ПРИМЕНЕНИЕ СОЕДИНЕНИЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ГЕМОРРАГИЧЕСКОГО ИНСУЛЬТА Российский патент 2021 года по МПК A61K31/568 A61K31/56 A61P25/00 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к новому медицинскому применению 5α-андрост-3β,5,6β-триола (Триола) и его аналогов, и в частности, к применению данных соединений для лечения геморрагического инсульта.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Инсульт представляет собой острое цереброваскулярное заболевание, вызванное повреждением тканей головного мозга в результате внезапного разрыва кровеносных сосудов головного мозга или отсутствия возможности тока крови к головному мозгу по причине закупорки кровеносных сосудов, и включает ишемический мозговой инсульт и геморрагический инсульт. Согласно статистическим данным ВОЗ от 2014 года, нарушения мозгового кровообращения, главным образом в виде инсульта, занимают второе место в мире по уровню смертности и являются основной причиной тяжелой инвалидности и деменции по всему миру. Смертность по всему миру по причине цереброваскулярных заболеваний в 2015 составила 6,326 миллиона, включая 2,978 миллиона ишемических инсультов и 3,348 миллиона геморрагических или иных инсультов.

Ишемический инсульт относится к внезапному возникновению нарушения местного кровоснабжения в ткани головного мозга по различным причинам, что приводит к очаговым поражениям и некрозу церебрального гипоксически-ишемического происхождения, который дополнительно ведет к клинически соответствующим заболеваниям, проявляющимся в недостаточности неврологических функций. В зависимости от патогенеза основные типы ишемического инсульта включают тромбозный церебральный инфаркт, эмболический церебральный инфаркт, лакунарный церебральный инфаркт, множественные церебральные инфаркты, транзиторную ишемическую атаку (ТИА) и т.д.

В отличие от ишемического инсульта, геморрагический инсульт, также называемый кровоизлияние в головной мозг или внутримозговое кровоизлияние, представляет собой ряд клинических проявлений неврологической дисфункции, возникающих в результате разрыва внутричерепных кровеносных сосудов и излияния крови в головной мозг. При геморрагическом инсульте уровень смертности в острой фазе выше, чем при ишемическом инсульте. Геморрагические инсульты главным образом подразделяют на внутримозговое кровоизлияние (ВМК) и субарахноидальное кровоизлияние (САК) в зависимости от различных локализаций кровотечений в ткани головного мозга. ВМК и САК могут происходить совместно. ВМК относится к кровотечению, вызванному разрывом кровеносных сосудов в паренхиме мозга, а САК является общим термином для кровотечения, возникающего по различным причинам, которое происходит между мягкой оболочкой мозга и паутинной оболочкой мозга с излиянием крови внутрь субарахноидального пространства. Гипертензия является наиболее распространенной причиной нетравматического ВМК, вызванного цереброваскулярной аномалией, церебральной амилоидной ангиопатией, аневризмой, болезнью мойя-мойя, церебральным артериитом, первичной или метастатической опухолью, оперативным вмешательством, ишемическим инсультом, инфарктом, тромболитической или антикоагулянтной терапией и т.д. Распространенной причиной САК является внутричерепная аневризма, и следующими по распространенности причинами являются цереброваскулярные аномалии и гипертензивный артериосклероз. САК также может происходить при артериите, атипичной сосудистой сети pavimentum cerebri, заболеваниях соединительной ткани, заболеваниях крови, антикоагулянтной терапии и т.д. САК является наиболее распространенной причиной внезапной смерти от инсульта.

Повреждение центральной нервной системы может также быть вызвано оперативным вмешательством, которое относится к прямому повреждению нервной ткани во время хирургических операций, выполняемых на центральной нервной системе (включая головной мозг и нотохорд), и гистопатологическим изменениям (включая отек мягких тканей, кровотечения, микрокровотечения, инфаркт и микроинфаркт) нервной системы, вызванным изменениями в кровоснабжении и кровотечением во время операции. Распространенные оперативные вмешательства, которые приводят к поражениям центральной нервной системы, включают, но не ограничиваются ими, клипирование или эмболизацию внутричерепной аневризмы, резекцию опухоли головного мозга и другие оперативные вмешательства, которые непосредственно затрагивают центральную нервную систему.

Различные типы инсульта требуют различных видов лечения, или даже противоположных. Способы распознавания ишемического и геморрагического инсультов известны в данной области техники и описаны, например, в PCT/EP2015/078576 и PCT/US2007/073272. Ввиду недостаточности эффективных видов лечения, лучшей мерой на данный момент считают профилактику. Таким образом, получение лекарственного средства для лечения геморрагического инсульта является очень важным с клинической точки зрения. В последние годы с развитием междисциплинарных методов, таких как нейровизуализация, диагностирование острого инсульта является более точным и быстрым, что положительно влияет на выбор плана лечения и оценку прогноза; однако, до сих пор не существует самостоятельного способа лечения, который позволяет вылечить инсульт.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В одном аспекте настоящего изобретения предложено применение соединения формулы I, его дейтерированного аналога или их фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения геморрагического инсульта,

Формула I

где R₁ представляет собой H, алкил или терминальный алкенил, содержащий от 1 до 5 атомов углерода, или -CH(CH₃)(CH₂)₃CH(CH₃)₂.

В одном из вариантов реализации R₁ предпочтительно представляет собой H, и соединение представляет собой 5α-андрост-3β,5,6β-триол (также именуемый ниже в настоящем описании как Триол). В одном из вариантов реализации R₁ выбран из группы, состоящей из -CHCH₂CH₃, -CH(CH₃)₂, -CH(CH₂)₃CH₃ и -CH(CH₃)(CH₂)₃CH(CH₃)₂.

В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения геморрагического инсульта у пациента, включающий введение пациенту эффективного количества соединения формулы I, его дейтерированного аналога или их фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы I, или его дейтерированное соединение, или их фармацевтически приемлемую соль;

Формула I

где R₁ представляет собой H, алкил или терминальный алкенил, содержащий от 1 до 5 атомов углерода, или -CH(CH₃)(CH₂)₃CH(CH₃)₂.

В одном из вариантов реализации R₁ предпочтительно представляет собой H. В одном из вариантов реализации R₁ выбран из группы, состоящей из -CHCH₂CH₃, -CH(CH₃)₂, -CH(CH₂)₃CH₃ и -CH(CH₃)(CH₂)₃CH(CH₃)₂.

В дополнительном аспекте в настоящем изобретении предложено соединение формулы I, его дейтерированный аналог или их фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения геморрагического инсульта у пациента,

Формула I

где R₁ представляет собой H, алкил или терминальный алкенил, содержащий от 1 до 5 атомов углерода, или -CH(CH₃)(CH₂)₃CH(CH₃)₂.

В одном из вариантов реализации R₁ предпочтительно представляет собой H. В одном из вариантов реализации R₁ выбран из группы, состоящей из -CHCH₂CH₃, -CH(CH₃)₂, -CH(CH₂)₃CH₃ и -CH(CH₃)(CH₂)₃CH(CH₃)₂.

В некоторых вариантах реализации геморрагический инсульт проявляется как кровоизлияние, вызванное трещиной или разрывом сосуда, в ткани головного мозга.

В некоторых вариантах реализации геморрагический инсульт представляет собой внутримозговое кровоизлияние (ВМК), такое как гипертензивное внутримозговое кровоизлияние. В некоторых вариантах реализации внутримозговое кровоизлияние представляет собой внутримозговое кровоизлияние, вызванное цереброваскулярной аномалией, церебральной амилоидной ангиопатией, аневризмой, болезнью мойя-мойя, церебральным артериитом, первичной или метастатической опухолью, ишемическим инфарктом, оперативным вмешательством или тромболитической или антикоагулянтной терапией.

В некоторых вариантах реализации геморрагический инсульт представляет собой субарахноидальное кровоизлияние (САК), в частности субарахноидальное кровоизлияние, вызванное внутричерепной аневризмой. В других вариантах реализации субарахноидальное кровоизлияние представляет собой субарахноидальное кровоизлияние, вызванное цереброваскулярной аномалией, гипертензивным артериосклерозом, артериитом, атипичной сосудистой сеткой в основании головного мозга, заболеванием соединительной ткани, заболеванием крови, оперативным вмешательством или антикоагулянтной терапией.

В некоторых вариантах реализации геморрагический инсульт представляет собой осложнение, возникшее в результате внутримозгового кровоизлияния и субарахноидального кровоизлияния, включая, но не ограничиваясь ими, осложнение, возникшее в результате внутримозгового кровоизлияния и субарахноидального кровоизлияния, вызванного гипертензией, цереброваскулярной аномалией, ишемическим инфарктом, амилоидной ангиопатией головного мозга, аневризмой, болезнью мойя-мойя, церебральным артериитом, первичной или метастатической опухолью, гипертензивным артериосклерозом, артериитом, атипичной сосудистой сетью pavimentum cerebri, заболеванием соединительной ткани, заболеванием крови, оперативным вмешательством, внутричерепной аневризмой или тромболитической или антикоагулянтной терапией.

В некоторых вариантах реализации геморрагический инсульт вызван оперативным вмешательством. В некоторых вариантах реализации геморрагический инсульт представляет собой внутримозговое кровоизлияние (ВМК), вызванное оперативным вмешательством, субарахноидальное кровоизлияние (САК), вызванное оперативным вмешательством, или оба указанных случая. В некоторых вариантах реализации оперативное вмешательство относится к оперативному вмешательству, непосредственно затрагивающему центральную нервную систему. В некоторых вариантах реализации оперативное вмешательство относится к клипированию или эмболизации внутричерепной аневризмы или резекции опухоли головного мозга.

В некоторых вариантах реализации лекарственное средство дополнительно включает дополнительные терапевтические агенты.

В некоторых вариантах реализации пациентом является человек.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

Фиг. 1. Количество крови при внутримозговом кровоизлиянии значительно снижено с помощью Триола в модели внутримозгового кровоизлияния на мышах C57B. A. Репрезентативный срез головного мозга через 24 ч после внутримозгового кровоизлияния; B. Количество крови при внутримозговом кровоизлиянии через 24 ч, n=10 в каждой группе, **p <0,01.

Фиг. 2. Нейросенсорная функция значительно улучшена с помощью Триола у мышей C57B после внутримозгового кровоизлияния. A. Тест с кругом; Тест с клейкой бумагой; B. Продолжительность времени контакта с клейкой бумагой; C. Затраты времени на отрыв клейкой бумаги; *p <0,05, ***p <0,001, n=12~23 животных на группу. Контр.: нормальные; Имитация: группа имитации операции; ВМК: модель внутримозгового кровоизлияния; среда: растворитель.

Фиг. 3. Соматосенсорная и моторная функция значительно улучшена с помощью Триола у мышей C57B после внутримозгового кровоизлияния. Модифицированную шкалу Гарсия (A-D) используют для оценки соматосенсорной и моторной функции у мышей C57B через 24 часа после внутримозгового кровоизлияния: A. Тест касания усов; B. Тест симметричности конечностей; C. Тест хождения передними конечностями; D. Общая оценка нервной функции; n = 12~23 животных на группу, *p <0,05, **p <0,01, ***p <0,001. Контр.: нормальные; Имитация: группа имитации операции; ВМК: модель внутримозгового кровоизлияния; среда: растворитель.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В контексте настоящего описания термин «композиция» относится к составу, подходящему для введения предполагаемому субъекту, представляющему собой животное, для терапевтических целей, который содержит по меньшей мере один фармацевтически активный компонент, такой как соединение. Необязательно композиция дополнительно содержит по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество.

Термин «фармацевтически приемлемый» означает, что вещество не имеет свойства, которое, с учетом требующего лечения заболевания или состояния и соответствующего пути введения, позволило бы рациональным и осмотрительным практикующим врачам отменить введение указанного вещества пациенту. Например, для инъекционных лекарственных средств, часто необходимо, чтобы такое вещество было по существу стерильным.

В контексте настоящего описания термины «терапевтически эффективное количество» и «эффективное количество» означают, что вещество и количество вещества являются эффективными для предотвращения, облегчения или улучшения одного или более симптомов заболевания или состояния, и/или продления выживаемости субъекта, получающего лечение.

В контексте настоящего описания «лечение» включает введение соединения согласно настоящей заявке или его фармацевтически приемлемой соли для облегчения симптомов или осложнений заболевания или состояния или устранение заболевания или состояния. Термин «облегчение» в контексте настоящего описания используют для описания процесса снижения тяжести признаков или симптомов расстройства. Симптомы могут быть облегчены, но не устранены. В одном из вариантов реализации введение фармацевтической композиции согласно настоящей заявке приводит к устранению признаков или симптомов.

Термин «геморрагический инсульт, вызванный оперативным вмешательством» относится к внутримозговому кровоизлиянию или субарахноидальному кровоизлиянию, или осложнению, возникшему в результате обоих кровоизлияний, вызванных хирургической операцией.

Соединение формулы I, его дейтерированный аналог или их фармацевтически приемлемая соль

Соединения, подходящие для способа или применения согласно настоящему изобретению, включают соединение формулы I, его дейтерированный аналог или их фармацевтически приемлемую соль,

формула I

где R₁ представляет собой H, алкил или терминальный алкенил, содержащий от 1 до 5 атомов углерода, или -CH(CH₃)(CH₂)₃CH(CH₃)₂, также именуемые как «соединения согласно настоящему изобретению». В одном из вариантов реализации R₁ представляет собой H, и указанное соединение представляет собой 5α-андрост-3β,5,6β-триол (также именуемый далее в настоящем описании как Триол), имеющий структуру формулы II.

формула II

Подтверждено, что Триол представляет собой защищающий нейроны агент, эффективный против острого ишемического гипоксического повреждения головного мозга.

В одном из вариантов реализации R₁ представляет собой -CHCH₂CH₃, и соединение представляет собой 17-пропилиденандрост-3β,5,6β-триол. В одном из вариантов реализации R₁ представляет собой -CH(CH₃)₂, и соединение представляет собой 17- изопропиландрост-3β,5,6β-триол. В одном из вариантов реализации R₁ представляет собой -CH(CH₂)₃CH₃, и соединение представляет собой 17-бутиландрост-3β,5,6β-триол. В одном из вариантов реализации R₁ представляет собой -CH(CH₃)(CH₂)₃CH(CH₃)₂, и соединение представляет собой холестан-3β,5,6β-триол.

Соединения могут быть приготовлены в виде или быть в форме фармацевтически приемлемых солей. Предполагаемые формы фармацевтически приемлемой соли включают, без ограничения, моно, бис, трис, тетракис и т.д. Фармацевтически приемлемые соли являются нетоксичными в количествах и концентрациях, в которых их вводят. Получение такой соли может улучшать фармакологическое применение путем изменения физических характеристик соединения, не препятствуя проявлению его физиологического эффекта. Пригодные для применения изменения в физических свойствах включают снижение температуры плавления для улучшения трансмукозального введения и повышение растворимости для улучшения введения более высоких концентраций лекарственного средства.

Фармацевтически приемлемые соли включают кислотно-аддитивные соли, в частности содержащие сульфат, хлорид, гидрохлорид, фумарат, малеат, фосфат, сульфамат, ацетат, цитрат, лактат, тартрат, метансульфонат, этансульфонат, бензолсульфонат, п-толуолсульфонат, циклогексилсульфамат и хинат. Фармацевтически приемлемые соли могут быть получены из кислот, в частности хлороводородной кислоты, малеиновой кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, сульфаминовой кислоты, уксусной кислоты, лимонной кислоты, молочной кислоты, малоновой кислоты, метансульфоновой кислоты, этансульфоновой кислоты, бензолсульфоновой кислоты, п-толуолсульфоновой кислоты, циклогексилсульфаминовой кислоты, фумаровой кислоты и хинной кислоты.

Фармацевтически приемлемые соли также включают основно-аддитивные соли, в частности содержащие бензатин, хлорпрокаин, холин, диэтаноламин, этаноламин, т-бутиламин, этилендиамин, меглюмин, прокаин, алюминий, кальций, литий, магний, калий, натрий, аммоний, алкиламин и цинк, когда присутствуют функциональные кислотные группы, такие как группа карбоновой кислоты или фенола. Такие соли могут быть получены с применением подходящих соответствующих оснований.

Фармацевтически приемлемые соли могут быть получены посредством стандартных методов. Например, соединение в форме свободного основания можно растворить в подходящем растворителе, таком как водный или водно-спиртовой раствор, содержащий подходящую кислоту, и затем выделить соль путем упаривания раствора. В другом примере соль можно получить путем проведения реакции свободного основания и кислоты в органическом растворителе.

Таким образом, например, если определенное соединение является основанием, необходимая фармацевтически приемлемая соль может быть получена любым подходящим способом, доступным в данной области техники, например, путем обработки свободного основания неорганической кислотой, такой как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и тому подобные, или органической кислотой, такой как уксусная кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота, миндальная кислота, фумаровая кислота, малоновая кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, гликолевая кислота, салициловая кислота, пиранoзидиловая кислота, такая как глюкуроновая кислота или галактуроновая кислота, альфа-гидроксикислота, такая как лимонная кислота или винная кислота, аминокислота, такая как аспарагиновая кислота или глутаминовая кислота, ароматическая кислота, такая как бензойная кислота или коричная кислота, сульфоновая кислота, такая как п-толуолсульфоновая кислота или этансульфоновая кислота, или тому подобные.

Подобным образом, если определенное соединение является кислотой, желаемая фармацевтически приемлемая соль может быть получена любым подходящим способом, например, путем обработки свободной кислоты неорганическим или органическим основанием, таким как амин (первичный, вторичный или третичный), гидроксидом щелочного металла или гидроксидом щелочно-земельного металла или тому подобными. Иллюстративные примеры подходящих солей включают органические соли, полученные из аминокислот, таких как L-глицин, L-лизин и L-аргинин, аммиака, первичных, вторичных и третичных аминов, и циклических аминов, таких как гидроксиэтилпирролидин, пиперидин, морфолин или пиперазин, и неорганические соли, полученные из натрия, кальция, калия, магния, марганца, железа, меди, цинка, алюминия и лития.

Фармацевтически приемлемая соль различных соединений может быть представлена в виде комплекса. Примеры комплексов включают 8-хлортеофиллиновый комплекс (аналогичный, например, дименгидринату: комплекс дифенгидрамина и 8-хлортеофиллина (1:1); драмамин) и различные комплексы с включением циклодекстрина.

Настоящее изобретение также предполагает включение применения фармацевтически приемлемых дейтерированных соединений или иных нерадиоактивных замещенных соединений. Дейтерирование представляет собой замещение одного, или более, или всех атомов водорода в активной молекулярной группе лекарственного средства изотопом дейтерием. Поскольку дейтерий нетоксичен и нерадиоактивен, и связь углерода с ним примерно в 6-9 раз более стабильна, чем углерод-водородная связь, он может блокировать метаболический участок и увеличивать период полувыведения лекарственного средства, тем самым снижая терапевтическую дозу без ухудшения фармакологической активности лекарственного средства. Таким образом, дейтерирование считают отличным методом модификации.

Фармацевтическая композиция

В другом аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество соединения формулы I, или дейтерированного соединения, или их фармацевтически приемлемой соли, и фармацевтически приемлемого носителя.

В настоящем изобретении «фармацевтическая композиция» относится к композиции, содержащей соединение формулы I и фармацевтически приемлемый носитель, причем указанное соединение и фармацевтически приемлемый носитель присутствуют в композиции в смешанном виде. Данную композицию в общем применяют при лечении субъекта, представляющего собой человека. Однако она может быть также использована для лечения подобных или таких же состояний у других субъектов, представляющих собой животных.

В данном контексте термины «субъект», «субъект, представляющий собой животное» и тому подобное относятся к человекообразным и нечеловекообразным позвоночным, например млекопитающим, таким как нечеловекообразные приматы, животные для спортивного и коммерческого применения, например лошадиные, крупный рогатый скот, свинообразные, овечьи, грызуны, и домашние животные, например, псовые и кошачьи.

Подходящие лекарственные формы, отчасти, зависят от применения или пути введения, например введение может быть осуществлено перорально, трансдермально, трансмукозально, ингаляционно или путем инъекции (парентерально). Такие лекарственные формы обеспечивают достижение соединением клеток-мишеней. Другие факторы хорошо известны в данной области техники и включают такие факторы, как токсичность, также существуют лекарственные формы, которые задерживают проявление эффекта соединения или композиции.

Для изготовления композиции могут быть применены носители или вспомогательные вещества. Носители или вспомогательные вещества могут быть выбраны для улучшения введения соединения. Примеры носителей включают карбонат кальция, фосфат кальция, различные сахара, такие как лактоза, глюкоза или сахароза, или виды крахмала, производные целлюлозы, желатин, растительные масла, полиэтиленгликоли и физиологически совместимые растворители. Примеры физиологически совместимых растворителей включают стерильные растворы с водой для инъекций (ВДИ), физиологический раствор и декстрозу.

Соединения могут быть введены различными путями, включая внутривенный, внутрибрюшинный, подкожный, внутримышечный, пероральный, трансмукозальный, ректальный, трансдермальный или ингаляционный. В некоторых вариантах реализации предпочтительны инъекционная форма или лиофилизированный порошок для инъекций. Для перорального введения, например, соединения могут быть приготовлены в виде традиционных пероральных лекарственных форм, таких как капсулы, таблетки, и жидких препаратов, таких как сиропы, эликсиры и концентрированные капли.

Фармацевтические препараты для перорального применения могут быть получены, например, путем объединения активного соединения с твердыми вспомогательными веществами, необязательного измельчения получаемой смеси и переработки смеси гранул после добавления, при необходимости, подходящих вспомогательных веществ для получения таблеток или ядер драже. Подходящими вспомогательными веществами являются, в частности, наполнители, такие как сахара, включая лактозу, сахарозу, маннитол или сорбитол; производные (preparations) целлюлозы, например, кукурузный крахмал, пшеничный крахмал, рисовый крахмал, картофельный крахмал, желатин, трагакантовая камедь, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, натрий-карбоксиметилцеллюлоза (КМЦ) и/или поливинилпирролидон (ПВП: повидон). При необходимости могут быть добавлены разрыхляющие агенты, такие как сшитый поливинилпирролидон, агар или альгиновая кислота или ее соли, такие как альгинат натрия.

В качестве альтернативы может быть применено введение путем инъекции (парентеральное введение), например, внутримышечно, внутривенно, внутрибрюшинно и/или подкожно. Для инъекции соединения согласно настоящему изобретению готовят в составе стерильных жидких растворов, предпочтительно их готовят в физиологически совместимых буферах или растворах, таких как физиологический раствор, раствор Хэнкса или раствор Рингера. Кроме того, соединения могут быть приготовлены в твердой лекарственной форме и повторно растворены или суспендированы непосредственно перед применением. Также могут быть получены лиофилизированные формы.

Введение также можно проводить трансмукозальным, местным, трансдермальным или ингаляционным способом. Для трансмукозального, местного или трансдермального введения в составе применяют вещества, способствующие проникновению, соответствующие барьеру для проникновения. Такие вещества, способствующие проникновению, общеизвестны в данной области техники и включают, например, для трансмукозального введения, соли желчной кислоты и производные фузидовой кислоты. Кроме того, для улучшения проникновения могут быть применены детергенты. Трансмукозальное введение, например, может быть осуществлено с помощью назальных спреев или суппозиториев (ректальных или вагинальных).

Количество различных предназначенных для введения соединений может быть установлено стандартными методами, учитывая факторы, такие как IC₅₀ соединения, биологический период полувыведения соединения, возраст, размеры и массу субъекта, показание к лечению. Важность этих и других факторов широко известна специалистам в данной области техники. Как правило, доза составляет примерно 0,01 - 50 мг/кг, предпочтительно 0,1 - 20 мг/кг массы субъекта, получающего лечение. Может быть применен многократный прием.

Соединения согласно настоящему изобретению также могут быть применены в комбинации с другими видами терапии для лечения того же заболевания. Такое комбинированное применение включает введение соединений и одного или более других терапевтических агентов в разное время или совместное введение соединения и проведение одного или более других видов терапии. В некоторых вариантах реализации для одного или более соединений согласно настоящему изобретению или других терапевтических агентов, применяемых в комбинации, доза может быть модифицирована, например, путем снижения вводимого количества относительно соединения или терапии, применяемых отдельно, способами, широко известными средним специалистам в данной области техники.

Понятно, что применение в комбинации включает применение с другими видами терапии, лекарственными средствами, медицинскими процедурами и т.д., причем указанная другая терапия или процедура может быть проведена в другое время (например, в течение короткого периода времени, в частности в течение нескольких часов (например, 1, 2, 3, 4-24 часов) или в течение более продолжительного времени (например, 1-2 дня, 2-4 дня, 4-7 дней, 1-4 недель)) по отношению к соединению согласно настоящему изобретению, или в то же самое время, что и соединение согласно настоящему изобретению. Применение в комбинации также включает применение с терапией или медицинской процедурой, которую проводят однократно или нечасто, такой как оперативное вмешательство, совместно с соединением согласно настоящему изобретению, вводимому в течение короткого периода времени или более продолжительного времени до или после другой терапии или процедуры. В некоторых вариантах реализации в настоящем изобретении обеспечивается доставка соединений согласно настоящему изобретению и одного или более других терапевтических агентов, доставляемых через различные пути введения или тем же самым путем введения.

Применение в комбинации с любым путем введения включает доставку соединений согласно настоящему изобретению и одного или более других терапевтических агентов, доставляемых совместно тем же самым путем введения в виде любого состава, включая составы, в которых два соединения химически связаны таким образом, что они при введении обеспечивают их терапевтическую активность. В одном аспекте указанная другая лекарственная терапия может быть проведена совместно с введением с одного или более соединений согласно настоящему изобретению. Применение в комбинации путем совместного введения включает введение совместных составов или составов химически связанных соединений или введение двух или более соединений в отдельных составах с небольшим временным промежутком (например, в течение часа, 2 часов, 3 часов, вплоть до 24 часов), вводимых одним и тем же или различными путями.

Совместное введение отдельных составов включает совместное введение путем доставки через одно устройство, например, один и тот же ингалятор, один и тот же шприц и т.д., или введение из отдельных устройств в течение короткого промежутка времени между ними. Получение совместных составов соединений согласно настоящему изобретению и одной или более дополнительных лекарственных терапий, доставляемых тем же путем, включает приготовление материалов совместно таким образом, что они могут быть введены с помощью одного устройства, включая отдельные соединения, объединенные в одном составе, или соединения, которые модифицируют так, что они являются химически связанными, но все еще проявляют свою биологическую активность. Такие химически связанные соединения могут иметь связь, которая по существу сохраняется in vivo, или связь может разрушаться in vivo с разделением указанных двух активных компонентов.

Способ лечения и его применение

В другом аспекте настоящего изобретения предложено применение соединения формулы I, его дейтерированного аналога или их фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения геморрагического инсульта. Соответственно, в настоящем изобретении предложено соединение формулы I, его дейтерированный аналог или их фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения геморрагического инсульта. Соответственно, в настоящем изобретении предложен способ лечения геморрагического инсульта у пациента, причем указанный способ включает введение пациенту эффективного количество соединения формулы I, его дейтерированного аналога или их фармацевтически приемлемой соли; или фармацевтической композиции, как описано выше.

В некоторых вариантах реализации геморрагический инсульт проявляется как кровоизлияние, вызванное трещиной или разрывом сосуда, в ткани головного мозга.

В некоторых вариантах реализации геморрагический инсульт представляет собой внутримозговое кровоизлияние (ВМК), такое как гипертензивное внутримозговое кровоизлияние. В некоторых вариантах реализации внутримозговое кровоизлияние представляет собой внутримозговое кровоизлияние, вызванное цереброваскулярной аномалией, церебральной амилоидной ангиопатией, аневризмой, болезнью мойя-мойя, церебральным артериитом, первичной или метастатической опухолью, ишемическим инфарктом, оперативным вмешательством или тромболитической или антикоагулянтной терапией.

В некоторых вариантах реализации геморрагический инсульт представляет собой субарахноидальное кровоизлияние (САК), такое как субарахноидальное кровоизлияние, вызванное внутричерепной аневризмой. В других вариантах реализации субарахноидальное кровоизлияние представляет собой субарахноидальное кровоизлияние, вызванное цереброваскулярной аномалией, гипертензивным артериосклерозом, артериитом, атипичной сосудистой сетью pavimentum cerebri, заболеванием соединительной ткани, заболеванием крови, оперативным вмешательством или антикоагулянтной терапией.

В некоторых вариантах реализации геморрагический инсульт представляет собой осложнение, возникшее в результате внутримозгового кровоизлияния и субарахноидального кровоизлияния, включая, но не ограничиваясь ими, осложнение, возникшее в результате внутримозгового кровоизлияния и субарахноидального кровоизлияния, вызванного гипертензией, цереброваскулярной аномалией, ишемическим инфарктом, амилоидной ангиопатией головного мозга, аневризмой, болезнью мойя-мойя, церебральным артериитом, первичной или метастатической опухолью, гипертензивным артериосклерозом, артериитом, атипичной сосудистой сетью pavimentum cerebri, заболеванием соединительной ткани, заболеванием крови, оперативным вмешательством, внутричерепной аневризмой или тромболитической или антикоагулянтной терапией.

В некоторых вариантах реализации геморрагический инсульт вызван оперативным вмешательством. В некоторых вариантах реализации геморрагический инсульт представляет собой внутримозговое кровоизлияние (ВМК), вызванное оперативным вмешательством, субарахноидальное кровоизлияние (САК), вызванное оперативным вмешательством, или осложнение, возникшее в результате обоих из них. В некоторых вариантах реализации оперативное вмешательство относится к оперативным вмешательствам, непосредственно затрагивающим центральную нервную систему. В некоторых вариантах реализации оперативное вмешательство относится к клипированию или эмболизации внутричерепной аневризмы или резекции опухоли головного мозга.

В некоторых вариантах реализации лекарственное средство дополнительно включает дополнительные терапевтические агенты.

В некоторых вариантах реализации субъект/пациент представляет собой человека.

ПРИМЕР

Материалы и методы

Подопытные животные: 112 здоровых самцов-мышей чистой линии C57 (8~10 недель, 20-22 г) были закуплены у Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co. Ltd. Условия кормления: 22°C-26°C, влажность 50%-60%. Мышей разделяли на группы с кормлением стандартным кормом и очищенной водой и давали им адаптированное питание в течение 1 недели.

Реагент и расходные материалы: основные реагенты и расходные материалы: коллагеназа типа VII (Sigma, США), Триол (Guangzhou Cellprotek Pharmaceutical Co., Ltd), набор для определения гемоглобина (реактив Драбкина: бикарбонат натрия 1,0 г, гидрид калия 0,05 г, ферроцианид калия 0,2 г и дистиллированная вода до отметки 1000 мл, хранение при 4°C), энфлюран, хлоральгидрат, костный воск, игла для микроинъекции, буфер TES, хлорид кальция, перфузат, одноразовый шприц, криофлакон и т.д.

Моделирование внутримозгового кровоизлияния и введение препарата: моделирование внутримозгового кровоизлияния: после измерения массы тела мышей им вводили анестезию в виде 5% энфлюрана и поддерживали 2% энфлюраном в смеси с 70% N₂O и 30% O2. Мышей фиксировали на стереотаксическом аппарате в положении лежа на животе и местно дезинфицировали. Кожу животных иссекали для обеспечения доступа для просверливания черепа. Устройством для введения микрообразцов медленно вводили инъекцию 0,3 мкл коллагеназы 0.35UVII. Иглу держали в течение 5 мин, затем медленно вынимали в течение 5 мин и место просверливания черепа закрывали костным клеем. Животным накладывали швы и подвергали стандартной дезинфекции. В группе имитации операции иглу вводили таким же образом, но без введения инъекции. Растворитель или Триол вводили посредством внутрибрюшинной инъекции в концентрации 60 мг/кг через 1 ч после моделирования.

Распределение животных по группам: Мышей C57 разделяли на 5 групп, используя метод случайных чисел, а именно: нормальная контрольная группа (n=12), группа имитации операции (n=12), группа с внутримозговым кровоизлиянием (n=26), группа с внутримозговым кровоизлиянием + внутрибрюшинная инъекция растворителя через 1 ч после моделирования (n=26), и группа с внутримозговым кровоизлиянием + внутрибрюшинная инъекция Триола через 1 ч после моделирования (n=26).

Нейроповеденческая оценка: Неврологическую функцию определяли через 24 часа после моделирования внутримозгового кровоизлияния.

Установление внутримозгового кровоизлияния: хлоральгидрат для внутрибрюшинного введения вводили внутрибрюшинно в виде инъекции для анестезии через 24 часа после моделирования. После транскардиальной перфузии ФСБ, головной мозг немедленно извлекали и вырезали область кровоизлияния в головном мозге. Вырезанную область промывали изотоническим раствором для удаления крови на внешней поверхности и гомогенизировали, полученный супернатант собирали и отправляли на хранение. Содержание гемоглобина в головном мозге измеряли с помощью набора для определения гемоглобина.

Результаты

Количество крови при внутримозговом кровоизлиянии значительно снижено с помощью Триола у мышей C57B в модели внутримозгового кровоизлияния

Через 1 ч после внутричерепного кровоизлияния, индуцированного внутричерепной инъекцией коллагеназы мышам C57B, применяли различные виды лечения. Площадь (объем) кровоизлияния в полушарии головного мозга из-за инъекции коллагеназы была значительно снижена Триолом (фигура 1A) спустя 24 ч. После определения содержания гемоглобина можно видеть, что содержание гемоглобина в полушарии с кровоизлиянием при лечении Триолом, т.е. количество крови при кровоизлиянии, значительно снизилось при сравнении с группой модели внутримозгового кровоизлияния (p <0,01) (фигура 1B). Указанные выше данные демонстрируют, что Триол способен эффективно снижать количество крови при внутримозговом кровоизлиянии.

Нейросенсорная функция значительно улучшена с помощью Триола после внутримозгового кровоизлияния у мышей C57B

Через 24 часа после внутримозгового кровоизлияния, индуцированного инъекцией коллагеназы, все сенсорные функции у мышей C57B были существенно инактивированы. После введения Триола наблюдалась тенденция сокращения времени, необходимого мышам, чтобы выйти из центра круга в любую точку на краю круга. Это указывает на то, что Триол восстанавливает чувство ориентации в пространстве у мышей с внутримозговым кровоизлиянием (фигура 2A). В тесте с клейкой бумагой продолжительность времени нахождения в контакте с клейкой бумагой (p <0,05) и затраты времени для удаления клейкой бумаги (p <0,001) у мышей с внутримозговым кровоизлиянием были значительно уменьшены с помощью Триола. Таким образом, нарушенная внутримозговым кровоизлиянием тактильная чувствительность на поверхности тела мышей была значительно улучшена (фигура 2B, 2C).

Соматосенсорная и моторная функция значительно улучшена с помощью Триола после внутримозгового кровоизлияния у мышей C57B.

Через 24 часа после внутримозгового кровоизлияния, индуцированного инъекцией коллагеназы, соматосенсорная и моторная функция у мышей C57B была явно инактивирована. Однако после введения Триола избегание касания усов у мышей было значительно восстановлено. Это указывает на то, что точные ответные движения на прикосновение у мышей с внутримозговым кровоизлиянием (p <0,001) (фигура 3A) были значительно улучшены с помощью Триола. После лечения с введением Триола симметричность движения конечностей (p <0,01) (фигура 3B) и хождение передними конечностями у мышей (p <0,05) (фигура 3C) были значительно улучшены. Это указывает на, что у мышей функция проприоцепции и моторная контролирующая функция, нарушенные внутримозговым кровоизлиянием, были восстановлены с помощью Триола. В рамках комплексного заключения неврологическая функция с оценкой в баллах у мышей с внутримозговым кровоизлиянием была значительно улучшена с помощью Триола (p <0,001) (фигура 3D).

В настоящем изобретении предложено применение 5α-андрост-3β,5,6β-триола и его аналога, дейтерированного производного, или их фармацевтически приемлемых солей для получения лекарственного средства для лечения геморрагического инсульта. Геморрагический инсульт представляет собой внутримозговое кровоизлияние, или субарахноидальное кровоизлияние, или оба указанных вида кровоизлияний. 17 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 пр.

1. Применение соединения формулы I, его дейтерированного аналога или фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения геморрагического инсульта у субъекта

Формула I,

где R₁ представляет собой H, алкил или терминальный алкенил, содержащий от 1 до 5 атомов углерода, или -CH(CH₃)(CH₂)₃CH(CH₃)₂.

2. Применение по п. 1, где R₁ представляет собой H.

3. Применение по п. 1, где R₁ выбран из группы, состоящей из -CHCH₂CH₃, -CH(CH₃)₂, -CH(CH₂)₃CH₃ и -CH(CH₃)(CH₂)₃CH(CH₃)₂.

4. Применение по любому из пп. 1-3, где указанный геморрагический инсульт представляет собой внутримозговое кровоизлияние (ВМК).

5. Применение по п. 4, где указанное внутримозговое кровоизлияние представляет собой гипертензивное внутримозговое кровоизлияние.

6. Применение по п. 4, где указанное внутримозговое кровоизлияние представляет собой внутримозговое кровоизлияние, вызванное цереброваскулярной аномалией, церебральной амилоидной ангиопатией, аневризмой, болезнью мойя-мойя, церебральным артериитом, первичной или метастатической опухолью, ишемическим инфарктом, оперативным вмешательством или тромболитической или антикоагулянтной терапией.

7. Применение по любому из пп. 1-3, где указанный геморрагический инсульт представляет собой субарахноидальное кровоизлияние.

8. Применение по п. 7, где указанное субарахноидальное кровоизлияние представляет собой субарахноидальное кровоизлияние, вызванное внутричерепной аневризмой.

9. Применение по п. 7, где указанное субарахноидальное кровоизлияние представляет собой субарахноидальное кровоизлияние, вызванное цереброваскулярной аномалией, гипертензивным артериосклерозом, артериитом, атипичной сосудистой сетью pavimentum cerebri, заболеванием соединительной ткани, заболеванием крови, оперативным вмешательством или антикоагулянтной терапией.

10. Применение по любому из пп. 1-3, где указанный геморрагический инсульт представляет собой осложнение, возникшее в результате внутримозгового кровоизлияния (ВМК) и субарахноидального кровоизлияния (САК).

11. Применение по любому из пп. 1-3, где указанный геморрагический инсульт вызван оперативным вмешательством.

12. Применение по п. 11, где указанный геморрагический инсульт, вызванный оперативным вмешательством, представляет собой внутримозговое кровоизлияние, вызванное оперативным вмешательством.

13. Применение по п. 11, где указанный геморрагический инсульт, вызванный оперативным вмешательством, представляет собой субарахноидальное кровоизлияние, вызванное оперативным вмешательством.

14. Применение по п. 11, где указанный геморрагический инсульт, вызванный оперативным вмешательством, представляет собой осложнение, возникшее в результате внутримозгового кровоизлияния, вызванного оперативным вмешательством, и субарахноидального кровоизлияния, вызванного оперативным вмешательством.

15. Применение по п. 11, где указанное оперативное вмешательство представляет собой оперативное вмешательство, непосредственно затрагивающее центральную нервную систему.

16. Применение по п. 15, где указанное оперативное вмешательство представляет собой клипирование или эмболизацию внутричерепной аневризмы или резекцию опухоли головного мозга.

17. Применение по любому из пп. 1-3, где указанный субъект представляет собой человека.

18. Применение по любому из пп. 1-3, где указанный геморрагический инсульт проявляется как кровоизлияние, вызванное трещиной или разрывом сосуда, в ткани головного мозга.