Способ создания экспериментальной субдуральной гематомы у мелких лабораторных животных Российский патент 2020 года по МПК G09B23/28 

Описание патента на изобретение RU2718298C1

Изобретение относится к ветеринарии, может быть использовано для разработки экспериментальных моделей воссоздания субдуральной гематомы, по аналогии гематом, возникающих при черепно-мозговой травме и геморрагических инсультах у человека, с целью разработки вариантов лекарственной терапии при указанной патологии.

Известны способы создания экспериментальной субдуральной гематомы у крыс:

1. Deinsberger W, Vogel J, Kuschinsky W, Auer LM, Boker DK. Experimental intracerebral hemorrhage: description of a double injection model in rats. NeurolRes. 1996;18:475-477. Моделирование геморрагического инсульта у крыс основано на введении в ткани мозга аутологичной артериальной крови. Для этого наркотизированным животным, фиксированным на спине, проводят катетеризацию правой бедренной артерии. Далее животное фиксируется в стереотаксической установке, проводится разрез кожи головы, скальпирование черепа и накладывание фрезевого отверстия диаметром 1,0 мм по координатам 0,2 мм кпереди и 3 мм вправо от брегмы. Затем проводят забор 1 мл крови из бедренной артерии животного. Введение аутологичной крови осуществляется на глубину 5,5 мм при помощи иглы с закругленным концом, после чего иглу извлекают и рану ушивают. Данный подход является проверенным и широко используемым методом моделирования геморрагического инсульта.

2. Yang GY, Betz AL, Chenevert TL, Brunberg JA, Hoff JT. Experimental intracerebral hemorrhage: relationship between brain edema, blood flow, and blood-brain barrier permeability in rats. J Neurosurg. 1994;81:93-102. В условиях наркоза животных фиксируют на спине, проводят катетеризацию правой бедренной артерии. Далее животное фиксируется в стереотаксической установке, проводится разрез кожи головы, скальпирование черепа и накладывание фрезевого отверстия диаметром 1,0 мм по координатам 0,2 мм кпереди и 3 мм вправо от брегмы. С помощью микроинфузионного насоса в правое каудатное ядро вводят с постоянной скоростью аутологичную кровь (выделенной из бедренной артерии), создавая управляемую и воспроизводимую гематому в зависимости от необходимого объема. Данный подход также широко используется для моделирования геморрагического инсульта.

3. Paul R. Krajft, Devin W. McBride, Tim Lekic, William B. Rolland, Charles E. Mansell, Qingyi Ma, Jiping Tang, and John H. Zhang. Correlation between subacute sensorimotor deficits and brain edema in two mouse models of intracerebral hemorrhage. Behav Brain Res. 2014 May 1; 264:151-160. В указанном варианте под внутривенным наркозом и после подготовки операционного поля, проводился надрез кожи в правой теменной кости, после было сделано отверстие (1 мм, с ориентирами 0,2 мм от брегмы и 2,0 мм с боку от средней линии). После этого у мышей обеспечивали доступ к центральной хвостовой артерии, которую прокалывали и собирали минимум 30 мкл артериальной крови в капиллярной трубке. Затем стеклянный шприц 250 мкл закрепляли на микроинъекционном насосе и игла стереотаксически вводилась через отверстие в кости с продвижением на 3,0 мм ниже твердой мозговой оболочки. В этом положении 5 мкл аутологичной цельной крови вводили в правое полушарие со скоростью 2 мкл/мин.

Представленные способы имеют ряд недостатков.

Во-первых, метод Deinsberger W, Vogel J, Kuschinsky W, Auer LM, Boker DK. Experimental intracerebral hemorrhage: description of a double injection model in rats. Neurol Res. 1996; 18:475-477. прямо или косвенно влияет на объем и время формирования гематом из-за рефлюкса крови вверх по иголочному тракту, вокруг иглы за счет большого диаметра перфорационного отверстия в кости черепа. Перфорационное отверстие в размере 1 мм представляется большим, что также способствует истеканию вводимой крови. Это требует введения более большего объема крови, что может прямо влиять на выживаемость животных в острый период.

Во-вторых, метод Yang GY, Betz AL, Chenevert TL, Brunberg JA, Hoff JT. Experimental intracerebral hemorrhage: relationship between brain edema, blood flow, and blood-brain barrier permeability in rats. J Neurosurg. 1994;81:93-102., а так же метод Paul R. Krafft, Devin W. McBride, Tim Lekic, William B. Rolland, Charles E. Mansell, Qingyi Ma, Jiping Tang, and John H. Zhang. Correlation between subacute sensorimotor deficits and brain edema in two mouse models of intracerebral hemorrhage. Behav Brain Res. 2014 May 1; 264:151-160. требуют наличия дорогостоящей аппаратуры (микроинъекционный насос). В-третьих, указанные методы с использованием бедренной артерии создают проблемы в будущем, когда приходит время оценить нейробиоральный дефицит.В-четвертых, продвижение иглы на 3 мм по методике Yang GY, Betz AL, Chenevert TL, Brunberg JA, Hoff JT. Experimental intracerebral hemorrhage: relationship between brain edema, blood flow, and blood-brain barrier permeability in rats. J Neurosurg. 1994;81:93-102. сопряжено с возможной травмой мягкой мозговой оболочки и мозговых структур с формированием гематомы за счет кровоизлияния из тканей мозга.

Техническая задача: разработка метода, позволяющего воспроизвести близкий по аналогии с человеком вариант субдуральной гематомы вследствие черепно-мозговой травмы, но без повреждения мозговых структур экспериментального животного. Поставленная задача решается следующим способом. Оперативный доступ к структурам мозга экспериментальных животных осуществляли на фоне действия сочетанного наркоза неингаляционного анестетика золетила с добавлением анальгетика. Золетил вводили подкожно в дозе 50 мг/кг массы подкожно. О наступлении хирургической стадии наркоза судили по отсутствию болевой реакции. После подготовки операционного поля, по средней линии черепа скальпелем делали разрез кожи, кровь останавливали 3%-ным раствором перекиси водорода. Кожу раздвигали указательным и большим пальцами левой руки, одновременно фиксируя голову животного. Отверстие в черепе осуществляли стоматологическим буром диаметром 0,1 мм с ориентирами 0,2 мм от брегмы и 2,0 мм с боку от средней линии. Правильность методики перфорации подтверждается отсутствием вытекания ликвора и крови в рану. Кровь из хвостовой вены в объеме 0,3 мл набирали в шприц, обработанный раствором гепарина. Через перфорационное отверстие, иглу для подкожных инъекций продвигали на глубину 2 мм и под углом 30° кровь медленно вводили в субдуральное пространство. Скорость кровотока составляла 0,1 мл/мин. После введения крови иглу не убирали из перфорационного отверстия в течение 2-3 минут. По истечении срока перфорационное отверстие запечатывали костным воском. Технический результат: разработан метод воспроизведения субдуральной гематомы у мелких лабораторных животных (крыса) по аналогии с вариантом гематомы вследствие черепно-мозговой травмы или геморрагического инсульта у человека. Способ, позволяет воспроизвести близкий, по аналогии с человеком, вариант субдуральной гематомы вследствие черепно-мозговой травмы или при геморрагическом инсульте, и отличающийся тем, что объем создаваемой гематомы соответствует объему наиболее часто встречающихся гематом у человека при черепно-мозговой травме и при геморрагическом инсульте. Метод воспроизводится без истекания крови вокруг иглы за счет меньшего диаметра перфорационного отверстия в кости черепа и исключает повреждение мозговых структур, смещения структур мозга гематомами большого объема, что позволяет наблюдать экспериментальное животное длительный период времени без его ранней гибели.

Похожие патенты RU2718298C1

название год авторы номер документа
СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ И ИССЛЕДОВАНИЯ ПОСЛЕДСТВИЙ ГЕМОРРАГИЧЕСКОГО ИНСУЛЬТА 2005
  • Мокрушин Анатолий Александрович
  • Хама-Мурад Арман Хамалав
  • Павлинова Лариса Ивановна
  • Смирнова Галина Петровна
RU2307396C2
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ СУБДУРАЛЬНОЙ ГЕМАТОМЫ 2009
  • Онысько Олег Васильевич
  • Рычков Андрей Владимирович
  • Смирнов Борис Викторович
  • Жигайлов Евгений Анатолиевич
RU2414173C1
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ПОСТТРАВМАТИЧЕСКОЙ ЭНЦЕФАЛОПАТИИ 2009
  • Романов Юрий Аскольдович
  • Смирнов Владимир Николаевич
  • Прошкин Сергей Дмитриевич
  • Поляков Юрий Израилевич
  • Медведев Святослав Всеволодович
  • Пальцев Михаил Александрович
  • Сухих Геннадий Тихонович
  • Савченко Валерий Григорьевич
RU2413523C2
Способ коррекции неврологического статуса 2-этил-6-метил-3- гидрокси пиридиния-N-ацетиламиноацетатом при повреждении головного мозга вследствие внутримозгового кровоизлияния в эксперименте 2022
  • Щеблыкина Олеся Викторовна
  • Скачилова София Яковлевна
  • Покровский Михаил Владимирович
  • Щеблыкин Дмитрий Валерьевич
  • Колесниченко Павел Дмитриевич
  • Ефименко Светлана Владимировна
  • Симакина Екатерина Александровна
  • Шилова Елена Владимировна
  • Даниленко Антон Павлович
  • Трунов Константин Сергеевич
  • Даниленко Людмила Михайловна
  • Боева Елизавета Валерьевна
  • Чередниченко Альбина Вячеславовна
  • Болгов Антон Алексеевич
RU2786315C1
Способ операционного гемостаза при острых труднодоступных эпидуральных кровотечениях из повреждённых вен, переломах свода и основания черепа и последующего его послеоперационного курирования 2016
  • Шелудяков Анатолий Юрьевич
  • Шпагин Максим Владимирович
  • Никитин Денис Николаевич
  • Левшин Дмитрий Анатольевич
  • Новиков Дмитрий Александрович
RU2633299C1
СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО ИШЕМИЧЕСКОГО ИНСУЛЬТА 2022
  • Сехвейл Салах М.М.
  • Гончарова Зоя Александровна
  • Прокофьев Виктор Николаевич
  • Тодоров Сергей Сергеевич
  • Медведев Дмитрий Сергеевич
  • Кириченко Евгения Юрьевна
RU2785608C1
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЧЕРЕПНО-МОЗГОВОЙ ТРАВМЫ 2008
  • Онысько Олег Васильевич
  • Благодатский Михаил Дмитриевич
  • Жигайлов Евгений Анатольевич
  • Смирнов Борис Викторович
  • Анпилогов Валерий Иванович
RU2366466C1
СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО ИШЕМИЧЕСКОГО ИНСУЛЬТА 2023
  • Сехвейл Салах М.М.
  • Гончарова Зоя Александровна
  • Прокофьев Виктор Николаевич
  • Медведев Дмитрий Сергеевич
  • Кириченко Евгения Юрьевна
RU2822706C1
Способ моделирования геморрагического инсульта у крыс 2019
  • Нестеров Аркадий Витальевич
  • Колесниченко Павел Дмитриевич
  • Покровский Михаил Владимирович
  • Нестерова Наталья Игоревна
  • Марковская Вера Александровна
  • Иванова Мария Игоревна
  • Карагодина Анастасия Юрьевна
  • Сапарбоева Нозима Махмуд Кизи
  • Мурашев Борис Владимирович
  • Прошин Антон Юрьевич
  • Патраханов Евгений Александрович
  • Архипов Иван Сергеевич
  • Покровский Владимир Михайлович
RU2721289C1
ВЕЩЕСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ НЕЙРОТРОПНОЙ - НЕЙРОМОДУЛЯТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ 2006
  • Ахапкина Валентина Ивановна
  • Воронина Татьяна Александровна
  • Ахапкин Роман Витальевич
RU2329804C2

Реферат патента 2020 года Способ создания экспериментальной субдуральной гематомы у мелких лабораторных животных

Изобретение относится к области медицины, в частности к патологической физиологии. Формируют перфорационное отверстие буром диаметром 0,1 мм с ориентирами 0,2 мм от брегмы и 2,0 мм сбоку от средней линии черепа. Забирают кровь из хвостовой вены в объеме 0,3 мл. Через перфорационное отверстие вводят иглу под углом 30° на глубину 2 мм, через которую вводят кровь из хвостовой вены со скоростью введения 0,1 мл/мин. После введения крови иглу оставляют в перфорационном отверстии на 2-3 минуты. Затем перфорационное отверстие запечатывают костным воском. Способ позволяет избежать повреждения тканей мозга, исключает истекание крови из раны, позволяет наблюдать животное длительный период времени.

Формула изобретения RU 2 718 298 C1

Способ создания экспериментальной субдуральной гематомы у мелких лабораторных животных, включающий в себя формирование отверстия в черепе, введение иглы для введения крови в субдуральное пространство, иглу оставляют в перфорационном отверстии, после чего перфорационное отверстие запечатывают костным воском, отличающийся тем, что перфорационное отверстие формируют буром диаметром 0,1 мм с ориентирами 0,2 мм от брегмы и 2,0 мм сбоку от средней линии черепа, затем забирают кровь из хвостовой вены в объеме 0,3 мл, через перфорационное отверстие вводят иглу под углом 30° на глубину 2 мм, через которую вводят кровь из хвостовой вены со скоростью введения 0,1 мл/мин, после введения крови иглу оставляют в перфорационном отверстии на 2-3 минуты.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2020 года RU2718298C1

Karabiyikoglu M et al, Acute subdural hematoma: new model delineation and effects of coagulation inhibitors, Neurosurgery
Способ обработки целлюлозных материалов, с целью тонкого измельчения или переведения в коллоидальный раствор 1923
  • Петров Г.С.
SU2005A1
СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ РАЗВИТИЯ МОЗГОВЫХ ГЕМОРРАГИЙ У ГИПЕРТЕНЗИВНЫХ МЫШЕЙ 2017
  • Семячкина-Глушковская Оксана Валерьевна
  • Курц Юрген Густаф
  • Наволокин Никита Александрович
  • Уланова Мария Васильевна
  • Брагин Денис Евгеньевич
  • Бодрова Анастасия Алексеевна
  • Шушунова Наталья Александровна
  • Хороводов Александр Петрович
  • Климова Мария Максимовна
  • Терсков Андрей Витальевич
  • Дубровский Александр Ильич
RU2678798C1
Способ моделирования внутримозговых гематом при артериальной гипертензии
Патол
физиол
эксперим
тер., 1989, 3: c
Капельная масленка с постоянным уровнем масла 0
  • Каретников В.В.
SU80A1
Zhu W et al, Mouse models of intracerebral

RU 2 718 298 C1

Авторы

Орлов Юрий Петрович

Бойко Татьяна Владимировна

Ланг Евгений Андреевич

Кабова Вера Александровна

Даты

2020-04-01Публикация

2019-05-13Подача