СПОСОБ МОРФОЛОГИЧЕСКОЙ ОЦЕНКИ ВЛИЯНИЯ РАЗЛИЧНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ ЖЕЛЕЗА ДЛЯ ЭНТЕРАЛЬНОГО ПРИМЕНЕНИЯ НА ТОНКИЙ ОТДЕЛ КИШЕЧНИКА У ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ Российский патент 2018 года по МПК A61B5/00 A61D99/00 A61K33/26 A61P1/00 A61P3/00 

Изобретение относится к области ветеринарии, а именно к патологической анатомии и токсикологии, и может быть использовано для определения степени патологического воздействия препаратов железа для энтерального применения на тонкий отдел кишечника экспериментальных животных.

Способ заключается в исследовании патогистологических изменений тонкого отдела кишечника с выявлением характерных морфологических изменений, указывающих на степень повреждения органа под влиянием энтеральных препаратов железа.

Алиментарная железодефицитная анемия является одной из самых распространенных патологий, отмечаемых у молодняка разных видов животных в условиях промышленного животноводства [3, 4].

Одним из путей решения данной проблемы следует считать изыскание эффективных и безопасных средств для лечения и профилактики железодефицитной анемии. В настоящее время применяют препараты железа для энтерального и парентерального (внутримышечного и внутривенного) введения [2, 4]. Однако несмотря на значительный ассортимент железосодержащих препаратов многие из них имеют значительные недостатки. Побочные эффекты после энтерального применения препаратов железа наблюдают в очень широком диапазоне клинических проявлений: от диареи и рвоты, до аллергии и анафилактического шока, при этом диспепсические расстройства являются самыми распространенными [1, 2, 5].

При комплексной оценке и выборе железосодержащих препаратов необходимо учитывать и их влияние на морфологию органов животных.

Известен способ диагностики отравлений тяжелыми металлами (заявка №2576496 от 03.02.1978, опубл. 05.07.1980. Бюл. №25). Однако данный способ предназначен для диагностики отравлений тяжелыми металлами в целом, не останавливаясь избирательно на каком-либо из них, поэтому использование его для определения эффективности препаратов на основе микроэлемента железа совершенно неинформативно, так как он не учитывает его специфического влияния на органы. Кроме того, данный способ основывается на исследовании крови, тогда как в нашем методе мы применяем морфологическое изучение тканей тонкого отдела кишечника. Также к недостаткам способа относится отсутствие оценки степени тяжести развивающихся нарушений.

Также известен способ диагностики функциональной патологии илеоцекального отдела кишечника (заявка №2005130104/14 от 19.09.2005, опубл. 27.11.2007. Бюл. №33). Недостатком этого способа является применение только специальных клинических методов исследования путем выполнения эндоскопической интубации с определением функциональных изменений кишечника без учета морфологических изменений в тканях этого органа. Кроме того, данный метод предлагает способ диагностики патологии толстой кишки и терминального отдела подвздошной кишки, не учитывая изменений в тонком отделе кишечника.

В предлагаемом нами способе диагностики и оценки используется наиболее объективный гистологический метод исследования с последующей бальной оценкой полученных результатов и выявления степени повреждения органа, что позволяет наиболее точно определить тяжесть воздействия энтеральных препаратов железа на тонкий отдел кишечника экспериментальных животных.

Задачей изобретения является создание способа морфологической оценки влияния различных лекарственных форм железа для энтерального применения на тонкий отдел кишечника экспериментальных животных.

Целью изобретения является создание объективного метода оценки тяжести воздействия энтеральных препаратов железа на морфологию тонкого отдела кишечника экспериментальных животных.

Техническим результатом заявленного изобретения является повышение точности и упрощение определения степени воздействия различных лекарственных форм железа для энтерального применения на тонкий отдел кишечника экспериментальных животных.

Указанный технический результат достигается путем системного пошагового морфологического анализа состояния тонкого отдела кишечника у экспериментальных животных при изучении структуры органа по гистологическим срезам, окрашенным гематоксилином и эозином, а также по Перлсу на соединения железа (для выявления гемосидерина), изготовленным по стандартным методикам.

Структурные изменения тканей кишечника оценивают по выявлению 7 основных морфологических критериев, отражающих альтеративные и компенсаторно-приспособительные процессы в органе.

В качестве морфологических критериев были избраны следующие: десквамация эпителия слизистой оболочки, некроз слизистой оболочки, артериально-венозная гиперемия, кровоизлияния, отек слизистой оболочки, гемосидероз энтероцитов, гемосидероз фагоцитов.

Каждому критерию присваивают балльную оценку согласно таблице 1.

За условную единицу выраженности морфологических критериев принята величина 1 балл. В случае если признак полностью отсутствует, изучаемому критерию присваивается значение 0 баллов, если признак слабо выражен, то он имеет значение 1 балл, если признак умеренно выражен, то его значение будет составлять 2 балла, если признак ярко выражен, то он будет ровняться 3 баллам.

Интегральное значение степени повреждения кишечника (СПК) в каждом конкретном случае оценивают по формуле:

где Σ(D, N, Hyp, Haim, Oed, Sid1, Sid2) - сумма баллов всех критериев между собой,

n - число морфологических критериев равное 7.

Минимальное значение степени повреждения кишечника (СПК) - 0 баллов; максимальное значение СПК - 3 балла.

Измеряя степень повреждения кишечника (СПК), можно определить тяжесть воздействия различных лекарственных форм железа для энтерального применения на тонкий отдел кишечника, сверяя полученный показатель с таблицей 2.

Таким образом, степень влияния различных лекарственных форм железа для энтерального применения на тонкий отдел кишечника у экспериментальных животных оценивается путем патогистологического анализа исследуемого органа с определением 7 основных морфологических критериев, отражающих альтеративные и компенсаторно-приспособительные процессы в органе, выражение их в виде баллов, с последующим расчетом степени повреждения кишечника (СПК).

Литература

1. Антипов А.А. Влияние энтеральных лекарственных препаратов железа на клиническое состояние крыс и морфологию кишечника в эксперименте по изучению острой токсичности / А.А. Антипов, А.А Дельцов //РВЖ.СХЖ. - 2014. - №1. - С. 16-19.

2. Ариповский А.В. Предпочтительная химическая природа соединений металлов, используемых в качестве пищевого источника / А.В. Ариповский, А.А. Дельцов // Звероводство. - 2011. - №5. С. 28-31.

3. Карелин А.И. Анемия поросят / А.И. Карелин. - М.: Россельхозиздат. - 1983. - 166 с.

4. Уразаев Д.Н. Биологическая роль железа. Применение железосодержащих препаратов в ветеринарной медицине: монография / Д.Н. Уразаев, А.А. Дельцов, Л.П. Парасюк, Р.Д. Уразаева. - М.: Колос.- 2010. - 104 с.

5. Kurtoglu Е. Effect of iron supplementation on oxidative stress and antioxidant status in iron-deficiency anemia / E. Kurtoglu, A. Ugur, A.K. Baltaci, L. Undar // Biol. Trace Elem. Res. - 2003. - V. 96. - N. 1-3. - P. 117-123.

Изобретение относится к медицине, а именно к ветеринарии. Проводят патогистологическое исследование тканей тонкого отдела кишечника. Определяют морфологические критерии: десквамация эпителия слизистой оболочки, некроз слизистой оболочки, артериально-венозная гиперемия, кровоизлияния, отек слизистой оболочки, гемосидероз энтероцитов, гемосидероз фагоцитов. Далее проводят балльную оценку критериев. Вычисляют степень влияния лекарственных форм железа на тонкий кишечник (СПК) по заявленной формуле. Значение СПК от 0 до 1,2 баллов включительно оценивают как повреждение легкой степени. СПК от 1,3 до 1,9 баллов включительно - как повреждение средней степени. СПК от 2,0 до 3,0 баллов включительно - как повреждение тяжелой степени. Способ позволяет точно и просто провести морфологическую оценку влияния различных лекарственных форм железа для энтерального применения на тонкий отдел кишечника у экспериментальных животных за счет определения наиболее значимых морфологических критериев. 2 табл.

Способ морфологической оценки влияния различных лекарственных форм железа для энтерального применения на тонкий отдел кишечника у экспериментальных животных, включающий патогистологическое исследование тканей тонкого отдела кишечника с последующим определением морфологических критериев: десквамация эпителия слизистой оболочки, некроз слизистой оболочки, артериально-венозная гиперемия, кровоизлияния, отек слизистой оболочки, гемосидероз энтероцитов, гемосидероз фагоцитов; далее каждому критерию присваивают балльную оценку, согласно таблице 1, содержащейся в описании; вычисляют степень влияния лекарственных форм железа на тонкий кишечник по формуле: СПК=Σ(D, N, Hyp, Haim, Oed, Sid1, Sid2)/n, где Σ(D, N, Hyp, Haim, Oed, Sid1, Sid2) - сумма баллов всех критериев между собой, n - число морфологических критериев равное 7, при этом значение СПК в диапазоне величин от 0 до 1,2 баллов включительно оценивают как повреждение легкой степени, СПК в диапазоне величин от 1,3 до 1,9 баллов включительно - как повреждение средней степени, СПК в диапазоне величин от 2,0 до 3,0 баллов включительно - как повреждение тяжелой степени.