СМЕСЬ НЕУСВАИВАЕМЫХ ОЛИГОСАХАРИДОВ ДЛЯ СТИМУЛИРОВАНИЯ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ Российский патент 2023 года по МПК A23L33/00 A61K31/702 A61K39/39 A61P11/06 A61P17/00 A61P31/00 A61P37/08 A61P37/04 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к питанию при помощи смеси неусваиваемых олигосахаридов и, в частности, к их применению для стимулирования иммунной системы.

Уровень техники

Дети, вскормленные человеческим молоком, имеют более низкую частоту возникновения инфекций, включая вирусные инфекции, чем дети, вскормленные молочной смесью. Считается, что множество компонентов человеческого молока, включающих иммуноглобулины (такие как IgA), интерлейкин (IL)-1, IL-6, IL-8, IL-10, интерферон-γ (IFN-γ), иммунокомпетентные клетки, трансформирующий фактор роста-β (TGF-β), лактоферрин, нуклеотиды и неусваиваемые олигосахариды (NDO), участвуют в защите против инфекции, вызванной кишечными или респираторными патогенами.

NDO представляют собой основную составляющую человеческого молока и являются основным элементом врожденной иммунной системы человеческого молока. Человеческие NDO промотируют рост полезной микробиоты, в которой доминируют бифидобактерии и лактобациллы. Также известно, что некоторые человеческие NDO способны предотвращать прямую адгезию патогенов и токсинов.

Человеческое молоко представляет собой предпочтительную пищу для детей. Однако не всегда возможно или желательно осуществлять грудное вскармливание ребенка. В подобных случаях хорошую альтернативу представляют собой детские смеси или усовершенствованные смеси. Эти смеси должны иметь оптимальный состав для того, чтобы можно было более точно имитировать положительные свойства грудного молока.

В WO 2007/067053 раскрыта детская смесь, включающая полученные из растений пребиотики инулин и олигосахарид галактуроновой кислоты, а также синтезированный из лактозы пребиотик трансгалактоолигосахарид для снижения инфекций.

WO 2005/039597 относится к применению кислого олигосахарида или нейтрального олигосахарида для усиления иммунной системы и лечения и/или предотвращения развития заболеваний, связанных с иммунной системой.

WO 01/642255 относится к питательной композиции, содержащей пребиотик для усиления иммунного ответа.

В US 6576251 раскрыта углеводная смесь для продуктов диетического питания, вводимых энтеральным или парентеральным путем, состоящую из (а) моносахарида(ов), (b) олигосахарида(ов) (в большинстве гексасахаридов) и (с) полисахарида(ов) (по меньшей мере гептасахаридов), где соотношение в смеси компонентов a, b, с, по отношению к массе, представляет собой: альфа=1, b=40-1000 и с=1-50, и содержащую по меньшей мере 1 процент по массе фукозы, присутствующей как свободно, так и/или в связи с олигосахаридом и/или полисахаридом. Считается, что углеводная смесь обладает как питательным, так и биологическим воздействием, что является более значительным, чем соответствующее воздействие отдельных компонентов.

WO 99/11773 относится к способам получения не являющихся человеком трансгенных млекопитающих, которые в своем молоке вырабатывают различные олигосахариды и гликоконъюгаты. Предмет, заявленный в формуле изобретения данного документа, относится к самим млекопитающим, молоку, которое они вырабатывают, композициям, содержащим молоко, фракции молока и очищенные олигосахариды, а также гликоконъюгаты, присутствующие в молоке.

В WO 2005/055944 раскрыты фармакологические композиции, содержащие молекулы, которые включают фукозную группу в α-1,2 связи, α-1,3 связи или α-1,4 связи с галактозной группой, и фармакологически приемлемый носитель.

WO 2007/105945 относится к пище или добавкам для беременных женщин, включающим водорастворимые неусваиваемые сахариды. Композиция применяется для улучшения флоры и/или иммунной системы беременной женщины, для улучшения иммунной системы ребенка и для улучшения кишечной флоры ребенка после его рождения.

В EP 1629850 предоставлен способ и композиция для лечения и/или предотвращения инфекционных заболеваний дыхательных путей, где указанный способ включает галактозосодержащий неусваиваемый олигосахарид и по меньшей мере 5 процентов по массе неусваиваемого галактозного сахарида.

Множество усилий посвящено поиску дополнительных решений для сбалансирования и стимулирования иммунной системы.

Сущность изобретения

Человеческое молоко отличается от молока, получаемого от домашних животных, тем, что оно включает больше NDO, и тем, что сами NDO имеют структурные отличия. Человеческий NDO является очень сложным, поскольку он представляет гетерогенную группу из более чем 130 различных соединений с разнообразной структурой сахаров. Из-за их сложной и полиморфной структуры крупномасштабный синтез затруднен. По этой причине приготовление детского питания с композицией NDO, идентичной человеческому молоку, все еще нецелесообразно с технической и экономической точек зрения.

Совсем недавно стали доступны новые технологии химического синтеза специфических типов NDO, идентичных человеческим NDO, таким образом, предлагая возможность протестировать иммуномодулирующую способность специфических человеческих NDO в анализах in vitro и in vivo.

Авторы неожиданно обнаружили, что фукозиллактоза (FL), олигосахарид, присутствующий в грудном молоке человека и имеющий относительно простую структуру, при комбинировании с бетагалактоолигосахаридами, и предпочтительно с фруктоолигосахаридами и/или олигосахаридами уроновой кислоты, дает синергический эффект в отношении стимулирования иммунной системы. Усиленный ответ по типу реакции гиперчувствительности замедленного типа, характерный для усиленного Th1 ответа, наблюдался после вакцинирования противогриппозной вакциной животных, получавших настоящую комбинацию FL и бетагалактоолигосахаридов, по сравнению с животными, получавшими такие компоненты отдельно.

Было обнаружено, что настоящая комбинация, т.е. комбинация, включающая фукозиллактозу и бетагалактоолигосахариды, и предпочтительно дополнительно включающая фруктоолигосахариды и/или олигосахариды уроновой кислоты, повышает Th1 ответ. Наблюдаемый эффект был неожиданно выше, чем сумма эффектов, полученных от отдельных компонентов.

Настоящая комбинация является особенно эффективной для людей со сниженным Th1 ответом по сравнению со здоровыми взрослыми, особенно для новорожденных детей, пожилых людей, страдающих «старением» иммунной системы, людей, имеющих СПИД или зараженных вирусом иммунодефицита человека, пациентов, больных раком, которые проходят курсы химиотерапии, лучевой терапии, и пациентов с раковой кахексией.

Настоящая комбинация является подходящей для лечения и/или предотвращения развития инфекций, и/или для поддержания ответа на вакцинацию до, во время и/или после вакцинации.

Настоящая комбинация является особенно подходящей для лечения и/или предотвращения развития заболеваний, которые могут быть предотвращены и/или вылечены путем усиления Th1 ответа и/или Th1/Th2 баланса, в особенности аллергии, атопического дерматита, астмы, аллергии на компоненты пищи, аллергических ринитов (например, поллиноза), аллергии на пылевого клеща и других форм гиперчувствительности, таких как анафилаксия и острая крапивница.

Подробное описание

Настоящее изобретение, таким образом, относится к питательной композиции, которая не является человеческим молоком и содержит фукозиллактозу и бетагалактоолигосахариды.

В контексте настоящего изобретения комбинация, включающая фукозиллактозу и бетагалактоолигосахариды, и предпочтительно дополнительно включающая фруктоолигосахариды и/или олигосахариды уроновой кислоты, также называется настоящей комбинацией. В контексте настоящего изобретения термин «композиция согласно изобретению», или «данная композиция», или «настоящая композиция» означает композицию, содержащую настоящую комбинацию.

Фукозиллактоза

Настоящая комбинация включает фукозиллактозу. Фукозиллактоза (FL) представляет собой неусваиваемый олигосахарид, присутствующий в человеческом молоке. Он не присутствует в коровьем молоке. Он состоит из трех единиц монозы, фукозы, галактозы и глюкозы, связанных вместе. Лактоза представляет собой галактозную единицу, связанную с глюкозной единицей посредством бета-1,4 связи. Фукозная единица связана с галактозной единицей молекулы лактозы посредством альфа-1,2 связи (2'-фукозиллактоза, 2'-FL) или посредством альфа-1,3 связи с глюкозной единицей лактозы (3-фукозиллактоза, 3-FL). Настоящая композиция предпочтительно включает 2'-FL.

2'-FL, предпочтительно α-L-Fuc-(1→2)-β-D-Gal-(1→4)-D-Glc, и 3-FL, предпочтительно α-L-Fuc-(1→3)-[β-D-Gal-(1→4)]-D-Glc, коммерчески доступны, например, у Sigma-Aldrich. Альтернативно, они могут быть выделены из человеческого молока, например, как описано у Andersson & Donald, 1981, J Chromatogr. 211:170-1744, или могут производиться генетически модифицированными микроорганизмами, например, как описано у Albermann et al., 2001, Carbohydrate Res. 334:97-103.

Предпочтительно, композиция согласно изобретению содержит от 1 мг до 3 мг фукозиллактозы на 100 мл, более предпочтительно от 10 мг до 2 г, еще более предпочтительно от 20 мг до 100 мг FL на 100 мл. Из расчета на сухую массу, настоящая композиция предпочтительно содержит от 0,007% масс. до 20% масс. фукозиллактозы, более предпочтительно от 0,07% масс. до 10% масс., еще более предпочтительно от 0,15% масс. до 1% масс. Более низкое содержание фукозиллактозы будет менее эффективным в отношении стимулирования иммунной системы, в то время как слишком высокое содержание приведет к нецелесообразно высоким ценам на продукт.

Бетагалактоолигосахариды

Настоящая комбинация включает бетагалактоолигосахариды. Было обнаружено, что наличие бетагалактоолигосахаридов, отличных от FL, вместе с FL оказывает синергический эффект на иммунную стимуляцию, в частности на ответ на вакцинирование.

Бетагалактоолигосахарид также может называться трансгалактоолигосахаридом. В частности, предпочтительный вариант осуществления настоящей композиции включает бетагалактоолигосахариды ([галактоза]_n-глюкоза; где n равно целому числу от 2 до 60, то есть 2, 3, 4, 5, 6, …, 59, 60; предпочтительно n выбран из 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10, где галактозные единицы в большинстве своем связаны друг с другом посредством бета-связи. Бетагалактоолигосахариды (TOS), например, продаются под торговой маркой Vivinal(TM) (Borculo Domo Ingredients, Нидерланды). Другой подходящий источник представляет собой Bi2Munno (Classado). Предпочтительно, бетагалактоолигосахариды включают бета-1,4 и бета-1,6 связи. Предпочтительно, бетагалактоолигосахариды имеют более 80% бета-1,4 и бета-1,6 связей, более предпочтительно более 90% основаны на целых связях, связывающих мономерные углеводные единицы.

Предпочтительно, настоящая композиция содержит дополнительные неусваиваемые олигосахариды с DP от 2 до 250, более предпочтительно от 2 до 60. Неусваиваемые олигосахариды представляют собой предпочтительно по меньшей мере один и более предпочтительно по меньшей мере два, выбранных из группы, состоящей из фруктоолигосахаридов и олигосахаридов уроновой кислоты.

Группа фруктоолигосахаридов включает инулины. Фруктоолигосахарид представляет собой NDO, включающий цепь из связанных бета-связью фруктозных единиц с DP или средним DP от 2 до 250, более предпочтительно от 2 до 100, еще более предпочтительно от 10 до 60. Фруктоолигосахарид включает инулин, леван и/или смешанный тип полифруктана. Особенно предпочтительным фруктоолигосахаридом является инулин. Фруктоолигосахарид, подходящий для применения в композициях, также коммерчески доступен, например, у Raftiline®HP (Orafti). Предпочтительно, средний DP фруктоолигосахарида составляет более 20.

Группа олигосахаридов уроновой кислоты включает олигосахариды маннуроновой кислоты, гулуроновой кислоты, галактуроновой кислоты, продукты деградации альгината и продукты деградации пектина. Олигосахариды уроновой кислоты предпочтительно образуются из продуктов деградации пектина. Поэтому настоящая композиция предпочтительно содержит продукт деградации пектина с DP от 2 до 100. Предпочтительно, продукт деградации пектина получают из пектина яблока, пектина свеклы и/или пектина цитрусовых. Предпочтительно, олигосахарид уроновой кислоты представляет собой олигосахарид галактуроновой кислоты.

В предпочтительном варианте осуществления композиция содержит смесь бетагалактоолигосахаридов и фруктоолигосахаридов, выбранных из группы, состоящей из фруктоолигосахаридов с короткой цепью и инулина, более предпочтительно из инулина. Смесь по меньшей мере из двух различных неусваиваемых олигосахаридов преимущественно стимулирует полезные бактерии микробиоты кишечника к дальнейшему росту. Предпочтительно, соотношение по массе в смеси бетагалактоолигосахаридов и фруктоолигосахаридов составляет интервал от 25 до 0,05, более предпочтительно, от 20 до 1. Предпочтительно настоящая композиция содержит бутагалактоолигосахариды со степенью полимеризации (DP) от 2 до 10 и/или фруктоолигосахариды с DP от 2 до 60.

Помимо FL, наиболее предпочтительно, композиция содержит бетагалактоолигосахарид, фруктоолигосахарид и олигосахарид уроновой кислоты. Было обнаружено, что подобная комбинация действует синергически с фукозиллактозой, в частности 2'-фукозиллактозой. Соотношение по массе бетагалактоолигосахарид:фруктоолигосахарид:олигосахарид уроновой кислоты составляет предпочтительно (20-2):1:(1-20), более предпочтительно (20-2):1:(1-10), еще более предпочтительно (20-2):1:(1-3), еще более предпочтительно (12-7):1:(1-2). Наиболее предпочтительно, соотношение по массе составляет приблизительно 9:1:1,1. Предпочтительно, соотношение по массе FL к бетагалактоолигосахариду, предпочтительно TOS, составляет от 5 до 0,05, более предпочтительно от 5 до 0,1, более предпочтительно от 2 до 0,1. Предпочтительно, соотношение по массе FL к фруктоолигосахариду, предпочтительно инулину, составляет от 10 до 0,05, более предпочтительно от 10 до 0,1, более предпочтительно от 2 до 0,5. Предпочтительно, соотношение по массе FL к олигосахариду уроновой кислоты, предпочтительно полученному из пектина, составляет от 10 до 0,05, более предпочтительно от 10 до 0,1, более предпочтительно от 2 до 0,5.

Предпочтительно, композиция содержит от 80 мг до 4 г неусваиваемых олигосахаридов, включая фукозиллактозу и бетагалактоолигосахариды на 100 мл, более предпочтительно от 150 мг до 2 г, еще более предпочтительно от 300 мг до 1 г неусваиваемых олигосахаридов на 100 мл. Из расчета на сухую массу, композиция предпочтительно содержит от 0,25% масс. до 25% масс. неусваиваемых олигосахаридов, более предпочтительно от 0,5% масс. до 10% масс., еще более предпочтительно от 1,5% масс. до 7,5% масс. Более низкое количество неусваиваемых олигосахаридов будет менее эффективным в отношении стимулирования полезных бактерий в микробиоте, в то время как более высокое количество приведет к побочным эффектам метеоризма и дискомфорта в желудке.

Питательная композиция

Настоящая комбинация FL и бетагалактоолигосахаридов предпочтительно представляет собой питательную композицию. Композиция настоящего изобретения не является человеческим молоком. Настоящая композиция предпочтительно вводится энтерально, более предпочтительно перорально.

Настоящая композиция предпочтительно представляет собой питательную смесь, предпочтительно детскую смесь. Настоящая композиция может быть преимущественно применена в качестве полноценного питания для детей. Настоящая композиция предпочтительно содержит липидный компонент, белковый компонент и углеводный компонент и предпочтительно вводится в жидкой форме. Настоящее изобретение включает сухое питание, предпочтительно порошки, которые сопровождаются инструкциями, как смешивать указанную выше смесь сухого питания с подходящей жидкостью, предпочтительно с водой.

Настоящее изобретение преимущественно предоставляет композицию, где липидный компонент предоставляет 5-50% от общего количества калорий, белковый компонент предоставляет 5-50% от общего количества калорий и усваиваемый углеводный компонент предоставляет 15-85% от общего количества калорий. Настоящее изобретение преимущественно предоставляет композицию, где липидный компонент предоставляет 20-50% от общего количества калорий, белковый компонент предоставляет 5-30% от общего количества калорий и усваиваемый углеводный компонент предоставляет 30-70% от общего количества калорий. Предпочтительно, в настоящей композиции липидный компонент предоставляет 35-50% от общего количества калорий, белковый компонент предоставляет 7,5-12,5% от общего количества калорий и усваиваемый углеводный компонент предоставляет 40-55% от общего количества калорий. Для расчета данных процентов от общего количества калорий для белкового компонента, необходимо учитывать общую энергию, предоставляемую белками, пептидами и аминокислотами.

Настоящая композиция предпочтительно содержит по меньшей мере один липид, выбранный из группы, состоящей из животного липида, за исключением человеческих липидов и растительных липидов. Предпочтительно, настоящая композиция содержит комбинацию из растительных липидов и по меньшей мере одного жира, выбранного из группы, состоящей из рыбьего жира, животного жира, жира водорослей, жира грибов и жира бактерий. Настоящая композиция предпочтительно содержит длинноцепочечные полиненасыщенные жирные кислоты (LC-PUFA). LC-PUFA представляют собой жирные кислоты или жирные ацильные цепи длиной 20-24 атомов углерода, предпочтительно 20-22 атомов углерода, включающие 2 или более ненасыщенных связей. Более предпочтительно, настоящая композиция содержит эйкозапетановую кислоту (EPA, n=3), докозагексановую кислоту (DHA, n=3) и/или арахидоновую кислоту (ARA, n=6).

Предпочтительно, настоящая композиция содержит по меньшей мере 0,1% масс., предпочтительно, по меньшей мере 0,25% масс., более предпочтительно по меньшей мере 0,6% масс., еще более предпочтительно по меньшей мере 0,75% масс. LC-PUFA с 20 и 22 атомами углерода, из расчета на общее содержание жира.

Содержание LC-PUFA, в частности LC-PUFA с 20 и 22 атомами углерода, предпочтительно, не превышает 6% масс., более предпочтительно не превышает 3% масс. от общего содержания жира, поскольку состав желательно приблизить к человеческому молоку, насколько это возможно. LC-PUFA может быть предоставлена в виде свободных жирных кислот, в форме триглицеридов, в форме диглицеридов, в форме моноглицеридов, в форме фосфолипидов или в виде смеси одного или более перечисленных выше веществ. Настоящая композиция предпочтительно содержит от 5 до 75% масс. полиненасыщенных жирных кислот, из расчета на общий жир, предпочтительно от 10 до 50% масс.

Белок, используемый в питательной смеси, предпочтительно выбирают из группы, состоящей из нечеловеческих животных белков (предпочтительно, белков молока), растительных белков (предпочтительно, белка сои и/или белка риса), гидролизатов перечисленных выше веществ, свободных аминокислот и смеси перечисленных выше веществ. Настоящая композиция предпочтительно содержит казеин, молочную сыворотку, гидролизованный казеин и/или гидролизованный сывороточный белок молока. Предпочтительно, белок включает интактные белки, более предпочтительно интактные коровьи сывороточные белки и/или интактные коровьи белки казеина.

Настоящая композиция предпочтительно содержит усваиваемые углеводы, выбранные из группы, состоящей из сахарозы, лактозы, глюкозы, фруктозы, сухой кукурузной патоки, крахмала и мальтодекстринов, более предпочтительно лактозы.

В свете вышеизложенного, также важно, чтобы жидкая пища не имела избыточной калорийной плотности, но, тем не менее, обеспечивала достаточное количество калорий для кормления субъекта. Следовательно, жидкая пища предпочтительно имеет калорийную плотность от 0,1 до 2,5 ккал/мл, еще более предпочтительно, калорийную плотность от 0,5 до 1,5 ккал/мл, наиболее предпочтительно, от 0,6 до 0,8 ккал/ мл.

Предпочтительно, настоящая композиция содержит нуклеотиды и/или нуклеозиды, более предпочтительно нуклеотиды. Предпочтительно композиция содержит цитидин 5'-монофосфат, уридин 5'-монофосфат, аденозин 5'-монофосфат, гуанозин 5'-монофосфат и инозин 5'-монофосфат. Предпочтительно, композиция содержит от 5 до 100, более предпочтительно, от 5 до 50 мг, наиболее предпочтительно, от 10 до 50 мг нуклеотидов и/или нуклеозидов на 100 г сухой массы композиции. Присутствие нуклеотидов и/или нуклеотидов преимущественно стимулирует активность NK-клеток. Считается, что нуклеотиды и/или нуклеозиды действуют синергически с фукозиллактозой настоящей композиции.

Применение

Было обнаружено, что настоящая комбинация FL и бетагалактоолигосахаридов синергически стимулирует иммунную систему. В частности, усиливается Th1 ответ. Эффект комбинирования этих двух компонентов выше, чем сумма эффектов отдельных компонентов.

Настоящая комбинация может преимущественно применяться для лечения и/или предотвращения развития заболевания, и, таким образом, изобретение относится к способу лечения и/или предотвращения развития заболевания млекопитающих, и указанный способ включает введение настоящей комбинации млекопитающим. Другими словами, изобретение также относится к применению комбинации согласно настоящему изобретению для получения композиции, предпочтительно питательной композиции, для лечения и/или предотвращения развития заболевания. Другими словами, изобретение относится к композиции или питательной композиции, содержащей комбинацию согласно настоящему изобретению для применения для лечения и/или предотвращения развития заболевания. Предпочтительно, млекопитающим является человек, еще более предпочтительно человеком является ребенок. Таким образом, изобретение также относится к применению комбинации согласно настоящему изобретению для получения композиции, предпочтительно питательного препарата, для лечения и/или предотвращения развития заболевания у детей. Другими словами, изобретение относится к композиции или питательной композиции, содержащей комбинацию согласно настоящему изобретению, для применения для лечения и/или предотвращения развития заболевания у детей.

В контексте настоящего изобретения ребенок находится в возрасте от 0 до 6 лет, предпочтительно в возрасте от 0 до 4 лет, предпочтительно в возрасте от 0 до 2 лет, предпочтительно в возрасте от 0 до 1 года.

Также изобретение относится к способу предоставления питания детям, включающему введение настоящей комбинации или питательной композиции ребенку. Другими словами, изобретение также относится к применению комбинации согласно настоящему изобретению для получения питательной композиции для предоставления питания ребенку. Другими словами, изобретение относится к композиции или питательной композиции, содержащей комбинацию согласно настоящему изобретению для применения с целью обеспечения питанием ребенка.

Настоящая комбинация может преимущественно применяться для усиления Th1 ответа, увеличения баланса Th1/Th2, восстановления дисбаланса в ответах Th1/Th2, сохранения предпочтительного Th1/Th2 баланса и/или для лечения и предотвращения развития заболеваний, которые связаны с Th1/Th2 дисбалансом. Таким образом, предложенные композиции для, например, стимулирования созревания иммунной системы, усиления резистентности к патогенам посредством стимулирования иммунной системы и/или поддержки иммунной системы, являются частью настоящего изобретения. В дополнительном варианте осуществления настоящее изобретение предоставляет способ лечения и/или предотвращения развития заболеваний, связанных с иммунной системой, включающий введение указанным выше млекопитающим композиции, содержащей терапевтически эффективное количество настоящей комбинации. В дополнительном варианте осуществления настоящее изобретение предоставляет способ усиления иммунного ответа у млекопитающих, включающий введение млекопитающим настоящей комбинации.

Иммунная система новорожденного ребенка характеризуется усиленным Th2 ответом. По мере созревания иммунной системы, Th1 ответ усиливается и Th1/Th2 баланс переключается на величины, наблюдаемые у взрослых. Таким образом, настоящая комбинация является особенно преимущественной для детей человека. Настоящее изобретение поддерживает созревание иммунной системы у детей. В дополнительном варианте осуществления способ изобретения относится к введению настоящей комбинации людям в возрасте от 0 до 6 лет, предпочтительно в возрасте от 0 до 4 лет, предпочтительно в возрасте от 0 до 2 лет, более предпочтительно в возрасте от 0 до 1 года. В предпочтительном варианте осуществления данный способ относится к стимулированию созревания иммунной системы у людей в возрасте от 0 до 6 лет, предпочтительно в возрасте от 0 до 4 лет, предпочтительно в возрасте от 0 до 2 лет, более предпочтительно в возрасте от 0 до 1 года.

Композицию, содержащую фукозиллактозу и бетагалактоолигосахариды, даже более преимущественно применять у недоношенных детей и/или у детей, рожденных с очень низким или низким весом, поскольку такие дети восприимчивы и/или склонны к вирусным инфекциям.

Композицию, содержащую фукозиллактозу и бетагалактоолигосахариды, даже более преимущественно применять у детей, родившихся с помощью кесарева сечения. Дети, родившиеся после кесарева сечения, рождаются в больнице в среде, имеющей больше патогенов, по отношению к которым антитела, переданные матерью ребенку, неэффективны. У детей, родившихся после кесарева сечения, наблюдается менее оптимальная колонизация толстого кишечника и, таким образом, они более подвержены кишечным инфекциям.

Слишком низкий баланс Th1/Th2 ведет к чрезвычайной чувствительности по отношению к чужеродным веществам, что может привести к разнообразным иммунологическим реакциям, например аллергии и связанным с ней заболеваниям, таким как атопический дерматит, астма, аллергия на пищевые продукты, аллергический ринит (например, поллиноз), аллергия на пылевого клеща, и другим формам гиперчувствительности, таким как общая анафилактическая реакция и острая крапивница. Таким образом, настоящая комбинация особенно полезна при лечении и/или предотвращении развития заболевания, выбранного из группы, состоящей из аллергии, аллергии на пищевые продукты, атопического дерматита, астмы, аллергического ринита, аллергии на пылевого клеща и крапивницы. Настоящее изобретение повышает баланс Th1/Th2.

Усиление Th1 ответа ведет к усилению ответа против патогенных бактерий и/или вирусов. Таким образом, настоящая комбинация является подходящей для лечения и/или предотвращения развития инфекций. Данный препарат может преимущественно применяться для лечения и/или предотвращения развития кишечных инфекций, системных инфекций и/или инфекций дыхательных путей.

Поскольку было обнаружено, что комбинация FL и бетагалактоолигосахаридов специфически синергически усиливает Th1 ответ, настоящее изобретение является в особенности подходящим для предотвращения вирусных инфекций, более предпочтительно вирусных инфекций, вызванных семейством orthomyxoviridae, в частности вирусом гриппа, семейством herpesviridae, ротавирусом, цитомегаловирусом, семейством calciviridae, респираторно-синцитиальным вирусом, вирусом иммунодефицита человека и/или риновирусом. Применение настоящего изобретения, таким образом, является предпочтительным для предотвращения и/или лечения вирусных инфекций, более предпочтительно для вирусных инфекций, распространенной простуды, гриппа, кори, ветрянки, вирусной диареи, вирусного гастроэнтерита, ВИЧ инфекции и/или вирусной инфекции дыхательных путей.

Также было обнаружено, что настоящая комбинация может подходящим образом применяться для поддержки процессов вакцинации, например усиливать эффекты вакцинации. Настоящая комбинация является подходящей для поддерживания ответа на вакцинацию до, во время и/или после вакцинации. В частности, эффекты вакцинаций от дифтерии-столбняка, коклюша, противополиомиелитной вакциной, вакциной от кори/паротита/краснухи, пневмококковой конъюгированной вакциной, конъюгированной вакциной против гемофильной палочки В, против гепатита В, А, ветрянки и/или гриппа могут быть подходящим образом усилены. Таким образом, настоящая комбинация преимущественно применяется при лечении и/или предотвращении развития инфекций и/или для применения с целью усиления ответа на вакцинацию.

Хотя настоящая комбинация преимущественно предназначена для людей, страдающих иммунодефицитом, в частности для пожилых людей, страдающих "старением" иммунной системы, людей, болеющих СПИДом или инфицированных ВИЧ, для пациентов, больных раком, в частности для пациентов, больных раком и проходящих курсы химиотерапии, лучевой терапии, и пациентов с раковой кахексией.

Настоящая композиция преимущественно применяется для питания пожилых людей. У пожилых людей наблюдается сниженный Th1 ответ. Пожилые особенно подвержены осложнениям вирусной инфекции. В предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение применяется для лечения и/или предотвращения развития «старения» иммунной системы у пожилых людей. В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к предоставлению питания пожилым людям. Пожилым человеком считается человек в возрасте от 55 лет и более, в частности в возрасте от 65 лет и более.

Примеры

Пример 1

Эффект диет, включающих 2'-FL и/или бетагалактоолигосахариды, тестировали на моделях мышей, где ответ на действие антигена измерялся ответом по типу гиперчувствительности замедленного типа (DTH). Данный DTH ответ в ушах после локального воздействия антигена, присутствующем в вакцине, представляет степень пролиферации Th1 клеток. Во время ответа на инфекцию и/или вакцинацию Th1 клетки пролиферируют в ответ на воздействие антигена. Данные Th1 клетки инфильтрируют ухо, когда на ухо впоследствии воздействуют антигеном, и вызывают развитие отека. Инфильтрация Th1 клетками уха занимает приблизительно 24 часа и появление отека, таким образом, отсрочено. Чем больше Th1 клеток пролиферируют во время первичной вакцинации и/или инфекции, тем сильнее наблюдается DTH в ответ на воздействие антигена.

Материалы и методы

6-8 недельные С57BL/6 мыши женского пола (Charles River) получали частично очищенные диеты, основанные на AIN-93G (Research Diet Service, Wijk bij Duurstede, Нидерланды), включающие:

1) 1% масс. бетагалактоолигосахарида (GOS, источник Vivinal GOS, Borculo Domo), фруктоолигосахарида (FOS, источник RaftilineHP, Orafti) и олигосахарида галактуроновой кислоты (источник AOS) в соотношении 9:1:1,1. AOS продуцируется из пектина (Südzucker AG, Мангейм, Германия) с DP, равным 1-20. Он состоит приблизительно из 75% олигомеров галактуроновой кислоты, из расчета на общую массу,

2) 1% масс. 2'-фукозиллактозы (2'-FL),

3) 1% масс. бетагалактоолигосахаридов, фруктоолигосахаридов и олигосахарида галактуроновой кислоты (AOS) в соотношении 9:1:1,1 и 1% масс. 2'-FL,

4) 0,5% масс. бетагалактоолигосахаридов, фруктоолигосахаридов и олигосахарида галактуроновой кислоты (AOS) в соотношении 9:1:1,1, и 0,5% масс. 2'-FL.

Все группы сравнивали с бездобавочной контрольной диетой (контрольная группа и группа ложного контроля). Диетическая поддержка началась за 14 дней до первой вакцинации и длилась до конца эксперимента, до 31-го дня после первой вакцинации.

Эксперименты по вакцинации производили с применением Influvac (Solvay Pharmaceuticals, Weesp, Нидерланды) от сезона 2005/2006. Мыши получали первичную вакцинацию и ревакцинацию, состоящие из подкожной (п/к) инъекции 1:1 смесью вакцины и адъюванта в общем объеме 100 мкл. Ревакцинацию проводили на 21 день после первичной вакцинации. Эксперименты заканчивали через 10 дней после проведения ревакцинации. Отрицательные контрольные группы, которые были включены, получали инъекции 1:1 смесью вакцины и адъюванта в общем объеме 100 мкл (ложный контроль). Толщину уха измеряли в повторе перед воздействием вакцины и через 24 часа после, используя цифровой микрометр (Mitutoyo Digimatic 293561, Veenendaal, Нидерланды). Ответ DTH рассчитывали путем вычитания величины исходной толщины уха из величины, полученной через 24 часа после воздействия.

Результаты

Поддержка только при помощи GOS/FOS/AOS или 2'-FL привела к увеличению отека уха. Однако комбинация 2'-FL и GOS/FOS/AOS привела к еще более усиленному ответу DTH, Th1-зависимому параметру, по сравнению с откармливаемыми животными контроля и по сравнению с одиночными компонентами. Комбинация синергически усилила ответ на вакцинацию. См. таблицу 1.

Таблица 1
Эффект 2'-FL и TOS на ответ DTH Диетическое вмешательство Отек уха DTH (среднеквадратичная ошибка) ∆ DTH мкм Относительная DTH Ложный контроль 19,3 (5,5) 0 0 Контроль 66,3 (6,4) 47,0 1 1% TOS/FOS/AOS 90,8 (7,5) 71,5 1,52 1% 2'-FL 99,7* (10,2) 80,4 1,71 0,5% TOS/FOS/AOS, 0,5% 2'-FL 117,8** (4,4) 98,5 2,10 Ожидаемое 95,3 76,0 1,62 * обозначает р<0,05 по сравнению с контрольной группой
** обозначает р<0,01 по сравнению с контрольной группой и р<0,05 по сравнению с 0,5% GOS/FOS/AOS

Поскольку эффект ответа DTH значительно выше (110%), чем ответы DTH при диетах, содержащих FL (71%) или бетагалактоолигосахариды (52%) по отдельности, а также значительно выше, чем основанный на суммарном эффекте, который может быть рассчитан как 62%-ое повышение DTH, данные результаты являются показательными для синергического эффекта, наблюдаемого при введении FL и бетагалактоолигосахаридов, и предпочтительно фруктоолигосахаридов и/или олигосахаридов уроновой кислоты, на усиление Th1 ответа.

Подводя итог, данные результаты подтверждают, что пероральная поддержка FL в комбинации с бетагалактоолигосахаридами, более предпочтительно с дополнительным включением фруктоолигосахаридов и/или олигосахаридов уроновой кислоты, стимулирует иммунный ответ. Иммунный ответ является особенно усиленным благодаря Th1 ответу и/или ответу на вакцинацию. Результаты также показательны относительно повышения Th1/Th2 баланса.

Результаты данного эксперимента являются показательными относительно того, что настоящее изобретение может преимущественно применяться для поддержания ответа на вакцинацию. Результаты данного эксперимента также являются показательными в том, что оно может преимущественно применяться у объектов с низким Th1 ответом, в частности у детей. Результаты данного эксперимента являются также показательными в том, что оно может преимущественно применяться у субъектов с низким Th1 ответом, в частности у пожилых, страдающих или находящихся в группе риска по «старению» иммунной системы, у пациентов, имеющих ВИЧ, пациентов, больных СПИДом, и/или у пациентов, больных раком и проходящих курсы химиотерапии, лучевой терапии, и пациентов с раковой кахексией. Данная модель является показательной для базовых иммунологических изменений, которые могут быть полезными при всех заболеваниях, связанных с нарушением функционирования иммунной системы.

Пример 2

Детская смесь для стимулирования иммунной системы, содержащая на 100 мл (13,9 сухой массы):

1,4 г белков (сыворотка и казеин),

7,3 г усваиваемых углеводов (включая лактозу),

3,6 г жиров (растительный жир, рыбий жир),

0,8 г неусваиваемых олигосахаридов, из них 80 мг 2'-фукозиллактозы и 640 мг бетагалактоолигосахаридов и 80 мг фруктоолигосахаридов.

Дополнительно включены: холин, миоинозитол, таурин, минералы, микроэлементы и витамины, как известно в данной области техники.

Пример 3

Детская смесь для стимулирования иммунной системы, содержащая на 100 мл (13,9 сухой массы):

1,4 г белков (сыворотка и казеин),

7,3 г усваиваемых углеводов (включая лактозу),

3,6 г жиров (растительный жир, рыбий жир),

0,8 г неусваиваемых олигосахаридов, из них 40 мг 2'-фукозиллактозы и 760 мг бетагалактоолигосахаридов, фруктоолигосахаридов и олигосахаридов уроновой кислоты в соотношении 9:1:1,2 по массе.

Дополнительно включены: холин, миоинозитол, таурин, минералы, микроэлементы и витамины, как известно в данной области техники.

Группа изобретений относится к области пищевой промышленности, а именно к питательной композиции, которая не является человеческим молоком и содержит фукозиллактозу и бетагалактоолигосахариды, которые имеют структуру [галактоза]_n-глюкоза, где n равно целому числу от 2 до 60, и имеют более 80% бета-1,4 и бета-1,6 связей, и где питательная композиция содержит белки, усваиваемые углеводы и жиры, где белки предоставляют 5-50%, усваиваемые углеводы предоставляют 15-85% и жиры предоставляют 5-50% калорий из расчета на общее количество калорий; и к применению такой композиции для предоставления питания детям, пожилым, пациентам, болеющим раком, и/или пациентам, зараженным ВИЧ, а также для лечения и/или предотвращения развития заболевания, которое может быть предотвращено и/или вылечено путем усиления Th1 ответа, и в получении композиции для усиления ответа на вакцинацию. Группа изобретений обеспечивает синергетический эффект на усиление Th1 ответа. 5 н. и 4 з.п. ф-лы, 1 табл., 3 пр.

1. Питательная композиция, которая не является человеческим молоком и содержит от 0,07 до 1 мас.% 2’-фукозиллактозы из расчета на сухую массу композиции и бетагалактоолигосахариды, имеющие структуру [галактоза]_n-глюкоза; где n равно целому числу от 2 до 60, где бетагалактоолигосахариды имеют более 80% бета-1,4 и бета-1,6 связей и где питательная композиция содержит белки, усваиваемые углеводы и жиры, где белки предоставляют 5-50%, усваиваемые углеводы предоставляют 15-85% и жиры предоставляют 5-50% калорий из расчета на общее количество калорий.

2. Питательная композиция по п.1, которая дополнительно содержит фруктоолигосахариды и/или олигосахариды уроновой кислоты.

3. Питательная композиция по п.1 или 2, которая дополнительно содержит фруктоолигосахариды и олигосахариды уроновой кислоты.

4. Питательная композиция по п.1 или 2, где бетагалактоолигосахариды имеют более 90% бета-1,4 и бета-1,6 связей.

5. Питательная композиция по п.2, имеющая в сумме от 0,25 до 15 мас.% бетагалактоолигосахаридов, фруктоолигосахаридов и олигосахаридов уроновой кислоты из расчета на сухую массу композиции.

6. Применение питательной композиции по любому из пп.1-5 в получении композиции для предоставления питания детям.

7. Применение питательной композиции по любому из пп.1-5 в получении композиции для предоставления питания пожилым, пациентам, болеющим раком, и/или пациентам, зараженным ВИЧ.

8. Применение питательной композиции по любому из пп.1-5 в получении композиции для лечения и/или предотвращения развития заболевания, которое может быть предотвращено и/или вылечено путем усиления Th1 ответа.

9. Применение питательной композиции по любому из пп.1-5 в получении композиции для усиления ответа на вакцинацию.