Способ диагностики воспалительного процесса органов мочевыделительной системы у детей раннего возраста Российский патент 2019 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно педиатрии, и может быть использовано для скрининга детей дошкольного возраста и раннего выявления у них инфекции мочевыводящих путей.

Известен способ прогнозирования развития пиелонефрита у детей с аномалиями органов мочевой системы, путем использования биомаркеров, в качестве которых используют измерения показателя активности нейтральной α-глюкозидазы и L-аланинаминопептидазы в моче, данный способ используется для прогноза развития пиелонефрита у детей с аномалиями органов мочевыделительной системы (ОМС) (см. RU 2442987, G01N 33/49,G01N 33/574, 2010).

Недостатком способа является то, что он подходит для диагностики воспалительного процесса только у детей с пороками развития ОМС.

Известен способ диагностики ИМВП, включающий отбор биоматериала от пациента и выявление в нем биомаркеров инфекции мочевыводящих путей, базирующийся на определении в количественном определении уреазной активности мочи (см. RU №2521201 G01N 33/52, 2013). Способ основан на том, что микробы в процессе жизнедеятельности выделяют в мочу фермент - уреазу, которая имеет различную степень активности в зависимости от вида микроорганизма. При значении уреазной активности мочи выше 1621,73 Е/л относят конкретного ребенка к группе риска формирования инфекции мочевыводящих путей.

Способ недостаточно информативен у детей первых трех лет жизни. Известен также способ экспресс-диагностики воспалительного процесса органов мочевыделительной системы у детей раннего возраста, включающий отбор биоматериала от пациента и выявление в нем биомаркеров инфекции мочевыводящих путей (см. RU №2592228, G01N 33/53, 2014).

Способ основан на получение образца от пациента и обнаружение в указанном образце экспрессии рецептора CD1d на NKT-клетках и BCL6 в тканях мочевого пузыря. При повышении экспрессии CD1d на NKT-клетках и снижении BCL6 в тканях мочевого пузыря диагностируют наличие инфекции мочевыводящих путей. Использование данных биомаркеров позволяет диагностировать наличие инфекции мочевыводящих путей, а также использовать для оценки эффективности лечения. Основным недостатком данного метода является тем, что нет данных о возможности его использования в диагностике воспалительного процесса органов мочевыделительной системы у детей раннего возраста.

Инфекция мочевыводящих путей остается наиболее распространенной бактериальной патологией у детей. По данным ВОЗ патология органов мочевой системы у детей занимает второе место после заболеваний респираторного тракта. Малосимптомность и неспецифичность клинических проявлений зачастую приводит к поздней диагностике, что может обуславливать развитие паренхиматозного повреждения почек и хронической почечной недостаточности. Поэтому разработка системы ранней диагностики воспалительного процесса органов мочевыделительной системы у детей раннего возраста очень актуальна в педиатрической практике, внедрение новых диагностических маркеров будет способствовать улучшению ранней диагностике воспалительных заболеваний почек у детей.

Задачей изобретения является разработка способа диагностики воспалительного процесса органов мочевыделительной системы у детей раннего возраста, обеспечивающей раннюю и эффективную диагностику у детей первых трех лет жизни.

Технический результат, проявляющийся при решении поставленной задачи выражается в возможности ранней экспресс-диагностики воспалительного процесса органов мочевыделительной системы у детей раннего возраста и обеспечении ранней диагностики воспалительных заболеваний почек у детей первых трех лет жизни.

Решение задачи достигается тем, что способ диагностики воспалительного процесса органов мочевыделительной системы у детей раннего возраста, включающий отбор биоматериала от пациента и выявление в нем биомаркеров инфекции мочевыводящих путей, отличается тем, что отбирают сыворотку крови в которой определяют содержание белков, связывающих жирные кислоты L-FABP, I-FABP, причем при превышении у ребенка содержания L-FABP - выше 319,28±27,50 пг/мл, и одновременно, содержания I-FABP - выше 38,42±9,8 пг/мл, диагностируют инфекцию органов мочевыделительной системы и высокую вероятность воспалительного заболевания почек.

Сопоставительный анализ признаков заявленного решения с признаками прототипа и аналогов свидетельствует о соответствии заявленного решения критерию «новизна».

Совокупность признаков изобретения обеспечивает достижение заявленного технического результата, а признаки отличительной части формулы изобретения обеспечивают решение следующих функциональных задач.

Признаки «отбирают сыворотку крови» обеспечивают возможность получения биомаркеров инфекции мочевыводящих путей.

Признаки, указывающие, что в сыворотке крови «определяют содержание белков, связывающих жирные кислоты, L-FABP, I-FABP» конкретизируют тип используемых биомаркеров инфекции мочевыводящих путей.

Признаки «при превышении у ребенка содержания L-FABP - выше 319,28±27,50 пг/мл, и одновременно, содержания I-FABP - выше 38,42±9,8 пг/мл, диагностируют инфекцию органов мочевыделительной системы и высокую вероятность воспалительного заболевания почек» задают диагностические критерии для диагноза «инфекция органов мочевыделительной системы и высокая вероятность воспалительного заболевания почек».

Способ осуществляется следующим образом.

Забор крови для последующего определения биомаркеров в сыворотке крови проводят из периферической вены, один раз вначале исследования, в первый день поступления ребенка в стационар до назначения антибактериальной терапии. Забор проводиться только в рамках обследования в стационаре и при письменном информированном согласии законного представителя ребенка. Для исследования необходимо взять 1,0 мл венозной крови. В контрольной группе забор крови проводят один раз из периферической вены, в объеме 1,0 мл венозной крови, при условии письменного согласия законного представителя ребенка. Процедура получения сыворотки крови включает:

- использование пробирки для отделения сыворотки крови;

- после забора биоматериала, образец оставляют на 2 часа при комнатной температуре или на ночь при температуре +4°С до центрифугирования;

- центрифугирируют образец 20 минут с ускорением 1000 g;

- для анализа используют свежеприготовленную сыворотку или сохраняют аликвотированные образцы при температуре от -20°С до -80°С для использования позднее (срок годности образца 4 месяца).

- концентрацию биомаркеров в крови определяют с помощью твердофазного иммуноферментного анализа ELISA.

Пациенту при подозрении на воспалительный процесс органов мочевыделительной системы проводят, известным образом забор крови в стерильную пробирку, в объеме достаточном для получения сыворотки крови в количестве 1 мл. Забор материала проводят утром натощак. Биологический материал центрифугируют в течение 10 минут, после чего, материал разливают по эпиндорфам.

Определение L-FABP, I-FABP проводят методом иммуноферментного анализа (ELISA). Через 3 часа оцениваются результаты исследования.

Полученные значения сравнивают с заявленными диагностическими критериями. При значениях L-FABP - выше 319,28±27,50 пг/мл, р<0,001; I-FABP- выше 38,42±9,8 пг/мл, p<0,001 пациентам ставят диагноз «инфекция органов мочевыделительной системы и высокая вероятность воспалительного заболевания почек».

Клинический пример 1. Больная А., 6 месяца с диагнозом ИМВП. Поступила с жалобами на постоянное беспокойство, немотивированный плач, срыгивания после еды, снижение аппетита, снижение диуреза, капризность. Данные жалобы в течении трех дней. Температура тела 36,8С. Ребенок находится на грудном вскармливании, введен прикорм - каши. Росла и развивалась по возрасту. УЗИ почек в 1 месяц - пиелоэктазия 0,7 мм справа. При комплексном обследовании выставлен диагноз- Инфекция мочевыводящих путей. У данного ребенка проведено определение содержания в сыворотке крови уровня L-FABP и I-FABP, которые составили 372 пг/мл и 32 пг/мл соответственно. Согласно изобретению, выставлен диагноз: Инфекция мочевыводящих путей. Результаты проведенных провокационных тестов подтвердили наличие воспалительного процесса органов мочевыделительной системы и пиелонефрит.

Клинический пример 2. Больной Д., 2 года с диагнозом ИМВП, острый аппендицит? Поступил с жалобами беспокойство ребенка, болями в области живота, повышение температуры тела до 38,5С, снижение аппетита, кашицеобразный стул 2 раза без патологических примесей. Ребенок болен в течении 2 дней, когда появились вышеперечисленные жалобы. Из анамнеза: мама ребенка и бабушка по материнской линии страдают пиелонефритом, у отца ребенка- мочекаменная болезнь. Проведено комплексное клинико-диагностическое обследование. Проведено определение содержания в сыворотке крови L-FABP и I-FABP по предлагаемому способу. В результате получены следующие значения: L-FABP - 417 пг/мл, I-FABP - 54 пг/мл. Согласно изобретению, выставлен диагноз: ИМВП. Результаты проведенных провокационных тестов подтвердили воспалительного процесса органов мочевыделительной системы (ВПОМС) и пиелонефрит.

Клинический пример 3. Больной К, 10 месяцев. Поступил с жалобами на слабость, плаксивость, отказ от еды, неприятный запах мочи. Данные жалобы в течении 5 дней, появились после перенесенной острой респираторной вирусной инфекции. Температура тела при осмотре 36,9С.

Из анамнеза: рос и развивался по возрасту. Родился от 1 беременности, 1 родов в сроке 39 недель. Вес при рождении 3520 г., рост 52 см. По шкале Апгар 8 баллов. Отставания в психическом и физическом развитии нет. Вакцинация по возрасту. Перенесенные заболевания: ОРВИ 2 раза в год. Прикорм по возрасту. Аллергический анамнез не отягощен. Наследственный анамнез: у отца ребенка ВПР ОМС: агенезия левой почки. При комплексном обследовании выставлен диагноз - Инфекция мочевыводящих путей. При комплексном обследовании выставлен диагноз- Инфекция мочевыводящих путей. У данного ребенка проведено одновременное определение содержания в сыворотке крови уровня L-FABP и I-FABP, которые составили 451 пг/мл и 66 пг/мл соответственно. Согласно изобретению, выставлен диагноз: Инфекция мочевыводящих путей. Результаты проведенных провокационных тестов подтвердили наличие воспалительного процесса органов мочевыводящей системы у данного пациента.

Клинический пример 4. Больная М, 2 г. 3 м, поступила с жалобами на боли в животе приступообразного характера, повышение температуры до 39 С, снижение диуреза, однократную рвоту. Больна в течении двух дней. Родители самостоятельно давали жаропонижающие, без эффекта. Из анамнеза: ребенок рос и развивался по возрасту. Перенесенные заболевания: ветряная оспа в 1,5 года, ОРВИ 6 раз в год. На диспансерном учете не состоит. В 1 месяц жизни проведено УЗИ почек- без патологии. Наследственный анамнез: не отягощен. У данного ребенка проведено одновременное определение содержания в сыворотке крови уровня L-FABP и I-FABP, которые составили 705 пг/мл и 106 пг/мл соответственно. Согласно изобретению, выставлен диагноз: Инфекция мочевыводящих путей. Результаты проведенных провокационных тестов подтвердили наличие воспалительного процесса органов мочевыводящей системы у данного пациента.

Предлагаемый способ диагностики применен у 40 пациентов Краевой детской клинической больницы №1 г.Владивостока в возрасте до 3 лет, включительно. Группу контроля в количестве 20 человек составили здоровые дети соответствующего возраста.

Результаты обследования детей в обеих группах представлены в таблице 1.

где * - достоверность различий р<0,001 между группой детей с диагнозом ВПОМС и контрольной группой.

Технический результат от реализации предлагаемого способа: -полная безопасность для здоровья пациента;

- возможность проведения исследования у детей раннего возраста.

- для исследования необходимо небольшое количество биологического материала (1 мл сыворотки крови);

- отсутствие реактогенности со стороны организма больного;

- позволяет диагностировать заболевание на ранней стадии.

Таким образом, предлагаемый информативный способ обеспечивает эффективную, безопасную и раннюю диагностику ИМВП у детей и позволяет своевременно определить тактику персонифицированной терапии.

Формула изобретения

способ диагностики воспалительного процесса органов мочевыделительной системы у детей раннего возраста, включающий отбор биоматериала от пациента и выявление в нем биомаркеров инфекции мочевыводящих путей, отличается тем, что отбирают сыворотку крови в которой определяют содержание белков, связывающих жирные кислоты L-FABP, I-FABP, причем при превышении у ребенка содержания L-FABP - выше 319,28±27,50 пг/мл, и одновременно, содержания I-FABP - выше 38,42±9,8 пг/мл, диагностируют инфекцию органов мочевыделительной системы и высокую вероятность воспалительного заболевания почек.

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для диагностики воспалительного процесса органов мочевыделительной системы у детей раннего возраста. Для этого отбирают сыворотку крови, в которой определяют содержание белков L-FABP, I-FABP, связывающих жирные кислоты. Причем при превышении у ребенка содержания L-FABP выше 319,28±27,50 пг/мл и одновременно содержания I-FABP выше 38,42±9,8 пг/мл диагностируют инфекцию органов мочевыделительной системы и высокую вероятность воспалительного заболевания почек. Изобретение обеспечивает раннюю и эффективную диагностику воспалительного процесса органов мочевыделительной системы у детей первых трех лет жизни и тем самым раннюю диагностику воспалительных заболеваний почек у детей первых трех лет жизни. 1 табл.

Способ диагностики воспалительного процесса органов мочевыделительной системы у детей раннего возраста, включающий отбор биоматериала от пациента и выявление в нем биомаркеров инфекции мочевыводящих путей, отличающийся тем, что отбирают сыворотку крови, в которой определяют содержание белков L-FABP, I-FABP, связывающих жирные кислоты, причем при превышении у ребенка содержания L-FABP выше 319,28±27,50 пг/мл и одновременно содержания I-FABP выше 38,42±9,8 пг/мл диагностируют инфекцию органов мочевыделительной системы и высокую вероятность воспалительного заболевания почек.