Способ прогнозирования развития плацентарной недостаточности при беременности, индуцированной экстракорпоральным оплодотворением Российский патент 2017 года по МПК G01N33/68 

Область применения: Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике.

Уровень техники

Результаты исследований последних лет, посвященных повышению эффективности вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), подтверждают, что при индуцированной беременности повышается частота встречаемости гестационных осложнений, связанных с проявлениями эндотелиальной дисфункции. Индукция суперовуляции в программах экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбрионов (ЭКО и ПЭ) связана со значительной экзогенной гормональной нагрузкой на организм женщины. Поддержка индуцированной беременности высокими дозами гормонов оказывает непосредственное влияние на функцию эндотелия и регуляцию ангиогенеза при формировании фетоплацентарного комплекса, следствием чего может быть внутриутробно программируемая сосудистая дисфункция плода, способная реализоваться впоследствии в манифестирующие формы ангиопатий.

Будучи частым осложнением беременности, частота выявления плацентарной недостаточности (ПН) достигает 45%, а перинатальная заболеваемость - 70% [1, 2].

Трудность доклинической диагностики ПН связана с невозможностью выявления нарушений кровообращения в системе «мать-плацента-плод» с ранних сроков беременности, что диктует необходимость разработки доступных способов диагностики и прогнозирования для выявления начальных проявлений патологического процесса и их своевременной коррекции.

В клинической практике, чаще всего, используются способы прогнозирования плацентарной недостаточности у беременных на основании исследования плодово-плацентарных гормонов в крови (плацентарного альфа 1-микроглобулина, альфа-фетопротеина, эстриола, плацентарного лактогена) [3, 4, 5]. В литературе имеются данные о прогностической значимости некоторых иммунологических показателей: аутоантител к двухспиральной ДНК, Fc - фрагменту, коллагену и анионным цитоплазматическим антигенам нейтрофилов, секреторного IgA, активности лизоцима, трансформирующего и эпидермального факторов роста [6, 7, 8].

Недостатком вышеприведенных способов прогнозирования является: неоднократное определение уровня комплекса гормонов, трудоемкость и дороговизна, отсутствие четкого математического анализа.

Прототипом предложенного изобретения является описанный ранее способ прогнозирования развития плацентарной недостаточности с ранних сроков беременности (с момента наступления беременности), заключающийся в определении содержания интерлейкинов (IL-6, IL-8), растворимой сосудистой молекулы межклеточной адгезии (sVCAM), васкуло-эндотелиального фактора роста (VEGF) и big-эндотелина в сыворотке крови с последующим вычислением прогностического индекса (PI) [9].

Несмотря на очевидные достоинства метода, использование для вычисления прогностического индекса пяти параметров существенно увеличивает материальные затраты.

Сущность изобретения

Целью изобретения является разработка способа прогнозирования развития плацентарной недостаточности при беременности, индуцированной экстракорпоральным оплодотворением на основании лабораторного исследования венозной крови, заключающегося в определении содержания ренина, эндоглина и растворимого рецептора-1 к васкуло-эндотелиальному фактору роста (sVEGF-R1).

Прогностическая значимость данных показателей связана с тем, что ренин является маркером ренин-ангиотензин-альдостероновой системы (РААС), гиперактивация которой приводит к развитию эндотелиальной дисфункции. Растворимый рецептор-1 к васкуло-эндотелиальному фактору роста (sVEGF-Rl) и эндоглин относятся к основным регуляторам ангиогенеза. Растворимые формы сосудистых факторов, участвующие в процессах васкулогенеза и ангиогенеза, более доступны для исследования в материнской циркуляции. Изменение содержания их в крови матери также отражает изменение содержания этих факторов в циркуляции и тканях плода. Следовательно, изучение данных факторов в материнском кровотоке имеет особо важное значение для понимания процессов морфогенеза и гистофизиологического развития плаценты, а также прогнозирования происходящих в ней нарушений [10].

Способ осуществляют следующим образом: забор венозной крови производят в сухую чистую пробирку в количестве 5 мл. Далее в сыворотке крови определяют содержание ренина, уровня эндоглина и sVEGF-R1 методом иммуноферментного анализа согласно инструкции фирмы производителя. Измерение оптической плотности образцов выполняют на микропланшетном ридере типа «SUNRISE BASIC», фирмы «TECAN Austria GmbH» (Австрия).

Полученные значения используют для вычисления прогностического индекса (PI) по формуле, разработанной с использованием метода дискриминантного анализа:

PI=11,7-0,003×Х₁-1,18×Х₂-0,95×Х₃, где

X₁ - содержание ренина, пг/мл,

Х₂ - содержание эндоглина, пг/мл,

Х₃ - содержание sVEGF-R1, нг/мл.

При PI>0 прогнозируют развитие плацентарной недостаточности во второй половине беременности, а при PI<0 делают заключение о низком риске развития данного патологического состояния. При PI равном 0 рекомендуется повторное исследование через две недели.

Чувствительность предлагаемого способа составляет 94,7% специфичность - 84,0%. Эффективность способа - 88,1%.

Пример 1. Пациентка А. Обследовалась амбулаторно в научной поликлинике ФГБУ «НИИ ОММ» Минздрава России. Первая попытка ЭКО. Диагноз: отягощенный акушерский анамнез (ОАА) (эутиреоз, синдром поликистозных яичников, бесплодие I степени), беременность 7 недель, угроза прерывания беременности. При лабораторном исследовании сыворотки крови получены следующие показатели: содержание ренина - 960,9 пг/мл, эндотелина - 3,73 пг/мл, sVEGF-R1 - 0,0046 нг/мл. Прогностический индекс, рассчитанный по формуле, равен 4,41, положительное значение индекса свидетельствует о высоком риске развития плацентарной недостаточности, в связи с чем пациентка отнесена в группу риска по формированию данного осложнения беременности. В сроке 21-22 недели по результатам ультразвукового и допплерометрического исследования выявлена субкомпенсированная форма плацентарной недостаточности (маловодие) с исходом в задержку роста плода I степени, которая сохранялась в сроке 28-29 недель.

Пример 2. Пациентка П., 37 лет. Обследовалась амбулаторно в научной поликлинике ФГБУ «НИИ ОММ» Минздрава России. Первая попытка ЭКО. Диагноз: ОАА (аутоиммунный тиреоидит, гипотиреоз, гиперплазия эндометрия, бесплодие I степени), беременность 9 недель, угроза прерывания беременности. При лабораторном исследовании сыворотки крови получены следующие показатели: содержание ренина - 889,53 пг/мл, эндотелина - 5,25 пг/мл, sVEGF-R1 - 0,2268 нг/мл. Прогностический индекс, рассчитанный по формуле, равен 2,62, положительное значение индекса свидетельствует о высоком риске развития плацентарной недостаточности, в связи с чем пациентка отнесена в группу риска по формированию данного осложнения беременности. В сроке 18-19 и 30-31 недели беременности по данным ультразвукового и допплерометрического исследования выявлена субкомпенсированная форма плацентарной недостаточности (маловодие, нарушение маточно-плацентарного кровообращения IA степени) с исходом в задержку роста плода I ст.

Пример 3. Пациентка З., 35 лет. Обследовалась амбулаторно в научной поликлинике ФГБУ «НИИ ОММ» Минздрава России. Первая попытка ЭКО. Диагноз: ОАА (субклинический гипотиреоз, генетическая тромбофилия, варикозная болезнь, бесплодие I степени), беременность 10 недель, угроза прерывания беременности. При лабораторном исследовании сыворотки крови получены следующие показатели: содержание ренина - 1885,7 пг/мл, эндотелина - 7,53 пг/мл, sVEGF-R1 - 1,8344 нг/мл. Прогностический индекс, рассчитанный по формуле, равен 4,59. Отрицательное значение прогностического индекса свидетельствует о низком риске развития плацентарной недостаточности. При дальнейшем наблюдении, по данным ультразвуковых и допплерометрических исследований в течение беременности (16 недель, 24 недели и 30 недель) состояние плаценты и плода оценивалось как нормальное, соответствующее сроку гестации.

Приведенные клинические примеры показывают, что нарушение продукции противоангиогенных факторов эндоглина и растворимого рецептора-1 к VEGF, а также одного из маркеров ренин-ангиотензин-альдостероновой системы (ренина) может являться одной из основных причин реализации патологических состояний при индуцированной беременности в ранние сроки. Вышеизложенное подтверждает прогностическую ценность заявляемого способа.

Таким образом, заявляемый способ прогнозирования развития плацентарной недостаточности в сравнении с существующими имеет следующие преимущества:

1. Способ является малоинвазивным, поскольку прогнозирование осуществляется по результатам исследования периферической крови.

2. Предлагаемый способ позволяет с ранних сроков гестации (первый триместр беременности) выявить группу риска по развитию плацентарной недостаточности, что дает возможность осуществления превентивных мероприятий, направленных на профилактику формирования данного патологического состояния.

Работа поддержана Грантом РФФИ и РФФИ-Урал №13-04-96080.

Источники информации

1. Павлова Н.Г. Плацентарная недостаточность: учебно-методическое пособие / Н.Г. Павлова, О.Н. Аржанова, М.С. Зайнулина, А.В. Колобов // СПб.: ООО «Издательство Н-Л», 2007. - 32 с.

2. Оразмурадов А.А. Плацентарная недостаточность: реалии и перспективы. Информационное письмо с комментарием проф. В.Е. Радзинского «Плацентарная недостаточность - опять загадки и предположения» / А.А. Оразмурадов, С.В. Апресян, В.Е. Радзинский. - М., StatusPraesens. - 2009. - 32 с.

3. Болтовская, М.Н. Анализ результатов клинического испытания ПАМГ-теста у беременных группы риска / М.Н. Болтовская, М.И. Маршицкая, С.В. Назимова и соавт.// Акушерство и гинекология. - 1999. - №6. - С. 11-13.

4. Таранов, А.Г. Лабораторная диагностика в акушерстве и гинекологии: Справочник. / А.Г. Таранов, - М.: ЭликсКом, 2004. - 79 с.

5. Федорова, М.В. Плацентарная недостаточность / М.В. Федорова // Акушерство и гинекология. - 1997. - №5. - С 40-43.

6. Башмакова Н.В. Способ прогнозирования компенсированной и субкомпенсированной форм хронической фетоплацентарной недостаточности во II половине беременности / Н.В. Башмакова, Л.П. Заварзина, А.Д. Мазуров // Патент RU 2130185 от 10.05.1999.

7. Замалеева, Р.С. Диагностическое значение маркеров риска развития плацентарной недостаточности при невынашивании беременности / Р.С. Замалеева // Матер. V Рос. форума "Мать и дитя": тез.докл. (Москва, 6-10 октября 2003 г). - М., - 2003. - С.

8. Орлов А.В. Способ прогнозирования фетоплацентарной недостаточности / А.В. Орлов, И.И. Крукиер, Т.Н. Погорелова, В.В. Авруцкая, Л.А. Донченко // Патент RU №2238567 от 20.10.2004 г.

9. Газиева И.А. Способ прогнозирования развития плацентарной недостаточности / И.А. Газиева, Г.Н. Чистякова, И.И. Ремизова, М.Н. Тарасова, Н.М. Паначева // Патент RU №2521367 от 30.04.2014 г.

10. Комилова М.С. Значение эндотелия в развитии осложнений гестационного периода / М.С. Комилова, Ж.Е. Пахомова // Российский вестник акушера-гинеколога. 2015. №1. С.18-23.

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для прогнозирования развития плацентарной недостаточности в первом триместре беременности у женщин после процедуры экстракорпорального оплодотворения. Способ заключается в определении в ранние сроки беременности содержания ренина, эндоглина и растворимого рецептора-1 к васкуло-эндотелиальному фактору роста (sVEGF-R1) в сыворотке крови женщины с последующим вычислением прогностического индекса PI. При РI>0 прогнозируют развитие плацентарной недостаточности во второй половине беременности, при PI<0 делают заключение о низком риске развития данного патологического состояния, а при PI равном нулю проводят повторное исследование через две недели. Предлагаемый способ позволяет повысить до 88% эффективность прогноза развития плацентарной недостаточности у женщин, беременность которых наступила в результате вспомогательных репродуктивных технологий с первого триместра гестации, что дает возможность осуществления превентивных мероприятий, направленных на профилактику формирования данного патологического состояния. 3 пр.

Способ прогнозирования развития плацентарной недостаточности при беременности, индуцированной экстракорпоральным оплодотворением, отличающийся тем, что в первом триместре беременности определяют содержание содержания ренина, эндоглина и растворимого рецептора-1 к васкуло-эндотелиальному фактору роста (sVEGF-R1) в сыворотке крови женщины, вычисляют прогностический индекс (PI) по формуле:

PI=11,7-0,003×X₁-1,18×Х₂-0,95×Х₃, где

X₁ - содержание ренина, пг/мл,

Х₂ - содержание эндоглина, пг/мл,

Х₃ - содержание sVEGF-R1, нг/мл

и при PI более 0 прогнозируют развитие плацентарной недостаточности во второй половине беременности, при PI менее 0 делают заключение о низком риске развития данного патологического состояния, а при PI равном нулю проводят повторное исследование через две недели.