Способ повышения продуктивности рыбы Российский патент 2023 года по МПК A23K50/80 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к рыбоводству и может быть использовано для кормления рыб.

Известен способ повышение живой массы (RU 2604501, A23K 50/75, A23K 10/16, A23K 20/163, A23K 20/28, 2016 г.), путем скармливания полнорационного корма с добавлением бакконцентрата, представляющего собой смесь бактерий штаммов Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus lactis subsp. lactis и Propionobacterium freudenreichii subsp. shermanii, предварительно сублимированную до состояния лиофилизированного порошка, лактулозы, крахмала и перлита, при следующем соотношении: лиофилизированный порошок бакконцентрата - 10%, крахмал - 40%, лактулоза - 30% и перлит - 20%.

Недостатком данного способа является её ограниченная область применения, так как используется только для кормления цыплят-бройлеров.

Известна кормовая добавка (RU №2359465, А23K 1/00, 2009 г.) для повышения продуктивности животных, в состав которой входят культуры бактерий Bifidobacterium globosum, Enterococcus faecium и Bacillus subtilis, сухой свекловичный жом, фумаровая кислота и цеолит, при следующем соотношении компонентов, мас.%: сухой свекловичный жом 71,8-79,2; пробиотик 0,20-0,36; фумаровая кислота 0,79-0,90; цеолит - остальное.

Недостатком кормовой добавки является её ограниченная область применения, так как используется только для кормления свиней.

Известен препарат для улучшения продуктивности животных (RU 2652824, A23K 20/174; A23K 20/00; A23K 50/00, 2018 г.), который включает пробиотические культуры Lactobacillus acidophilus и Propionibacterium в соотношении 1:1 до 10⁶-10¹⁰ КОЕ, аскорбиновую кислоту, L-лизин, DL-метионин, L-карнитин, бетаин, лимонную кислоту, муравьиную кислоту, пропионовую кислоту, сорбат калия, глютамат натрия, сульфат магния, бикарбонат натрия, хлорид натрия, марганец (в виде сульфата), хлорид калия, цинк (в виде сульфата), селен (в виде селенита натрия), йод (в виде йодата калия), кобальт (в виде хлорида), медь (в виде карбоната), железо (в виде глюконата) и витамины: A, D3, Е, В1, В2, В6, В9, B12, В5, K, которые взяты в определенном количестве.

Недостатком препарата является её ограниченная область применения, так как препарат вводится с помощью орального выпаивания и применим только для кормления птицы и сельскохозяйственных животных.

Известна кормовая добавка (RU 2579219, A23K 10/10, A23K 20/28, 2016 г.) которая содержит пчелиный подмор, биомассу и культуральную жидкость, полученную при культивировании чайного гриба Medusomyces Gisevii Lindau, бифидобактерин, экстракт коры сосны и осины, опоку, бентонит и травяную муку, при следующем соотношении компонентов мас. %: пчелиный подмор 10,0-12,0; биомасса и культуральная жидкость, полученная при культивировании чайного гриба Medusomyces Gisevii Lindau 18,0-20,0; бифидумбактерин 0,35-0,40; экстракт коры сосны и осины 4,5-5,0; опока 3,0-3,5 %; бентонит 3,0-3,5 %, травяная мука - остальное.

Недостатком кормовой добавки является наличие чайного гриба, который может привести к расстройству желудка, так как вызывает повышение кислотности желудка животных, а также её ограниченная область применения, так как используется только для сельскохозяйственных животных и птицы.

Известна кормовая добавка (RU 2574691, А23К 1/16, 10.02.2016 г.), содержащая комплекс биологически активных веществ на основе биомассы и культуральной жидкости гриба Medusomyces Gisevii Lindau в смеси с пробиотиком «Бифидумбактерин», культивируемым в хитинсодержащей питательной среде, где в качестве источника хитина использован порошок подмора пчел.

Недостатком данного способа является трудоемкость приготовления добавки, а также их ограниченная область применения, так как используются только для птицы.

Известна кормовая добавка (RU 2708161, A23K 10/16, A23K 10/30, A23K 20/28, 2019 г.) для повышения продуктивности, которая содержит порошок цеолита, пробиотик, включающий биомассу молочнокислых бактерий, выбранных из Lactobacillus acidophilus, или Propionobacterium freundenreichii, или Bifidobacterium longum, или Bifidobacterium adolescentis, или Streptococcus termophilus с титром не менее 10⁹ КОЕ/мл, пресноводную микроводоросль хлореллу, глюкозу кормовую и отруби злаковые, при следующем количественном соотношении исходных компонентов, масс. %: порошок цеолита 30,0-32,0; пробиотик 8,0-18,0; ресноводная микроводоросль хлорелла 13,0-14,0 %, глюкоза кормовая 3,0-3,5 %, отруби злаковые - остальное.

Недостатком способа является её ограниченная область применения, так как используется только для сельскохозяйственных животных.

Известна кормовая добавка (RU 2359465, A23K1/00, 2009 г.) которая состоит из сухого свекловичного жома, содержащая пробиотик, в состав которого входят культуры бактерий Bifidobacterium globosum, Enterococcus faecium и Bacillus subtilis, фумаровую кислоту и цеолит, при следующем соотношении компонентов, мас.%: сухой свекловичный жом 71,8-79,2; пробиотик 0,20-0,36; фумаровая кислота 0,79-0,90; цеолит - остальное.

Недостатком кормовой добавки является её ограниченная область применения, так как используется только для свиней.

Известен способ (RU 2471359, A23K 1/00, 2013 г.) который предусматривает использование пробиотика «Проваген» в дозе 5 г на одну голову в сутки, который смешивают с сухим кормом. В полученную смесь последовательно вносят кальция пантотенат в дозе 0,12 г и кислоту аскорбиновую в дозе 0,2 г на одну голову в сутки.

Недостатком способа является её ограниченная область применения, так как используется только для поросят в период отъема.

Известен способ улучшения физиолого-биохимических процессов в организме и повышения продуктивности (RU 2738275, A23K 10/00, 2020 г.), отличающийся тем, что в основной рацион вводят комплексную кормовую добавку, в состав которой входят в % соотношении: минерал шунгит - 35, холин в «защищенной» от воздействия рубцовой микрофлоры форме - 10, «Целлобактерин+», в основе которого спорообразующий штамм Enterococcus faecium 1-30, жмых льняной - 40, и скармливают ее в количестве 40 г на 100 кг живой массы в сутки.

Недостатком способа является её ограниченная область применения, так как используется только для телят молочного и послемолочного периода и для молочных коров.

Известен способ приготовления кормовой добавки (RU 2744196, A23K 50/10, A23K 50/60, A23K 20/20, 2021 г.) который характеризуется тем, что в рацион вводят ультрадисперсные частицы железа размером 90 нм в дозировке 2,2 мг на голову один раз в сутки в течение 7 дней.

Недостатком способа является её ограниченная область применения, так как используется только для молодняка крупного рогатого скота.

Известен способ повышения продуктивности (RU 2658391, A23K 50/75, A23K 20/142, A61K 33/34, B82B 1/00, 2018 г.) с помощью внутримышечных инъекций наноформ железа размером 80,5±5 мкм в дозировке 2 мг/кг живой массы и меди размерностью 40±0,5 мкм в дозировке 2 мг/кг живой массы с электрохимически активированным католитом.

Недостатком способа является её ограниченная область применения, так как микроэлементы вводятся с помощью внутримышечных инъекций и способ применим только для птицы.

Известен способ повышения продуктивности (RU 2601812, A61K 33/34 A23K 20/142, A23K 50/75, B82B 1/00, 2016 г.) с помощью внутримышечной инъекции наноформ железа размером 80,5±5 мкм в дозировке 2 мг/кг живой массы и с включением аргинина в составе рациона в дозировке 10 г на кг рациона.

Недостатком способа является её ограниченная область применения, так как железо вводится с помощью внутримышечных инъекций и способ применим только для птицы.

Известен способ повышения продуктивности животных (RU 2440770, А23К 1/00, 2012 г.). Способ заключается во введении нанопорошка железа в рацион сельскохозяйственных животных путем опрыскивания кормов суспензией нанопорошка железа с размером частиц 20-30 нм в дозах 0,08-0,1 мг/кг живой массы в сутки.

Недостатком способа является её ограниченная область применения, так как используется только для сельскохозяйственных животных.

Известен способ увеличения продуктивности живой массы за счет повышения переваримости питательных компонентов корма в пищеварительном тракте (RU 2766683, A23K 50/60, A23K 50/10, A23K 20/20, 2022 г.), который характеризуется тем, что в комбикорм вводят ультрадисперсные частицы железа размером 90 нм в дозировке 2,4 мг на голову один раз в сутки в течение 14 дней.

Недостатком данного способа является её ограниченная область применения, так как используется только для кормления молодняка крупного рогатого скота.

Известна кормовая добавка (RU 2652836, A23K 10/16, 2018 г.) обеспечивающая улучшение показателей роста и развития сельскохозяйственных животных, птиц, лошадей и рыб, содержащая в своем составе биомассу комплекса бактерий Enterococcus faecium и Bacillus megaterium, нанесенную на наполнитель, в качестве которого используют отруби или шрот подсолнечный, или диатомит, или трепел.

Недостатком данной кормовой добавки является её ограниченная область применения, так как используется только для холодолюбивых рыб (радужная форель).

Известен способ приготовления кормов для рыб (RU 2192756, A23K 1/16, A23K 1/175, 2002 г.), в котором в качестве кормовой добавки используют ультрадисперсные частицы железа размером 7-20 нм, дозой 25 мг/кг корма, обработанные ультразвуком в течение 5 мин с частотой 44 кГц, затем ультрадисперсные частицы смешивают с глицерином в соотношении 1:12, и смешивают с фаршем животной части корма (50 %), состоящей из селезенки, килечного фарша и калифорнийского червя, а затем смешивают с гранулированным кормом ЛК-5 (50 %).

Недостатком данного способа является увеличение себестоимости производства комбикормов из-за включения в состав животной части корма.

Технический результат - увеличение продуктивности рыбы.

Способ был реализован следующим образом: тонкий слой корма опрыскивают полученными методом высокотемпературной конденсации диспергированными ультразвуком в дистиллированной воде в течение 30 мин с частотой 35 кГц ультрадисперсными частицами железа, размером 100±2 нм, в количестве 30 мг/кг корма, и растворенным в дистиллированной воде пробиотическим препаратом «Бифидумбактерин», в количестве 0,747 мг/кг корма.

На базе кафедры биотехнологии животного сырья и аквакультуры Оренбургского государственного университета проведен эксперимент, в ходе которого методом аналогов было сформированы 3 группы (n=30) молоди карпа средней массой 22,5 г. Рыбы контрольной группы получали основной рацион (ОР), рыбы I опытной группы (O1) - ОР + УДЧ железа в количестве 30 мг/кг корма; рыбы II опытной группы (O2) - ОР + УДЧ железа в количестве 30 мг/кг корма + пробиотический препарат «Бифидумбактерин» в количестве 0,747 мг/кг корма.

В качестве ОР использовался сбалансированный по основным питательным веществам корм для карповых рыб КРК-110-1 (ОАО «Оренбургский комбикормовый завод», г. Оренбург), содержащий 26,0 % протеина.

УДЧ железа, размером 100±2 нм, вводили после диспергирования препарата в дистиллированной воде в течение 30 мин с частотой 35 кГц с помощью УЗДН-2Т. Материаловедческая аттестация УДЧ Fe включала электронную сканирующую, просвечивающую и атомно-силовую микроскопию с использованием LEX T OLS4100, JSM 7401F, JEM-2000FX («JEOL», Япония). Размерное распределение частиц исследовалось на анализаторе наночастиц Brookhaven 90Plus/BIMAS Zeta PALS и Photocor Compact («Фотокор», Россия). Биологическая экспертиза ультрадисперсных частиц проводилась с использованием lux-биосенсоров штамм Escherichia coli K12 TG1 pF1 по методике (Deryabin D. G., Aleshina E. S., Efremova L. V. Application of the inhibition of bacterial bioluminescence test for assessment of toxicity of carbon-based nanomaterials. Microbiology. 2012;81(4):492-497. doi: 10.1134/S0026261712040042.).

Препарат «Бифидумбактерин» представляет собой штамм бактерий Bifidobacterium bifidum 791, лиофилизированную, с титром живых бактерий не менее 1×10⁷ КОЕ (ЗАО «Экополис», Россия, г. Ковров).

Исследования и обслуживание рыб выполнено в соответствии с инструкциями Russian Regulations, 1987 (Order No.755 on 12.08.1977 the USSR Ministry of Health) и «The Guide for Care and Use of Laboratory Animals (National Academy Press Washington, D.С. 1966)». При выполнении исследований были приняты усилия, чтобы свести к минимуму страдания животных и уменьшения количества используемых образцов.

Суточная норма кормления определялась еженедельно с учетом массы рыбы, температуры воды и концентрации растворенного в воде кислорода (Пономарев С.В. Индустриальное рыбоводство: учебник / С. В. Пономарев, Ю. Н. Грозеску, А. А. Бахарева. - Санкт-Петербург: Лань, 2013. - 448 с.).

Полученные результаты были статистически обработаны. Для выявления статистически значимых (достоверных) различий использовали критерий Стьюдента. Достоверными считали различия при уровне вероятности ошибки не выше 5% (P≤0,05) (Лакин Г.Ф. Биометрия. - М.: Высш. шк., 1990. - 352 с.).

Экспериментальные исследования показали, что введение в рацион УДЧ Fe и пробиотического препарата «Бифидумбактерин» сопряжено с повышением продуктивности массы рыбы. Начиная, с первой недели эксперимента рыбы опытных групп опережали по интенсивности роста рыб контрольной группы (фиг.1). На фиг.1 приведен график, показывающий разницу живой массы рыб опытных групп по сравнению с контрольной в %.

Высокий ростостимулирующий эффект зафиксирован в группе О2 с УДЧ Fe и Бифидумбактерином, так продуктивность рыбы на 3 недели эксперимента была достоверно выше контроля на 21,1 % (P≤0,01), на 4-7 неделях - на 17,7-18,2 % (P≤0,01), на 8 неделе - на 27,8 % (P≤0,01). Относительный прирост за весь период выращивания в группе О2 составил 108 %, в группе О1 - 80,9 %, а в контроле 68,8 % (табл.1).

Сохранность рыб за весь период выращивания в опытных группах находилась на высоком уровне - 100 %, а в контроле 98 %.

Для оценки влияния добавок на физиологическое состояние рыб проведены гематологические исследования крови рыб по стандартным методикам (аттестат аккредитации № RA.RU.21ПФ59 от 02.12.2015 г.) с использованием оборудования ЦКП БСТ РАН http://цкп-бст.рф.

Таблица 1 - Рыбоводно-биологические показатели выращивания подопытного карпа Показатели Группа O1 O2 Контроль Масса рыбы в начале опыта, г 22,5 ± 0,6 22,5 ± 0,5 22,3 ± 0,5 Масса рыбы в конце опыта, г 40,7 ± 0,5* 46,8 ± 1,2** 36,6 ± 1,1 Абсолютный прирост, г 16,2 24,3 14,3 Относительный прирост, % 80,9 108 68,8 Сохранность, % 100 100 98 Период выращивания, сут 56 Примечание: разница с контролем ^*Р≤0,05; ^**P≤0,01

Гематологические показатели исследуемых рыб находились в пределах физиологической нормы (табл. 2), что говорит об отсутствие токсического эффекта вводимых добавок. Установлено положительное влияние УДЧ Fe и Бифидумбактерина на уровень белкового обмена, о чем свидетельствует повышение уровня глюкозы на 63,6 % (Р≤0,05) и 152 % (Р≤0,001), и общего белка на 36,1 % (Р≤0,001) и 12,8 % (Р≤0,05), в крови рыб групп О1 и О2, соответственно, относительно контрольных значений, что может быть следствием активации обменных реакций и говорит о высокой резистентности организма (Kondera E, Bojarski B, Ługowska K, Kot B, Witeska M. Effects of Oxytetracycline and Gentamicin Therapeutic Doses on Hematological, Biochemical and Hematopoietic Parameters in Cyprinus carpio Juveniles // Animals (Basel). 2020 Dec 3;10(12):2278. doi: 10.3390/ani10122278).

Таблица 2 - Гематологические показатели рыб Показатель Группа O1 O2 Контроль Гемоглобин, г/л 135 ± 3,3 138 ± 3,2 137 ± 3,7 Эритроциты, 10¹²/л 0,81 ± 0,05** 0,86 ± 0,04** 1,08 ± 0,05 Лейкоциты, 10⁹/л 173,5 ± 0,9** 152,1 ± 1,1 149,0 ± 1,6 Общий белок, г/л 35,0 ± 2,0*** 29,0 ± 2,5* 25,7 ± 1,4 Глюкоза, ммоль/л 2,11 ± 0,5* 3,25 ± 0,4*** 1,29 ± 0,2 СОЭ, мм/ч 4 4 4 Примечание: разница с контролем * Р≤0,05; ** Р≤0,01; *** Р≤0,001.

Анализируя полученные данные, можно сделать следующие выводы:

- совместное добавление в основной рацион пробиотического препарата «Бифидумбактерин», на основе штамма бактерий Bifidobacterium bifidum, в количестве 0,747 мг/кг корма и ультрадисперсных частиц железа в количестве 30 мг/кг корма положительно влияет на продуктивность и развитие рыб.

- способ повышения продуктивности роста рыб путем включения в рацион пробиотического препарата «Бифидумбактерин» в количестве 0,747 мг/кг корма и ультрадисперсных частиц железа в количестве 30 мг/кг корма подтвержден возможностью его осуществления с помощью описанных в заявке средств и методов.

- заявленное изобретение соответствует условию «промышленная применимость».

Тонкий слой корма предварительно опрыскивают полученными методом высокотемпературной конденсации диспергированными ультразвуком в дистиллированной воде в течение 30 мин с частотой 35 кГц ультрадисперсными частицами железа, размером 100±2 нм, в количестве 30 мг/кг корма, и растворенным в дистиллированной воде пробиотическим препаратом «Бифидумбактерин», в количестве 0,747 мг/кг корма. Изобретение обеспечивает увеличение продуктивности рыбы. 1 ил., 2 табл.

Способ повышения продуктивности рыб, включающий скармливание корма, тонкий слой которого предварительно опрыскивают полученными методом высокотемпературной конденсации диспергированными ультразвуком в дистиллированной воде в течение 30 мин с частотой 35 кГц ультрадисперсными частицами железа, размером 100±2 нм, в количестве 30 мг/кг корма, и растворенным в дистиллированной воде пробиотическим препаратом «Бифидумбактерин», в количестве 0,747 мг/кг корма.