Способ прогнозирования неблагоприятного типа течения облитерирующего атеросклероза артерий нижних конечностей Российский патент 2021 года по МПК G01N33/50 C12Q1/68 A61B5/145 

Изобретение имеет отношение к медицине, конкретно к сердечно-сосудистой хирургии, и может использоваться в диагностике облитерирующего атеросклероза артерий нижних конечностей (ОААНК).

В своем клиническом течении ОААНК достаточно разнообразен [1]: в ряде случаев заболевание протекает бессимптомно, что существенно затрудняет своевременность выявления [2]. Перемежающаяся хромота – наиболее распространенное проявление заболевания, которое можно считать условно благоприятным типом течения. Развитие же критической ишемии нижних конечностей (КИНК) является неблагоприятным предиктором, как для сохранения конечности, так и для жизни пациента. Стремительное развитие КИНК в срок менее 5 лет от начала заболевания стоит относить к неблагоприятному типу течения ОААНК [3]. С точки зрения прогнозирования течения любых заболеваний наиболее актуальными являются генетические исследования. На сегодняшний день в данной области проделан огромный шаг вперед, однако тест-систем для прогнозирования течения ОААНК не существует.

Наиболее близким аналогом изобретения (прототипом) является способ прогнозирования эффективности оперативных методов лечения облитерирующего атеросклероза артерий нижних конечностей (RU 2 613 093 C1), включающий в себя многофакторную систему прогнозирования, в том числе и исследование некоторых генетических маркеров. Однако данным способом оценивается прогноз эффекта от планируемой реконструктивной операции. Прогноз течения самого заболевания, в том числе и на ранних стадиях развития данным способом оценить невозможно.

Еще одним известным способом прогнозирования течения ОААНК (SU 1 236 380 A1) является способ, предложенный Д.И. Бельченко, который основан на сравнении уровня фосфолипидов в крови, взятой из бедренной вены пораженной конечности и вены на руке. Данным способом можно оценить прогноз заболевания, однако, данные о полиморфизме генов не используются.

Печеночная липаза, являющаяся ключевым ферментом, участвующим в метаболизме липопротеидов высокой плотности (ЛПВП), также принимает участие в образовании более атерогенной фракции - липопротеидов низкой плотности (ЛПНП) [4]. В связи с этим, снижение уровня данного фермента может приводить к прогрессированию атеросклеротического процесса.

Исследования полиморфизма -250 G>A гена печеночной липазы (LIPC) показали взаимосвязь с повышенным уровнем инсулина, липопротеидов низкой и очень низкой плотности [5], что является в свою очередь факторами риска развития и прогрессирования атеросклероза [6]. Аллель А данного полиморфизма по данным Valdivielso P. ассоциируется со снижением выработки печеночной липазы, способствуя прогрессированию атеросклероза периферических артерий [7].

Технический результат настоящего изобретения - разработка способа прогнозирования неблагоприятного типа течения облитерирующего атеросклероза артерий нижних конечностей.

В проведенном исследовании участвовало 68 пациентов с ОААНК. В первую группу (n=34) производился набор пациентов с неблагоприятным, стремительно развивающимся течением ОААНК, у которых критическая ишемия развилась в срок до 5 лет от начала заболевания. Вторую группу (n=34) составили пациенты с условно благоприятным течением ОААНК: у пациентов этой группы в течение долгого времени заболевание не прогрессирует и не наступает критическая ишемия. Третью (контрольную) группу (n=8) составили здоровые добровольцы без признаков атеросклероза в любом сосудистом бассейне. Критерием исключения для всех групп являлся сахарный диабет. У всех пациентов проводился забор крови с целью анализа геномной ДНК, выделенной из лейкоцитов цельной крови с помощью реагента «ДНК-экспресс-кровь».

Таблица 1
Частота распределения генотипов LIPC -250 G>A LIPC -250 G>A Исследуемая группа Гомозигота по 1 аллели, % (n) Гетерозигота, % (n) Гомозигота по 2 аллели, % (n) p
ОР (ДИ) Группа I 29,4% (10) 70,6% (24) 0 p=0,004
ОР 2,133
(ДИ 1,214-3,748) Группа II 64,7% (22) 35,3% (12) 0 Контрольная группа 50% (4) 50% (4) 0 p=0,013

При сравнении групп неблагоприятного и условно благоприятного течения ОААНК со здоровыми добровольцами по критерию Хи-квадрат Пирсона с поправкой на правдоподобие выявлены статистически значимые различия наблюдаемых и ожидаемых частот (p=0,013), связь по критерию Крамера V положительная (+0,335).

При оценке групп неблагоприятного и условно благоприятного течения ОААНК по критерию Хи-квадрат Пирсона выявлены статистически значимые различия наблюдаемых и ожидаемых частот (p=0,004), связь по критерию Фи положительная (+0,354).

Гетерозиготный генотип полиморфизма LIPC -250 G>A является фактором риска неблагоприятного типа течения ОААНК. Отношение рисков – 2,133 с 95% доверительным интервалом 1,214-3,748. Риск развития неблагоприятного типа течения ОААНК при гетерозиготном носительстве в 2,133 раза выше, чем при наличии гомозиготы по 1 аллели.

Клиническое наблюдение № 1. 1) Пациент П., 64 года, обратился к сосудистому хирургу с жалобами на боли в правой нижней конечности при ходьбе. Был установлен диагноз: ОААНК: окклюзия артерий бедренно-подколенного сегмента справа, IIБ стадия заболевания. Со слов пациента боли появились 1 месяц назад. В связи с отсутствием критической ишемии (дистанция безболевой ходьбы – 120 м), пациенту было назначено консервативное лечение. При исследовании полиморфизма LIPC -250 G>A был выявлен гомозиготный генотип GG. Спустя год пациент обратился к сосудистому хирургу для повторного осмотра, на котором был определен положительный эффект консервативного лечения, дистанция безболевой ходьбы увеличилась до 200 м.

Клиническое наблюдение № 2. Пациент У., 62 года, обратился к сосудистому хирургу с жалобами на боли в левой нижней конечности при ходьбе. Был установлен диагноз: ОААНК: окклюзия артерий бедренно-подколенного сегмента справа, IIБ стадия заболевания. Назначена адекватная консервативная терапия. При исследовании полиморфизма LIPC -250 G>A был определен гетерозиготный генотип GA. Спустя 6 месяцев пациент повторно обратился к сосудистому хирургу, выставлен диагноз: ОААНК: окклюзия артерий бедренно-подколенного сегмента слева, III стадия заболевания (появились боли покоя). В связи с развившейся КИНК пациент был госпитализирован. Было проведено бедренно-подколенное шунтирование, после чего был благополучно выписан с периферической пульсацией. Спустя 4 месяца пациент снова поступил в отделение сосудистой хирургии с диагнозом: ОААНК: тромбоз бедренно-подколенного шунта на левой нижней конечности, ишемия конечности IIА степени. Пациенту была проведена попытка решунтирования, однако периферическое русло оказалось неудовлетворительным, в связи с чем была выполнена ампутация бедра. В итоге пациент потерял конечность менее чем за год от начала заболевания.

Источники информации

1. Dua A., Lee C. Epidemiology of Peripheral Arterial Disease and Critical Limb Ischemia // Tech Vasc Interv Radiol. 2016. Vol. 19, № 2. P. 91-95. doi: 10.1053/j.tvir.2016.04.001

2. Савельев В.С., Кошкин В.М., Каралкин А.В. Патогенез и консервативное лечение тяжелых стадий облитерирующего атеросклероза артерий нижних конечностей. Москва: МИА; 2010. С. 216.

3. Калинин Р.Е., Сучков И.А., Чобанян А.А. Перспективы прогнозирования течения облитерирующего атеросклероза артерий нижних конечностей // Наука молодых (Eruditio Juvenium). 2019. Т. 7, № 2. С. 274-282. doi:10.23888/HMJ201972274-282.

4. Кожанова Т.В., Неудахин Е.В., Жилина С.С., Мещерякова Т.И., Абрамов А.А., Лукаш Е.Н., Притыко А.Г. Генетическая предрасположенность к развитию атеросклероза // Архив внутренней медицины. 2018. № 6. С. 407-417.

5. Вильмс, Е.А., Долгих, Т.И., Турчанинов, Д.В. Распространенность полиморфизмов генов, ассоциированных с социально-значимыми мультифакториальными заболеваниями, у населения г. Омска // Медицинский альманах. 2012. № 3. С. 169-172.

6. Стародубова Ю.Н., Осипова И.В. Особенности дислипидемии и длительность ревматоидного артрита у женщин // Атеросклероз. 2017. Т. 13, № 3. С. 33.

7. Valdivielso P., Ariza M.J., de la Vega-Roman C. et al., Association of the -250G/A promoter polymorphism of the hepatic lipase gene with the risk of peripheral arterial disease in type 2 diabetic patients // J. Diabet. Complic. 2008. Vol. 22. P. 273–277.

Изобретение относится к области медицины, в частности к сердечно-сосудистой хирургии, и предназначено для прогнозирования развития критической ишемии в срок до 5 лет от начала заболевания облитерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей. Осуществляют генотипирование полиморфизма -250 G>A гена LIPC. При выявлении гетерозиготного носительства прогнозируют повышенный риск развития критической ишемии в срок до 5 лет от начала заболевания облитерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей. Изобретение обеспечивает разработку способа прогнозирования неблагоприятного типа течения облитерирующего атеросклероза артерий нижних конечностей. 1 табл., 2 пр.

Способ прогнозирования развития критической ишемии в срок до 5 лет от начала заболевания облитерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей, включающий генотипирование полиморфизма -250 G>A гена LIPC, отличающийся тем, что при выявлении гетерозиготного носительства прогнозируют повышенный риск развития критической ишемии в срок до 5 лет от начала заболевания облитерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей.