Способ прогнозирования лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы Российский патент 2018 года по МПК G01N33/48 G01N33/574 

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способов прогнозирования риска возникновения лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы.

В настоящее время, согласно литературным данным, при раке молочной железы выделяют несколько факторов, ассоциированных с риском развития лимфогенной диссеминации. Одним из таких факторов является размер первичной опухоли. При размере первичного опухолевого узла до 0,5 см частота метастатического поражения регионарных лимфатических узлов достигает 18%. Данный показатель повышается до 46% при увеличении размера первичной опухоли от 0,5 до 1,0 см [1]. Кроме того, к важнейшим факторам, определяющим риск поражения аксиллярных лимфатических узлов метастазами, относят гистологический тип новообразования и выраженность инфильтративного компонента ткани опухоли молочной железы. Известен тот факт, что внутриэпителиальный рак молочной железы не метастазирует. В свою очередь, при инвазивном протоковом раке с преобладанием внутрипротокового компонента метастазы в регионарных лимфатических узлах регистрируются довольно редко - лишь в 4,2% случаев. Чаще лимфогенная диссеминация наблюдается при апокриновом раке - 51,6%, при раке Педжета соска - 64% и воспалительном раке молочной железы - 73% [1].

Необходимо сказать, что большое количество работ посвящено изучению особенностей течения, клинико-морфологических и молекулярно-генетических параметров, закономерностей лимфогенного и гематогенного метастазирования, а также рецидивирования при различных молекулярно-генетических типах рака молочной железы. Однако одной из важных проблем современной онкологии, несмотря на многочисленные исследования злокачественных новообразований данной локализации, все же остается вопрос прогнозирования течения злокачественных новообразований с целью предсказания развития разных форм опухолевой прогрессии, в том числе лимфогенного метастазирования [4].

Известно, что инвазия и метастазирование, как два тесно связанных друг с другом процесса, представляют собой основные формы опухолевой прогрессии при развитии злокачественных новообразований различных локализаций, в том числе и при раке молочной железы [5, 6]. С этой точки зрения, изучение инвазивных свойств опухоли и сопоставление их с параметрами лимфогенного метастазирования представляет большой интерес. В литературе широко обсуждается роль транскрипционного фактора Snail и интегриновых рецепторов семейства β1 и β3 в процессах инвазивного роста опухоли. Экспрессия данных маркеров в ткани новообразования расценивается как показатель наличия повышенных инвазивных свойств, что указывает на более агрессивный характер опухоли и повышенный потенциал карциномы к диссеминации, в частности к лимфогенной [5]. В связи с этим в нашем исследовании была предпринята попытка определения экспрессионных особенностей определенных маркеров, ассоциированных с инвазивным ростом опухоли, в разных структурах инфильтративного компонента карциномы неспецифического типа молочной железы. Выявленные особенности экспрессионных характеристик маркеров были сопоставлены с параметрами лимфогенного метастазирования. В результате исследования было сделано заключение о том, что между экспрессией маркеров инвазии в определенных структурах инфильтративного компонента опухоли молочной железы и параметрами лимфогенной диссеминации существует отчетливая взаимосвязь. Данное обстоятельство позволило разработать способ прогнозирования риска лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы.

Наиболее близким к настоящему способу является способ определения риска лимфогенного метастазирования при раке молочной железы P. Scarff, Н. Bloom и W. Richardson (модифицированная схема). Суть данного способа основывается на определении при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы такого показателя, как степень злокачественности опухоли. При данном способе проводят морфологическое исследование ткани новообразования на светооптическом уровне. В инфильтративном компоненте ткани опухоли осуществляют подсчет тубулярных структур, количества митозов в 10 полях зрения при увеличении × 400, а также определяют выраженность клеточного полиморфизма. Каждый из перечисленных трех показателей оценивается в баллах - от 1 до 3. При наличии в инфильтративном компоненте более 75% тубулярных структур от общего объема опухоли данный показатель оценивается в 1 балл, от 10 до 75% - в 2 балла, при величине менее 10% данный показатель оценивается в 3 балла. Подсчет количества митозов проводится в 10 случайно выбранных полях зрения при увеличении × 400. Если число митозов в 10 полях зрения составляет менее 10, то данный показатель оценивается в 1 балл, от 10 до 20 митозов - в 2 балла, при наличии более 20 митозов в 10 полях зрения показатель оценивается в 3 балла. Клеточный полиморфизм оценивается по размерам и форме опухолевых клеток и их ядер. Мелкие опухолевые клетки, имеющие одинаковые размеры и форму, с равномерным распределением хроматина в ядре и отсутствием ядрышек оцениваются в 1 балл. В случаях, при которых опухолевая ткань представлена слегка увеличенными в размерах опухолевыми клетками, в части которых ядра характеризуются резко неправильной формой и отличаются большими размерами, данный показатель оценивается в 2 балла. При наличии в ткани новообразования крупных опухолевых клеток с крупными, различной формы ядрами, с одним или несколькими ядрышками, с грубым хроматином показатель клеточного полиморфизма оценивается в 3 балла. После оценки каждого из трех перечисленных параметров подсчитывают сумму баллов, которая соответствует определенной степени злокачественности. Сумма баллов от 3 до 5 соответствует низкой степени злокачественности (I степень), сумма в 6-7 баллов - умеренной (II степень) и 8-9 баллов - высокой степени злокачественности опухоли (III степень). Степень злокачественности опухоли при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы в настоящее время относится к прогностическим критериям лимфогенного метастазирования. Низкая степень злокачественности опухоли молочной железы ассоциируется с низким риском лимфогенного метастазирования, умеренная степень злокачественности имеет промежуточный риск метастазирования. Рак молочной железы, характеризующийся высокой степенью злокачественности, обладает высоким риском лимфогенной диссеминации [2].

Недостатком этого способа является то, что отсутствуют конкретные числовые показатели, позволяющие оценивать риск возникновения лимфогенного метастазирования персонифицировано у каждой пациентки.

Новая техническая задача - создание способа прогнозирования риска лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы, имеющего высокую достоверность, точность и информативность. В результате применения данного способа будут получены достоверные числовые показатели, характеризующие высокую или низкую степень риска возникновения лимфогенной диссеминации у конкретной больной, отражающие прогноз течения опухолевой болезни.

Для решения поставленной задачи в способе прогнозирования лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы путем морфологического исследования препаратов ткани новообразования молочной железы на светооптическом уровне проводят гистологическую оценку инфильтративного компонента ткани опухоли, где выделяют наличие разных типов структур от 1 до 5, среди которых - альвеолярные, тубулярные, трабекулярные, солидные структуры и дискретные группы опухолевых клеток, далее в альвеолярных, тубулярных, трабекулярных и солидных структурах инфильтративного компонента опухоли определяют наличие краудинга, при этом выделяют 2 возможных типа краудинга - по типу изолированного «скучивания» и по типу одновременного сочетания «скучивания» и «наслоения» опухолевых клеток, причем обнаружение участков краудинга по типу «скучивания» клеток оценивают в 1 балл, выявление участков краудинга с вариантом одновременного сочетания «скучивания» и «наслоения» опухолевых клеток оценивают в 2 балла, далее проводят оценку рецепторного статуса путем определения экспрессии рецепторов к половым гормонам - эстрогенам (РЭ) и прогестерону (РП), и пролиферативной активности ткани новообразования путем определения экспрессия Ki67, а также оценивают экспрессию маркеров инвазивного клеточного роста Snail, интегрина β1 и интегрина β3 с использованием иммуногистохимического метода исследования, при этом отсутствие экспрессии рецепторов к прогестерону в структурах ткани опухоли оценивают в 1 балл, а наличие экспрессии в 2 балла, далее определяют наличие участков фокального отсутствия экспрессии РЭ, РП и Ki67 по периферии разных типов структур инфильтративного компонента, наличие данных участков расценивают как факт выявления инвазивного фронта в опухоли и оценивают в 2 балла, отсутствие - оценивают в 1 балл, далее проводят оценку экспрессии маркеров инвазивного клеточного роста Snail, интегрина β1 и интегрина β3, для каждого из перечисленных маркеров отсутствие экспрессии в дискретных группах клеток оценивают в 1 балл, наличие их экспрессии оценивают в 2 балла, далее рассчитывают значение уравнения регрессии Y по формуле:

Y=(-21-25X₁+6,4Х₂+6,5Х₃+7,3X₄-34,0Х₅+42,4Х₆),

где

(-21) - значение коэффициента регрессии свободного члена;

X₁ - вариант краудинга в опухоли (1 - «скучивание», 2 - «скучивание и наслоение»),

(-25) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₂ - наличие экспрессии Snail в дискретных группах опухолевых клеток (1 - нет, 2 - есть),

(6,4) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₃ - наличие экспрессии интегрина β3 в дискретных группах опухолевых клеток (1 - нет, 2 - есть),

(6,5) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₄ - наличие экспрессии интегрина β1 в дискретных группах опухолевых клеток (1 - нет, 2 - есть),

(7,3) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₅ - наличие фронта в опухоли, определяемого по наличию участков фокального исчезновения экспрессии РЭ, РП или Ki67 по периферии структур (1 - нет, 2 - есть),

(-34,0) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₆ - наличие экспрессии РП в опухоли,

(42,4) - значение коэффициента регрессии этого признака;

далее значение вероятности развития лимфогенных метастазов Р определяют по формуле:

Р=e^Y/(1+e^Y),

где е - математическая константа, равная 2,72.

и при вероятности Р≥50% определяют высокий, а при вероятности Р<50% - низкий риск развития лимфогенных метастазов.

Способ осуществляют следующим образом.

Макроскопической оценке подвергают ткань опухоли молочной железы и все удаленные лимфатические узлы. Материал фиксируют в 10-12% растворе нейтрального формалина. Проводку материала и изготовление гистологических препаратов осуществляют по стандартной методике. Препараты окрашивают гематоксилином и эозином. Гистологический тип рака молочной железы устанавливают согласно рекомендациям ВОЗ, Женева, 2012.

Осуществляют гистологическое исследование препаратов ткани новообразования молочной железы на светооптическом уровне, проводят гистологическую оценку инфильтративного компонента ткани опухоли, где выделяют наличие разных типов структур (от 1 до 5), среди которых выделяют альвеолярные, тубулярные, трабекулярные, солидные структуры и дискретные группы опухолевых клеток. Далее в альвеолярных, тубулярных, трабекулярных и солидных структурах инфильтративного компонента опухоли определяют наличие такого морфологического признака, как краудинг. Краудингом обозначается феномен увеличения количества клеток в единице объема вследствие преобладания процессов пролиферации над процессами апоптоза (гибели) клеток. Морфологически краудинг может проявляться в разных структурах инфильтративного компонента опухолевой ткани в виде участков «скучивания» и «наслоения» опухолевых клеток. На основе гистологического исследования структур инфильтративного компонента ткани новообразования нами было предложено выделять 2 возможных типа краудинга - по типу изолированного «скучивания» и по типу одновременного сочетания «скучивания» и «наслоения» опухолевых клеток. Под краудингом по типу «скучивания» клеток понимается более близкое расположение клеток и соответственно их ядер друг к другу в сравнении с характером расположения опухолевых клеток в остальных участках той же структуры. При краудинге по типу одновременного сочетания «скучивания» и «наслоения» клеток отмечают наличие более близкого расположения клеток в структуре в сочетании с наслоением ядер этих клеток друг на друга. Обнаружение при морфологическом исследовании в структурах инфильтративного компонента участков краудинга по типу «скучивания» клеток оценивается как 1, выявление участков краудинга с вариантом одновременного сочетания «скучивания» и «наслоения» опухолевых клеток оценивается как 2 балла.

Далее проводят оценку рецепторного (экспрессия рецепторов к половым гормонам - эстрогенам (РЭ) и прогестерону (РП)) статуса и пролиферативной активности (экспрессия Ki67) ткани новообразования, а также оценивают экспрессию маркеров инвазивного клеточного роста Snail, интегрина β1 и интегрина β3 с применением иммуногистохимического метода исследования.

Иммуногистохимическое исследование осуществляют по стандартной методике. Применяют антитела фирмы «Dako» к рецепторам эстрогенов (клон 1D5, RTU, мышиные), к рецепторам прогестерона (клон PgR636, RTU, мышиные), к KI67 (клон MIB-1, RTU, мышиные), антитела фирмы «Abcam» Anti-Snail antibody (кроличьи поликлональные 1:1600), Anti-Integrin beta 3 antibody [EPR2417Y] ab75872 (кроличьи моноклональные 1:250), Anti-Integrin beta 1 antibody [4B7R] ab3167 (мышиные моноклональные 1:20).

При исследовании иммуногистохимических препаратов оценивают наличие или отсутствие в ткани опухоли экспрессии к половым гормонам (РЭ и РП). В формулу вошел показатель наличия или отсутствия экспрессии в опухолевой ткани рецепторов к прогестерону. Отсутствие экспрессии рецепторов к прогестерону в структурах ткани опухоли оценивают в 1 балла, наличие экспрессии - как 2. Далее определяют наличие участков фокального отсутствия экспрессии РЭ, РП и Ki67 по периферии разных типов структур инфильтративного компонента инвазивной карциномы неспецифического типа молочной железы. Наличие данных участков фокального отсутствия экспрессии РЭ, РП и Ki67 по периферии разных типов структур инфильтративного компонента карциномы расценивают как факт выявления инвазивного фронта в опухоли и оценивают в 2 балла. Соответственно, при отсутствии участков фокального исчезновения экспрессии РЭ, РП и Ki67 по периферии разных типов структур ткани новообразования данный показатель оценивают в 1 балл.

Далее проводят оценку экспрессии маркеров инвазивного клеточного роста Snail, интегрина β1 и интегрина β3. Оценивают наличие или отсутствие экспрессии указанных маркеров в дискретных группах опухолевых клеток инфильтративного компонента ткани опухоли молочной железы. Для каждого из перечисленных маркеров отсутствие экспрессии в дискретных группах клеток оценивают в 1 балл, наличие их экспрессии оценивают в 2 балла.

Далее рассчитывают значение уравнения регрессии Y по формуле:

Y=(-21-25X₁+6,4Х₂+6,5Х₃+7,3X₄-34,0Х₅+42,4Х₆),

где

(-21) - значение коэффициента регрессии свободного члена;

X₁ - вариант краудинга в опухоли (1 - «скучивание», 2 - «скучивание и наслоение»),

(-25) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₂ - наличие экспрессии Snail в дискретных группах опухолевых клеток (1 - нет, 2 - есть),

(6,4) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₃ - наличие экспрессии интегрина β3 в дискретных группах опухолевых клеток (1 - нет, 2 - есть),

(6,5) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₄ - наличие экспрессии интегрина β1 в дискретных группах опухолевых клеток (1 - нет, 2 - есть),

(7,3) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₅ - наличие фронта в опухоли, определяемого по наличию участков фокального исчезновения экспрессии РЭ, РП или Ki67 по периферии структур (1 - нет, 2 - есть),

(-34,0) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₆ - наличие экспрессии РП в опухоли,

(42,4) - значение коэффициента регрессии этого признака.

Далее значение вероятности развития лимфогенных метастазов Р определяют по формуле:

Р=e^Y/(1+e^Y),

где е - математическая константа, равная 2,72.

При вероятности Р≥50% определяется высокий риск развития лимфогенных метастазов, при вероятности Р<50% - низкий риск развития лимфогенных метастазов.

Модель имеет высокую степень достоверности χ²=17,6; р=0,007.

Чувствительность модели составила 100%, специфичность - 100%.

Сущность предлагаемого способа иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Пациентка Л., 68 лет, с инвазивной карциномой неспецифического типа молочной железы. Пациентка в менопаузе, размер первичного опухолевого узла 3 см. При морфологическом и иммуногистохимическом исследовании в структурах инфильтративного компонента ткани опухоли определялся краудинг по типу «скучивания» клеток (1), не было выявлено фронта инвазии по экспрессии РЭ, РП и КА67 (1), в опухоли отсутствовала экспрессия РП (1), кроме того, в дискретных группах опухолевых клеток была обнаружена экспрессия Snail (2) и интегрина β3 (2), экспрессия интегрина β1 в дискретных группах клеток отсутствовала (1). Риск развития лимфогенных метастазов оценивался по формуле:

Y=-21-25Х₁+6,4Х₂+6,5Х₃+7,3X₄-34,0Х₅+42,4Х₆=-21-25×1+6,4×2+6,5×2+7,3×1-34,0×1+42,4×1=-21-25+12,8+13+7,3-34,0+42,0=-4,9.

Значение вероятности развития лимфогенных метастазов определялся по формуле: Р=e^Y/(1+e^Y)=2,72^-4,9/(1+2,72^-4,9)=0,007/1,007=0,01. Вероятность развития лимфогенных метастазов составила 1%. В операционном материале в 5 аксиллярных лимфатических узлах метастазов не было обнаружено.

Пример 2. Больная И., 74 года, с инвазивной карциномой неспецифического типа молочной железы. Пациентка в менопаузе, размер первичного опухолевого узла 3,5 см. При морфологическом и иммуногистохимическом исследовании в структурах инфильтративного компонента ткани опухоли определялся краудинг по типу «скучивания» клеток (1), был выявлен фронт инвазии по экспрессии РЭ, РП и Ki67 (2), в опухоли отмечалась экспрессия РП (2), кроме того, в дискретных группах опухолевых клеток была обнаружена экспрессия Snail (2) и интегрина β3 (2), экспрессия интегрина β1 в дискретных группах клеток отсутствовала (1). Риск развития лимфогенных метастазов оценивался по формуле:

Y=-21-25Х₁+6,4Х₂+6,5Х₃+7,3X₄-34,0Х₅+42,4Х₆=-21-25×1+6,4×2+6,5×2+7,3×1-34,0×2+42,4×2=-21-25+12,8+13+7,3-68+84,8=3,9.

Значение вероятности развития лимфогенных метастазов определяется по формуле: Р=e^Y/(1+e^Y)=2,72^3,9/(1+2,72^3,9)=49,52/50,52=0,98. Вероятность развития лимфогенных метастазов составила 98%. В операционном материале в 4 из 11 исследованных аксиллярных лимфоузлов были обнаружены метастазы.

Предлагаемый способ основан на анализе данных морфологического и иммуногистохимического исследования операционного материала.

Изучался операционный материал от 107 пациенток с инвазивной карциномой неспецифического типа молочной железы. Средний возраст больных составил 57,2±11,2 лет. Оперативное пособие выполнялось в объеме радикальной мастэктомии, радикальной или секторальной резекции молочных желез с аксиллярной лимфаденэктомией.

Макроскопической оценке подвергали ткань опухоли и все удаленные лимфатические узлы.

Материал фиксировали в 10-12% растворе нейтрального формалина. Проводку материала и изготовление гистологических препаратов осуществляли по стандартной методике. Препараты окрашивали гематоксилином и эозином. Гистологический тип рака устанавливали согласно рекомендациям ВОЗ (Женева, 2012). Во всех случаях (107 пациенток) гистологический тип новообразований молочной железы соответствовал инвазивной карциноме неспецифического типа.

Проводили морфологическое исследование строения ткани опухоли молочной железы. Осуществляли гистологическое исследование препаратов ткани новообразования молочной железы на светооптическом уровне, проводили гистологическую оценку инфильтративного компонента ткани опухоли, где выделяли наличие разных типов структур (от 1 до 5). В альвеолярных, тубулярных, трабекулярных и солидных структурах инфильтративного компонента опухоли определяли наличие такого морфологического признака, как краудинг. Обнаружение при морфологическом исследовании в структурах инфильтративного компонента участков краудинга по типу «скучивания» клеток оценивали как 1, выявление участков краудинга с вариантом одновременного сочетания «скучивания» и «наслоения» опухолевых клеток оценивали как 2.

Далее проводили оценку рецепторного (экспрессия рецепторов к половым гормонам - эстрогенам (РЭ) и прогестерону (РП)) статуса и пролиферативной активности (экспрессия Ki67) ткани новообразования, а также оценивали экспрессию маркеров инвазивного клеточного роста Snail, интегрина β1 и интегрина β3 с применением иммуногистохимического метода исследования.

Иммуногистохимическое исследование осуществляли по стандартной методике. Применяли антитела фирмы «Dako» к рецепторам эстрогенов (клон 1D5, RTU, мышиные), к рецепторам прогестерона (клон PgR636, RTU, мышиные), к Ki67 (клон MIB-1, RTU, мышиные), антитела фирмы «Abcam» Anti-Snail antibody (кроличьи поликлональные 1:1600), Anti-Integrin beta 3 antibody [EPR2417Y] ab75872 (кроличьи моноклональные 1:250), Anti-Integrin beta 1 antibody [4B7R] ab3167 (мышиные моноклональные 1:20).

При исследовании иммуногистохимических препаратов оценивали наличие или отсутствие в ткани опухоли экспрессии к половым гормонам (РЭ и РП). В формулу вошел показатель наличия или отсутствия экспрессии в опухолевой ткани рецепторов к прогестерону. Отсутствие экспрессии рецепторов к прогестерону в структурах ткани опухоли оценивалось как 1, наличие экспрессии - как 2. Далее определяли наличие участков фокального отсутствия экспрессии РЭ, РП и Ki67 по периферии разных типов структур инфильтративного компонента инвазивной карциномы неспецифического типа молочной железы. Наличие данных участков фокального отсутствия экспрессии РЭ, РП и Ki67 по периферии разных типов структур инфильтративного компонента карциномы расценивалось как факт выявления инвазивного фронта в опухоли и оценивалось 2 баллами. Соответственно, при отсутствии участков фокального исчезновения экспрессии РЭ, РП и Ki67 по периферии разных типов структур ткани новообразования данный показатель оценивался 1 баллом.

Далее проводили оценку экспрессии маркеров инвазивного клеточного роста Snail, интегрина β1 и интегрина β3. Оценивали наличие или отсутствие экспрессии указанных маркеров в дискретных группах опухолевых клеток инфильтративного компонента ткани опухоли молочной железы. Для каждого из перечисленных маркеров отсутствие экспрессии в дискретных группах клеток оценивали 1 баллом, наличие их экспрессии - 2 баллами.

Статистическая обработка результатов выполнялась с помощью пакета программ «Statistica 6.0 for Windows».

Для предсказания риска развития лимфогенных метастазов использовали метод логистической регрессии. Значение уравнения регрессии Y рассчитывали по формуле:

Y=(-21-25X₁+6,4Х₂+6,5Х₃+7,3Х₄-34,0Х₅+42,4Х₆),

где

(-21) - значение коэффициента регрессии свободного члена;

X₁ - вариант краудинга в опухоли (1 - «скучивание», 2 - «скучивание и наслоение»),

(-25) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₂ - наличие экспрессии Snail в дискретных группах опухолевых клеток (1 - нет, 2 - есть),

(6,4) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₃ - наличие экспрессии интегрина β3 в дискретных группах опухолевых клеток (1 - нет, 2 - есть),

(6,5) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₄ - наличие экспрессии интегрина β1 в дискретных группах опухолевых клеток (1 - нет, 2 - есть),

(7,3) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₅ - наличие фронта в опухоли, определяемого по наличию участков фокального исчезновения экспрессии РЭ, РП или Ki67 по периферии структур (1 - нет, 2 - есть),

(-34,0) - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₆ - наличие экспрессии РП в опухоли,

(42,4) - значение коэффициента регрессии этого признака.

Далее значение вероятности развития лимфогенных метастазов Р определяли по формуле: Р=e^Y/(1+e^Y),

где е - математическая константа, равная 2,72.

При вероятности Р≥50% определяли высокий риск, а при вероятности Р<50% - низкий риск развития лимфогенных метастазов.

Степень достоверности модели χ²=17,6; р=0,007. Чувствительность модели - 100%, специфичность - 100%.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет с высокой точностью и информативностью прогнозировать риск развития лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы у конкретной больной и, соответственно, оптимизировать тактику ведения таких пациенток.

Источники информации

1. Волченко Н.Н. Морфологические факторы прогноза при раке молочной железы / Н.Н. Волченко // Российский онкологический журнал. - 2000. - №3. - С. 49-53.

2. Fulford L.G. Basal-like Grade III Invasive Ductal Carcinoma of the Breast: Patterns of Metastasis and Long-Term Survival / L.G. Fulford, J.S. Reis-Filho, K. Ryder et al. // Breast Cancer Res. - 2007. - Vol. 9. - Suppl. 1. - P. 1-5.

3. Ковалев A.A. Метастатический каскад как терапевтическая и хирургическая мишень / А.А. Ковалев // Онкология. Здоровье Украины. - Вересень. - 2011. - С. 26-28.

4. Friedl P. Classifying collective cancer cell invasion / P. Friedl, J. Locker, E. Sahai et al. // Nature Cell Biology. - 2012. - Vol. 14(8). - P. 777-783.

5. Guan X. Cancer metastases: challenges and opportunities / Guan X. // Acta Pharm. Sin. B. - 2015. - Vol. 5(5). - P. 402-418.

6. Slattum G. Tumor cell invasion: an emerging role for basal cell extrusion / G. Slattum, J. Rosenblatt // Nat. Rev. Cancer. - 2014. - Vol. 14(7). - P. 495-501.

Изобретение относится к области медицины, а именно к области онкологии, и касается способов прогнозирования риска возникновения лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы Способ прогнозирования лимфогенного метастазирования включает оценку инфильтративного компонента ткани опухоли, где выделяют наличие разных типов структур от 1 до 5, среди которых - альвеолярные, тубулярные, трабекулярные, солидные структуры и дискретные группы опухолевых клеток, далее в альвеолярных, тубулярных, трабекулярных и солидных структурах инфильтративного компонента опухоли определяют наличие краудинга, проводят оценку рецепторного статуса и экспрессии маркеров инвазивного клеточного роста Snail, интегрина β1 и интегрина β3, а также определяют наличие участков фокального отсутствия экспрессии РЭ, РП и Ki67 по периферии разных типов структур инфильтративного компонента. Данные показатели оценивают в баллах и рассчитывают значение вероятности развития лимфогенных метастазов: при вероятности Р≥50% определяют высокий, а при вероятности Р<50% - низкий риск развития лимфогенных метастазов. Изобретение обеспечивает высокую достоверность, точность и информативность прогнозирования риска лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы. 2 пр.

Способ прогнозирования лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы, включающий морфологическое исследование препаратов ткани новообразования молочной железы на светооптическом уровне, отличающийся тем, что проводят гистологическую оценку инфильтративного компонента ткани опухоли, где выделяют наличие разных типов структур от 1 до 5 типов, среди которых - альвеолярные, тубулярные, трабекулярные, солидные структуры и дискретные группы опухолевых клеток, далее в альвеолярных, тубулярных, трабекулярных, солидных структурах инфильтративного компонента опухоли определяют наличие краудинга, при этом выделяют два возможных типа краудинга - по типу изолированного «скучивания» и по типу одновременного сочетания «скучивания» и «наслоения» опухолевых клеток, причем обнаружение участков краудинга по типу «скучивания клеток» оценивают в 1 балл, выявление участков краудинга с вариантом одновременного сочетания «скучивания» и «наслоения» опухолевых клеток оценивают в 2 балла, далее проводят оценку рецепторного статуса путем определения экспрессии рецепторов к половым гормонам - эстрогенам (РЭ) и прогестерону (РП), и пролиферативной активности ткани новообразования путем определения экспрессии Ki67, а также оценивают экспрессию маркеров инвазивного клеточного роста Snail, интегрина β1 и интегрина β3 с использованием иммуногистохимического метода исследования, при этом отсутствие экспрессии рецепторов к прогестерону в структурах опухоли оценивают в 1 балл, а наличие экспрессии в 2 балла, далее, определяют наличие участков фокального отсутствия экспрессии РЭ, РП и Ki67 по периферии разных типов структур инфильтративного компонента, наличие данных участков расценивают как факт выявления инвазивного фронта в опухоли и оценивают в 2 балла, отсутствие оценивают в 1 балл, далее проводят оценку экспрессии маркеров инвазивного клеточного роста Snail, интегрина β1 и интегрина β3, для каждого из перечисленных маркеров отсутствие экспрессии в дискретных группах клеток оценивают в 1 балл, наличие их экспрессии оценивают в 2 балла, далее рассчитывают значение параметра Y в уравнении регрессии по формуле:

Y=(-21-25Х₁ + 6,4Х₂ + 6,5Х₃ + 7,3X₄ - 34,0Х₅ + 42,4Х₆),

где

-21 - значение коэффициента регрессии свободного члена;

X₁ - вариант краудинга в опухоли, причем при обнаружении участков краудинга по типу «скучивания» клеток X₁=1, a при выявлении участков краудинга с вариантом одновременного сочетания «скучивания» и «наслоения» опухолевых клеток X₁=2,

-25 - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₂ - наличие экспрессии Snail в дискретных группах опухолевых клеток, X₁=1 - нет экспрессии, Х₁=2 - есть экспрессия,

6,4 - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₃ - наличие экспрессии интегрина β3 в дискретных группах опухолевых клеток Х₃=1 - нет экспрессии, Х₃=2 - есть экспрессия,

6.5 - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₄ - наличие экспрессии интегрина β1 в дискретных группах опухолевых клеток Х₄=1 - нет экспрессии, Х₄=2 - есть экспрессия,

7,3 - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₅ - наличие фронта в опухоли, определяемого по наличию участков фокального исчезновения экспрессии РЭ, РП или Ki 67 по периферии структур, Х₅=1 - нет экспрессии, Х₅=2 - есть экспрессия,

-34,0 - значение коэффициента регрессии этого признака;

Х₆ - наличие экспрессии РП в опухоли, Х₆=1 - нет экспрессии, Х₆=2 - есть экспрессия,

42,4 - значение коэффициента регрессии этого признака;

далее значение вероятности развития лимфогенных метастазов Р определяют по формуле:

P=e^Y/(1+e^Y),

где e - математическая константа, равная 2,72,

и при вероятности P≥50% определяют высокий, а при вероятности P<50% - низкий риск развития лимфогенных метастазов.