УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Данное описание относится к ингибиторам белка Bcl-2 и терапевтическим способам лечения заболеваний, расстройств или состояний, при которых ингибирование белков Bcl-2 приводит к положительному эффекту.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Апоптоз, процесс запрограммированной клеточной гибели, является необходимым биологическим процессом для гомеостаза тканей. Было показано, что у млекопитающих он регулирует раннее эмбриональное развитие. На более позднем этапе жизни, клеточная гибель является стандартным механизмом, посредством которого удаляются потенциально опасные клетки, например клетки, несущие злокачественные дефекты. Известно несколько путей апоптоза. Один из наиболее важных путей апоптоза включает в себя семейство белков Bcl-2, которые являются ключевыми регуляторами митохондриального (также называемого «внутреннего») пути апоптоза. См. Danial and Korsmeyer, Cell 116:205-219 (2004). Домены структурной гомологии BH1, BH2, BH3 и BH4 характерны для белков семейства Bcl-2. Семейство белков Bcl-2 может быть далее классифицировано на три подсемейства, в зависимости от того, сколько доменов гомологии содержит каждый белок, и от его биологической активности, то есть имеет ли он про- или антиапоптотическую функцию.
Первая подгруппа белков Bcl-2 содержит белки, имеющие все четыре домена гомологии, т.е. BH1, BH2, BH3 и BH4. Их общий эффект - антиапоптотический, заключающийся в предохранении клетки от запуска процесса клеточной гибели. Белки, такие как Bcl-2, Bcl-w, Bcl-xL, Mcl-1 и Bfl-1/A1, являются членами данной первой подгруппы. Белки, принадлежащие ко второй подгруппе белков Bcl-2, содержат три домена гомологии BH1, BH2 и BH3, и обладают проапоптотическим эффектом. Два основных репрезентативных белка данной второй подгруппы - Bax и Bak. Третья подгруппа белков Bcl-2 состоит из белков, содержащих только домен BH3, и члены данной подгруппы обычно называют «белками только с BH3». Их биологическое действие на клетку является проапоптотическим. Bim, Bid, Bad, Bik, Noxa, Hrk, Bmf и Puma являются примерами данного ретьего подсемейства белков. Точный механизм, с помощью которого белки семейства Bcl-2 регулируют клеточную гибель, известен не полностью. В одной гипотезе регуляции клеточной гибели белками семейства Bcl-2, белки только с ВН3 далее классифицируются как «активаторы», например, Bim and Bid, или «сенсибилизаторы», например, Bad, Bik, Noxa, Hrk Bmf и Puma белки, в зависимости от их регуляторной функции.
Одним из ключей к гомеостазу тканей является достижение баланса во взаимодействиях между тремя подгруппами белков Bcl-2 в клетках. Исследования выяснили механизмы, с помощью которых проапоптотические и антиапоптотические подгруппы белков семейства Bcl 2 взаимодействуют, чтобы позволить клетке претерпеть запрограммированную клеточную гибель. После получения внутриклеточных или внеклеточных сигналов в клетках, происходит посттрансляционная или транскрипционная активация белков только с ВН3. Белки только с BH3 являются первичными индукторами апоптотического каскада, который включает, в качестве одной стадии, активацию проапоптотических белков Bax и Bak на митохондриальной мембране в клетках. После активации Bax и/или Bak, которые уже прикреплены к митохондриальной мембране или мигрируют к данной мембране, Bax и/или Bak олигомеризуются, что приводит к пермеабилизации внешней мембраны митохондрий (MOMP), высвобождению цитохрома C и последующей активации эффекторных каспаз, что в конечном итоге приводит к апоптозу клетки. Некоторые исследователи выдвигают гипотезу о том, что некоторые белки только с BH3, например, Puma, Bim, Bid, являются «активаторами», по той причине, что данные белки непосредственно задействуют проапоптотические белки Bax и Bak для инициации MOMP, тогда как другие белки только с BH3, например Bad, Bik и Noxa, являются «сенсибилизаторами» и индуцируют олигомеризацию Bax и Bak косвенно, путем связывания антиапоптотических белков, например, Bcl-2, Bcl-xL, Bcl-w, Mcl-1, а также вытеснения и «высвобождения» белков только с ВН3 «активаторов», которые впоследствии связываются с проапоптотическими белками, например, Bax, Bak, и активируют их, чтобы вызвать клеточную гибель. Другое исследование предполагает, что антиапоптотические белки задействуют и блокируют Bax и Bak непосредственно, и все белки только с ВН3 регулируют это взаимодействие путем связывания с антиапоптотическими белками, например, Bcl-2, Bcl-xL, Bcl-w, Mcl-1, что приводит к высвобождению Bax и Bak. См. Adams and Cory, Oncogene 26: 1324-1337 (2007) и Willis et al., Science 315: 856-859 (2007). Несмотря на то, что точные взаимодействия, посредством которых анти- и проапоптотические белки семейства Bcl-2 регулируют апоптоз, остаются предметом исследования, существует большое количество научных доказательств того, что соединения, которые ингибируют связывание белков только с BH3, с антиапоптотическими белками семейства Bcl-2, способствуют апоптозу в клетках.
Нарушение регуляции путей апоптоза наблюдается при патологии многих значимых заболеваний, таких как нейродегенеративные состояния (активированный апоптоз), таких как, например, болезнь Альцгеймера; и пролиферативные заболевания (подавленный апоптоз), такие как, например, рак, аутоиммунные заболевания и протромботические состояния.
Подавленный апоптоз (и, в частности, семейство белков Bcl-2) может иметь отношение к образованию злокачественной опухоли. Исследование показало, например, что антиапоптотические белки, Bcl-2 и Bcl-xL, сверхэкспрессированы во многих типах раковых клеток. См. Zhang, Nature Reviews Drug Discovery 1: 101 (2002); Kirkin и др., Biochimica et Biophysica Acta 1644: 229-249 (2004); и Amundson и др., Cancer Research 60: 6101-6110 (2000). Эффект данной дерегуляции заключается в выживании измененных клеток, которые при других обстоятельствах подверглись бы апоптозу в нормальных условиях. Повторение данных дефектов, связанных с нерегулируемой пролиферацией, считается отправной точкой эволюции рака. Кроме того, исследование показало, что белки только с BH3 могут действовать как супрессоры опухолей при экспрессии у больных животных.
Эти результаты сделали возможными новые стратегии в поиске лекарств, нацеленных на борьбу с раком. Если бы небольшая молекула, которая могла бы имитировать эффект белков только с BH3, могла проникнуть в клетку и преодолеть сверхэкспрессию антиапоптотического белка, то можно было бы восстановить апоптотический процесс. Данная стратегия может иметь то преимущество, что она может облегчить проблему устойчивости к лекарственным препаратам, которая обычно является следствием апоптотической дерегуляции (аномальной выживаемости). Были рассмотрены терапевтические стратегии целенаправленного воздействия на Bcl-2 и Bcl-XL при раке для восстановления сенситивности раковых клеток и преодоления устойчивости раковых клеток к апоптозу. См. Adams и др., Science 281:1322 (1998) и Reed, Adv. Pharmacol. 41:501 (1997); Reed и др., J. Cell. Biochem. 60:23 (1996).
Тромбоциты также содержат необходимый апоптотический механизм, например, Bax, Bak, Bcl-xL, Bcl-2, цитохром с, каспазу-9, каспазу-3 и APAF-1, для реализации запрограммированной клеточной гибели через внутренний апоптотический путь. Несмотря на то, что производство циркулирующих тромбоцитов является нормальным физиологическим процессом, ряд заболеваний вызван или осложнен избытком или нежелательной активацией тромбоцитов. Это говорит о том, что терапевтические агенты, способные ингибировать антиапоптотические белки в тромбоцитах и уменьшать количество тромбоцитов у млекопитающих, могут быть применены при лечении протромботических состояний и заболеваний, которые характеризуются избытком или нежелательной активацией тромбоцитов.
Низкомолекулярные миметики белков только с ВН3, такие как ABT-737 и ABT-263, связываются сильно с подгруппой антиапоптотических белков Bcl-2, включая Bcl-2, Bcl-w и Bcl-xL, и слабо с Mcl-1 и A1. Данные небольшие молекулы были протестированы в исследованиях на животных и продемонстрировали цитотоксическую активность в некоторых ксенотрансплантантных моделях в качестве отдельных агентов, а также усилили действие ряда химиотерапевтических агентов на другие ксенотрансплантантные модели при использовании в комбинации. См. Tse, C. и др., Cancer Res 68:3421-3428 (2008) и van Delft, M. F. и др., Cancer Cell 10:389-399 (2006). Данные исследования in vivo предполагают потенциальную полезность ингибиторов антиапоптотических белков семейства Bcl-2 для лечения заболеваний, при которых нарушена регуляция пути апоптоза. ABT-199 (Venetoclax) - высокоактивный ингибитор Bcl-2, одобренный Управлением США по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов для лечения хронического лимфолейкоза. См. Cang и др., Journal of Hematology & Oncology 8:129 (2015) и Souers и др., Nature Medicine 19:202-208 (2013).
Естественные уровни экспрессии антиапоптотических белков семейства Bcl-2 варьируются в разных типах клеток. Например, в молодых тромбоцитах белок Bcl-xL высоко экспрессируется и играет важную роль в регуляции клеточной гибели (продолжительности жизни) тромбоцитов. Кроме того, в некоторых типах раковых клеток, выживание раковых клеток объясняется нарушением регуляции пути апоптоза, вызванным сверхэкспрессией одного или нескольких антиапоптотических белков семейства Bcl-2. Ввиду важной роли семейства белков Bcl-2 в регуляции апоптоза как в раковых, так и в нормальных, т. е. незлокачественных клетках, а также признанной вариабельности межклеточного типа экспрессии белка семейства Bcl-2, целесообразно иметь низкомолекулярный ингибитор, который селективно воздействует и предпочтительно связывается с одним типом или подгруппой антиапоптотического белка (белков) Bcl-2, например, с антиапоптотическим членом семейства Bcl-2, который сверхэкспрессируется при определенном типе рака. Такое селективное соединение также может придавать определенные преимущества в клинических условиях, обеспечивая, например, гибкость в выборе режима дозирования, сниженный токсический эффект на мишень в нормальных клетках, среди прочего, например, лимфопения наблюдается у Bcl-2 дефицитных мышей. См. Nakayama, К. и др. PNAS 91:3700-3704 (1994).
Существует постоянная потребность в небольших молекулах, которые селективно ингибируют активность одного типа или подгруппы белков Bcl-2 для лечения гиперпролиферативных заболеваний, таких как рак.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В одном аспекте, данное описание относится к соединениям, представленным любой из Формул I-A или I-VIII, ниже, и к их фармацевтически приемлемым солям и сольватам, например, их гидратам, которые в совокупности упоминаются в данном документе как «Соединения по данному Описанию».
В другом аспекте, данное описание относится к фармацевтической композиции, содержащей Соединение по данному Описанию и один или несколько фармацевтически приемлемых носителей.
В другом аспекте, данное описание относится к способу ингибирования белков Bcl-2, например, Bcl-2, Bcl-w, Bcl-xL, Mcl-1 и Bfl-1/A1, или любой их комбинации у субъекта, например, человека, включающему введение субъекту эффективного количества по меньшей мере одного Соединения по данному Описанию.
В другом аспекте, данное описание относится к способам лечения или профилактики заболеваний, расстройств, или состояний, например, гиперпролиферативного заболевания, например, рака, например, мелкоклеточного рака легкого, неходжкинской лимфомы (НХЛ), острого миелогенного лейкоза (ОМЛ), хронического лимфоидного (или лимфоцитарного) лейкоза (ХЛЛ), или острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ), у субъекта восприимчивого к ингибированию Bcl-2 белков, например, Bcl-2 и/или Bcl-хL, включающим введение субъекту терапевтически эффективного количества Соединения по данному Описанию.
В другом аспекте, данное описание относится к применению Соединений по данному Описанию в качестве ингибиторов одного или нескольких белков Bcl-2, например, Bcl-2 и/или Bcl-xL.
В другом аспекте, данное описание относится к применению Соединений по данному Описанию в качестве ингибиторов Bcl-2.
В другом аспекте, данное описание относится к применению Соединений по данному Описанию в качестве ингибиторов Bcl-xL.
В другом аспекте, данное описание относится к фармацевтической композиции для лечения заболеваний, расстройств, или состояний, восприимчивых к ингибированию белков Bcl-2, например, Bcl-2 и/или Bcl-xL, причем фармацевтическая композиция содержит терапевтически эффективное количество Соединения по данному Описанию, необязательно смешанное с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями.
В другом аспекте, данное описание относится к Соединениям по данному Описанию для применения при лечении или профилактике заболевания, расстройства, или состояния, например, гиперпролиферативного заболевания, например, рака, у субъекта, например, человека.
В другом аспекте, данное описание относится к Соединению по данному Описанию для применения в производстве лекарственного средства для лечения заболевания, расстройства, или состояния, например, гиперпролиферативного заболевания, например, рака, у субъекта, например, человека.
В другом аспекте, данное описание относится к набору, содержащему Соединение по данному Описанию.
В другом аспекте, данное описание относится к набору, содержащему Соединение по данному Описанию и второй терапевтический агент, применяемый для лечения заболевания, расстройства, или состояния, представляющего интерес, и листок-вкладыш в упаковку, содержащий инструкции по применению для лечения данного заболевания, расстройства, или состояния.
В другом аспекте, данное описание относится к композиции, содержащей: (а) Соединение по данному Описанию; (b) второй терапевтически активный агент; и (с) необязательно наполнитель и/или фармацевтически приемлемый носитель.
Дополнительные варианты реализации и преимущества изобретения будут частично изложены в последующем описании, и будут следовать из описания, или могут быть изучены при реализации изобретения. Варианты реализации и преимущества изобретения будут реализованы и достигнуты посредством элементов и комбинаций, в частности указанных в прилагаемой формуле изобретения.
Следует понимать, что как вышеприведенная сущность, так и последующее подробное описание являются только типовыми и пояснительными, и не ограничивают заявленное изобретение.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
На Фиг.1 представлена иллюстрация (Вестерн-блоттинг анализ), показывающая экспрессию PARP, расщепленной каспазы-3, и Bcl-2 в RS4;11 ксенотрансплантантных опухолевых тканях, полученных от мышей после введения Соединений по данному Описанию и ABT-199.
На Фиг.2 представлена иллюстрация (Вестерн-блоттинг анализ), показывающая экспрессию PARP и каспазы-3 в RS4;11 ксенотрансплантантных опухолевых тканях, полученных от мышей после введения Соединений по данному Описанию.
На Фиг.3 представлен линейный график, показывающий противоопухолевую активность Соед. № 6 в RS4;11 ксенотрансплантантной модели лейкоза.
На Фиг.4 представлен линейный график, показывающий вес мыши после введения Соед. № 6 в RS4;11 ксенотрансплантантной модели лейкоза.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Соединения по данному Описанию ингибируют белки Bcl-2, например, Bcl-2 и/или Bcl-xL. Ввиду этого свойства, Соединения по данному Описанию могут быть применены для лечения или профилактики заболеваний, расстройств, или состояний, например, гиперпролиферативного заболевания, например, рака, восприимчивого к ингибированию белков Bcl-2 у субъекта. Рак, восприимчивый к ингибированию белков Bcl-2, включает, но не ограничиваясь ими, мелкоклеточный рак легкого, НХЛ, ОМЛ, ХЛЛ, и ОЛЛ.
В одном варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A:
I-A,
или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где:
А выбран из группы, состоящей из:
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, и 
;
E представляет собой атом углерода и 
представляет собой двойную связь; или
E представляет собой -C(H)- и представляет собой простую связь; или
E представляет собой атом азота и представляет собой простую связь;
X1, X2,и X3 каждый независимо выбран из группы, состоящей из -CR8= и -N=;
R1a и R1b, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют 3-, 4-, или 5-членный необязательно замещенный циклоалкил; или
R1a и R1b, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют 4- или 5-членный необязательно замещенный гетероцикл;
R2 выбран из группы, состоящей из -NO2, -SO2CH3, и -SO2CF3;
R2a выбран из группы, состоящей из водорода и галогена;
R3 выбран из группы, состоящей из водорода, -CN, -C≡CH, и -N(R4a)(R4b);
R4a выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного C1-6 алкила, необязательно замещенного C3-6 циклоалкила, гетероцикла, гетероалкила, (циклоалкил)алкила, и (гетероцикло)алкила;
R4b выбран из группы, состоящей из водорода и C1-4 алкила;
R5 выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного C1-6 алкила, гетероцикла, гетероалкила, (циклоалкил)алкила, и (гетероцикло)алкила;
R6a, R6c, R6e, R6f, и R6g каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, необязательно замещенного C1-6 алкила, необязательно замещенного C3-6 циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила, гетероцикла, гетероалкила, (циклоалкил)аллкила, и (гетероцикло)алкила;
R6b и R6d каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, C1-4 алкила, и галогена;
R7 выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного С1-6 алкила, гетероцикла, гетероалкила, (циклоалкил)алкила и (гетероцикло)алкила; и
R8 выбран из группы, состоящей из водорода и галогена.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A, где:
А выбран из группы, состоящей из А-1, А-2, А-3, А-4, А-5, А-6, А-7, А-8, и А-9;
R4a выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного C1-6 алкила, гетероцикла, гетероалкила, (циклоалкил)алкила и (гетероцикло)алкила; и
R6a, R6c, R6e, R6f, и R6g каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, необязательно замещенного C1-6 алкила, гетероцикла, гетероалкила, (циклоалкил)алкила и (гетероцикло)алкила.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I:
I,
или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где:
E представляет собой атом углерода и представляет собой двойную связь; или
E представляет собой -C(H)- и представляет собой простую связь; или
E представляет собой атом азота и представляет собой простую связь;
R1a и R1b, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют 3-, 4-, или 5-членный необязательно замещенный циклоалкил; или
R1a и R1b, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют 4- или 5-членный необязательно замещенный гетероцикл;
R2 выбран из группы, состоящей из -NO2, -SO2CH3, и -SO2CF3;
R3 выбран из группы, состоящей из водорода, -CN, -C≡CH, и -N(R4a)(R4b);
R4a выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного C1-6 алкила, гетероцикла, (циклоалкил)алкила, и (гетероцикло)алкила; и
R4b выбран из группы, состоящей из водорода и C1-4 алкила.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу II:
II,
или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где Y выбран из группы, состоящей из -CH2- и -O-, и R2 и R4a являются такими, как определено в связи с Формулой I.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу III:
III,
или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где Y выбран из группы, состоящей из -CH2- и -O-, и R2 и R4a являются такими, как определено в связи с Формулой I.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу IV:
IV,
или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где Y выбран из группы, состоящей из -CH2- и -O-, и R2 и R4a являются такими, как определено в связи с Формулой I.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу V:
V,
или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где Y выбран из группы, состоящей из -CH2- и -O-, и A, X1, X2, и X3 являются такими, как определено в связи с Формулой I-A.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу VI:
VI,
или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где Y выбран из группы, состоящей из -CH2- и -O-, и A является таким, как определено в связи с Формулой I-A.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A, V, или VI, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где А представляет собой А-1.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A, V, или VI, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где А представляет собой А-2.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A, V, или VI, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где А представляет собой А-3.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A, V, или VI, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где А представляет собой А-4.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A, V, или VI, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где А представляет собой А-5.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A, V, или VI, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где А представляет собой А-6.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A, V, или VI, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где А представляет собой А-7.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A, V, или VI, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где А представляет собой А-8.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A, V, или VI, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где А представляет собой А-9.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A, V, или VI, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где А представляет собой А-10.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу VII:
VII,
или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где Y выбран из группы, состоящей из -CH2- и -O-, и X1, X2, X3, R2, и R4a являются такими, как определено в связи с Формулой I-A.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A, V, или VII, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где X1, X2, и X3 каждый представляет собой -CH=.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A, V, или VII, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где X1 представляет собой -CF=, а X2 и X3 каждый представляет собой -CH=.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A, V, или VII, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где X1 и X3 каждый представляет собой -CH=, и X2 представляет собой -CF=.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A, V, или VII, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где X1 и X2 каждый представляет собой -CH=, и X3 представляет собой -CF=.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A, V, или VII, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где X1 представляет собой -N=, а X2 и X3 каждый представляет собой -CH=.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A, V, или VII, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где X1 и X3 каждый представляет собой -CH=, и X2 представляет собой -N=.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу I-A, V, или VII, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где X1 и X2 каждый представляет собой -CH=, и X3 представляет собой -N=.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие любую из Формул II-VII, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где Y представляет собой O-.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие любую из Формул II-VII, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где Y представляет собой CH2-.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие любую из Формул I-A или I-VII, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где R2 представляет собой -NO2.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие любую из Формул I-IV, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где R4a выбран из группы, состоящей из:
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие любую из Формул I-A или V-VII, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где R4a, R5, R6a, и R7 каждый независимо выбран из группы, состоящей из:
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу VIII:
VIII,
или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где R2a представляет собой водород или фтор, и R4a является таким, как определено в связи с Формулой I-A.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, имеющие Формулу VIII, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где R4a выбран из группы, состоящей из:
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию представляют собой соединения, выбранные из одного или нескольких соединений из Таблицы 1, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват.
Таблица 1
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по изобретению представляют собой соединения, выбранные из одного или нескольких соединений из Таблицы 1-A, или их фармацевтически приемлемой соли или сольвата.
Таблица 1-A
В другом варианте реализации изобретения, Соединение по данному Описанию представляет собой соединение из таблицы 1-B, или его фармацевтически приемлемую соль или сольват.
Таблица 1-B
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по изобретению представляют собой соединения, выбранные из одного или нескольких соединений из Таблицы 1-C, или их фармацевтически приемлемую соль или сольват.
Таблица 1-C
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию выбраны из группы, состоящей из:
.
или их фармацевтически приемлемых солей или сольватов.
В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию выбраны из группы, состоящей из:
.
или их фармацевтически приемлемых солей или сольватов.
В другом варианте реализации изобретения, Соединение по данному Описанию представляет собой:
.
или его фармацевтически приемлемую соль или сольват.
В другом варианте реализации изобретения, данное описание относится к фармацевтической композиции, содержащей Соединение по данному Описанию, или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, и фармацевтически приемлемый носитель.
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
В данном описании, термин «галоген», применяемый сам по себе или как часть другой группы, относится к -Cl, -F, -Br, или -I.
В данном описании, термин «нитро», применяемый сам по себе или как часть другой группы, относится к -NO2.
В данном описании, термин «циано», применяемый сам по себе или как часть другой группы, относится к -CN.
В данном описании, термин «гидрокси», применяемый сам по себе или как часть другой группы, относится к -ОН.
В данном описании, термин «амино», применяемый сам по себе или как часть другой группы, относится к -NH2.
В данном описании, термин «алкил», применяемый сам по себе или как часть другой группы, относится к незамещенным неразветвленным или разветвленным алифатическим углеводородам, содержащим от одного до двенадцати атомов углерода, т.е. C1-12 алкил, или алкил с указанным числом атомов углерода, например, C1 алкил, такой как метил, C2 алкил, такой как этил, C3 алкил, такой как пропил или изопропил, C1-3 алкил, такой как метил, этил, пропил, или изопропил, и т. д. В одном варианте реализации изобретения, алкильная группа представляет собой неразветвленную C1-6 алкильную группу. В другом варианте реализации изобретения, алкильная группа представляет собой разветвленную C3-6 алкильную группу. В другом варианте реализации изобретения, алкильная группа представляет собой неразветвленную C1-4 алкильную группу. В другом варианте реализации изобретения, алкильная группа представляет собой разветвленную C3-4 алкильную группу. В другом варианте реализации изобретения, алкильная группа представляет собой неразветвленную или разветвленную C3-4 алкильную группу. В другом варианте реализации изобретения, алкильная группа частично или полностью дейтерирована, т.е. один или несколько атомов водорода алкильной группы заменены атомами дейтерия. Неограничивающие примеры С1-12 алкильных групп включают метил, -CD3, этил, пропил, изопропил, бутил, втор-бутил, трет-бутил, изобутил, 3-пентил, гексил, гептил, октил, нонил и децил. Неограничивающие примеры С1-4 алкильных групп включают метил, этил, пропил, изопропил, бутил, втор-бутил, трет-бутил и изобутил. Неограничивающие примеры C1-4 групп включают метил, этил, пропил, изопропил и трет-бутил.
В данном описании, термин «необязательно замещенный алкил», применяемый сам по себе или как часть другой группы, относится к алкилу, который не замещен или замещен одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена, нитро, циано, гидрокси, алкокси, амино, алкиламино, диалкиламино и необязательно замещенного арила. В одном варианте реализации изобретения, необязательно замещенный алкил замещен двумя заместителями. В другом варианте реализации изобретения, необязательно замещенный алкил замещен одним заместителем. В другом варианте реализации изобретения, необязательно замещенный алкил является незамещенным. Неограничивающие примеры необязательно замещенных алкильных групп включают -CH2Ph, -CH2CH2NO2, -CH2CH2OH, -CH2CH2OCH3 и CH2CH2F.
В данном описании, термин «циклоалкил», применяемый сам по себе или как часть другой группы, относится к незамещенным насыщенным или частично ненасыщенным, например, содержащим одну или две двойные связи, циклическим алифатическим углеводородам, содержащим от одного до трех колец, имеющих от трех до двенадцати атомов углерода, т. е. C3-12 циклоалкил, или циклоалкил с указанным числом атомов углерода. В одном варианте реализации изобретения, циклоалкильная группа имеет два кольца. В одном варианте реализации изобретения, циклоалкильная группа имеет одно кольцо. В другом варианте реализации изобретения, циклоалкильная группа представляет собой С3-8 циклоалкил. В другом варианте реализации изобретения, циклоалкильная группа представляет собой С3-6 циклоалкил. В другом варианте реализации изобретения, циклоалкильная группа представляет собой С3-5 циклоалкил. Термин «циклоалкил» подразумевает включение групп, в которых звено -CH2- заменено на -C(=O)-. Неограничивающие примеры циклоалкильных групп включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил, норборнил, декалин, адамантил, циклогексенил, циклопентенил, циклопентанон, спиро[3.3]гептан и бицикло[3.3.1]нонан.
В данном описании, термин «необязательно замещенный циклоалкил», применяемый сам по себе или как часть другой группы, относится к циклоалкилу, который является незамещенным, или замещен одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена, нитро, циано, гидрокси, алкил, алкокси, амино, алкиламино, диалкиламино, галогеналкила и гетероцикла. В одном варианте реализации изобретения, необязательно замещенный циклоалкил замещен двумя заместителями. В другом варианте реализации изобретения, необязательно замещенный циклоалкил замещен одним заместителем. В другом варианте реализации изобретения, необязательно замещенный циклоалкил является незамещенным.
В данном описании, термин «галогеналкил», применяемый сам по себе или как часть другой группы, относится к алкилу, замещенному одним или несколькими атомами фтора, хлора, брома и/или йода. В одном варианте реализации изобретения, алкильная группа замещена одним, двумя или тремя атомами фтора и/или хлора. В другом варианте реализации изобретения, галогеналкильная группа представляет собой C1-4 галогеналкильную группу. Неограничивающие примеры галогеналкильных групп включают группы фторметил, 2-фторэтил, дифторметил, трифторметил, пентафторэтил, 1,1-дифторэтил, 2,2-дифторэтил, 2,2,2-трифторэтил, 3,3,3-трифторпропил, 4,4,4-трифторбутил и трихлорметил.
В данном описании, термин «алкокси», применяемый сам по себе или как часть другой группы, относится к необязательно замещенному алкилу, присоединенному к терминальному атому кислорода. В одном варианте реализации изобретения, алкоксигруппа представляет собой C1-6 алкил, присоединенный к терминальному атому кислорода. В другом варианте реализации изобретения, алкоксигруппа представляет собой C1-4 алкил, присоединенный к терминальному атому кислорода. Неограничивающие примеры алкоксигрупп включают группы метокси, этокси и трет-бутокси.
В данном описании, термин «арил», применяемый сам по себе или как часть другой группы, относится к незамещенным моноциклическим или бициклическим ароматическим кольцевым системам, имеющим от шести до четырнадцати атомов углерода, т. е. C6-14 арил. Неограничивающие примеры арильных групп включают группы фенил (сокращенно «Ph»), нафтил, фенантрил, антрацил, инденил, азуленил, бифенил, бифениленил и флуоренил. В одном варианте реализации изобретения, арильная группа представляет собой фенил или нафтил.
В данном описании, термин «необязательно замещенный арил», применяемый в данном документе сам по себе или как часть другой группы, относится к арилу, который является незамещенным, или замещен одним-пятью заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена, нитро, циано, гидрокси, алкил, алкокси, амино, алкиламино, диалкиламино, галогеналкила, и гетероцикла. В одном варианте реализации изобретения, необязательно замещенный арил представляет собой необязательно замещенный фенил. В другом варианте реализации изобретения, необязательно замещенный фенил имеет один заместитель. В другом варианте реализации изобретения, необязательно замещенный фенил является незамещенным. Неограничивающие примеры замещенных арильных групп включают 2-метилфенил, 2-метоксифенил, 2-фторфенил и 4-хлорфенил.
В данном описании, термин «гетероцикл», применяемый сам по себе или как часть другой группы, относится к незамещенным насыщенным и частично ненасыщенным, например, содержащим одну или две двойные связи, циклическим группам, содержащим одно, два или три кольца, имеющие от трех до четырнадцати членов кольца, т. е. от 3- до 14-членные гетероциклы, где по меньшей мере один атом углерода одного из колец замещен гетероатомом. Термин «гетероцикл» подразумевает включение циклических уреидогрупп, таких как имидазолидинил-2-он, циклических амидных групп, таких как β-лактам, γ-лактам, δ-лактам и ε-лактам, и циклических карбаматных групп, таких как оксазолидинил-2-он. В одном варианте реализации изобретения, гетероциклильная группа представляет собой 4-, 5-, 6-, 7- или 8-членную циклическую группу, содержащую одно кольцо и один или два атома кислорода и/или азота. В одном варианте реализации изобретения, гетероциклильная группа представляет собой 5- или 6-членную циклическую группу, содержащую одно кольцо и один или два атома азота. В одном варианте реализации изобретения, гетероциклильная группа представляет собой 8-, 9-, 10-, 11- или 12-членную циклическую группу, содержащую два кольца и один или два атома азота. В одном варианте реализации изобретения, гетероциклильная группа представляет собой 4- или 5-членную циклическую группу, содержащую одно кольцо и один атом кислорода. Гетероцикл может быть необязательно связан с остальной частью молекулы через атом углерода или азота. Неограничивающие примеры гетероциклильных групп включают 1,4-диоксан, 2-оксопирролидин-3-ил, 2-имидазолидинон, пиперидинил, морфолинил, пиперазинил, пирролидинил, 8-азабицикло[3.2.1]октан (нортропан), 6-азаспиро[2.5]октан, 6-азаспиро[3.4]октан, индолинил, индолинил-2-он и 1,3-дигидро-2Н-бензо[d]имидазол-2-он.
В данном описании, термин «необязательно замещенный гетероцикл», применяемый в данном документе сам по себе или как часть другой группы, относится к гетероциклу, который является незамещенным, или замещен одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена, нитро, циано, гидрокси, алкил, алкокси, амино, алкиламино, диалкиламино, галогеналкила, и гетероцикла. Неограничивающие примеры необязательно замещенных гетероциклильных групп включают:
.
В данном описании, термин «алкиламино», применяемый сам по себе или как часть другой группы, относится к -NHR10, где R10 представляет собой C1-6 алкил. В одном варианте реализации изобретения, R10 представляет собой C1-4 алкил. Неограничивающие примеры алкиламиногрупп включают -N(H)CH3 и -N(H)CH2CH3.
В данном описании, термин "диалкиламино", применяемый сам по себе или как часть другой группы, относится к -NR11aR11b, где R11a и R11b каждый независимо представляет собой C1-6 алкил. В одном варианте реализации изобретения, R11a и R11b каждый независимо представляет собой C1-4 алкил. Неограничивающие примеры диалкиламиногрупп включают -N(CH3)2 и -N(CH3)CH2CH(CH3)2.
В данном описании, термин «(циклоалкил)алкил», применяемый сам по себе или как часть другой группы, относится к алкилу, замещенному одной необязательно замещенной циклоалкильной группой. В одном варианте реализации изобретения, (циклоалкил)алкил представляет собой C1-4 алкил, замещенный одним необязательно замещенным C3-6 циклоалкилом. В одном варианте реализации изобретения, необязательно замещенная циклоалкильная группа замещена гетероциклильной группой. Неограничивающие примеры (циклоалкил)алкильных групп включают:
.
В данном описании, термин «(гетероцикло)алкил», применяемый сам по себе или как часть другой группы, относится к алкилу, замещенному одной необязательно замещенной гетероциклильной группой. В одном варианте реализации изобретения, (гетероцикло)алкил представляет собой C1-4 алкил, замещенный одной необязательно замещенной 4-6-членной гетероциклильной группой. Гетероцикл может быть связан с алкильной группой через атом углерода или азота. Неограничивающие примеры (гетероцикло)алкильных групп включают:
В данном описании, термин «гетероалкил», применяемый сам по себе или как часть другой группы, относится к незамещенным неразветвленным или разветвленным алифатическим углеводородам, содержащим от шести до двенадцати атомов в цепи, т. е., от 6- до 12-членный гетероалкил, или гетероралкил с указанным числом атомов в цепи, где по меньшей мере две группы -CH2- независимо замещены на -O-, -N(H)- или -S-. -O-, -N(Н)- или -S- могут быть независимо помещены в любую внутреннюю позицию алифатической углеводородной цепи при условии, что каждая -O-, -N(H)-, или -S- группа разделена как минимум двумя -CH2- группами. В одном варианте реализации изобретения, две группы -CH2- заменены двумя группами -O-. В другом варианте реализации изобретения, три -CH2- группы заменены тремя группами -O-. Неограничивающие примеры гетероалкильных групп включают -CH2CH2OCH2CH2 OCH3, -CH2CH2OCH2CH2N(H)CH3 и -CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2ОСН3.
Данное описание охватывает любое из Соединений по данному Описанию, которое является изотопно-меченным (т.е., помечено радиоактивным изотопом) путем замены одного или нескольких атомов атомом, имеющим отличающуюся атомную массу или массовое число. Примеры изотопов, которые могут быть введены в описанные соединения, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора и хлора, такие как 2Н (или дейтерий (D)), 3Н, 11C, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 31P, 32P, 35S, 18F и 36Cl, соответственно, например, 3Н, 11C и 14C. В одном варианте реализации изобретения, предложена композиция, в которой, по существу, все атомы в пределах Соединения по данному Описанию заменены атомом, имеющим отличающуюся атомную массу или массовое число. В другом варианте реализации изобретения, предложена композиция, в которой часть атомов в пределах Соединения по данному Описанию заменена, т. е., Соединение по данному Описанию обогащено в положении атомом, имеющим отличающуюся атомную массу или массовое число. Изотопно-меченные Соединения по данному Описанию могут быть получены способами, известными в данной области техники.
Соединения по данному Описанию могут содержать один или несколько центров асимметриии и, таким образом, могут давать энантиомеры, диастереомеры и другие стереоизомерные формы. Данное описание подразумевает охват применения всех таких возможных форм, включая рацемические и разрешенные формы, а также их смеси. Индивидуальные стереоизомеры, например, энантиомеры, могут быть разделены в соответствии со способами, известными в данной области техники с учетом данного описания. Когда соединения, описанные в данном документе, содержат олефиновые двойные связи или другие центры геометрической асимметрии, и если не указано иное, подразумевается, что они включают как E, так и Z геометрические изомеры. Предполагается, что все таутомеры будут также включены в данное описание.
Применяемый в данном документе термин «стереоизомеры» или «стереоизомерные формы» является общим термином для всех изомеров отдельных молекул, которые отличаются только ориентацией их атомов в пространстве. Он включает энантиомеры и изомеры соединений с более чем одним хиральным центром, которые не являются зеркальными отражениями друг друга (диастереомеры).
Термин «хиральный центр» или «асимметричный атом углерода» относится к атому углерода, к которому присоединены четыре различные группы.
Термины «энантиомер» и «энантиомерный» относятся к молекуле, которая не может быть совмещена с ее зеркальным изображением и, следовательно, является оптически активной, при этом энантиомер вращает плоскость поляризованного света в одном направлении, а его зеркальное соединение вращает плоскость поляризованного света в противоположном направлении.
Термин «рацемический» относится к смеси равных частей энантиомеров, которая является оптически неактивной.
Термин «абсолютная конфигурация» относится к пространственному расположению атомов хирального химического соединения (или группы) и его стереохимическому описанию, например, R или S.
Стереохимические термины и условные обозначения, используемые в описании изобретения, подразумевают соответствие с описаными в Pure & Appl. Chem 68:2193 (1996), если не указано иное.
Термин «энантиомерный избыток» или «эи» относится к показателю того, сколько присутствует одного энантиомера по сравнению с другим. Для смеси R и S энантиомеров, процентный энантиомерный избыток определяется как│R - S│*100, где R и S представляют собой соответствующие мольные или весовые доли энантиомеров в смеси, такой, что R+S=1. При знании оптического вращения хирального вещества, процентный энантиомерный избыток определяется как ([α]obs/[α]max)*100, где [α]obs представляет собой оптическое вращение смеси энантиомеров, и [α]max представляет собой оптическое вращение чистого энантиомера. Определение энантиомерного избытка возможно с применениюм различных аналитических методов, включая ЯМР-спектроскопию, хиральную колоночную хроматографию или оптическую поляриметрию.
Термины «энантиомерно чистый» или «энантиочистый» относятся к образцу хирального вещества, все молекулы которого (в пределах обнаружения) имеют одинаковый вид хиральности. В одном варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию, имеющие один или несколько хиральных центров, являются энантиочистыми.
Термины «энантиомерно обогащенный» или «энантиообогащенный» относятся к образцу хирального вещества, энантиомерный избыток которого составляет более 50%, например, около 60% или более, около 70% или более, около 80% или более, около 90% или более, около 95% или более, около 98% или более, или около 99% или более. Энантиомерно обогащенные соединения могут быть энантиомерно чистыми. В одном варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию, имеющие один или несколько хиральных центров, являются энантиообогащенными.
Употребление терминов в единственном числе предполагает также множественное число для данных терминов.
Применяемый в данном документе термин «около» включает приведенное число ± 10%. Таким образом, «около 10» означает от 9 до 11.
Данное описание охватывает получение и применение солей Соединений по данному Описанию, включая нетоксичные фармацевтически приемлемые соли. Примеры фармацевтически приемлемых аддитивных солей включают аддитивные соли неорганических и органических кислот и основные соли. Фармацевтически приемлемые соли включают, но не ограничиваясь ими, соли металлов, такие как натриевая соль, калиевая соль, цезиевая соль и т.п.; соли щелочноземельных металлов, такие как кальциевая, магниевая соль и т.п.; соли органических аминов, такие как соль триэтиламина, соль пиридина, соль пиколина, соль этаноламина, соль триэтаноламина, соль дициклогексиламина, соль N,N'-дибензилэтилендиамина и т.п.; соли неорганических кислот, такие как гидрохлорид, гидробромид, фосфат, сульфат и т.п.; соли органических кислот, такие как цитрат, лактат, тартрат, малеат, фумарат, манделат, ацетат, дихлорацетат, трифторацетат, оксалат, формиат и т. п.; сульфонаты, такие как метансульфонат, бензолсульфонат, п-толуолсульфонат и т. п.; и соли аминокислот, такие как аргинат, аспаргинат, глутамат и т. п. Термин «фармацевтически приемлемая соль», применяемый в данном документе, относится к любой соли, например, полученой в результате реакции с кислотой или основанием, Соединения по данному Описанию, которая является физиологически переносимой для целевого пациента (например, млекопитающего, например, человека).
Кислотно-аддитивные соли могут быть получены путем смешивания раствора конкретного Соединения по данному Описанию с раствором фармацевтически приемлемой нетоксичной кислоты, такой как соляная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота, уксусная кислота, лимонная кислота, винная кислота, угольная кислота, фосфорная кислота, щавелевая кислота, дихлоруксусная кислота или т. п. Основные соли могут быть получены путем смешивания раствора соединения по данному описанию с раствором фармацевтически приемлемого нетоксичного основания, такого как гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид холина, карбонат натрия и т. п.
Данное описание охватывает получение и применение сольватов Соединений по данному Описанию. Сольваты, как правило, существенно не изменяют физиологическую активность или токсичность соединений и, как таковые, могут функционировать в качестве фармакологических эквивалентов. Применяемый в данном документе термин «сольват» означает комбинацию, физическую ассоциацию и/или сольватацию соединения по данному описанию с молекулой растворителя, такой как, например, дисольват, моносольват или полусольват, где соотношение молекул растворителя и соединения по данному описанию составляет около 2:1, около 1:1 или около 1:2, соответственно. Данная физическая ассоциация включает в себя различные степени ионного и ковалентного связывания, включая водородные связи. В некоторых случаях, сольват может быть выделен, например, когда одна или несколько молекул растворителя включены в кристаллическую решетку кристаллического твердого вещества. Таким образом, «сольват» охватывает как фазу раствора, так и сольваты, которые могут быть выделены. Соединения по данному Описанию могут присутствовать в виде сольватированных форм с фармацевтически приемлемым растворителем, таким как вода, метанол, этанол и т. п., и предполагается, что описание включает как сольватированные, так и несольватированные формы Соединений по данному Описанию.
В одном варианте реализации изобретения, сольват представляет собой гидрат. «Гидрат» относится к конкретной подгруппе сольватов, где молекулой растворителя является молекула воды. Сольваты, как правило, могут функционировать в качестве фармакологических эквивалентов. Получение сольватов известно в данной области техники. См., например, М. Caira и др., J. Pharmaceut. Sci., 93(3):601-611 (2004), где описано получение сольватов флуконазола с этилацетатом и водой. Подобное получение сольватов, полусольватов, гидратов и т.п. описано E. C. van Tonder и др., AAPS Pharm. Sci. Tech., 5(1): Статья 12 (2004), и A. L. Bingham и др., Chem. Commun. 603-604 (2001). Типичный, не ограничивающий, способ получения сольвата включает растворение Соединения по данному Описанию в желаемом растворителе (органическом, воде, или их смеси) при температуре от 20 до 25 °С, затем охлаждение раствора со скоростью, достаточной для образования кристаллов, и выделение кристаллов известными способами, например, фильтрацией. Аналитические методы, такие как инфракрасная спектроскопия, могут быть применены для подтверждения присутствия растворителя в кристалле сольвата.
Соединения по данному Описанию являются ингибиторами белков Bcl-2, таких как Bcl-2 и/или Bcl-XL, и, таким образом, лечение или профилактика ряда заболеваний, состояний или растройств, опосредованных белками Bcl-2, возможно путем введения субъекту данных соединений. Данное описание, таким образом, в целом направлено на способ лечения или профилактики заболевания, состояния или расстройства, восприимчивого к ингибированию белков Bcl-2, таких как Bcl-2 и/или Bcl-XL, у животного, страдающего от или имеющего риск данного заболевания, состояния или расстройства. Данный способ включает введение животному эффективного количества одного или нескольких Соединений по данному Описанию.
Данное описание дополнительно направлено на способ ингибирования белков Bcl-2 у животного, например, человека, нуждающегося в этом, данный способ включает введение животному терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного Соединения по данному Описанию.
Данное описание дополнительно направлено на способ ингибирования Bcl-2 у животного, например, человека, нуждающегося в этом, данный способ включает введение животному терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного Соединения по данному Описанию.
Данное описание дополнительно направлено на способ ингибирования Bcl-XL у животного, например, человека, нуждающегося в этом, данный способ включает введение животному терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного Соединения по данному Описанию.
Используемые в данном документе термины «лечить», «лечение» и тому подобное относятся к устранению, уменьшению или ослаблению заболевания или состояния, и/или связанных с ним симптомов. Несмотря на то, что это не исключается, лечение заболевания или состояния не требует полного устранения заболевания, состояния или симптомов, связанных с ним. Термин «лечить» и синонимы предполагают введение терапевтически эффективного количества Соединения по данному Описанию субъекту, нуждающемуся в таком лечении. Лечение может быть ориентировано симптоматически, например, на подавление симптомов. Это может быть осуществлено в течение короткого периода времени, ориентировано на среднесрочную перспективу, или может быть длительным лечением, например, в контексте поддерживающей терапии.
Используемые в данном документе термины «предотвращать», «предотвращение» и «профилактика» относятся к способу предотвращения возникновения заболевания или состояния и/или сопутствующих ему симптомов или защиты субъекта от заражения заболеванием. Применяемый в данном документе термин «предотвращать», «предотвращение» и «профилактика» также включает задержку начала заболевания и/или сопутствующих ему симптомов и снижение риска заражения заболеванием для субъекта. Термины «предотвращать», «профилактика» могут включать «профилактическое лечение», которое относится к снижению вероятности повторного развития заболевания или состояния, или рецидива ранее контролируемого заболевания или состояния у субъекта, который не болен, но подвержен риску или чувствителен к повторному развитию заболевания или состояния или рецидива заболевания или состояния.
Применяемый в данном документе термин «терапевтически эффективное количество» или «эффективная доза» относится к количеству активного(ых) ингредиента(ов), которое является (являются) достаточным, при введении способом по данному описанию, для эффективной доставки активного(ых) ингредиента(ов) для лечения состояния или заболевания, представляющего интерес для нуждающегося в этом лица. В случае рака или другого нарушения пролиферации, терапевтически эффективное количество агента может уменьшить (т.е. замедлить до некоторой степени и предпочтительно остановить) нежелательную клеточную пролиферацию; уменьшить количество раковых клеток; уменьшить размер опухоли; ингибировать (т. е. замедлить до некоторой степени и предпочтительно остановить) инфильтрацию раковых клеток в периферические органы; ингибировать (т. е. замедлить до некоторой степени и предпочтительно остановить) метастаз опухоли; ингибировать, до некоторой степени, рост опухоли; модулировать метилирование белка в клетках-мишенях; и/или ослабить, до некоторой степени, один или несколько симптомов, связанных с раком. В той степени, в которой вводимое соединение или композиция предотвращает рост и/или убивает существующие раковые клетки, оно может быть цитостатическим и/или цитотоксическим.
Термин «контейнер» означает любую емкость и сосуд, пригодный для хранения, транспортировки, дозирования и/или обращения с фармацевтическим продуктом.
Термин «вкладыш» означает информацию, прилагаемую к фармацевтическому продукту, которая содержит описание того, как вводить продукт, а также данные о безопасности и эффективности, необходимые для того, чтобы врач, фармацевт и пациент могли принять информированное решение относительно применения продукта. Вкладыш в упаковку обычно считается «этикеткой» для фармацевтического продукта.
В данном описании, термин «белки Bcl-2» или «семейство белков Bcl-2» относится к любому одному или нескольким из следующих белков: Bax, Bak, Bid, Bcl-2, Bcl-xL, Mcl-1, Bcl-w, Bfl-1/A1, Bim, Puma, Bad, Bik/Blk, Noxa, Bmf, Hrk/DP5 и Beclin-1. См. Cold Spring Harb Perspect Biol 2013;5:a008714.
Термин «заболевание» или «состояние» или «расстройство» обозначает нарушения и/или аномалии, которые, как правило, рассматриваются как патологические состояния или функции, и которые могут проявляться в форме конкретных признаков, симптомов и/или дисфункций. Соединения по данному Описанию ингибируют Bcl-2 белки, такие как Bcl-2 и/или Bcl-хL, и могут быть применены для лечения или профилактики заболеваний, состояний или расстройств, таких как гиперпролиферативные заболевания, при которых ингибирование Bcl-2 белков приводит к положительному эффекту.
Термин «гиперпролиферативное заболевание» относится к любому состоянию, при котором локализованная популяция пролиферирующих клеток у животного не регулируется обычными ограничениями нормального роста. В одном варианте реализации изобретения, гиперпролиферативное заболевание представляет собой рак.
В некоторых вариантах реализации изобретения, Соединения по данному Описанию могут быть применены для лечения «расстройства, опосредованного белком Bcl-2», например, Bcl-2-опосредованного расстройства, и/или Bcl-xL-опосредованного расстройства. Нарушение, опосредованное белком Bcl-2, представляет собой любое патологическое состояние, при котором, как известно, играет роль белок Bcl-2. В одном варианте реализации изобретения, Bcl-2-опосредованное расстройство представляет собой гиперпролиферативное заболевание. В одном варианте реализации изобретения, Bcl-2-опосредованное расстройство представляет собой рак.
В одном варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию имеют IC50 для Bcl-2 и/или Bcl-xL менее чем около 10 мкМ. В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию имеют IC50 для Bcl-2 и/или Bcl-xL менее чем около 5 мкМ. В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию имеют IC50 для Bcl-2 и/или Bcl-xL менее чем около 1 мкМ. В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию имеют IC50 для Bcl-2 и/или Bcl-xL менее чем около 0,5 мкМ. В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию имеют IC50 для Bcl-2 и/или Bcl-xL менее чем около 0,1 мкМ. В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию имеют IC50 для Bcl-2 и/или Bcl-xL менее чем около 0,05 мкМ. В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию имеют IC50 для Bcl-2 и/или Bcl-xL менее чем около 0,025 мкМ. В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию имеют IC50 для Bcl-2 и/или Bcl-xL менее чем около 0,010 мкМ. В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию имеют IC50 для Bcl-2 и/или Bcl-xL менее чем около 0,005 мкМ. В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию имеют IC50 для Bcl-2 и/или Bcl-xL менее чем около 0,0025 мкМ. В другом варианте реализации изобретения, Соединения по данному Описанию имеют IC50 для Bcl-2 и/или Bcl-xL менее чем около 0,001 мкМ.
В одном варианте реализации изобретения, данное описание относится к способу лечения или профилактики гиперпролиферативного заболевания у субъекта, например, человека, включающему введение терапевтически эффективного количества Соединения по данному Описанию.
В другом варианте реализации изобретения, данное описание относится к способу лечения или профилактики рака у субъекта, включающему введение терапевтически эффективного количества Соединения по данному Описанию. Не будучи ограниченым конкретным механизмом, в некоторых вариантах реализации изобретения, с помощью Соединений по данному Описанию возможно лечение или профилактика рака путем ингибирования белков Bcl-2, например Bcl-2 и/или Bcl-xL. Примеры поддающихся лечению раковых заболеваний включают, но не ограничиваясь ими, одно или несколько раковых заболеваний из Таблицы 2.
Таблица 2
В другом варианте реализации изобретения, рак представляет собой рак молочной железы, шейки матки, толстой кишки, почки, печени, головы и шеи, кожи, поджелудочной железы, яичника, пищевода, или простаты.
В другом варианте реализации изобретения, рак представляет собой гемобластоз, такой как острый миелоидный лейкоз (ОМЛ), В- и Т-острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ), хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ ), или мантийноклеточная лимфома (МКЛ).
В другом варианте реализации изобретения, рак представляет собой плоскоклеточный рак пищевода (ESCC), карциному мочевого пузыря или карциному шейки матки.
В другом варианте реализации изобретения, рак представляет собой лейкоз, например лейкоз, выбранный из острого моноцитарного лейкоза, острого миелоидного лейкоза, хронического миелоидного лейкоза, хронического лимфоцитарного лейкоза и недифференцированного лейкоза (MLL). В другом варианте реализации изобретения, рак представляет собой срединную карциному, имеющую NUT-перегруппировку. В другом варианте реализации изобретения, рак представляет собой множественную миелому. В другом варианте реализации изобретения, рак представляет собой рак легкого, такой как мелкоклеточный рак легкого (SCLC). В другом варианте реализации изобретения, рак представляет собой нейробластому. В другом варианте реализации изобретения, рак представляет собой лимфому Беркитта. В другом варианте реализации изобретения, рак представляет собой рак шейки матки. В другом варианте реализации изобретения, рак представляет собой рак пищевода. В другом варианте реализации изобретения, рак представляет собой рак яичника. В другом варианте реализации изобретения, рак представляет собой колоректальный рак. В другом варианте реализации изобретения, рак представляет собой рак предстательной железы. В другом варианте реализации изобретения, рак представляет собой рак молочной железы.
В другом варианте реализации изобретения, рак представляет собой адренокортикальный рак, уротелиальную карциному мочевого пузыря, инвазивную карциному молочной железы, колоректальную аденокарциному, диффузную В-крупноклеточную лимфому, плоскоклеточный рак головы и шеи, гепатоцеллюлярную карциному, аденокарциному легкого, плоскоклеточный рак легкого, серозную цистаденокарциному яичника, аденокарциному поджелудочной железы, аденокарциному предстательной железы, светлоклеточную карциному почки, кожную меланому, аденокарциному желудка, карциносаркому матки, или карциному эндометрия и тела матки.
В другом варианте реализации изобретения, данное описание относится к терапевтическому способу модуляции экспрессии генов, пролиферации клеток, дифференцировки клеток и/или апоптоза in vivo при раке, например, при видах раках, упомянутых выше, путем введения терапевтически эффективного количества Соединения по данному Описанию субъекту, нуждающемуся в данной терапии.
Соединения по данному Описанию могут быть введены субъекту в форме чистого соединения без содержания иных компонентов. Соединения по данному Описанию также могут быть введены субъекту в виде части фармацевтической композиции, содержащей данное соединение, в комбинации с одним или несколькими пригодными фармацевтически приемлемыми носителями. Такие носители могут быть выбраны из фармацевтически приемлемых наполнителей и вспомогательных веществ. Термин «фармацевтически приемлемый носитель» или «фармацевтически приемлемый переносчик» охватывает любой из стандартных фармацевтических носителей, растворителей, поверхностно-активных веществ или переносчиков. Пригодные фармацевтически приемлемые переносчики включают водные переносчики и неводные переносчики. Стандартные фармацевтические носители и технологии их получения описаны в Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA, 19th ed. 1995.
Фармацевтические композиции в рамках данного описания включают все композиции, в которых Соединение по данному Описанию находится в комбинации с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями. В одном варианте реализации изобретения, Соединение по данному Описанию присутствует в композиции в количестве, которое является эффективным для достижения предполагаемой терапевтической области применения. Хотя индивидуальные потребности могут варьироваться, определение оптимальных диапазонов эффективных количеств каждого соединения находится в компетенции специалиста в данной области техники. Как правило, Соединение по данному Описанию, или эквивалентное количество его фармацевтически приемлемой соли или сольвата, может быть введено млекопитающему, например, человеку, перорально в дозе от около 0,0025 до около 1500 мг на кг массы тела млекопитающего, в день для лечения конкретного расстройства. Применяемая пероральная доза Соединения по данному Описанию, или эквивалентного количества его фармацевтически приемлемой соли или сольвата, вводимая млекопитающему, составляет от около 0,0025 до около 50 мг на кг массы тела млекопитающего. Для внутримышечной инъекции, доза, как правило, составляет около половины пероральной дозы.
Разовая пероральная доза может содержать от около 0,01 мг до около 1 г Соединения по данному Описанию, например, от около 0,01 мг до около 500 мг, от около 0,01 мг до около 250 мг, от около 0,01 мг до около 100 мг, от 0,01 мг до около 50 мг, например, от около 0,1 мг до около 10 мг данногог соединения. Разовая доза может быть введена один или несколько раз в день, например, в виде одной или нескольких таблеток или капсул, каждая из которых содержит от около 0,01 мг до около 1 г данного соединения, или эквивалентное количество его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.
Соединение по данному Описанию или фармацевтическая композиция, содержащая Соединение по данному Описанию, могут быть введены любому пациенту или субъекту, который может испытать положительные эффекты Соединения по данному Описанию. Преимущественно, такими пациентами или субъектами являются млекопитающие, например, люди и домашние животные, хотя описание не предназначено для такого ограничения. В одном варианте реализации изобретения, пациентом или субъектом является человек.
Соединение по данному Описанию или фармацевтическая композиция, содержащая Соединение по данному Описанию, могут быть введены любыми способами, которые достигают предполагаемой области применения. Например, введение может быть осуществлено пероральным, парентеральным, подкожным, внутривенным, внутримышечным, внутрибрюшинным, трансдермальным, интраназальным, трансмукозальным, ректальным, интравагинальным или трансбуккальным путем, или путем ингаляции. Вводимая доза и способ введения будут варьироваться в зависимости от обстоятельств конкретного субъекта и с учетом таких факторов, как возраст, пол, состояние здоровья и вес реципиента, состояния или расстройства, подлежащего лечению, вида одновременного лечения, если таковое имеется, частоты лечения и характера желаемого эффекта.
В одном варианте реализации изобретения, Соединение по данному Описанию или фармацевтическая композиция, содержащая Соединение по данному Описанию, могут быть введены перорально. В другом варианте реализации изобретения, фармацевтическая композиция по данному описанию может быть введена перорально в составе таблеток, драже, капсул или жидкой лекарственной формы. В одном варианте реализации изобретения, композиция для перорального применения содержит множество экструдированных частиц, содержащих Соединение по данному Описанию.
В соответствии с другим вариантом, Соединение по данному Описанию или фармацевтическая композиция, содержащая Соединение по данному Описанию, могут быть введены ректально в составе суппозиториев.
В соответствии с другим вариантом, Соединение по данному Описанию или фармацевтическая композиция, содержащая Соединение по данному Описанию, могут быть введены инъекционно.
В соответствии с другим вариантом, Соединение по данному Описанию или фармацевтическая композиция, содержащая Соединение по данному Описанию, могут быть введены трансдермально.
В соответствии с другим вариантом, Соединение по данному Описанию или фармацевтическая композиция, содержащая Соединение по данному Описанию, могут быть введены путем ингаляции или интраназальным или трансмукозальным путем введения.
В соответствии с другим вариантом, Соединение по данному Описанию или фармацевтическая композиция, содержащая Соединение по данному Описанию, могут быть введены интравагинальным путем.
Фармацевтическая композиция по данному описанию может содержать от около 0,01 до 99 процентов по массе, например, от около 0,25 до 75 процентов по массе, Соединения по данному Описанию, например, около 1%, около 5%, около 10%, около 15%, около 20%, около 25%, около 30%, около 35%, около 40%, около 45%, около 50%, около 55%, около 60%, около 65%, около 70% или около 75% по массе Соединения по данному Описанию.
Фармацевтическую композицию по данному описанию производят способом, который сам по себе будет известен с точки зрения данного описания, например, посредством стандартных процессов смешивания, грануляции, приготовления драже, растворения, экструзии или лиофилизации. Таким образом, фармацевтические композиции для перорального применения могут быть получены путем комбинирования активного соединения с твердыми наполнителями, необязательно измельчения полученной смеси и обработки смеси гранул, после добавления пригодных вспомогательных веществ, если это желательно или необходимо, для получения таблеток или ядер драже.
Пригодные наполнители включают наполнители, такие как сахариды (например, лактоза, сахароза, маннит или сорбит), препараты целлюлозы, фосфаты кальция (например, трикальцийфосфат или гидрофосфат кальция), а также связующие вещества, такие как крахмальная паста (с применением, например, кукурузного крахмала, пшеничного крахмала, рисового крахмала или картофельного крахмала), желатин, трагакант, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, натрий карбоксиметилцеллюлоза, и/или поливинилпирролидон. При желании, один или несколько разрыхрытелей могут быть добавлены, таких как вышеупомянутые крахмалы, а также карбоксиметилкрахмал, сшитый поливинилпирролидон, агар, или альгиновая кислота или ее соль, такая как альгинат натрия.
Вспомогательными веществами, как правило, являются регуляторы потока и смазывающие вещества, такие как, например, диоксид кремния, тальк, стеариновая кислота или ее соли (например, стеарат магния или стеарат кальция), и полиэтиленгликоль. Ядра драже снабжены пригодными покрытиями, устойчивыми к желудочному соку. Для данной области применения, могут быть применены концентрированные растворы сахаридов, которые могут необязательно содержать гуммиарабик, тальк, поливинилпирролидон, полиэтиленгликоль и/или диоксид титана, растворы лака и пригодные органические растворители или смеси растворителей. Для получения покрытий, устойчивых к желудочному соку, могут быть применены растворы пригодных препаратов целлюлозы, таких как фталат ацетилцеллюлозы или фталат гидроксипропилметилцеллюлозы. Красящие вещества или пигменты могут быть добавлены в покрытия таблеток или драже, например, для идентификации или для характеристики комбинаций доз активного соединения.
Примеры других фармацевтических препаратов, которые могут быть применены перорально, включают твердые капсулы, сделанные из желатина, или мягкие, герметичные капсулы, сделанные из желатина и пластификатора, такого как глицерин или сорбит. Твердые капсулы могут содержать соединение в форме гранул, которые могут быть смешаны с наполнителями, такими как лактоза, связующими веществами, такими как крахмалы, и/или смазывающими веществами, такими как тальк или стеарат магния и, необязательно, стабилизаторами, или в форме множества экструдированных частиц. В мягких капсулах активные соединения предпочтительно растворяют или суспендируют в пригодных жидкостях, таких как жирные масла или жидкий парафин. Кроме того, могут быть добавлены стабилизаторы.
Возможные фармацевтические препараты для ректального введения включают, например, суппозитории, которые состоят из комбинации одного или нескольких активных соединений с суппозиторной основой. Пригодные суппозиторные основы включают, среди прочих, природные и синтетические триглицериды и парафиновые углеводороды. Также возможно применение желатиновых ректальных капсул, состоящих из комбинации активного соединения с основным материалом, таким как, например, жидкий триглицерид, полиэтиленгликоль или парафиновый углеводород.
Подходящие композиции для парентерального введения включают водные растворы активного соединения в водорастворимой форме, такой как, например, водорастворимая соль, щелочной раствор или кислотный раствор. В соответствии с другим вариантом, суспензия активного соединения может быть приготовлена в виде масляной суспензии. Пригодные липофильные растворители или переносчики для такой суспензии могут включать жирные масла (например, кунжутное масло), синтетические сложные эфиры жирных кислот (например, этил олеат), триглицериды, или полиэтиленгликоль, такой как полиэтиленгликоль-400 (ПЭГ-400). Водная суспензия может содержать одно или несколько веществ для увеличения вязкости суспензии, включая, например, натрий карбоксиметилцеллюлозу, сорбит и/или декстран. Суспензия может необязательно содержать стабилизаторы.
В другом варианте реализации изобретения, данное описание относится к наборам, которые содержат Соединение по данному Описанию (или фармацевтическую композицию, содержащую Соединение по данному Описанию), упакованным таким образом, который облегчает их применение для осуществления способов данного описания. В одном варианте реализации изобретения, набор включает Соединение по данному Описанию (или фармацевтическую композицию, содержащую Соединение по данному Описанию), упакованное в контейнер, такой как запечатанная бутылка или сосуд, с этикеткой, прикрепленной к контейнеру или включенной в набор, которая описывает применение соединения или композиции для осуществления способов данного описания. В одном варианте реализации изобретения, соединение или композиция упакованы в лекарственную форму с однократной дозировкой. Кроме того, набор может включать устройство, пригодное для введения композиции в соответствии с предполагаемым путем введения.
В другом варианте реализации изобретения, Соединение по данному Описанию вводят субъекту в сочетании со вторым терапевтическим агентом. Второй терапевтический агент отличается от Соединения по данному Описанию. Соединение по данному Описанию и второй терапевтический агент могут быть введены одновременно или последовательно для достижения желаемого эффекта. Кроме того, Соединение по данному Описанию и второй терапевтический агент могут быть введены из одной композиции или двух отдельных композиций.
Второй терапевтический агент вводят в количестве, обеспечивающем его желаемый терапевтический эффект. Диапазон эффективных доз для каждого второго терапевтического агента известен в данной области техники, и второй терапевтический агент вводят субъекту, нуждающемуся в этом, в таких установленных пределах.
Соединение по данному Описанию и второй терапевтический агент могут быть введены вместе в виде одной единичной дозы или отдельно в виде нескольких единичных доз, причем Соединение по данному Описанию вводят перед вторым терапевтическим агентом, или наоборот. Может быть введена одна или несколько доз Соединения по данному Описанию и/или одна или несколько доз второго терапевтического агента. Соединение по данному Описанию, следовательно, может быть применено в сочетании с одним или несколькими вторыми терапевтическими агентами, например, противораковыми агентами, но не ограничиваясь ими.
В некоторых вариантах реализации изобретения, второй терапевтический агент представляет собой эпигенетическое лекарственное средство. Применяемый в данном документе термин «эпигенетическое лекарственное средство» относится к терапевтическому агенту, который нацелен на эпигенетический регулятор. Примеры эпигенетических регуляторов включают гистон-лизин метилтрансферазы, гистон-аргинин метилтрансферазы, гистоновые деметилазы, гистоновые деацетилазы, гистоновые ацетилазы и ДНК-метилтрансферазы. Ингибиторы гистоновой деацетилазы включают, но не ограничиваясь им, вориностат.
В другом варианте реализации изобретения, химиотерапевтические агенты или другие антипролиферативные агенты могут быть скомбинированы с Соединением по данному Описанию для лечения пролиферативных заболеваний и рака. Примеры методов лечения и противораковых агентов, которые могут быть применены в комбинации с Соединениями по данному Описанию, включают хирургическое вмешательство, лучевую терапию (например, гамма-излучение, нейтронную лучевую терапию, электронную лучевую терапию, протонную терапию, брахитерапию и системные радиоактивные изотопы), эндокринную терапию, модификатор биологического ответа (например, интерферон, интерлейкин, фактор некроза опухоли (TNF), гипертермия и криотерапия, агент для ослабления любого неблагоприятного воздействия (например, противорвотное средство) и любой другой одобренный химиотерапевтический препарат.
Примеры антипролиферативных соединений включают, но не ограничиваются ими, ингибитор ароматазы; антиэстроген; антиандроген; агонист гонадорелина; ингибитор топоизомеразы I; ингибитор топоизомеразы II; активный по отношению к микротрубочкам агент; алкилирующий агент; ретиноид, каротиноид или токоферол; ингибитор циклооксигеназы; ингибитор ММР; ингибитор mTOR; антиметаболит; соединение платины; ингибитор метионин-аминопептидазы; бисфосфонат; антипролиферативное антитело; ингибитор гепараназы; ингибитор Ras-онкогенных изоформ; ингибитор теломеразы; ингибитор протеасомы; соединение, применяемое при лечении гематологических злокачественных новообразований; ингибитор Flt-3; ингибитор Hsp90; ингибитор кинезинового белка веретена; ингибитор MEK; противоопухолевый антибиотик; нитрозомочевина; соединение, целенаправленно воздействующее/снижающее активность протеинкиназы или липидкиназы, соединение, целенаправленно воздействующее/снижающее активность протеинфосфатазы или липидфосфатазы, или любое другое антиангиогенное соединение.
Неограничивающие примеры ингибиторов ароматазы включают, но не ограничиваются ими, стероиды, такие как атаместан, экземестан и форместан, и нестероиды, такие как аминоглутетимид, роглетимид, пиридоглутетимид, трилостан, тестолактон, кетоконазол, ворозол, фадрозол, анастрозол, и летрозол.
Неограничивающие антиэстрогены включают, но не ограничиваются ими, тамоксифен, фулвестрант, ралоксифен и ралоксифена гидрохлорид. Антиандрогены включают, но не ограничиваются им, бикалутамид. Агонисты гонадорелина включают, но не ограничиваются ими, абареликс, гозерелин и ацетат гозерелина.
Типичные ингибиторы топоизомеразы I включают, но не ограничиваются ими, топотекан, гиматекан, иринотекан, камптотецин и его аналоги, 9-нитрокамптотецин и макромолекулярный конъюгат камптотецина PNU-166148. Ингибиторы топоизомеразы II включают, но не ограничиваются ими, антрациклины, такие как доксорубицин, даунорубицин, эпирубицин, идарубицин и неморубицин; антрахиноны, такие как митоксантрон и лосоксантрон; и подофиллотоксины, такие как этопозид и тенипозид.
Активные по отношению к микротрубочкам вещества включают соединения, стабилизирующие микротрубочки, соединения, дестабилизирующие микротрубочки, и ингибиторы полимеризации микротрубочек, включая, но не ограничиваясь ими, таксаны, такие как паклитаксел и доцетаксел; алкалоиды барвинка, такие как винбластин, винбластин сульфат, винкристин и винкристин сульфат и винорелбин; дискодермолиды; кохицин и эпотилоны и их производные.
Неограничивающие примеры алкилирующих агентов включают циклофосфамид, ифосфамид, мелфалан и производные нитрозомочевины, такие как кармустин и ломустин.
Неограничивающие примеры ингибиторов циклооксигеназы включают ингибиторы Cox-2, 5-алкилзамещенную 2-ариламинофенилуксусную кислоту и ее производные, такие как целекоксиб, рофекоксиб, эторикоксиб, вальдекоксиб или 5-алкил-2-ариламинофенилуксусную кислоту и ее производное, такое как люмиракоксиб.
Неограничивающие примеры ингибиторов матриксной металлопротеиназы («ингибиторы ММР») включают пептидомиметические и непептидомиметические ингибиторы коллагена, производные тетрациклина, батимастат, маримастат, приномастат, метастат, BMS-279251, BAY 12 9566, TAA211, MMI2996 и MMI299B.
Неограничивающие примеры ингибиторов mTOR включают соединения, которые ингибируют мишень рапамицина млекопитающих (mTOR) и обладают антипролиферативной активностью, такие как сиролимус, эверолимус, CCI-779 и ABT578.
Неограничивающие примеры антиметаболитов включают 5-фторурацил (5-FU), капецитабин, гемцитабин, ДНК-деметилирующие соединения, такие как 5-азацитидин и децитабин, метотрексат и эдатрексат, и антагонисты фолиевой кислоты, такие как пеметрексед.
Неограничивающие примеры соединений платины включают карбоплатин, цис-платин, цисплатину и оксалиплатин.
Неограничивающие примеры ингибиторов метионин аминопептидазы включают бенгамид или его производное и PPI-2458.
Неограничивающие примеры бисфосфонатов включают этридоновую кислоту, клодроновую кислоту, тилудроновую кислоту, памидроновую кислоту, алендроновую кислоту, ибандроновую кислоту, ризедроновую кислоту и золедроновую кислоту.
Неограничивающие примеры антипролиферативных антител включают трастузумаб, трастузумаб-DM1, цетуксимаб, бевацизумаб, ритуксимаб, PR064553 и 2C4. Термин «антитело» подразумевает включение интактных моноклональных антител, поликлональных антител, полиспецифических антител, образованных по меньшей мере из двух интактных антител, и фрагментов антител, при условии, что они проявляют желаемую биологическую активность.
Неограничивающие примеры ингибиторов гепараназы включают соединения, которые целенаправленно воздействуют, снижают или ингибируют деградацию сульфата гепарина, такие как PI-88 и OGT2115.
Применяемый в данном документе термин «ингибитор онкогенных изоформ Ras», таких как H-Ras, K-Ras или N-Ras, относится к соединению, которое целенаправленно воздействует, снижает или ингибирует онкогенную активность Ras, например ингибитор фарнезилтрансферазы, такой как L-744832, DK8G557, типифарниб и лонафарниб.
Неограничивающие примеры ингибиторов теломеразы включают соединения, которые целенаправленно воздействуют, снижают или ингибируют активность теломеразы, такие как соединения, которые ингибируют рецептор теломеразы, такие как теломестатин.
Неограничивающие примеры ингибиторов протеасомы включают соединения, которые целенаправленно воздействуют, снижают или ингибируют активность протеасомы, включая, но не ограничиваясь им, бортезомид.
Используемая в данном документе фраза «соединения, используемые для лечения гематологических злокачественных опухолей» включает ингибиторы FMS-подобной тирозинкиназы, которые представляют собой соединения, целенаправленно воздействующие, снижающие или ингибирующие активность рецепторов FMS-подобной тирозинкиназы (Flt-3R); интерферон, β-β-D-арабинофурансилцитозин (ara-c), и бисульфан; и ингибиторы ALK, которые представляют собой соединения, которые целенаправленно воздействуют, уменьшают, или ингибируют киназу анапластической лимфомы.
Неограничивающие примеры ингибиторов Flt-3 включают PKC412, мидостаурин, производное стауроспорина, SU11248, и MLN518.
Неограничивающие примеры ингибиторов HSP90 включают соединения, целенаправленно воздействующие, снижающие или ингибирующие собственную АТФазную активность HSP90; или разлагающие, целенаправленно воздействующие, снижающие или ингибирующие белки-клиенты HSP90 посредством убиквитин-протеосомного пути. Соединения, целенаправленно воздействующие, снижающие или ингибирующие внутреннюю АТФазную активность HSP90, представляют собой, в частности, соединения, белки или антитела, которые ингибируют АТФазную активность HSP90, такие как 17-аллиламино-17-деметоксигельданамицин (17AAG), производное гельданамицина; другие родственные гельданамицину соединения; радицикол и ингибиторы HDAC.
Фраза «соединение, целенаправленно воздействующее/снижающее активность протеинкиназы или липидкиназы, или активность протеинфосфатазы или липидфосфатазы, или любое другое антиангиогенное соединение», как используется в данном документе, включает ингибитор протеинтирозинкиназы и/или серинкиназы и/или треонинкиназы, или ингибитор липидкиназы, такой как а) соединение, целенаправленно воздействующее, снижающее или ингибирующее активность рецепторов фактора роста, полученных из тромбоцитов (PDGFR), такое как соединение, которое целенаправленно воздействует, снижает или ингибирует активность PDGFR, такое как производные N-фенил-2-пиримидинамина, такие как иматиниб, SU101, SU6668 и GFB-111; b) соединение, целенаправленно воздействующее, снижающее или ингибирующее активность рецепторов фактора роста фибробластов (FGFR); c) соединение, целенаправленно воздействующее, снижающее или ингибирующее активность рецептора инсулиноподобного фактора роста I (IGF-IR), такое как соединение, которое целенаправленно воздействует, снижает или ингибирует активность IGF-IR; d) соединение, целенаправленно воздействующее, снижающее или ингибирующее активность Trk-рецепторов семейства тирозинкиназ, или ингибиторы эфрина В4; e) соединение, целенаправленно воздействующее, снижающее или ингибирующее активность Axl-рецепторов семейства тирозинкиназ; f) соединение, целенаправленно воздействующее, снижающее или ингибирующее активность Ret-рецепторной тирозинкиназы; g) соединение, целенаправленно воздействующее, снижающее или ингибирующее активность Kit/SCFR-рецепторной тирозинкиназы, такое как иматиниб; h) соединение, целенаправленно воздействующее, снижающее или ингибирующее активность с-Kit-рецепторных тирозинкиназ, такое как иматиниб; i) соединение, целенаправленно воздействующее, снижающее или ингибирующее активность членов семейства c-Abl, их продуктов слияния генов (например, Bcr-Abl-киназы) и мутантов, таких как производное N-фенил-2-пиримидинамина, такое как иматиниб или нилотиниб; PD180970; AG957; NSC 680410; PD173955; или дасатиниб; j) соединение, целенаправленно воздействующее, снижающее или ингибирующее активность членов семейства протеинкиназы C (PKC) и семейства Raf серин/треонинкиназ, членов MEK, SRC, JAK, FAK, PDK1, PKB/Akt и членов семейства Ras/MAPK, и/или членов семейства циклинзависимых киназ (CDK), такое как производное стауроспорина, описанное в патенте США № 5093330, такое как мидостаурин; примеры других соединений включают UCN-01, сафингол, BAY 43-9006, бриостатин 1, перифозин; илмофозин; RO 318220 и RO 320432; GO 6976; Isis 3521; LY333531/LY379196; соединение изохинолина; ингибитор фарнезилтрансферазы; PD184352 или QAN697, или AT7519; k) соединение, целенаправленно воздействующее, снижающее или ингибирующее активность протеинтирозинкиназы, такое как мезилат иматиниба или тирфостин, такой как Тирфостин A23/RG-50810; AG 99; Тирфостин AG 213; Тирфостин AG 1748; Тирфостин AG 490; Тирфостин B44; (+) энантиомер Тирфостина B44; Тирфостин AG 555; AG 494; Тирфостин AG 556, AG957 и адафостин (адамантиловый эфир 4-{[(2,5-дигидроксифенил)метил]амино}бензойной кислоты); NSC 680410, адафостин); l) соединение, целенаправленно воздействующее, снижающее или ингибирующее активность рецептора эпидермального фактора роста семейства тирозинкиназ (EGFR, ErbB2, ErbB3, ErbB4 в качестве гомо- или гетеродимеров) и их мутантов, таких как CP 358774, ZD 1839, ZM 105180; трастузумаб, цетуксимаб, гефитиниб, эрлотиниб, OSI-774, Cl-1033, EKB-569, GW-2016, антитела El.l, E2.4, E2.5, E6.2, E6.4, E2.11, E6.3 и Е7.6.3 и производные 7Н-пирроло-[2,3-d] пиримидина; и m) соединение, целенаправленно воздействующее, снижающее или ингибирующее активность c-Met рецептора.
Типичные соединения, которые целенаправленно воздействуют, уменьшают, или ингибируют активность белка или липидной фосфатазы, включают ингибиторы фосфатазы 1, фосфатазы 2А, или CDC25, такие как окадаевая кислота или ее производное.
Другие антиангиогенные соединения включают соединения, обладающие другим механизмом их активности, не связанным с ингибированием протеинкиназы или липидкиназы, например, талидомид и TNP-470.
Дополнительные неограничивающие примеры химиотерапевтических соединений, одно или несколько из которых могут быть применены в комбинации с Соединением по данному Описанию, включают: даунорубицин, адриамицин, Ara-C, VP-16, тенипозид, митоксантрон, идарубицин, карбоплатин, PKC412, 6 -меркаптопурин (6-MP), флударабина фосфат, октреотид, SOM230, FTY720, 6-тиогуанин, кладрибин, 6-меркаптопурин, пентостатин, гидроксимочевина, производные 2-гидрокси-1H-изоиндол-1,3-диона, 1-(4)-хлоранилино)-4-(4-пиридилметил)фталазин или его фармацевтически приемлемая соль, 1-(4-хлоранилино)-4-(4-пиридилметил)фталазин сукцинат, ангиостатин, эндостатин, амиды антраниловой кислоты, ZD4190, ZD6474, SU5416, SU6668, бевацизумаб, rhuMAb, rhuFab, макугон; Ингибиторы FLT-4, ингибиторы FLT-3, IgGI-антитела к VEGFR-2, RPI 4610, бевацизумаб, порфимер натрия, анекортав, триамцинолон, гидрокортизон, 11-a-эпигидрокотизол, кортексолон, 17a-гидроксипрогестерон, кортикостерон, дезоксикортикостерон, тестостерон, эстрон, дексаметазон, флуоцинолон, растительный алкалоид, гормональное соединение и/или антагонист, модификатор биологического ответа, такой как лимфокин или интерферон, антисмысловой олигонуклеотид или производное олигонуклеотида, shRNA и siRNA.
Другие примеры вторых терапевтических средств, с одним или несколькими из которых Соединение по данному Описанию также может быть скомбинировано, включают, но не ограничиваясь ими: средство для лечения болезни Альцгеймера, такое как донепезил и ривастигмин; средство для лечения болезни Паркинсона, такое как L-DOPA/карбидопа, энтакапон, ропинрол, прамипексол, бромокриптин, перголид, тригексефендил и амантадин; средство для лечения рассеянного склероза (РС), такое как бета-интерферон (например, AVONEX® и REBIF®), глатирамер ацетат и митоксантрон; средство для лечения астмы, такое как альбутерол и монтелукаст; средство для лечения шизофрении, такое как зипрекса, риспердал, сероквель и галоперидол; противовоспалительное средство, такое как кортикостероид, блокатор TNF, IL-1 RA, азатиоприн, циклофосфамид и сульфасалазин; иммуномодулирующее средство, включая иммунодепрессанты, такие как циклоспорин, такролимус, рапамицин, микофенолят мофетил, интерферон, кортикостероид, циклофосфамид, азатиоприн и сульфасалазин; нейротрофический фактор, такой как ингибитор ацетилхолинэстеразы, ингибитор МАО, интерферон, противосудорожное средство, блокатор ионных каналов, рилузол или средство от болезни Паркинсона; средство для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, такое как бета-блокатор, ингибитор АПФ, диуретик, нитрат, блокатор кальциевых каналов или статин; средство для лечения заболеваний печени, такое как кортикостероид, холестирамин, интерферон, и противовирусное средство; средство для лечения заболеваний крови, такое как кортикостероид, антилейкозное средство, или фактор роста; или средство для лечения нарушений иммунодефицита, такое как гамма-глобулин.
Вышеупомянутые вторые терапевтически активные агенты, один или несколько из которых могут быть применены в комбинации с Соединением по данному Описанию, получают и вводят, как описано в данной области техники.
ОБЩАЯ СХЕМА СИНТЕЗА СОЕДИНЕНИЙ
Соединения по данному Описанию получают с применением способов, известных специалистам в данной области техники с учетом данного описания, или с помощью иллюстративных способов, показанных на Общих Схемах ниже. В Общих Схемах, R2 и R4a являются такими, как определено в связи с Формулой I, и Y является такими, как определено в связи с Формулой II.
Общая Схема 1
На Общей Схеме 1, Соединение А приводят в контакт с R4aNH2 в присутствии основания, например, триэтиламина, с получением Соединения В.
Общая Схема 2
На Общей Схеме 2, метил 4-бром-2-фторбензоат приводят в контакт с Соединением C, с получением Соединения D, а сложный эфир Соединения D гидролизуется с получением Соединения E. Проводят кросс-сочетание Соединения E и Соединения B из Общей Схемы 1, с получением Соединения F.
Общая Схема 3
На Общей Схеме 3, Соединение G переходит в Соединение H.
Общая Схема 4
В Общей Схеме 4, Соединение H из Общей Схемы 3 приводят в контакт с 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1,2,3,6-тетрагидропиридином, с получением Соединения I. Проводят кросс-сочетание Соединения I и Соединения F из Общей Схемы 2, с получением соединения, имеющего Формулу IV.
Общая Схема 5
В Общей Схеме 5, Соединение H из Общей Схемы 3 приводят в контакт с Boc-защищенным пиперидином с получением Соединения J, и группу Boc удаляют с получением Соединения K. Соединение K приводят в контакт с метил 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-фторбензоатом с получением Соединения L, а сложный эфир Соединения L гидролизуется с получением Соединения M. Проводят кросс-сочетание Соединения М и Соединения В из Общей Схемы 1, с получением соединения, имеющего Формулу II.
ПРИМЕРЫ
ПРИМЕР 1
Синтетические промежуточные продукты
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 1: Синтез 1-циклобутилиденпропан-2-она
К раствору циклобутанона (5,0 г, 71,4 ммоль) в толуоле (200 мл) добавляли 1-(трифенилфосфоранилиден)-2-пропанон (22,7 г, 71,4 ммоль) и смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (этилацетат/гексан 1/10-1/5) с получением 1-циклобутилиденпропан-2-она (5,0 г) в виде желтого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 5,95-5,93 (м, 1H), 3,19-3,13 (м, 2H), 2,91-2,84 (м, 2H), 2,21 (с, 3H), 2,21-2,11 (м, 2H).
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 2: Синтез Спиро[3,5]нонан-6,8-диона.
К раствору 1-циклобутилиденпропан-2-она (23,1 г, 0,21 моль) и метилмалоната (30,3 г, 0,23 моль) в метаноле (150 мл) добавляли метоксид натрия (41,4 г, 30% в метаноле). Смесь кипятили с обратным холодильником в атмосфере N2 в течение 4 часов, и концентрировали. Полученный остаток подвергали гидролизу в 2Н растворе гидроксида калия (200 мл) при 70 °С в течение 4 часов. Смесь экстрагировали этилацетатом (100 мл), затем титровали до рН 3-5 с помощью 1Н раствора хлороводородной кислоты. Полученный раствор нагревали до 70 °С в течение 5 часов и экстрагировали этилацетатом (100 мл х 3). Объединенные органические слои сушили над сульфатом магния и концентрировали с получением спиро[3,5]нонан-6,8-диона (19,8 г, 62,3%) в виде желтого твердого вещества. Данный продукт использовали непосредственно в следующей стадии без дополнительной очистки. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 11,05 (с, 1H), 5,17 (с, 1H), 2,50-2,35 (м, 4H), 1,92-1,79 (м, 2H), 1,79-1,72 (м, 4H).
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 3: 8-Изобутоксиспиро[3.5]нон-7-ен-6-он.
К раствору спиро[3.5]нонан-6,8-диона (19,8 г, 0,13 моль) в толуоле (150 мл) добавляли 4-толуолсульфоновую кислоту (248 мг, 0,0013 моль) и изобутиловый спирт (14,5 г, 0,2 моль). Смесь кипятили с обратным холодильником и удаляли воду азеотропной перегонкой. Растворитель удаляли в вакууме и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (этилацетат/петролейный эфир 1/10-1/3) с получением 8-изобутоксиспиро[3.5]нон-7-ен-6-она (25,0 г, 92,7%) в виде светло-желтого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 5,31 (с, 1H), 3,59 (д, J=6,8 Гц, 2H), 2,51 (с, 2H), 2,45 (с, 2H), 2,12-1,96 (м, 1H), 1,93-1,83 (м, 6H), 0,99 (д, J=6,8 Гц, 6H).
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 4: Синтез Спиро[3.5]нон-7-ен-6-она.
К раствору 8-изобутоксиспиро[3.5]нон-7-ен-6-она (25,0 г, 0,12 моль) в толуоле (100 мл) добавляли Red-Al® (40 мл, 70% в толуоле, 0,18 моль) по каплям при комнатной температуре. Смесь нагревали до 45 °С в течение 4 часов, затем гасили 1Н раствором хлороводородной кислоты. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (этилацетат/петролейный эфир 1/10) с получением спиро[3.5]нон-7-ен-6-она (9,0 г, 55%) в виде светло-желтого масла.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 5: Синтез Спиро[3.5]нонан-6-она.
Спиро[3.5]нон-7-ен-6-он (9,0 г) гидрировали при 1 атм Н2 в присутствии катализатора 10% Pd/C (1,0 г) в метаноле (80 мл) в течение 5,5 часов. Pd/C удаляли фильтрованием и фильтрат концентрировали с получением спиро[3.5]нонан-6-она (8,8 г, 96,4%) в виде бесцветного масла, который использовали непосредственно в следующей стадии без дополнительной очистки. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 2,38 (с, 2Н), 2,23-2,20 (м, 2Н), 1,89-1,75 (м, 10Н).
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 6: Синтез Метил 6-оксоспиро[3.5]нонан-7-карбоксилата.
К суспензии гидрида натрия (5,1 г, 0,13 моль) в тетрагидрофуране (150 мл) добавляли метилкарбонат (28,7 г, 0,32 моль) при комнатной температуре, а затем спиро[3.5]нонан-6-он в тетрагидрофуране (30 мл). Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакцию гасили насыщенным водным раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (100 мл х 3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором и концентрировали. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле с получением метил 6-оксоспиро[3.5]нонан-7-карбоксилата (4,0 г, 32%) в виде светло-желтого масла.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 7: Синтез Метил 6-(((трифторметил)сульфонил)окси)спиро[3.5]нон-6-ен-7-карбоксилата.
К раствору метил 6-оксоспиро[3.5]нонан-7-карбоксилата (4,0 г, 0,02 моль) в тетрагидрофуране (25 мл) добавляли карбонат калия (5,6 г, 0,04 моль) и N,N- бис(трифторметилсульфонил)анилин (7,9 г, 0,022 моль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (100 мл × 3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом магния и концентрировали. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (этилацетат/петролейный эфир 1/50-1/10) с получением метил 6-(((трифторметил)сульфонил)окси)спиро[3.5]нон-6-ен-7-карбоксилата (5,0 г, 76%) в виде светло-желтого масла.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 8: Синтез Метил 6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-карбоксилата.
Смесь метил 6-((((трифторметил)сульфонил)окси)спиро[3.5]нон-6-ен-7-карбоксилата (5,0 г, 0,015 моль), 4-хлорфенилбороновой кислоты (2,58 г, 0,017 моль), CsF (4,63 г, 0,03 моль) и Pd(PPh3)4 (173 мг, 0,15 моль) в 1,2-диметоксиэтане (30 мл) и метаноле (15 мл) нагревали до 70 °С в атмосфере N2 в течение 2 часов. Растворители удаляли при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (этилацетат/петролейный эфир 1/10) с получением метил 6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-карбоксилата (4,0 г, 92%) в виде бесцветного масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,30 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,06 (д, J=8,5 Гц, 2H), 3,48 (с, 3H), 2,50-2,44 (м, 2H), 2,43 (т, J=2,3 (2,3 или 6,3?) Гц, 2H), 2,02-1,80 (м, 6H), 1,74 (т, J=6,3 Гц, 2H).
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 9: Синтез (6-(4-Хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метанола.
К раствору метил 6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-карбоксилата (4,0 г, 0,014 моль) в тетрагидрофуране (20 мл) добавляли раствор LiBH4 (910 мг, 0,042 моль) в тетрагидрофуране (10 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, гасили 1Н водным раствором хлороводородной кислоты и экстрагировали этилацетатом (100 мл × 3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом магния и концентрировали. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (этилацетат/петролейный эфир 1/10-1/3) с получением (6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метанола (3,0 г, 81,7%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,31 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,09 (д, J=8,4 Гц, 2H), 3,93 (д, J=4,2 Гц, 2H), 2,37-2,26 (м, 2H), 2,01-1,77 (м, 8H), 1,74 (т, J=6,3 Гц, 2H).
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 10: Синтез 7-(Хлорметил)-6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ена.
К раствору (6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метанола (3,5 г, 0,013 моль) и триметиламина (2,7 г, 0,026 моль) в дихлорметане (20 мл) по каплям добавляли метилсульфонилхлорид (3,0 г, 0,026 моль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле с получением 7-(хлорметил)-6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ена (2,75 г, 75,5%) в виде желтого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,31 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,09 (д, J=8,5 Гц, 2H), 3,93 (с, 2H), 2,34-2,25 (м, 4H), 1,97-1,78 (м, 6H), 1,74 (т, J=6,3 Гц, 2H).
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 11: Синтез Этил 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-фторбензоата.
Смесь 1-(триизопропилсилил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ола (2,2 г), этил 2,4-дифторбензоата (1,96 г), и K3PO4 (2,14 г) в диглиме (20 мл) перемешивали при 115 °C в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали, разбавляли этилацетатом (100 мл) и промывали водой, солевым раствором, и концентрировали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (этилацетат/гексан 1/3) с получением этил 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-фторбензоата (1,9 г) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 10,13-10,08 (м, 1H), 8,23 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,98 (дд, J=8,8, 6,6 Гц, 1H), 7,67 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,44 (дд, J=3,5, 2,5 Гц, 1H), 6,84 (ддд, J=8,8, 7,6, 2,4 Гц, 1H), 6,55 (дд, J=10,3, 2,4 Гц, 1H), 6,52 (дд, J=3,5, 2,0 Гц, 1H), 4,38 (к, J=7,1 Гц, 2H), 1,36 (т, J=7,1 Гц, 3H).
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 12: Синтез Метил 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-бромбензоата.
Смесь 1-(триизопропилсилил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ола (1,91 г), метил 4-бром-2-фторбензоата (1,70 г) и K3PO4 (1,86 г) в диглиме (20 мл) перемешивали при 115 °C в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали, разбавляли этилацетатом (100 мл) и промывали водой, солевым раствором, и концентрировали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (этилацетат/гексан 1/3) с получением метил 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-бромбензоата (1,8 г) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,28 (с, 1H), 8,18 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,79 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,62 (д, J=2,5 Гц), 1H), 7,40-6,96 (м, 2H), 6,96 (д, J=1,7 Гц, 1H), 6,51-6,48 (м, 1H), 3,89 (с, 3H).
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 13: Синтез 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-бромбензойной кислоты.
К раствору метил 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-бромбензоата (300 мг, 0,867 ммоль) в диоксане (10 мл) добавляли 1Н раствор NaOH (2,2 мл, 2,2 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь подкисляли 1Н раствором HCl и экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором и сушили над безводным MgSO4. После выпаривания при пониженном давлении получали неочищенную 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-бромбензойную кислоту в виде бесцветного масла. Данный продукт использовали непосредственно в следующей стадии без дополнительной очистки.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 14: Синтез 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-бром-N-((3-нитро-4-(((тетрагидро-2H-пиран)-4-ил)метил)амино)фенил)сульфонил)бензамида.
К раствору 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-бромбензойной кислоты (100 мг, 0,3 ммоль) в DCM (10 мл) добавляли 3-нитро-4-(((тетрагидро-2H-пиран-4-ил)метил)амино)бензолсульфонамид (95 мг, 0,3 ммоль), DMAP (55 мг, 0,45 ммоль) и EDCI (115 мг, 0,6 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток очищали хроматографией на силикагеле (DCM/MeOH 95/5) с получением 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-бром-N-((3-нитро-4-(((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)амино)фенил)сульфонил)бензамида в виде желтого масла (80 мг). МС m/z 630 [М+Н]+.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 15: Синтез (S)-N-((4-(((1,4-диоксан-2-ил)метил)амино)-3-нитрофенил)сульфонил)-2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-бромбензамида.
Указанное в названии соединение получали с применением процедуры, аналогичной описанной для ПРОМЕЖУТОЧНОГО ПРОДУКТА 14, и очищали хроматографией на силикагеле (DCM/MeOH 95/5). 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 11,79 (с, 1H), 8,59-8,52 (м, 2H), 8,05 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,85 (дд, J=9,2, 2,4 Гц), 1H), 7,66 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,59-7,49 (м, 1H), 7,48 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,34 (дд, J=8,2, 1,8 Гц, 1H), 7,12 (д, J=9,2 Гц, 1H), 6,88 (д, J=1,8 Гц, 1H), 6,50-6,40 (м, 1H), 3,83-3,37 (м, 2H), 3,72-3,56 (м, 2H), 3,56-3,42 (м, 2H), 3,37-3,01 (м, 3H).
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 16: Синтез (R)-N-((4-(((1,4-диоксан-2-ил)метил)амино)-3-нитрофенил)сульфонил)-2-((1H-пирроло [2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-бромбензамида.
Указанное в названии соединение получали с применением процедуры, аналогичной описанной для ПРОМЕЖУТОЧНОГО ПРОДУКТА 14, и очищали хроматографией на силикагеле (DCM/MeOH 95/5). 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 11,79 (с, 1H), 8,59-8,52 (м, 2H), 8,05 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,85 (дд, J=9,2, 2,4 Гц), 1H), 7,66 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,59-7,49 (м, 1H), 7,48 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,34 (дд, J=8,2, 1,8 Гц, 1H), 7,12 (д, J=9,2 Гц, 1H), 6,88 (д, J=1,8 Гц, 1H), 6,50-6,40 (м, 1H), 3,83-3,37 (м, 2H), 3,72-3,56 (м, 2H), 3,56-3,42 (м, 2H), 3,37-3,01 (м, 3H).
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 17: Синтез 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-бром-N-((3-нитро-4-(((1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)метил)амино)фенил)сульфонил)бензамида.
Указанное в названии соединение получали с применением процедуры, аналогичной описанной для ПРОМЕЖУТОЧНОГО ПРОДУКТА 14, и очищали хроматографией на силикагеле (DCM/MeOH 95/5). МС m/z 685 [М+Н]+.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 18: Синтез 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-бром-N-((4-(((4-морфолиноциклогексил)метил)амино)3-нитрофенил)сульфонил)бензамида.
Указанное в названии соединение получали с применением процедуры, аналогичной описанной для ПРОМЕЖУТОЧНОГО ПРОДУКТА 14, и очищали хроматографией на силикагеле (DCM/MeOH 95/5). МС m/z 713 [М+Н]+.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 19: Синтез 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-бром-N-((3-нитро-4-(((1-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)пиперидин-4-ил)метил)амино)фенил)сульфонил)бензамида.
Указанное в названии соединение получали с применением процедуры, аналогичной описанной для ПРОМЕЖУТОЧНОГО ПРОДУКТА 14, и очищали хроматографией на силикагеле (DCM/MeOH 95/5). МС m/z 713 [М+Н]+.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 20: Синтез 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-бром-N-((3-нитро-4-(((тетрагидро-2H-пиран-3-ил)метил)амино)фенил)сульфонил)бензамида.
Указанное в названии соединение получали с применением процедуры, аналогичной описанной для ПРОМЕЖУТОЧНОГО ПРОДУКТА 14, и очищали хроматографией на силикагеле (DCM/MeOH 95/5). МС m/z 630 [М+Н]+.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 21: Синтез 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-бром-N-((4-(((1-метилпиперидин-4-ил)метил)амино)-3-нитрофенил)сульфонил)бензамида.
Указанное в названии соединение получали с применением процедуры, аналогичной описанной для ПРОМЕЖУТОЧНОГО ПРОДУКТА 14, и очищали хроматографией на силикагеле (DCM/MeOH 95/5). МС m/z 643 [М+Н]+.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 23: Синтез трет-бутил-4-(3-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(этоксикарбонил)фенил)пиперазин-1-карбоновой кислоты.
Смесь этил 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-фторбензоата (2,1 г, 7 ммоль), N- Вос-пиперазина (2,61 г, 0,014 моль) и гидрофосфата калия (2,44 г, 0,014 моль) в диметилсульфоксиде нагревали до 135 °С в течение ночи. К реакционной смеси добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом (50 мл × 3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле с получением трет-бутил-4-(3-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(этоксикарбонил)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (2,4 г, 73%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,42 (ш с, 1H), 8,20 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,95 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,53 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,37 (дд, J=3,5, 2,5 Гц, 1H), 6,66 (дд, J=8,9, 2,5 Гц, 1H), 6,46 (дд, J=3,5, 2,0 Гц, 1H), 6,36 (д, J=2,5 Гц, 1H), 4,28 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 3,55-3,50 (м, 4H), 3,21-3,17 (м, 4H), 1,47 (с, 9H), 1,26 (т, J=7,1 Гц, 3H).
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 24: Синтез Этил 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(пиперазин-1-ил)бензоата.
Трифторуксусную кислоту (6 мл) добавляли к раствору трет-бутил-4-(3-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(этоксикарбонил)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (2,1 г) в дихлорметане (10 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении и неочищенный этил 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(пиперазин-1-ил)бензоат (2,5 г) непосредственно использовали в следующей стадии без дополнительной очистки.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 25: Синтез Этил 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензоата.
К раствору 7-(хлорметил)-6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ена (851 мг, 3 ммоль) в N,N-диметилформамиде (10 мл) добавляли карбонат калия (1,26 г, 9 ммоль), йодид калия (100 мг, 0,6 ммоль) и этил 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(пиперазин-1-ил)бензоат (1,53 г, 3,3 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (50 мл × 3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (этилацетат/петролейный эфир 1/5-1/1) с получением этил 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензоата (1,3 г, 71% ) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,98 (с, 1H), 8,20 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,91 (д, J=9,0 Гц, 1H), 7,51 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,38 (т, J=3,5 Гц, 1H), 7,28 (д, J=8,3 Гц, 2H), 6,97 (д, J=8,3 Гц, 2H), 6,62 (дд, J=9,0, 2,5 Гц, 1H), 6,45 (дд, J=3,5, 2,0 Гц, 1H), 6,32 (д, J=2,5 Гц, 1H), 4,26 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 3,20-3,12 (м, 4H), 2,77 (с, 2H), 2,31-2,17 (м, 8H), 1,98-1,72 (м, 6H), 1,68 (т, J=6,3 Гц, 2H), 1,25 (т, J=7,1 Гц, 3Н).
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 26: Синтез 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензойной кислоты.
Раствор этил 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензоата (1,3 г, 2,1 ммоль) и 2Н раствор гидроксида калия (12 мл, 0,042 моль) в диоксане (15 мл) нагревали до 60 °С в течение ночи. Смесь нейтрализовали 1Н водным раствором хлороводородной кислоты до рН 7 и экстрагировали этилацетатом (50 мл × 3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом магния и концентрировали с получением 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензойной кислоты (1,1 г, 88,7%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 10,34 (с, 1H), 8,19 (д, J=2,6 Гц, 1H), 8,02 (д, J=9,0 Гц, 1H), 7,63 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,38-7,34 (м, 1H), 7,27 (д, J=8,3 Гц, 2H), 6,96 (д, J=8,3 Гц, 2H), 6,63 (дд, J=9,0, 2,4 Гц, 1H), 6,44 (дд, J=3,5, 1,5 Гц, 1H), 6,22 (д, J=2,4 Гц, 1H), 3,81 (с, 2H), 3,17-3,10 (м, 4H), 2,80 (с, 2H), 2,30-2,20 (м, 6H), 1,98-1,72 (м, 6H), 1,67 (т, J=6,3 Гц, 2H).
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 27: Синтез 1-(Оксетан-3-илиден)пропан-2-она.
К раствору оксетан-3-она (20,6 г, 0,28 моль) в DCM (300 мл) добавляли 1-(трифенилфосфоранилиден)пропан-2-он (98,6 г, 0,31 моль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. DCM удаляли при пониженном давлении до осаждения твердого вещества. Твердое вещество удаляли фильтрацией, а фильтрат концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (этилацетат/гептан 1/5~1/3) с получением 1-(оксетан-3-илиден)пропан-2-она (23,3 г). 74,3%) в виде желтого масла.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 28: Синтез 2-Оксаспиро[3.5]нонан-6,8-диона.
К раствору 1-(оксетан-3-илиден)пропан-2-она (23,3 г, 0,21 моль) и метил малоната (30,2 г, 0,23 моль) в метаноле (150 мл) добавляли метоксид натрия (41,3 г, 30% раствор в МеОН). Смесь кипятили с обратным холодильником в атмосфере N2 в течение 1 часа. Растворитель удаляли при пониженном давлении с получением метил 6-гидрокси-8-оксо-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-5-карбоксилата, который использовали в следующей стадии непосредственно без очистки. К водному раствору КОН (2 моль/л, 200 мл) добавляли метил 6-гидрокси-8-оксо-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-5-карбоксилат. После перемешивания при комнатной температуре в течение 30 минут, водный раствор экстрагировали этилацетатом (150 мл × 3). Водный слой доводили до рН 3-5 с помощью 1Н раствора хлороводородной кислоты и нагревали при 50 °С в течение 4 часов. Воду удаляли при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле с получением 2-оксаспиро[3.5]нонан-6,8-диона (2,5 г, 77,0%) в виде светло-желтого твердого вещества. Данный продукт использовали непосредственно в следующей стадии без дополнительной очистки.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 29: Синтез 8-Изобутокси-2-оксаспиро[3.5]нон-7-ен-6-она.
К раствору 2-оксаспиро[3.5]нонан-6,8-диона (25 г, 0,16 моль) в толуоле (150 мл) добавляли TsOH (238 мг, 0,0016 моль) и изобутиловый спирт (18 г, 0,24 моль). Реакция прошла до конца после перемешивания при комнатной температуре в течение 1 часа. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (этилацетат/петролейный эфир 1/5~1/3) с получением 8-изобутокси-2-оксаспиро[3.5]нон-7-ен-6-она (6 г, 43%) в виде светло-желтого масла. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 5,34 (с, 1H), 4,47 (д, J=6,1 Гц, 2H), 4,45 (д, J=6,1 Гц, 2H), 3,60 (д, J=6,8 Гц, 2H), 2,80 (с, 2H), 2,68 (с, 2H), 2,09-2,01 (м, 1H), 0,98 (д, J=6,8 Гц, 6H).
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 30: Синтез 2-Оксаспиро[3.5]нон-7-ен-6-она.
К раствору 8-изобутокси-2-оксаспиро[3.5]нон-7-ен-6-она (14,7 г, 0,07 моль) в толуоле (100 мл) добавляли Red-Al® (40,4 г, 70% в толуоле) по каплям. Смесь нагревали до 45 °C в течение 2 часов и гасили 1Н раствором HCl. Смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (этилацетат/петролейный эфир 1/10~1/5) с получением 2-оксаспиро[3.5]нон-7-ен-6-она (8,8 г, 91%) в виде бесцветного масла. Данный продукт использовали непосредственно в следующей стадии без дополнительной очистки.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 31: Синтез 2-Оксаспиро[3.5]нонан-6-она.
К раствору 2-оксаспиро[3.5]нон-7-ен-6-она (8,8 г) в тетрагидрофуране (80 мл) добавляли Pd/C (1 г). Смесь гидрировали при 1 атм Н2 при комнатной температуре в течение 2 часов. После прохождения реакции до конца, Pd/C удаляли фильтрованием и раствор концентрировали с получением 2-оксаспиро[3.5]нонан-6-она (8,0 г, 89,6%) в виде бесцветного масла. Данный продукт использовали непосредственно в следующей стадии без дополнительной очистки.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 32: Синтез Метил 6-оксо-2-оксаспиро[3.5]нонан-7-карбоксилата.
К суспензии гидрида натрия (4,6 г, 0,11 моль) в тетрагидрофуране (150 мл) в атмосфере N2 по каплям добавляли метил карбонат (25,7 г, 0,28 моль). После завершения добавления, смесь нагревали с обратным холодильником. Затем добавляли раствор 2-оксаспиро[3.5]нонан-6-она (11,2 г, 0,057 моль) в тетрагидрофуране (30 мл). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 часов, гасили насыщенным водным раствором хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом (100 мл × 3). Объединенный органический слой промывали солевым раствором, концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле с получением метил 6-оксо-2-оксаспиро[3.5]нонан-7-карбоксилата (4,5 г, 69%) в виде бесцветного масла. Данный продукт использовали непосредственно в следующей стадии без дополнительной очистки.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 33: Синтез Метил 6-(((трифторметил)сульфонил)окси)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-карбоксилата.
К суспензии метил 6-оксо-2-оксаспиро[3.5]нонан-7-карбоксилата (4,5 г, 0,02 моль) и карбоната калия (6,3 г, 0,046 моль) в ДМФА (30 мл) добавляли N,N- бис(трифторметилсульфонил)анилин (8,9 г, 0,025 моль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (100 мл × 3). Объединенный органический слой промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (этилацетат/петролейный эфир 1/10~1/3) с получением метил 6-(((трифторметил)сульфонил)окси)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-карбоксилата (6,6 г, 86%) в виде светло-желтого масла. Данный продукт использовали непосредственно в следующей стадии без дополнительной очистки.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 34: Синтез Метил 6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-карбоксилата.
К раствору метил 6-(((трифторметил)сульфонил)окси)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-карбоксилата (6,6 г, 0,02 моль) в 1,2-диметоксиэтане (30 мл) и метаноле (10 мл) добавляли 4-хлорфенилбороновую кислоту (3,13 г, 0,02 моль), CsF (6,08 г, 0,04 моль) и Pd(PPh3)4 (231 мг, 0,2 ммоль) и смесь нагревали до 70 °C в атмосфере N2 в течение 30 минут. Растворители удаляли при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (этилацетат/петролейный эфир 1/5-1/3) с получением метил 6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-карбоксилата (5,1 г, 87,3%) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,33 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,07 (д, J=8,4 Гц, 2H), 4,54 (д, J=5,6 Гц, 2H), 4,48 (д, J=5,6 Гц, 2H), 3,48 (с, 3H), 2,74-2,70 (м, 2H), 2,55-2,50 (м, 2H), 2,04 (т, J=6,4 Гц, 2H).
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 35: Синтез (6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метанола.
К раствору метил 6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-карбоксилата (2,1 г, 0,0072 моль) в тетрагидрофуране (20 мл) добавляли LiBH4 (475 мг, 0,022 моль) в тетрагидрофуране (10 мл) по каплям при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов, гасили 1Н раствором HCl и экстрагировали этилацетатом (100 мл × 3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (этилацетат/петролейный эфир 1/5-1/1) с получением (6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метанола (1,5 г, 78,9%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,34 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,07 (д, 2H, J=8,4 Гц), 4,54 (д, 2H, J=6,0 Гц), 4,46 (д, 2H, J=5,6 Гц), 3,93 (с, 2H), 2,62 (с, 2H), 2,40-2,33 (м, 2H), 2,03 (т, 2H, J=6,4 Гц).
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 36: Синтез 7-(Хлорметил)-6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ена.
К раствору (6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метанола (1,5 г, 5,7 ммоль) и триэтиламина (836 мг, 8,6 ммоль) в дихлорметане (15 мл) добавляли метилсульфонилхлорид (980 мг, 8,6 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3,5 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле с получением 7-(хлорметил)-6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ена (1,4 г, 87,0%) в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,35 (д, 2H, J=8,4 Гц), 7,16 (д, 2H, J=8,4 Гц), 4,53 (д, 2H, J=6,0 Гц), 4,45 (д, 2H, J=5,6 Гц), 3,86 (с, 2H), 2,64 (с, 2H), 2,40-2,33 (м, 2H), 2,03 (т, 2H, J=6,4 Гц).
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 37: Синтез Этил 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензоата.
К раствору этил 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(пиперазин-1-ил)бензоата (382 мг, 0,82 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли 7-(хлорметил)-6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен (200 мг, 0,75 ммоль), карбонат калия (310 мг, 2,25 ммоль), DIPEA (290 мг, 2,25 ммоль) и йодид калия (24,9 мг, 0,15 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (50 мл × 3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле (этилацетат/петролейный эфир 1/5-1/1) с получением этил 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин- 5-ил)окси)-4-(4-((6- (4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензоата (370 мг, 80,6%) в виде белого твердого вещества. МС m/z 613 [М+Н]+.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 38: Синтез 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4- (4-((6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензойной кислоты.
К раствору этил 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензоата (370 мг, 0,6 ммоль) в диоксане (10 мл) добавляли 2Н раствор гидроксида калия (6 мл, 12 ммоль) и смесь перемешивали при 60 °С в течение ночи. Раствор нейтрализовали 1Н раствором хлороводородной кислоты до рН 7 и экстрагировали этилацетатом (100 мл × 3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом магния и концентрировали с получением 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензойной кислоты (1,1 г, 88,7%) в виде белого твердого вещества. МС m/z 585 [М+Н]+.
ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ 55: Синтез Метил 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(1-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперидин-4-ил)бензоата.
К раствору 7-(хлорметил)-6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ена (850 мг, 3,04 ммоль) в N,N-диметилформамиде (10 мл) добавляли карбонат калия (1,26 г, 2,2 ммоль), йодид калия (100 мг, 0,61 ммоль), и метил 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(пиперидин-4-ил)бензоат (1,0 г, 3,34 ммоль), смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем смесь разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, концентрировали. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле с получением метил 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(1-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперидин-4-ил)бензоата (1,0 г, 55,2%) в виде светло-желтого твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 9,39 (ш с, 1H), 8,19 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,87 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,57 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,39 (дд, J=3,5, 2,5 Гц, 1H), 7,30-7,23 (м, 2H), 7,04-6,93 (м, 3H), 6,72 (д, J=1,6 Гц, 1H), 6,49 (дд, J=3,5, 2,0 Гц, 1H), 3,87 (с, 3H), 2,81-2,75 (м, 2H), 2,73-2,71 (м, 2H), 2,28 (с, 2H), 2,25-2,15 (м., 2Н), 1,98-1,76 (м, 6Н), 1,75-1,51 (м, 9Н).
ПРИМЕР 2
Синтез (R)-N-((4-(((1,4-диоксан-2-ил)метил)амино)-3-нитрофенил)сульфонил)-2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(1-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)бензамида.
К раствору (R)-N-((4-(((1,4-диоксан-2-ил)метил)амино)-3-нитрофенил)сульфонил)-2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-бромбензамида в 1,2-диметоксиэтане (10 мл) и воде (1 мл) добавляли 1-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1,2,3,6-тетрагидропиридин, Pd(dppf)Cl2 и K2CO3, и смесь перемешивали при 80 °C в течение 12 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой. Смесь экстрагировали этилацетатом (30 мл × 3), сушили над безводным MgSO4 и концентрировали. Остаток очищали препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой С18, получая (R)-N-((4-(((1,4-диоксан-2-ил)метил)амино)-3-нитрофенил)сульфонил)-2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(1-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)бензамид. 1H ЯМР (400 МГц, Метанол-d4) δ 8,68 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,97 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,88 (дд, J=9,3, 2,3 Гц, 1H), 7,63 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,50 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,46 (д, J=3,5 Гц, 1H), 7,30 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,16 (дд, J=8,2, 1,7 Гц, 1H), 7,10 (д, J=8,4 Гц, 2H), 6,94 (д, J=9,3 Гц, 1H), 6,85 (д, J=1,7 Гц, 1H), 6,41 (д, J=3,5 Гц, 1H), 5,94-5,90 (м, 1H), 3,95-3,40 (м, 14H), 3,15-3,03 (м, 1H), 2,68-2,45 (м, 2H), 2,43 (с, 2Н), 2,30-2,20 (м, 2Н), 2,03-1,77 (м, 8Н).
ПРИМЕР 3
2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(1-((6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-N-((3-нитро-4-(((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)амино)фенил)сульфонил)бензамид
Указанное в названии соединение получали с применением процедуры, аналогичной описаной для ПРИМЕРА 2. 1H ЯМР (400 МГц, Метанол-d4) δ 8,70 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,99 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,90 (дд, J=9,2, 2,3 Гц, 1H), 7,61 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,57 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,48 (д, J=3,5 Гц, 1H), 7,31 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,20-7,10 (м, 3H), 6,96 (д, J=9,2 Гц, 1H), 6,82 (д, J=1,6 Гц, 1H), 6,44 (д, J=3,5 Гц, 1H), 5,93-5,86 (м, 1H), 4,53 (д, J=5,9 Гц, 2H), 4,49 (д, J=5,9 Гц, 2H), 4,00-3,90 (м, 2H), 3,77-3,33 (м, 7H), 3,26 (д, J=7,0 Гц, 2H), 3,15-3,00 (м, 1H), 2,70-2,65 (м, 2H), 2,63-2,25 (м, 4H), 2,07 (т, J=6,3 Гц, 2H), 2,00-1,85 ( м, 1Н), 1,75-1,65 (м, 2Н), 1,46-1,30 (м, 2Н).
ПРИМЕР 4
Синтез 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(1-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7)ил)метил)-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-N-((3-нитро-4-(((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)амино)фенил)сульфонил)бензамида
Указанное в названии соединение получали с применением процедуры, аналогичной описаной для ПРИМЕРА 2. 1H ЯМР (400 МГц, Метанол-d4) δ 8,71 (т, J=1,9 Гц, 1H), 8,00-7,95 (м, 1H), 7,90 (дд, J=9,3, 1,9 Гц, 1H), 7,63 (дд, J=8,1, 1,4 Гц, 1H), 7,56-7,50 (м, 1H), 7,46 (дд, J=3,5, 1,4 Гц, 1H), 7,33-7,26 (м, 2H), 7,18-7,06 (м, 3H), 6,96 (дд, J=9,3, 1,4 Гц, 1H), 6,81 (с, 1H), 6,43 (дд, J=3,5, 1,5 Гц, 1H), 5,93-5,86 (м, 1H), 4,00-3,94 (м, 2Н), 3,83-3,36 (м, 7Н), 3,26 (д, J=7,0 Гц, 2Н), 3,10-3,04 (м, 1Н), 2,67-2,40 (м, 4Н), 2,30-2,24 (м, 2Н), 2,02-1,77 (м, 9Н), 1,74-1,67 (м, 2Н), 1,45-1,30 (м, 2Н).
ПРИМЕР 5
Синтез (R)-N-((4-(((1,4-диоксан-2-ил)метил)амино)-3-нитрофенил)сульфонила)-2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(1-((6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)бензамида
Указанное в названиие соединение получали с применением процедуры, аналогичной описаной для ПРИМЕРА 1. 1H ЯМР (400 МГц, Метанол-d4) δ 8,68 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,99 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,89 (дд, J=9,2, 2,3 Гц, 1H), 7,65 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,54 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,48 (д, J=3,4 Гц, 1H), 7,33 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,21-7,16 (м, 1H), 7,13 (д, J=8,4 Гц, 2H), 6,95 (д, J=9,3 Гц, 1H), 6,86 (д, J=1,6 Гц, 1H), 6,43 (д, J=3,5 Гц, 1H), 5,94-5,90 (м, 1H), 4,60-4,43 (м, 4H), 3,95-3,40 (м, 14H), 3,15-3,00 (м, 1H), 2,80-2,60 (м, 4H), 2,38-2,25 (м, 2H), 2,08 (т, J=6,3 Гц, 2H).
ПРИМЕР 6
Синтез (R)-N-((4-(((1,4-диоксан-2-ил)метил)амино)-3-нитрофенил)сульфонил)-2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензамида
Смесь 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6)-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензойной кислоты (290 мг, 0,5 ммоль), (R)-4-(((1,4-диоксан-2-ил)метил)амино)-3-нитробензолсульфонамида (236 мг, 0,75 ммоль), EDCI (191 мг, 1 ммоль), 4-(N,N-диметиламино)пиридина (591 мг, 0,75 ммоль) в дихлорметане (15 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле с получением (R)-N-((4-(((1,4-диоксан-2-ил)метил)амино)-3-нитрофенила)сульфонил)-2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензамида (150 мг, 34,1%) в виде желтого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d4) δ 8,67 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,99 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,85 (дд, J=9,3, 2,3 Гц, 1H), 7,64 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,52 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,45 (д, J=3,5 Гц, 1H), 7,39 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,13 (д, J=8,4 Гц, 2H), 6,95 (д, J=9,3 Гц, 1H), 6,76 (дд, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 6,41 (д, J=3,5 Гц, 1H), 6,34 (д, J=2,4 Гц, 1H), 4,54 (д, J=5,9 Гц, 2H), 4,48 (д, J=5,9 Гц, 2H), 3,93-3,35 (м, 19H), 2,70-2,65 (м, 2H), 2,33 (с, 2H), 2,08 (т, J=6,3 Гц, 2H).
ПРИМЕР 7
Синтез 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-((3-нитро-4-(((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)амино)фенил)сульфонил)бензамида
Смесь 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензойной кислоты (250 мг, 0,43 ммоль), 3-нитро-4-(((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)амино)бензолсульфонамида (202 мг, 0,64 ммоль), EDCI (164 мг, 0,86 ммоль), 4-(N,N-диметиламино)пиридина (78 мг, 0,64 ммоль) в дихлорметане (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, с последующим концентрированием. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле с получением 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)-2-оксаспиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-((3-нитро-4-(((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)амино)фенил)сульфонил)бензамида (150 мг, 39,6%) в виде желтого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d4) δ 8,70 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,01 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,87 (дд, J=9,2, 2,3 Гц, 1H), 7,66 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,56 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,47 (д, J=3,5 Гц, 1H), 7,39 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,13 (д, J=8,4 Гц, 2H), 6,97 (д, J=9,2 Гц, 1H), 6,76 (дд, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 6,43 (д, J=3,5 Гц, 1H), 6,32 (д, J=2,4 Гц, 1H), 4,54 (д, J=5,9 Гц, 2H), 4,48 (д, J=5,9 Гц, 2H), 4,03-3,94 (м, 2H), 3,67 (с, 2H), 3,55-3,27 (м, 12H), 2,69 (с, 2H), 2,35-2,25 (м, 2H), 2,08 (т, J=6,3 Гц, 2H), 2,05-1,93 (м, 1H), 1,76-1,69 (м, 2Н), 1,45-1,35 (м, 2Н).
ПРИМЕР 8
Синтез 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7)ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-((3-нитро-4-(((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)амино)фенил)сульфонил)бензамида
Проводили реакцию смеси 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензойной кислоты (1,75 г, 3 ммоль), 3-нитро-4-(((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)амино)бензолсульфонамида (1,43 г, 4,5 ммоль), EDCI (1,15 г, 6 ммоль) и 4-(N,N-диметиламино)пиридина (550 мг, 4,5 ммоль) и дихлорметана (40 мл) при комнатной температуре в течение ночи, с последующим добавлением воды. Водный слой экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, концентрировали и очищали колоночной хроматографией на силикагеле с получением 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-((3-нитро-4-(((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)амино)фенил)сульфонил)бензамида (1,7 г, 64,4%) в виде желтого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d4) δ 8,70 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,01 (д, J=2,7 Гц, 1H), 7,87 (д, J=9,2, 2,3 Гц, 1H), 7,66 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,55 (д, J=2,7 Гц, 1H), 7,47 (д, J=3,4 Гц, 1H), 7,38 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,10 (д, J=8,4 Гц, 2H), 6,97 (д, J=9,2 Гц, 1H), 6,77 (дд, J=8,9, 2,4 Гц, 1H), 6,44 (д, J=3,4 Гц, 1H), 6,34 (д, J=2,4 Гц, 1H), 4,02-3,94 (м, 3H), 3,66 (с, 3H), 3,49-3,38 (м, 2H), 3,41-3,25 (м, 7H), 2,42 (с, 3H), 2,26 (с, 3H), 2,00-1,67 (м, 4H), 1,45-1,38 (м, 2H).
ПРИМЕР 9
Синтез (R)-N-((4-(((1,4-диоксан-2-ил)метил)амино)-3-нитрофенил)сульфонил)-2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензамида
Указанное в названиие соединение получали с применением процедуры, аналогичной описаной для ПРИМЕРА 8. 1Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d4) δ 8,66 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,99 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,84 (дд, J=9,2, 2,4 Гц, 1H), 7,64 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,51 (д, J=2,4 Гц, 2H), 7,45 (д, J=3,3 Гц, 1H), 7,37 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,10 (д, J=8,4 Гц, 2H), 6,94 (д, J=9,2 Гц, 1H), 6,76 (дд, J=8,9, 2,3 Гц, 1H), 6,40 (д, J=3,3 Гц, 1H), 6,36 (д, J=2,3 Гц, 1H), 3,87 (дд, J=11,8, 4,2 Гц, 3H), 3,83-3,70 (м, 3H), 3,67 (с, 2H), 3,62 (дд, J=11,7, 2,9 Гц, 1H), 3,51-3,41 (м, 2H), 3,40-3,35 (м, 1H), 3,29 (дкв, J=3,2, 1,6 Гц, 1H), 2,41 (с, 2H), 2,26 (с, 2H), 2,00-1,77 (м, 6H).
ПРИМЕР 10
Синтез 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-((3-нитрофенил)сульфонил)бензамида
Указанное в названиие соединение получали с применением процедуры, аналогичной описаной для ПРИМЕРА 8. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 11,70 (с, 1H), 9,47 (с, 1H), 8,62 (д, J=2,2 Гц, 1H), 8,44 (д, J=8,3 Гц, 1H), 8,27 (д, J=7,9 Гц, 1H), 8,02-7,97 (м, 1H), 7,84-7,75 (м, 1H), 7,56-7,43 (м, 3H), 7,40 (д, J=8,3 Гц, 2H ), 7,11 (д, J=8,3 Гц, 2H), 6,72 (д, J=8,9 Гц, 1H), 6,40-6,35 (м, 1H), 6,30 (с, 1H), 3,80-3,65 (м, 2H), 3,55 (с, 2Н), 3,28-2,95 (м, 4Н), 2,82-2,65 (м, 2Н), 2,31 (с, 2Н), 2,22-2,15 (м, 2Н), 1,93-1,60 (м, 8Н).
ПРИМЕР 11
Синтез 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-((4-(метиламино)-3-нитрофенил)сульфонил)бензамида
Указанное в названиие соединение получали с применением процедуры, аналогичной описаной для ПРИМЕРА 8. 1Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d4) δ 8,78 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,05 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,96 (дд, J=9,2, 2,3 Гц, 1H), 7,80 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,61 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,46 (д, J=3,5 Гц, 1H), 7,34 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,01 (д, J=8,4 Гц, 2H), 6,90 (д, J=9,2 Гц, 1H), 6,68 (дд, J=8,9, 2,4 Гц, 1H), 6,46 (д, J=3,5 Гц, 1H), 6,18 (д, J=2,4 Гц, 1H), 3,60 (с, 2H), 3,50-3,12 (м, 8H), 3,06 (с, 3H), 2,38 (с, 2H), 2,30-2,16 (м, 2H), 1,97-1,73 (м, 8H).
ПРИМЕР 12
Синтез 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-((4-(диметиламино)-3-нитрофенил)сульфонил)бензамида
Указанное в названиие соединение получали с применением процедуры, аналогичной описаной для ПРИМЕРА 8. 1Н ЯМР (400 МГц, Метанол-d4) δ 8,41 (д, J=2,2 Гц, 1H), 8,08 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,91 (дд, J=9,4, 2,3 Гц, 1H), 7,81 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,68 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,48 (д, J=3,5 Гц, 1H), 7,34 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,04 (д, J=9,4 Гц, 1H), 7,01 (д, J=8,0 Гц, 2H), 6,71-6,63 (м, 1H), 6,51 (д, J=3,5 Гц, 1H), 6,15 (д, J=1,9 Гц, 1Н), 3,59 (с, 2Н), 3,52-3,20 (м, 8Н), 2,98 (с, 6Н), 2,38 (с, 2Н), 2,25-2,17 (м, 2Н), 1,96-1,72 (м, 8Н).
ПРИМЕР 13
Синтез 2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(1-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперидин-4-ил)-N-((3-нитро-4-(((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)амино)фенил)сульфонил)бензамида
Смесь 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(1-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперидин-4-ил)бензойной кислоты (200 мг, 0,34 ммоль), 3-нитро-4-(((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)амино)бензолсульфонамида (162 мг, 0,52 ммоль), EDCI (130 мг, 0,68 ммоль), 4-(N,N-диметиламино)пиридина (63,4 мг, 0,52 ммоль) в дихлорметане (15 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, с последующей очисткой колоночной хроматографией на силикагеле с получением 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(1-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперидин-4-ил)-N-((3-нитро-4-(((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)амино)фенил)сульфонил)бензамида (170 мг, 57,3%) в виде желтого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 11,94 (с, 1H), 11,64 (с, 1H), 8,50-8,42 (м, 2H), 7,97 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,76 (дд, J=9,2, 2,2 Гц, 1H), 7,52-7,36 (м, 5H), 7,11 (д, J=7,9 Гц, 2H), 6,99 (д, J=9,2 Гц, 1H), 6,91-6,86 (м, 1Н), 6,55 (с, 1Н), 6,37 (с, 1Н), 3,89-3,79 (м, 2Н), 3,35-2,90 (м, 10Н), 2,32-2,10 (м, 5Н), 1,95-1,15 (м, 17Н).
ПРИМЕР 14
Следующие Соединения по данному Описанию были получены с применением методологий, описанных в Примерах 1-13:
Соед. № 40: (S)-N-((4-(((1,4-диоксан-2-ил)метил)амино)-3-фтор-5-нитрофенил)сульфонил)-2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1- ил)бензамид
1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ 8,49-8,46 (м, 1H), 7,99 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,70 (дд, J=13,6, 2,3 Гц, 1H), 7,66 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,49 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,45 (д, J=3,4 Гц, 1H), 7,38 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,10 (д, J=8,5 Гц, 2H), 6,79 (дд, J=8,8, 2,3 Гц, 1H), 6,41-6,37 (м, 2H), 3,83-2,70 (м, 19H), 2,42 (с, 2H), 2,30-2,22 (м, 2H), 2,00-1,78 (м, 8H).
Соед. № 44: (S)-N-((4-(((1,4-диоксан-2-ил)метил)амино)-2-фтор-5-нитрофенил)сульфонил)-2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензамид
1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ 8,75 (д, J=7,5 Гц, 1H), 8,08-8,02 (м, 1H), 7,68 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,63 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,50 (д, J=3,4 Гц, 1H), 7,36 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,09 (д, J=8,4 Гц, 2H), 6,80-6,72 (м, 2H), 6,50 (д, J=3,4 Гц, 1H), 6,29 (д, J=2,2 Гц, 1H), 3,90-2,70 (м, 19H), 2,41 (с, 2H), 2,32-2,20 (м, 2H), 2,00-1,78 (м, 8H).
Соед. 45: (S)-N-((4-(((1,4-диоксан-2-ил)метил)амино)-2-фтор-3-нитрофенил)сульфонил)-2-((1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)бензамид
МС m/z=900 [М+Н].
Соед. № 46: 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-((2-метил-7-нитро-2Н-индазол-5-ил)сульфонил)бензамид
1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ 8,80 (д, J=1,6 Гц, 1H), 8,73 (д, J=1,6 Гц, 1H), 8,69 (с, 1H), 7,92 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,62 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,44 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,39 (д, J=3,4 Гц, 1H), 7,36 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,09 (д, J=8,5 Гц, 2H), 6,75 (дд, J=8,9, 2,3 Гц, 1H), 6,34 (д, J=2,3 Гц, 1H), 6,32 (д, J=3,4 Гц, 1H), 4,35 (с, 3H), 3,67-2,70 (м, 8H), 3,66 (с, 2H), 2,41 (с, 2H), 2,32-2,22 (м, 2H), 2,02-1,75 (м, 8H).
Соед. № 47: 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-((7-нитро-1Н-бензо[d]имидазол-5-ил)сульфонил)бензамид
1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ 8,70 (д, J=1,3 Гц, 1H), 8,64 (д, J=1,3 Гц, 1H), 8,57 (с, 1H), 7,93 (д, J=1,9 Гц, 1H), 7,59 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,50 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,40 (д, J=3,4 Гц, 1H), 7,33 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,08 (д, J=8,4 Гц, 2H), 6,74 (дд, J=8,9, 2,2 Гц, 1H), 6,35 (д, J=2,2 Гц, 1H), 6,33 (д, J=3,4 Гц, 1H), 3,72-2,72 (м, 8H), 2,40 (с, 2Н), 2,34-2,20 (м, 2Н), 2,00-1,77 (м, 8Н).
Соед. № 48: 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-((7-нитро-2-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)-2H-индазол-5-ил)сульфонил)бензамид
1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ 8,87 (д, J=1,6 Гц, 1H), 8,84 (с, 1H), 8,75 (д, J=1,6 Гц, 1H), 7,96 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,64 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,50 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,41 (д, J=3,4 Гц, 1H), 7,38 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,09 (д, J=8,5 Гц, 2H), 6,75 (дд, J=8,9, 2,3 Гц, 1H), 6,35 (д, J=3,4 Гц, 1H), 6,31 (д, J=2,3 Гц, 1H), 4,20-4,14 (м, 2H), 3,75-2,70 (м, 13H), 2,41 (с, 2H), 2,32-1,76 (м, 14H).
Соед. № 49: 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-((1-метил-7-нитро-1H-индазол-5-ил)сульфонил)бензамид
1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ 8,71 (д, J=1,5 Гц, 1H), 8,63 (д, J=1,5 Гц, 1H), 8,33 (с, 1H), 7,95 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,63 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,50 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,42 (д, J=3,4 Гц, 1H), 7,37 (д, J=8,3 Гц, 2H), 7,09 (д, J=8,3 Гц, 2H), 6,76 (дд, J=8,9, 1,7 Гц, 1H), 6,36 (д, J=3,4 Гц, 1H), 6,34 (д, J=1,7 Гц, 1H), 4,20 (с, 3H), 3,75-2,70 (м, 8H), 3,70 (с, 2H), 2,41 (с, 2H), 2,30-2,23 (м, 2H), 2,00-1,76 (м, 8H).
Соед. № 50: 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-((7-нитро-2Н-индазол-5-ил)сульфонил)бензамид
1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ 8,82 (с, 2H), 8,41 (с, 1H), 7,93 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,64 (д, J=9,0 Гц, 1H), 7,44 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,40-7,34 (м, 3H), 7,09 (д, J=8,4 Гц, 2H), 6,76 (дд, J=9,0, 2,3 Гц, 1H), 6,36 (д, J=2,3 Гц, 1H), 6,29 (д, J=3,4 Гц, 1H), 3,70-2,70 (м, 8H), 3,66 (с, 2H), 2,41 (с, 2H), 2,30-2,20 (м, 2H), 2,02-1,77 (м, 8H).
Соед. № 51: 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-((4-нитро-2H-индазол-6-ил)сульфонил)бензамид
1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ 9,19 (с, 1H), 8,84 (с, 1H), 8,73 (д, J=1,2 Гц, 1H), 7,94 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,65 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,63 (д, J=8,7 Гц, 1H), 7,43-7,37 (м, 3H), 7,12 (д, J=8,4 Гц, 2H), 6,81 (дд, J=8,7, 2,1 Гц, 1H), 6,41 (д, J=3,4 Гц, 1H), 6,39 (д, J=2,1 Гц, 1H), 3,71-2,70 (м, 8H), 3,69 (с, 2H), 2,43 (с, 2H), 2,30-2,24 (м, 2H), 2,02-1,76 (м, 8H).
Соед. № 52: 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-((1-метил-4-нитро-1H-бензо[d]имидазол-6-ил)сульфонил)бензамид
1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ 8,66 (д, J=1,6 Гц, 1H), 8,60 (с, 1H), 8,54 (д, J=1,6 Гц, 1H), 7,91 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,64 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,38 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,35 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,33 (д, J=3,5 Гц, 1H), 7,10 (д, J=8,5 Гц, 2H), 6,77 (дд, J=8,9, 2,3 Гц, 1H), 6,37 (д, J=2,3 Гц, 1H), 6,27 (д, J=3,5 Гц, 1H), 4,01 (с, 3H), 3,70-2,70 (м, 8H), 3,66 (с, 2H), 2,42 (с, 2H), 2,32-2,23 (м, 2H), 2,03-1,80 (м, 8H).
Соед. № 53: 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-((7-нитро-2-((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)-1H-бензо[d]имидазол-5-ил)сульфонил)бензамид
1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ 8,67 (д, J=1,5 Гц, 1H), 8,56 (д, J=1,5 Гц, 1H), 7,94 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,63 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,48 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,41 (д, J=3,4 Гц, 1H), 7,36 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,09 (д, J=8,5 Гц, 2H), 6,74 (дд, J=8,9, 2,3 Гц, 1H), 6,34 (д, J=3,4 Гц, 1H), 6,30 (д, J=2,3 Гц, 1H), 4,00-3,85 (м, 2H), 3,70-2,70 (м, 10H), 3,65 (с, 2H), 2,98 (д, J=7,3 Гц, 2H), 2,41 (с, 2H), 2,35-2,20 (м, 3H), 2,02-1,40 (м, 12H).
Соед. № 54: 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-((2-(2-(2-метоксиэтокси)этил)-4-нитро-2Н-индазол-6-ил)сульфонил)бензамид
1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ 8,85 (с, 1H), 8,70 (с, 1H), 8,53 (д, J=1,2 Гц, 1H), 7,94 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,65 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,43 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,42-7,35 (м, 3H), 7,10 (д, J=8,4 Гц, 2H), 6,79 (дд, J=8,9, 2,3 Гц, 1H), 6,39 (д, J=2,3 Гц, 1H), 6,30 (д, J=3,4 Гц, 1H), 4,80 (т, J=5,0, 2H), 4,09 (т, J=5,0 Гц, 2H), 3,70-3,65 (м, 4H), 3,64-2,70 (м, 10H), 3,29 (с, 3H), 2,42 (с, 2H), 2,30-2,25 (м, 2H), 2,02-1,76 (м, 8H).
Соед. № 55: 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-((2-(2-метоксиэтил)-4-нитро-2Н-индазол-6-ил)сульфонил)бензамид
1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ 8,80 (д, J=0,8 Гц, 1H), 8,74-8,72 (м, 1H), 8,54 (д, J=1,3 Гц, 1H), 7,93 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,65 (д, J=8,9 Гц, 1H), 7,42 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,40-7,35 (м, 3H), 7,10 (д, J=8,5 Гц, 2H), 6,78 (дд, J=8,9, 2,4 Гц, 1H), 6,36 (д, J=2,4 Гц, 1H), 6,30 (д, J=3,4 Гц, 1H), 4,79 (т, J=5,0 Гц, 2H), 3,99 (т, J=5,0 Гц, 2H), 3,70-2,70 (м, 8H), 3,67 (с, 2H), 3,38 (с, 3H), 2,42 (с, 2H), 2,32-2,25 (м, 2H), 2,02-1,76 (м, 8H).
Соед. № 25: 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен)-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-((5-нитро-1-((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)-1Н-пиррол-3-ил)сульфонил)бензамид
1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d4) δ 8,04 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,72-7,68 (м, 2H), 7,61 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,48 (д, J=3,5 Гц, 1H), 7,45 (д, J=2,2 Гц, 1H), 7,39 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,11 (д, J=8,5 Гц, 2H), 6,80 (дд, J=8,9, 2,3 Гц, 1H), 6,47 (д, J=3,5 Гц, 1H), 6,37 (д, J=2,3 Гц, 1H), 4,27 (д, J=7,2 Гц, 2H), 3,85-2,70 (м, 12H), 3,66 (с, 2H), 2,42 (с, 2Н), 2,35-2,25 (м, 2Н), 2,03-1,77 (м, 9Н), 1,48-1,26 (м, 4Н).
Соед. № 56: 2-((1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)окси)-4-(4-((6-(4-хлорфенил)спиро[3.5]нон-6-ен-7-ил)метил)пиперазин-1-ил)-N-(нафталин-2-илсульфонил)бензамид
1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d4+CDCl3) δ 8,61 (с, 1H), 8,07 (д, J=2,5 Гц, 1H), 7,92-7,70 (м, 4H), 7,78 (д, J=9,0 Гц, 1H), 7,68-7,57 (м, 3H), 7,47 (д, J=3,5 Гц, 1H), 7,32 (д, J=8,4 Гц, 2H), 6,98 (д, J=8,4 Гц, 2H), 6,62 (дд, J=9,0, 2,3 Гц, 1H), 6,48 (д, J=3,5 Гц, 1H), 6,13 (д, J=2,3 Гц, 1H), 3,57 (с, 2H), 3,56-2,71 (м, 8H), 2,36 (с, 2H), 2,24-2,14 (м, 2H), 1,96-1,71 (м, 8H).
ПРИМЕР 15
Ингибирование Bcl-2 и Bcl-xL: меченные флуоресцеином белки BIM (81-106), BAK (72-87) и BID (79-99), обозначенные как Flu-BIM, Flu-BAK и Flu-BID, соответственно, были применены в качестве флуоресцентных зондов в анализах ПФ для Bcl-2, Bcl-xL и Mcl-1, соответственно. Путем мониторинга значений общей поляризации флуоресценции смесей, состоящих из флуоресцентных зондов с фиксированными концентрациями и белков с увеличивающимися концентрациями вплоть до полного насыщения, значения Kd Flu-BIM для Bcl-2, Flu-BAK для Bcl-xL и Flu BID для Mcl-1 были определены равными 0,55 ± 0,15, 4,4 ± 0,8 и 6,9 ± 0,9 нМ, соответственно. Значения поляризации флуоресценции измеряли с применением планшетного ридера Infinite M-1000 (Tecan U.S., Парк Исследовательского Треугольника, Северная Каролина) в 96-луночных черных круглодонных планшетах Microfluor 1 (Thermo Scientific). В каждую лунку добавляли 1 нМ Flu-BIM, или 2 нМ Flu-BAK, или 2 нМ Flu-BID и увеличивающиеся концентрации Bcl-2, или Bcl-xL, или Mcl-1 до конечного объема 125 μл в аналитическом буфере (100 мМ фосфат калия, рН 7,5, 100 μг/мл бычьего γ-глобулина, 0,02% азида натрия, Invitrogen, с 0,01% Triton X-100 и 4% ДМСО). Планшеты перемешивали и инкубировали при комнатной температуре в течение 1 часа при осторожном встряхивании для обеспечения равновесия. Значения поляризации в миллиполяризационных единицах (мП) измеряли при длине волны возбуждения 485 нм и длине волны эмиссии 530 нм. Равновесные константы диссоциации (Kd) затем рассчитывали путем аппроксимации сигмоидального дозозависимого увеличения ПФ как функции концентрации белка с применением программного обеспечения Graphpad Prism 5.0 (Graphpad Software, Сан-Диего, Калифорния).
Значения Ki типичных Соединений по данному Описанию для Bcl-2, Bcl-xL и Mcl-1 определяли из экспериментов по конкурентному связыванию, в которых серийные разведения ингибиторов добавляли в 96-луночные планшеты, содержащие фиксированные концентрации флуоресцентных зондов и белков в каждой лунке. Смеси 5 μл испытываемых ингибиторов в ДМСО и 120 μл предварительно инкубированных комплексов белок/зонд в буферном растворе для анализа добавляли в планшеты для анализа, и инкубировали при комнатной температуре в течение 2 часов при осторожном встряхивании. Конечные концентрации белка и зонда составляют 1,5 нМ и 1 нМ для анализа Bcl-2, 10 нМ и 2 нМ для анализа Bcl-xL и 20 нМ и 2 нМ для анализа Mcl-1, соответственно. Отрицательные контроли, содержащие только комплекс белок/зонд (эквивалентно 0%-ному ингибированию), и положительные контроли, содержащие только свободный зонд (эквивалентно 100%-ному ингибированию), были включены в каждый планшет для анализа. Значения ПФ измеряли, как описано выше. Значения IC50 определяли путем аппроксимации нелинейной регрессией кривых конкуренции. Значения Ki конкурентных ингибиторов рассчитывали с использованием уравнения, описанного в Nikolovska-Coleska и др., Analytical Biochemistry 332: 261-73 (2004), на основании измеренных значений IC50,, значений Kd зондов для белков и концентраций белков и зондов в конкурентных анализах. значение Ki были также рассчитаны используя уравнение Хуанга, Journal of Biomolecular Screening 8:34-38 (2003).
Ингибирующие активности типичных Соединений по данному Описанию против Bcl-2, Bcl-xL и Mcl-1 представлены в Таблице 4.
Таблица 4
IC50 (нМ)
ПРИМЕР 16
Ингибирование RS4;11
Клетки RS4;11 были получены из Американской коллекции типовых культур (ATCC). Их использовали в течение трех месяцев после оттаивания новых флаконов. Клетки поддерживали в рекомендованной культуральной среде с 10% FBS при 37°C и атмосфере 5% CO2.
Влияние типичных Соединений по данному Описанию на жизнеспособность клеток определяли с применением анализа Cell Counting Kit-8 (CCK-8) (Dojindo, Роквилл, Мэриленд) согласно инструкциям производителя. 200 мкл суспензии клеток RS4;11 (10000 клеток/лунка) в культуральной среде высевали в 96-луночные планшеты и культивировали в течение ночи. Каждое тестируемое соединение серийно разбавляли культуральной средой, и 20 мкл разведенного соединения добавляли в соответствующую лунку клеточного планшета. После добавления тестируемого соединения, клетки инкубировали при 37 °С в атмосфере 5% СО2 в течение 4 дней. В конце 4 дней, в каждую лунку планшета добавляли 10 мкл раствора CCK-8 и инкубировали в течение 1-4 часов. Планшеты считывали при 450 нм на микропланшетном спектрофотометре (Epoch2, BioTek). Показания были нормализованы для клеток-носителей, и IC50 была рассчитана с помощью нелинейного регрессионного анализа с применением программного обеспечения GraphPad Prism 5.
Ингибирующие активности типичных Соединений по данному Описанию против клеточной линии RS4;11 представлены в Таблице 5.
Таблица 5
IC50 (нМ)
(зависит от Bcl-2)
ПРИМЕР 17
Ингибирование Molm13
Клетки Molm13 были получены от Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSMZ). Их использовали в течение трех месяцев после оттаивания новых флаконов. Клетки поддерживали в рекомендованной культуральной среде с 10% FBS при 37°C и атмосфере 5% CO2.
Влияние типичных Соединений по данному Описанию на жизнеспособность клеток определяли с применением анализа Cell Counting Kit-8 (CCK-8) (Dojindo, Роквилл, Мэриленд) согласно инструкциям производителя. 200 мкл клеточной суспензии Molm13 (10000 клеток/лунка) в культуральной среде высевали в 96-луночные планшеты и культивировали в течение ночи. Каждое тестируемое соединение серийно разбавляли культуральной средой, и 20 мкл разведенного соединения добавляли в соответствующую лунку клеточного планшета. После добавления тестируемого соединения, клетки инкубировали при 37 °С в атмосфере 5% СО2 в течение 4 дней. В конце 4 дней, в каждую лунку планшета добавляли 10 мкл раствора CCK-8 и инкубировали в течение 1-4 часов. Планшеты считывали при 450 нм на микропланшетном спектрофотометре (Epoch2, BioTek). Показания были нормализованы для клеток-носителей, и IC50 была рассчитана с помощью нелинейного регрессионного анализа с применением программного обеспечения GraphPad Prism 5.
Ингибирующие активности типичных Соединений по данному Описанию против клеточной линии Molm13 представлены в Таблице 6.
Таблица 6
IC50 (нМ)
(зависит от Bcl-2)
ПРИМЕР 18
RS4;11 ксенотрансплантантная модель
RS4;11 ксенотрансплантантные опухолевые ткани, полученные от мышей, которых лечили Соединениями по данному Описанию или ABT-199 в дозе 25 мг/кг перорально, исследовали на экспрессию PARP (Cell Signaling Technology (CST), #9523), каспазы-3 (CST, #9661) и Bcl-2 (CST, #4223) с помощью вестерн-блоттинга. GAPDH был использован в качестве контроля загрузки. Результаты показаны на Фиг. 1 и Фиг. 2.
Противоопухолевая активность Соед. № 6 (соединение 6) также изучали на RS4;11 ксенотрансплантантной модели лейкоза. Человеческие опухолевые клетки RS4;11 инъецировали голым мышам, и лечение начинали на 11 день, когда размер опухоли достигал приблизительно 100 мм3. Соед. № 6 вводили через желудочный зонд в указанных дозах и графиках. Соед. № 6 ингибирует рост опухоли (Фиг. 3) и не вызывает потерю веса у мышей (Фиг. 4).
ПРИМЕР 19
Фармакокинетика
Фармакокинетику ABT-199 и типичных Соединений по данному Описанию оценивали на крысах при внутривенной дозе 2 мг/кг и пероральной дозе 20 мг/кг. Результаты показаны в Таблице 3.
Таблица 3
(л/ч/кг)
(л/
кг)
(в/в)
(ч)
ПРИМЕР 20
Ингибирование MV4;11
Ингибирующие активности типичных Соединений по данному Описанию против клеточной линии MV4;11 представлены в Таблице 7.
Таблица 7
IC50
(мкм)
Теперь, после полного описания данного изобретения, специалистам обычной квалификации в данной области техники будет понятно, что то же самое можно выполнить в широком и эквивалентном диапазоне условий, составов, и других параметров, не влияя на объем изобретения или любой его вариант реализации.
Другие варианты реализации изобретения будут очевидны для квалифицированных специалистов в данной области техники из рассмотрения описания и практики данного изобретения, описанного в данном документе. Предполагается, что описание и примеры будут рассматриваться только как примерные, с истинным объемом и сущностью данного изобретения, указанными в следующей формуле изобретения.
Все патенты и публикации, процитированные в данном документе, полностью включены в данный документ посредством ссылки в полном объеме.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| N-(ФЕНИЛСУЛЬФОНИЛ) БЕНЗАМИДЫ И РОДСТВЕННЫЕ СОЕДИНЕНИЯ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ BCL-2 | 2017 |
|
RU2722560C1 |
| БЕНЗАМИДНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ | 2019 |
|
RU2801647C2 |
| ИНДУЦИРУЮЩИЕ АПОПТОЗ СРЕДСТВА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОЙ ОПУХОЛИ И ИММУННЫХ И АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ | 2010 |
|
RU2573832C2 |
| ИНДУЦИРУЮЩИЕ АПОПТОЗ СРЕДСТВА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОЙ ОПУХОЛИ И ИММУННЫХ И АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ | 2010 |
|
RU2535347C2 |
| ИНДУЦИРУЮЩИЕ АПОПТОЗ СРЕДСТВА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОЙ ОПУХОЛИ И ИММУННЫХ И АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ | 2015 |
|
RU2628885C2 |
| ИНДУЦИРУЮЩИЕ АПОПТОЗ СРЕДСТВА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОЙ ОПУХОЛИ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ И АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ | 2014 |
|
RU2662812C2 |
| АПОПТОЗ-ИНДУЦИРУЮЩИЕ СРЕДСТВА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА И ИММУННЫХ И АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ | 2010 |
|
RU2554346C2 |
| ТВЕРДЫЕ ДИСПЕРСИИ, СОДЕРЖАЩИЕ СРЕДСТВА, ВЫЗЫВАЮЩИЕ АПОПТОЗ | 2011 |
|
RU2598345C2 |
| ПОЛУЧЕННЫЕ ЭКСТРУЗИЕЙ РАСПЛАВА ТВЕРДЫЕ ДИСПЕРСИИ, СОДЕРЖАЩИЕ ИНДУЦИРУЮЩЕЕ АПОПТОЗ СРЕДСТВО | 2011 |
|
RU2577859C2 |
| ПОЛУЧЕННЫЕ ЭКСТРУЗИЕЙ РАСПЛАВА ТВЕРДЫЕ ДИСПЕРСИИ, СОДЕРЖАЩИЕ ИНДУЦИРУЮЩЕЕ АПОПТОЗ СРЕДСТВО | 2011 |
|
RU2633353C1 |
Настоящее изобретение относится к области органической химии, а именно к соединению или его фармацевтически приемлемой соли, выбранному из группы, состоящей из:
.
Также изобретение относится к фармацевтической композиции и способу лечения рака, восприимчивого к ингибированию белков Bcl-2. Технический результат: предложены новые органические соединения, которые относятся к ингибиторам белка Bcl-2, пригодные для лечения рака. 3 н. и 6 з.п. ф-лы, 4 ил., 7 табл., 20 пр.
1. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, выбранное из группы, состоящей из:
.
2. Соединение по п. 1, которое представляет собой:
или его фармацевтически приемлемая соль.
3. Соединение по п. 1, которое представляет собой:
или его фармацевтически приемлемая соль.
4. Соединение по п. 1, которое представляет собой:
или его фармацевтически приемлемая соль.
5. Фармацевтическая композиция для лечения рака, восприимчивого к ингибированию белков Bcl-2 у субъекта, содержащая эффективное количество соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.
6. Фармацевтическая композиция по п. 5, где соединение представляет собой:
или его фармацевтически приемлемую соль.
7. Фармацевтическая композиция по п. 5, где соединение представляет собой:
или его фармацевтически приемлемую соль.
8. Фармацевтическая композиция по п. 5, где соединение представляет собой:
или его фармацевтически приемлемую соль.
9. Способ лечения рака, восприимчивого к ингибированию белков Bcl-2, у субъекта пациента, который включает введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп. 1-4 или его фармацевтически приемлемой соли.
| US 2010305122 A1, 02.12.2010 | |||
| US 2006128706 A1, 15.06.2006 | |||
| ИНДУЦИРУЮЩИЕ АПОПТОЗ СРЕДСТВА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОЙ ОПУХОЛИ И ИММУННЫХ И АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ | 2010 |
|
RU2573832C2 |
