Состав для стимуляции неспецифической резистентности и обмена веществ у цыплят-бройлеров Российский патент 2017 года по МПК A61K31/194 A61K31/426 A61K33/04 A61K33/30 A61K33/34 A61P3/00 A61P37/00 

Изобретение относится к ветеринарной медицине и может быть использовано в птицеводстве как биологически активная добавка для стимуляции неспецифической резистентности, метаболических процессов, профилактики иммунных дефицитов у цыплят-бройлеров.

В бройлерном производстве одной из ключевых проблем является полная реализация генетического потенциала и биологических возможностей организма современных высокопродуктивных кроссов птицы. Организм молодняка птицы отличается от взрослых рядом особенностей функционирования организма, в т.ч. и такими, как неспецифическая резистентность и иммунная реактивность, которые обеспечивают устойчивость к заболеваниям.

Пищеварительная система во взаимоотношениях организма птицы с внешней средой занимает ведущее место ввиду того, что слизистая оболочка органов пищеварения имеет многоуровневую защиту. Она включает многочисленные лимфоидные образования (миндалины, лимфоидные узелки, лимфоидные бляшки), являющиеся биологическими фильтрами на пути тока лимфы от органов пищеварения, а также диффузно ассоциированная с органами пищеварения лимфоидная ткань, осуществляющие иммунный надзор за всем содержимым как на поверхности слизистой, так и в ее толще. Органы пищеварения принимают участие в инактивации антигенов различной природы, элиминации комплексов антиген + антитело, синтезе иммуноглобулинов (IgA), компонентов комплемента и в других процессах, связанных с формированием неспецифической резистентности и иммунитета.

В постнатальный период развития птицы в становлении иммунной защиты организма на лимфоидную ткань желудочно-кишечного тракта ложится основная нагрузка антигенного материала кормовой и микробной природы. Миграция и рециркуляция иммунокомпетентных клеток через кишечник обеспечивает контакт с большинством антигенов, с которыми организм сталкивается в окружающей среде. В дальнейшем эти клетки - лимфоциты памяти расселяются по всему организму, обеспечивая местную и системную защиту.

У цыплят выделяют три возрастных иммунных дефицита. Первый регистрируется на 3-5 сутки жизни, который характеризуется лейкопенией, снижением в крови количества лимфоцитов главным образом за счет Т-клеток. В сыворотке крови уменьшается содержание общего белка, иммуноглобулинов всех классов и особенно IgG, падает литическая активность лизоцима. Второй - на 12-28 сутки жизни цыплят, развитие его начинается с резкого снижения уровня иммуноглобулинов в сыворотке крови, особенно IgM, и в меньшей степени IgG и IgA (И.М. Карпуть, М.П. Бабина. Профилактика иммунных дефицитов и желудочно-кишечных болезней у цыплят-бройлеров // Ветеринария, - 2000. - №1. - С. 41-44; М.П. Бабина. Иммунология цыплят-бройлеров в онтогенезе и профилактика иммунной недостаточности, желудочно-кишечных болезней бактериальными препаратами. Витебск 2001, 114 с.).

Проблему профилактики возрастных иммунных дефицитов, стимуляции метаболических процессов у цыплят пытаются решать применением биологически активных веществ аэрозольно или через систему водопоения, а также с помощью введения в корма биологических добавок, содержащих энерго- и иммуностимуляторы, пробиотики и т.д. Однако такие средства в основном узкого спектра действия и значительного эффекта не дают.

Имеется достаточно большой выбор добавок для введения их в корма с вышеизложенной целью. Например, кормовые добавки, содержащие в качестве компонентов, повышающих резистентность, каротиносодержащую биомассу дрожжей (патент РФ 2122807, 1998); экстракт мумие (патент РФ 2125380, 1999); тыквенный жмых (патент РФ 2125881, 1999).

Известна биологически активная кормовая добавка для животных и птиц (патент РФ 2265368, 2005), содержащая жидкие гуматы калия, натрия и кремнийсодержащие компоненты, при концентрации гуминовых кислот в добавке не менее 4,5 г/л, кремния не менее 0,3% от общей массы, натрия и калия - 0,08 и 0,43% от общей массы. Включают ее в рацион сельскохозяйственных животных и птиц с жидкими, сухими и пастообразными кормами, из расчета 0,4-0,5 мл на 1 кг живой массы животных, ежедневно 1 раз в сутки в течение всего периода выращивания. Скармливание продукта птице позволяет увеличить среднесуточные приросты живой массы, уменьшить падеж, но получение жидкого гумата довольно сложный и трудоемкий процесс. Более того, данная кормовая добавка не позволяет решить комплексную задачу увеличения сохранности поголовья и его продуктивности, повышения естественной резистентности птицы, а также обогащения конечной продукции дефицитными микроэлементами, значительно повышающими ее качество.

В последние годы в составы комплексных иммунометаболических препаратов стали включать органические кислоты из цикла трикарбоновых. Известна композиция биологически активной кормовой добавки для усиления иммунной защиты и повышения усвояемости кормов сельскохозяйственных, домашних животных и птицы (патент РФ №2265366, 2005). В ее составе содержатся высушенная биомасса Вас. subtilis и Вас. Lichenifomis соответственно в соотношении 50:50, смесь фосфорилированных форм сахаров в виде кальциевых солей, органические кислоты цикла трикарбоновых: фумаровая и янтарная или их соли в соотношении 1:3, лимонная, аскорбиновая кислоты, витамин В12. Опыт ее применения в птицеводстве показал, что данная добавка улучшает обмен энергии в организме, в результате незначительно увеличиваются продуктивные показатели, но на резистентность поголовья не влияет. Кроме того, указанная кормовая добавка имеет высокую стоимость и при ее реализации возникают экономические трудности.

Все перечисленные или аналогичные биологически активные добавки комплексно проблему не решают, содержащие в них в качестве активного начала вещества животного, растительного или микробного происхождения многокомпонентны, нередко плохо сочетаемы, не позволяют добиться получения эффективных положительных результатов.

Известен препарат для усиления обменных процессов и иммунитета у сельскохозяйственных животных и птицы (патент РФ 2259832, 2005). Препарат содержит следующие ингредиенты при соотношении, вес. %: рибоксин 10,0-40,0, кальция глицерофосфат 30,0-40,0, витамин B₁₂ 0,02-0,04, аскорбиновая кислота 2-4, лимонная кислота 2-4, янтарная кислота 2-4, фолиевая кислота 1-2, фруктоза 5-10, глюкоза - до 100. Включение препарата в комбикорм для кур-несушек благодаря повышенному усвоению питательных веществ способствовало повышению яйценоскости в среднем на 10%, снижению затрат комбикорма для получения 100 штук яиц на 5,6%, улучшению конверсия корма на 10%. Однако данный препарат не обладает способностью активизировать неспецифическую резистентность организма птицы, в его состав входят достаточно дорогостоящие компоненты, что снижает его применение.

Разработан ряд комплексных иммунометаболических препаратов, в которых биологически активным соединением, оказывающим направленное стимулирующее действие на обменные процессы и функции ряда систем и органов, является янтарная кислота (C₄H₆О₄), а имунностимулирующими средствами - АСД Ф-2 (патент РФ 2303979, 2007), нуклеинат натрия или деринат натрия/дезоксирибонуклеат (патент РФ 2395278, 2010). Данные препараты предназначены для внутримышечного применения, что затрудняет их использование при выращивании мясных цыплят.

В качестве прототипа взят иммунометаболический антгельминтный препарат, в состав которого входит янтарная кислота и иммуностимулирующее средство левамизол при следующем соотношении, мас. %: левамизол 7,5; янтарная кислота 1,0; вода остальное (патент РФ 2411944, 2011).

Недостатком прототипа является ограниченность применения в птицеводстве, обусловленная его инъекционной формой, и отсутствие компонентов, стимулирующих минеральный обмен.

Технической задачей изобретения является разработка нового способа получения жидкого эффективного и экономичного биостимулирующего состава с комплексным иммуно- и ростстимулирующим действием.

Решение технической задачи достигается тем, что для получения биостимулирующего состава с комплексным иммунометаболическим действием используют левамизол, янтарную кислоту и водорастворимые сернокислые соли основных микроэлементов.

Производное фениламидазотиазола - левамизол оказывает комплексное влияние на иммунную систему: увеличивает выработку антител на различные антигены, усиливает Т-клеточный ответ, активируя Т-лимфоциты и стимулируя их пролиферацию, повышает функции моноцитов, макрофагов и нейтрофилов (Справочник ВИДАЛЬ «Ветеринарные препараты в России», 2013).

Включение в биостимулирующий состав янтарной кислоты (C₄H₆О₄, ГОСТ 6341-75), которая является катализатором биоэнергетических процессов, направлено на усиление клеточного дыхания и усвоение кислорода клетками. Для организма растущих цыплят важны также ее антиоксидантные и пробиотические свойства, участие в нейтрализации токсинов, активации ряда важнейших ферментов.

Добавление комплекса микроэлементов значительно усиливает биологическую активность состава, т.к. они являются кофакторами (входят в состав простетических групп) целого ряда ферментов или компонентами других физиологически активных веществ. Железо занимает центральное место в молекуле гемоглобина, выполняет в организме окислительные функции. Медь принимает участие в гемопоэзе, катализирует включение железа в структуру гемма, способствует созреванию эритроцитов. Цинк является компонентом или активатором ферментов - карбоксипептидазы, карбоангидразы, аргиназы, щелочной фосфатазы и др. Кобальт – составная часть витамина В₁₂, который участвует во многих обменных процессах, кроветворении.

Технологический процесс получения биостимулирующего состава включает следующие этапы:

- в колбу с 500 мл дистиллированной воды вносили 5,0 г порошка янтарной кислоты;

- при постоянном помешивании содержимое нагревали до 38-40°C;

- в теплый раствор при перемешивании последовательно вносили навески, содержащие 10,0 г сульфата железа; 1,0 г сульфата меди; 3,0 г сульфата цинка; 10,0 г сульфата кобальта;

- после полного растворения компонентов раствор охлаждали до 30°C и вносили 3,75 г левамизола;

- дробным добавлением 10% раствора гидроокиси натрия доводили pH состава до 6,7- 7,0.

Оптимальное количество янтарной кислоты (10 мг/мл, 1%), необходимой для снижения токсичности левамизола, было определено в серии ранее проведенных опытов (патент РФ 2411944, 2011).

Выбранные количества компонентов, входящих в предлагаемый биостимулирующий состав, были определены опытным путем и обоснованы тем, что такое соотношение компонентов является наиболее эффективным.

При уменьшении левамизола (менее 0,75%) снижаются иммуностимулирующие свойства состава, уменьшение янтарной кислоты (менее 1,0%) не обеспечивает метаболического эффекта, снижения токсичности левамизола. Уменьшение водорастворимых солей ниже указанных значений сопровождается снижением ростстимулирующего действия состава. Увеличение всех компонентов выше верхних значений существенного влияния на биостимулирующие свойства состава не оказывало.

Оценку острой токсичности полученного состава проводили по стандартной методике на 10 белых мышах, определяли летальную дозу ЛД₅₀ при пероральном введении. Исследования показали, что острая токсичность заявляемого состава (ЛД₅₀) - 24000 мг/кг.

Пример 1. Ростстимулирующую оценку состава провели на двух группах (по 10 голов в каждой) беспородных мышей с исходной живой массой тела 10,5-11,5 г. Опытным мышам испытуемый состав вводили перорально принудительно в объеме 1 мл три раза с интервалом в 24 часа, контрольным - такое же количество изотонического раствора натрия хлорида. Результаты исследований представлены в таблице 1. Как следует из данных таблицы, испытуемый состав оказал заметное влияние на рост мышей опытной группы.

Пример 2. Влияние приготовленного состава на обмен веществ, неспецифическую резистентность и зоотехнические показатели исследовали на 60 цыплятах-бройлерах кросса «Cobb-500». В суточном возрасте из них по принципу аналогов сформировали две группы по 30 цыплят в каждой. Птице скармливался комбикорм, питательная и энергетическая ценность которого соответствовала возрастному периоду и нормам, рекомендованным ВНИТИП. Цыплята первой группы получали основной рацион + выпаивание испытуемого состава в разведении 1:3 (1 часть препарата и 3 части воды) в следующие возрастные периоды (сут): 5-6; 12-14; 16-18; 20-22; 24-26; 27-35. Вторая группа служила контролем.

В период опыта за цыплятами вели клиническое наблюдение, определяли живую массу, среднесуточный прирост и сохранность. Для гематологических и биохимических исследований из каждой группы выделяли по 10 цыплят. Кровь отбирали при убое птицы в возрасте 40-суток из вены с внутренней стороны крыла над локтевым сочленением. В цельной крови или ее сыворотке общепринятыми методами крови определяли содержание эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, показатели, характеризующие состояние обменных процессов и неспецифическую резистентность.

Результаты исследований показали, что живая масса цыплят опытной группы, начиная с двухнедельного возраста, превышала показатели контроля (табл. 2). Причем с 21-суточного возраста и до конца опыта выявленные различия были статистически достоверными (Р<0,05).

Среднесуточный прирост живой массы птицы, получавшей биостимулирующий состав, был выше контрольной группы на 8,08 г. Сохранность цыплят-бройлеров опытной группы в процессе выращивания была выше на 3,2%.

Представленные в таблице 3 данные, характеризующие морфологические и биохимические показатели крови, свидетельствуют о том, что ряд показателей опытных цыплят заметно превышал значения контроля. Так, повышенное количество в крови эритроцитов и гемоглобина, по-видимому, связано со стимулирующим влиянием испытуемого состава на эритропоэз, без изменения стабильности этого процесса в целом.

Об активизации окислительно-восстановительных, дыхательных и метаболических процессов, протекающих в организме бройлеров опытной группы, можно судить по щелочному резерву крови, концентрации общего белка, глюкозы, кальция и фосфора.

Что касается микроэлементов, то их более высокий уровень определенно связан с их поступлением в составе испытуемого препарата, в котором их содержание представлено оптимальным биологическим соотношением, в результате они легко всасываются в кровь. Не следует исключать и общее биостимулирующее влияние состава на метаболизм этих микроэлементов, что обеспечивает их активное всасывание в кишечнике при расщеплении компонентов комбикорма.

При определении активности аминотрансфераз (АсАТ, АлАт) было установлено, что у подопытных цыплят она относительно невысокая, что наглядно доказывает отсутствие функциональных изменений в печени бройлеров как контрольной, так и опытной групп.

Выпаивание биологически активного состава бройлерам опытной группы оказало положительное влияние на неспецифическую резистентность их организма, что подтверждается результатами исследований бактерицидной (БАСК) и лизоцимной (ЛАСК) активности сыворотки крови (табл. 4).

К концу выращивания показатель БАСК у цыплят, получавших биостимулятор, по сравнению с контролем был выше на 2,78%, а ЛАСК соответственно - на 4,85%.

Таким образом, результаты проведенных исследований показали, что биостимулирующий состав, содержащий иммуномодулятор левамизол, янтарную кислоту и комплекс микроэлементов, направленно активизирует метаболические процессы и неспецифическую резистентность организма растущих цыплят-бройлеров.

Группа изобретений относится к области ветеринарии и предназначена для повышения неспецифической резистентности организма и обмена веществ у мясных цыплят. Заявленный состав включает левамизол в качестве иммуномодулятора, янтарную кислоту как биологически активное соединение, водорастворимые соли железа, меди, цинка, кобальта и воду при следующем соотношении компонентов, мас. %: левамизол - 0,75, янтарная кислота - 1,0, сульфат железа - 2,0, сульфат меди - 0,2, сульфат цинка - 0,6, сульфат кобальта - 2,0, дистиллированная вода - остальное. Способ включает применение заявленного состава. Состав в разведении с водой 1:3 выпаивают цыплятам-бройлерам в следующие возрастные периоды, сут: 5-6; 12-14; 16-18; 20-22; 24-26; 27-35. 2 н.п. ф-лы, 4 табл., 2 пр.

1. Состав для стимуляции неспецифической резистентности и обмена веществ у цыплят-бройлеров, включающий левамизол в качестве иммуномодулятора, янтарную кислоту как биологически активное соединение и воду, отличающийся тем, что дополнительно содержит водорастворимые соли железа, меди, цинка, кобальта при следующем соотношении компонентов, мас. %:

левамизол 0,75 янтарная кислота 1,0 сульфат железа 2,0 сульфат меди 0,2 сульфат цинка 0,6 сульфат кобальта 2,0 дистиллированная вода остальное

2. Способ применения состава по п. 1, заключающийся в том, что состав в разведении с водой 1:3 выпаивают цыплятам-бройлерам в следующие возрастные периоды, сут: 5-6; 12-14; 16-18; 20-22; 24-26; 27-35.