ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИЕ МОДУЛЯТОРЫ ТРАНСПОРТЕРОВ АТФ-СВЯЗЫВАЮЩЕЙ КАССЕТЫ Российский патент 2022 года по МПК C07D405/12 A61K31/443 A61P11/00 

Перекрестная ссылка на родственные заявки

Настоящая заявка испрашивает, согласно Разделу 35 Кодекса законов США, § 119, приоритет предварительной заявки на патент США под номером 60/734506, поданной 8 ноября 2005 года, предварительной заявки на патент США под номером 60/754086, поданной 27 декабря 2005 года, и предварительной заявки на патент США под номером 60/802458, поданной 22 мая 2006 года, полные содержания каждой из которых включены в данный контекст путем ссылки.

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к модуляторам транспортеров АТФ-связывающей кассеты («АВС») или их фрагментов, включая трансмембранный регулятор муковисцидоза («CFTR»), содержащим их композициям и способам их получения. Настоящее изобретение также относится к способам лечения опосредуемых АВС-транспортером заболеваний с применением таких модуляторов.

Предпосылки создания изобретения

АВС-Транспортеры представляют собой семейство мембранных транспортерных белков, которые регулируют транспорт большого ряда фармакологических агентов, потенциально токсичных лекарственных средств и ксенобиотиков, а также анионов. АВС-Транспортеры представляют собой гомологичные мембранные белки, которые связывают и используют клеточный аденозинтрифосфат (АТФ) вследствие их специфических активностей. Некоторые из этих транспортеров раскрыты как резистентные к многочисленным лекарственным средствам белки (подобно как MDR1-P-гликопротеин или резистентный к многочисленным лекарственным средствам белок, MRP1), защищающие злокачественные раковые клетки от химиотерапевтических агентов. На данный момент идентифицированы 48 АВС-транспортеров и распределены по группам на 7 семейств на основании идентичности их последовательности и функции.

АВС-Транспортеры регулируют множество важных физиологических процессов в организме и обеспечивают защиту от вредных соединений из окружающей среды. Вследствие этого, они представляют собой важные потенциальные лекарственные мишени для лечения заболеваний, ассоциированных с дефектами в транспортере, предотвращения транспорта лекарственного средства из клетки-мишени и вмешательства в другие заболевания, в случае которых модуляция активности АВС-транспортера может быть полезной.

Одним членом семейства АВС-транспортеров, обычно ассоциируемым с заболеванием, является цАМФ/АТФ-опосредуемый анионный канал, CFTR. CFTR экспрессируется множеством типов клеток, включая абсорбирующие и секреторные эпителиальные клетки, где он регулирует анионный поток через мембрану, а также активность других ионных каналов и белков. В эпителиальных клетках, нормальное функционирование CFTR является критическим для поддерживания транспорта электролита по всему организму, включая ткань дыхательных путей и пищеварительного тракта. CFTR состоит из приблизительно 1480 аминокислот, которые кодируют белок, составленный из тандемной дупликации трансмембранных доменов, причем каждый содержит шесть трансмембранных спиралей и нуклеотидсвязывающий домен. Два трансмембранных домена связаны большим, полярным, регуляторным (R)-доменом с многочисленными сайтами фосфорилирования, которые регулируют активность канала и клеточную направленную миграцию.

Идентифицирован и секвенирован кодирующий ген CFTR (см.: Gregory R.J. и др., Nature, 347, 382-386 (1990); Rich D.P. и др., Nature, 347, 358-362 (1990); Riordan J.R. и др., Science, 245, 1066-1073 (1989)). Дефект в этом гене вызывает мутации в CFTR, приводящие к муковиcцидозу («СF»), наиболее распространенной смертельной генетической болезни у людей. Муковисцидоз поражает приблизительно одного из каждых 2500 детей в США. В пределах общего населения США, вплоть до 10 миллионов жителей содержат одну копию дефектного гена без явных вредных эффектов. Напротив, индивидуумы с двумя копиями ассоциированного с муковисцидозом гена страдают от ослабляющих и фатальных воздействий муковисцидоза, включая хроническое заболевание легких.

У пациентов с муковисцидозом, мутации в CFTR, эндогенно экпрессируемом в респираторных эпителиальных тканях, приводят к пониженной апикальной секреции анионов, вызывающей дисбаланс в транспорте ионов и жидкостей. Происходящее уменьшение транспорта анионов способствует усиленной аккумуляции слизи в легком и сопутствующим микробным инфекциям, которые, в конце концов, вызывают смерть пациентов с муковисцидозом. В дополнение к респираторному заболеванию, пациенты с муковисцидозом обычно страдают от желудочно-кишечных проблем и панкреатической недостаточности, которая, если остается без лечения, приводит к смерти. Кроме того, большинство из мужчин с муковисцидозом является бесплодным и фертильность уменьшена у женщин с муковисцидозом. В противоположность тяжелым воздействиям двух копий ассоциированного с муковисцидозом гена, индивидуумы с одной копией ассоциированного с муковисцидозом гена проявляют повышенную резистентность к холере и обезвоживанию, проистекающему от диареи, что возможно объясняет относительно высокую частоту гена муковисцидоза у населения.

Секвенирование CFTR-гена СF-хромосом показывает множество вызывающих заболевание мутаций (Cutting G.R. и др., Nature, 346, 366-369 (1990); Dean M. и др., Cell, 61, 863-870 (1990); и Kerem B-S. и др., Science, 245, 1073-1080 (1989); Kerem B-S. и др., Proc. Natl, Acad. Sci., USA, 87, 8447-8451 (1990)). На данный момент, идентифицированы вызывающие >1000 заболеваний мутации в CF-гене (http://www.genet.sickkids.on.ca/cftr/). Наиболее широко распространенной мутацией является делеция фенилаланина в положении 508 аминокислотной последовательности CFTR и обычно упоминается как ΔF508-CFTR. Эта мутация встречается в приблизительно 70% случаях муковисцидоза и связана с тяжелым заболеванием.

Делеция остатка 508 в ΔF508-CFTR препятствует корректной складчатости образующегося белка. Это приводит к неспособности мутантого белка к выходу из эндоплазматического ретикулюма (ЕR) и транспорту в плазматическую мембрану. В результате, количество каналов, имеющихся в мембране, составляет намного меньше, чем наблюдается в клетках, экспрессирующих CFTR дикого типа. В дополнение к сниженному транспорту, мутация приводит к дефектному открытию мембранного канала. Одновременно, уменьшенное количество каналов в мембране и дефектное открытие мембранного канала приводят к сниженному транспорту анионов через эпителиальные ткани, приводящему к дефектному транспорту ионов и жидкостей (Quinton P.M., FASEB J., 4, 2709-2727 (1990)). Исследования показали, однако, что пониженные количества ΔF508-CFTR в мембране являются функциональными, хотя меньше, чем в случае CFTR дикого типа. (Dalemans и др., Nature Lond., 354, 526-528 (1991); Denning и др., см. выше; Pasyk и Foskett, J. Cell. Biochem., 270, 12347-50 (1995)). В дополнение к ΔF508-CFTR, вызывающие другое заболевание мутации в CFTR, которые приводят к дефектной(му) направленной миграции, синтезу и/или открытию мембранного канала, должны быть регулируемы в направлениях выше или ниже для изменения секреции анионов и ослабления прогрессирования и/или тяжести заболевания.

Хотя CFTR транспортирует множество молекул в дополнение к анионам, ясно, что эта роль (транспорт анионов) представляет собой один элемент в важном механизме транспортировки ионов и воды через эпителий. Другие элементы включают эпителиальный Na⁺-канал, ENAC, Na⁺/2Cl^-/K⁺-котранспортер, Na⁺-K⁺-АТФазный насос и К⁺-каналы базолатеральной мембраны, которые ответственны за ввод хлорида в клетку.

Эти элементы действуют вместе для достижения направленного транспорта через эпителий за счет их селективной экспрессии и локализации в клетке. Абсорбция хлорида происходит за счет координированной активности ENaC и CFTR, присутствующих в апикальной мембране, и Na⁺-K⁺-АТФазного насоса и Cl-каналов, экспрессируемых на базолатеральной поверхности клетки. Вторичный активный транспорт хлорида из люминальной области приводит к аккумуляции внутриклеточного хлорида, который затем может пассивно удаляться из клетки через Сl^--каналы, приводя к векторному транспорту. Расположение Na⁺/2Cl^-/K⁺-котранспортер, Na⁺-K⁺-АТФазный насос и К⁺-каналы на базолатеральной поверхности и CFTR в люминальной области координируют секрецию хлорида за счет CFTR в люминальной области. Из-за воды, вероятно, сам он никогда активно не транспортируется, его поток через эпителиальные ткани зависит от очень маленьких трансэпителиальных осмотических градиентов, генерируемых большим потоком натрия и хлорида.

В дополнение к муковисцидозу, модуляция активности CFTR может быть полезной в случае других заболеваний, не непосредственно вызываемых мутациями в CFTR, как например секреторное заболевание и другие, связанные со складкообразованием белка, заболевания, опосредуемые CFTR. Они включают, но не исчерпывающим образом, хроническое обструктивное заболевание легких (COPD), заболевание «сухой глаз» и синдром Шегрена.

COPD характеризуется затрудненностью дыхания, которая прогрессирует и неполностью обратима. Затрудненность дыхания обусловлена гиперсекрецией слизи, эмфиземой и бронхиолитом. Активаторы мутантного или дикого типа CFTR оказывают потенциальное лечение в отношении гиперсекреции слизи и ослабленного мукоцилиарного клиренса, что является распространенным в случае COPD. Конкретно, увеличение секреции анионов за счет CFTR может облегчать транспорт жидкой среды к поверхностной жидкости дыхательных путей для гидратирования слизи и оптимизации вязкости перицилиарной жидкости. Это должно приводить к усиленному мукоцилиарному клиренсу и ослаблению симптомов, связанных с COPD. Заболевание «сухой глаз» характеризуется уменьшением продуцирования водянистой слезной жидкости и анормальных профилей слезного пленочного липида, белка и муцина. Имеется много причин «сухого глаза», некоторые из которых включают возраст, хирургию глаза по Lasik, артрит, медикаментозные лечения, химические/термические ожоги, аллергии, и заболевания, как например муковисцидоз и синдром Шегрена. Увеличение секреции анионов за счет CFTR должно усиливать транспорт жидкости из корнеальных эндотелиальных клеток и секреторных желез, окружающих глаз, для повышения корнеальной гидратации. Это должно способствовать облегчению симптомов, связанных с болезнью «сухой глаз». Синдром Шегрена представляет собой аутоиммунное заболевание, при котором иммунная система воздействует на продуцирующие влагу железы во всем организме, включая глаз, полость рта, кожу, ткань дыхательных путей, печень, влагалище и кишки. Симптомы включают сухой глаз, полость рта и влагалище, а также заболевание легких. Заболевание также ассоциировано с ревматоидным артритом, системной красной волчанкой, системным склерозом и полимиозитом/дерматомиозитом. Полагают, что транспорт дефектного белка является причиной заболевания, варианты лечения которого ограничены. За счет активности модуляторов CFTR можно гидратировать различные органы, пораженные заболеванием, и способствовать ослаблению ассоциированных с ним симптомов.

Как обсуждалось выше, полагают, что делеция остатка 508 в ΔF508-CFTR препятствует корректной складчатости образующегося белка, приводящей к неспособности мутантного белка к выходу из эндоплазматического ретикулюма (ЕR) и транспорту в плазматическую мембрану. В результате, в плазматической мембране присутствуют недостаточные количества зрелого белка и транспорт хлорида в эпителиальных тканях значительно уменьшен. Действительно, показано, что этот клеточный феномен дефектного ER-процессинга АВС-транспортеров за счет ER-механизма является основным базисом не только для CF-заболевания, но и для большого ряда других отдельных и наследственных заболеваний. Два пути, согласно которым ER-механизм может недостаточно функционировать, это либо за счет потери связи с ER-экпортом белков, приводящей к деградации, либо за счет ER-аккумуляции этих дефектных/с ошибочной складчатостью белков [Aridor M. и др., Nature Med., 5(7), 745-751 (1999); Shastry B.S. и др., Neurochem. International, 43, 1-7 (2003); Rutishauer J. и др., Swiss Med. Wkly, 132, pp 211-222 (2002); Morello J.P. и др., TIPS, 21, pp 466-469 (2000); Bross P. и др., Human Mut., 14, pp 186-198 (1999)]. Заболеваниями, связанными с первой категорией недостаточного функционирования ER, являются муковисцидоз (обусловленный ошибочно складчатым ΔF508-CFTR, как указано выше), наследственная эмфизема (обусловленная а1-антитрипсином; не Piz-варианты), наследственный гемохроматоз, дефициты коагуляции-фибринолиза, как например дефицит белка С, наследственная болезнь Квинке типа 1, дефициты процессирования липида, как например семейная гиперхолестеринемия, хиломикронемия типа 1, абеталипопротеинемия, связанное с аккумуляцией лизосом заболевание, как например болезнь клеточных включений/псевдосиндром Гурлера, мукополисахаридозы (обусловленные процессирующими лизосомы ферментами), болезнь Сандхоффа/Тея-Сакса (обусловленная β-гексозаминидазой), синдром Криглера-Найяра типа II (обусловленный UDP-глюкуронилсиаликтрансферазой), полиэндокринопатия/гиперинсулинемия, сахарный диабет (обусловленный рецептором инсулина), карликовость лароновского типа (обусловленная рецептором гормона роста), дефицит милеопероксидазы, первичный гипопаратиреоидизм (обусловленный препаратироидным гормоном), меланома (обусловленная тирозиназой). Заболеваниями, связанными со второй категорией недостаточного функционирования ER, являются гликаноз CDG типа 1, наследственная эмфизема (обусловленная α1-антитрипсином (вариант PiZ)), врожденный гипертиреоидизм, несовершенный остеогенез (обусловленный проколлагеном типа I, II, IV), наследственная гипофибриногенемия (обусловленная фибриногеном), дефицит АСТ (обусловленный α1-антихимотрипсином), несахарный диабет (DI), нейрофизеальный DI (обусловленный гормоном вазопрессином/V2-рецептором), непрогенный DI (обусловленный аквапорином II), синдром Шарко-Мари-Тута (обусловленный периферическим миелиновым белком 22), болезнь Перлизауса-Мерцбахера, нейродегенеративные заболевания, как например болезнь Альцгеймера (обусловленная βАРР и презенилинами), болезнь Паркинсона, боковой амиотрофический склероз, прогрессирующая надъядерная плазия, болезнь Пика, тяжелые полиглутаминовые неврологические нарушения, как например болезнь Гентингтона, относящаяся к спинному мозгу и мозжечку атаксия типа I, спинальная и бульбарная мышечная атрофия, дентаторубальный паллидолуизиан и миотоническая дистрофия, а также губковидные энцефалопатии, как например наследственная болезнь Крейцфельда-Якоба (обусловленная дефектом процессинга прионового белка), болезнь Фабри (обусловленная лизосомальной α-галактозидазой А) и синдром Страусслера-Шейнкера (обусловленный дефектом процессинга Prp).

В дополнение к регуляции в направлении выше активности CFTR, уменьшение секреции анионов модуляторами CFTR может быть полезным для лечения секреторных диарей, в случае которых эпителиальный транспорт воды резко увеличивается как результат усиливающего секрецию активированного транспорта хлорида. Механизм вовлекает в патологический процесс повышение цАМФ и стимулирование CFTR.

Хотя имеются многочисленные случаи диареи, основные последствия диарейных заболеваний, проистекающих от избыточного транспорта хлорида, являются общими для всех и включают обезвоживание, ацидоз, ухудшенное развитие и смерть.

Острые и хронические диареи представляют собой основную медицинскую проблему во многих областях мира. Диарея представляет собой как важный фактор в нарушении питания, так и основную причину смерти (5000000 смертей в год) у детей в возрасте менее чем пять лет.

Секреторные диареи также представляют собой опасное состояние у пациентов с синдромом приобретенного иммунодефицита (СПИД) и с хроническим воспалительным кишечным заболеванием (IBD). 16 миллионов путешественников в развивающиеся страны из индустриализованных стран каждый год обнаруживают диарею, с тяжестью и числом случаев диареи, различающимися в зависимости от страны и области путешествия.

Диарея у сельских и домашних животных, таких как коровы, свиньи и лошади, овцы, козы, кошки и собаки, также известная как чистки, является главной причиной смерти этих животных. Диарея может происходить от какого-либо основного изменения, такого как отъем (от матки) или физическое передвижение, а также в ответ на множество бактериальных или вирусных инфекций и обычно встречается в первые несколько часов жизни животного.

Наиболее распространенной, вызывающей диарею бактерией является энтеротоксигенная Е-coli (ETEC), имеющая антиген пилуса К99. Распространенные вирусные причины диареи включают ротавирус и коронавирус. Другие инфекционные агенты включают, среди прочих, cryptosporidium, giardia lamblia и сальмонеллу.

Симптомы ротавирусной инфекции включают выделение водянистых экскрементов, обезвоживание и слабость. Коронавирус вызывает более тяжелое расстройство у новорожденных животных и имеет более высокий коэффициент смертности, чем ротавирусная инфекция. Часто, однако, молодое животное может быть инфицировано одновременно более чем одним вирусом или комбинацией вирусных и бактериальных микроорганизмов. Эта «драматичность» повышает тяжесть заболевания.

Соответственно, существует потребность в модуляторах активности АВС-транспортера и включающих их композициях, которые могут быть использованы для модуляции активности АВС-транспортера в клеточной мембране млекопитающего.

Существует потребность в способах лечения опосредуемых АВС-транспортером заболеваний с применением таких модуляторов активности АВС-транспортера.

Существует потребность в способах модуляции активности АВС-транспортера в ex vivo клеточной мембране млекопитающего.

Существует потребность в модуляторах активности CFTR, которые могут быть использованы для модуляции активности CFTR в клеточной мембране млекопитающего.

Существует потребность в способах лечения опосредуемых CFTR заболеваний с применением таких модуляторов активности CFTR.

Существует потребность в способах модуляции активности CFTR в ex vivo клеточной мембране млекопитающего.

Краткое изложение сущности изобретения

В настоящее время найдено, что соединения согласно настоящему изобретению и cодержащие их фармацевтически приемлемые композиции пригодны в качестве модуляторов активности АВС-транспортера. Эти соединения отвечают общей формуле (I):

или их фармацевтически приемлемые соли, где R₁, R₂, R₃, R’₃, R₄ и n имеют указанные в данном описании значения.

Эти соединения и содержащие их фармацевтически приемлемые композиции пригодны для лечения или ослабления тяжести множества заболеваний, нарушений или состояний, включая, но не исчерпывающим образом, муковисцидоз, наследственную эмфизему, наследственный гемохроматоз, дефициты коагуляции-фибринолиза, как например дефицит белка С, наследственную болезнь Квинке типа 1, дефициты процессирования липида, как например семейная гиперхолестеринемия, хиломикронемию типа 1, абеталипопротеинемию, связанные с аккумуляцией лизосом заболевания, как например болезнь клеточных включений/псевдосиндром Гурлера, мукополисахаридозы, болезнь Сандхоффа/Тея-Сакса, синдром Криглера-Найяра типа II, полиэндокринопатию/гиперинсулинемию, сахарный диабет, карликовость лароновского типа, дефицит милеопероксидазы, первичный гипопаратиреоидизм, меланому, гликаноз CDG типа 1, наследственную эмфизему, врожденный гипертиреоидизм, несовершенный остеогенез, наследственную гипофибриногенемию, дефицит АСТ, несахарный диабет (DI), нейрофизеальный DI, непрогенный DI, синдром Шарко-Мари-Тута, болезнь Перлизауса-Мерцбахера, нейродегенеративные заболевания как, например, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, боковой амиотрофический склероз, прогрессирующая надъядерная плазия, болезнь Пика, тяжелые полиглутаминовые неврологические нарушения как, например, болезнь Гентингтона, относящаяся к спинному мозгу и мозжечку атаксия типа I, спинальная и бульбарная мышечная атрофия, дентаторубальный паллидолуизиан и миотоническая дистрофия, а также губковидные энцефалопатии, как например наследственная болезнь Крейцфельда-Якоба, болезнь Фабри, синдром Страусслера-Шейнкера, COPD, болезнь «сухой глаз» и синдром Шегрена.

Подробное описание изобретения

Определения

Как используемые в данном контексте, применяют следующие определения, если не указано ничего другого.

Термин «АВС-транспортер», как используется в данном контексте, означает АВС-транспортерный белок или его фрагмент, включающий по меньшей мере один связывающий домен, где вышеуказанный белок или его фрагмент находятся in vivo или in vitro. Термин «связывающий домен», как используется в данном контексте, означает домен АВС-транспортера, который может связываться с модулятором; см., например, Hwang T.C. и др., J. Gen. Physiol., 111(3), 477-490 (1998).

Термин «CFTR», как используется в данном контексте, означает трансмембранный в отношении проводимости регулятор муковисцидоза, или его мутацию, обладающую активностью регулятора, включая, но не исчерпывающим образом, ΔF508 CFTR и G551D CFTR (см., например, http://www.genet.sickkids.on.ca/cftr/, в отношении мутаций CFTR).

Термин «модулирующий», как используется в данном контексте, означает увеличение или уменьшение, например, активности, в измеримом значении. Соединения, которые модулируют активность АВС-транспортера, как например активность CFTR, путем повышения активности АВС-транспортера, например, CFTR-анионного канала, называют агонистами. Соединения, которые модулируют активность АВС-транспортера, как например активность CFTR, путем уменьшения активности АВС-транспортера, например, CFTR-анионного канала, называют антагонистами. Агонист взаимодействует с АВС-транспортером, как например CFTR-анионный канал, повышая способность рецептора к трансдукции внутриклеточного сигнала в ответ на связывание эндогенного лиганда. Антагонист взаимодействует с АВС-транспортером, как например CFTR, и конкурирует с эндогенным лигандом (эндогенными лигандами) или субстратом (субстратами) в сайте (сайтах) связывания рецептора, уменьшая способность рецептора к трансдукции внутриклеточного сигнала в ответ на связывание эндогенного лиганда.

Фраза «лечение или ослабление тяжести опосредуемого АВС-транспортером заболевания» относится как к лечениям заболеваний, вызываемых непосредственно активностями АВС-транспортера и/или CFTR, так и облегчению симптомов заболеваний, не вызываемых непосредственно активностями АВС-транспортера и/или CFTR-анионного канала. Примеры заболеваний, симптомы которых могут находиться под влиянием активности АВС-транспортера и/или активности CFTR, включают, но не исчерпывающим образом, муковисцидоз, наследственную эмфизему, наследственный гемохроматоз, дефициты коагуляции-фибринолиза, как например дефицит белка С, наследственную болезнь Квинке типа 1, дефициты процессирования липида, как например семейная гиперхолестеринемия, хиломикронемию типа 1, абеталипопротеинемию, связанные с аккумуляцией лизосом заболевания, как например болезнь клеточных включений/псевдосиндром Гурлера, мукополисахаридозы, болезнь Сандхоффа/Тея-Сакса, синдром Криглера-Найяра типа II, полиэндокринопатию/гиперинсулинемию, сахарный диабет, карликовость лароновского типа, дефицит милеопероксидазы, первичный гипопаратиреоидизм, меланому, гликаноз CDG типа 1, наследственную эмфизему, врожденный гипертиреоидизм, несовершенный остеогенез, наследственную гипофибриногенемию, дефицит АСТ, несахарный диабет (DI), нейрофизеальный DI, непрогенный DI, синдром Шарко-Мари-Тута, болезнь Перлизауса-Мерцбахера, нейродегенеративные заболевания, как например болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, боковой амиотрофический склероз, прогрессирующую надъядерную плазию, болезнь Пика, тяжелые полиглутаминовые неврологические нарушения, как например болезнь Гентингтона, относящуюся к спинному мозгу и мозжечку атаксию типа I, спинальную и бульбарную мышечную атрофию, дентаторубальный паллидолуизиан и миотоническую дистрофию, а также губковидные энцефалопатии, как например наследственная болезнь Крейцфельда-Якоба, болезнь Фабри, синдром Страусслера-Шейнкера, COPD, болезнь «сухой глаз» и синдром Шегрена.

Для целей настоящего изобретения, химические элементы идентифицированы в соответствии с периодической таблицей элементов, версия CAS, Handbook of Chemistry and Physics, 75-е издание. Дополнительно, общие принципы органической химии описаны в руководствах «Organic Chemistry», Thomas Sorrell, University Science Books, Sausolito, 1999; и «March’s Advanced Organic Chemistry», 5-е издание, ред. Smith M.B. и March J.; John Wiley and Sons, New York, 2001, полные содержания которых включены в данный контекст путем ссылки.

Как используется в данном контексте, термин «алифатический радикал» включает термины алкил, алкенил, алкинил, каждый из которых является необязательно замещенным, как поясняется ниже.

Как используется в данном контексте, термин «алкильная группа» относится к насыщенной алифатической углеводородной группе, содержащей 1-8 (например, 1-6 или 1-4) атомов углерода. Алкильная группа может быть линейной или разветвленной. Примеры алкильных групп включают, но не исчерпывающим образом, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, н-гептил или 2-этилгексил. Алкильная группа может быть замещена (то есть необязательно замещена) одним или более заместителями, такими как галоген, циклоалифатический радикал [например, циклоалкил или циклоалкенил], гетероциклоалифатический радикал [например, гетероциклоалкил или гетероциклоалкенил], арил, гетероарил, алкоксигруппа, ароил, гетероароил, ацил [например, (алифатический радикал)карбонил, (циклоалифатический радикал)карбонил или (гетероциклоалифатический радикал)карбонил], нитрогруппа, цианогруппа, амидная группа [например, (циклоалкилалкил)карбониламино-, арилкарбониламино-, аралкилкарбониламино-, (гетероциклоалкил)карбониламино-, (гетероциклоалкилалкил)карбониламино-, гетероарилкарбониламино-, гетероаралкилкарбониламиногруппа], аминогруппа [например, (алифатический радикал)аминогруппа, (циклоалифатический радикал)аминогруппа или (гетероциклоалифатический радикал)аминогруппа], сульфонил [например, (алифатический радикал)сульфонил, сульфинил, сульфанил, сульфоксигруппа, карбамидная группа, тиокарбамидная группа, сульфамоил, сульфамид, оксогруппа, карбоксил, карбамоил, (циклоалифатический радикал)оксигруппа, (гетероциклоалифатический радикал)оксигруппа, арилоксигруппа, гетероарилоксигруппа, аралкилоксигруппа, гетероарилалкоксигруппа, алкоксикарбонил, алкилкарбонилоксигруппа или гидроксил. Не исчерпывающим образом, некоторые примеры замещенных алкилов включают карбоксиалкил (такой как НООС-алкил, алкоксикарбонилалкил и алкилкарбонилоксиалкил), цианоалкил, гидроксиалкил, алкоксиалкил, ацилалкил, гидроксиалкил, аралкил, (алкоксиарил)алкил, (сульфониламино)алкил (такой как (алкилсульфониламино)алкил), аминоалкил, амидоалкил, (циклоалифатический радикал)алкил, цианоалкил или галогеналкил.

Как используется в данном контексте, термин «алкенильная группа» относится к алифатической углеродной группе, которая содержит 2-8 (например, 2-6 или 2-4) атомов углерода и, по меньшей мере, одну двойную связь. Подобно алкильной группе, алкенильная группа может быть с линейной или разветвленной цепью. Примеры алкенильной группы включают, но не исчерпывающим образом, аллил, изопренил, 2-бутенил и 2-гексенил. Алкенильная группа может быть необязательно замещенной одним или более заместителями, такими как галоген, циклоалифатическая группа, гетероциклоалифатическая группа, арил, гетероарил, алкоксил, ароил, гетероароил, ацил [например, (циклоалифатический радикал)карбонил или (гетероциклоалифатический радикал)карбонил], нитрогруппа, цианогруппа, ацил [например, (алифатический радикал)карбонил, (циклоалифатический радикал)карбонил, арилкарбонил, (гетероциклоалифатический радикал)карбонил или гетероарилкарбонил], амидогруппа [например, (циклоалкилалкил)карбониламиногруппа, арилкарбониламиногруппа, аралкилкарбониламиногруппа, (гетероциклоалкил)карбониламиногруппа, (гетероциклоалкилалкил)карбониламиногруппа, гетероарилкарбониламиногруппа, гетероаралкилкарбониламиногруппа, алкиламинокарбонил, циклоалкиламинокарбонил, гетероциклоалкиламинокарбонил, ариламинокарбонил или гетероариламинокарбонил], аминогруппа [например, (алифатический радикал)аминогруппа или (алифатический радикал)сульфониламиногруппа], сульфонил [например, алкилсульфонил, (циклоалифатический радикал)сульфонил или арилсульфонил], сульфинил, сульфанил, сульфоксил, карбамидная группа, тиокарбамидная группа, сульфамоил, сульфамид, оксогруппа, карбоксил, карбамоил, (циклоалифатический радикал)оксигруппа, (гетероциклоалифатический радикал)оксигруппа, арилоксигруппа, гетероарилоксигруппа, аралкилоксигруппа, гетероарилалкоксил, алкоксикарбонил, алкилкарбонилоксигруппа или гидроксил.

Как используется в данном контексте, термин «алкинильная группа» относится к алифатической углеродной группе, которая содержит 2-8 (например, 2-6 или 2-4) атомов углерода и имеет, по меньшей мере, одну тройную связь. Алкинильная группа может быть с линейной или разветвленной цепью. Примеры алкинильной группы включают, но не исчерпывающим образом, пропаргил или бутинил. Алкинильная группа может быть необязательно замещенной одним или более заместителями, такими как ароил, гетероароил, алкоксигруппа, циклоалкилоксигруппа, гетероциклоалкилоксигруппа, арилоксигруппа, гетероарилоксигруппа, аралкилоксигруппа, нитрогруппа, карбоксил, цианогруппа, галоген, гидроксил, сульфогруппа, меркаптогруппа, сульфанил [например, (алифатический радикал)сульфанил или (циклоалифатический радикал)сульфанил], сульфинил [например, (алифатический радикал)сульфинил или (циклоалифатический радикал)сульфинил], сульфонил [например, (алифатический радикал)сульфонил, (алифатический радикал)аминосульфонил или (циклоалифатический радикал)сульфонил], амидогруппа [например, аминокарбонил, алкиламинокарбонил, алкилкарбониламиногруппа, циклоалкиламинокарбонил, гетероциклоалкиламинокарбонил, циклоалкилкарбониламиногруппа, ариламинокарбонил, арилкарбониламиногруппа, аралкилкарбониламиногруппа, (гетероциклоалкил)карбониламиногруппа, (циклоалкилалкил)карбониламиногруппа, гетероаралкилкарбониламиногруппа, гетероарилкарбониламиногруппа или гетероариламинокарбонил], карбамидная группа, тиокарбамидная группа, сульфамоил, сульфамидогруппа, алкоксикарбонил, алкилкарбонилоксигруппа, циклоалифатическая группа, гетероциклоалифатическая группа, арил, гетероарил, ацил [например, (циклоалифатический радикал)карбонил или (гетероциклоалифатический радикал)карбонил], аминогруппа [например, (алифатический радикал)аминогруппа], сульфоксигруппа, оксогруппа, карбоксил, карбамоил, (циклоалифатический радикал)оксигруппа, (гетероциклоалифатический радикал)оксигруппа или (гетероарил)алкоксил.

Как используется в данном контексте, термин «амидогруппа» включает как «аминокарбонил», так и «карбониламиногруппу». Эти термины, когда используются отдельно или в сочетании с другой группой, относятся к амидогруппе, такой как N(R^XR^Y)-C(O)- или R^YC(O)-N(R^X)-, когда используются в конце группы, и -С(О)-N(R^X)- или -N(R^X)-С(О)-, когда используются внутри группы, где R^X и R^Y имеют значения, как описано ниже. Примеры амидогрупп включают алкиламидогруппу (такую как алкилкарбониламиногруппа или алкилкарбониламиногруппа), (гетероциклоалифатический радикал)амидогруппу, (гетероаралкил)амидогруппу, (гетероарил)амидогруппу, (гетероциклоалкил)алкиламидогруппу, ариламидогруппу, аралкиламидогруппу, (циклоалкил)алкиламидогруппу или циклоалкиламидогруппу.

Как используется в данном контексте, термин «аминогруппа» относится к -NR^XR^Y, где каждый из R^X и R^Y независимо означает водород, алкил, циклоалифатическую группу, (циклоалифатический радикал)алифатическую группу, арил, аралифатическую группу, гетероциклоалифатическую группу, (гетероциклоалифатический радикал)алифатическую группу, гетероарил, карбоксил, сульфанил, сульфинил, сульфонил, (алифатический радикал)карбонил, (циклоалифатический радикал)карбонил, ((циклоалифатический радикал)алифатический радикал)карбонил, арилкарбонил, (аралифатический радикал)карбонил, (гетероциклоалифатический радикал)карбонил, ((гетероциклоалифатический радикал)алифатический радикал)карбонил, (гетероарил)карбонил или (гетероаралифатический радикал)карбонил, каждый из которых имеет значение, указанное в данном контексте, и является необязательно замещенным. Примеры аминогрупп включают алкиламино-, диалкиламино- или ариламиногруппу. Когда термин «аминогруппа» не относится к концевой группе (например, алкилкарбониламиногруппа), то он означает NR^X-. R^X имеет вышеуказанное значение.

Как используется в данном контексте, термин «арильная группа», используемый отдельно или как часть более крупного остатка, как в терминах «аралкил», «аралкоксил» или «арилоксиалкил», относится к моноциклической (например, фенил), бициклической (например, инденил, нафталинил, тетрагидронафтил, тетрагидроинденил) и трициклической (например, флуоренил, тетрагидрофлуоренил или тетрагидроантраценил, антраценил) системам, в которых моноциклическая система является ароматической или, по меньшей мере, один из циклов в бициклической или трициклической системе является ароматическим. Бициклические и трициклические системы включают бензоконденсированные 2-3-членные карбоциклы. Например, бензоконденсированная группа включает фенил, конденсированный с двумя или более С_4-8-карбоциклическими остатками. Арил необязательно замещен одним или более заместителями, включая алифатическую группу [например, алкил, алкенил или алкинил], циклоалифатическую группу, (циклоалифатический радикал)алифатическую группу, гетероциклоалифатическую группу, (гетероциклоалифатический радикал)алифатическую группу, арил, гетероарил, алкоксил, (циклоалифатический радикал)оксигруппу, (гетероциклоалифатический радикал)оксигруппу, арилоксигруппу, гетероарилоксигруппу, (аралифатический радикал)оксигруппу, (гетероаралифатический радикал)оксигруппу, ароил, гетероароил, аминогруппу, оксогруппу (в неароматическом карбоцикле бензоконденсированного бициклического или трициклического арила), нитрогруппу, карбоксил, амидогруппу, ацил [например, (алифатический радикал)карбонил, (циклоалифатический радикал)карбонил, ((циклоалифатический радикал)алифатический радикал)карбонил, (аралифатический радикал)карбонил, (гетероциклоалифатический радикал)карбонил, ((гетероциклоалифатический радикал)алифатический радикал)карбонил или (гетероаралифатический радикал)карбонил], сульфонил [например, (алифатический радикал)сульфонил или аминосульфонил], сульфинил [например, (алифатический радикал)сульфинил или (циклоалифатический радикал)сульфинил], сульфанил [например, (алифатический радикал)сульфанил], цианогруппу, галоген, гидроксил, меркаптогруппу, сульфоксил, карбамидную группу, тиокарбамидную группу, сульфамоил, сульфамидогруппу или карбамоил. Альтернативно, арил может быть незамещенным.

Не ограничивающие объем изобретения примеры замещенных арилов включают галогенарил [например, моно-, ди- (такой как п,м-дигалогенарил) и (тригалоген)арил], (карбокси)арил [например, (алкоксикарбонил)арил, ((аралкил)карбонилокси)арил и (алкоксикарбонил)арил], (амидо)арил [например, (аминокарбонил)арил, (((алкиламино)алкил)аминокарбонил)арил, (алкилкарбонил)аминоарил, (ариламинокарбонил)арил и (((гетероарил)амино)карбонил)арил], аминоарил [например, ((алкилсульфонил)амино)арил или ((диалкил)амино)арил], (цианоалкил)арил, (алкокси)арил, (сульфамоил)арил [например, (аминосульфонил)арил], (алкилсульфонил)арил, (циано)арил, (гидроксиалкил)арил, ((алкокси)алкил)арил, (гидрокси)арил, ((карбокси)алкил)арил, (((диалкил)амино)алкил)арил, (нитроалкил)арил, (((алкилсульфонил)амино)алкил)арил, ((гетероциклоалифатический радикал)карбонил)арил, ((алкилсульфонил)алкил)арил, (цианоалкил)арил, (гидроксиалкил)арил, (алкилкарбонил)арил, алкиларил, (тригалогеналкил)арил, п-амино-м-алкоксикарбониларил, п-амино-м-цианоарил, п-галоген-м-аминоарил или (м-(гетероциклоалифатический радикал)-о-(алкил))арил.

Как используется в данном контексте, термин «аралифатическая группа», такая как «аралкильная группа», относится к алифатической группе (например, С_1-4-алкильная группа), которая замещена арильной группой. Термины «алифатический», «алкил» и «арил» имеют значения, как описано в данном контексте. Примером аралифатической группы, такой как аралкильная группа, является бензил.

Как используется в данном контексте, термин «аралкильная группа» относится к алкильной группе (например, С_1-4-алкильная группа), которая замещена арильной группой. Как термин «алкил», так и термин «арил» имеют вышеуказанные значения. Примером аралкильной группы является бензил. Аралкил необязательно замещен одним или более заместителями, такими как алифатическая группа [например, алкил, алкенил или алкинил, включая карбоксиалкил, гидроксиалкил или галогеналкил, такой как трифторметил], циклоалифатическая группа [например, циклоалкил или циклоалкенил], (циклоалкил)алкил, гетероциклоалкил, (гетероциклоалкил)алкил, арил, гетероарил, алкоксил, циклоалкилоксигруппа, гетероциклоалкилоксигруппа, арилоксигруппа, гетероарилоксигруппа, аралкилоксигруппа, гетероаралкилоксигруппа, ароил, гетероароил, нитрогруппа, карбоксил, алкоксикарбонил, алкилкарбонилоксигруппа, амидогруппа [например, аминокарбонил, алкилкарбониламиногруппа, циклоалкилкарбониламиногруппа, (циклоалкилалкил)карбониламиногруппа, арилкарбониламиногруппа, аралкилкарбониламиногруппа, (гетероциклоалкил)карбониламиногруппа, (гетероциклоалкилалкил)карбониламиногруппа, гетероарилкарбониламиногруппа или гетероаралкилкарбониламиногруппа], цианогруппа, галоген, гидроксил, ацил, меркаптогруппа, алкилсульфанил, сульфоксил, карбамидная группа, тиокарбамидная группа, сульфамоил, сульфамидогруппа, оксогруппа или карбамоил.

Как используется в данном контексте, термин «бициклическая система» включает 8-12-членные (например, 9, 10 или 11) структуры, которые образуют два цикла, где эти два цикла имеют, по меньшей мере, один общий атом (например, 2 общих атома). Бициклические системы включают бициклоалифатические группы (например, бициклоалкил или бициклоалкенил), бициклогетероалифатические группы, бициклические арилы и бициклические гетероарилы.

Как используется в данном контексте, термин «циклоалифатическая группа» относится к терминам «циклоалкильная группа» и «циклоалкенильная группа», каждая из которых необязательно замещена, как описано ниже.

Как используется в данном контексте, термин «циклоалкильная группа» относится к насыщенному карбоциклическому, моно- или бициклическому циклу (конденсированному циклу или циклу с мостиковой связью) с 3-10 (например, 5-10) атомами углерода. Примеры циклоалкильных групп включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, адамантил, норборнил, кубил, октагидроинденил, декагидронафтил, бицикло[3,2,1]октил, бицикло[2,2,2]октил, бицикло[3,3,1]нонил, бицикло[3,3,2]децил, бицикло[2,2,2]октил, адамантил, азациклоалкил или ((аминокарбонил)циклоалкил)циклоалкил. Термин «циклоалкенильная группа», как используется в данном контексте, относится к неароматическому карбоциклу с 3-10 (например, 4-8) атомами углерода, имеющему, одну или более двойных связей. Примеры циклоалкенильных групп включают циклопентенил, 1,4-циклогексадиенил, циклогептенил, циклооктенил, гексагидроинденил, октагидронафтил, циклогексенил, циклопентенил, бицикло[2,2,2]октенил или бицикло[3,3,1]ноненил. Циклоалкильная или циклоалкенильная группа может быть необязательно замещена одним или более заместителями, такими как алифатическая группа [например, алкил, алкенил или алкинил], циклоалифатическая группа, (циклоалифатический радикал)алифатическая группа, гетероциклоалифатическая группа, (гетероциклоалифатический радикал)алифатическая группа, арил, гетероарил, алкоксил, (циклоалифатический радикал)оксигруппа, (гетероциклоалифатический радикал)оксигруппа, арилоксигруппа, гетероарилоксигруппа, (аралифатический радикал)оксигруппа, (гетероаралифатический радикал)оксигруппа, ароил, гетероароил, аминогруппа, амидогруппа [например, (алифатический радикал)карбониламиногруппа, (циклоалифатический радикал)-карбониламиногруппа, ((циклоалифатический радикал)алифатический радикал)карбониламиногруппа, (арил)карбониламиногруппа, (аралифатический радикал)карбониламиногруппа, (гетероциклоалифатический радикал)карбониламиногруппа, ((гетероциклоалифатический радикал)алифатический радикал)карбониламиногруппа, (гетероарил)карбониламиногруппа или (гетероаралифатический радикал)карбониламиногруппа], нитрогруппа, карбоксил [например, НООС-, алкоксикарбонил или алкилкарбонилоксигруппа], ацил [например, (циклоалифатический радикал)карбонил, ((циклоалифатический радикал)алифатический радикал)карбонил, (аралифатический радикал)карбонил, (гетероциклоалифатический радикал)карбонил, ((гетероциклоалифатический радикал)алифатический радикал)карбонил или (гетероаралифатический радикал)карбонил], цианогруппа, галоген, гидроксил, меркаптогруппа, сульфонил [например, алкилсульфонил и арилсульфонил], сульфинил [например, алкилсульфинил], сульфанил [например, алкилсульфанил], сульфоксил, карбамидная группа, тиокарбамидная группа, сульфамоил, сульфамидогруппа, оксогруппа или карбамоил.

Как используется в данном контексте, термин «циклический остаток» включает циклоалифатическую группу, гетероциклоалифатическую группу, арил или гетероарил, каждый из которых имеет вышеуказанное значение.

Как используется в данном контексте, термин «гетероциклоалифатический радикал» относится к гетероциклоалкильной группе и гетероциклоалкенильной группе, каждая из которых необязательно замещена, как описано ниже.

Как используется в данном контексте, термин «гетероциклоалкильная группа» относится к 3-10-членной, моно- или бициклической (конденсированной или мостиковой) (например, 5-10-членной моно- или бициклической) насыщенной циклической структуре, в которой один или более атомов цикла являются гетероатомами (например, N, O, S или их комбинации). Примеры гетероциклоалкильной группы включают пиперидил, пиперазил, тетрагидропиранил, тетрагидрофурил, 1,4-диоксоланил, 1,4-дитианил, 1,3-диоксоланил, оксазолидил, изоксазолидил, морфолинил, тиоморфолил, октагидробензофурил, октагидрохроменил, октагидротиохроменил, октагидроиндолил, октагидропиридинил, декагидрохинолинил, октагидробензо[b]тиофенил, 2-оксабицикло[2,2,2]октил, 1-азабицикло[2,2,2]октил, 3-азабицикло[3,2,1]октил и 2,6-диоксатрицикло[3,3,1,0^3,7]нонил. Моноциклическая гетероциклоалкильная группа может быть конденсирована с фенильным остатком, таким как тетрагидроизохинолин. Термин «гетероциклоалкенильная группа», как используется в данном контексте, относится к моно- или бициклической (например, 5-10-членной моно- или бициклической) неароматической циклической структуре, имеющей одну или более двойных связей, и где один или более атомов цикла являются гетероатомами (например, N, O или S). Моноциклические и бициклогетероалифатические группы нумеруют в соответствии со стандартной химической номенклатурой.

Гетероциклоалкильная или гетероциклоалкенильная группа может быть необязательно замещена одним или более заместителями, такими как алифатическая группа [например, алкил, алкенил или алкинил], циклоалифатическая группа, (циклоалифатический радикал)алифатическая группа, гетероциклоалифатическая группа, (гетероциклоалифатический радикал)алифатическая группа, арил, гетероарил, алкоксил, (циклоалифатический радикал)оксигруппа, (гетероциклоалифатический радикал)оксигруппа, арилоксигруппа, гетероарилоксигруппа, (аралифатический радикал)оксигруппа, (гетероаралифатический радикал)оксигруппа, ароил, гетероароил, аминогруппа, амидогруппа [например, (алифатический радикал)карбониламиногруппа, (циклоалифатический радикал)карбониламиногруппа, ((циклоалифатический радикал)алифатический радикал)карбониламиногруппа, (арил)карбониламиногруппа, (аралифатический радикал)карбониламиногруппа, (гетероциклоалифатический радикал)карбониламиногруппа, ((гетероциклоалифатический радикал)алифатический радикал)карбониламиногруппа, (гетероарил)карбониламиногруппа или (гетероаралифатический радикал)карбониламиногруппа], нитрогруппа, карбоксил [например, НООС-, алкоксикарбонил или алкилкарбонилоксигруппа], ацил [например, (циклоалифатический радикал)карбонил, ((циклоалифатический радикал)алифатический радикал)карбонил, (аралифатический радикал)карбонил, (гетероциклоалифатический радикал)карбонил, ((гетероциклоалифатический радикал)алифатический радикал)карбонил или (гетероаралифатический радикал)карбонил], нитрогруппа, цианогруппа, галоген, гидроксил, меркаптогруппа, сульфонил [например, алкилсульфонил или арилсульфонил], сульфинил [например, алкилсульфинил], сульфанил [например, алкилсульфанил], сульфоксил, карбамидная группа, тиокарбамидная группа, сульфамоил, сульфамидогруппа, оксогруппа или карбамоил.

Термин «гетероарильная группа», как используется в данном контексте, относится к моноциклической, бициклической или трициклической системе с 4-15 атомами цикла, где один или более атомов цикла являются гетероатомами (например, N, O, S или их комбинации) и где моноциклическая система является ароматической или, по меньшей мере, один из циклов в бициклической или трициклической системе является ароматическим. Гетероарильная группа включает бензоконденсированную циклическую систему, имеющую 2-3 цикла. Например, бензоконденсированная группа включает бензоконденсированную группу с одним или двумя 4-8-членными гетероциклоалифатическими остатками (например, индолизил, индолил, изоиндолил, 3Н-индолил, индолинил, бензо[b]фурил, бензо[b]тиофенил, хинолинил или изохинолинил). Некоторыми примерами гетероарилов являются азетидинил, пиридил, 1Н-индазолил, фурил, пирролил, тиенил, тиазолил, оксазолил, имидазолил, тетразолил, бензофурил, изохинолинил, бензтиазолил, ксантен, тиоксантен, фенотиазин, дигидроиндол, бензо[1,3]диоксол, бензо[b]фурил, бензо[b]тиофенил, индазолил, бензимидазолил, бензтиазолил, пурил, циннолил, хинолил, хиназолил, циннолил, фталазил, хиназолил, хиноксалил, изохинолил, 4Н-хинолизил, бензо-1,2,5-тиадиазолил или 1,8-нафтиридил.

Не исчерпывающим образом, моноциклические гетероарилы включают фурил, тиофенил, 2Н-пирролил, пирролил, оксазолил, тиазолил, имидазолил, пиразолил, изоксазолил, изотиазолил, 1,3,4-тиадиазолил, 2Н-пиранил, 4Н-пиранил, пиридил, пиридазил, пиримидил, пиразолил, пиразил или 1,3,5-триазил. Моноциклические гетероарилы нумеруют в соответствии со стандартной химической номенклатурой.

Не исчерпывающим образом, бициклические гетероарилы включают индолизил, индолил, изоиндолил, 3Н-индолил, индолинил, бензо[b]фурил, бензо[b]тиофенил, хинолинил, изохинолинил, индолизил, изоиндолил, индолил, бензо[b]фурил, бензо[b]тиофенил, индазолил, бензимидазил, бензтиазолил, пуринил, 4Н-хинолизил, хинолил, изохинолил, циннолил, фталазил, хиназолил, хиноксалил, 1,8-нафтиридил или птеридил. Бициклические гетероарилы нумеруют в соответствии со стандартной химической номенклатурой.

Гетероарил необязательно замещен одним или более заместителями, такими как алифатическая группа [например, алкил, алкенил или алкинил], циклоалифатическая группа, (циклоалифатический радикал)алифатическая группа, гетероциклоалифатическая группа, (гетероциклоалифатический радикал)алифатическая группа, арил, гетероарил, алкоксил, (циклоалифатический радикал)оксигруппа, (гетероциклоалифатический радикал)оксигруппа, арилоксигруппа, гетероарилоксигруппа, (аралифатический радикал)оксигруппа, (гетероаралифатический радикал)оксигруппа, ароил, гетероароил, аминогруппа, оксогруппа (в неароматическом карбоцикле или гетероцикле бициклического или трициклического гетероарила), карбоксил, амидогруппа, ацил [например, (алифатический радикал)карбонил, (циклоалифатический радикал)карбонил, ((циклоалифатический радикал)алифатический радикал)карбонил, (аралифатический радикал)карбонил, (гетероциклоалифатический радикал)карбонил, ((гетероциклоалифатический радикал)алифатический радикал)карбонил или (гетероаралифатический радикал)карбонил], сульфонил [например, (алифатический радикал)сульфонил или аминосульфонил], сульфинил [например, (алифатический радикал)сульфинил], сульфанил [например, алифатический сульфанил], нитрогруппа, цианогруппа, галоген, гидроксил, меркаптогруппа, сульфоксил, карбамидная группа, тиокарбамидная группа, сульфамоил, сульфамидогруппа или карбамоил. Альтернативно, гетероарил может быть незамещенным.

Не исчерпывающие примеры замещенных гетероарилов включают (галоген)гетероарил [например, моно- или ди(галоген)гетероарил], (карбокси)гетероарил [например, (алкоксикарбонил)гетероарил], цианогетероарил, аминогетероарил [например, ((алкилсульфонил)амино)гетероарил и ((диалкил)амино)гетероарил], (амидо)гетероарил [например, аминокарбонилгетероарил, ((алкилкарбонил)амино)гетероарил, ((((алкил)амино)алкил)аминокарбонил)гетероарил, (((гетероарил)амино)карбонил)гетероарил, ((гетероциклоалифатический радикал)карбонил)гетероарил и ((алкилкарбонил)амино)гетероарил], (цианоалкил)гетероарил, (алкокси)гетероарил, (сульфамоил)гетероарил [например, (аминосульфонил)гетероарил], (сульфонил)гетероарил [например, (алкилсульфонил)гетероарил], (гидроксиалкил)гетероарил, (алкоксиалкил)гетероарил, (гидрокси)гетероарил, ((карбокси)алкил)гетероарил, [((диалкил)амино)алкил]гетероарил, (гетероциклоалифатический радикал)гетероарил, (циклоалифатический радикал)гетероарил, (нитроалкил)гетероарил, (((алкилсульфонил)амино)алкил)гетероарил, ((алкилсульфонил)алкил)гетероарил, (цианоалкил)гетероарил, (ацил)гетероарил [например, (алкилкарбонил)гетероарил], (алкил)гетероарил и (галогеналкил)гетероарил [например, тригалогеналкилгетероарил].

Термин «гетероаралифатический радикал» (такой как гетероаралкильная группа), как используется в данном контексте, относится к алифатической группе (например, С_1-4-алкильная группа), которая замещена гетероарильной группой. Термины «алифатический радикал», «алкил» и «гетероарил» имеют вышеуказанные значения.

Термин «гетероаралкильная группа», как используется в данном контексте, относится к алкильной группе (например, С_1-4-алкильная группа), которая замещена гетероарильной группой. Как «алкил», так и «гетероарил» имеют вышеуказанные значения. Гетероаралкил является необязательно замещенным одним или более заместителями, такими как алкил (включая карбоксиалкил, гидроксиалкил и галогеналкил, такой как трифторметил), алкенил, алкинил, циклоалкил, (циклоалкил)алкил, гетероциклоалкил, (гетероциклоалкил)алкил, арил, гетероарил, алкоксил, циклоалкилоксигруппа, гетероциклоалкилоксигруппа, арилоксигруппа, гетероарилоксигруппа, аралкилоксигруппа, гетероаралкилоксигруппа, ароил, гетероароил, нитрогруппа, карбоксил, алкоксикарбонил, алкилкарбонилоксигруппа, аминокарбонил, алкилкарбониламиногруппа, циклоалкилкарбониламиногруппа, (циклоалкилалкил)карбониламиногруппа, арилкарбониламиногруппа, аралкилкарбониламиногруппа, (гетероциклоалкил)карбониламиногруппа, (гетероциклоалкилалкил)карбониламиногруппа, гетероарилкарбониламиногруппа, гетероаралкилкарбониламиногруппа, цианогруппа, галоген, гидроксил, ацил, меркаптогруппа, алкилсульфанил, сульфоксил, карбамидная группа, тиокарбамидная группа, сульфамоил, сульфамидогруппа, оксогруппа или карбамоил.

Как используется в данном контексте, термин «циклический остаток» включает циклоалкил, гетероциклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкенил, арил или гетероарил, каждый из которых имеет вышеуказанное значение.

Как используется в данном контексте, термин «ацильная группа» относится к формильной группе или к R^X-C(O)- (такой как -алкил-С(О)-, также относящийся к термину «алкилкарбонил»), где R^X и «алкил» имеют вышеуказанные значения. Ацетил и пивалоил являются примерами ацильных групп.

Как используемые в данном контексте, термины «ароил» или «гетероароил» относятся к арил-С(О)- или к гетероарил-С(О)-. Арильная и гетероарильная часть ароила или гетероароила является необязательно замещенной, как описано ранее.

Как используется в данном контексте, термин «алкоксильная группа» относится к алкил-О-группе, где термин «алкил» имеет вышеуказанное значение.

Как используется в данном контексте, термин «карбамоильная группа» относится к группе, имеющей структуру –О-СО-NR^XR^Y или -NR^X-CO-O-R^Z, где R^X и R^Y имеют вышеуказанные значения, а R^Z может быть алифатической группой, арилом, аралифатической группой, гетероциклоалифатической группой, гетероарилом или гетероаралифатической группой.

Как используется в данном контексте, термин «карбоксильная группа» относится к –СООН, -СООR^X, -ОС(О)Н, -ОС(О)R^X, когда используется в качестве концевой группы, или –ОС(О)- или -С(О)О-, когда используется в качестве внутренней группы.

Как используется в данном контексте, термин «галогеналифатическая группа» относится к алифатической группе, замещенной 1, 2 или 3 атомами галогена. Например, термин «галогеналкил» включает группу –СF₃.

Как используется в данном контексте, термин «меркаптогруппа» относится к –SH.

Как используется в данном контексте, термин «сульфогруппа» относится к –SO₃H или -SO₃R^X, когда используется в конце, или к -S(O)₃, когда используется внутри группы.

Как используется в данном контексте, термин «сульфамидная группа» относится к структуре –NR^X-S(O)₂-NR^YR^Z, когда используется в конце, и к структуре –NR^X-S(O)₂-NR^Y-, когда используется внутри, где R^X, R^Y и R^Z имеют вышеуказанные значения.

Как используется в данном контексте, термин «сульфамоильная группа» относится к структуре -S(O)₂-NR^ХR^Y или –NR^X-S(O)₂-R^Z, когда используется в конце, или -S(O)₂-NR^Х- или -NR^Х-S(O)₂-, когда используется внутри, где R^X, R^Y и R^Z имеют вышеуказанные значения.

Как используется в данном контексте, термин «сульфанильная группа» относится к –S-R^X-, когда используется в конце, и –S-, когда используется внутри, где R^X имеет вышеуказанное значение. Примеры сульфанилов включают алкилсульфанил.

Как используется в данном контексте, термин «сульфинильная группа» относится к –S(О)-R^X-, когда используется в конце, и -S(О)-, когда используется внутри, где R^X имеет вышеуказанное значение.

Как используется в данном контексте, термин «сульфонильная группа» относится к –S(О)₂-R^X-, когда используется в конце, и -S(О)₂-, когда используется внутри, где R^X имеет вышеуказанное значение.

Как используется в данном контексте, термин «сульфоксильная группа» относится к –О-SО-R^X или –SО-О-R^X, когда используется в конце, и –О-S(О)- или -S(О)-О-, когда используется внутри, где R^X имеет вышеуказанное значение.

Как используется в данном контексте, термины «галоген» или «галогеновая группа» относятся к фтору, хлору, брому или иоду.

Как используется в данном контексте, термин «алкоксикарбонил», который включает термин «карбоксил», используемый отдельно или в сочетании с другой группой, относится к группе, такой как алкил-О-С(О)-.

Как используется в данном контексте, термин «алкоксиалкил» относится к алкильной группе, такой как алкил-О-алкил-, где алкил имеет вышеуказанное значение.

Как используется в данном контексте, термин «карбонил» относится к –С(О)-.

Как используется в данном контексте, термин «оксогруппа» относится к =О.

Как используется в данном контексте, термин «аминоалкил» относится к структуре (R^XR^Y)N-алкил-.

Как используется в данном контексте, термин «цианоалкил» относится к структуре (NC)-алкил-.

Как используется в данном контексте, термин «карбамидная группа» относится к структуре –NR^X-CO-NR^YR^Z и термин «тиокарбамидная группа» относится к структуре –NR^X-CS-NR^YR^Z, когда используется в конце, и –NR^X-CO-NR^Y- или –NR^X-CS-NR^Y-, когда используется внутри, где R^X, R^Y и R^Z имеют вышеуказанные значения.

Как используется в данном контексте, термин «гуанидиногруппа» относится к структуре –N=C(N(R^XR^Y))N(R^XR^Y), где R^X и R^Y имеют вышеуказанные значения.

Как используется в данном контексте, термин «амидиногруппа» относится к структуре -C=(NR^X)N(R^XR^Y), где R^X и R^Y имеют вышеуказанные значения.

Вообще, термин «вицинальный» относится к положению заместителей в группе, которая включает два или более атомов углерода, где заместители присоединены к соседним атомам углерода.

Вообще, термин «геминальный» относится к положению заместителей в группе, которая включает два или более атомов углерода, где заместители присоединены к одному и тому же атому углерода.

Термины «в конце» и «внутри» относятся к расположению группы внутри заместителя. Группа является концевой, когда группа находится в конце заместителя, не связанном далее с остальной частью химической структуры. Карбоксиалкил, то есть, R^XO(O)C-алкил, является примером карбоксильной группы, используемой в конце. Группа является внутренней, когда группа находится в середине заместителя по отношению к концу заместителя, связанному с остальной частью химической структуры. Алкилкарбоксил (например, алкил-С(О)О- или алкил-OC(O)-) и алкилкарбоксиарил (например, алкил-С(О)О-арил- или алкил-О(СО)-арил-) являются примерами карбоксильных групп, используемых внутри.

Как используется в данном контексте, термин «амидиногруппа» относится к структуре -C=(NR^X)N(R^XR^Y), где R^X и R^Y имеют вышеуказанные значения.

Как используется в данном контексте, термин «циклическая группа» включает моно, би- или трициклические системы, включая циклоалифатическую группу, гетероциклоалифатическую группу, арил или гетероарил, каждый из которых имеет вышеуказанное значение.

Как используется в данном контексте, термин «мостиковая бициклическая система» относится к бициклической гетероциклоалифатической циклической системе или бициклической циклоалифатической циклической системе, в которой циклы связаны мостиковой связью. Примеры мостиковых бициклических систем включают, но не исчерпывающим образом, адамантанил, норборнанил, бицикло[3,2,1]октил, бицикло[2,2,2]октил, бицикло[3,3,1]нонил, бицикло[3,2,3]нонил, 2-оксабицикло[2,2,2]октил, 1-азабицикло[2,2,2]октил, 3-азабицикло[3,2,1]октил и 2,6-диоксатрицикло[3,3,1,0^3,7]нонил. Мостиковые бициклические системы могут быть необязательно замещены одним или более заместителями, такими как алкил (включая карбоксиалкил, гидроксиалкил и галогеналкил, такой как трифторметил), алкенил, алкинил, циклоалкил, (циклоалкил)алкил, гетероциклоалкил, (гетероциклоалкил)алкил, арил, гетероарил, алкоксил, циклоалкилоксигруппа, гетероциклоалкилоксигруппа, арилоксигруппа, гетероарилоксигруппа, аралкилоксигруппа, гетероаралкилоксигруппа, ароил, гетероароил, нитрогруппа, карбоксил, алкоксикарбонил, алкилкарбонилокси, аминокарбонил, алкилкарбониламиногруппа, циклоалкилкарбониламиногруппа, (циклоалкилалкил)карбониламиногруппа, арилкарбониламиногруппа, аралкилкарбониламиногруппа, (гетероциклоалкил)карбониламиногруппа, (гетероциклоалкилалкил)карбониламиногруппа, гетероарилкарбониламиногруппа, гетероаралкилкарбониламиногруппа, цианогруппа, галоген, гидроксил, ацил, меркаптогруппа, алкилсульфанил, сульфоксил, карбамидная группа, тиокарбамидная группа, сульфамоил, сульфамидогруппа, оксогруппа или карбамоил.

Как используется в данном контексте, термин «алифатическая цепь» относится к линейной или разветвленной алифатической группе (например, алкильные группы, алкенильные группы или алкинильные группы). Линейная алифатическая цепь имеет структуру –[CH₂]_v-, где v означает 1-6. Разветвленная алифатическая цепь является линейной алифатической цепью, которая замещена одной или более алифатическими группами. Разветвленная алифатическая цепь имеет структуру –[CHQ]_v-, где Q означает водород или алифатическую группу; однако, Q может быть алифатической группой, по меньшей мере, в одном отдельном случае. Термин «алифатическая цепь» включает алкильные цепи, алкенильные цепи и алкинильные цепи, где алкил, алкенил и алкинил имеют вышеуказанные значения.

Фраза «необязательно замещенный» используется равнозначно с фразой «замещенный или незамещенный». Как описывается в данном контексте, соединения согласно данному изобретению могут быть необязательно замещены одним или более заместителями, такими как проиллюстрированные большей частью выше, или как проиллюстрированные путем конкретных классов, подклассов и типов согласно данному изобретению. Как описывается в данном контексте, переменные R₁, R₂, R₃ и R₄ и другие переменные, включенные в этом отношении в формулу (I), относятся к конкретным группам, таким как алкил и арил. Если не указано ничего другого, каждая из конкретных групп с переменными R₁, R₂, R₃ и R₄, и другими переменными, включенными в нее, может быть необязательно замещена одним или более заместителями, описанными в данном контексте. Каждый заместитель конкретной группы, далее, необязательно замещен от одного до трех атомами галогена, цианогруппой, оксоалкоксилом, гидроксилом, аминогруппой, нитрогруппой, арилом, галогеналкилом и алкилом. Например, алкильная группа может быть замещена алкилсульфанилом и алкилсульфанил может быть необязательно замещен от одного до трех атомами галогена, цианогруппой, оксоалкоксигруппой, гидроксилом, аминогруппой, нитрогруппой, арилом, галогеналкилом и алкилом. В качестве дополнительного примера, циклоалкильная часть (циклоалкил)карбониламиногруппы может быть необязательно замещена от одного до трех атомами галогена, цианогруппой, алкоксигруппой, гидроксилом, нитрогруппой, галогеналкилом и алкилом. Когда две алкоксильные группы являются связанными с одним и тем же атомом или со смежными атомами, то две алкоксильные группы могут образовывать цикл вместе с атомом(ами), с которым(и) они связаны.

Вообще, термин «замещенный», которому предшествует ли термин «необязательно» или нет, относится к замене водородных радикалов в данной структуре радикалом конкретного заместителя. Конкретные заместители описаны выше в определениях и ниже в описании соединений и относящихся к ним примерах. Если не указано ничего другого, необязательно замещенная группа может иметь заместитель в каждом замещаемом положении группы, и когда более, чем одно положение в любой данной структуре может быть замещено более, чем одним заместителем, выбираемым из конкретной группы, заместитель может быть или одним и тем же или другим в каждом положении. Циклический заместитель, такой как гетероциклоалкил, может быть связан с другим циклом, таким как циклоалкил, с образованием спиро-бициклической системы, например, оба цикла имеют совместно один общий атом. Квалифицированному специалисту в данной области понятно, что комбинации заместителей, предусматриваемые согласно данному изобретению, являются такими комбинациями, которые в результате приводят к образованию стабильных или химически пригодных соединений.

Фраза «вплоть до», как используется в данном контексте, относится к нулю или любому целому числу, которое равно или меньше, чем число следующей фразы. Например, термин «вплоть до 3» означает любое число из 0, 1, 2 и 3.

Фраза «стабильный или химически пригодный», как используется в данном контексте, относится к соединениям, которые фактически не изменяются, когда подвергаются условиям, позволяющим осуществлять их получение, детектирование и, предпочтительно, их выделение, очистку и применение для одной или более целей, раскрываемых в данном контексте. В некоторых воплощениях, стабильное соединение или химически пригодное соединение является таковым, которое фактически не изменяется, когда выдерживают при температуре 40°С или ниже, в отсутствие влажности или других химически реакционных условий, по меньшей мере, в течение недели.

Как используется в данном контексте, эффективное количество определяют как количество, необходимое для достижения терапевтического эффекта у подвергаемого лечению пациента и обычно его определяют на основании возраста, площади поверхности тела, массы тела и состояния пациента. Взаимосвязь доз для животных и людей (в мг/м² поверхности тела) описана Freireich и др., в Сancer Chemother., Rep., 50, 219 (1966). Площадь поверхности тела можно приблизительно определить, исходя из роста и массы тела пациента. См., например, Scientific Tables, Geigy Pharmaceuticals, Ardsley, New York, 537 (1970). Как используется в данном контексте, термин «пациент» относится к млекопитающему, включая человека.

Если не указано ничего другого, подразумевают, что структуры, описанные в данном контексте, также включают все изомерные формы структуры (например, энантиомерные, диастереомерные и геометрические (или конформационные) формы)), например, R- и S-конфигурации для каждого асимметрического центра, (Z)- и (Е)-изомеры по двойной связи, и конформационные (Z)- и (Е)-изомеры. Следовательно, отдельные стереохимические изомеры, а также смеси энантиомеров, диастереомеров и геометрических изомеров (или конформационных изомеров) соединений согласно настоящему изобретению входят в объем данного изобретения. Если не указано ничего другого, все таутомерные формы соединений согласно данному изобретению входят в объем данного изобретения. Кроме того, если не указано ничего другого, подразумевают, что структуры, описанные в данном контексте, также включают соединения, которые различаются только наличием одного или более обогащенных изотопами атомов. Например, соединения, имеющие структуры согласно настоящему изобретению, за исключением замены атома водорода дейтерием или тритием или замены атома углерода с помощью ¹³С- или ¹⁴С-обогащенного атома углерода, входят в объем данного изобретения. Такие соединения являются пригодными, например, в качестве аналитических «инструментов» или зондов в биологических анализах.

СОЕДИНЕНИЯ

Соединения согласно настоящему изобретению являются пригодными модуляторами АВС-транспортеров и пригодны при лечении опосредуемых АВС-транспортом заболеваний.

А. Характерные соединения

Настоящее изобретение включает соединение формулы (I):

или его фармацевтически приемлемую соль, где

каждый R₁ означает необязательно замещенную С_1-6-алифатическую группу, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенную С_3-10-циклоалифатическую группу, необязательно замещенную 3-10-членную гетероциклоалифатическую группу, карбоксил [например, гидроксикарбонил или алкоксикарбонил], амидогруппу [например, аминокарбонил], аминогруппу, галоген или гидроксил;

при условии, что, по меньшей мере, один R₁ означает необязательно замещенную циклоалифатическую группу, необязательно замещенную гетероциклоалифатическую группу, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил, присоединенный в положении 5 или 6 пиридильного цикла;

каждый R₂ означает водород, необязательно замещенную С_1-6-алифатическую группу, необязательно замещенную С_3-6-циклоалифатическую группу, необязательно замещенный фенил или необязательно замещенный гетероарил;

каждый R₃ и R’₃ вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют необязательно замещенную С_3-7-циклоалифатическую группу или необязательно замещенную гетероциклоалифатическую группу;

каждый R₄ означает необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил; и

каждый n означает 1, 2, 3 или 4.

В другом аспекте, настоящее изобретение включает соединение формулы (I’):

или его фармацевтически приемлемую соль, где

один из G₁ и G₂ означает азот, а другой означает углерод; и

R₁, R₂, R₃, R’₃, R₄ и n имеют вышеуказанные значения.

Конкретные воплощения

А. Заместитель R₁

Каждый R₁ означает независимо необязательно замещенную С_1-6-алифатическую группу, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенную С_3-10-циклоалифатическую группу, необязательно замещенную 3-10-членную гетероциклоалифатическую группу, карбоксил [например, гидроксикарбонил или алкоксикарбонил], амидогруппу [например, аминокарбонил], аминогруппу, галоген или гидроксил.

В некоторых воплощениях, один R₁ означает необязательно замещенную С_1-6-алифатическую группу. В некоторых примерах, один R₁ означает необязательно замещенный С_1-6-алкил, необязательно замещенный С_2-6-алкенил или необязательно замещенный С_2-6-алкинил. В некоторых примерах, один R₁ означает С_1-6-алкил, С_2-6-алкенил или С_2-6-алкинил.

В некоторых воплощениях, один R₁ означает арил или гетероарил с 1, 2 или 3 заместителями. В некоторых примерах, один R₁ означает моноциклический арил или гетероарил. В некоторых воплощениях, R₁ означает арил или гетероарил с 1, 2 или 3 заместителями. В некоторых примерах, R₁ означает моноциклический арил или гетероарил.

В некоторых воплощениях, по меньшей мере, один R₁ означает необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил и R₁ связан с центральной структурой в положении 6 пиридинового цикла.

В некоторых воплощениях, по меньшей мере, один R₁ означает необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил и R₁ связан с центральной структурой в положении 5 пиридинового цикла.

В некоторых воплощениях, один R₁ означает фенил с количеством заместителей вплоть до 3. В некоторых воплощениях, R₁ означает фенил с количеством заместителей вплоть до 3.

В некоторых воплощениях, один R₁ означает гетероарильный цикл с количеством заместителей вплоть до 3. В некоторых воплощениях, один R₁ означает моноциклический гетероарильный цикл с количеством заместителей вплоть до 3. В других воплощениях, один R₁ означает бициклический гетероарильный цикл с количеством заместителей вплоть до 3. В некоторых воплощениях, R₁ означает гетероарильный цикл с количеством заместителей вплоть до 3. В некоторых воплощениях, R₁ означает моноциклический гетероарильный цикл с количеством заместителей вплоть до 3. В других воплощениях, R₁ означает бициклический гетероарильный цикл с количеством заместителей вплоть до 3.

В некоторых воплощениях, один R₁ означает карбоксил [например, гидроксикарбонил или алкоксикарбонил]. Или, один из R₁ означает амидо [например, аминокарбонил]. Или, один R₁ означает аминогруппу. Или, означает галоген. Или, означает цианогруппу. Или, означает гидроксил.

В некоторых воплощениях, R₁ означает водород, метил, этил, изопропил, трет-бутил, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, аллил, F, Cl, метоксигруппу, этоксигруппу, изопропоксигруппу, трет-бутоксигруппу, CF₃, OCF₃, CN, гидроксил или аминогруппу. В некоторых примерах, R₁ означает водород, метил, метоксигруппу, F, CF₃ или OCF₃. В некоторых примерах, R₁ может означать водород. Или, R₁ может означать метил. Или, R₁ может означать CF₃. Или, R₁ может означать метоксигруппу.

В некоторых воплощениях, R₁ замещен не более, чем тремя заместителями, выбираемыми из группы, состоящей из галогена, оксогруппы или необязательно замещенных алифатической группы, циклоалифатической группы, гетероциклоалифатической группы, аминогруппы [например, (алифатический радикал)аминогруппа], амидогруппы [например, аминокарбонил, ((алифатический радикал)амино)карбонил и ((алифатический радикал)₂амино)карбонил], карбоксила [например, алкоксикарбонил и гидроксикарбонил], сульфамоила [например, аминосульфонил, ((алифатический радикал)₂амино)сульфонил, ((циклоалифатический радикал)алифатический радикал)аминосульфонил и ((циклоалифатический радикал)амино)сульфонил], цианогруппы, алкоксила, арила, гетероарила [например, моноциклический гетероарил и бициклогетероарил], сульфонила [например, (алифатический радикал)сульфонил или (гетероциклоалифатический радикал)сульфонил], сульфинила [например, (алифатический радикал)сульфинил], ароила, гетероароила или (гетероциклоалифатический радикал) карбонила.

В некоторых воплощениях, R₁ замещен галогеном. Примеры заместителей R₁ включают F, Cl и Br. В некоторых примерах, R₁ замещен с помощью F.

В некоторых воплощениях, R₁ замещен необязательно замещенной алифатической группой. Примеры заместителей R₁ включают необязательно замещенные алкоксиалифатическую группу, гетероциклоалифатическую группу, аминоалкил, гидроксиалкил, (гетероциклоалкил)алифатическую группу, алкилсульфонилалифатическую группу, алкилсульфониламиноалифатическую группу, алкилкарбониламиноалифатическую группу, алкиламиноалифатическую группу или алкилкарбонилалифатическую группу.

В некоторых воплощениях, R₁ замещен необязательно замещенной аминогруппой. Примеры заместителей R₁ включают алифатическую карбониламиногруппу, алифатическую аминогруппу, ариламиногруппу или алифатическую сульфониламиногруппу.

В некоторых воплощениях, R₁ замещен сульфонилом. Примеры заместителей R₁ включают (гетероциклоалифатический радикал)сульфонил, (алифатический радикал)сульфонил, (алифатический радикал)аминосульфонил, аминосульфонил, (алифатический радикал)карбониламиносульфонил, алкоксиалкилгетероциклоалкилсульфонил, алкилгетероциклоалкилсульфонил, алкиламиносульфонил, циклоалкиламиносульфонил, (гетероциклоалкил)алкиламиносульфонил и гетероциклоалкилсульфонил.

В некоторых воплощениях, R₁ замещен карбоксилом. Примеры заместителей R₁ включают алкоксикарбонил и гидроксикарбонил.

В некоторых воплощениях, R₁ замещен амидогруппой. Примеры заместителей R₁ включают алкиламинокарбонил, аминокарбонил, ((алифатический радикал)₂амино)карбонил и [((алифатический радикал)аминоалифатический радикал)амино]карбонил.

В некоторых воплощениях, R₁ замещен карбонилом. Примеры заместителей R₁ включают арилкарбонил, (циклоалифатический радикал)карбонил, (гетероциклоалифатический радикал)карбонил и гетероарилкарбонил.

В некоторых воплощениях, R₁ означает водород. В некоторых воплощениях, R₁ означает –Z^AR₅, где каждый Z^A независимо означает связь или необязательно замещенную, разветвленную или линейную С_1-6-алифатическую цепь, где вплоть до двух атомов углерода Z^A необязательно и независимо заменены на –СО-, -CS-, -CONR^A-, -CONR^ANR^A-, -CO₂-, -ОСО-, -NR^ACO₂-, -O-, -NR^ACONR^A-, -OCONR^A-, -NR^ANR^A-, NR^ACO-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^A, -SO₂NR^A-, -NR^ASO₂- или -NR^ASO₂NR^A-. Каждый R₅ независимо означает R^A, галоген, -ОН, -NH₂, -NO₂, -CN, -CF₃ или -OCF₃. Каждый R^A независимо означает С_1-8-алифатическую группу, циклоалифатическую группу, гетероциклоалифатическую группу, арил или гетероарил, каждый из которых необязательно замещен 1, 2 или 3 радикалами R^D. Каждый R^D означает –Z^DR₉, где каждый Z^D означает, независимо, связь или необязательно замещенную, разветвленную или линейную С_1-6-алифатическую цепь, где вплоть до двух атомов углерода Z^D необязательно и независимо заменены на –СО-, -CS-, -CONR^Е-, -CONR^ЕNR^Е-, -CO₂-, -ОСО-, -NR^ЕCO₂-, -O-, -NR^ЕCONR^Е-, -OCONR^Е-, -NR^ЕNR^Е-, -NR^ЕCO-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^Е, -SO₂NR^Е-, -NR^ЕSO₂- или -NR^ЕSO₂NR^Е-. Каждый R₉ независимо означает R^Е, галоген, -ОН, -NH₂, -NO₂, -CN, -CF₃ или -OCF₃. Каждый R^Е независимо означает водород, необязательно замещенную С_1-8-алифатическую группу, необязательно замещенную циклоалифатическую группу, необязательно замещенную гетероциклоалифатическую группу, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил.

В некоторых воплощениях, каждый R^D независимо означает -Z^DR₉; где каждый Z^D может независимо означать связь или необязательно замещенную, разветвленную или линейную С_1-6-алифатическую цепь, где вплоть до двух атомов углерода Z^D необязательно и независимо заменены на -O-, -NНС(О)-, -С(О)NR^Е-, -SO₂-, -NНSO₂-, -NНС(О)-, -NR^ЕSO₂-, -SO₂NН-, -SO₂NR^Е-, -NН- или –С(О)О-. В некоторых воплощениях, один атом углерода Z^D заменен на –О-. Или, заменен на -NНС(О)-. Или, заменен на -С(О)NR^Е-. Или, заменен на -SO₂-. Или, заменен на -NНSO₂-. Или, заменен на -NНС(О)-. Или, заменен на -SO-. Или, заменен на -NR^ЕSO₂-. Или, заменен на -SO₂NН-. Или, заменен на -SO₂NR^Е-. Или, заменен на -NН-. Или, заменен на -С(О)О-.

В некоторых воплощениях, R₉ означает водород. В некоторых воплощениях, R₉ независимо означает необязательно замещенную алифатическую группу. В некоторых воплощениях, R₉ означает необязательно замещенную циклоалифатическую группу. Или, необязательно замещенную гетероциклоалифатическую группу. Или, необязательно замещенный арил. Или, необязательно замещенный гетероарил. Или, галоген.

В некоторых воплощениях, один R₁ означает арил или гетероарил, причем каждый необязательно замещен 1, 2 или 3 радикалами R^D, где R^D имеет вышеуказанное значение.

В некоторых воплощениях, один R¹ означает карбоксил [например, гидроксикарбонил или алкоксикарбонил]. Или, один R¹ означает амидогруппу [например, аминокарбонил]. Или, один R¹ означает аминогруппу. Или, означает галоген.

В некоторых воплощениях, один R¹, который присоединен в положении 5 или 6 пиридильного цикла, означает арил или гетероарил, причем каждый необязательно замещен 1, 2 или 3 радикалами R^D, где R^D имеет вышеуказанное значение. В некоторых воплощениях, один R¹, присоединенный в положении 5 или 6 пиридильного цикла, означает фенил, необязательно замещенный 1, 2 или 3 радикалами R^D, где R^D имеет вышеуказанное значение. В некоторых воплощениях, один R¹, присоединенный в положении 5 или 6 пиридильного цикла, означает гетероарил, необязательно замещенный 1, 2 или 3 радикалами R^D. В некоторых воплощениях, один R¹, присоединенный в положении 5 или 6 пиридильного цикла, означает 5-6-членный гетероарил, включающий 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбираемых из группы, состоящей из кислорода, азота и серы. В других воплощениях, 5-6-членный гетероарил замещен одним радикалом R^D.

В некоторых воплощениях, один R¹, присоединенный в положении 5 или 6 пиридильного цикла, означает фенил, замещенный одним радикалом R^D. В некоторых воплощениях, один R¹, присоединенный в положении 5 или 6 пиридильного цикла, означает фенил, замещенный двумя радикалами R^D. В некоторых воплощениях, один R¹, присоединенный в положении 5 или 6 пиридильного цикла, означает фенил, замещенный 3 радикалами R^D.

В некоторых воплощениях, R¹ означает:

где

W₁ означает –С(О)-, -SO₂- или СН₂-;

D означает водород, гидроксил или необязательно замещенную группу, выбираемую из алифатической группы, циклоалифатической группы, алкоксила и аминогруппы; и

R^D имеет вышеуказанное значение.

В некоторых воплощениях, W₁ означает –С(О)-. Или, W₁ означает -SO₂-. Или, W₁ означает СН₂-.

В некоторых воплощениях, D означает ОН. Или, D является необязательно замещенной С_1-6-алифатической группой или необязательно замещенной С_3-8-циклоалифатической группой. Или, D является необязательно замещенным алкоксилом. Или, D является необязательно замещенной аминогруппой.

В некоторых примерах, D означает:

где каждый из А и В независимо означает водород, необязательно замещенную С_1-6-алифатическую группу, необязательно замещенную С_3-8-циклоалифатическую группу или

А и В, взятые вместе, образуют необязательно замещенный 3-7-членный гетероциклоалифатический цикл.

В некоторых воплощениях, А означает водород, а В означает необязательно замещенную С_1-6-алифатическую группу. В некоторых воплощениях, В является замещенным 1, 2 или 3 заместителями. Или, оба, А и В, означают водород. Типичные заместители включают оксогруппу, алкил, гидроксил, гидроксиалкил, алкоксигруппу, алкоксиалкил, диалкиламиногруппу или необязательно замещенную группу, выбираемую из циклоалифатической группы, гетероциклоалифатической группы, арила и гетероарила.

В некоторых воплощениях, А означает водород, а В означает необязательно замещенную С_1-6-алифатическую группу. Или, оба, А и В, означают водород. Типичные заместители включают оксогруппу, алкил, гидроксил, гидроксиалкил, алкоксигруппу, алкоксиалкил или необязательно замещенную гетероциклоалифатическую группу.

В некоторых воплощениях, В означает С_1-6-алкил, необязательно замещенный оксогруппой, алкилом, гидроксилом, гидроксиалкилом, алкоксилом, алкоксиалкилом или необязательно замещенной группой, выбираемой из циклоалифатической группы, гетероциклоалифатической группы, арила и гетероарила. В некоторых воплощениях, В замещен оксогруппой, С_1-6-алкилом, гидроксилом, гидрокси-(С_1-6)-алкилом, (С_1-6)-алкоксилом, (С_1-6)-алкокси-(С_1-6)-алкилом, С_3-8-циклоалифатической группой, 3-8-членной гетероциклоалифатической группой, фенилом и 5-10-членным гетероарилом. В одном примере, В означает С_1-6-алкил, замещенный необязательно замещенным фенилом.

В некоторых воплощениях, А и В, взятые вместе, образуют необязательно замещенный 3-7-членный гетероциклоалифатический цикл. В нескольких примерах, гетероциклоалифатический цикл необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями. Типично, такие циклы включают необязательно замещенные пирролидинил, пиперидинил, морфолинил и пиперазинил. Типичные заместители у таких циклов включают галоген, оксогруппу, алкил, гидроксил, гидроксиалкил, алкоксил, алкоксиалкил, ацил (например, алкилкарбонил), аминогруппу, амидогруппу и карбоксил. В некоторых воплощениях, заместителем является галоген, оксогруппа, алкил, гидроксил, гидроксиалкил, алкоксил, алкоксиалкил, аминогруппа, амидогруппа и карбоксил.

В некоторых воплощениях, R^D означает водород, галоген или необязательно замещенную группу, выбираемую из алифатической группы, циклоалифатической группы, аминогруппы, гидроксила, алкоксила, карбоксила, амидогруппы, карбонила, цианогруппы, арила или гетероарила. В некоторых примерах, R^D означает водород, галоген, необязательно замещенную С_1-6-алифатическую группу или необязательно замещенный алкоксил. В некоторых примерах, R^D означает водород, F, Cl, необязательно замещенный С_1-6-алкил или необязательно замещенный –О(С_1-6-алкил). Примеры радикала R^D включают водород, F, Cl, метил, этил, изопропил, трет-бутил, -ОМе, -OEt, изопропоксигруппу, трет-бутоксигруппу, CF₃ или -OCF₃. В некоторых примерах, R^D означает водород, F, метил, метоксигруппу, CF₃ или -OCF₃. R^D может означать водород. R^D может означать F. R^D может означать метил. R^D может означать метоксигруппу.

В некоторых воплощениях, R₁ означает:

где

W₁ означает –С(О)-, -SO₂- или СН₂-;

каждый из А и В независимо означает водород, необязательно замещенную С_1-6-алифатическую группу, необязательно замещенную С_3-8-циклоалифатическую группу или

А и В, взятые вместе, образуют необязательно замещенный 3-7-членный гетероциклоалифатический цикл.

В некоторых воплощениях, один R₁, который присоединен в положении 5 или 6 пиридильного цикла, означает циклоалифатическую группу или гетероциклоалифатическую группу, причем каждая необязательно замещена 1, 2 или 3 радикалами R^D, где R^D означает –Z^DR₉; где каждый Z^D означает, независимо, связь или необязательно замещенную, разветвленную или линейную С_1-6-алифатическую группу, где вплоть до двух атомов углерода Z^D необязательно и независимо заменены на –СО-, -CS-, -CONR^Е-, -CONR^ЕNR^Е-, -CO₂-, -ОСО-, -NR^ЕCO₂-, -O-, -NR^ЕCONR^Е-, -OCONR^Е-, -NR^ЕNR^Е-, -NR^ЕCO-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^Е, -SO₂NR^Е-, -NR^ЕSO₂- или -NR^ЕSO₂NR^Е-; каждый R₉ независимо означает R^Е, галоген, -ОН, -NH₂, -NO₂, -CN, -CF₃ или -OCF₃; каждый R^Е независимо означает водород, необязательно замещенную С_1-8-алифатическую группу, необязательно замещенную циклоалифатическую группу, необязательно замещенную гетероциклоалифатическую группу, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил.

В некоторых примерах, один R₁, который присоединен в положении 5 или 6 пиридильного цикла, означает необязательно замещенную С_3-8-циклоалифатическую группу.

В некоторых воплощениях, один R₁, который присоединен в положении 5 или 6 пиридильного цикла, означает необязательно замещенный С_3-8-циклоалкил или необязательно замещенный С_3-8-циклоалкенил.

В некоторых воплощениях, один R₁, который присоединен в положении 5 или 6 пиридильного цикла, означает С_3-8-циклоалкил или С_3-8-циклоалкенил. Примеры циклоалкила и циклоалкенила включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклопентенил, циклогексенил и циклогептенил.

В некоторых воплощениях, R₁ означает:

В некоторых примерах R₁ выбирают из:

В. Заместитель R₂

Каждый R₂ может означать галоген. Каждый R₂ может означать необязательно замещенную группу, выбираемую из С_1-6-алифатической группы, С_3-6-циклоалкифатической группы, фенила и гетероарила.

В некоторых воплощениях, R₂ означает С_1-6-алифатическую группу, необязательно замещенную 1-, 2- или 3-кратно атомом галогена, С_1-2-алифатическим радикалом или алкоксилом. В некоторых воплощениях, R₂ может быть замещен метилом, этилом, пропилом или бутилом. В некоторых примерах, R₂ может означать метил, этил, пропил или бутил.

В некоторых воплощениях, R₂ означает водород.

С. Заместители R₃ и R’₃

Каждый R₃ и R’₃ вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют С_3-7-циклоалифатическую или гетероциклоалифатическую группу, каждая из которых необязательно замещена 1, 2 или 3 заместителями.

В некоторых воплощениях, R₃ и R’₃ вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют С_3-7-циклоалифатическую или С_3-7-гетероциклоалифатическую группу, каждая из которых необязательно замещена с помощью 1, 2 или 3 радикалов –Z^BR₇, где каждый Z^B независимо означает связь или необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-4-алифатическую цепь, где вплоть до двух атомов углерода Z^B необязательно и независимо заменены на –СО-, -CS-, -CONR^B-, -CONR^BNR^B-, -CO₂-, -OCO-, -NR^BCO₂-, -O-, -NR^BCONR^B-, -OCONR^B-, -NR^BNR^B-, -NR^BCO-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^B-, -SO₂NR^B-, -NR^BSO₂- или -NR^BSO₂NR^B-; каждый R₇ независимо означает R^B, галоген, -ОН, -NH₂, -NO₂, -CN, -CF₃ или –OCF₃; и каждый R^B независимо означает водород, необязательно замещенную С_1-8-алифатическую группу, необязательно замещенную циклоалифатическую группу, необязательно замещенную гетероциклоалифатическую группу, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил.

В некоторых воплощениях, R₃ и R’₃ вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют 3-, 4-, 5- или 6-членную циклоалифатическую группу, которая необязательно замещена 1, 2 или 3 заместителями. В некоторых примерах, R₃ и R’₃ и атом углерода, к которому они присоединены, образуют необязательно замещенную циклопропильную группу. В некоторых альтернативных примерах, R₃ и R’₃ и атом углерода, к которому они присоединены, образуют необязательно замещенную циклобутильную группу. В некоторых других примерах, R₃ и R’₃ и атом углерода, к которому они присоединены, образуют необязательно замещенную циклопентильную группу. В других примерах, R₃ и R’₃ и атом углерода, к которому они присоединены, образуют необязательно замещенную циклогексильную группу. В еще других примерах, R₃ и R’₃ вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют незамещенный циклопропил.

В некоторых воплощениях, R₃ и R’₃ вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют 5-, 6- или 7-членную, необязательно замещенную гетероциклоалифатическую группу. В других примерах, R₃ и R’₃ и атом углерода, к которому они присоединены, образуют необязательно замещенную тетрагидропиранильную группу.

В некоторых воплощениях, R₃ и R’₃ вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют незамещенную С_3-7-циклоалифатическую группу или незамещенную гетероциклоалифатическую группу. В некоторых примерах, R₃ и R’₃ вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют незамещенный циклопропил, незамещенный циклопентил или незамещенный циклогексил.

D. Заместитель R₄

Каждый R₄ независимо означает необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил.

В некоторых воплощениях, R₄ означает 6-10-членный (например, 7-10-членный) арил, необязательно замещенный с помощью 1, 2 или 3 заместителей. Примеры R₄ включают необязательно замещенный бензол, нафталин или инден. Или, например, R₄ может означать необязательно замещенный фенил, необязательно замещенный нафтил или необязательно замещенный инденил.

В некоторых воплощениях, R₄ означает необязательно замещенный гетероарил. Примеры R₄ включают моноциклический или бициклический гетероарил, такой как бензоконденсированная циклическая система, в которой фенил конденсирован с одной или двумя 4-8-членными гетероциклоалифатическими группами.

В некоторых воплощениях, R₄ означает арил или гетероарил, причем каждый необязательно замещен 1, 2 или 3 радикалами –Z^СR₈. В некоторых воплощениях, R₄ означает арил, необязательно замещенный с помощью 1, 2 или 3 радикалов –Z^СR₈. Или, R₄ означает гетероарил, необязательно замещенный с помощью 1, 2 или 3 радикалов –Z^СR₈. Каждый Z^С независимо означает связь или необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-6-алифатическую цепь, где вплоть до двух атомов углерода Z^С необязательно и независимо заменены на –СО-, -CS-, -CONR^С-, -CONR^СNR^С-, -CO₂-, -OCO-, -NR^СCO₂-, -O-, -NR^СCONR^С-, -OCONR^С-, -NR^СNR^С-, -NR^СCO-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^С-, -SO₂NR^С-, -NR^СSO₂- или –NR^СSO₂NR^С-. Каждый R₈ независимо означает R^С, галоген, -ОН, -NH₂, -NO₂, -CN, -CF₃ или –OCF₃. Каждый R^С независимо означает водород, необязательно замещенную С_1-8-алифатическую группу, необязательно замещенную циклоалифатическую группу, необязательно замещенную гетероциклоалифатическую группу, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил.

В некоторых воплощениях два встречающихся –Z^СR₈, взятые вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют 4-8-членный насыщенный, частично насыщенный или ароматический цикл с количеством вплоть до трех атомов цикла, независимо выбираемых из группы, состоящей из О, NH, NR^C и S; где R^C имеет вышеуказанное значение.

В некоторых воплощениях, R₄ выбирают из:

Е. Семейства типичных соединений

В некоторых воплощениях, R₁ означает необязательно замещенную циклическую группу, которая связана со структурой ядра в положении 5 или 6 пиридинового цикла.

В некоторых воплощениях, R₁ означает необязательно замещенный арил, который связан с пиридиновым циклом в положении 5. В других примерах, R₁ означает необязательно замещенный арил, который связан с пиридиновым циклом в положении 6.

В еще других примерах, R₁ означает необязательно замещенный гетероарил, который связан с пиридиновым циклом в положении 5. Однако, в других примерах, R₁ означает необязательно замещенный гетероарил, который связан с пиридиновым циклом в положении 6.

В других воплощениях, R₁ означает необязательно замещенную циклоалифатическую или необязательно замещенную гетероциклоалифатическую группу, которая связана с пиридиновым циклом в положении 5 или 6.

Соответственно, другой аспект настоящего изобретения относится к соединениям формулы (II):

или их фармацевтически приемлемым солям, где R₁, R₂, R₃, R’₃ и R₄ имеют значения, указанные в случае формулы (I).

В некоторых воплощениях, каждый R₁ означает арил или гетероарил, необязательно замещенный с помощью 1, 2 или 3 радикалов R^D, где каждый R^D означает –Z^DR₉, где каждый Z^D независимо означает связь или необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-6-алифатическую цепь, где вплоть до двух атомов углерода Z^D необязательно и независимо заменены на –СО-, -CS-, -CONR^Е-, -CONR^ЕNR^Е-, -CO₂-, -OCO-, -NR^ЕCO₂-, -O-, -NR^ЕCONR^Е-, -OCONR^Е-, -NR^ЕNR^Е-, -NR^ЕCO-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^Е-, -SO₂NR^Е-, -NR^ЕSO₂- или –NR^ЕSO₂NR^Е-; каждый R₉ независимо означает R^Е, галоген, -ОН, -NH₂, -NO₂, -CN, -CF₃ или –OCF₃; каждый R^Е независимо означает водород, необязательно замещенную С_1-8-алифатическую группу, необязательно замещенную циклоалифатическую группу, необязательно замещенную гетероциклоалифатическую группу, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил.

В некоторых воплощениях, каждый R₁ означает циклоалифатическую или гетероциклоалифатическую группу, необязательно замещенную с помощью 1, 2 или 3 радикалов R^D; где R^D имеет вышеуказанное значение.

Другой аспект настоящего изобретения относится к соединениям формулы (III):

их фармацевтически приемлемым солям, где R₁, R₂, R₃, R’₃ и R₄ имеют значения, указанные в случае формулы (I).

В некоторых воплощениях, каждый R₁ означает арил или гетероарил, необязательно замещенный с помощью 1, 2 или 3 радикалов R^D, где каждый R^D означает –Z^DR₉, где каждый Z^D независимо означает связь или необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-6-алифатическую цепь, где вплоть до двух атомов углерода Z^D необязательно и независимо заменены на –СО-, -CS-, -CONR^Е-, -CONR^ЕNR^Е-, -CO₂-, -OCO-, -NR^ЕCO₂-, -O-, -NR^ЕCONR^Е-, -OCONR^Е-, -NR^ЕNR^Е-, -NR^ЕCO-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^Е-, -SO₂NR^Е-, -NR^ЕSO₂- или –NR^ЕSO₂NR^Е-; каждый R₉ независимо означает R^Е, галоген, -ОН, -NH₂, -NO₂, -CN, -CF₃ или –OCF₃; каждый R^Е независимо означает водород, необязательно замещенную С_1-8-алифатическую группу, необязательно замещенную циклоалифатическую группу, необязательно замещенную гетероциклоалифатическую группу, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил.

В некоторых воплощениях, каждый R₁ означает циклоалифатическую или гетероциклоалифатическую группу, необязательно замещенную 1, 2 или 3 радикалами R^D; где R^D имеет вышеуказанное значение.

В другом аспекте, настоящее изобретение включает соединения формулы (IV):

или их фармацевтически приемлемые соли, где R₁, R₂, R₃, R’₃ и R₄ имеют значения, указанные в случае формулы (I).

R^D означает –Z^DR₉; где каждый Z^D независимо означает связь или необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-6-алифатическую цепь, где вплоть до двух атомов углерода Z^D необязательно и независимо заменены на –СО-, -CS-, -CONR^Е-, -CONR^ЕNR^Е-, -CO₂-, -OCO-, -NR^ЕCO₂-, -O-, -NR^ЕCONR^Е-, -OCONR^Е-, -NR^ЕNR^Е-, -NR^ЕCO-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^Е-, -SO₂NR^Е-, -NR^ЕSO₂- или –NR^ЕSO₂NR^Е-.

R₉ независимо означает R^Е, галоген, -ОН, -NH₂, -NO₂, -CN, -CF₃ или –OCF₃.

Каждый R^Е независимо означает водород, необязательно замещенную С_1-8-алифатическую группу, необязательно замещенную циклоалифатическую группу, необязательно замещенную гетероциклоалифатическую группу, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил.

В некоторых воплощениях, Z^D независимо означает связь или необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-6-алифатическую цепь, где один атом углерода Z^D необязательно заменен на –SO₂-, -CONR^E-, -NR^ESO₂- или -SO₂NR^E. Например, Z^D означает необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-6-алифатическую цепь, где один атом углерода Z^D необязательно заменен на –SO₂-. В других примерах, R₉ означает необязательно замещенный гетероарил или необязательно замещенную гетероциклоалифатическую группу. В дополнительных примерах, R₉ означает необязательно замещенную гетероциклоалифатическую группу, включающую 1-2 атома азота, и R₉ прямо связан с –SO₂- через азот цикла.

В другом аспекте, настоящее изобретение включает соединения формулы (V-A) или формулы (V-B):

или их фармацевтически приемлемые соли,

где

Т означает необязательно замещенную С_1-2-алифатическую цепь, где каждый из атомов углерода необязательно и независимо заменен на –СО-, -CS-, -COCO-, -SO-, -B(OH)- или -B(O(C_1-6-алкил))-;

каждый из R₁’ и R₁” независимо означает связь или необязательно замещенную С_1-6-алифатическую группу, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенную 3-10-членную циклоалифатическую группу, необязательно замещенную 3-10-членную гетероциклоалифатическую группу, карбоксил, амидогруппу, аминогруппу, галоген или гидроксил;

R^D1 связан с углеродом в положении 3” или 4”;

каждый R^D1 и R^D2 означает –Z^DR₉; где каждый Z^D независимо означает связь или необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-6-алифатическую цепь, где вплоть до двух атомов углерода Z^D необязательно и независимо заменены на –СО-, -CS-, -CONR^Е-, -CONR^ЕNR^Е-, -CO₂-, -OCO-, -NR^ЕCO₂-, -O-, -NR^ЕCONR^Е-, -OCONR^Е-, -NR^ЕNR^Е-, -NR^ЕCO-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^Е-, -SO₂NR^Е-, -NR^ЕSO₂- или –NR^ЕSO₂NR^Е-;

R₉ независимо означает R^Е, галоген, -ОН, -NH₂, -NO₂, -CN, -CF₃ или –OCF₃;

или R^D1 и R^D2, взятые вместе с атомами, с которыми они связаны, образуют 3-8-членный насыщенный, частично ненасыщенный или ароматический цикл с количеством вплоть до трех членов цикла, независимо выбираемых из группы, состоящей из О, NH, NR^E и S; и

каждый R^Е независимо означает водород, необязательно замещенную С_1-8-алифатическую группу, необязательно замещенную циклоалифатическую группу, необязательно замещенную гетероциклоалифатическую группу, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил.

В некоторых воплощениях, Т означает необязательно замещенный –СН₂-. В некоторых других воплощениях, Т означает необязательно замещенный –СН₂СН₂-.

В некоторых воплощениях, Т необязательно замещен радикалом –Z^ER₁₀; где каждый Z^Е независимо означает связь или необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-6-алифатическую цепь, где вплоть до двух атомов углерода Z^Е необязательно и независимо заменены на –СО-, -CS-, -CONR^F-, -CONR^FNR^F-, -CO₂-, -OCO-, -NR^FCO₂-, -O-, -NR^FCONR^F-, -OCONR^F-, -NR^FNR^F-, -NR^FCO-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^F-, -SO₂NR^F-, -NR^FSO₂- или –NR^FSO₂NR^F-; R₁₀ независимо означает R^F, галоген, -ОН, -NH₂, -NO₂, -CN, -CF₃ или –OCF₃; каждый R^F независимо означает водород, необязательно замещенную С_1-8-алифатическую группу, необязательно замещенную циклоалифатическую группу, необязательно замещенную гетероциклоалифатическую группу, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил. В одном примере Z^E означает –О-.

В некоторых воплощениях, R₁₀ может означать необязательно замещенный С_1-6-алкил, необязательно замещенный С_2-6-алкенил, необязательно замещенную С_3-7-циклоалифатическую группу или необязательно замещенный С_6-10-арил. В одном воплощении, R₁₀ означает метил, изопропил или трет-бутил.

В некоторых воплощениях, вплоть до двух атомов углерода Т необязательно заменены на –СО-, -CS-, B(OH)- или -В(O(C_1-6-алкил))-.

В некоторых воплощениях, Т выбирают из группы, состоящей из –СН₂-, -СН₂СН₂-, -СF₂-, -C(CH₃)₂-, -C(O)-,

-С(фенил)₂-, -В(ОН)- и –СН(ОС₂Н₅)-. В некоторых воплощениях, Т означает –СН₂-, -СF₂-, -C(CH₃)₂-,

или -С(фенил)₂-. В других воплощениях, Т означает -СН₂СН₂-, -C(O)-, -В(ОН)- и -СН(ОС₂Н₅)-. В некоторых воплощениях, Т означает –СН₂-, -CF₂-, -С(СН₃)₂-,

Более предпочтительно, Т означает –СН₂-, -CF₂- или -С(СН₃)₂-. В некоторых воплощениях, Т означает –СН₂-. Или, Т означает –СF₂-. Или, Т означает –С(СН₃)₂-.

В некоторых воплощениях, каждый из R₁’ и R₁” означает водород. В некоторых воплощениях, каждый из R₁’ и R₁” независимо означает –Z^AR₅, где каждый Z^А независимо означает связь или необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-6-алифатическую цепь, где вплоть до двух атомов углерода Z^А необязательно и независимо заменены на –СО-, -CS-, -CONR^А-, -CONR^АNR^А-, -CO₂-, -OCO-, -NR^АCO₂-, -O-, -NR^АCONR^А-, -OCONR^А-, -NR^АNR^А-, -NR^АCO-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^А-, -SO₂NR^А-, -NR^АSO₂- или –NR^АSO₂NR^А-. Каждый R₅ независимо означает R^А, галоген, -ОН, -NH₂, -NO₂, -CN, -CF₃ или –OCF₃. Каждый R^А независимо означает необязательно замещенную группу, выбираемую из С_1-8-алифатической группы, циклоалифатической группы, гетероциклоалифатической группы, арила и гетероарила.

В некоторых воплощениях, R₁’ выбирают из группы, состоящей из Н, С_1-6-алифатической группы, галогена, CF₃, CHF₂, -О(С_1-6-алифатической группы), (С₃-С₅)-циклоалкила или (С₄-С₆)-гетероциклоалкила, содержащего один атом кислорода. В некоторых воплощениях, R₁’ выбирают из группы, состоящей из Н, метила, этила, изопропила, трет-бутила, F, Cl, CF₃, CHF₂, -OCH₃, -OCH₂CH₃, -O-(изопропил) или –О-(трет-бутил). Более предпочтительно, R₁’ означает Н. Или, R₁’ означает метил. Или, R₁’ означает этил. Или, R₁’ означает СF₃.

В некоторых воплощениях, R₁” выбирают из группы, состоящей из Н, С_1-6-алифатической группы, галогена, CF₃, CHF₂, -О(С_1-6-алифатическая группа). В некоторых воплощениях, R₁” выбирают из группы, состоящей из Н, метила, этила, изопропила, трет-бутила, F, Cl, CF₃, CHF₂, -OCH₃, -OCH₂CH₃, -O-(изопропил) или –О-(трет-бутил). Более предпочтительно, R₁” означает Н. Или, R₁” означает метил. Или, R₁” означает этил. Или, R₁” означает СF₃.

В некоторых воплощениях, R^D1 связан с углеродом в положении 3” или 4” и означает –Z^DR₉; где каждый Z^D независимо означает связь или необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-6-алифатическую цепь, где вплоть до двух атомов углерода Z^D необязательно и независимо заменены на –СО-, -CS-, -CONR^Е-, -CONR^ЕNR^Е-, -CO₂-, -OCO-, -NR^ЕCO₂-, -O-, -NR^ЕCONR^Е-, -OCONR^Е-, -NR^ЕNR^Е-, -NR^ЕCO-, -S-, -SO-, -SO₂-, -NR^Е-, -SO₂NR^Е-, -NR^ЕSO₂- или –NR^ЕSO₂NR^Е-. В еще некоторых воплощениях, Z^D независимо означает связь или необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-6-алифатическую цепь, где один атом углерода Z^D необязательно заменен на –СО-, -SО-, -SO₂-, -СОО-, -ОСО-, -CONR^Е-, -NR^ЕСО-, -NR^ЕCO₂-, -O-, -NR^ЕSO₂- или –SO₂NR^Е-. В некоторых воплощениях, один атом углерода Z^D необязательно заменен на –СО-. Или, на –SO-. Или, на –SO₂-. Или, на –СОО-. Или, на –ОСО-. Или, на -CONR^Е-. Или, на -NR^ЕСО-. Или, на -NR^ЕCO₂-. Или, на -O-. Или, на -NR^ЕSO₂-. Или, на –SO₂NR^Е-.

В некоторых воплощениях, R₉ означает водород, галоген, -ОН, -NH₂, -CN, -CF₃ или –OCF₃ или необязательно замещенную группу, выбираемую из группы, состоящей из С_1-6-алифатической группы, С_3-8-циклоалкифатической группы, 3-8-членной гетероциклоалифатической группы, С_6-10-арила и 5-10-членного гетероарила. В некоторых примерах, R₉ означает водород, F, Cl, -OH, -CN, -CF₃ или –OCF₃. В некоторых воплощениях, R₉ означает С_1-6-алифатическую группу, С_3-8-циклоалифатическую группу, 3-8-членную гетероциклоалифатическую группу, С_6-10-арил и 5-10-членный гетероарил, каждый из которых необязательно замещен 1 или 2 заместителями, независимо выбираемыми из группы, состоящей из R^E, оксогруппы, галогена, -ОН, -NR^ER^E, -OR^E, -COOR^E и –CONR^ER^E. В некоторых примерах, R₉ необязательно замещен 1 или 2 заместителями, независимо выбираемыми из группы, состоящей из оксогруппы, F, Cl, метила, этила, изопропила, трет-бутила, -СН₂ОН, -СН₂СН₂ОН, -С(О)ОН, -С(О)NH₂, -СН₂О(С_1-6-алкил), -СН₂СН₂О(С_1-6-алкил) и –С(О)(С_1-6-алкил).

В одном воплощении, R₉ означает водород. В некоторых воплощениях, R₉ выбирают из группы, состоящей из линейного или разветвленного С_1-6-алкила или линейного или разветвленного С_2-6-алкенила; где вышеуказанный алкил или алкенил необязательно замещен с помощью 1 или 2 заместителей, независимо выбираемых из группы, состоящей из R^E, оксогруппы, галогена, -ОН, -NR^ER^E, -OR^E, -COOR^E и –CONR^ER^E.

В некоторых воплощениях, R₉ означает С_3-8-циклоалифатическую группу, необязательно замещенную с помощью 1 или 2 заместителей, независимо выбираемых из группы, состоящей из R^E, оксогруппы, галогена, -ОН, -NR^ER^E, -OR^E, -COOR^E и –CONR^ER^E. Примеры циклоалифатической группы включают, но не исчерпывающим образом, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил.

В еще других воплощениях, R₉ означает 3-8-членную гетероциклическую группу с 1 или 2 гетероатомами, независимо выбираемыми из группы, состоящей из О, NH, NR^E и S; где вышеуказанная гетероциклическая группа необязательно замещена с помощью 1 или 2 заместителей, независимо выбираемых из группы, состоящей из R^E, оксогруппы, галогена, -ОН, -NR^ER^E, -OR^E, -COOR^E и –CONR^ER^E. Примеры 3-8-членной гетероциклической группы включают, но не исчерпывающим образом,

В еще некоторых других воплощениях, R₉ означает необязательно замещенный 5-8-членный гетероарил с одним или двумя атомами цикла, независимо выбираемыми из группы, состоящей из О, S и NR^E. Примеры 5-8-членного гетероарила включают, но не исчерпывающим образом,

В некоторых воплощениях, R^D1 и R^D2, взятые вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют необязательно замещенный 4-8-членный насыщенный, частично ненасыщенный или ароматический цикл с 0-2 атомами цикла, независимо выбираемыми из группы, состоящей из О, NH, NR^E и S. Примеры R^D1 и R^D2, взятых вместе с фенилом, содержащим атомы углерода в положениях 3” и 4”, включают, но не исчерпывающим образом,

В некоторых воплощениях, R^D2 выбирают из группы, состоящей из Н, R^E, галогена, -ОН, -(СН₂)_rNR^ER^E, -(CH₂)_r-OR^E, -SO₂-R^E, -NR^E-SO₂-R^E, -SO₂NR^ER^E, -C(O)R^E, -C(O)OR^E, -OC(O)OR^E, -NR^EC(O)OR^E и –C(O)NR^ER^E; где r означает 0, 1 или 2. В других воплощениях, R^D2 выбирают из группы, состоящей из Н, С_1-6-алифатической группы, галогена, -CN, -NH₂, NH(С_1-6-алифатический радикал), -N(С_1-6-алифатический радикал)₂, -СН₂-N(С_1-6-алифатический радикал)₂, -CH₂-NH(С_1-6-алифатический радикал), -СН₂NH₂, -OH, -O(С_1-6-алифатический радикал), -СН₂ОН, –СН₂-О(С_1-6-алифатический радикал), -SO₂(С_1-6-алифатический радикал), -N(С_1-6-алифатический радикал)-SO₂(С_1-6-алифатический радикал), -NH-SO₂(С_1-6-алифатический радикал), -SO₂NH₂, -SO₂NH(С_1-6-алифатический радикал), -SO₂N(С_1-6-алифатический радикал)₂, -C(O)(С_1-6-алифатический радикал), -C(O)O(С_1-6-алифатический радикал), -C(O)OH, -OC(O)O(С_1-6-алифатический радикал), -NHC(O)(С_1-6-алифатический радикал), -NHC(O)O(С_1-6-алифатический радикал), -N(С_1-6-алифатический радикал)C(O)O(С_1-6-алифатический радикал), -NHC(O)(С_1-6-алифатический радикал), -NHC(O)O(С_1-6-алифатический радикал), -N(С_1-6-алифатический радикал)C(O)O(С_1-6-алифатический радикал), -C(O)NH₂ и –C(O)N(С_1-6-алифатический радикал)₂. В некоторых примерах, R^D2 выбирают из группы, состоящей из Н, С_1-6-алифатической группы, галогена, -CN, -NH₂, -CH₂NH₂, -OH, -O(С_1-6-алифатический радикал), -CH₂OH, -SO₂(С_1-6-алифатический радикал), -NH-SO₂(С_1-6-алифатический радикал), -C(O)O(С_1-6-алифатический радикал), -C(O)OH, -NHC(O)(С_1-6-алифатический радикал), -C(O)NH₂, -C(O)NH(С_1-6-алифатический радикал) и –C(O)N(С_1-6-алифатический радикал)₂. Например, R^D2 выбирают из группы, состоящей из Н, метила, этила, н-пропила, изопропила, трет-бутила, F, Cl, -NH₂, -CH₂NH₂, -OH, -OCH₃, О-(этил), -O-(изопропил), –О-(н-пропил), -СН₂ОН, -SO₂CH₃, -NH-SO₂CH₃, -C(O)OCH₃, -C(O)OCH₂CH₃, -C(O)OH, -NHC(O)CH₃, -C(O)NH₂ и –C(O)N(CH₃)₂. В одном воплощении, R^D2 означает водород. В другом воплощении, R^D2 означает метил. Или, R^D2 означает этил. Или, R^D2 означает F. Или, R^D2 означает Cl. Или, R^D2 означает –ОСН₃.

В одном воплощении, настоящее изобретение относится к соединениям формулы (VI-A-i) или формулы (VI-A-ii):

где Т, R^D1, R^D2 и R₁’ имеют вышеуказанные значения.

В одном воплощении, Т означает –СН₂-, -CF₂- или -C(CH₃)₂-.

В одном воплощении, R₁’ выбирают из группы, состоящей из Н, С_1-6-алифатической группы, галогена, CF₃, CHF₂, -O(C_1-6-алифатический радикал), (С₃-С₅)-циклоалкила или (С₄-С₆)-гетероциклоалкила, содержащего один атом кислорода. Типичные воплощения включают Н, метил, этил, изопропил, трет-бутил, F, Cl, CF₃, CHF₂, -OCH₃, -OCH₂CH₃, -O-(изопропил), -О-(трет-бутил), циклопропил или оксетанил. Более предпочтительно, R₁’ означает Н. Или, R₁’ означает метил. Или, R₁’ означает этил. Или, R₁’ означает СF₃. Или, R₁’ означает оксетанил.

В одном воплощении, R^D1 означает Z^DR₉, где Z^D выбирают из CONH, NHCO, SO₂NH, SO₂N(C_1-6-алкил), NHSO₂, CH₂NHSO₂, CH₂N(CH₃)SO₂, CH₂NHCO, COO, SO₂ или CO. В одном воплощении, R^D1 означает Z^DR₉, где Z^D выбирают из CONH, SO₂NH, SO₂N(C_1-6-алкил), CH₂NHSO₂, CH₂N(CH₃)SO₂, CH₂NHCO, COO, SO₂ или CO.

В одном воплощении, Z^D означает СОО, и R₉ означает Н. В одном воплощении, Z^D означает СОО, и R9 означает необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-6-алифатическую группу. В одном воплощении, Z^D означает СОО, и R9 означает необязательно замещенный линейный или разветвленный С_1-6-алкил. В одном воплощении, Z^D означает СОО, и R9 означает С_1-6-алкил. В одном воплощении, Z^D означает СОО, и R9 означает метил.

В одном воплощении, Z^D означает СОNH, и R9 означает Н. В одном воплощении, Z^D означает СОNH, и R9 означает необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-6-алифатическую группу. В одном воплощении, Z^D означает СОNH, и R9 означает линейный или разветвленный С_1-6-алкил. В одном воплощении, Z^D означает СОNH, и R9 означает метил. В одном воплощении, Z^D означает СОNH, и R9 означает необязательно замещенный линейный или разветвленный С_1-6-алкил. В одном воплощении, Z^D означает СОNH, и R9 означает 2-(диметиламино)этил.

В некоторых воплощениях, Z^D означает СН₂NHСО, и R9 означает необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-6-алифатическую группу или необязательно замещенный алкоксил. В некоторых воплощениях, Z^D означает СН₂NHСО, и R9 означает линейный или разветвленный С_1-6-алкил, необязательно замещенный галогеном, оксогруппой, гидроксилом, или необязательно замещенную группу, выбираемую из алифатической группы, циклической группы, арила, гетероарила, алкоксила, аминогруппы, карбоксила или карбонила. В одном воплощении, Z^D означает СН₂NHСО, и R9 означает метил. В одном воплощении, Z^D означает СН₂NHСО, и R9 означает CF₃. В одном воплощении, Z^D означает СН₂NHСО, и R9 означает трет-бутоксигруппу.

В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает Н. В некоторых воплощениях, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-6-алифатическую группу. В некоторых воплощениях, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает линейный или разветвленный С_1-6-алкил, необязательно замещенный галогеном, оксогруппой, гидроксилом, или необязательно замещенную группу, выбираемую из С_1-6-алифатической группы, 3-8-членной циклической группы, С_6-10-арила, 5-8-членного гетероарила, алкоксила, аминогруппы, амидогруппы, карбоксила или карбонила. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает метил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает изопропил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает трет-бутил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает 3,3-диметилбутил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает СН₂СН₂ОН. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает СН(СН₃)СН₂ОН. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает СН₂СН(СН₃)ОН. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает СН(СН₂ОН)₂. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает СН₂СН(ОН)СН₂ОН. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает СН₂СН(ОН)СН₂СН₃. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает С(СН₃)₂СН₂ОН. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает СН(СН₂СН₃)СН₂ОН. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает СН₂СН₂ОСН₂СН₂ОН. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает С(СН₃)(СН₂ОН)₂. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает СН₂СН(ОН)СН₂С(О)ОН. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает СН₂СН₂N(CH₃)₂. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает СН₂СН₂NHC(O)CH₃. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает СН(СН(СН₃)₂)СН₂ОН. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает СН(СН₂СН₂СН₃)СН₂ОН. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает 1-тетрагидрофурилметил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает фурилметил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает (5-метилфурил)метил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает 2-пирролидинилэтил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает 2-(1-метилпирролидинил)этил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает 2-(4-морфолинил)этил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает 3-(4-морфолинил)пропил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает С(СН₂СН₃)(СН₂ОН)₂. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает 2-(1Н-имидазол-4-ил)этил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает 3-(1Н-имидазол-1-ил)пропил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает 2-(2-пиридинил)этил.

В некоторых воплощениях, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает необязательно замещенную С_3-6-циклоалифатическую группу. В некоторых примерах, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает необязательно замещенный С_3-6-циклоалкил. В некоторых примерах, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает С_3-6-циклоалкил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает циклобутил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает циклопентил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂NH, и R9 означает циклогексил.

В некоторых воплощениях, Z^D означает SO₂N(С_1-6-алкил), и R9 означает необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-6-алифатическую группу или необязательно замещенную циклоалифатическую группу. В некоторых воплощениях, Z^D означает SO₂N(С_1-6-алкил), и R9 означает необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-6-алифатическую группу. В некоторых воплощениях, Z^D означает SO₂N(С_1-6-алкил), и R9 означает необязательно замещенный линейный или разветвленный С_1-6-алкил или необязательно замещенный линейный или разветвленный С_2-6-алкенил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂N(СН₃), и R9 означает метил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂N(СН₃), и R9 означает н-пропил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂N(СН₃), и R9 означает н-бутил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂N(СН₃), и R9 означает циклогексил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂N(СН₃), и R9 означает аллил. В одном воплощении, Z^D означает SO₂N(СН₃), и R9 означает СН₂СН₂ОН. В одном воплощении, Z^D означает SO₂N(СН₃), и R9 означает СН₂СН(ОН)СН₂ОН. В одном воплощении, Z^D означает SO₂N(СН₂СН₂СН₃), и R9 означает циклопропилметил.

В одном воплощении, Z^D означает СН₂NHSO₂, и R9 означает метил. В одном воплощении, Z^D означает СН₂N(СН₃)SO₂, и R9 означает метил.

В некоторых воплощениях, Z^D означает SO₂, и R9 означает необязательно замещенную линейную или разветвленную С_1-6-алифатическую группу или необязательно замещенную 3-8-членную гетероциклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 члена цикла, выбираемые из группы, состоящей из азота, кислорода, серы, SO или SO₂. В некоторых воплощениях, Z^D означает SO₂, и R9 означает линейную или разветвленную С_1-6-алкильную группу или 3-8-членную гетероциклоалифатическую группу, каждая из которых необязательно замещена 1-, 2- или 3-кратно оксогруппой, атомом галогена, гидроксилом или необязательно замещенной группой, выбираемой из С_1-6-алифатической группы, карбонила, аминогруппы и карбоксила. В одном воплощении, Z^D означает SO₂, и R9 означает метил. В некоторых воплощениях, Z^D означает SO₂ и примеры R₉ включают:

В некоторых воплощениях, R^D2 означает Н, гидроксил, галоген, С_1-6-алкил, С_1-6-алкоксил, С_3-6-циклоалкил или NH₂. В некоторых примерах, R^D2 означает Н, галоген, С_1-4-алкил или С_1-4-алкоксил. Примеры R^D2 включают Н, F, Cl, метил, этил и метоксигруппу.

В некоторых воплощениях, настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I’-A) или формулы (I’-B):

или их фармацевтически приемлемым солям,

где R₁, R₂, R₃, R’₃, R₄ и n имеют вышеуказанные значения.

В некоторых воплощениях, R₁ означает необязательно замещенный арил. В некоторых примерах, R₁ означает фенил, необязательно замещенный 1-, 2- или 3-кратно атомом галогена, ОН, -О-(С_1-6-алифатическим радикалом), аминогруппой, С_1-6-алифатической группой, С_3-7-циклоалифатической группой, 3-8-членной гетероциклоалифатической группой, С_6-10-арильной группой или 5-8-членной гетероарильной группой. В некоторых воплощениях, R₁ означает фенил, необязательно замещенный алкоксилом, галогеном или аминогруппой. В одном воплощении, R₁ означает фенил. В одном воплощении, R₁ означает фенил, замещенный хлором, метоксигруппой, этоксигруппой или диметиламиногруппой.

В некоторых воплощениях, R₂ означает водород. В некоторых воплощениях, R₂ означает необязательно замещенную С_1-6-алифатическую группу.

В некоторых воплощениях, R₃, R’₃ и атом углерода, к которому они присоединены, образуют необязательно замещенную С_3-8-циклоалифатическую группу или необязательно замещенную 3-8-членную гетероциклоалифатическую группу. В некоторых воплощениях, R₃, R’₃ и атом углерода, к которому они присоединены, образуют необязательно замещенный С_3-8-циклоалкил. В одном примере, R₃, R’₃ и атом углерода, к которому они присоединены, означают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил или циклогептил, каждый из которых необязательно замещен. В одном примере, R₃, R’₃ и атом углерода, к которому они присоединены, означают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил или циклогептил. В некоторых примерах, R₃, R’₃ и атом углерода, к которому они присоединены, означают циклопропил.

В некоторых воплощениях, R₄ означает необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил. В некоторых воплощениях, R₄ означает необязательно замещенный фенил. В некоторых воплощениях, R₄ означает фенил, конденсированный с 3-, 4-, 5- или 6-членным гетероциклом, имеющим 1, 2 или 3 члена цикла, выбираемых из кислорода, серы и азота. В некоторых воплощениях, R₄ означает

где Т имеет вышеуказанное значение. В некоторых примерах, Т означает –СН₂-.

Альтернативные воплощения R₁, R₂, R₃, R’₃, R₄ и n в формуле (I’-A) и в формуле (I’-B) являются такими, как указано в случае формулы (I), формулы (I’) и их воплощениях.

Типичные соединения согласно настоящему изобретению включают, но не исчерпывающим образом, соединения, указанные в нижеприводимой таблице 1.

Таблица 1 Примеры соединений согласно настоящему изобретению

Схемы синтеза

Соединения согласно изобретению могут быть получены известными способами или как проиллюстрировано в примерах. В одном примере, где R₁ означает арил или гетероарил, соединения согласно изобретению могут быть получены как проиллюстрировано на схеме I.

Схема I

а) 50% NaOH, X-R₃-R’₃-Y, BTEAC; X, Y = удаляемая группа; b) SOCl₂, ДМФА; с) пиридин; d) R₁-B(OR)₂, Pd(dppf)Cl₂, K₂CO₃, ДМФА, Н₂О

Схема II

а) Pd(PPh₃)₄, CO, MeOH; b) LiAlH₄, ТГФ; с) SOCl₂; d) NaCN; e) NBS или NCS, АИБН, СХ₄ (Х=Вr или Cl)

Схема III

а) пиридин, ДХМ; b) R₁-B(OR)₂, Pd(dppf)Cl₂, K₂CO₃, ДМФА, Н₂О

Схема IV

а) пиридин, ДХМ; b) R₁-B(OR)₂, Pd(dppf)Cl₂, K₂CO₃, ДМФА, Н₂О

Согласно схеме I, нитрил формулы (i) алкилируют (стадия а) с помощью дигалогеналифатического соединения в присутствии основания, такого, как, например, 50%-ный гидроксид натрия, и, необязательно, межфазного реагента, такого как, например бензилтриэтиламмонийхлорид (ВТЕАС), получая соответствующий алкилированный нитрил (не представлен), который при гидролизе дает кислоту (ii). Соединения формулы (ii) превращают в хлорангидрид кислоты (iii) при использовании подходящего реагента, такого как, например, тионилхлорид/ДМФА. Реакция хлорангидрида кислоты (iii) c аминопиридином, где Х означает галоген, формулы (iv) (стадия с) приводит к амиду формулы (v). Путем реакции амида (v) с необязательно замещенным производным бороновой кислоты (стадия d) в присутствии катализатора, такого как, например, ацетат палладия или дихлор[1,1-бис(дифенилфосфино)ферроцен] палладий-(II) (Pd(dppf)Cl₂), получают соединения согласно изобретению, где R₁ означает арил, гетероарил или циклоалкенил. Производные бороновой кислоты (vi) коммерчески доступны или могут быть получены известными способами, такими, как реакция арилбромида со сложным диборановым эфиром в присутствии связывающего агента, такого, как, например, ацетат палладия, как описано в примерах.

В другом примере, где один R₁ означает арил, а другой R₁ означает алифатическую, алкоксильную, циклоалифатическую или гетероциклоалифатическую группу, соединения согласно изобретению могут быть получены как описывается в случае стадий а, b и c схемы I, используя соответствующим образом замещенный аминопиридин, такой, как

где Х означает галоген и Q означает С_1-6-алифатическую группу, арил, гетероарил или 3-10-членную циклоалифатическую или гетероциклоалифатическую группу в качестве заместителя аминопиридина формулы (iv).

Приготовления лекарственных средств, введения и применения

Фармацевтически приемлемые композиции

Соответственно, согласно другому аспекту, настоящее изобретение относится к фармацевтически приемлемым композициям, где эти композиции включают любое из соединений, как описанные выше, и необязательно содержат фармацевтически приемлемый носитель, адъювант или наполнитель. В некоторых воплощениях, эти композиции, далее, необязательно включают один или более дополнительных терапевтических агентов.

Также должно быть понятно, что некоторые из соединений согласно настоящему изобретению могут существовать в свободной форме для лечения или, где соответствует, в виде их фармацевтически приемлемого производного или пролекарства. Согласно настоящему изобретению, фармацевтически приемлемое производное или пролекарство включает, но не исчерпывающим образом, фармацевтически приемлемые соли, сложные эфиры, соли таких сложных эфиров, или любой другой аддукт или производное, которое после введения нуждающемуся в нем пациенту способно давать, прямо или непрямо, соединение, как иным образом описанное в данном контексте, или его метаболит или его остаток.

Как используется в данном контексте, термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к таким солям, которые, в рамках надежной с медицинской точки зрения оценки, являются подходящими для применения в контакте с тканями людей и низших животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергического ответа и т.п. и соразмерны с приемлемым соотношением польза/риск. Термин «фармацевтически приемлемая соль» означает любую нетоксичную соль или соль сложного эфира соединения согласно данному изобретению, которая, после введения реципиенту, способна давать, прямо или непрямо, соединение согласно данному изобретению или его ингибирующие активный метаболит или его остаток.

Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны в уровне техники. Например, S.M. Berg и др. подробно описывают фармацевтически приемлемые соли в статье J. Pharmaceutical Sciences, 66, 1-19 (1977), включенной в данный контекст путем ссылки. Фармацевтически приемлемые соли соединений согласно данному изобретению включают соли, производные подходящих неорганических и органических кислот и оснований. Примерами фармацевтически приемлемых, нетоксичных аддитивных солей являются соли по аминогруппе, образуемые с неорганическими кислотами, такими, как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота и хлорная кислота, или с органическими кислотами, такими, как уксусная кислота, щавелевая кислота, малеиновая кислота, винная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота или малоновая кислота, или при использовании других способов, применяемых в уровне техники, таких, как ионный обмен. Другие фармацевтически приемлемые соли включают адипат, альгинат, аскорбат, аспартат, бензолсульфонат, бензоат, бисульфат, борат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, цитрат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, формиат, фумарат, глюкогептаноат, глицерофосфат, глюконат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гидроиодид, 2-гидроксиэтансульфонат, лактобионат, лактат, лаурат, лаурилсульфат, малат, малеат, малонат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, фосфат, пикрат, пивалат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, п-толуолсульфонат, ундеканоат, валерат и т.п. Соли, производные соответствующих оснований, включают соли щелочного металла, щелочноземельного металла, аммония и N⁺(С_1-4-алкил)₄. Согласно настоящему изобретению также предусматривается кватернизация любых основных азотсодержащих групп соединений, описываемых в данном контексте. Водные или маслорастворимые или диспергируемые продукты могут быть получены путем такой кватернизации. Типичные соли щелочных или щелочноземельных металлов включают соли натрия, лития, калия, кальция, магния и т.п. Далее, фармацевтически приемлемые соли включают, когда соответствует, нетоксичные катионы аммония, четвертичного аммония и амина, образованные за счет использования противоионов, таких как галогенид, гидроксид, карбоксилат, сульфат, фосфат, нитрат, (низший алкил)сульфонат и арилсульфонат.

Как описано выше, фармацевтически приемлемые композиции согласно настоящему изобретению дополнительно включают фармацевтически приемлемый носитель, адъювант или наполнитель, который, как используется согласно данному контексту, включает любой и все растворители, разбавители или другие жидкие наполнители, диспергаторы или суспендирующие добавки, поверхностно-активные вещества, изотонические агенты, загустители или эмульгаторы, консерванты, твердые связующие вещества, лубриканты и т.п., которые подходят для конкретной желательной дозированной формы. В руководствах Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21-е издание, 2005 г., ред. D.B. Troy, Lippincott Williams и Wilkins, Филадельфия, и Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, ред. J.Swarbrick и J.C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekker, Нью-Йорк, содержания каждого из которых включены в данный контекст путем ссылки, раскрываются различные носители, используемые в получаемых фармацевтически приемлемых композициях, и известные способы их получения. За исключением того, когда любая обычная среда в качестве носителя несовместима с соединениями согласно изобретению, как например за счет продуцирования любого нежелательного биологического эффекта или иного способа взаимодействия вредным образом с любым другим компонентом (компонентами) фармацевтически приемлемой композиции, предполагают, что их использование входит в объем настоящего изобретения. Некоторые примеры веществ, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают, но не исчерпывающим образом, ионообменники, оксид алюминия, стеарат алюминия, лецитин, сывороточные белки, такие, как человеческий сывороточный альбумин, буферные вещества, такие как фосфаты, глицин, сорбиновую кислоту или сорбат калия, смеси неполных глицеридов насыщенных растительных жирных кислот, воду, соли или электролиты, такие, как протаминсульфат, динатрийгидрофосфат, гидрофосфат калия, хлорид натрия, соли цинка, коллоидный кремнезем, трисиликат магния, поливинилпирролидон, полиакрилаты, воски, полиэтилен-полиоксипропиленовые блоксополимеры, ланолин, сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлозу и ее производные, такие как натрийкарбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; измельченный трагакант; солод; желатин; тальк; эксципиенты, такие как масло какао и воски для суппозиториев; масла, такие, как арахисовое масло, хлопковое масло, сафлоровое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; гликоли, такие как пропиленгликоль или полиэтиленгликоль; сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; агар; забуферивающие агенты, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; альгиновую кислоту; непирогенную воду; изотонический солевой раствор; раствор Рингера; этиловый спирт и фосфатные буферные растворы, а также другие нетоксичные совместимые лубриканты, такие как лаурилсульфат натрия и стеарат магния, также как красители, высвобождающие агенты, агенты для покрытия, подсластители, вкусовые добавки и ароматизирующие добавки, консерванты и антиоксиданты также могут находиться в композиции, по усмотрению изготовителя.

Применения соединений и фармацевтически приемлемых

композиций

В еще одном аспекте, настоящее изобретение относится к способу лечения состояния, заболевания или нарушения, к которому причастна активность АВС-транспортера. В некоторых воплощениях, настоящее изобретение относится к способу лечения состояния, заболевания или нарушения, к которому причастен дефицит активности АВС-транспортера, способу, включающему введение содержащей соединение формул (I, II, III, IV, V-A, V-B, I’, I’-A и I’-B) композиции субъекту, предпочтительно, млекопитающему, нуждающемуся в этом.

В некоторых предпочтительных воплощениях, настоящее изобретение относится к способу лечения муковисцидоза, наследственной эмфиземы, наследственного гемохроматоза, дефицитов коагуляции-фибринолиза, как например дефицита белка С, наследственной болезни Квинке типа 1, дефицитов процессирования липидов, как например семейной гиперхолестеринемии, хиломикронемии типа 1, абеталипопротеинемии, связанных с аккумуляцией лизосом заболеваний, как например болезни клеточных включений/псевдосиндром Гурлера, мукополисахаридозов, болезни Сандхоффа/Тея-Сакса, синдрома Криглера-Найяра типа II, полиэндокринопатии/гиперинсулинемии, сахарного диабета, карликовости лароновского типа, дефицита милеопероксидазы, первичного гипопаратиреоидизма, меланомы, гликаноза CDG типа 1, наследственной эмфиземы, врожденного гипертиреоидизма, несовершенного остеогенеза, наследственной гипофибриногенемии, дефицита АСТ, несахарного диабета (DI), нейрофизеального DI, непрогенного DI, синдрома Шарко-Мари-Тута, болезни Перлизауса-Мерцбахера, нейродегенеративных заболеваний, как например болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, бокового амиотрофического склероза, прогрессирующей надъядерной плазии, болезни Пика, тяжелых полиглутаминовых неврологических нарушений, как например болезни Гентингтона, относящейся к спинному мозгу и мозжечку атаксии типа I, спинальной и бульбарной мышечной атрофии, дентаторубального паллидолуизиана и миотонической дистрофии, а также губковидных энцефалопатий, как например наследственной болезни Крейцфельда-Якоба (обусловленной дефектом процессирования прионового белка), болезни Фабри, синдрома Страусслера-Шейнкера, секреторной диареи, поликистоза почек, хронического обструктивного заболевания легких (COPD), болезни «сухой глаз» и синдрома Шегрена, включающему стадию введения вышеуказанному млекопитающему эффективного количества композиции, содержащей соединение формул (I, II, III, IV, V-A, V-B, I’, I’-A и I’-B), или его предпочтительное воплощение, как изложено выше.

Согласно альтернативному предпочтительному воплощению, настоящее изобретение относится к способу лечения муковисцидоза, включающему стадию введения вышеуказанному млекопитающему эффективного количества композиции, содержащей соединение формул (I, II, III, IV, V-A, V-B, I’, I’-A и I’-B), или его предпочтительное воплощение, как изложено выше.

Согласно настоящему изобретению, термин «эффективное количество» соединения или фармацевтически приемлемой композиции означает количество, эффективное для лечения или ослабления тяжести одного или более заболеваний, как муковисцидоз, наследственная эмфизема, наследственный гемохроматоз, дефициты коагуляции-фибринолиза, как например дефицит белка С, наследственная болезнь Квинке типа 1, дефициты процессирования липидов, как например семейная гиперхолестеринемия, хиломикронемия типа 1, абеталипопротеинемия, связанные с аккумуляцией лизосом заболевания, как например болезнь клеточных включений/псевдосиндром Гурлера, мукополисахаридозы, болезнь Сандхоффа/Тея-Сакса, синдром Криглера-Найяра типа II, полиэндокринопатия/гиперинсулинемия, сахарный диабет, карликовость лароновского типа, дефицит милеопероксидазы, первичный гипопаратиреоидизм, меланома, гликаноз CDG типа 1, наследственная эмфизема, врожденный гипертиреоидизм, несовершенный остеогенез, наследственная гипофибриногенемия, дефицит АСТ, несахарный диабет (DI), нейрофизеальный DI, непрогенный DI, синдром Шарко-Мари-Тута, болезнь Перлизауса-Мерцбахера, нейродегенеративные заболевания, как например болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, боковой амиотрофический склероз, прогрессирующая надъядерная плазия, болезнь Пика, тяжелые полиглутаминовые неврологические нарушения, как например болезнь Гентингтона, относящаяся к спинному мозгу и мозжечку атаксия типа I, спинальная и бульбарная мышечная атрофия, дентаторубальный паллидолуизиан и миотоническая дистрофия, а также губковидные энцефалопатии, как например наследственная болезнь Крейцфельда-Якоба, болезнь Фабри, синдром Страусслера-Шейнкера, секреторная диареи, поликистоз почек, хроническое обструктивное заболевание легких (COPD), болезнь «сухой глаз» и синдром Шегрена.

Соединения и композиции, в соответствии со способом согласно настоящему изобретению, могут быть введены, используя любое количество и любой путь введения, эффективные для лечения или ослабления тяжести одного или более заболеваний, как муковисцидоз, наследственная эмфизема, наследственный гемохроматоз, дефициты коагуляции-фибринолиза, как например дефицит белка С, наследственная болезни Квинке типа 1, дефициты процессирования липидов, как например семейная гиперхолестеринемия, хиломикронемия типа 1, абеталипопротеинемия, связанные с аккумуляцией лизосом заболевания, как например болезнь клеточных включений/псевдосиндром Гурлера, мукополисахаридозы, болезнь Сандхоффа/Тея-Сакса, синдром Криглера-Найяра типа II, полиэндокринопатия/гиперинсулинемия, сахарный диабет, карликовость лароновского типа, дефицит милеопероксидазы, первичный гипопаратиреоидизм, меланома, гликаноз CDG типа 1, наследственная эмфизема, врожденный гипертиреоидизм, несовершенный остеогенез, наследственная гипофибриногенемия, дефицит АСТ, несахарный диабет (DI), нейрофизеальный DI, непрогенный DI, синдром Шарко-Мари-Тута, болезнь Перлизауса-Мерцбахера, нейродегенеративные заболевания, как например болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, боковой амиотрофический склероз, прогрессирующая надъядерная плазия, болезнь Пика, тяжелые полиглутаминовые неврологические нарушения, как например болезнь Гентингтона, относящаяся к спинному мозгу и мозжечку атаксия типа I, спинальная и бульбарная мышечная атрофия, дентаторубальный паллидолуизиан и миотоническая дистрофия, а также губковидные энцефалопатии, как например наследственная болезнь Крейцфельда-Якоба, болезнь Фабри, синдром Страусслера-Шейнкера, секреторная диареи, поликистоз почек, хроническое обструктивное заболевание легких (COPD), болезнь «сухой глаз» и синдром Шегрена.

Требующееся точное количество изменяется от субъекта к субъекту в зависимости от вида, возраста и общего состояния субъекта, тяжести инфекции, конкретного средства, способа его введения и т.п. Соединения согласно изобретению предпочтительно используют для получения лекарственного средства в единичной дозированной форме для облегчения введения и единообразия дозировки. Выражение «единичная дозированная форма», как используемое в данном контексте, относится к физически дискретной единице соответствующего агента для пациента, подвергаемого лечению. Должно быть понятно, однако, что общий суточный прием соединений и композиций согласно настоящему изобретению должен быть определен штатным врачом в рамках надежной с медицинской точки зрения оценки. Уровень конкретной эффективной дозы для любого конкретного пациента или организма зависит от множества факторов, включая нарушение, которое нужно лечить, и тяжесть нарушения, активность конкретного используемого соединения, используемую конкретную композицию, возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол и диету пациента, время введения, путь введения и скорость выделения используемого конкретного соединения, продолжительность лечения; лекарственные средства, используемые в комбинации или совмещении с используемым конкретным соединением, и подобные факторы, хорошо известные в медицинской практике. Термин «пациент», как используется в данном контексте, означает животное, предпочтительно, млекопитающее и, наиболее предпочтительно, человек.

Фармацевтически приемлемые композиции согласно настоящему изобретению могут быть введены людям и другим животным орально, ректально, парентерально, интрацистернально, интравагинально, интраперитонеально, местно (в виде порошков, мазей или капель), буккально, в виде орального или назального спрея, или тому подобным образом, в зависимости от тяжести инфекции, подвергаемой лечению. В некоторых воплощениях, соединения согласно изобретению могут быть введены орально или парентерально при уровнях дозировок от примерно 0,01 мг/кг до примерно 50 мг/кг и, предпочтительно, от примерно 1 мг/кг до примерно 25 мг/кг массы тела субъекта в сутки, один или более раз в сутки, для достижения желательного терапевтического эффекта.

Жидкие дозированные формы для орального введения включают, но не исчерпывающим образом, фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. В дополнение к активным соединениям, жидкие дозированные формы могут содержать инертные разбавители, обычно используемые в уровне техники, такие как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие агенты и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла (в особенности, хлопковое масло, арахисовое масло, кукурузное масло, масло из пшеничных зародышей, оливковое масло, касторовое масло и кунжутное масло), глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сорбитановые эфиры жирных кислот, и их смеси. Кроме инертных разбавителей, пероральные композиции также могут включать адъюванты, такие как увлажняющие компоненты, эмульгаторы и суспендирующие агенты, подсластители, ароматизаторы и ароматизирующие добавки.

Инъецируемые препараты, например, стерильные инъецируемые водные или масляные суспензии, могут быть получены в соответствии с известным уровнем техники, используя подходящие диспергаторы или увлажняющие компоненты и суспендирующие агенты. Стерильный инъецируемый препарат также может представлять собой стерильный инъецируемый раствор, суспензию или эмульсию в нетоксичном, парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например, как раствор в 1,3-бутандиоле. К числу приемлемых наполнителей и растворителей, которые могут быть использованы, относятся вода, раствор Рингера, Фармакопея США, и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, в качестве растворителя или суспендирующего агента обычно используют стерильные нелетучие масла. Для этой цели, может быть использовано любое легкое нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, при приготовлении инъецируемых препаратов используют жирные кислоты, такие как олеиновая кислота.

Инъецируемые препараты могут быть стерилизованы, например, путем фильтрации через бактериально-удерживающий фильтр или путем включения стерилизующих агентов в форму стерильных твердых композиций, которые могут быть растворены или диспергированы в стерильной воде или другой стерильной инъецируемой среде до использования.

Для пролонгирования эффекта соединения согласно настоящему изобретению, часто желательно замедлять абсорбцию соединения из подкожной или внутримышечной инъекции. Это может быть достигнуто за счет использования жидкой суспензии кристаллического или аморфного вещества с плохой растворимостью в воде. Скорость абсорбции соединения, кроме того, зависит от его скорости растворения, которая, в свою очередь, может зависеть от размера кристалла и кристаллической формы. Альтернативно, отсроченная абсорбция парентерально введенной формы соединения достигается за счет растворения или суспендирования соединения в масляном наполнителе. Инъецируемые депо-формы получают за счет образующихся микроинкапсулированных матриц соединения в биоразлагающихся полимерах, таких как полилактид-полигликолид. В зависимости от соотношения соединения к полимеру и природы конкретно используемого полимера, скорость высвобождения соединения может быть контролируемой. Примеры других биоразлагающихся полимеров включают сложные поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды). Инъецируемые депо препараты также получают путем улавливания соединения в липосомах или микроэмульсиях, совместимых с тканями организма.

Композиции для ректального или вагинального введения представляют собой предпочтительно суппозитории, которые могут быть получены путем смешения соединений согласно данному изобретению с подходящими, не вызывающими раздражения эксципиентами или носителями, такими как масло какао, полиэтиленгликоль или свечной воск, которые являются твердыми при комнатной температуре, но жидкими при температуре тела и поэтому расплавляются в прямой кишке или вагинальной полости и высвобождают активное соединение.

Твердые дозированные формы для орального введения включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых дозированных формах активное соединение смешано с, по меньшей мере, одним инертным, фармацевтически приемлемым эксципиентом или носителем, таким как цитрат натрия или дикальцийфосфат и/или а) наполнители или разбавители, такие как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и кремниевая кислота; b) связующие вещества, такие как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и гуммиарабик; с) смачивающие средства, такие как глицерин; d) дезинтегрирующие агенты, такие, как агар-агар, карбонат кальция, картофельный или маниоковый крахмал, альгиновая кислота, некоторые силикаты и карбонат натрия; е) замедляющие растворение агенты, такие как парафин; f) ускорители абсорбции, такие как четвертичные аммониевые соединения; g) увлажняющие средства, такие как, например, цетиловый спирт и глицеринмоностеарат; h) абсорбенты, такие как каолиновая и бентонитовая глина; и i) лубриканты, такие как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия, и их смеси. В случае капсул, таблеток и пилюлей, дозированная форма может также включать забуферивающие агенты.

Также могут быть использованы твердые композиции подобного типа в качестве наполнителей в заполняемых мягких и твердых желатиновых капсулах, используя такие эксципиенты, как лактоза или молочный сахар, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и т.п. Твердые дозированные формы в виде таблеток, драже, капсул, пилюль и гранул могут быть получены с нанесенными покрытиями и оболочками, такими, как энтеросолюбильные покрытия и другие покрытия, хорошо известные в области получения лекарственных средств. Они могут необязательно содержать опалесцирующие компоненты и также могут быть состава, из которого они высвобождают только активный ингредиент (ингредиенты), или предпочтительно, в какой-либо части кишечника, необязательно, пролонгированным образом. Примеры композиций для заделки, которые могут быть использованы, включают полимерные вещества и воски. Также могут быть использованы твердые композиции подобного типа в качестве наполнителей в заполняемых мягких и твердых желатиновых капсулах, используя такие эксципиенты, как лактоза или молочный сахар, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и т.п.

Активные соединения также могут быть в микроинкапсулированной форме с одним или боле эксципиентами, как указано выше. Твердые дозированные формы в виде таблеток, драже, капсул, пилюль и гранул могут быть получены с нанесенными покрытиями и оболочками, такими, как энтеросолюбильные покрытия, контролирующие высвобождение покрытия и другие покрытия, хорошо известные в области получения лекарственных средств. В таких твердых дозированных формах активное вещество может быть смешано с, по меньшей мере, одним инертным разбавителем, таким как сахароза, лактоза или крахмал. Такие дозированные формы также могут включать, как принято на практике, дополнительные вещества, другие, чем инертные разбавители, как, например, лубриканты для таблетирования и другие вспомогательные для таблетирования средства, как стеарат магния и микрокристаллическая целлюлоза. В случае капсул, таблеток и пилюль, дозированные формы также могут включать забуферивающие агенты. Они могут необязательно содержать опалесцирующие компоненты и также могут быть состава, из которого они высвобождают только активный ингредиент (ингредиенты), или предпочтительно, в какой-либо части кишечника, необязательно, пролонгированным образом. Примеры композиций для заделки, которые могут быть использованы, включают полимерные вещества и воски.

Дозированные формы для местного или трансдермального введения соединения согласно настоящему изобретению включают мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, порошки, растворы, спреи, дозированные формы для ингаляции или пластыри. Активный компонент смешивают, в стерильных условиях, с фармацевтически приемлемым носителем и любыми необходимыми консервантами или буферами, которые могут требоваться. Глазные препараты, ушные капли и глазные капли также рассматривают как входящие в объем настоящего изобретения. Дополнительно, настоящее изобретение также относится к применению трансдермальных пластырей, которые обладают дополнительным преимуществом обеспечения контролируемого высвобождения соединения в организме. Такие дозированные формы получают путем растворения или диспергирования соединения в подходящей среде. Также могут быть использованы усилители абсорбции для увеличения потока соединения через кожу. Скорость может быть контролируема либо за счет использования контролирующей скорость мембраны, либо за счет диспергирования соединения в полимерной матрице или геле.

Как в общих чертах описано выше, соединения согласно изобретению пригодны в качестве модуляторов АВС-транспортеров. Следовательно, не желая прибегать к связыванию с какой-либо конкретной теорией, соединения и композиции в особенности пригодны для лечения или ослабления тяжести заболевания, состояния или нарушения, где гиперактивность или неактивность АВС-транспортеров причастна к заболеванию, состоянию или нарушению. Когда гиперактивность или неактивность АВС-транспортера причастна к конкретному заболеванию, состоянию или нарушению, заболевание, состояние или нарушение также может быть названо как «опосредуемое АВС-транспортером заболевание, состояние или нарушение». Соответственно, в другом аспекте, настоящее изобретение относится к способу лечения или ослабления тяжести заболевания, состояния или нарушения, где гиперактивность или неактивность АВС-транспортера причастна к болезненному состоянию.

Активность соединения, используемого согласно данному изобретению в качестве модулятора АВС-транспортера, может быть определена в соответствии со способами, описанными в общих чертах в уровне техники и в приводимых в данном контексте примерах.

Также должно быть понятно, что соединения и фармацевтически приемлемые композиции согласно настоящему изобретению могут быть использованы в комбинированных терапиях, то есть, соединения и фармацевтически приемлемые композиции могут быть введены совместно с, до или после одного или более других желательных терапевтических средств или медицинских процедур. Конкретную комбинацию терапий (терапевтические средства или процедуры) для использования в комбинированном режиме нужно выбирать в расчете на совместимость желательных терапевтических средств и процедур и желательный терапевтический эффект, который должен быть достигнут. Также должно быть понятно, что с помощью используемых терапий можно достигать желательного эффекта в случае одного и того же нарушения (например, предлагаемое согласно изобретению соединение может быть введено совместно с другим агентом, используемым для лечения того же самого нарушения) или можно достигать других эффектов (например, контролирование любых неблагоприятных эффектов). Как используемые в данном контексте, дополнительные терапевтические агенты, которые обычно вводят для лечения или предотвращения конкретного заболевания или состояния, известны как «подходящие для заболевания или состояния, которое нужно лечить».

Количество дополнительного терапевтического агента, присутствующее в композициях согласно данному изобретению, должно быть не больше, чем количество, которое должно быть обычно введено в композицию, содержащую этот терапевтический агент в качестве единственно терапевтически активного агента. Предпочтительно, количество дополнительного терапевтического агента в раскрываемых в данном контексте композициях должно колебаться в пределах от примерно 50% до 100%, в расчете на количество, обычно присутствующее в композиции, содержащей такой агент в качестве единственно терапевтически активного агента.

Соединения согласно настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемые композиции также могут быть включены в композиции для нанесения покрытия на имплантируемые медицинские приспособления, такие как протезы, искусственные клапаны, васкулярные трансплантаты, стенты и катетеры. Соответственно, настоящее изобретение, в другом аспекте, включает композицию для нанесения покрытия на имплантируемое приспособление, содержащую соединение согласно настоящему изобретению, как, в общем, описанное выше, и в виде классов и подклассов, в данном контексте, и носитель, подходящий на нанесения на вышеуказанное имплантируемое приспособление. В еще другом аспекте, настоящее изобретение включает имплантируемое приспособление с нанесенным покрытием из композиции, содержащей соединение согласно настоящему изобретению, как, в общем, описанное выше, и в виде классов и подклассов, в данном контексте, и носитель, подходящий на нанесения на вышеуказанное имплантируемое приспособление. Подходящие покрытия и общие способы получения имплантируемых приспособлений с нанесенным покрытием описываются в патентах США 6099562, 5886026 и 5304121. Покрытия обычно представляют собой биосовместимые полимерные материалы, такие как полимер в виде гидрогеля, полиметилдисилоксан, поликапролактон, полиэтиленгликоль, полимолочная кислота, сополимер этилена и винилацетата и их смеси. На покрытия, далее, необязательно может быть еще нанесено подходящее покрытие из фторсиликона, полисахаридов, полиэтиленгликоля, фосфолипидов или их комбинаций для придания композиции характеристик контролируемого высвобождения.

Другой аспект изобретения относится к модуляции активности АВС-транспортера в биологическом образце или у пациента (например, in vitro или in vivo), способ достижения которой включает введение пациенту или контактному вышеуказанному биологическому образцу соединения формулы (I) или композиции, включающей вышеуказанное соединение. Термин «биологический образец», как используется в данном контексте, включает, но не исчерпывающим образом, клеточные культуры или их экстракты; биопсийный материал, получаемый от млекопитающего, или его экстракты; и кровь, слюну, мочу, экскременты, сперму, слезы или другие жидкости организма или их экстракты.

Модуляция активности АВС-транспортера в биологическом образце пригодна для множества целей, которые известны специалисту в данной области. Примеры таких целей включают, но не исчерпывающим образом, исследование АВС-транспортеров в случае биологических и патологических симптомов и сравнительную оценку новых модуляторов АВС-транспортеров.

В еще одном другом воплощении, способ модуляции активности анионного канала in vitro или in vivo предусматривает стадию контактирования вышеуказанного канала с соединением формул (I, II, III, V-A, V-B, I’, I’-A и I’-B). В предпочтительных воплощениях, анионным каналом является хлоридный канал или бикарбонатный канал. В других предпочтительных воплощениях, анионным каналом является хлоридный канал.

Согласно альтернативному воплощению, настоящее изобретение относится к способу повышения количества функциональных АВС-транспортеров в мембране клетки, включающему стадию контактирования вышеуказанной клетки с соединением формул (I, II, III, V-A, V-B, I’, I’-A и I’-B). Термин «функциональный АВС-транспортер», как используется в данном контексте, означает АВС-транспортер, который способен к транспортной активности. В предпочтительных воплощениях, вышеуказанным функциональным АВС-транспортером является CFTR.

Согласно другому предпочтительному воплощению, активность АВС-транспортера определяют путем измерения трансмембранного потенциала. Для измерения трансмембранного потенциала в биологическом образце можно использовать любой из известных методов уровня техники, такой, как оптический анализ мембранного потенциала или другие электрофизиологические методы.

В случае оптического анализа трансмембранного потенциала используют потенциалчувствительные FRET-сенсоры, описанные Gonzalez и Tsien (см. Gonzalez J.E. и Tsien R.Y «Voltage sensing by fluorescence resonance energy transfer in single cells», Biophys. J., 69(4), 1272-80 (1995); и Gonzalez J.E. и Tsien R.Y «Improved indicators of cell membrane potential that use fluorescence resonance energy transfer», Chem. Biol., 4(4), 269-77 (1997)), в комбинации с приборным обеспечением для измерения изменений флуоресценции, таким, как Voltage/Ion Probe Reader (VIPR) (см. Gonzalez J.E., Oades K. и др. «Cell-based assays and instrumentation for screening ion-channel targets», Drug. Discov. Today, 4(9), 431-439 (1999)).

Эти потенциалчувствительные анализы базируются на изменении переноса энергии резонанса флуоресценции (FRET) между растворимым в мембране, потенциалчувствительным красителем, DiSBAC₂(3), и флуоресцирующим фосфолипидом, СС2-DMPE, который связан с наружным «листочком» цитоплазматической мембраны и действует как FRET-донор. Изменения мембранного потенциала (V_m) вызывают перераспределение отрицательно заряженного DiSBAC₂(3) в цитоплазматической мембране и изменения переноса количества энергии от СС2-DMPE, соответственно. Изменения эмиссии флуоресценции могут быть отслежены, используя VIPR^TM II, который представляет собой встроенный жидкостной драйвер и флуоресцентный детектор, предназначенный для проведения базирующегося на клетках скрининга при использовании 96-луночных или 384-луночных титрационных микропланшетов.

В другом аспекте, настоящее изобретение относится к набору для применения при измерении активности АВС-транспортера или его фрагмента в биологическом образце in vitro или in vivo, включающему (i) композицию, содержащую соединение формул (I, II, III, V-A, V-B, I’, I’-A и I’-B), или любое из его вышеуказанных воплощений; и (ii) инструкции для а.) контактирования композиции с биологическим образцом и b.) определения активности вышеуказанного АВС-транспортера или его фрагмента. В одном воплощении, набор включает дополнительно инструкции в отношении а.) контактирования дополнительной композиции с биологическим образцом; b.) определения активности вышеуказанного АВС-транспортера или его фрагмента в присутствии вышеуказанного дополнительного соединения и с.) сравнения активности АВС-транспортера в присутствии дополнительного соединения с плотностью АВС-транспортера в присутствии композиции формулы (I, II, III, IV, V-A, V-B, I’, I’-A и I’-B). В предпочтительных воплощениях, набор используют для определения плотности СFTR.

Получения и примеры

Общая методика I

Фрагмент структуры с карбоновой кислотой

Бензилтриэтиламмонийхлорид (0,025 экв.) и соответствующее дигалогенсодержащее соединение (2,5 экв.) добавляют к замещенному фенилацетонитрилу. Смесь нагревают до температуры 70°С и затем к смеси медленно добавляют 50%-ный раствор гидроксида натрия (10 экв.). Реакционную смесь перемешивают при температуре 70°С в течение 12-24 часов для обеспечения завершения образования циклоалкильного остатка и затем нагревают при температуре 130°С в течение 24-48 часов для обеспечения завершения конверсии нитрила в карбоновую кислоту. Реакционную смесь темно-коричневого/черного цвета разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом и затем дихлорметаном, каждый раз трехкратно, для удаления побочных продуктов. Основный водный раствор подкисляют с помощью концентрированной соляной кислоты до рН менее, чем один, и осадок, который начинает образовываться при рН=4, отфильтровывают и два раза промывают 1 М раствором соляной кислоты. Твердый продукт растворяют в дихлорметане и два раза экстрагируют 1 М раствором соляной кислоты и один раз насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический раствор сушат над сульфатом натрия и выпаривают досуха, получая циклоалкилкарбоновую кислоту.

А. 1-Бензо[1,3]диоксол-5-илциклопропанкарбоновая кислота

Смесь бензо[1,3]диоксол-5-ацетонитрила (5,10 г, 31,7 ммоль), 1-бром-2-хлорэтана (9,00 мл, 109 ммоль) и бензилтриэтиламмонийхлорида (0,181 г, 0,795 ммоль) нагревают до температуры 70°С и затем к смеси медленно добавляют 50%-ный (масс./масс.) водный раствор гидроксида натрия (26 мл). Реакционную смесь перемешивают при температуре 70°С в течение 18 часов и затем нагревают при температуре 130°С в течение 24 часов. Реакционную смесь темно-коричневого цвета разбавляют водой (400 мл) и один раз экстрагируют равным объемом этилацетата и один раз равным объемом дихлорметана. Основный водный раствор подкисляют с помощью концентрированной соляной кислоты до рН менее, чем один, и осадок отфильтровывают и промывают 1 М раствором соляной кислоты. Твердое вещество растворяют в дихлорметане (400 мл) и дважды экстрагируют равными объемами 1 М раствора соляной кислоты и один раз насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический раствор сушат над сульфатом натрия и выпаривают досуха, получая твердое вещество слегка не чисто белого цвета (5,23 г, выход 80%).

ESI-MS, m/z: рассчитано: 206,1, найдено: 207,1 (М+1)⁺;

Время удерживания: 2,37 мин; ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 1,07-1,11 (м, 2H), 1,38-1,42 (м, 2H), 5,98 (с, 2H), 6,79 (м, 2H), 6,88 (м, 1H), 12,26 (с, 1Н).

Общая методика II

Фрагмент структуры с карбоновой кислотой

Hal=Cl, Br, I, все другие переменные имеют значения, как указано в данном контексте.

Гидроксид натрия (50%-ный водный раствор, 7,4 экв.) медленно добавляют к смеси соответствующего фенилацетонитрила, бензилтриэтиламмонийхлорида (1,1 экв.) и подходящего дигалогенсодержащего соединения (2,3 экв.) при температуре 70°С. Эту смесь перемешивают в течение ночи при температуре 70°С и реакционную смесь разбавляют водой (30 мл) и экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия и выпаривают досуха, получая сырой циклопропанкарбонитрил, который используют непосредственно на следующей стадии.

Сырой циклопропанкарбонитрил кипятят с обратным холодильником в 10%-ном водном растворе гидроксида натрия (7,4 экв.) в течение 2,5 часов. Охлажденную реакционную смесь промывают диэтиловым эфиром (100 мл) и водную фазу подкисляют до рН=2 с помощью 2 М раствора соляной кислоты. Выпавшее в осадок твердое вещество отфильтровывают, получая циклопропанкарбоновую кислоту в виде твердого вещества белого цвета.

Общая методика III

Фрагмент структуры с карбоновой кислотой

В. 1-(2,2-Дифторбензо[1,3]диоксол-5-ил)

циклопропанкарбоновая кислота

Стадия а: Метиловый эфир 2,2-дифторбензо[1,3]

диоксол-5-карбоновой кислоты

Раствор 5-бром-2,2-дифторбензо[1,3]диоксола (11,8 г, 50,0 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия (0) [Pd(PPh₃)₄, 5,78 г, 5,00 ммоль] в метаноле (20 мл), содержащий ацетонитрил (30 мл) и триэтиламин (10 мл), перемешивают в атмосфере монооксида углерода (55 фунт/кв.дюйм) при температуре 75°С (температура масляной бани) в течение 15 часов. Охлажденную реакционную смесь отфильтровывают и фильтрат выпаривают досуха. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, получая сырой метиловый эфир 2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-карбоновой кислоты (11,5 г), который используют непосредственно на следующей стадии.

Стадия b: (2,2-Дифторбензо[1,3]диоксол-5-ил)метанол

Сырой метиловый эфир 2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-карбоновой кислоты (11,5 г), растворенный в 20 мл безводного тетрагидрофурана (ТГФ), медленно добавляют к суспензии литийалюминийгидрида (4,10 г, 106 ммоль) в безводном ТГФ (100 мл) при температуре 0°С. Смесь затем нагревают до комнатной температуры. После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 часа, реакционную смесь охлаждают до температуры 0°С и обрабатывают водой (4,1 г), затем раствором гидроксида натрия (10%-ный водный раствор, 4,1 мл). Полученную суспензию отфильтровывают и промывают с помощью ТГФ. Объединенный фильтрат выпаривают досуха и остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, получая (2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-ил)метанол (7,2 г, 38 ммоль, выход 76% за две стадии) в виде бесцветного масла.

Стадия с: 5-Хлорметил-2,2-дифторбензо[1,3]диоксол

Тионилхлорид (45 г, 38 ммоль) медленно добавляют к раствору (2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-ил)метанола (7,2 г, 38 ммоль) в дихлорметане (200 мл) при температуре 0°С. Полученную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре и затем выпаривают досуха. Остаток распределяют между водным насыщенным раствором бикарбоната натрия (100 мл) и дихлорметаном (100 мл). Отделенный водный слой экстрагируют дихлорметаном (150 мл) и органический слой сушат над сульфатом натрия, отфильтровывают и выпаривают досуха, получая сырой 5-хлорметил-2,2-дифторбензо[1,3]диоксол (4,4 г), который используют непосредственно на следующей стадии.

Стадия d: (2,2-Дифторбензо[1,3]диоксол-5-ил)ацетонитрил

Смесь сырого 5-хлорметил-2,2-дифторбензо[1,3]диоксола (4,4 г) и цианида натрия (1,36 г, 27,8 ммоль) в диметилсульфоксиде (50 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь выливают на лед и экстрагируют этилацетатом (300 мл). Органический слой сушат над сульфатом натрия и выпаривают досуха, получая сырой (2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-ил)ацетонитрил (3,3 г), который используют непосредственно на следующей стадии.

Стадия е: 1-(2,2-Дифторбензо[1,3]диоксол-5-ил)

циклопропанкарбонитрил

Раствор гидроксида натрия (50%-ный водный раствор, 10 мл) медленно добавляют к смеси сырого (2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-ил)ацетонитрила, бензилтриэтиламмонийхлорида (3,00 г, 15,3 ммоль) и 1-бром-2-хлорэтана (4,9 г, 38 ммоль) при температуре 70°С. Эту смесь перемешивают в течение ночи при температуре 70°С перед тем, как реакционную смесь разбавляют водой (30 мл) и экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия и выпаривают досуха, получая сырой 1-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-ил)циклопропанкарбонитрил, который используют непосредственно на следующей стадии.

Стадия f: 1-(2,2-Дифторбензо[1,3]диоксол-5-ил)-циклопропанкарбоновая кислота

1-(2,2-Дифторбензо[1,3]диоксол-5-ил)циклопропанкарбонитрил (сырой, с последней стадии) кипятят с обратным холодильником в 10%-ном водном растворе гидроксида натрия (50 мл) в течение 2,5 часов. Охлажденную реакционную смесь промывают диэтиловым эфиром (100 мл) и водный слой подкисляют до рН=2 с помощью 2 М раствора соляной кислоты. Выпавшее в осадок твердое вещество отфильтровывают, получая 1-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-ил)циклопропанкарбоновую кислоту в виде твердого вещества белого цвета (0,15 г, выход 1,6% за четыре стадии).

ESI-MS, m/z: рассчитано: 242,2, найдено: 243,3 (М+1)⁺; ¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ 7,14-7,04 (м, 2H), 6,98-6,96 (м, 1H), 1,74-1,64 (м, 2H), 1,26-1,08 (м, 2H).

С. 2-(4-Хлор-3-метоксифенил)ацетонитрил

Стадия а: 1-Хлор-2-метокси-4-метилбензол

К раствору 2-хлор-5-метилфенола (93 г, 0,65 моль) в СН₃CN (700 мл) добавляют CH₃I (111 г, 0,78 моль) и К₂СО₃ (180 г, 1,3 моль). Эту смесь перемешивают при температуре 25°С в течение ночи. Твердое вещество отфильтровывают и фильтрат выпаривают в вакууме, получая 1-хлор-2-метокси-4-метилбензол (90 г, выход 89%). ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 7,22 (д, J=7,8 Гц, 1H), 6,74-6,69 (м, 2H), 3,88 (с, 3H), 2,33 (с, 3H).

Cтадия b: 4-Бромметил-1-хлор-2-метоксибензол

К раствору 1-хлор-2-метокси-4-метилбензола (50 г, 0,32 моль) в ССl₄ (350 мл) добавляют NBS (57,2 г, 0,32 моль) и AИБН (10 г, 60 ммоль). Эту смесь кипятят с обратным холодильником в течение 3 часов. Растворитель выпаривают в вакууме и остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат = 20:1), получая 4-бромметил-1-хлор-2-метоксибензол (69 г, выход 92%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,33-7,31 (м, 1H), 6,95-6,91 (м, 2H), 4,46 (с, 2H), 3,92 (с, 3H).

Стадия с: 2-(4-Хлор-3-метоксифенил)ацетонитрил

К раствору 4-бромметил-1-хлор-2-метоксибензола (68,5 г, 0,29 моль) в этаноле (90%-ный раствор, 500 мл) добавляют NaCN (28,5 г, 0,58 моль). Эту смесь перемешивают при температуре 60^оС в течение ночи. Этанол выпаривают и остаток растворяют в воде. Смесь экстрагируют этилацетатом (3 раза по 300 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат = 30:1), получая 2-(4-хлор-3-метоксифенил)ацетонитрил (25 г, выход 48%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,36 (д, J=8 Гц, 1H), 6,88-6,84 (м, 2H), 3,92 (с, 3H), 3,74 (с, 2H), ¹³C ЯМР (100 МГц, CDCl₃) δ 155,4, 130,8, 129,7, 122,4, 120,7, 117,5, 111,5, 56,2, 23,5.

D. (4-Хлор-3-гидроксифенил)ацетонитрил

BBr₃ (16,6 г, 66 ммоль) медленно добавляют к раствору 2-(4-хлор-3-метоксифенил)ацетонитрила (12 г, 66 ммоль) в дихлорметане (120 мл) при температуре -78°С в атмосфере азота. Температуру реакционной смеси медленно повышают до комнатной температуры. Реакционную смесь перемешивают в течение ночи и затем выливают в смесь воды со льдом. Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют дихлорметаном (3 раза по 40 мл). Объединенные органические слои промывают водой, насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и концентрируют в вакууме, получая (4-хлор-3-гидроксифенил)ацетонитрил (9,3 г, выход 85%). ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 7,34 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,02 (д, J=2,1 Гц, 1H), 6,87 (дд, J=2,1, 8,4 Гц, 1H), 5,15 (ушир.с, 1Н), 3,72 (с, 2H).

Е. 1-(3-(Гидроксиметил)-4-метоксифенил)

циклопропанкарбоновая кислота

Стадия а: Метиловый эфир 1-(4-метоксифенил)

циклопропанкарбоновой кислоты

К раствору 1-(4-метоксифенил)циклопропанкарбоновой кислоты (50,0 г, 0,26 моль) в МеОН (500 мл) добавляют моногидрат толуол-4-сульфоновой кислоты (2,5 г, 13 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 20 часов. МеОН удаляют путем выпаривания в вакууме и добавляют этилацетат (200 мл). Органический слой промывают насыщенным водным раствором NaHCO₃ (100 мл) и насыщенным солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и выпаривают в вакууме, получая метиловый эфир 1-(4-метоксифенил)циклопропанкарбоновой кислоты (53,5 г, выход 99%). ¹Н-ЯМР (CDCl₃,400 МГц) δ 7,25-7,27 (м, 2H), 6,85 (д, J=8,8 Гц, 2H), 3,80 (с, 3H), 3,62 (с, 3H), 1,58 (м, 2H), 1,15 (м, 2H).

Стадия b: Метиловый эфир 1-(3-хлорметил-4-метоксифенил)циклопропанкарбоновой кислоты

К раствору метилового эфира 1-(4-метоксифенил)циклопропанкарбоновой кислоты (30,0 г, 146 ммоль) и МОМСl (29,1 г, 364 ммоль) в CS₂ (300 мл) добавляют TiCl₄ (8,30 г, 43,5 ммоль) при температуре 5°С. Реакционную смесь нагревают при температуре 30°С в течение 1 дня и выливают в смесь воды со льдом. Эту смесь экстрагируют с помощью СН₂Сl₂ (3 раза по 150 мл). Объединенные органические экстракты выпаривают в вакууме, получая сырой метиловый эфир 1-(3-хлорметил-4-метоксифенил)циклопропанкарбоновой кислоты (38,0 г), который используют на следующей стадии без дальнейшей очистки.

Стадия с: Метиловый эфир 1-(3-гидроксиметил-4-метоксифенил)циклопропанкарбоновой кислоты

К суспензии сырого метилового эфира 1-(3-хлорметил-4-метоксифенил)циклопропанкарбоновой кислоты (20,0 г) в воде (350 мл) добавляют Bu₄NBr (4,0 г) и Na₂CO₃ (90,0 г, 0,85 моль) при комнатной температуре. Реакционную смесь нагревают при температуре 65°С в течение ночи. Полученный раствор подкисляют водным раствором HCl (2 моль/л) и экстрагируют этилацетатом (3 раза по 200 мл). Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и выпаривают в вакууме, получая сырой продукт, который очищают с помощью колоночной хроматографии (петролейный эфир/этилацетат = 15:1), получая метиловый эфир 1-(3-гидроксиметил-4-метоксифенил)циклопропанкарбоновой кислоты (8,0 г, выход 39%). ¹Н-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 7,23-7,26 (м, 2H), 6,83 (д, J=8,0 Гц, 1H), 4,67 (с, 2H), 3,86 (с, 3H), 3,62 (с, 3H), 1,58 (кв, J=3,6 Гц, 2H), 1,14-1,17 (м, 2Н).

Стадия d: Метиловый эфир 1-[3-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-4-метоксифенил]циклопропанкарбоновой кислоты

К раствору метилового эфира 1-(3-гидроксиметил-4-метоксифенил)циклопропанкарбоновой кислоты (8,0 г, 34 ммоль) в СН₂Сl₂ (100 мл) добавляют имидазол (5,8 г, 85 ммоль) и ТВSCl (7,6 г, 51 ммоль) при комнатной температуре. Эту смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Смесь промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и выпаривают в вакууме, получая сырой продукт, который очищают с помощью колоночной хроматографии (петролейный эфир/этилацетат = 30:1), получая метиловый эфир 1-[3-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-4-метоксифенил]циклопропанкарбоновой кислоты (6,7 г, выход 56%). ¹Н-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 7,44-7,45 (м, 1H), 7,19 (дд, J=2,0, 8,4 Гц, 1H), 6,76 (д, J=8,4 Гц, 1H), 4,75 (с, 2H), 3,81 (с, 3 H), 3,62 (с, 3H), 1,57-1,60 (м, 2H), 1,15-1,18 (м, 2H), 0,96 (с, 9H), 0,11 (с, 6H).

Стадия е: 1-(3-Гидроксиметил-4-метоксифенил)

циклопропанкарбоновая кислота

К раствору метилового эфира 1-[3-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-4-метоксифенил]циклопропанкарбоновой кислоты (6,2 г, 18 ммоль) в метаноле (75 мл) добавляют раствор LiOH·Н₂О (1,50 г, 35,7 ммоль) в воде (10 мл) при температуре 0°С. Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при температуре 40°С. Метанол удаляют путем выпаривания в вакууме. Добавляют АсОН (1 моль/л, 40 мл) и этилацетат (200 мл). Органический слой отделяют, промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и выпаривают в вакууме, получая 1-(3-гидроксиметил-4-метоксифенил)-циклопропанкарбоновую кислоту (5,3 г).

F. 2-(3-Фтор-4-метоксифенил)ацетонитрил

К суспензии трет-BuOK (25,3 г, 0,207 моль) в ТГФ (150 мл) добавляют раствор TosMIC (20,3 г, 0,104 моль) в ТГФ (50 мл) при температуре -78°С. Смесь перемешивают в течение 15 минут, по каплям обрабатывают раствором 3-фтор-4-метоксибензальдегида (8,00 г, 51,9 ммоль) в ТГФ (50 мл) и продолжают перемешивание в течение 1,5 часов при температуре -78°С. К охлажденной реакционной смеси добавляют метанол (50 мл). Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 30 минут. Растворитель из реакционной смеси удаляют, получая сырой продукт, который растворяют в воде (200 мл). Водную фазу экстрагируют этилацетатом (3 раза по 100 мл). Объединенные органические слои сушат и выпаривают при пониженном давлении, получая сырой продукт, который очищают с помощью колоночной хроматографии (петролейный эфир/этилацетат = 10:1), получая 2-(3-фтор-4-метоксифенил)ацетонитрил (5,0 г, выход 58%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,02-7,05 (м, 2H), 6,94 (т, J=8,4 Гц, 1H), 3,88 (с, 3H), 3,67 (с, 2H). ¹³С-ЯМР (100 МГц, CDCl₃) δ 152,3, 147,5, 123,7, 122,5, 117,7, 115,8, 113,8, 56,3, 22,6.

G. 2-(3-Хлор-4-метоксифенил)ацетонитрил

К суспензии трет-BuOK (4,8 г, 40 ммоль) в ТГФ (30 мл) добавляют раствор TosMIC (3,9 г, 20 моль) в ТГФ (10 мл) при температуре -78°С. Эту смесь перемешивают в течение 10 минут, по каплям обрабатывают раствором 3-хлор-4-метоксибензальдегида (1,65 г, 10 ммоль) в ТГФ (10 мл) и продолжают перемешивать в течение 1,5 часов при температуре -78°С. К охлажденной реакционной смеси добавляют метанол (10 мл). Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 30 минут. Растворитель из реакционной смеси удаляют, получая сырой продукт, который растворяют в воде (20 мл). Водную фазу экстрагируют этилацетатом (3 раза по 20 мл). Объединенные органические слои сушат и выпаривают при пониженном давлении, получая сырой продукт, который очищают с помощью колоночной хроматографии (петролейный эфир/этилацетат = 10:1), получая 2-(3-хлор-4-метоксифенил)-ацетонитрил (1,5 г, выход 83%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,33 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,20 (дд, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,92 (д, J=8,4 Гц, 1H), 3,91 (с, 3H), 3,68 (с, 2H). ¹³С-ЯМР (100 МГц, CDCl₃) δ: 154,8, 129,8, 127,3, 123,0, 122,7, 117,60, 112,4, 56,2, 22,4.

Н. 1-(3,3-Диметил-2,3-дигидробензофуран-5-ил) циклопропанкарбоновая кислота

Стадия а: Метиловый эфир 1-(4-гидроксифенил)

циклопропанкарбоновой кислоты

К раствору метил-1-(4-метоксифенил)циклопропанкарбоксилата (10,0 г, 48,5 ммоль) в дихлорметане (80 мл) добавляют EtSH (16 мл) при охлаждении на бане со смесью воды со льдом. Смесь перемешивают при температуре 0°С в течение 20 минут перед тем, как медленно добавляют AlCl₃ (19,5 г, 0,15 ммоль) при температуре 0°С. Смесь перемешивают при температуре 0°С в течение 30 минут. Реакционную смесь выливают в смесь воды со льдом, органический слой отделяют и водную фазу экстрагируют дихлорметаном (3 раза по 50 мл). Объединенные органические слои промывают водой, насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и выпаривают в вакууме, получая метиловый эфир 1-(4-гидроксифенил)циклопропанкарбоновой кислоты (8,9 г, выход 95%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,20-7,17 (м, 2H), 6,75-6,72 (м, 2H), 5,56 (с, 1H), 3,63 (с, 3H), 1,60-1,57 (м, 2H), 1,17-1,15 (м, 2H).

Стадия b: Метиловый эфир 1-(4-гидрокси-3,5-дииодофенил)циклопропанкарбоновой кислоты

К раствору метилового эфира 1-(4-гидроксифенил)циклопропанкарбоновой кислоты (8,9 г, 46 ммоль) в СН₃CN (80 мл) добавляют NIS (15,6 г, 69 ммоль). Эту смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрируют и остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат = 10:1), получая метиловый эфир 1-(4-гидрокси-3,5-дииодофенил)циклопропанкарбоновой кислоты (3,5 г, выход 18%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,65 (с, 2H), 5,71 (с, 1H), 3,63 (с, 3H), 1,59-1,56 (м, 2H), 1,15-1,12 (м, 2H).

Стадия с: Метиловый эфир 1-[3,5-дииод-4-(2-метилаллилокси)фенил]циклопропанкарбоновой кислоты

Смесь метилового эфира 1-(4-гидрокси-3,5-дииодофенил)циклопропанкарбоновой кислоты (3,2 г, 7,2 ммоль), 3-хлор-2-метилпропена (1,0 г, 11 ммоль), К₂СО₃ (1,2 г, 8,6 ммоль), NaI (0,1 г, 0,7 ммоль) в ацетоне (20 мл) перемешивают при температуре 20°С в течение ночи. Твердое вещество отфильтровывают и фильтрат концентрируют в вакууме, получая метиловый эфир 1-[3,5-дииодо-4-(2-метилаллилокси)фенил]циклопропанкарбоновой кислоты (3,5 г, выход 97%). ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 7,75 (с, 2H), 5,26 (с, 1H), 5,06 (с, 1H), 4,38 (с, 2H), 3,65 (с, 3H), 1,98 (с, 3H), 1,62-1,58 (м, 2H), 1,18-1,15 (м, 2H).

Стадия d: Метиловый эфир 1-(3,3-диметил-2,3-

дигидробензофуран-5-ил)циклопропанкарбоновой кислоты

К раствору метилового эфира 1-[3,5-дииод-4-(2-метилаллилокси)фенил]циклопропанкарбоновой кислоты (3,5 г, 7,0 ммоль) в толуоле (15 мл) добавляют Bu₃SnH (2,4 г, 8,4 ммоль) и AИБН (0,1 г, 0,7 ммоль). Эту смесь кипятят с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат = 20:1), получая метиловый эфир 1-(3,3-диметил-2,3-дигидробензофуран-5-ил)циклопропанкарбоновой кислоты (1,05 г, выход 62%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,10-7,07 (м, 2H), 6,71 (д, J=8 Гц, 1H), 4,23 (с, 2H), 3,62 (с, 3H), 1,58-1,54 (м, 2H), 1,34 (с, 6H), 1,17-1,12 (м, 2H).

Стадия е: 1-(3,3-Диметил-2,3-дигидробензофуран-5-ил)циклопропанкарбоновая кислота

К раствору метилового эфира 1-(3,3-диметил-2,3-дигидробензофуран-5-ил)циклопропанкарбоновой кислоты (1 г, 4 ммоль) в МеОН (10 мл) добавляют LiOH (0,40 г, 9,5 ммоль). Эту смесь перемешивают при температуре 40°С в течение ночи. Медленно добавляют соляную кислоту (10%-ный раствор) для достижения рН=5. Полученную смесь экстрагируют этилацетатом (3 раза по 10 мл). Экстракты промывают насыщенным солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Растворитель удаляют в вакууме и сырой продукт очищают с помощью препаративной ВЭЖХ, получая 1-(3,3-диметил-2,3-дигидробензофуран-5-ил)циклопропанкарбоновую кислоту (0,37 г, выход 41%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,11-7,07 (м, 2 H), 6,71 (д, J=8 Гц, 1H), 4,23 (с, 2H), 1,66-1,63 (м, 2H), 1,32 (с, 6H), 1,26-1,23 (м, 2H).

I. 2-(7-Метоксибензо[d][1,3]диоксол-5-ил)ацетонитрил

Стадия а: 3,4-Дигидрокси-5-метоксибензоат

К раствору метилового эфира 3,4,5-тригидроксибензойной кислоты (50 г, 0,27 моль) и Na₂B₄O₇ (50 г) в воде (1000 мл) последовательно добавляют Ме₂SO₄ (120 мл) и водный раствор NaOH (25%-ный раствор, 200 мл) при комнатной температуре. Эту смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 6 часов перед тем, как охлаждают ее до температуры 0°С. Смесь подкисляют до рН~2 путем добавления концентрированной серной кислоты и затем отфильтровывают. Фильтрат экстрагируют этилацетатом (3 раза по 500 мл). Объединенные органические слои сушат над безводным сульфатом натрия и выпаривают при пониженном давлении, получая метил-3,4-дигидрокси-5-метоксибензоат (15,3 г, выход 47%), который используют на следующей стадии без дальнейшей очистки.

Стадия b: Метил-7-метоксибензо[d][1,3]диоксол-5-карбоксилат

К раствору метил-3,4-дигидрокси-5-метоксибензоата (15,3 г, 0,078 моль) в ацетоне (500 мл) добавляют СН₂BrCl (34,4 г, 0,27 моль) и К₂СО₃ (75 г, 0,54 моль) при температуре 80°С. Полученную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 4 часов. Эту смесь охлаждают до комнатной температуры и твердый К₂СО₃ отфильтровывают. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток растворяют в этилацетате (100 мл). Органический слой промывают водой, сушат над безводным сульфатом натрия и выпаривают при пониженном давлении, получая сырой продукт, который очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат = 10:1), получая метил-7-метоксибензо[d][1,3]диоксол-5-карбоксилат (12,6 г, выход 80%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,32 (с, 1H), 7,21 (с, 1H), 6,05 (с, 2H), 3,93 (с, 3H), 3,88 (с, 3H).

Стадия с: (7-Метоксибензо[d][1,3]диоксол-5-ил)метанол

К раствору метил-7-метоксибензо[d][1,3]диоксол-5-карбоксилата (13,9 г, 0,040 моль) в ТГФ (100 мл) при комнатной температуре порциями добавляют LiAlH₄ (3,1 г, 0,080 моль). Эту смесь перемешивают в течение 3 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждают до температуры 0°С и последовательно обрабатывают водой (3,1 г) и раствором NaOH (10%-ный раствор, 3,1 мл). Суспензию отфильтровывают и промывают с помощью ТГФ. Объединенные фильтраты выпаривают при пониженном давлении, получая (7-метоксибензо[d][1,3]диоксол-5-ил)метанол (7,2 г, выход 52%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 6,55 (с, 1Н), 6,54 (с, 1H), 5,96 (с, 2H), 4,57 (с, 2H), 3,90 (с, 3H).

Стадия d: 6-(Хлорметил)-4-метоксибензо[d][1,3]диоксол

К раствору SOCl₂ (150 мл) при температуре 0°С порциями добавляют (7-метоксибензо[d][1,3]диоксол-5-ил)метанола (9,0 г, 54 ммоль). Смесь перемешивают в течение 0,5 часа. Избыток SOCl₂ выпаривают при пониженном давлении, получая сырой продукт, который подщелачивают с помощью насыщенного водного раствора NaHCO₃ до рН~7. Водную фазу экстрагируют этилацетатом (3 раза по 100 мл). Объединенные органические слои сушат над безводным сульфатом натрия и выпаривают, получая 6-(хлорметил)-4-метоксибензо[d][1,3]диоксол (10,2 г, выход 94%), который используют на следующей стадии без дальнейшей очистки. ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 6,58 (с, 1H), 6,57 (с, 1H), 5,98 (с, 2H), 4,51 (с, 2H), 3,90 (с, 3H).

Стадия е: 2-(7-Метоксибензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-ацетонитрил

К раствору 6-(хлорметил)-4-метоксибензо[d][1,3]диоксола (10,2 г, 40 ммоль) в ДМСО (100 мл) добавляют NaCN (2,43 г, 50 ммоль) при комнатной температуре. Эту смесь перемешивают в течение 3 часов и выливают в воду (500 мл). Водную фазу экстрагируют этилацетатом (3 раза по 100 мл). Объединенные органические слои сушат над безводным сульфатом натрия и выпаривают, получая сырой продукт, который промывают диэтиловым эфиром, получая 2-(7-метоксибензо[d][1,3]диоксол-5-ил)ацетонитрил (4,6 г, выход 45%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 6,49 (с, 2H), 5,98 (с, 2H), 3,91 (с, 3H), 3,65 (с, 2H). ¹³С-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 148,9, 143,4, 134,6, 123,4, 117,3, 107,2, 101,8, 101,3, 56,3, 23,1.

J. 1-(Бензофуран-5-ил)циклопропанкарбоновая кислота

Стадия а: 1-[4-(2,2-Диэтоксиэтокси)фенил]

циклопропанкарбоновая кислота

К перемешиваемому раствору метилового эфира 1-(4-гидроксифенил)циклопропанкарбоновой кислоты (15,0 г, 84,3 ммоль) в ДМФА (50 мл) добавляют гидрид натрия (6,7 г, 170 ммоль, 60%-ный раствор в минеральном масле) при температуре 0°С. После прекращения выделения водорода, к реакционной смеси по каплям добавляют 2-бром-1,1-диэтоксиэтан (16,5 г, 84,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при температуре 160°С в течение 15 часов. Реакционную смесь выливают на лед (100 г) и экстрагируют с помощью СН₂Сl₂. Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия. Растворитель выпаривают в вакууме, получая сырую 1-[4-(2,2-диэтоксиэтокси)фенил]циклопропанкарбоновую кислоту (10 г), которую используют непосредственно на следующей стадии без очистки.

Стадия b: 1-Бензофуран-5-илциклопропанкарбоновая кислота

К суспензии сырой 1-[4-(2,2-диэтоксиэтокси)фенил]-циклопропанкарбоновой кислоты (20 г, ~65 ммоль) в ксилоле (100 мл) добавляют РРА (22,2 г, 64,9 ммоль) при комнатной температуре. Эту смесь кипятят с обратным холодильником (температура 140°С) в течение 1 часа перед тем, как ее охлаждают до комнатной температуры и отфильтровывают РРА. Растворитель выпаривают в вакууме, получая сырой продукт, который очищают с помощью препаративной ВЭЖХ, получая 1-(бензофуран-5-ил)циклопропанкарбоновую кислоту (1,5 г, выход 5%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 12,25 (ушир., с, 1H), 7,95 (д, J=2,8 Гц, 1H), 7,56 (д, J=2,0 Гц, 1H), 7,47 (д, J=11,6 Гц, 1H), 7,25 (дд, J=2,4, 11,2 Гц, 1H), 6,89 (д, J=1,6 Гц, 1H), 1,47-1,44 (м, 2H), 1,17-1,14 (м, 2Н).

К. 1-(2,3-Дигидробензофуран-5-ил)

циклопропанкарбоновая кислота

К раствору 1-(бензофуран-5-ил)циклопропанкарбоновой кислоты (700 мг, 3,47 ммоль) в МеОН (10 мл) добавляют PtO₂ (140 мг, 20%-ный раствор) при комнатной температуре. Перемешиваемую реакционную смесь гидрируют в атмосфере водорода (1 атм) при температуре 10°С в течение 3 дней. Реакционную смесь отфильтровывают. Растворитель выпаривают в вакууме, получая сырой продукт, который очищают с помощью препаративной ВЭЖХ, получая 1-(2,3-дигидробензофуран-5-ил)циклопропанкарбоновую кислоту (330 мг, выход 47%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) d₆ 7,20 (с, 1H), 7,10 (д, J=10,8 Гц, 1 H), 6,73 (д, J=11,2 Гц, 1H), 4,57 (т, J=11,6 Гц, 2H), 3,20 (т, J=11,6 Гц, 2H), 1,67-1,63 (м, 2H), 1,25-1,21 (м, 2H).

L. 2-(2,2-Диметилбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)ацетонитрил

Стадия а: (3,4-Дигидроксифенил)ацетонитрил

К раствору бензо[1,3]диоксол-5-илацетонитрила (0,50 г, 3,1 ммоль) в СН₂Сl₂ (15 мл) по каплям добавляют BBr₃ (0,78 г, 3,1 ммоль) при температуре -78°С в атмосфере азота. Эту смесь медленно нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение ночи. Добавляют воду (10 мл) для гашения реакционной смеси и слой СН₂Сl₂ отделяют. Водную фазу экстрагируют с помощью СН₂Сl₂ (2 раза по 7 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат = 5:1), получая (3,4-дигидроксифенил)ацетонитрил (0,25 г, выход 54%) в виде твердого вещества белого цвета. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ 9,07 (с, 1H), 8,95 (с, 1H), 6,68-6,70 (м, 2H), 6,55 (дд, J=8,0, 2,0 Гц, 1H), 3,32 (с, 2H).

Стадия b: 2-(2,2-Диметилбензо[d][1,3]

диоксол-5-ил)-ацетонитрил

К раствору (3,4-дигидроксифенил)ацетонитрила (0,2 г, 1,3 ммоль) в толуоле (4 мл) добавляют 2,2-диметоксипропан (0,28 г, 2,6 ммоль) и TsOH (0,010 г, 0,065 ммоль). Смесь кипятят с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь выпаривают для удаления растворителя и остаток растворяют в этилацетате. Органический слой промывают раствором NaHCO₃, водой, насыщенным солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Растворитель выпаривают при пониженном давлении, получая остаток, который очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат = 10:1), получая 2-(2,2-диметилбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)ацетонитрил (40 мг, выход 20%). ¹Н-ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 6,68-6,71 (м, 3H), 3,64 (с, 2H), 1,67 (с, 6H).

М. 2-(3-(Бензилокси)-4-хлорфенил)ацетонитрил

Стадия а: (4-Хлор-3-гидроксифенил)ацетонитрил

BBr₃ (16,6 г, 66 ммоль) медленно добавляют к раствору 2-(4-хлор-3-метоксифенил)ацетонитрила (12 г, 66 ммоль) в дихлорметане (120 мл) при температуре -78°С в атмосфере азота. Температуру реакционной смеси медленно повышают до комнатной температуры. Реакционную смесь перемешивают в течение ночи и затем выливают в смесь воды со льдом. Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют дихлорметаном (3 раза по 40 мл). Объединенные органические слои промывают водой, насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и концентрируют в вакууме, получая (4-хлор-3-гидроксифенил)ацетонитрил (9,3 г, выход 85%). ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 7,34 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,02 (д, J=2,1 Гц, 1H), 6,87 (дд, J=2,1, 8,4 Гц, 1H), 5,15 (ушир.с, 1H), 3,72 (с, 2H).

Стадия b: 2-(3-(Бензилокси)-4-хлорфенил)ацетонитрил

К раствору (4-хлор-3-гидроксифенил)ацетонитрила (6,2 г, 37 ммоль) в СН₃CN (80 мл) добавляют К₂СО₃ (10,2 г, 74 ммоль) и BnBr (7,6 г, 44 ммоль). Эту смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Твердые вещества отфильтровывают и фильтрат выпаривают в вакууме. Остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат = 50:1), получая 2-(3-(бензилокси)-4-хлорфенил)ацетонитрил (5,6 г, выход 60%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,48-7,32 (м, 6H), 6,94 (д, J=2 Гц, 2H), 6,86 (дд, J=2,0, 8,4 Гц, 1H), 5,18 (с, 2H), 3,71 (с, 2H).

N. 2-(Хиноксалин-6-ил)ацетонитрил

Стадия а: 6-Метилхиноксалин

К раствору 4-метилбензол-1,2-диамина (50,0 г, 0,41 моль) в изопропаноле (300 мл) добавляют раствор глиоксаля (40%-ный раствор в воде, 65,3 г, 0,45 моль) при комнатной температуре. Реакционную смесь нагревают при температуре 80°С в течение 2 часов и выпаривают в вакууме, получая 6-метилхиноксалин (55 г, выход 93%), который используют непосредственно на следующей стадии. ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 8,77 (дд, J=1,5, 7,2 Гц, 2H), 7,99 (д, J=8,7 Гц, 1H), 7,87 (с, 1H), 7,60 (дд, J=1,5, 8,4 Гц, 1H), 2,59 (с, 3H).

Стадия b: 6-Бромметилхиноксалин

К раствору 6-метилхиноксалина (10,0 г, 69,4 ммоль) в ССl₄ (80 мл) добавляют NBS (13,5 г, 76,3 ммоль) и бензоилпероксид (ВР, 1,7 г, 6,9 ммоль) при комнатной температуре. Эту смесь кипятят с обратным холодильником в течение 2 часов. После охлаждения, смесь выпаривают в вакууме, получая твердое вещество желтого цвета, которое экстрагируют петролейным эфиром (5 раз по 50 мл). Экстракты концентрируют в вакууме. Органические слои объединяют и концентрируют, получая сырой 6-бромметилхиноксалин (12,0 г), который используют непосредственно на следующей стадии. ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 8,85-8,87 (м, 2H), 8,10-8,13 (м, 2H), 7,82 (дд, J=2,1, 8,7 Гц, lH),4,70(с,2H).

Стадия с: 2-(Хиноксалин-6-ил)ацетонитрил

К раствору сырого 6-бромметилхиноксалина (36,0 г) в 95%-ном этаноле (200 мл) добавляют NaCN (30,9 г, 0,63 моль) при комнатной температуре. Эту смесь нагревают при температуре 50°С в течение 3 часов и затем концентрируют в вакууме. Добавляют воду (100 мл) и этилацетат (100 мл). Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. Остаток очищают на колонке с силикагелем (петролейный эфир/этилацетат = 10:1), получая 2-(хиноксалин-6-ил)ацетонитрил (7,9 г, выход 23% за две стадии). ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 8,88-8,90 (м, 2H), 8,12-8,18 (м, 2H), 7,74 (дд, J=2,1, 8,7 Гц, 1H), 4,02 (с, 2H). MS (ESI), m/z: 170,0 (М+Н)⁺.

О. 2-(Хинолин-6-ил)ацетонитрил

Стадия а: 6-Бромметилхинолин

К раствору 6-метилхинолина (2,15 г, 15,0 ммоль) в ССl₄ (30 мл) добавляют NBS (2,92 г, 16,5 ммоль) и бензоилпероксид (ВР, 0,36 г, 1,5 ммоль) при комнатной температуре. Эту смесь кипятят с обратным холодильником в течение 2 часов. После охлаждения, смесь выпаривают в вакууме, получая твердое вещество желтого цвета, которое экстрагируют петролейным эфиром (5 раз по 30 мл). Экстракты концентрируют в вакууме, получая сырой 6-бромметилхинолин (1,8 г), который используют непосредственно на следующей стадии.

Стадия b: 2-(Хинолин-6-ил)ацетонитрил

К раствору сырого 6-бромметилхинолина (1,8 г) в 95%-ном этаноле (30 мл) добавляют NaCN (2,0 г, 40,8 ммоль) при комнатной температуре. Эту смесь нагревают при температуре 50°С в течение 3 часов и затем концентрируют в вакууме. Добавляют воду (50 мл) и этилацетат (50 мл). Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. Объединенный сырой продукт очищают на колонке (петролейный эфир/этилацетат = 5:1), получая 2-(хинолин-6-ил)ацетонитрил (0,25 г, выход 8% за две стадии). ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 8,95 (дд, J=1,5,4,2 Гц, 1H), 8,12-8,19 (м, 2H), 7,85 (с, 1H), 7,62 (дд, J=2,1, 8,7 Гц, 1H), 7,46 (кв, J=4,2 Гц, 1H), 3,96 (с, 2 H). MS (ESI), m/z: 169,0 (М+Н)⁺.

Р. 2-(2,3-Дигидробензо[d][1,4]диоксин-6-ил)ацетонитрил

Стадия а: Этиловый эфир 2,3-дигидробензо[1,4]

диоксин-6-карбоновой кислоты

К суспензии Сs₂CO₃ (270 г, 1,49 моль) в ДМФА (1000 мл) добавляют этиловый эфир 3,4-дигидроксибензойной кислоты (54,6 г, 0,3 моль) и 1,2-дибромэтан (54,3 г, 0,29 моль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивают при температуре 80°С в течение ночи и затем выливают в смесь воды со льдом. Смесь экстрагируют этилацетатом (3 раза по 200 мл). Объединенные органические слои промывают водой (3 раза по 200 мл) и насыщенным солевым раствором (100 мл), сушат над сульфатом натрия и концентрируют досуха. Остаток очищают на колонке с силикагелем (петролейный эфир/этилацетат = 50:1), получая этиловый эфир 2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-6-карбоновой кислоты (18 г, выход 29%). ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 7,53 (дд, J=1,8, 7,2 Гц, 2H), 6,84-6,87 (м, 1H), 4,22-4,34 (м, 6H), 1,35(т, J=7,2 Гц,3H).

Стадия b: (2,3-Дигидробензо[1,4]диоксин-6-ил)метанол

К суспензии литийалюминийгидрида (2,8 г, 74 ммоль) в ТГФ (20 мл) по каплям добавляют раствор этилового эфира 2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-6-карбоновой кислоты (15 г, 72 ммоль) в ТГФ (10 мл) при температуре 0°С в атмосфере азота. Эту смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа и затем осторожно гасят путем добавления воды (2,8 мл) и раствора NaOH (10%-ный раствор, 28 мл), при охлаждении. Осажденное твердое вещество отфильтровывают и фильтрат выпаривают досуха, получая (2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-6-ил)метанол (10,6 г). ¹Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ 6,73-6,78 (м, 3H), 5,02 (т, J=5,7 Гц, 1H), 4,34 (д, J=6,0 Гц, 2H), 4,17-4,20 (м, 4H).

Стадия с: 6-Хлорметил-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин

Смесь (2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-6-ил)метанола (10,6 г) в SOCl₂ (10 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 10 минут и затем выливают в смесь воды со льдом. Органический слой отделяют и водную фазу экстрагируют дихлорметаном (3 раза по 50 мл). Объединенные органические слои промывают раствором NaHCO₃ (насыщенный раствор), водой и насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и концентрируют досуха, получая 6-хлорметил-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин (12 г, выход 88% за две стадии), который используют непосредственно на следующей стадии.

Стадия d: 2-(2,3-Дигидробензо[b][1,4]

диоксин-6-ил)ацетонитрил

Смесь 6-хлорметил-2,3-дигидробензо[1,4]диоксина (12,5 г, 67,7 ммоль) и NaCN (4,30 г, 87,8 ммоль) в ДМСО (50 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Эту смесь выливают в воду (150 мл) и затем экстрагируют дихлорметаном (4 раза по 50 мл). Объединенные органические слои промывают водой (2 раза по 50 мл) и насыщенным солевым раствором (50 мл), сушат над сульфатом натрия и концентрируют досуха. Остаток очищают при использовании колонки с силикагелем (петролейный эфир/этилацетат = 50:1), получая 2-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)ацетонитрил в виде масла желтого цвета (10,2 г, выход 86%). ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 6,78-6,86 (м, 3H), 4,25 (с, 4H),3,63(с, 2H).

Q. 2-(2,2,4,4-Тетрафтор-4Н-бензо[d][1,3]

диоксин-6-ил)ацетонитрил

Стадия а: Метиловый эфир 2,2,4,4-тетрафтор-4Н-

бензо[1,3]диоксин-6-карбоновой кислоты

Суспензию 6-бром-2,2,4,4-тетрафтор-4Н-бензо[1,3]диоксина (4,75 г, 16,6 ммоль) и Pd(PPh₃)₄ (950 мг, 8,23 ммоль) в МеОН (20 мл), MeCN (30 мл) и Et₃N (10 мл) перемешивают в атмосфере оксида углерода (55 фунт/кв.дюйм) при температуре 75°С (температура масляной бани) в течение ночи. Охлажденную реакционную смесь отфильтровывают и фильтрат концентрируют. Остаток очищают на колонке с силикагелем (петролейный эфир), получая метиловый эфир 2,2,4,4-тетрафтор-4Н-бензо[1,3]диоксин-6-карбоновой кислоты (3,75 г, выход 85%). ¹Н-ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 8,34 (с, 1H), 8,26 (дд, J=2,1, 8,7 Гц, 1H), 7,22 (д, J=8,7 Гц, 1H), 3,96 (с, 3H).

Стадия b: (2,2,4,4-Тетрафтор-4Н-бензо[1,3]

диоксин-6-ил)метанол

К суспензии литийалюминийгидрида (2,14 г, 56,4 ммоль) в безводном ТГФ (200 мл) по каплям добавляют раствор метилового эфира 2,2,4,4-тетрафтор-4Н-бензо[1,3]диоксин-6-карбоновой кислоты (7,50 г, 28,2 ммоль) в безводном ТГФ (50 мл) при температуре 0°С. После перемешивания при температуре 0°С в течение 1 часа, реакционную смесь обрабатывают водой (2,14 г) и 10%-ным раствором NaOH (2,14 мл). Суспензию отфильтровывают и промывают с помощью ТГФ. Объединенные фильтраты выпаривают досуха, получая сырой (2,2,4,4-тетрафтор-4Н-бензо[1,3]диоксин-6-ил)метанол (6,5 г), который используют непосредственно на следующей стадии. ¹Н-ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 7,64 (с, 1H), 7,57-7,60 (м, 1H), 7,58 (д, J=8,7 Гц, 1H), 4,75 (с, 2H).

Стадия с: 6-Хлорметил-2,2,4,4-тетрафтор-4Н-бензо[1,3]диоксин

Смесь (2,2,4,4-тетрафтор-4Н-бензо[1,3]диоксин-6-ил)метанола (6,5 г) в тионилхлориде (75 мл) кипятят с обратным холодильником в течение ночи. Полученную смесь концентрируют в вакууме. Остаток подщелачивают водным насыщенным раствором NaHCO₃. Водный слой экстрагируют дихлорметаном (3 раза по 50 мл). Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, отфильтровывают и концентрируют при пониженном давлении, получая 6-хлорметил-2,2,4,4-тетрафтор-4Н-бензо[1,3]диоксин (6,2 г), который используют непосредственно на следующей стадии. ¹Н-ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 7,65 (с, 1H), 7,61 (дд, J=2,1, 8,7 Гц, 1H), 7,15 (д, J=8,4 Гц, 1H), 4,60 (с, 2H).

Стадия d: (2,2,4,4-Тетрафтор-4Н-бензо[1,3]диоксин-6-ил)ацетонитрил

Смесь 6-хлорметил-2,2,4,4-тетрафтор-4Н-бензо[1,3]диоксина (6,2 г) и NaCN (2,07 г, 42,3 ммоль) в ДМСО (50 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь выливают на лед и экстрагируют этилацетатом (3 раза по 50 мл). Объединенные органические слои сушат над безводным сульфатом натрия и выпаривают, получая сырой продукт, который очищают на колонке с силикагелем (петролейный эфир/этилацетат = 10:1), получая (2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-ил)ацетонитрил (4,5 г, выход 68% за 3 стадии). ¹Н-ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 7,57-7,60 (м, 2H), 7,20 (д, J=8,7 Гц, 1H), 3,82 (с, 2H).

R. 2-(4Н-Бензо[d][1,3]диоксин-7-ил)ацетонитрил

Стадия а: (3-Гидроксифенил)ацетонитрил

К раствору (3-метоксифенил)ацетонитрила (150 г, 1,03 моль) в СН₂Сl₂ (1000 мл) по каплям добавляют BBr₃ (774 г, 3,09 моль) при температуре -70°С. Эту смесь перемешивают и медленно нагревают до комнатной температуры. Добавляют воду (300 мл) при температуре 0^оС. Полученную смесь экстрагируют с помощью СН₂Сl₂. Объединенные органические слои сушат над безводным сульфатом натрия, отфильтровывают и выпаривают в вакууме. Сырой остаток очищают на колонке (петролейный эфир/этилацетат = 10:1), получая (3-гидроксифенил)ацетонитрил (75,0 г, выход 55%). ¹Н-ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 7,18-7,24 (м, 1H), 6,79-6,84 (м, 3H), 3,69 (с, 2H).

Стадия b: 2-(4Н-Бензо[d][1,3]диоксин-7-ил)ацетонитрил

К раствору (3-гидроксифенил)ацетонитрила (75,0 г, 0,56 моль) в толуоле (750 мл) добавляют параформальдегид (84,0 г, 2,80 моль) и моногидрат толуол-4-сульфоновой кислоты (10,7 г, 56,0 ммоль), при комнатной температуре. Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 40 минут. Толуол удаляют путем выпаривания. Добавляют воду (150 мл) и этилацетат (150 мл). Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и выпаривают в вакууме. Остаток разделяют с помощью препаративной ВЭЖХ, получая 2-(4Н-бензо[d][1,3]диоксин-7-ил)ацетонитрил (4,7 г, выход 5%). ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 6,85-6,98 (м, 3H), 5,25 (д, J=3,0 Гц, 2H), 4,89 (с, 2H), 3,69 (с, 2H).

S. 2-(4Н-Бензо[d][1,3]диоксин-6-ил)ацетонитрил

К раствору (4-гидроксифенил)ацетонитрила (17,3 г, 0,13 моль) в толуоле (350 мл) добавляют параформальдегид (39,0 г, 0,43 ммоль) и моногидрат толуол-4-сульфоновой кислоты (2,5 г, 13 ммоль), при комнатной температуре. Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1 часа. Толуол удаляют путем выпаривания. Добавляют воду (150 мл) и этилацетат (150 мл). Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и выпаривают в вакууме. Остаток разделяют с помощью препаративной ВЭЖХ, получая 2-(4Н-бензо[d][1,3]диоксин-6-ил)ацетонитрил (7,35 г, выход 32%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,07-7,11 (м, 1H), 6,95-6,95 (м, 1H), 6,88 (д, J=11,6 Гц, 1H), 5,24 (с, 2H), 4,89 (с, 2H), 3,67 (с, 2H).

Т. 2-(3-(Бензилокси)-4-метоксифенил)ацетонитрил

К суспензии трет-BuOK (20,15 г, 0,165 моль) в ТГФ (250 мл) добавляют раствор TosMIC (16,1 г, 82,6 ммоль) в ТГФ (100 мл) при температуре -78°С. Эту смесь перемешивают в течение 15 минут, по каплям обрабатывают раствором 3-бензилокси-4-метоксибензальдегида (10,0 г, 51,9 ммоль) в ТГФ (50 мл) и продолжают перемешивать в течение 1,5 часов при температуре -78°С. К охлажденной реакционной смеси добавляют метанол (50 мл). Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 30 минут. Растворитель из реакционной смеси удаляют, получая сырой продукт, который растворяют в воде (300 мл). Водную фазу экстрагируют этилацетатом (3 раза по 100 мл). Объединенные органические слои сушат и выпаривают при пониженном давлении, получая сырой продукт, который очищают с помощью колоночной хроматографии (петролейный эфир/этилацетат = 10:1), получая 2-(3-(бензилокси)-4-метоксифенил)ацетонитрил (5,0 г, выход 48%). ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 7,48-7,33 (м, 5H), 6,89-6,86 (м, 3H), 5,17 (с, 2H), 3,90 (с, 3H), 3,66 (с, 2H). ¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ: 149,6, 148,6, 136,8, 128,8, 128,8, 128,2, 127,5, 127,5, 122,1, 120,9, 118,2, 113,8, 112,2, 71,2, 56,2, 23,3.

В нижеследующей таблице 2 приводится перечень фрагментов структуры с карбоновой кислотой, которые коммерчески доступны или их получают по одной из методик, описанных выше.

Таблица 2 Фрагменты структуры с карбоновой кислотой Соединение Название А-1 1-бензо[1,3]диоксол-5-илциклопропан-1-карбоновая кислота А-2 1-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-ил)циклопропан-1-карбоновая кислота А-3 1-(3,4-диметоксифенил)циклопропан-1-карбоновая кислота А-4 1-(3-метоксифенил)циклопропан-1-карбоновая кислота А-5 1-(2-метоксифенил)циклопропан-1-карбоновая кислота А-6 1-[4-(трифторметокси)фенил]циклопропан-1-карбоновая кислота А-8 тетрагидро-4-(4-метоксифенил)-2Н-пиран-4-карбоновая кислота А-9 1-фенилциклопропан-1-карбоновая кислота А-10 1-(4-метоксифенил)циклопропан-1-карбоновая кислота А-11 1-(4-хлорфенил)циклопропан-1-карбоновая кислота А-13 1-фенилциклопентанкарбоновая кислота А-14 1-фенилциклогексанкарбоновая кислота А-15 1-(4-метоксифенил)циклопентанкарбоновая кислота А-16 1-(4-метоксифенил)циклогексанкарбоновая кислота А-17 1-(4-хлорфенил)циклогексанкарбоновая кислота А-18 1-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)циклопропанкарбоновая кислота А-19 1-(4Н-бензо[d][1,3]диоксин-7-ил)циклопропанкарбоновая кислота А-20 1-(2,2,4,4-тетрафтор-4Н-бензо[d][1,3]диоксин-6-ил)циклопропанкарбоновая кислота А-21 1-(4Н-бензо[d][1,3]диоксин-6-ил)циклопропанкарбоновая кислота А-22 1-(хиноксалин-6-ил)циклопропанкарбоновая кислота А-23 1-(хинолин-6-ил)циклопропанкарбоновая кислота А-24 1-(4-хлорфенил)циклопентанкарбоновая кислота А-25 1-(бензофуран-5-ил)циклопропанкарбоновая кислота А-26 1-(4-хлор-3-метоксифенил)циклопропанкарбоновая кислота А-27 1-(3-(гидроксиметил)-4-метоксифенил)циклопропанкарбоновая кислота А-28 1-(2,3-дигидробензофуран-5-ил)циклопропанкарбоновая кислота А-29 1-(3-фтор-4-метоксифенил)циклопропанкарбоновая кислота А-30 1-(3-хлор-4-метоксифенил)циклопропанкарбоновая кислота А-31 1-(3-гидрокси-4-метоксифенил)циклопропанкарбоновая кислота А-32 1-(4-гидрокси-3-метоксифенил)циклопропанкарбоновая кислота А-33 1-(2,2-диметилбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)циклопропанкарбоновая кислота А-34 1-(3,3-диметил-2,3-дигидробензофуран-5-ил)циклопропанкарбоновая кислота А-35 1-(7-метоксибензо[d][1,3]диоксол-5-ил)циклопропанкарбоновая кислота А-36 1-(4-хлор-3-гидроксифенил)циклопропанкарбоновая кислота А-37 1-(4-метокси-3-метилфенил)циклопропанкарбоновая кислота А-38 1-(3-(бензилокси)-4-хлорфенил)циклопропанкарбоновая кислота А-45 1-(4-метокси-3-(метоксиметил)фенил)циклопропанкарбоновая кислота

U. 6-Хлор-5-метилпиридин-2-амин

Стадия а: 2,2-Диметил-N-(5-метилпиридин-2-ил)пропионамид

К перемешиваемому раствору 5-метилпиридин-2-амина (200 г, 1,85 моль) в безводном CH₂Cl₂ (1000 мл) по каплям добавляют раствор триэтиламина (513 мл, 3,70 моль) и 2,2-диметилпропионилхлорида (274 мл, 2,22 моль) при температуре 0°С в атмосфере азота. Ледяную баню отставляют и перемешивание продолжают при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь выливают на лед (2000 г). Органический слой отделяют и оставшийся водный слой экстрагируют с помощью CH₂Cl₂ (3 раза). Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия и выпаривают, получая 2,2-диметил-N-(5-метилпиридин-2-ил)пропионамид (350 г), который используют на следующей стадии без дальнейшей очистки. ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,12 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,06 (д, J=1,2 Гц, 1H), 7,96 (с, 1H), 7,49 (дд, J=1,6, 8,4 Гц, 1H), 2,27 (с, 1H), 1,30 (с, 9H).

Стадия b: 2,2-Диметил-N-(5-метил-1-оксипиридин-

2-ил)пропионамид

К перемешиваемому раствору 2,2-диметил-N-(5-метилпиридин-2-ил)пропионамида (100 г, 0,52 моль) в АсОН (500 мл) по каплям добавляют 30%-ный раствор Н₂О₂ (80 мл, 2,6 моль) при комнатной температуре. Смесь перемешивают при температуре 80°С в течение 12 часов. Реакционную смесь выпаривают в вакууме, получая 2,2-диметил-N-(5-метил-1-оксипиридин-2-ил)пропионамид (80 г, чистота 85%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 10,26 (ушир, с, 1H), 8,33 (д, 7=8,4 Гц, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,17 (дд, J=0,8, 8,8 Гц, 1H), 2,28 (с, 1H), 1,34 (с, 9H).

Стадия с: N-(6-Хлор-5-метилпиридин-2-ил)-2,2-

диметилпропионамид

К перемешиваемому раствору 2,2-диметил-N-(5-метил-1-оксипиридин-2-ил)пропионамида (10 г, 48 ммоль) в безводном CH₂Cl₂ (50 мл) добавляют триэтиламин (60 мл, 240 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания в течение 30 минут, к реакционной смеси по каплям добавляют POCl₃ (20 мл). Реакционную смесь перемешивают при температуре 50°С в течение 15 часов. Реакционную смесь выливают на лед (200 г). Органический слой отделяют и оставшийся водный слой экстрагируют с помощью CH₂Cl₂ (3 раза). Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия. Растворитель выпаривают в вакууме, получая сырой продукт, который очищают с помощью хроматографии (петролейный эфир/этилацетат = 100:1), получая N-(6-хлор-5-метилпиридин-2-ил)-2,2-диметилпропионамид (0,5 г, выход 5%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,09 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,94 (ушир, с, 1H), 7,55 (д, J=8,4 Гц, 1H), 2,33 (с, 1H), 1,30 (с, 9H).

Стадия d: 6-Хлор-5-метилпиридин-2-иламин

К N-(6-хлор-5-метилпиридин-2-ил)-2,2-диметилпропионамиду (4,00 г, 17,7 ммоль) добавляют 6 н раствор HCl (20 мл) при комнатной температуре. Эту смесь перемешивают при температуре 80°С в течение 12 часов. Реакционную смесь подщелачивают до рН=8-9 путем добавления по каплям насыщенного раствора NaHCO₃ и затем смесь экстрагируют с помощью CH₂Cl₂ (3 раза). Органические фазы сушат над сульфатом натрия и выпаривают в вакууме, получая 6-хлор-5-метилпиридин-2-иламин (900 мг, выход 36%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,28 (д, J=8,0 Гц, 1H), 6,35 (д, J= 8,0 Гц, 1H), 4,39 (ушир.с, 2H), 2,22 (с, 3H). MS (ESI), m/z: 143 (М+H⁺).

V. 6-Хлор-5-(трифторметил)пиридин-2-амин

2,6-Дихлор-3-(трифторметил)пиридин (5,00 г, 23,2 ммоль) и 28%-ный водный раствор аммиака (150 мл) вводят в автоклав емкостью 250 мл. Эту смесь нагревают при температуре 93°С в течение 21 часа. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и экстрагируют этилацетатом (3 раза по 100 мл). Объединенные органические экстракты сушат над безводным сульфатом натрия и выпаривают в вакууме, получая сырой продукт, который очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (2-20% этилацетата в петролейном эфире в качестве элюента), получая 6-хлор-5-(трифторметил)пиридин-2-амин (2,1 г, выход 46%). ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО- d₆) δ 7,69 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,13 (ушир.с, 2H), 6,43 (д, J=8,4 Гц, 1H). MS (ESI), m/z: 197,2 (М+H)⁺.

Общая методика IV

Реакции сочетания

Hal=Cl, Br, I, все другие переменные имеют значения, как указано в данном контексте. Цикл А является циклом, образованным R₃ и R’₃. Х=С или N.

Один эквивалент соответствующей карбоновой кислоты вводят в высушенную в сушильном шкафу колбу в атмосфере азота. Добавляют тионилхлорид (3 экв.) и каталитическое количество N,N-диметилформамида и раствор оставляют перемешиваться при температуре 60°С в течение 30 минут. Избыток тионилхлорида удаляют в вакууме и полученное твердое вещество суспендируют в минимальном количестве безводного пиридина. Этот раствор медленно добавляют к перемешиваемому раствору одного эквивалента соответствующего аминогетероциклического соединения, растворенного в минимальном количестве безводного пиридина. Полученную смесь оставляют перемешиваться в течение 15 часов при температуре 110°С. Смесь выпаривают досуха, суспендируют в дихлорметане и затем три раза экстрагируют 1 н раствором NaOH. Органический слой затем сушат над сульфатом натрия, выпаривают досуха и потом очищают с помощью колоночной хроматографии.

W. 1-(Бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(5-бромпиридин-2-ил)циклопропанкарбоксамид (В-1)

1-Бензо[1,3]диоксол-5-илциклопропанкарбоновую кислоту (2,38 г, 11,5 ммоль) вводят в высушенную в сушильном шкафу колбу в атмосфере азота. Добавляют тионилхлорид (2,5 мл) и N,N-диметилформамид (0,3 мл) и раствор оставляют перемешиваться в течение 30 минут при температуре 60°С. Избыток тионилхлорида удаляют в вакууме и полученное твердое вещество суспендируют в 7 мл безводного пиридина. Этот раствор затем медленно добавляют к раствору 5-бромпиридин-2-иламина (2,00 г, 11,6 ммоль), суспендированного в 10 мл безводного пиридина. Полученную смесь оставляют перемешиваться в течение 15 часов при температуре 110°С. Смесь затем выпаривают досуха, суспендируют в 100 мл дихлорметана и промывают три раза, порциями по 25 мл, 1 н раствором NaOH. Органический слой сушат над сульфатом натрия, выпаривают почти досуха и затем очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, используя дихлорметан в качестве элюента, получая чистый продукт (3,46 г, выход 83%).

ESI-MS, m/z: рассчитано: 361,2, найдено: 362,1 (М+1)⁺;

Время удерживания: 3,40 мин; ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО- d₆) δ 1,06-1,21 (м, 2H), 1,44-1,51 (м, 2H), 6,07 (с, 2H), 6,93-7,02 (м, 2H), 7,10 (д, J=1,6 Гц, 1H), 8,02 (д, J=1,6 Гц, 2H), 8,34 (с, 1H), 8,45 (с, 1H).

Х. 1-(Бензо[d][1,3]диоксол-6-ил)-N-(6-бромпиридин-2-ил)циклопропанкарбоксамид (В-2)

1-Бензо[1,3]диоксол-5-илциклопропанкарбоновую кислоту (1,2 г, 5,8 ммоль) вводят в высушенную в сушильном шкафу колбу в атмосфере азота. Добавляют тионилхлорид (2,5 мл) и N,N-диметилформамид (0,3 мл) и раствор оставляют перемешиваться при температуре 60°С в течение 30 минут. Избыток тионилхлорида удаляют в вакууме и полученное твердое вещество суспендируют в 5 мл безводного пиридина. Этот раствор затем медленно добавляют к раствору 6-бромпиридин-2-амина (1,0 г, 5,8 ммоль), суспендированного в 10 мл безводного пиридина. Полученную смесь оставляют перемешиваться в течение 15 часов при температуре 110°С. Смесь затем выпаривают досуха, суспендируют в 50 мл дихлорметана и промывают три раза, порциями по 20 мл, 1 н раствором NaOH. Органический слой сушат над сульфатом натрия, выпаривают почти досуха и затем очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, используя дихлорметан, содержащий 2,5% триэтиламина, в качестве элюента, получая чистый продукт.

ESI-MS, m/z: рассчитано: 361,2, найдено: 362,1 (М+1)⁺;

Время удерживания: 3,43 мин; ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 1,10-1,17 (м, 2H), 1,42-1,55 (м, 2H), 6,06 (с, 2H), 6,92-7,02 (м, 2H), 7,09 (д, J=1,6 Гц, 1H), 7,33 (д, J=7,6 Гц, 1Н), 7,73 (т, J=8,0 Гц, 1H), 8,04 (д, J=8,2 Гц, 1H), 8,78 (с, 1H).

Соединения, указанные в нижеследующей таблице 3, получают способом, аналогичным таковому, описанному выше.

Таблица 3 Примеры соединений, синтезированных в соответствии с Получениями W и X Соединение Название Время удерживания (мин) (М+1)^{+ 1}Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) В-3 1-(Бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(5-бром-6-метилпиридин-2-ил)циклопропанкарбоксамид 3,58 375,3 ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 8,39 (с, 1H), 7,95 (д, J=8,7 Гц, 1H), 7,83 (д, J=8,8 Гц, lH), 7,10(д, J=1,6 Гц, 1H), 7,01-6,94 (м, 2H), 6,06 (с, 2H), 2,41 (с, 3H), 1,48-1,46 (м, 2H), 1,14-1,10 (м, 2H) В-4 1-(Бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(6-хлор-5-метилпиридин-2-ил)циклопропанкарбоксамид 2,90 331,0 ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 8,64 (с, 1H), 7,94-7,91 (м, 1Н), 7,79-7,77 (м, 1H), 7,09(м, 1H), 7,00-6,88(м, 2H), 6,06 (с, 2H), 2,25 (с, 3H), 1,47-1,44 (м,2H),1,13-1,10 (м,2H) В-5 1-(Бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(5-бром-4-метилпиридин-2-ил)циклопропанкарбоксамид 3,85 375,1 ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 8,36 (с, 1H), 8,30 (с, 1H), 8,05 (с, 1H), 7,09 (д, J=1,6 Гц, 1Н), 7,01-6,95 (м, 2H), 6,07 (с, 2H), 2,35 (с, 3H), 1,49-1,45 (м, 2H), 1,16-1,13 (м,2H) В-6 1-(Бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(5-бром-3,4-диметилпиридин-2-ил)циклопропанкарбоксамид 3,25 389,3 ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 8,82 (с, 1H), 8,35 (с, 1Н), 7,01 (м, 1Н), 6,96-6,89 (м, 2H), 6,02 (с, 2H), 2,35 (с, 3H), 2,05 (с, 3H), 1,40-1,38 (м, 2H), 1,08-1,05 (м, 2H) В-7 1-(Бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(5-бром-3-метилпиридин-2-ил)циклопропанкарбоксамид 2,91 375,1 В-8 1-(Бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(6-хлорпиридазин-3-ил) циклопропанкарбоксамид 2,88 318,3 ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 1,15-1,19 (м, 2H), 1,48-1,52 (м, 2H), 6,05 (с, 2H), 6,93-7,01 (м, 2H), 7,09 (д, J=1,7 Гц, 1Н), 7,88 (д, J=9,4 Гц, 1Н), 9,46 (с, 1Н) В-9 1-(Бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(5-бромпиразин-2- ил)циклопропанкарбоксамид 3,20 318,3 ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 1,13-1,18 (м, 2H), 1,47-1,51 (м, 2H), 6,04 (с, 2H), 6,90-6,99 (м, 2H), 7,06 (д, 7=1,6 Гц, 1Н), 8,47 (с, 1Н), 9,21 (с, 1H), 9,45 (с, 1H) В-10 1-(Бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(6-хлорпиразин-2- ил)циклопропанкарбоксамид 3,45 362,1 ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 1,12-1,23 (м, 2H), 1,41-1,58 (м, 2H), 6,04 (с, 2H), 6,90-7,00 (м, 2H), 7,07 (д, J=1,6 Гц, 1Н), 8,55 (с, 1H), 8,99-9,21 (м, 2H) В-11 N-(6-Бромпиридин-2-ил)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)циклопропанкарбоксамид 2,12 397,3 ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 9,46 (с, 1H), 8,01-7,99 (м, 1H), 7,75-7,71 (м, 1H), 7,54 (м, 1H), 7,41-7,39 (м, 1Н), 7,36-7,30 (м, 2H), 1,52-1,49 (м, 2H), 1,20-1,17(м, 2H) В-12 N-(6-Хлор-5-метилпиридин-2-ил)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)циклопропанкарбоксамид 2,18 367,1 ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 9,30 (с, 1H), 7,89-7,87 (м, 1H), 7,78-7,76 (м, 1H), 7,53 (м, 1Н), 7,41-7,39 (м, 1H), 7,33-7,30 (м, 1Н), 2,26 (с, 3H), 1,51-1,49 (м, 2H), 1,18-1,16 (м, 2H) В-13 N-(6-Хлор-5-(трифторметил)пиридин-2-ил)-1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]диоксол-5-ил)циклопропанкарбоксамид 1,98 421,1 ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 10,09 (с, 1H), 8,29 (м, 1H), 8,16 (м, 1H), 7,53 (м, 1Н), 7,41-7,38 (м, 1H), 7,34-7,29 (м, 1Н), 1,56-1,53 (м, 2H), 1,24-1,22 (м, 2H)

Общая методика V

Соединения формулы I

Hal=Cl, Br, I. Цикл А является циклом, образованным R₃ и R’₃.

Соответствующий арилгалогенид (1 экв.) растворяют в 1 мл N,N-диметилформамида (ДМФА) в реакционной пробирке. Добавляют соответствующую бороновую кислоту (1,3 экв.), 0,1 мл 2 М водного раствора карбоната калия (2 экв.) и каталитическое количество Pd(dppf)Cl₂ (0,09 экв.) и реакционную смесь нагревают при температуре 80°С в течение трех часов или при температуре 150°С в течение 5 минут в микроволновой печи. Полученный продукт охлаждают до комнатной температуры, отфильтровывают и очищают с помощью препаративной жидкостной хроматографии с обращенными фазами.

Y. [5-(2,4-Диметоксифенил)пиридин-2-ил]амид 1-

бензо[1,3]диоксол-5-илциклопропанкарбоновой кислоты

(5-Бромпиридин-2-ил)амид 1-бензо[1,3]диоксол-5-илциклопропанкарбоновой кислоты (36,1 мг, 0,10 ммоль) растворяют в 1 мл N,N-диметилформамида (ДМФА) в реакционной пробирке. Добавляют 2,4-диметоксибензолбороновую кислоту (24 мг, 0,13 ммоль), 0,1 мл 2 М водного раствора карбоната калия и каталитическое количество Pd(dppf)Cl₂ (6,6 мг, 0,0090 ммоль) и реакционную смесь нагревают при температуре 80°С в течение трех часов. Полученный продукт охлаждают до комнатной температуры, отфильтровывают и очищают с помощью препаративной жидкостной хроматографии с обращенными фазами, получая чистый продукт в виде трифторацетата.

ESI-MS, m/z: рассчитано: 418,2, найдено: 419,0 (М+1)⁺;

Время удерживания: 3,18 мин; ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN) δ 1,25-1,29 (м, 2H), 1,63-1,67 (м, 2H), 3,83 (с, 3H), 3,86 (с, 3H), 6,04 (с, 2H), 6,64-6,68 (м, 2H), 6,92 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,03-7,06 (м, 2H), 7,30 (д, J =8,3 Гц, 1H), 7,96 (д, J=8,9 Гц, 1H), 8,14 (дд, J=8,9, 2,3 Гц, 1H), 8,38 (д, J=2,2 Гц, 1H), 8,65 (с, 1H).

Z. [6-(4-Диметиламинофенил)пиридин-2-ил]амид

1бензо[1,3]диоксол-5-илциклопропанкарбоновой кислоты

(6-Бромпиридин-2-ил)амид 1-бензо[1,3]диоксол-5-ил-циклопропанкарбоновой кислоты (36 мг, 0,10 ммоль) растворяют в 1 мл N,N-диметилформамида в реакционной пробирке. Добавляют 4-(диметиламино)фенилбороновую кислоту (21 мг, 0,13 ммоль), 0,1 мл 2 М водного раствора карбоната калия и Pd(dppf)Cl₂ (6,6 мг, 0,0090 ммоль) и реакционную смесь нагревают при температуре 80°С в течение трех часов. Полученный продукт охлаждают до комнатной температуры, отфильтровывают и очищают с помощью препаративной жидкостной хроматографии с обращенными фазами, получая чистый продукт в виде трифторацетата.

ESI-MS, m/z: рассчитано: 401,2, найдено: 402,5 (М+1)⁺;

Время удерживания: 2,96 мин; ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN) δ 1,23-1,27 (м, 2H), 1,62-1,66 (м, 2H), 3,04 (с, 6H), 6,06 (с, 2H), 6,88-6,90 (м, 2H), 6,93-6,96 (м, 1H), 7,05-7,07 (м, 2H), 7,53-7,56 (м, 1H), 7,77-7,81 (м, 3H), 7,84-7,89 (м, 1H), 8,34 (с, 1H).

Следующие схемы используют для получения дополнительных эфиров бороновой кислоты, которые не являются коммерчески доступными.

АА. 1-Метил-4-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-

диоксаборолан-2-ил)фенил]сульфонилпиперазин

Стадия а: 1-(4-Бромфенилсульфонил)-4-метилпиперазин

Раствор 4-бромбензол-1-сульфонилхлорида (256 мг, 1,00 ммоль) в 1 мл дихлорметана медленно добавляют в пробирку (40 мл), содержащую 5 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия, дихлорметан (5 мл) и 1-метилпиперазин (100 мг, 1,00 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Фазы разделяют и органический слой сушат над сульфатом магния. Выпаривают растворитель при пониженном давлении, получая указанный продукт, который используют на следующей стадии без дальнейшей очистки.

ESI-MS, m/z: рассчитано: 318,0, найдено: 318,9 (М+1)⁺;

Время удерживания: 1,30 мин; ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 7,65 (д, J=8,7 Гц, 2H), 7,58 (д, J=8,7 Гц, 2H), 3,03 (т, J=4,2 Гц, 4H), 2,48 (т, J=4,2 Гц, 4H), 2,26 (с, 3H).

Стадия b: 1-Метил-4-[4-(4,4,5,5-тетраметил-

1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]сульфонилпиперазин

В круглодонную колбу емкостью 50 мл вводят 1-(4-бромфенилсульфонил)-4-метилпиперазин (110 мг, 0,350 ммоль), бис(пинаколят)диборон (93 мг, 0,37 ммоль), ацетат палладия (6 мг, 0,02 ммоль) и ацетат калия (103 мг, 1,05 ммоль) в N,N-диметилформамиде (6 мл). Эту смесь дегазируют путем осторожного барботирования аргона через раствор в течение 30 минут при комнатной температуре. Смесь затем нагревают при температуре 80^оС в атмосфере аргона до тех пор, пока реакция не завершится (4 часа). Желательный продукт, 1-метил-4-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]сульфонилпиперазин, и биарильный продукт, 4-(4-метилпиперазин-1-илсульфонил)фенилфенилсульфонил-4-метилпиперазин, получают в соотношении 1:2, как показывает анализ LC/MS. Эту смесь используют без дальнейшей очистки.

ВВ. 4,4,5,5-Тетраметил-2-(4-(2-(метилсульфонил)

этил)фенил)-1,3,2-диоксаборолан

Стадия а: 4-Бромфенетил-4-метилбензолсульфонат

В круглодонную колбу емкостью 50 мл вводят п-бромфенетиловый спирт (1,0 г, 4,9 ммоль), затем добавляют пиридин (15 мл). К этому прозрачному раствору добавляют, в атмосфере аргона, п-толуолсульфонилхлорид (TsCl) (1,4 г, 7,5 ммоль) в виде твердого вещества. Реакционную смесь продувают аргоном и перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов. Сырую смесь обрабатывают с помощью 1 н раствора НСl (20 мл) и экстрагируют этилацетатом (5 раз по 25 мл). Органические фракции сушат над сульфатом натрия, отфильтровывают и концентрируют, получая 4-бромфенетил-4-метилбензолсульфонат (0,60 г, выход 35%) в виде жидкости желтоватого цвета. ¹Н-ЯМР (ацетон-d₆, 300 МГц) δ 7,64 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,40-7,37 (д, J=8,7 Гц, 4H), 7,09 (д, J=8,5 Гц, 2H), 4,25 (т, J=6,9 Гц, 2H), 2,92 (т, J=6,3 Гц, 2H), 2,45 (с, 3H).

Стадия b: (4-Бромфенетил)(метил)сульфан

В круглодонную колбу емкостью 20 мл вводят 4-бромфенетил-4-метилбензолсульфонат (0,354 г, 0,996 ммоль) и СН₃SNa (0,10 г, 1,5 ммоль), затем добавляют ТГФ (1,5 мл) и N-метил-2-пирролидинон (1,0 мл). Эту смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 48 часов и затем обрабатывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10 мл). Смесь экстрагируют этилацетатом (4 раза по 10 мл), сушат над сульфатом натрия, отфильтровывают и концентрируют, получая (4-бромфенетил)(метил)сульфан (0,30 г, сырой) в виде масла желтоватого цвета. ¹Н-ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 7,40 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,06 (д, J=8,4 Гц, 2H), 2,89-2,81 (м, 2H), 2,74-2,69 (м, 2H), 2,10 (с, 3H).

Стадия с: 1-Бром-4-(2-метилсульфонил)этилбензол

В круглодонную колбу емкостью 20 мл вводят (4-бромфенетил)(метил)сульфан (0,311 г, 1,34 ммоль) и оксон (3,1 г, 0,020 моль), затем добавляют смесь ацетон/вода (1:1, 10 мл). Смесь энергично перемешивают при комнатной температуре в течение 20 часов перед тем, как ее концентрируют. Водную смесь экстрагируют этилацетатом (3 раза по 15 мл) и дихлорметаном (3 раза по 10 мл). Органические фракции объединяют, сушат над сульфатом натрия, отфильтровывают и концентрируют, получая полутвердое вещество белого цвета. Очищают сырой продукт с помощью флэш-хроматографии, получая 1-бром-4-(2-метилсульфонил)этилбензол (0,283 г, выход 80%). ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц) d₆ 7,49 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,25 (д, J=8,7 Гц, 2H), 3,43 (м, 2H), 2,99 (м, 2H), 2,97 (с, 3H).

Стадия d: 4,4,5,5-Тетраметил-2-(4-(2-(метилсульфонил)-этил)фенил)-1,3,2-диоксаборолан

4,4,5,5-Тетраметил-2-(4-(2-(метилсульфонил)этил)фенил)-1,3,2-диоксаборолан получают таким же образом, как описано выше в случае 1-метил-4-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]сульфонилпиперазина, Получение АА.

СС. трет-Бутилметил(4-(4,4,5,5-тетраметил-

1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензил)карбамат

Стадия а: трет-Бутил-4-бромбензилкарбамат

Коммерчески доступный п-бромбензиламингидрохлорид (1 г, 4 ммоль) обрабатывают с помощью 10%-ного водного раствора NaOH (5 мл). К прозрачному раствору добавляют (Вос)₂О (1,1 г, 4,9 ммоль), растворенный в диоксане (10 мл). Смесь энергично перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов. Полученный остаток концентрируют, суспендируют в воде (20 мл), экстрагируют этилацетатом (4 раза по 20 мл), сушат над сульфатом натрия, отфильтровывают и концентрируют, получая трет-бутил-4-бромбензилкарбамат (1,23 г, выход 96%) в виде твердого вещества белого цвета. ¹Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ 7,48(д, J=8,4Гц, 2H), 7,40 (т, J=6 Гц, 1H), 7,17 (д, J=8,4 Гц, 2H), 4,07 (д, J=6,3 Гц, 2H), 1,38 (с, 9H).

Стадия b: трет-Бутил-4-бромбензил(метил)карбамат

В пробирку емкостью 60 мл вводят трет-бутил-4-бромбензилкарбамат (1,25 г, 4,37 ммоль), растворенный в ДМФА (12 мл). К этому раствору добавляют Аg₂O (4,0 г, 17 ммоль), затем СН₃I (0,68 мл, 11 ммоль). Смесь перемешивают при температуре 50^оС в течение 18 часов. Реакционную смесь отфильтровывают через слой целита и целит промывают метанолом (2 раза по 20 мл) и дихлорметаном (2 раза по 20 мл). Фильтрат концентрируют до удаления большей части ДМФА. Остаток обрабатывают водой (50 мл) и образуется эмульсия белого цвета. Эту смесь экстрагируют этилацетатом (4 раза по 25 мл), сушат над сульфатом натрия и растворитель выпаривают, получая трет-бутил-4-бромбензил(метил)карбамат (1,3 г, выход 98%) в виде масла желтого цвета. ¹Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ 7,53 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,15 (д, J=8,4 Гц, 2H), 4,32 (с, 2H), 2,74 (с, 3H), 1,38 (с, 9H).

Стадия с: трет-Бутил-4-(4,4,5,5-тетраметил-

1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилметилкарбамат

Реакцию сочетания осуществляют таким же образом, как описано выше в случае 1-метил-4-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]сульфонилпиперазина, Получение АА. Вос-защитную группу удаляют после реакции сочетания путем обработки сырой реакционной смеси с помощью 0,5 мл 1 н раствора НСl в диэтиловом эфире в течение 18 часов перед тем, как очищают с помощью ВЭЖХ.

Соединения дополнительных примеров согласно данному изобретению получают, следуя вышеуказанной методике с незначительными изменениями, но используя арилбороновые кислоты, указанные в таблице 4.

Таблица 4 Дополнительные типичные соединения формулы I Соединение № Амин Бороновая кислота 1 В-2 [2-(диметиламинометил)фенил]бороновая кислота 2 В-2 [4-(1-пиперидил)фенил]бороновая кислота 3 В-2 (3,4-дихлорфенил)бороновая кислота 4 В-2 (4-морфолиносульфонилфенил)бороновая кислота 5 В-2 (3-хлор-4-метоксифенил)бороновая кислота 6 В-2 (6-метокси-3-пиридил)бороновая кислота 7 В-2 (4-диметиламинофенил)бороновая кислота 8 В-2 (4-морфолинофенил)бороновая кислота 9 В-2 [4-(ацетиламинометил)фенил]бороновая кислота 10 В-2 (2-гидроксифенил)бороновая кислота 11 В-1 2-дигидроксиборанилбензойная кислота 12 В-1 (6-метокси-3-пиридил)бороновая кислота 14 В-2 (2,4-диметилфенил)бороновая кислота 15 В-2 [3-(гидроксиметил)фенил]бороновая кислота 16 В-2 3-дигидроксиборанилбензойная кислота 17 В-2 (3-этоксифенил)бороновая кислота 18 В-2 (3,4-диметилфенил)бороновая кислота 19 В-1 [4-(гидроксиметил)фенил]бороновая кислота 20 В-1 3-пиридилбороновая кислота 21 В-2 (4-этилфенил)бороновая кислота 23 В-2 4,4,5,5-тетраметил-2-(4-(2-(метилсульфонил)-этил)фенил)-1,3,2-диоксаборолан 24 В-1 бензо[1,3]диоксол-5-илбороновая кислота 25 В-2 (3-хлорфенил)бороновая кислота 26 В-2 (3-метилсульфониламинофенил)бороновая кислота 27 В-2 (3,5-дихлорфенил)бороновая кислота 28 В-2 (3-метоксифенил)бороновая кислота 29 В-1 (3-гидроксифенил)бороновая кислота 31 В-2 фенилбороновая кислота 32 В-2 (2,5-дифторфенил)бороновая кислота 33 В-8 фенилбороновая кислота 36 В-2 (2-метилсульфониламинофенил)бороновая кислота 37 В-1 1Н-индол-5-илбороновая кислота 38 В-2 2,2,2-трифтор-N-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензил)ацетамид 39 В-2 (2-хлорфенил)бороновая кислота 40 В-1 м-толилбороновая кислота 41 В-2 (2,4-диметоксипиримидин-5-ил)бороновая кислота 42 В-2 (4-метоксикарбонилфенил)бороновая кислота 43 В-2 трет-бутил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилметилкарбамат^(а) 44 В-2 (4-этоксифенил)бороновая кислота 45 В-2 (3-метилсульфонилфенил)бороновая кислота 46 В-2 (4-фтор-3-метилфенил)бороновая кислота 47 В-2 (4-цианофенил)бороновая кислота 48 В-1 (2,5-диметоксифенил)бороновая кислота 49 В-1 (4-метилсульфонилфенил)бороновая кислота 50 В-1 циклопент-1-енилбороновая кислота 51 В-2 о-толилбороновая кислота 52 В-1 (2,6-диметилфенил)бороновая кислота 53 В-8 2-хлорфенилбороновая кислота 54 В-2 (2,5-диметоксифенил)бороновая кислота 55 В-2 (2-фтор-3-метоксифенил)бороновая кислота 56 В-2 (2-метоксифенил)бороновая кислота 57 В-9 фенилбороновая кислота 58 В-2 (4-изопропоксифенил)бороновая кислота 59 В-2 (4-карбамоилфенил)бороновая кислота 60 В-2 (3,5-диметилфенил)бороновая кислота 61 В-2 (4-изобутилфенил)бороновая кислота 62 В-1 (4-цианофенил)бороновая кислота 63 В-10 фенилбороновая кислота 64 В-2 N-этил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамид 65 В-1 2,3-дигидробензофуран-5-илбороновая кислота 66 В-2 (4-хлорфенил)бороновая кислота 67 В-2 (4-хлор-3-метилфенил)бороновая кислота 68 В-2 (2-фторфенил)бороновая кислота 69 В-2 бензо[1,3]диоксол-5-илбороновая кислота 70 В-2 (4-морфолинокарбонилфенил)бороновая кислота 71 В-1 циклогекс-1-енилбороновая кислота 72 В-2 (3,4,5-триметоксифенил)бороновая кислота 73 В-2 [4-(диметиламинометил)фенил]бороновая кислота 74 В-2 м-толилбороновая кислота 77 В-2 (3-цианофенил)бороновая кислота 78 В-2 [3-(трет-бутоксикарбониламинометил)-фенил]бороновая кислота^(а) 79 В-2 (4-метилсульфонилфенил)бороновая кислота 80 В-1 п-толилбороновая кислота 81 В-2 (2,4-диметоксифенил)бороновая кислота 82 В-2 (2-метоксикарбонилфенил)бороновая кислота 83 В-2 (2,4-дифторфенил)бороновая кислота 84 В-2 (4-изопропилфенил)бороновая кислота 85 В-2 [4-(2-диметиламиноэтилкарбамоил)фенил]-бороновая кислота 86 В-1 (2,4-диметоксифенил)бороновая кислота 87 В-1 бензофуран-2-илбороновая кислота 88 В-2 2,3-дигидробензофуран-5-илбороновая кислота 89 В-2 (3-фтор-4-метоксифенил)бороновая кислота 91 В-1 (3-цианофенил)бороновая кислота 92 В-1 (4-диметиламинофенил)бороновая кислота 93 В-2 (2,6-диметоксифенил)бороновая кислота 94 В-2 (2-метокси-5-метилфенил)бороновая кислота 95 В-2 (3-ацетиламинофенил)бороновая кислота 96 В-1 (2,4-диметоксипиримидин-5-ил)бороновая кислота 97 В-2 (5-фтор-2-метоксифенил)бороновая кислота 98 В-1 [3-(гидроксиметил)фенил]бороновая кислота 99 В-1 (2-метоксифенил)бороновая кислота 100 В-2 (2,4,6-триметилфенил)бороновая кислота 101 В-2 [4-(диметилкарбамоил)фенил]бороновая кислота 102 В-2 [4-(трет-бутоксикарбониламинометил)фенил]-бороновая кислота^(а) 104 В-1 (2-хлорфенил)бороновая кислота 105 В-1 (3-ацетиламинофенил)бороновая кислота 106 В-2 (2-этоксифенил)бороновая кислота 107 В-2 3-фурилбороновая кислота 108 В-2 [2-(гидроксиметил)фенил]бороновая кислота 110 В-9 2-хлорфенилбороновая кислота 111 В-2 (2-фтор-6-метоксифенил)бороновая кислота 112 В-2 (2-этокси-5-метилфенил)бороновая кислота 113 В-2 1Н-индол-5-илбороновая кислота 114 В-1 (3-хлор-4-пиридил)бороновая кислота 115 В-2 циклогекс-1-енилбороновая кислота 116 В-1 о-толилбороновая кислота 119 В-2 (2-аминофенил)бороновая кислота 120 В-2 (4-метокси-3,5-диметилфенил)бороновая кислота 121 В-2 (4-метоксифенил)бороновая кислота 122 В-2 (2-пропоксифенил)бороновая кислота 123 В-2 (2-изопропоксифенил)бороновая кислота 124 В-2 (2,3-дихлорфенил)бороновая кислота 126 В-2 (2,3-диметилфенил)бороновая кислота 127 В-2 (4-фторфенил)бороновая кислота 128 В-1 (3-метоксифенил)бороновая кислота 129 В-2 (4-хлор-2-метилфенил)бороновая кислота 130 В-1 (2,6-диметоксифенил)бороновая кислота 131 В-2 (5-изопропил-2-метоксифенил)бороновая кислота 132 В-2 (3-изопропоксифенил)бороновая кислота 134 В-2 4-дигидроксиборанилбензойная кислота 135 В-2 (4-диметиламино-2-метоксифенил)бороновая кислота 136 В-2 (4-метилсульфинилфенил)бороновая кислота 137 В-2 [4-(метилкарбамоил)фенил]бороновая кислота 138 В-1 8-хинолилбороновая кислота 139 В-2 циклопент-1-енилбороновая кислота 140 В-2 п-толилбороновая кислота 142 В-8 2-метоксифенилбороновая кислота 143 В-2 (2,5-диметилфенил)бороновая кислота 144 В-1 (3,4-диметоксифенил)бороновая кислота 145 В-1 (3-хлорфенил)бороновая кислота 146 В-2 [4-(морфолинометил)фенил]бороновая кислота 147 В-10 4-(диметиламино)фенилбороновая кислота 148 В-2 [4-(метилсульфамоил)фенил]бороновая кислота 149 В-1 4-дигидроксиборанилбензойная кислота 150 В-1 фенилбороновая кислота 151 В-2 (2,3-дифторфенил)бороновая кислота 152 В-1 (4-хлорфенил)бороновая кислота 153 В-9 2-метоксифенилбороновая кислота 154 В-2 3-дигидроксиборанилбензойная кислота 155 В-10 2-метоксифенилбороновая кислота 157 В-2 (3-хлор-4-фторфенил)бороновая кислота 158 В-2 (2,3-диметоксифенил)бороновая кислота 159 В-2 [4-(трет-бутоксикарбониламинометил)фенил]-бороновая кислота 160 В-2 (4-сульфамоилфенил)бороновая кислота 161 В-2 (3,4-диметоксифенил)бороновая кислота 162 В-2 [4-(метилсульфониламинометил)фенил]бороновая кислота 166 В-1 4-(N,N-диметилсульфамоил)фенилбороновая кислота 167 В-6 2-изопропилфенилбороновая кислота 171 В-6 4-(метилкарбамоил)фенилбороновая кислота 173 В-2 3-фторфенилбороновая кислота 174 В-6 3-(N,N-диметилсульфамоил)фенилбороновая кислота 179 В-6 4-(N-метилсульфамоил)фенилбороновая кислота 181 В-1 3-((трет-бутоксикарбониламино)метил)фенилбороновая кислота 185 В-3 3-метоксифенилбороновая кислота 186 В-6 2-хлорфенилбороновая кислота 187 В-7 3-(диметилкарбамоил)фенилбороновая кислота 188 В-6 3-(гидроксиметил)фенилбороновая кислота 189 В-1 3-(N,N-диметилсульфамоил)фенилбороновая кислота 190 В-1 4-сульфамоилфенилбороновая кислота 191 В-1 2-изопропилфенилбороновая кислота 193 В-5 3-сульфамоилфенилбороновая кислота 194 В-3 4-изопропилфенилбороновая кислота 195 В-3 3-(N,N-диметилсульфамоил)фенилбороновая кислота 196 В-7 4-(метилкарбамоил)фенилбороновая кислота 198 В-3 3-(диметилкарбамоил)фенилбороновая кислота 204 В-5 3-(диметилкарбамоил)фенилбороновая кислота 206 В-3 4-хлорфенилбороновая кислота 207 В-1 4-(N-метилсульфамоил)фенилбороновая кислота 209 В-1 3-(метилкарбамоил)фенилбороновая кислота 210 В-3 4-сульфамоилфенилбороновая кислота 213 В-5 3-изопропилфенилбороновая кислота 215 В-7 4-метоксифенилбороновая кислота 216 В-6 3-хлорфенилбороновая кислота 217 В-7 м-толилбороновая кислота 219 В-5 4-(гидроксиметил)фенилбороновая кислота 222 В-6 м-толилбороновая кислота 224 В-5 2-хлорфенилбороновая кислота 225 В-1 3-изопропилфенилбороновая кислота 227 В-6 4-(гидроксиметил)фенилбороновая кислота 229 В-7 3-хлорфенилбороновая кислота 230 В-6 о-толилбороновая кислота 231 В-1 2-(гидроксиметил)фенилбороновая кислота 235 В-3 3-изопропилфенилбороновая кислота 238 В-5 3-карбамоилфенилбороновая кислота 241 В-2 4-(N,N-диметилсульфамоил)фенилбороновая кислота 243 В-7 2-метоксифенилбороновая кислота 247 В-6 3-(диметилкарбамоил)фенилбороновая кислота 251 В-3 3-сульфамоилфенилбороновая кислота 252 В-1 4-метоксифенилбороновая кислота 254 В-3 4-(N-метилсульфамоил)фенилбороновая кислота 255 В-1 4-((трет-бутоксикарбониламино)метил)фенил-бороновая кислота 257 В-5 4-хлорфенилбороновая кислота 258 В-3 3-(метилкарбамоил)фенилбороновая кислота 260 В-3 2-(гидроксиметил)фенилбороновая кислота 263 В-4 4-(гидроксиметил)фенилбороновая кислота 264 В-7 4-хлорфенилбороновая кислота 265 В-6 4-карбамоилфенилбороновая кислота 266 В-5 3-метоксифенилбороновая кислота 269 В-7 фенилбороновая кислота 272 В-3 4-метоксифенилбороновая кислота 274 В-6 2-(гидроксиметил)фенилбороновая кислота 277 В-3 4-(гидроксиметил)фенилбороновая кислота 278 В-3 3-(метилкарбамоил)фенилбороновая кислота 280 В-3 4-(N,N-диметилсульфамоил)фенилбороновая кислота 283 В-3 4-карбамоилфенилбороновая кислота 286 В-1 4-(метилкарбамоил)фенилбороновая кислота 287 В-2 4-(трифторметокси)фенилбороновая кислота 288 В-5 4-(N-метилсульфамоил)фенилбороновая кислота 289 В-3 фенилбороновая кислота 290 В-6 4-изопропилфенилбороновая кислота 291 В-3 3-(гидроксиметил)фенилбороновая кислота 293 В-6 3-метоксифенилбороновая кислота 294 В-7 2-(гидроксиметил)фенилбороновая кислота 295 В-3 3-карбамоилфенилбороновая кислота 296 В-5 м-толилбороновая кислота 297 В-1 4-(диметилкарбамоил)фенилбороновая кислота 298 В-3 2-метоксифенилбороновая кислота 299 В-7 п-толилбороновая кислота 300 В-3 о-толилбороновая кислота 301 В-5 2-(гидроксиметил)фенилбороновая кислота 303 В-6 2-метоксифенилбороновая кислота 305 В-6 3-изопропилфенилбороновая кислота 308 В-7 4-изопропилфенилбороновая кислота 309 В-3 4-(диметилкарбамоил)фенилбороновая кислота 310 В-5 4-(метилкарбамоил)фенилбороновая кислота 313 В-7 о-толилбороновая кислота 314 В-7 3-(метилкарбамоил)фенилбороновая кислота 315 В-3 п-толилбороновая кислота 320 В-1 3-(диметилкарбамоил)фенилбороновая кислота 321 В-5 4-сульфамоилфенилбороновая кислота 322 В-6 фенилбороновая кислота 323 В-5 о-толилбороновая кислота 324 В-3 4-((трет-бутоксикарбониламино)метил)фенил-бороновая кислота^(а) 326 В-5 4-(диметилкарбамоил)фенилбороновая кислота 327 В-5 2-метоксифенилбороновая кислота 328 В-1 4-изопропилфенилбороновая кислота 329 В-5 2-изопропилфенилбороновая кислота 331 В-3 м-толилбороновая кислота 333 В-6 4-метоксифенилбороновая кислота 334 В-5 4-метоксифенилбороновая кислота 337 В-6 п-толилбороновая кислота 343 В-5 4-(N,N-диметилсульфамоил)фенилбороновая кислота 346 В-3 2-изопропилфенилбороновая кислота 348 В-6 4-((трет-бутоксикарбониламино)метил)фенил-бороновая кислота^(а) 349 В-1 3-сульфамоилфенилбороновая кислота 350 В-3 3-((трет-бутоксикарбониламино)метил)фенил-бороновая кислота^(а) 351 В-5 фенилбороновая кислота 352 В-7 2-изопропилфенилбороновая кислота 353 В-6 4-хлорфенилбороновая кислота 354 В-7 2-хлорфенилбороновая кислота 355 В-5 3-(N,N-диметилсульфамоил)фенилбороновая кислота 356 В-7 3-сульфамоилфенилбороновая кислота 357 В-7 4-(N-метилсульфамоил)фенилбороновая кислота 359 В-1 4-карбамоилфенилбороновая кислота 361 В-3 3-хлорфенилбороновая кислота 365 В-1 3-карбамоилфенилбороновая кислота 367 В-7 3-(гидроксиметил)фенилбороновая кислота 368 В-4 4-(диметилкарбамоил)фенилбороновая кислота 370 В-5 3-(гидроксиметил)фенилбороновая кислота 371 В-5 3-(метилкарбамоил)фенилбороновая кислота 374 В-6 4-сульфамоилфенилбороновая кислота 375 В-5 4-карбамоилфенилбороновая кислота 389 В-12 2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 390 В-11 3-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 391 В-13 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 392 В-11 3-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 393 В-12 2-хлор-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 394 В-12 3-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 395 В-2 4-циклогексилфенилбороновая кислота 396 В-12 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 397 В-11 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 398 В-12 3-фтор-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 399 В-13 2-метокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 400 В-13 3-фтор-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 401 В-11 2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 402 В-12 2-метокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 403 В-11 2-фтор-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 404 В-11 2-метокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 405 В-12 2-фтор-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 406 В-13 2-фтор-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 407 В-11 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 408 В-13 2-фтор-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 410 В-2 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)анилин 411 В-13 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 412 В-2 2-метоксипиридин-3-илбороновая кислота 414 В-11 3-фтор-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 415 В-13 3-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 417 В-12 2-фтор-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 418 В-4 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 419 В-11 2-хлор-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 420 В-2 4-(гидроксиметил)фенилбороновая кислота 421 В-11 2-фтор-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота 422 В-12 3-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота

(а) Вос-защитную группу удаляют после реакции сочетания путем обработки сырой реакционной смеси с помощью 0,5 мл 1 н раствора НCl в диэтиловом эфире в течение 18 часов, перед очисткой путем ВЭЖХ.

Соединения дальнейших примеров согласно данному изобретению могут быть получены путем модификации промежуточных продуктов, как проиллюстрировано выше.

Получение производных соединений после сочетания

DD. 1-(Бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(6-(4-

(2-метилпирролидин-1-илсульфонил)фенил)пиридин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Стадия а: 4-(4,4’-Диметоксибензгидрил)

тиофенилбороновая кислота

4,4’-Диметоксибензгидрол (2,7 г, 11 ммоль) и 4-меркаптофенилбороновую кислоту (1,54 г, 10 ммоль) растворяют в 20 мл АсОН и нагревают при температуре 60°С в течение 1 часа. Растворитель выпаривают и остаток высушивают в высоком вакууме. Это вещество используют без дальнейшей очистки.

Стадия b: 6-(4-(Бис(4-метоксифенил)метилтио)фенил)-

пиридин-2-амин

4-(4,4’-Диметоксибензгидрил)тиофенилбороновую кислоту (10 ммоль) и 2-амино-6-бромпиридин (1,73 г, 10 ммоль) растворяют в МеСN (40 мл), затем добавляют Pd(PPh₃)₄ (~50 мг) и водный раствор К₂СО₃ (1 М раствор, 22 мл). Реакционную смесь нагревают порционным способом в СВЧ-печи (160°С, 400 с). Продукты распределяют между этилацетатом и водой. Органический слой промывают водой, насыщенным солевым раствором и сушат над сульфатом натрия. Выпаривают летучие вещества, получая масло, которое используют без очистки на следующей стадии.

ESI-MS, m/z: рассчитано: 428,0, найдено: 429,1 (М+1).

Стадия с: 1-(Бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(6-(4-(бис

(4-метоксифенил)метилтио)фенил)пиридин-2-ил)

циклопропанкарбоксамид

6-[(4,4’-Диметоксибензгидрил)-4-тиофенил]пиридин-2-иламин (~10 ммоль) и 1-бензо[1,3]диоксол-5-илциклопропанкарбоновую кислоту (2,28 г, 11 ммоль) растворяют в хлороформе (25 мл) и затем добавляют ТСРН (4,1 г, 12 ммоль) и DIEA (5 мл, 30 ммоль). Реакционную смесь нагревают при температуре 65°С в течение 48 часов перед удалением летучих веществ при пониженном давлении. Остаток переносят в делительную воронку и распределяют между водой (200 мл) и этилацетатом (150 мл). Органический слой промывают 5%-ным раствором NaHCO₃ (2 раза по 150 мл), водой (1 раз по 150 мл), насыщенным солевым раствором (1 раз 150 мл) и сушат над сульфатом магния. После выпаривания растворителя получают сырой 1-(бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(6-(4-(бис(4-метоксифенил)метилтио)фенил)пиридин-2-ил)циклопропанкарбоксамид в виде светлого масла.

ESI-MS, m/z: рассчитано: 616,0, найдено: 617,0 (М+1);

(чистота по ВЭЖХ равна ~85%; УФ-спектр, длина волны 254 нм).

Стадия d: 4-(6-(1-(Бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-циклопропанкарбоксамидо)пиридин-2-ил)

бензолсульфоновая кислота

1-(Бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(6-(4-(бис(4-метоксифенил) метилтио)фенил)пиридин-2-ил)циклопропанкарбоксамид (~8,5 ммоль) растворяют в АсОН (75 мл), затем добавляют 30%-ный раствор Н₂О₂ (10 мл). Спустя 2 часа добавляют еще пероксид водорода (10 мл). Реакционную смесь перемешивают при температуре 35-45°С в течение ночи (конверсия составляет ~90% по ВЭЖХ). Объем реакционной смеси уменьшают до трети путем выпаривания (температура бани ниже 40°С). Реакционную смесь загружают непосредственно в колонку (С-18) препаративной ВЭЖХ с обращенными фазами и подвергают очистке. Фракции с 4-(6-(1-(бензо[d][1,3]диоксол-5-ил) циклопропанкарбоксамидо)пиридин-2-ил)бензолсульфоновой кислотой собирают и выпаривают (1,9 г, 43%, в расчете на 4-меркаптофенилбороновую кислоту).

ESI-MS, m/z: рассчитано: 438,0, найдено: 438,9 (М+1).

Стадия е: 4-(6-(1-(Бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-циклопропанкарбоксамидо)пиридин-2-ил)бензол-1-сульфонилхлорид

4-(6-(1-(Бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-циклопропанкарбоксамидо) пиридин-2-ил)бензолсульфоновую кислоту (1,9 г, 4,3 ммоль) растворяют в РОСl₃ (30 мл), затем добавляют SOCl₂ (3 мл) и ДМФА (100 мкл). Реакционную смесь нагревают при температуре 70-80°С в течение 15 минут. Летучие компоненты выпаривают и затем повторно выпаривают со смесью хлороформ - толуол. Остаточное масло коричневого цвета разбавляют хлороформом (22 мл) и непосредственно используют для сульфонилирования.

ESI-MS, m/z: рассчитано: 456,0, найдено: 457,1 (М+1).

Стадия f: 1-(Бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(6-(4-(2-метилпирролидин-1-илсульфонил)фенил)пиридин-2-ил)

циклопропанкарбоксамид

4-(6-(1-(Бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-циклопропанкарбоксамидо)пиридин-2-ил)бензол-1-сульфонилхлорид (~35 мкмоль, 400 мкл раствора в хлороформе) обрабатывают с помощью 2-метилпирролидина, затем добавляют DIEA (100 мкл). Реакционную смесь выдерживают при комнатной температуре в течение 1 часа, концентрируют, затем разбавляют с помощью ДМСО (400 мкл). Полученный раствор подвергают очистке путем ВЭЖХ. Фракции, содержащие желательный продукт, объединяют и концентрируют в вакуумной центрифуге при температуре 40°С, получая трифторацетат целевого вещества (ESI-MS, m/z: рассчитано: 505,0, найдено: 505,9 (М+1), время удерживания: 4,06 мин). ¹Н-ЯМР (250МГц, ДМСО-d₆) δ 1,15 (м, 2H), 5 1,22 (д, 3H, J=6,3 Гц), δ5 1,41-1,47 (м, 2H), δ 1,51 (м, 2H), δ 1,52-1,59 (м, 2H), δ 3,12 (м, 1H), δ 3,33 (м, 1H), δ 3,64 (м, 1Н), δ 6,07 (с, 2H), δ 6,96-7,06 (м, 2H), δ 7,13 (д, 1H, J=1,3 Гц), δ 7,78 (д, 1H, J=8,2 Гц), δ 7,88 (д, 2H, J=8,5 Гц), δ 7,94 (т, 1H, J=8,2 Гц), δ 8,08 (д, 1H, J=8,2 Гц), δ 8,16 (д, 2H, J=8,5 Гц), δ 8,53 (с, 1H).

Соединения, указанные в следующей таблице, синтезируют, как описано выше, используя коммерчески доступные амины. Соединения дополнительных примеров согласно данному изобретению получают, следуя вышеуказанной методике с незначительными изменениями, но используя амины, указанные в таблице 5.

Таблица 5 Дополнительные типичные соединения формулы (I) Соединение № Амин 13 1-метилпиперазин 22 2,6-диметилморфолин 30 пиперидин-3-илметанол 34 2-(метиламино)этанол 35 (R)-пирролидин-2-илметанол 75 2-(пирролидин-1-ил)этанамин 76 пирролидин 90 пиперидин 103 (тетрагидрофуран-2-ил)метанамин 109 пиперидин-4-ол 117 2-метилпропан-2-амин 118 циклопентанамин 125 (S)-2-(метоксиметил)пирролидин 133 (R)-2-(метоксиметил)пирролидин 141 пиперидин-4-илметанол 156 N-метилпропанамин 163 пирролидин-3-ол 168 2-(2-аминоэтокси)этанол 172 2-морфолиноэтанамин 175 фуран-2-илметанамин 176 пиперидин-3-ол 178 2-(1-метилпирролидин-2-ил)этанамин 180 3-метилпиперидин 182 (S)-пирролидин-2-карбоксамид 184 (R)-1-аминопропан-2-ол 197 2-аминопропан-1,3-диол 199 2-амино-2-этилпропан-1,3-диол 203 N¹,N¹-диметилэтан-1,2-диамин 205 (R)-2-амино-3-метилбутан-1-ол 208 циклогексанамин 212 пиперазин-2-он 232 2-аминоэтанол 233 пиперидин-2-илметанол 234 2-(пиперазин-1-ил)этанол 244 N-(циклопропилметил)пропан-1-амин 249 3-морфолинопропан-1-амин 261 1-(пиперазин-1-ил)этанон 267 2-(1Н-имидазол-4-ил)этанамин 268 (R)-2-аминопропан-1-ол 270 2-метилпиперидин 273 2-(пиридин-2-ил)этанамин 275 3,3-дифторпирролидин 276 2-амино-2-метилпропан-1-ол 285 3-(1Н-имидазол-1-ил)пропан-1-амин 304 пиперидин-3-карбоксамид 306 циклобутанамин 307 (S)-3-аминопропан-1,2-диол 311 N-метилциклогексанамин 312 N-метилпроп-2-ен-1-амин 316 2-амино-2-метилпропан-1,3-диол 325 (5-метилфуран-2-ил)метанамин 330 3,3-диметилбутан-1-амин 332 2-метилпирролидин 335 2,5-диметилпирролидин 336 (R)-2-аминобутан-1-ол 338 пропан-2-амин 339 N-метилбутан-1-амин 342 4-амино-3-гидроксимасляная кислота 344 3-(метиламино)пропан-1,2-диол 347 N-(2-аминоэтил)ацетамид 360 1-аминобутан-2-ол 364 (S)-пирролидин-2-карбоновая кислота 366 1-(2-метоксиэтил)пиперазин 373 (R)-2-аминопентан-1-ол

ЕЕ. 1-Бензо[1,3]диоксол-5-ил-N-[6-[4-[(метилметилсульфониламино)метил]фенил]-2-пиридил]

циклопропан-1-карбоксамид (соединение № 292)

К исходному амину (полутвердое вещество коричневого цвета, 0,100 г, ~0,2 ммоль, полученное путем обработки соответствующего трет-бутилоксикарбонильного производного 1н раствором НСl в диэтиловом эфире) добавляют дихлорэтан (DCE) (1,5 мл), затем пиридин (0,063 мл, 0,78 ммоль) и метансульфонилхлорид (0,03 мл, 0,4 ммоль). Эту смесь перемешивают при температуре 65°С в течение 3 часов. Спустя это время, анализ LC/MS показывает конверсию в желательный продукт, составляющую ~50%. Добавляют два дополнительных эквивалента пиридина и 1,5 эквивалента метансульфонилхлорида и реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов. Остаток концентрируют и очищают с помощью ВЭЖХ, получая 1-бензо[1,3]диоксол-5-ил-N-[6-[4-[(метилметилсульфониламино) метил]фенил]-2-пиридил]циклопропан-1-карбоксамид (0,020 г, выход 21%) в виде твердого вещества белого цвета.

ESI-MS, m/z: рассчитано: 479,2, найдено: 480,1 (М+1)⁺.

FF. (R)-1-(3-Гидрокси-4-метоксифенил)-N-(6-(4-(2-(гидроксиметил)пирролидин-1-илсульфонил)фенил)пиридин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

(R)-1-(3-(Бензилокси)-4-метоксифенил)-N-(6-(4-(2-(гидроксиметил)пирролидин-1-илсульфонил)фенил)пиридин-2-ил)циклопропанкарбоксамид (28 мг, 0,046 ммоль) растворяют в этаноле (3 мл). Добавляют палладий-на-угле (10%-ный, 20 мг) и реакционную смесь перемешивают в течение ночи в атмосфере водорода (1 атм.). Катализатор отфильтровывают и продукт выделяют путем хроматографии на силикагеле (50-80% этилацетата в гексане), получая (R)-1-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-N-(6-(4-(2-(гидроксиметил)пирролидин-1-илсульфонил)фенил)пиридин-2-ил)циклопропанкарбоксамид (8 мг, выход 34%).

ESI-MS, m/z: рассчитано: 523,4, найдено: 524,3 (М+1)⁺;

Время удерживания: 3,17 мин.

2-Амино-5-фенилпиридин (CAS [33421-40-8]) означает С-1.

GG. (R)-(1-(4-(6-Аминопиридин-2-ил)фенилсульфонил)

пирролидин-2-ил)метанолгидрохлорид (С-2)

Стадия а: (R)-(1-(4-Бромфенилсульфонил)

пирролидин-2-ил)метанол

К смеси насыщенного водного раствора NaHCO₃ (44 г, 0,53 моль), СН₂Сl₂ (400 мл) и пирролидин-2-илметанола (53 г, 0,53 моль) добавляют раствор 4-бромбензолсульфонилхлорида (127 г, 0,50 моль) в СН₂Сl₂ (100 мл). Реакционную смесь перемешивают при температуре 20°С в течение ночи. Органическую фазу отделяют и сушат над сульфатом натрия. Выпаривают растворитель при пониженном давлении, получая (R)-(1-(4-бромфенилсульфонил)-пирролидин-2-ил)метанол (145 г, сырой), который используют на следующей стадии без дальнейшей очистки. ¹Н-ЯМР (CDCl₃,300 МГц) δ 7,66-7,73 (м, 4H), 3,59-3,71 (м, 3 H), 3,43-3,51 (м, 1H), 3,18-3,26 (м, 1H), 1,680-1,88 (м, 3H), 1,45-1,53 (м, 1H).

Стадия b: (R)-1-(4-Бромбензолсульфонил)-2-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)пирролидин

К раствору [1-(4-бромбензолсульфонил)пирролидин-2-ил]метанола (50,0 г, 0,16 моль) и 1Н-имидазола (21,3 г, 0,31 моль) в СН₂Сl₂ (500 мл) порциями добавляют трет-бутилхлордиметилсилан (35,5 г, 0,24 моль). После завершения добавления, смесь перемешивают в течение 1 часа при комнатной температуре. Реакционную смесь гасят водой (200 мл) и выделенный водный слой экстрагируют с помощью СН₂Сl₂ (3 раза по 100 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и выпаривают в вакууме, получая 1-(4-бромбензолсульфонил)-2-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)пирролидин (68,0 г, выход 99%). ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 7,63-7,71 (м, 4 H), 3,77-3,81 (м, 1 H), 3,51-3,63 (м, 2H), 3,37-3,43 (м, 1H), 3,02-3,07 (м, 1H), 1,77-1,91 (м, 2H), 1,49-1,57 (м, 2H), 0,87 (с, 9H), 0,06 (д, J=1,8 Гц, 6H).

Стадия с: (R)-4-(2-((трет-Бутилдиметилсилилокси)метил)-пирролидин-1-илсульфонил)фенилбороновая кислота

К раствору 1-(4-бромбензолсульфонил)-2-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)пирролидина (12,9 г, 29,7 ммоль) и В(О-изопропил)₃ (8,4 г, 45 ммоль) в безводном ТГФ (100 мл) по каплям добавляют н-BuLi (2,5 М раствор в гексане, 29,7 мл) при температуре -70^оС. После завершения добавления, смесь медленно нагревают до температуры -10°С и обрабатывают раствором НСl (1 М раствор, 50 мл). Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия и выпаривают в вакууме. Органические слои объединяют, получая сырую (R)-4-(2-((трет-бутилдиметилсилилокси)метил)пирролидин-1-илсульфонил)-фенилбороновую кислоту (15,0 г), которую используют непосредственно на следующей стадии.

Стадия d: трет-Бутиловый эфир (6-{4-[2-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)пирролидин-1-сульфонил]

фенил}-пиридин-2-ил)карбаминовой кислоты

К раствору трет-бутилового эфира (6-бромпиридин-2-ил)карбаминовой кислоты (24,6 г, 90,0 ммоль) и ДМФА (250 мл) добавляют (R)-4-(2-((трет-бутилдиметилсилилокси)метил)-пирролидин-1-илсульфонил)фенилбороновую кислоту (45,0 г), Pd(PPh₃)₄ (10,4 г, 9,0 ммоль), карбонат калия (18,6 г, 135 моль) и воду (200 мл). Полученную смесь дегазируют путем осторожного барботирования аргона через раствор в течение 5 минут при температуре 20°С. Реакционную смесь затем нагревают при температуре 80°С в течение ночи. ДМФА удаляют в вакууме. К остатку добавляют этилацетат (300 мл). Смесь отфильтровывают через слой силикагеля, который промывают этилацетатом (3 раза по 50 мл). Объединенные органические экстракты выпаривают в вакууме. Сырой остаток очищают на колонке (петролейный эфир/этилацетат = 20:1), получая трет-бутиловый эфир (6-{4-[2-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)пирролидин-1-сульфонил]фенил}пиридин-2-ил)карбаминовой кислоты (22,2 г, выход 45% за 2 стадии). ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 8,09 (д, J=8,4 Гц, 2 H), 7,88-7,96(м, 3H), 8,09 (т, J=7,8 Гц, 1H), 7,43-7,46 (м, 1H), 7,38 (с, 1H), 3,83-3,88 (м, 1H), 3,64-3,67 (м, 1H), 3,53-3,59 (м, 1H), 3,41-3,47 (м, 1H), 3,08-3,16 (м, 1H), 1,82-1,91 (м, 2H), 1,67-1,69 (м, 1H), 1,53-1,56 (м, 10H), 0,89 (с, 9H), 0,08 (д, J=2,4 Гц, 6 H).

Стадия е: трет-Бутиловый эфир {6-[4-(2-

гидроксиметилпирролидин-1-сульфонил)фенил]

пиридин-2-ил}карбаминовой кислоты

Раствор сырого трет-бутилового эфира (6-{4-[2-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)пирролидин-1-сульфонил]фенил}-пиридин-2-ил)карбаминовой кислоты (22,2 г, 40,5 ммоль) и ТВАF (21,2 г, 81,0 ммоль) в дихлорметане (300 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Эту смесь промывают насыщенным солевым раствором (3 раза по 100 мл), сушат над сульфатом натрия и выпаривают в вакууме, получая трет-бутиловый эфир {6-[4-(2-гидроксиметилпирролидин-1-сульфонил)фенил]-пиридин-2-ил}карбаминовой кислоты (15,0 г, выход 86%), который используют непосредственно на следующей стадии.

Стадия f: (R)-(1-(4-(6-Аминопиридин-2-ил)-фенилсульфонил)пирролидин-2-ил)метанолгидрохлорид (С-2)

Раствор трет-бутилового эфира {6-[4-(2-гидроксиметилпирролидин-1-сульфонил)фенил]пиридин-2-ил} карбаминовой кислоты (15,0 г, 34,6 ммоль) в растворе хлороводорода в метаноле (50 мл, 2 М раствор) кипятят с обратным холодильником в течение 2 часов. После охлаждения до комнатной температуры, реакционную смесь выпаривают в вакууме и промывают этилацетатом, получая (R)-(1-(4-(6-аминопиридин-2-ил)фенилсульфонил)пирролидин-2-ил)метанолгидрохлорид (С-2; 11,0 г, выход 86%). ¹Н-ЯМР (300МГц, ДМСО-d₆) δ 8,18 (д, J=8,7 Гц, 2H), 7,93-7,99 (м, 3H), 7,31 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,03 (д, J=8,7 Гц, 1H), 3,53-3,57 (м, 2H), 3,29-35 (м, 2H), 3,05-3,13 (м, 1H), 1,77-1,78 (м, 2H), 1,40-1,45 (м, 2H). MS (ESI), m/z: 334,2 (М+Н)⁺.

НН. N-(4-(6-Аминопиридин-2-ил)бензил)метансульфонамид (С-3)

Стадия а: трет-Бутиловый эфир [6-(4-цианофенил)

пиридин-2-ил]карбаминовой кислоты

Смесь 4-цианобензолбороновой кислоты (7,35 г, 50 ммоль), трет-бутилового эфира (6-бромпиридин-2-ил)карбаминовой кислоты (13,8 г, 50 ммоль), Pd(PPh₃)₄ (5,8 г, 0,15 ммоль) и К₂СО₃ (10,4 г, 75 ммоль) в смеси ДМФА/Н₂О (1:1, 250 мл) перемешивают в атмосфере аргона при температуре 80°С в течение ночи. ДМФА выпаривают при пониженном давлении и остаток растворяют в этилацетате (200 мл). Смесь промывают водой и насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и концентрируют досуха. Остаток очищают на колонке с силикагелем (петролейный эфир/этилацетат = 50:1), получая трет-бутиловый эфир [6-(4-цианофенил)пиридин-2-ил]карбаминовой кислоты (7,0 г, выход 60%). ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 8,02-8,07 (м, 2H), 7,95 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,71-7,79 (м, 3H), 7,37-7,44 (м, 2H), 1,53 (с, 9H).

Стадия b: трет-Бутиловый эфир [6-(4-аминометилфенил)

пиридин-2-ил]карбаминовой кислоты

Суспензию трет-бутилового эфира [6-(4-цианофенил)пиридин-2-ил]карбаминовой кислоты (7,0 г, 24 ммоль), никеля Ренея (1,0 г) в этаноле (500 мл) и NH₃·H₂O (10 мл) гидрируют в атмосфере водорода (50 фунт/кв.дюйм) при температуре 50°С в течение 6 часов. Катализатор отфильтровывают и фильтрат концентрируют досуха, получая трет-бутиловый эфир [6-(4-аминометилфенил)пиридин-2-ил]карбаминовой кислоты, который используют непосредственно на следующей стадии. ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 7,83-7,92 (м, 3H), 7,70 (т, J=7,8 Гц, 1H), 7,33-7,40 (м, 4H), 3,92 (ушир,с, 2H), 1,53 (с, 9H).

Стадия с: трет-Бутиловый эфир {6-[4-(метансульфониламинометил)фенил]пиридин-2-ил}карбаминовой кислоты

К раствору трет-бутилового эфира [6-(4-аминометилфенил)пиридин-2-ил]карбаминовой кислоты (5,7 г, 19 ммоль) и триэтиламина (2,88 г, 29 ммоль) в дихлорметане (50 мл) по каплям добавляют MsCl (2,7 г, 19 ммоль) при температуре 0°С. Реакционную смесь перемешивают при этой температуре в течение 30 минут и затем промывают водой и насыщенным солевым раствором, сушат над сульфатом натрия и концентрируют досуха. Остаток перекристаллизовывают из смеси дихлорметан/петролейный эфир (1:3), получая трет-бутиловый эфир {6-[4-(метансульфониламинометил)фенил]пиридин-2-ил}карбаминовой кислоты (4,0 г, выход 44% за две стадии). ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 7,90-7,97 (м, 3H), 7,75 (т, /=8,4, 8,4 Гц, 1H), 7,54-7,59 (м, 1H), 7,38-7,44 (м, 3H), 4,73 (ушир., 1H), 4,37 (д, J=6,0 Гц, 2H), 2,90 (с, 3H), 1,54 (с, 9H).

Стадия d: N-(4-(6-Аминопиридин-2-ил)бензил)

метансульфон-амид (С-3)

Смесь трет-бутилового эфира {6-[4-(метансульфониламинометил)фенил]пиридин-2-ил}карбаминовой кислоты (11 г, 29 ммоль) в растворе хлористого водорода в метаноле (4 М раствор, 300 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Эту смесь концентрируют досуха. Остаток отфильтровывают и промывают диэтиловым эфиром, получая N-(4-(6-аминопиридин-2-ил)бензил)метансульфонамид (С-3) (7,6 г, выход 80%). ¹Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ 14,05 (ушир.с, 1H), 8,24 (ушир.с, 2H), 7,91-7,98 (м, 3H), 7,70 (т, J=6,0 Гц, 1H), 7,53 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,22 (д, J=6,9 Гц, 1H), 6,96 (д, J=9 Гц, 1H), 4,23 (д, J=5,7 Гц, 2H), 2,89 (с, 3H). MS (ESI), m/z: 278,0 (М+Н)⁺.

II. 4-(6-Аминопиридин-2-ил)-N-

метилбензолсульфонамидгидрохлорид (С-4)

Стадия а: 4-Бром-N-метилбензолсульфонамид

К смеси насыщенного водного раствора NaHCO₃ (42 г, 0,5 моль), СН₂Сl₂ (400 мл) и метиламина (51,7 г, 0,5 моль, 30%-ный раствор в метаноле) добавляют раствор 4-бромбензолсульфонилхлорида (127 г, 0,5 моль) в СН₂Сl₂ (100 мл). Реакционную смесь перемешивают при температуре 20°С в течение ночи. Органическую фазу отделяют и сушат над сульфатом натрия. Выпаривают растворитель при пониженном давлении, получая 4-бром-N-метилбензолсульфонамид (121 г, сырой), который используют на следующей стадии без дальнейшей очистки. ¹Н-ЯМР (CDCl₃,300 МГц) δ 7,64-7,74 (м, 4H), 4,62-4,78 (м, 1H), 2,65 (д, J=5,4 Гц, 3H).

Стадия b: 4-(N-Метилсульфамоил)фенилбороновая кислота

К раствору 4-бром-N-метилбензолсульфонамида (24,9 г, 0,1 моль) и B(O-изопропил)₃ (28,2 г, 0,15 моль) в ТГФ (200 мл) добавляют н-BuLi (100 мл, 0,25 моль) при температуре -70°С. Эту смесь медленно нагревают до температуры 0°С, затем добавляют 10%-ный раствор НСl до достижения рН~3-4. Полученную смесь экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над сульфатом натрия и выпаривают при пониженном давлении, получая 4-(N-метилсульфамоил)фенилбороновую кислоту (22,5 г, выход 96%), которую используют на следующей стадии без дальнейшей очистки. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆,300 МГц) δ 8,29 (с, 2H), 7,92 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,69 (д, J=8,4 Гц, 2H), 2,36 (д, J= 5,1 Гц, 3H).

Стадия с: трет-Бутил-6-(4-(N-метилсульфамоил)фенил)

пиридин-2-илкарбамат

К раствору 4-(N-метилсульфамоил)фенилбороновой кислоты (17,2 г, 0,08 моль) и трет-бутилового эфира (6-бромпиридин-2-ил)карбаминовой кислоты (21,9 г, 0,08 моль) в ДМФА (125 мл) и Н₂О (125 мл) добавляют Pd(PPh₃)₄ (9,2 г, 0,008 ммоль) и К₂СО₃ (16,6 г, 0,12 моль). Полученную смесь дегазируют путем осторожного барботирования аргона через раствор в течение 5 минут при температуре 20^оС. Реакционную смесь затем нагревают при температуре 80°С в течение 16 часов. Смесь выпаривают при пониженном давлении, затем выливают в виоду и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и выпаривают при пониженном давлении, получая трет-бутил-6-(4-(N-метилсульфамоил)фенил)пиридин-2-илкарбамат (21 г, выход 58%), который используют на следующей стадии без дальнейшей очистки.

Стадия d: 4-(6-Аминопиридин-2-ил)-N-метилбензолсульфонамидгидрохлорид

К раствору трет-бутил-6-(4-(N-метилсульфамоил)фенил)пиридин-2-илкарбамата (8,5 г, 23,4 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляют раствор хлористого водорода в метаноле (2 М раствор, 50 мл) при комнатной температуре. Эту суспензию перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Твердый продукт собирают путем фильтрации, промывают метанолом и сушат, получая 4-(6-аминопиридин-2-ил)-N-метилбензолсульфонамидгидрохлорид (5,0 г, выход 71%). ¹Н-ЯМР (300 Гц, ДМСО-d₆) δ 8,12(д, J=8,4 Гц, 2H), 7,91-7,96 (м, 3H), 7,58-7,66 (м, 1H), 7,31-7,53 (м, 1H), 7,27 (д, J=6,6, 1H), 6,97 (д, J=9,0, 1H), 2,43 (д, J=4,8 Гц, 3H). MS (ESI), m/z: 264,0 (М+Н)⁺.

Соединения, указанные в следующей таблице, синтезируют, как описано выше, используя коммерчески доступные или ранее описанные карбоновые кислоты и амины.

Таблица 6 Дополнительные типичные соединения формулы (I)

Физические данные для соединений примеров согласно данному изобретению представлены в таблице 7.

Дополнительные типичные соединения 164-388, как указано в таблице 1, также могут быть получены, используя соответствующие исходные вещества и методики, указанные в случае ранее описанных соединений.

Таблица 7 Физические данные для типичных соединений Соединение № LCMS [M+H]⁺ LCMS RT ЯМР 1 416,3 2,39 2 442,5 2,7 3 427,1 4,1 4 508,3 3,43 5 423,3 3,72 6 390,1 3,57 7 402,5 2,96 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN) δ 1,21-1,29 (м, 2H), 1,62-1,68 (м, 2H), 3,05 (с, 6H), 6,06 (с, 2H), 6,86-6,97 (м, 3H), 7,04-7,08 (м, 2H), 7,53-7,55 (м, 1Н), 7,76-7,82 (м, 3H), 7,86 (т, J=8,0 Гц, 1H), 8,34 (ушир.с, 1H) 8 444,5 3,09 9 430,5 2,84 10 375,3 3,39 11 403,5 2,83 12 390 3,14 14 520,2 1,38 15 387,3 3,71 16 389,3 2,9 17 403,5 3,33 18 403,5 3,75 19 387,1 3,76 20 389 2,79 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN/ДМСО-d₆) δ 1,15-1,23 (м, 2H), 1,56-1,61 (м, 2H), 4,60 (с, 2H), 6,05 (с, 2H), 6,94 (д, J=8,3 Гц, 1Н), 7,05-7,09 (м, 2H), 7,44 (д, J=8,2 Гц, 2H), 7,57-7,62 (м, 2H), 7,92 (с, 1H), 8,00 (дд, J=2,5, 8,6 Гц, 1H), 8,17 (д, J=8,6 Гц, 1H), 8,48 (д, J=1,8 Гц, 1H) 21 360 2,18 22 387,3 3,77 23 535,2 2,81 24 464,1 2,35 ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц) δ 8,40(с, 1H), 7,96 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 7,86 (м, 2H), 7,82 (м, 1H), 7,62 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,36 (д, J=7,8 Гц, 1Н), 7,11 (д, J=2,1 Гц, 1H), 7,00 (м, 2H), 6,05 (с, 2H), 3,42 (м, 2H, перекрывается сигналом Н₂О), 3,03 (м, J=5,4 Гц, 2H), 2,98 (т, 1H), 1,49 (м, 2H), 1,14 (м, 2H) 25 403 3,29 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN/ДМСО-d₆) δ 1,14-1,17 (м,2H), 1,52-1,55 (м, 2H), 6,01 (с, 2H), 6,03 (с, 2H), 6,89-6,96 (м, 2H), 7,01-7,12 (м, 3H), 7,15 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,93 (дд, J=8,7, 2,5 Гц, 1H), 8,05-8,11 (м, 2H), 8,39-8,41 (м, 1Н). 26 393 3,88 27 452,1 3,11 28 427,1 4,19 29 388,9 3,58 30 375,3 2,95 31 535,2 2,42 32 359,1 3,48 33 394,9 3,77 34 360,3 2,96 35 495,1 2,24 ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 8,22 (д, J=8,7 Гц, 1Н), 7,98 (м, 3H), 7,80 (м, 3H), 7,45 (д, J=7,5 Гц, 1H), 6,99 (дд, J=8,1, 1,8 Гц, 2H), 6,95 (д, J=1,5 Гц, 1Н), 6,86 (д, J=8,1 Гц, 1H), 6,02 (с, 2H), 3,77 (т, J=5,1 Гц, 2H), 3,17 (м, J=5,1 Гц, 2H), 2,85 (с, 3H), 1,70 (кв, J=3,6 Гц, 2H), 1,19 (кв, J=3,6 Гц, 2H) 36 521,2 2,36 ¹Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ 8,51 (с, 1Н), 8,15 (д, J=9,0 Гц, 2H), 8,06 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,92 (т, J=7,8 Гц, 1H), 7,88 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,76 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,11 (д, J=1,2 Гц, 1H), 7,03 (дд, J=7,8, 1,8 Гц, 1H), 6,97 (д, J=7,8 Гц, 1H), 6,06 (с, 2H), 3,55 (м, 2H, перекрывается сигналом Н₂О), 3,15 (м, 2H), 3,07 (м, 1H), 1,77 (м, 2H), 1,50 (дд, J=7,2, 4,5 Гц, 2H), 1,43 (м, 2H), 1,15 (дд, J=6,9, 3,9 Гц, 2Н) 37 452,3 3,38 38 398 3,02 39 483,1 2,58 ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆, 300 МГц) δ 10,01 (т, J= 6,0 Гц, 1H), 8,39 (с, 1H), 7,97 (д, J= 7,8 Гц, 1H), 7,89 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,83 (д, J= 7,8 Гц, 1Н), 7,62 (д, J=6,9 Гц, 1Н), 7,33 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,11 (д, J=2,1 Гц, 1H), 7,03 (д, J=1,5 Гц, 1Н), 6,99 (дд, 7,8 Гц, 2H), 6,05 (с, 2H), 4,41 (д, J=6 Гц, 2H), 1,48 (м, 2H), 1,14 (м, 2H) 40 393,1 3,89 41 373,1 3,57 42 421,1 3,33 43 417,3 3,62 44 401,2 1,26 45 403,5 3,25 46 437,3 3,19 47 391,1 3,82 48 384,3 3,74 49 419,3 3,27 50 437 3,02 51 349 3,33 52 373,1 3,58 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN) δ 1,17-1,20 (м, 2H), 1,58-1,61 (м, 2H), 2,24 (с, ЗН), 6,01 (с, 2H), 6,90 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,04-7,06 (м, 2H), 7,16 (дд, J=7,5, 0,8 Гц, 1Н), 7,23-7,33 (м, 4H), 7,79-7,89 (м, 2H), 8,10 (дд, J=8,3, 0,8 Гц, 1H) 53 387 3,62 54 394,1 3,06 55 419,3 2,92 56 407,5 3,55 57 388,9 2,91 58 360,2 3,74 59 417,3 3,64 60 402,5 3,07 61 387,1 3,84 62 415,3 4,1 63 384 3,35 64 360,3 3,58 65 465,1 2,47 ¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 8,19 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,97 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,92 (с, 1H), 7,89 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,76 (т, J=7,5 Гц, 1H), 7,44 (д, J=7,5 Гц, 1H), 6,99 (м, 1H), 6,95 (ушир.с, 1H), 6,86 (д, J=8,1 Гц, 1H), 6,02 (с, 2H), 4,37 (т, J=5,7 Гц, 1Н), 3,02 (м, 2H), 1,70 (кв, J=3,9 Гц, 2H), 1,17 (кв, J=3,6 Гц, 2H), 1,11 (т, J=7,2 Гц, 3H) 66 401 3,24 67 393 3,88 68 407,5 4,04 69 377,1 3,26 70 403,5 3,69 71 472,3 3,02 72 363 3,38 73 449,3 3,4 74 416,3 2,43 75 373,1 3,69 76 534,2 1,36 77 491,2 2,7 78 384,3 3,72 79 388,3 2,32 80 437,3 3,42 81 373 3,51 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN/ДМСО-d₆) δ 1,07-1,27 (м, 2H), 1,50-1,67 (м, 2H), 2,36 (с, 3H), 6,10 (с, 2H), 6,92 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,01-7,09 (м, 2H), 7,28 (д, J=7,9 Гц, 2H), 7,50 (д, J=8,2 Гц, 2H), 7,93-8,00 (м, 2H), 8,15 (д, J=9,3 Гц, 1H), 8,44 (д, J=2,5 Гц) 82 419 2,71 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN) δ 1,29-1,32 (м, 2H), 1,68-1,71 (м, 2H), 3,90 (с, 3H), 3,99 (с, 3H), 6,04 (с, 2H), 6,70-6,72 (м, 2H), 6,93 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,03-7,05 (м, 2H), 7,59 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,73 (т, J=7,6 Гц, 2H), 8,01 (т, J=8,1 Гц, 1H), 8,72 (ушир.с, 1Н) 83 417,3 3,41 84 394,9 3,74 85 401,3 3,97 86 473,5 2,69 87 419,1 3,18 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN) δ 1,25-1,31 (м, 2H), 1,62-1,69 (м, 2H), 3,84 (с, 3H), 3,86 (с, 3H), 6,04 (с, 2H), 6,62-6,70 (м, 2H), 6,92 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,00-7,08 (м, 2H), 7,30 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,96 (д, J=8,9 Гц, 1H), 8,14 (дд, J=8,9, 2,3 Гц, 1H), 8,38 (д, J=2,2 Гц, 1H), 8,65 (ушир.с, 1H) 88 399 3,83 89 401,3 3,62 90 407,3 3,59 91 505,2 2,88 92 384 3,36 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN) d₆ 1,27-1,30 (м, 2H), 1,65-1,67 (м, 2H), 6,05 (с, 2H), 6,93 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,04-7,09 (м, 2H), 7,67 (т, J=7,7 Гц, 1H), 7,79-7,81 (м, 1H), 7,91-7,94 (м, 1H), 8,02-8,08 (м, 2H), 8,23 (дд, J=8,9, 2,5 Гц, 1H), 8,50 (д, J=1,9 Гц, 1H), 8,58 (ушир. с, 1Н) 93 402 2,73 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN) δ 1,16-1,24 (м, 2H), 1,57-1,62 (м, 2H), 6,05 (с, 2H), 6,95 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,05-7,09 (м, 2H), 7,71-7,75 (м, 2H), 7,95 (ушир.с, 1H), 8,04-8,10 (м, 3H), 8,22 (д, J=8,7 Гц, 1Н), 8,54 (д, J=2,5 Гц, 1H) 94 419,3 2,8 95 403,3 2,98 97 416,5 3,22 98 421 3 99 407,1 3,32 100 389 2,83 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN) δ 1,21-1,26 (м, 2H), 1,60-1,65 (м, 2H), 4,65 (с, 2H), 6,03 (с, 2H), 6,89-6,94 (м, 1H), 7,02-7,08 (м, 2H), 7,36-7,62 (м, 3H), 8,12 (с, 2H), 8,36 (ушир.с, 1H), 8,45-8,47 (м, 1Н) 101 388,9 3,27 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN) δ 1,22-1,24 (м, 2H), 1-61-1,63 (м, 2H), 3,82 (с, 3H), 6,04 (с, 2H), 6,92 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,04-7,12 (м, 4H), 7,34 (дд, J=7,6, 1,7 Гц, 1H), 7,38-7,43 (м, 1H), 8,03 (дд, J=8,7, 2,3 Гц, 1H), 8,10 (дд, J=8,7, 0,7 Гц, 1H), 8,27 (ушир.с, 1H), 8,37-8,39 (м, 1H) 102 401,3 3,77 103 430,5 3,04 104 388,3 2,32 105 521,2 2,46 106 393 3,63 107 416 2,84 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN/ДМСО-d₆) δ 1,13-1,22 (м, 2H), 1,53-1,64 (м, 2H), 2,07 (с, 3H), 6,08 (с, 2H), 6,90-6,95 (м, 1H), 7,01-7,09 (м, 2H), 7,28 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,37 (т, J=7,9 Гц, 1H), 7,61 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,84 (д, J =Гц, 1H), 7,95 (дд, J=2,5, 8,7 Гц, 1H), 8,03 (ушир.с, 1H), 8,16 (д, J =Гц, 1Н), 8,42 (д, J=2,4 Гц, 1Н), 9,64 (с, 1H) 108 403,3 3,07 109 349,1 3,29 110 389,2 3,15 111 521,2 2,27 112 394 3,82 113 407,5 3,3 114 417,1 3,17 115 398,1 3,22 116 394 3,1 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN) δ 1,18-1,26 (м, 2H), 1,59-1,64 (м, 2H), 6,05 (с, 2H), 6,95 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,06-7,11 (м, 2H), 7,40 (д, J=4,9 Гц, 1H), 7,92-7,96 (м, 2H), 8,26 (д, J=9,3 Гц, 1Н), 8,36 (д, J=1,7 Гц, 1H), 8,56 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,70 (с, 1H) 117 363,3 3,48 118 374,3 3,54 119 494,3 3,59 120 505,2 2,9 121 374,3 2,55 122 417,3 3,63 123 389,3 3,47 124 417,1 3,29 125 417,3 3,08 126 427,3 3,89 127 535,2 2,76 128 386,9 3,67 129 377,1 3,67 130 389,1 3,4 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN) δ 1,22-1,24 (м, 2H), 1,61-1,63 (м, 2H), 3,86 (с, 3H), 6,05 (с, 2H), 6,93 (д, J=8,4 Гц, 1H), 6,97-7,00 (м, 1Н), 7,05-7,08 (м, 2H), 7,16-7,21 (м, 2H), 7,41 (т, J=8,0 Гц, 1Н), 8,07-8,17 (м, 3H), 8,48-8,48 (м, 1H) 131 407,3 3,49 132 419 3,09 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN) δ 1,17-1,25 (м, 2H), 1,57-1,64 (м, 2H), 3,72 (с, 6H), 6,04 (с, 2H), 6,74 (д, J=8,4 Гц, 2H), 6,93 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,05-7,08 (м, 2H), 7,35 (т, J=8,4 Гц, 1H), 7,75 (д, J=10,5 Гц, 1H), 8,07-8,14 (м, 3H) 133 431,3 3,27 135 417,3 3,81 136 535,2 2,75 137 403,5 3,35 138 432,5 2,76 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN) δ 1,30-1,35 (м, 2H), 1,69-1,74 (м, 2H), 3,09 (с, 6H), 4,05 (с, 3H), 6,04 (с, 2H), 6,38 (д, J=2,4 Гц, 1H), 6,50 (дд, J=9,0, 2,4 Гц, 1H), 6,93 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,03-7,06 (м, 2H), 7,31 (д, J=7,7 Гц, 1H), 7,71 (д, J=8,8 Гц, 2H), 7,97 (т, J=8,3 Гц, 1Н) 139 421,1 2,71 140 416,5 2,92 141 410 2,83 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN) δ 1,28-1,37 (м, 2H), 1,66-1,73 (м, 2H), 6,05 (с, 2H), 6,91-6,97 (м, 1H), 7,05-7,09 (м, 2H), 7,69-7,74 (м, 1H), 7,82 (т, J=7,7 Гц, 1H), 7,93 (д, J=7,2 Гц, 1H), 8,04 (д, J=8,8 Гц, 1H), 8,15(д, J=8,2Гц, 1H), 8,37 (д, J=8,8 Гц, 1H), 8,58-8,65 (м, 2H), 8,82 (ушир.с, 1H), 8,94 (д, J=6,2 Гц, 1H) 142 349,3 3,33 143 373,1 3,68 144 535,2 2,33 145 390,3 3,4 146 386,9 3,72 147 419,1 3,13 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN) δ 1,23-1,26 (м, 2H), 1,62-1,64 (м, 2H), 3,86 (с, 3H), 3,89 (с, 3H), 6,04 (с, 2H), 6,93 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,03-7,07 (м, 3H), 7,17-7,19 (м, 2H), 8,06-8,15 (м, 2H), 8,38 (ушир.с, 1Н), 8,45-8,46 (м, 1Н) 148 393,1 3,72 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN) δ 1,20-1,27 (м, 2H), 1,58-1,67 (м, 2H), 6,05 (с, 2H), 6,94 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,05-7,09 (м, 2H), 7,41-7,50 (м, 2H), 7,55-7,59 (м, 1H), 7,66-7,69 (м, 1H), 8,07 (д, J=11,2 Гц, 1H), 8,11 (ушир.с, 1H), 8,16 (д, J=8,8 Гц, 1H), 8,48 (д, J=1,9 Гц, 1H) 149 458,5 2,42 150 403,5 3,04 151 452,3 3,44 ¹Н-ЯМР (400 МГц, МeOD) δ 1,30-1,36 (м, 2H), 1,71-1,77 (м, 2H), 2,58 (с, 3H), 6,04 (с, 2H), 6,93 (дд, J=0,8, 7,5 Гц, 1H), 7,04-7,08 (м, 2H), 7,86 (дд, J=0,8, 7,7 Гц, 1H), 8,00-8,02 (м, 2H), 8,08-8,12 (м, 3H), 8,19-8,23 (м, 1H) 152 403 2,97 153 359,1 3,36 ¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃CN) δ 1,24-1,26 (м, 2H), 1,62-1,65 (м, 2H), 6,05 (с, 2H), 6,93 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,05-7,08 (м, 2H), 7,42-7,46 (м, 1H), 7,49-7,53 (м, 2H), 7,63-7,66 (м, 2H), 8,10-8,16 (м, 2H), 8,33 (ушир.с, 1H), 8,48-8,48 (м, 1H) 154 395,1 3,34 155 393 3,7 156 390,2 3,7 157 403,5 3,33 158 390,2 3,58 159 493,2 2,85 160 411,3 3,94 161 419,1 3,2 162 488,1 3,62 163 438,1 3 164 314,1 3,38 165 538,5 3,28 166 466,1 2,9 167 429,3 2,95 168 526,3 3,189189 169 498,3 3,7 170 468,3 3,27 171 444,5 2,24 172 551,1 2,849824 173 377 3,7 174 493,9 2,69 175 517,9 3,423179 176 522,3 3,49262 177 502,1 3,43 178 549,1 2,906129 179 480,1 2,51 180 520,3 4,295395 181 488,2 3,07 182 535,1 3,267469 183 436,3 3,62 184 496,3 3,265482 185 403,5 2,88 186 420,9 2,86 187 444,3 2,39 188 417,3 2,24 189 466,1 2,88 190 438,1 2,39 191 401,1 3,44 192 552,3 3,18 193 452,3 2,55 194 415 4 195 479,1 1,08 196 430,5 2,34 197 512,3 2,961206 198 444,5 2,75 ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 1,11-1,19 (м, 2H), 1,46-1,52 (м, 2H), 2,31 (с, 3H), 2,94 (с, 3H), 2,99 (с, 3H), 6,08 (с, 2H), 6,97-7,05 (м, 2H), 7,13 (д, J=1,6 Гц, 1Н), 7,35 (т, J=1,5 Гц, 1H), 7,41 (т, J=7,8 Гц, 2H), 7,51 (т, J=7,6 Гц, 1H), 7,68 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,97 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,34 (с, 1H) 199 540,3 3,18 200 520,3 3,79 201 452,3 3,22 202 536,5 3,63 203 509,1 2,82 204 444,5 2,5 205 524,3 3,48 206 407,5 3,6 207 452,1 2,62 208 520,3 4,06 209 416,1 2,3 210 452,3 2,8 ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСO-d₆) δ 1,11-1,19 (м, 2H), 1,47-1,52 (м, 2H), 2,31 (с, 6,08 (с, 2H), 6,96-7,07 (м, 2H), 7,13 (д, J=1,6 Гц, 1H), 7,43 (с, 1H), 7,57 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,69 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,89 (д, J=8,2 Гц, 2H), 7,99 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,38 (с, 1H) 211 480,3 3,33 212 521,1 3,23 213 415,3 3,4 214 562,3 3,71 215 403,3 2,67 216 421,1 2,91 217 387,1 2,89 218 488,3 3,73 219 403,7 2,43 220 508,5 3,46 221 508,3 3,46 222 401,1 2,76 223 484,5 3,95 224 407,5 3,23 225 401,2 3,49 226 608,3 5,58 227 417,1 2,24 228 452,3 3,21 229 407,1 3,08 230 401,3 2,68 231 389,1 2,36 232 481,9 3,155919 233 535,9 3,58 234 551,1 2,90 235 415,3 3,71 ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 1,12-1,17 (м, 2H), 1,23 (д, J=6,9 Гц, 6H), 1,47-1,51 (м, 2H), 2,30 (с, 3H), 2,92 (сeпт, J=6,9 Гц, 1H), 6,08 (с, 2H), 6,97-7,05 (м, 2H), 7,12-7,17 (м, 2H), 7,20-7,22 (м, 1H), 7,24-7,26 (м, 1H), 7,36 (т, J=7,6 Гц, 1H), 7,65 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 7,95 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,32 (с, 1H) 236 540,3 3,85 237 456,5 3,35 238 416,5 2,35 239 529,3 2,29 240 442,3 3,57 241 466,3 3,5 242 506,3 3,67 243 403,3 2,69 244 534,3 3,93 245 466,3 3,6 246 496,3 2,9 247 458,5 2,3 248 450,3 3,01 249 565,2 2,89 250 480,5 3,74 251 452,1 1,07 252 389,1 2,82 253 530,3 2,8 254 466,1 1,06 255 488,2 3,05 256 558,3 3,46 257 407,5 3,27 258 430,5 2,66 ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 1,12-1,18 (м, 2H), 1,47-1,54 (м, 2H), 2,30 (с, 3H), 2,79 (д, J=4,5 Гц,3H), 6,08 (с, 2H), 6,96-7,07 (м, 2H), 7,13 (д, J=1,6 Гц, 1H), 7,48-7,57 (м, 2H), 7,70 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,78 (д, J=1,5 Гц, 1H), 7,84 (дт, J=7,3,1,7 Гц, 1H), 7,98 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,36 (с, 1H), 8,50-8,51 (м, 1H) 259 470,3 3,82 260 403,1 2,27 261 549,1 3,39 262 438,1 3,43 263 403,3 2,8 264 407,1 3,04 265 430,5 2,18 266 403,3 2,96 267 531,9 2,81 268 496,3 3,24 269 373,5 2,76 270 520,3 4,21 271 450,3 3,77 272 403,2 1,09 273 543,1 2,89 274 417,3 2,26 275 527,9 3,91 276 510,3 3,37 277 403,1 2,2 278 430,5 2,68 ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 1,12-1,19 (м, 2H), 1,47-1,51 (м, 2H), 2,31 (с, 3H), 2,80 (д, J=4,5 Гц, 3H), 6,08 (с, 2H), 6,97-7,05 (м, 2H), 7,13 (д, J=1,6 Гц, 1H), 7,45 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,68 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,90 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,97 (д, J=8,3 Гц, 1H), 8,35 (с, 1H), 8,50 (кв, J=4,5 Гц, 1H) 279 536,5 3,19 280 480,3 3,25 281 550,5 3,78 282 482,5 3,15 283 416,3 2,58 284 554,3 3,99 285 546,3 2,87 286 416,1 2,29 287 443 4,02 288 466,3 2,76 289 373,1 2,84 290 429,3 3 291 403,1 2,24 292 479,2 2,49 293 417,3 2,65 294 403,5 2,39 295 416,3 2,61 ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 1,14-1,18 (м, 2H), 1,46-1,54 (м, 2H), 2,31 (с, 3H), 6,08 (с, 2H), 6,97-7,05 (м, 2H), 7,13 (д, J=1,6 Гц, 1H), 7,44 (с, 1H), 7,49-7,56 (м, 2H), 7,72 (д, J=8,4 Гц, 1Н), 7,83-7,85 (м, 1H), 7,87-7,91 (м, 1H), 7,99 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,05 (с, 1H), 8,39 (с, 1H) 296 387,1 3,09 297 430,2 2,38 298 403,2 2,72 299 387,3 2,86 300 387,3 3,03 301 403,5 2,44 302 508,3 3,45 303 417,3 2,58 304 549,1 3,35 305 429,5 3,01 306 492,3 3,81 307 512,3 2,97 308 415,3 2,85 309 444,5 2,75 310 430,5 2,41 311 534,3 3,92 312 492,3 3,99 313 387,3 2,84 314 430,5 2,37 315 387 1,12 316 526,3 3,08 317 344,2 3,35 318 536,5 3,17 319 492,3 3,69 320 430,2 2,38 321 452,3 2,55 322 387,1 2,6 323 387,1 3,01 324 402,5 2,14 325 531,9 3,83 326 444,5 2,5 327 403,3 2,83 328 401,1 3,48 329 415,3 3,36 330 522,3 4,14 331 387,1 3,01 332 505,9 4,06 333 417,1 2,58 334 403,5 2,92 335 520,3 4,22 336 510,3 3,36 337 401,1 2,73 338 479,9 3,44 339 508,3 3,83 340 512,5 3,6 341 452,3 3,15 342 540,3 3,07 343 480,3 3 344 526,3 3,15 345 422,1 3,21 346 415 4,05 347 523,1 3,10 348 416,3 1,87 349 438,1 2,4 350 402,5 2,18 351 373,1 3,08 352 415,7 3,13 353 420,9 2,9 354 407,3 3,03 355 480,3 2,96 356 452,3 2,47 357 466,3 2,63 358 536,5 3,26 359 402,1 2,2 360 510,3 3,42 361 407 3,11 362 494,5 3,45 363 438,1 3,42 364 535,9 3,44 365 402,1 2,21 366 565,2 3,01 367 403,5 2,36 368 444,5 2,97 369 408,5 3,43 370 403,3 2,45 371 430,5 2,43 372 478,3 3,47 373 524,3 3,50 374 466,3 2,35 375 416,5 2,36 376 552,3 3,42 377 524,5 3,17 378 538,5 3,07 379 528,3 3,33 380 548,3 3,75 381 526,3 3,46 382 520,5 3,48 383 518,1 3,55 384 542,3 3,59 385 550,5 3,69 386 524,3 3,15 387 522,5 3,78 388 542,2 3,6 389 467,3 1,93 390 469,3 1,99 391 507,5 2,12 392 453,5 1,99 393 487,3 2,03 394 483,5 1,92 395 441,3 4,33 396 453,3 1,93 397 439,5 1,94 398 471,3 2 399 537,5 2,1 400 525,3 2,19 401 453,5 1,96 402 483,3 1,87 403 457,5 1,99 404 469,5 1,95 405 471,3 1,98 406 525,3 2,15 407 439,4 1,97 408 525,1 2,14 409 618,7 3,99 410 374,5 2,46 411 507,5 2,14 412 390,1 3,09 413 552,3 4,04 414 457,5 2,06 415 521,5 2,14 416 319 3,32 417 471,3 1,96 418 417,3 1,75 419 473,3 2,04 420 389,3 2,94 421 457,5 1,99 422 467,3 1,96

Анализы в отношении детектирования и измерения

корректирующих ΔF508-CFTR свойств соединений

JJ. Оптические методы определения трансмембранного

потенциала для анализа модулирующих ΔF508-CFTR

свойств соединений

В случае оптического анализа трансмембранного потенциала используют потенциалчувствительные FRET-сенсоры, описанные Gonzalez и Tsien (см. Gonzalez J.E. и Tsien R.Y «Voltage sensing by fluorescence resonance energy transfer in single cells», Biophys. J., 69(4), 1272-80 (1995); и Gonzalez J.E. и Tsien R.Y «Improved indicators of cell membrane potential that use fluorescence resonance energy transfer», Chem. Biol., 4(4), 269-277 (1997)), в комбинации с приборным обеспечением для измерения изменений флуоресценции, таким, как Voltage/Ion Probe Reader (VIPR) (см. Gonzalez J.E., Oades K. и др. «Cell-based assays and instrumentation for screening ion-channel targets», Drug. Discov. Today, 4(9), 431-439 (1999)).

Эти потенциалчувствительные анализы базируются на изменении переноса энергии резонанса флуоресценции (FRET) между растворимым в мембране, потенциалчувствительным красителем, DiSBAC₂(3), и флуоресцирующим фосфолипидом, СС2-DMPE, который связан с наружным «листочком» цитоплазматической мембраны и действует как FRET-донор. Изменения мембранного потенциала (V_m) вызывают перераспределение отрицательно заряженного DiSBAC₂(3) в цитоплазматической мембране и изменения переноса количества энергии от СС2-DMPE, соответственно. Изменения эмиссии флуоресценции могут быть отслежены, используя VIPR^TM II, который представляет собой встроенный жидкостной драйвер и флуоресцентный детектор, предназначенный для проведения базирующегося на клетках скрининга при использовании 96-луночных или 384-луночных титрационных микропланшетов.

1. Идентификация корректирующих соединений

Для идентификации маленьких молекул, которые корректируют дефект транспорта, связанный с ΔF508-CFTR, разработан вид анализа с одним добавлением HTS. Клетки инкубировали в не содержащей сыворотки среде в течение 16 часов при температуре 37^оС в присутствии или в отсутствие (отрицательный контроль) тестируемого соединения. В качестве положительного контроля, клетки, нанесенные на 384-луночные планшеты, инкубировали в течение 16 часов при температуре 27°С для «температурной коррекции» в отношении ΔF508-CFTR. Клетки затем промывали 3 раза раствором Кребса-Рингера и нагружали потенциалчувствительными красителями. Для активации ΔF508-CFTR, в каждую лунку добавляли 10 мкМ форсколина и усилитель CFTR, генистеин (20 мкМ), вместе с не содержащей Cl^- средой. Добавление не содержащей Cl^- среды промотировало отток Cl^- в ответ на активацию ΔF508-CFTR, и достигаемую деполяризацию мембраны оптически оценивали, используя чувствительные к базирующемуся на FRET потенциалу красители.

2. Идентификация соединений-усилителей

Для идентификации усилителей ΔF508-CFTR, разработан вид анализа с двойным добавлением HTS. Во время первого добавления, в каждую лунку добавляли не содержащую Cl^- среду вместе с тестируемым соединением или без него. Спустя 22 секунды, осуществляли второе добавление не содержащей Cl^- среды, включающей 2-10 мкМ форсколина, для активации ΔF508-CFTR. Концентрация внеклеточного Cl^- после обоих добавлений составляла 28 мМ, которая промотировала отток Cl^- в ответ на активацию ΔF508-CFTR, и достигаемую деполяризацию мембраны оптически оценивали, используя чувствительные к базирующемуся на FRET потенциалу красители.

3. Растворы

Раствор электролита № 1: (в мМ) NaCl 160, KCl 4,5, CaCl₂ 2, MgCl₂ 1, ГЕПЕС 10, pH=7,4, установленное с помощью NaOH.

Не содержащий хлорида раствор электролита: хлориды в растворе электролита № 1 заменены глюконатами.

СС2-DMPE: получают в виде 10 мМ исходного раствора в ДМСО и хранят при температуре -20°С.

DISBAC₂(3): получают в виде 10 мМ исходного раствора в ДМСО и хранят при температуре -20°С.

4. Клеточная культура

Мышиные фибробласты NIH3T3, стабильно экспрессирующие ΔF508-CFTR, использовали для оптических измерений трансмембранного потенциала. Клетки выдерживали при температуре 37°С в атмосфере с 5% СО₂ и влажностью 90% в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла, дополненной 2 мМ глутамина, 10% фетальной телячьей сыворотки, 1 Х NEAA, β-МЕ, 1 Х пенициллин/стрептомицин и 25 мМ ГЕПЕСа, в колбах для культивирования емкостью 175 см². В случае всех оптических анализов, клетки высевали в количестве по 30000/лунка на 384-луночные, покрытые матригелем планшеты и культивировали в течение 2 часов при температуре 37°С, до культивирования при температуре 27°С в течение 24 часов для анализа усилителя. В случае анализов в отношении коррекции, клетки культивировали при температуре 27° или 37°С вместе с соединениями или без них в течение 16-24 часов.

Электрофизиологические анализы в отношении исследования модулирующих ΔF508-CFTR свойств соединений

1. Анализ при использовании камеры Using

Эксперименты в камере Using осуществляли при использовании поляризованных эпителиальных клеток, экспрессирующих ΔF508-CFTR, для дальнейшего охарактеризовывания модуляторов ΔF508-CFTR, идентифицированных согласно оптическим анализам. Эпителиальные клетки FRT^ΔF508-CFTR, культивированные на инсертах клеточной культуры Costar Snapwell, помещали в камеру Ussing (Physiologic Instruments, Inc., San Diego, CA) и монослои непрерывно подвергали короткому замыканию, используя систему фиксации напряжений (Department of Bioengineering, University of Iowa, IA, и Physiologic Instruments, Inc., San Diego, CA). Трансэпителиальное сопротивление измеряли путем приложения импульса 2 мВ. В этих условиях, FRT-эпителии проявляли сопротивления 4 КОм/см² или более. Растворы выдерживали при температуре 27°С и барботировали через них воздух. Напряжение смещения электрода и сопротивление жидкости корректировали, используя не содержащий клетки инсерт. В этих условиях, ток отражает поток Cl^- посредством ΔF508-CFTR, экспрессируемого в апикальной мембране. I_SC численно определяли, используя интерфейс МР100А-СЕ и программное обеспечение AcqKnowledge (ν 3.2.6: BIOPAC Systems, Santa Barbara, CA).

2. Идентификация корректирующих соединений

Согласно типичному протоколу, использовали градиент концентрации Cl^- от базолатеральной мембраны до апикальной мембраны. Для установки этого градиента, в случае базолатеральной мембраны использовали 1 н раствор Рингера, тогда как апикальный NaCl заменяли эквимолярным количеством глюконата натрия (титрован до рН=7,4 с помощью NaOH) для достижения большого градиента концентрации Cl^- через эпителий. Все эксперименты осуществляли при использовании интактных монослоев. Для полной активации ΔF508-CFTR, использовали форсколин (10 мкМ) и PDE-ингибитор, IBMX, (100 мкМ) с последующим добавлением усилителя CFTR, генистеина (50 мкМ).

Как наблюдали в случае других типов клеток, инкубация при низких температурах FTR-клеток, стабильно экспрессирующих ΔF508-CFTR, повышает функциональную плотность CFTR в цитоплазматической мембране. Для определения активности корректирующих соединений, клетки инкубировали вместе с 10 мкМ тестируемого соединения в течение 24 часов при температуре 37°С и затем промывали 3 раза, до регистрации. Опосредуемый цАМФ и генистеином I_SC в обработанных соединением клетках нормализовали до контролей при температурах 27°С и 37°С и выражали в виде активности в процентах. Прединкубация клеток вместе с корректирующим соединением значительно увеличивает опосредуемый цАМФ и генистеином I_SC по сравнению с контролями при температуре 37°С.

3. Идентификация соединений-усилителей

Согласно типичному протоколу, использовали градиент концентрации Cl^- от базолатеральной мембраны до апикальной мембраны. Для установки этого градиента, в случае базолатеральной мембраны использовали 1 н растворы Рингера и добавляли нистатин (360 мкг/мл), тогда как апикальный NaCl заменяли эквимолярным количеством глюконата натрия (титрован до рН=7,4 с помощью NaOH) для достижения большого градиента концентрации Cl^- через эпителий. Все эксперименты осуществляли спустя 30 минут после добавления нистатина. Форсколин (10 мкМ) и все тестируемые соединения добавляли на оба участка инсертов клеточной культуры. Эффективность предполагаемых усилителей ΔF508-CFTR сравнивали с таковой известного усилителя, генистеина.

4. Растворы

Базолатеральный раствор (в мМ): NaCl (135), CaCl₂ (1,2), MgCl₂ (1,2), K₂HPO₄ (2,4), KHPO₄ (0,6), N-2-гидроксиэтилпиперазин-N’-2-этансульфокислота (ГЕПЕС) (10) и декстроза (10). Раствор титрован до рН=7,4 с помощью NaOH.

Апикальный раствор (в мМ): такой же, как и базолатеральный раствор, с заменой NaCl на глюконат натрия (135).

5. Клеточная культура

Эпителиальные клетки крысы Fisher (FRT), экспрессирующие ΔF508-CFTR (FRT^ΔF508-CFTR) использовали для экспериментов в камере Ussing в отношении предполагаемых модуляторов ΔF508-CFTR, идентифицированных согласно проведенным авторами изобретения оптическим анализам. Клетки культивировали на инсертах клеточной культуры Costar Snapwell и культивировали в течение пяти суток при температуре 37°С в атмосфере с 5% СО₂ в модифицированной по способу Coon’s среде Ham’s F-12, дополненной 5% фетальной телячьей сыворотки, 100 Ед/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина. До использования для охарактеризовывания усиливающей активности соединений, клетки инкубировали при температуре 27°С в течение 16-48 часов для коррекции в отношении ΔF508-CFTR. В целях определения активности корректирующих соединений, клетки инкубировали при температуре 27°С или 37°С с соединениями или без них в течение 24 часов.

6. Регистрация целых клеток

Макроскопический ток ΔF508-CFTR (I_ΔF508) в случае корректируемых по температуре и с помощью тестируемых соединений клеток NIH3T3, стабильно экспрессирующих ΔF508-CFTR, оценивали, используя регистрацию целых клеток при применении перфорированного пэтча. Вкратце, регистрации фиксации напряжения I_ΔF508 осуществляли при комнатной температуре, используя пэтч-кламп-амплификатор Axopatch 200B (Axon Instruments Inc., Foster City, CA). Все регистрации осуществляли при использовании частоты дискретизации 10 кГц и фильтра нижних частот на 1 кГц. Пипетки имели сопротивление 5-6 МОм, когда заполнялись внутриклеточным раствором. В этих условиях регистрации, рассчитанный обратный потенциал для Cl^- (E_Сl) при комнатной температуре составлял -28 мВ. В случае всех регистраций сопротивление изоляции составляло >20 ГОм и последовательное сопротивление составляло <15 МОм. Генерацию импульса, сбор данных и анализ осуществляли, используя персональный компьютер, снабженный интерфейсом Digidata 1320 A/D в сочетании с Clampex 8 (Axon Instruments Inc.). Электролит содержал <250 мкл физиологического раствора и его непрерывно перфундировали со скоростью 2 мл/мин., используя систему перфузии в гравитационном режиме.

7. Идентификация корректирующих соединений

Для определения активности корректирующих соединений в отношении увеличения плотности функционального ΔF508-CFTR в цитоплазматической мембране, авторы изобретения использовали вышеописанные методы регистрации с перфорированным пэтчем для измерения плотности тока после обработким в течение 24 часов с помощью корректирующих соединений. Для полной активации ΔF508-CFTR, к клеткам добавляли 10 мкМ форсколина и 20 мкМ генистеина. В условиях регистрации согласно авторам изобретения, плотность тока после инкубации в течение 24 часов при температуре 27°С была выше, чем наблюдали после инкубации в течение 24 часов при температуре 37°С. Эти результаты согласовывались с известными воздействиями низкотемпературной инкубации на плотность ΔF508-CFTR в цитоплазматической мембране. Для определения воздействий корректирующих соединений на плотность тока CFTR, клетки инкубировали с 10 мкМ тестируемого соединения в течение 24 часов при температуре 37°С и плотность тока сравнивали с контролями, полученными при температурах 27°С и 37°С (% активности). До регистрации, клетки промывали 3 раза внеклеточной средой для регистрации с целью удаления какого-либо остающегося количества тестируемого соединения. Предынкубация с помощью 10 мкМ корректирующих соединений значительно повышает зависимый от цАМФ и генистеина ток по сравнению с контролями при температуре 37°С.

8. Идентификация соединений-усилителей

Способность усилителей ΔF508-CFTR увеличивать макроскопический ток Cl^- ΔF508-CFTR (I_ΔF508) в NIH3T3-клетках, стабильно экспрессирующих ΔF508-CFTR, также исследовали, используя методы регистрации с перфорированным пэтчем. Усилители, идентифицированные согласно оптическим анализам, индуцировали зависимое от дозы увеличение I_ΔF508 с аналогичной потенцией и эффективностью, наблюдаемой в оптических анализах. В случае всех исследованных клеток, обратный потенциал до и во время применения усилителя составлял около -30 мВ, который представляет собой рассчитанный Е_Cl (-28 мВ).

9. Растворы

Внутриклеточный раствор (в мМ): аспартат цезия (90), CsCl (50), MgCl₂ (1), ГЕПЕС (10) и 240 мкг/мл амфотерицина-В (рН доведено до 7,35 с помощью CsOH).

Внеклеточный раствор (в мМ): N-метил-D-глюкамин(NMDG)-Cl (150), MgCl₂ (2), CaCl₂ (2), ГЕПЕС (10) (рН доведено до 7,35 с помощью HCl).

10. Клеточная культура

Мышиные фибробласты NIH3T3, стабильно экспрессирующие ΔF508-CFTR, использовали для регистрации целых клеток. Клетки выдерживали при температуре 37°С в атмосфере с 5% СО₂ и влажностью 90% в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла, дополненной 2 мМ глутамина, 10% фетальной телячьей сыворотки, 1 Х NEAA, β-МЕ, 1 Х пенициллин/стрептомицин и 25 мМ ГЕПЕСа, в колбах для культивирования емкостью 175 см². В случае всех регистраций целых клеток, 2500-5000 клеток высевали на покрытые поли-L-лизином покровные стекла и культивировали в течение 24-48 часов при температуре 27°С, до использования для тестирования активности усилителей, и инкубировали с корректирующим соединением или без него при температуре 37°С для определения активности корректоров.

11. Регистрации одного канала

Активности одного канала корректированного по температуре ΔF508-CFTR, стабильно экспрессируемого в NIH3T3-клетках, и активности соединений-усилителей наблюдали, используя эксцизированный с внутренней стороны мембраны пэтч. Вкратце, регистрации фиксации напряжения в случае активности одного канала осуществляли при комнатной температуре при использовании пэтч-кламп-амплификатора Axopatch 200B (Axon Instruments Inc.). Все рагистрации получали при использовании частоты дискретизации 10 кГц и низкочастотного фильтра на 400 Гц. Пэтч-пипетки были изготовлены из стекла Corning Kovar Sealing №7052 (World Precision Instruments, Inc., Satasota, FL) и имели сопротивление 5-8 МОм, когда заполнялись внеклеточным раствором. ΔF508-CFTR активировали после эксцизии путем добавления 1 мМ Mg-АТФ и 75 нМ зависимой от цАМФ протеинкиназы, каталитическая субъединица (РКА; Promega Corp. Madison, WI). После стабилизации активности канала, пэтч перфундировали, используя систему микроперфузии в гравитационном режиме. Впуск помещали рядом с пэтчем, достигая полного обмена раствора в пределах 1-2 секунд. Для сохранения активности ΔF508-CFTR во время быстрой перфузии, к раствору электролита добавляли неспецифический фосфатазный ингибитор F^- (10 мM NaF). В этих условиях регистрации, активность канала оставалась постоянной на всем протяжении продолжительности пэтч-регистрации (вплоть до 60 минут). Токи, продуцируемые положительным зарядом, движущиеся от внутриклеточного раствора к внеклеточному раствору (анионы движутся в противоположном направлении), рассматривали как положительные токи. Потенциал пипетки (V_p) поддерживали при 80 мВ.

Активность канала анализировали исходя из мембранных пэтчей, содержащих ≤2 активных каналов. Максимальное число одновременных открытий определяло число активных каналов во время хода эксперимента. Для определения амплитуды тока одного канала, данные, зарегистрированные исходя из 120 секунд активности ΔF508-CFTR, фильтровали автономно при частоте 100 Гц и затем использовали для конструкции гистограмм по всем точкам амплитуды, по которым строили кривую с помощью мультигауссовых функций, используя программное обеспечение Bio-Patch Analysis (Bio-Logic Comp. France). Общий микроскопический ток и вероятность открытия (Р_о) определяли исходя из 120 секунд активности канала. Р_о определяли, используя программное обеспечение Bio-Patch или исходя из зависимости Р_о=I/i(N), где I=слабый ток, i = амплитуда тока одного канала и N = число активных каналов в пэтче.

12. Растворы

Внеклеточный раствор (в мМ): NMDG (150), аспарагиновая кислота (150), СаCl₂ (5), MgCl₂ (2) и ГЕПЕС (10) (рН доведено до 7,35 с помощью Трис-основания).

Внутриклеточный раствор (в мМ): NMDG-Cl (150), MgCl₂ (2), EGTA (5), TES (10) и Трис-основание (14) (рН доведено до 7,35 с помощью HCl).

13. Клеточная культура

Мышиные фибробласты NIH3T3, стабильно экспрессирующие ΔF508-CFTR, использовали для пэтч-кламп-регистраций эксцизированной мембраны. Клетки выдерживали при температуре 37°С в атмосфере с 5% СО₂ и влажностью 90% в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла, дополненной 2 мМ глутамина, 10% фетальной телячьей сыворотки, 1 Х NEAA, β-МЕ, 1 Х пенициллин/стрептомицин и 25 мМ ГЕПЕСа, в колбах для культивирования емкостью 175 см². В случае регистраций одного канала, 2500-5000 клеток высевали на покрытые поли-L-лизином покровные стекла и культивировали в течение 24-48 часов при температуре 27°С, до использования.

Приведенные в качестве примера соединения таблицы 1 обладают активностью в диапазоне от примерно 100 нМ до 20 мкМ, как измерено, используя вышеописанные анализы. Найдено, что приведенные в качестве примера соединения таблицы 1 являются достаточно эффективными, как определено, используя вышеописанные анализы.

Другие воплощения

Должно быть понятно, что, тогда как изобретение описывается совместно с его подробным описанием, вышеупомянутое описание предназначено для иллюстрации и не ограничивает объема изобретения, который определен объемом прилагаемой формулы изобретения. Другие аспекты, преимущества и модификации входят в рамки нижеследующей формулы изобретения.

Изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения заболеваний, опосредуемых трансмембранным регулятором муковисцидоза («CFTR»), причем композиция содержит фармацевтически приемлемый носитель и терапевтически эффективное количество соединения формулы

Технический результат: получена новая фармацевтическая композиция, которая может быть использована для лечения заболеваний, опосредуемых трансмембранным регулятором муковисцидоза («CFTR»). 7 табл.

Фармацевтическая композиция для лечения заболеваний, опосредуемых трансмембранным регулятором муковисцидоза («CFTR»), причем композиция содержит фармацевтически приемлемый носитель и терапевтически эффективное количество соединения формулы

или его фармацевтически приемлемой соли.