплазмы совместно с традиционным лечением способствовало снижению воспалительного процесса и более раннему по времени заживлению ран у лошадей. Важно отметить, что в случаях задержки гноя в ране у лошадей гнойно-резорбтивная лихорадка при гнойно-экссудативном типе очищения оказывается более выражена по сравнению с протеканием раневого процесса у других видов животных [4]. Следовательно, применение тромбоцитарной аутоплазмы может быть рекомендовано для использования практикующими ветеринарными врачами не только как стимулятор регенерации ран, но и как профилактическое средство, не допускающее развитие гнойного процесса и возникновение гнойно-резорбтивной лихорадки у лошадей.

Применение тромбоцитарной аутоплазмы способствовало заживлению экспериментальных ран у любого вида млекопитающего. Например, через сутки после четвертой инъекции тромбоцитарной аутоплазмы диаметр ран у лошадей подопытной группы был меньше, чем диаметр ран лошадей контрольной группы, на 54%.

Лечение ран животных тромбоцитарной аутоплазмой практически исключило стадию гидратации из раневого процесса, что может служить профилактикой появления гноя в ране.

Описанный выше метод является рекомендованным, однако возможны отклонения и индивидуальный подход к каждому пациенту. Если размер животного не позволяет взять кровь в объеме, необходимом для лечения, тогда может быть применен способ вычисления объема тромбоцитарной аутоплазмы по диаметру, вне зависимости от площади раны.

Тромбоцитарную аутоплазму невозможно передозировать. Поэтому при получении большего объема, чем требуется, рекомендуется вводить весь полученный объем.

Литература

1. Ахмеров P.P., Зарудий Р.Ф., И. Рычкова, О. Бочкова. Плазмолифтинг - новый метод современной косметологии, XIV международный конгресс по прикладной эстетике, Москва, КрокусЭкспо, 14-16.04. 2011.

2. Джуффре Дж., Капуто Дж., Миссо С., Пелузо Ф. Лечение богатой тромбоцитами плазмой и гемостаз у пациентов с риском возникновения кровотечений. - Журнал «Минерва в стоматологии» (Minerva Stomatologica). Ноябрь-декабрь 2006 г.; 55(11-12):599-609.

3. Шейда Елена Владимировна. Антимикробные свойства тромбоцитарного катионного белка сельскохозяйственных животных - автореферат, Уфа, 2010.

4. Семенов Б.С., Видении В.Н. Оперативная хирургия у животных. Учебное пособие МСХ. М.: Колосс, 2012.

5. Гусева В.А. Морфологическое сравнение биоптатов раневой поверхности кожи после применения метода «Плазмолифтинг™» и общепринятых методов лечения ран у кроликов. Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. 2013. №3. С. 45-46.

Изобретение относится к лечению кожных ран млекопитающих. Способ включает забор крови у млекопитающего и приготовление необходимого объема тромбоцитраной аутоплазмы. При этом предварительно осуществляют измерение площади раны. Для обширных ран площадью более 20 см² определение вводимого объема тромбоцитарной аутоплазмы осуществляют по следующему принципу: измеряют диаметр раны в самой широкой ее части и готовят такой объем тромбоцитарной аутоплазмы в мл, который равен диаметру раны в см. Полученный объем тромбоцитарной аутоплазмы делят на 4-5 инъекций, которые проводят на границе раневой поверхности со здоровой кожей. При этом иглу вводят на глубину 0,5-1 см. Таким образом раны обрабатывают 1 раз в 3, 5 или 7 суток. Кратность введения составляет от 3 до 6 раз в зависимости от состояния раны. Прекращают введение тромбоцитарной аутоплазмы после полного завершения стадии эпителизации. Способ позволяет повысить эффективность лечения ран у любого вида млекопитающего, способствует ускорению процесса заживления, а также профилактике и лечению гнойного процесса в ране. 5 ил., 1 пр.

Способ лечения кожных ран у млекопитающих с помощью тромбоцитарной аутоплазмы, заключающийся в том, что осуществляют забор крови у млекопитающего, имеющего рану, готовят необходимый объем тромбоцитраной аутоплазмы и вводят ее в рану, отличающийся тем, что непосредственно перед лечением и перед приготовлением тромбоцитарной аутоплазмы осуществляют измерение площади раны, для обширных ран площадью более 20 см² определение вводимого объема тромбоцитарной аутоплазмы осуществляют по следующему принципу: измеряют диаметр раны в самой широкой ее части и готовят столько тромбоцитарной аутоплазмы в мл, сколько получился диаметр в см, при этом полученный объем тромбоцитарной аутоплазмы делят на 4-5 инъекций, которые вводят на границе раневой поверхности со здоровой кожей, при этом иглу вводят на глубину 0,5-1 см, таким образом раны обрабатывают 1 раз в 3, 5 или 7 суток, кратность введения составляет от 3 до 6 раз, что определяется индивидуально лечащим врачом в зависимости от состояния раны, прекращают введение тромбоцитарной аутоплазмы после полного завершения стадии эпителизации.