ВАКЦИННЫЙ ВИРУС СВИНОГО РЕПРОДУКТИВНО-РЕСПИРАТОРНОГО СИНДРОМА Российский патент 2023 года по МПК C12N7/02 A61K39/12 A61P31/14 

Данное изобретение относится к модифицированным живым вирусам свиного репродуктивно-респираторного синдрома. Модифицированные живые вирусы пригодны для применения в вакцинах, особенно в вакцинах, которые обеспечивают защиту против гетерологичных вирусов.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Свиной репродуктивно-респираторный синдром (PRRS), который изначально называли «загадочная болезнь свиней», был впервые описан в Европе, но на данный момент распространился по всему миру. PRRS вызывает выкидыши на поздних стадиях, мертворождение и бесплодие у половозрелых свиней и респираторное заболевание, ухудшение показателей роста и даже смерть в детском возрасте, а также у поросят на доращивании и в заключительной стадии откорма. PRRS вызывает значительные экономические потери.

Симптомы вирусной инфекции PRRS у взрослых свиней включают без ограничения снижение аппетита, сонливость и лихорадку. У беременных свиней могут наблюдаться преждевременные роды, выкидыш плода или рождение мумифицированных или мертвых поросят, и до 10% беременных свиней могут умереть от вирусной инфекции PRRS. У инфицированных поросят наблюдаются высокие показатели смертности до отъема, они часто слабые и с отеками вокруг глаз. Вирусная инфекция PRRS у детенышей после отъема или поросят на доращивании и в заключительной стадии откорма может вызывать, без ограничения, отсутствие развития, дыхательную недостаточность, затрудненное или учащенное дыхание, покраснение участков кожи или всклокоченный шерстяной покров.

Вирус PRRS представляет собой вирус в оболочке с геномом линейной РНК с положительной цепью с размером приблизительно 15 тыс. оснований, и вирус отнесен к семейству Arteriviridae. К настоящему моменту в геноме было идентифицировано по меньшей мере одиннадцать открытых рамок считывания. Вирусы PRRS разделены на два генотипа. Пример европейского генотипа, вирусы PRRS 1 типа (PRRSV-1), представляет собой штамм «Лелистад», тогда как пример северо-американских вирусов PRRS 2 типа (PRRSV-2) представляет собой штамм VR-2332.

Указанные два генотипа могут обладать последовательностями геномов, которые идентичны всего на приблизительно 60%, и даже в рамках генотипов отдельные штаммы могут изменяться на около 20% по идентичности своих геномов. Такая вариабельность усложняет разработку вакцин для эффективного лечения и/или профилактики PRRS. Модифицированные живые варианты вируса (MLV) PRRS могут вызывать иммунитет против заражения вирусами PRRS, но вакцина является наиболее эффективной, когда происходит заражение вирусом PRRS, генетически гомологичным MLV. Вакцины MLV являются менее эффективными против заражения гетерологичными вирусами. Дополнительно, MLV демонстрируют некоторый возврат вирулентности, так что вакцинный вирус вызывает заболевание у вакцинированных животных. Вакцины, содержащие инактивированные (т.е. убитые) вирусы PRRS, обладают улучшенными профилями безопасности, но эффективность против гетерологичного штамма может быть ограничена.

Поскольку разработанные на данный момент вакцины PRRS не демонстрируют достаточной безопасности и эффективности для снижения экономического влияния вирусной инфекции PRRS, необходимы новые и улучшенные вакцины. Предпочтительно, эти вакцины должны быть как безопасными, так и эффективными. Если вакцины содержат ослабленные MLV, эти ослабленные MLV не должны демонстрировать возврата вирулентности, чтобы считаться безопасными для применения в полевых условиях. Например, путем адаптирования штамма PRRS к росту в клетках тканевой культуры в течение по меньшей мере 60 пассажей, по меньшей мере 70 пассажей, по меньшей мере 80 пассажей или предпочтительно по меньшей мере 85 пассажей, MLV не должен демонстрировать возврата вирулентности. Для проявления эффективности, штамм вакцинного вируса должен быть способен вызывать защитный иммунитет у свиньи против ряда филогенетически различных штаммов PRRS дикого типа. Предпочтительно, новый штамм вакцинного вируса PRRS должен быть способен вызывать защитный иммунитет у свиньи против по меньшей мере трех филогенетически различных штаммов PRRS дикого типа.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В данном изобретении предложен модифицированный живой штамм вакцинного вируса репродуктивно-респираторного синдрома свиней, причем консенсусная комплементарная последовательность ДНК указанного штамма PRRS по меньшей мере на 90% идентична последовательности, выбранной из группы SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Предпочтительно, модифицированный живой штамм может обладать консенсусной комплементарной последовательностью ДНК, которая по меньшей мере на 95% идентична последовательности, выбранной из группы SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Более предпочтительно, модифицированный живой штамм может также обладать консенсусной комплементарной последовательностью ДНК, которая по меньшей мере на 98% идентична последовательности, выбранной из группы SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Специалист в данной области техники поймет, что вследствие высокой частоты мутаций вируса PRRS модифицированный живой штамм PRRS может содержать несколько субпопуляций, при этом каждый обладает гомологичным, но не идентичным геномом.

В данном изобретении предложен модифицированный живой штамм вируса свиного репродуктивно-респираторного синдрома (PRRS), причем штамм вируса PRRS представляет собой штамм DE 14-3073, ES 13-49, IT 14-32 или PL 14-02. Штамм вируса PRRS необходимо пересевать предпочтительно по меньшей мере 60 раз, или более предпочтительно 70 раз, или еще более предпочтительно 80 раз, в клетках тканевой культуры. Наиболее предпочтительно, штамм вируса PRRS следует пересевать 85 раз в клетках тканевой культуры. Такой пересев в клетках тканевой культуры является эффективным для ослабления модифицированного живого штамма вируса PRRS. Ослабленные штаммы вируса PRRS могут вызывать субклиническое, но не клиническое заболевание при введении этих штаммов свиньям. Модифицированные живые штаммы вируса PRRS, пересеваемые по меньшей мере 80 раз, обладают низкой вероятностью возвращения к вирулентности дикого типа. Наиболее предпочтительно, модифицированные живые штаммы вируса PRRS, пересеваемые 85 раз, обладают низкой вероятностью возвращения к вирулентности дикого типа.

В данном изобретении предложена иммуногенная композиция, содержащая модифицированный живой штамм вируса PRRS, имеющий консенсусную комплементарную последовательность ДНК, которая по меньшей мере на 90% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Предпочтительно, модифицированный живой штамм может обладать консенсусной комплементарной последовательностью ДНК, которая по меньшей мере на 95% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Более предпочтительно, модифицированный живой штамм может также обладать консенсусной комплементарной последовательностью ДНК, которая по меньшей мере на 98% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Специалист в данной области техники поймет, что вследствие высокой частоты мутаций вируса PRRS модифицированный живой штамм PRRS может содержать несколько субпопуляций, при этом каждый обладает гомологичным, но не идентичным геномом.

В данном изобретении предложена иммуногенная композиция, содержащая модифицированный живой штамм вируса PRRS, причем указанный штамм вируса PRRS представляет собой штамм DE 14-3073, штамм ES 13-49, штамм IT 14-32 или штамм PL 14-02. Штамм DE 14-3073, или штамм ES 13-49, или штамм IT 14-32, или штамм PL 14-02 можно пересевать по меньшей мере 80 раз, или предпочтительно даже 85 раз, в клетках тканевой культуры. Наиболее предпочтительно, иммуногенная композиция содержит по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.

Иммуногенная композиция может также содержать дополнительный антиген от другого вируса, или от бактериального штамма, или от паразита.

В данном изобретении предложена вакцина, содержащая модифицированный живой штамм вируса PRRS, причем консенсусная комплементарная последовательность ДНК указанного штамма PRRS по меньшей мере на 90% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Предпочтительно, модифицированный живой штамм может обладать консенсусной комплементарной последовательностью ДНК, которая по меньшей мере на 95% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Наиболее предпочтительно, модифицированный живой штамм может также обладать консенсусной комплементарной последовательностью ДНК, которая по меньшей мере на 98% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Вакцина может дополнительно содержать адъювант. Вакцина может дополнительно содержать фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, стабилизатор, солюбилизатор или разбавитель. Вакцина может содержать дополнительный антиген от другого вируса, или от бактериального штамма, или от паразита.

В данном изобретении предложена вакцина для применения при профилактике репродуктивно-респираторного синдрома свиней. Поскольку PRRS вызван вирусом PRRS, в данном изобретении предложена вакцина для применения в профилактике инфекции, вызванной вирусом PRRS. В данном изобретении также предложена вакцина для применения у свиньи для снижения симптома инфекции, вызванной вирусом PRRS. Инфекция может проистекать от вирулентного штамма дикого типа вируса PRRS. Симптом может представлять собой, без ограничения, сниженный аппетит, сонливость, лихорадку, преждевременные роды, выкидыш, мертворождение, отек, бесплодие, кашель, затруднение дыхания, затрудненное или учащенное дыхание, покраснение участков кожи, всклокоченный шерстный покров, поражение легких, бессимптомное вирусовыделение и смертность. В данном изобретении предложена вакцина для применения при профилактике PRRS у свиней.

Предпочтительно, вакцина содержит модифицированный живой штамм PRRS, который обладает консенсусной комплементарной последовательностью ДНК, которая по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 98% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Наиболее предпочтительно, вакцина содержит модифицированный живой штамм PRRS, который представляет собой штамм DE 14-3073, штамм ES 13-49, штамм IT 14-32 или штамм PL 14-02. Вакцина может дополнительно содержать фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.

Вакцина может дополнительно содержать адъювант. Вакцина может содержать дополнительный антиген от другого вируса, или от бактериального штамма, или от паразита.

В данном изобретении предложен способ профилактики симптома репродуктивно-респираторного синдрома свиней, включающий введение указанной свинье иммуногенной композиции, содержащей модифицированный живой штамм вируса PRRS. В данном изобретении также предложен способ профилактики свиного репродуктивно-респираторного синдрома у свиньи, включающий введение указанной свинье иммуногенной композиции, содержащей модифицированный живой штамм вируса PRRS. Предпочтительно, модифицированный живой штамм вируса PRRS для применения в указанном способе будет обладать консенсусной комплементарной последовательностью ДНК, которая по меньшей мере на 90% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Более предпочтительно, модифицированный живой штамм вируса PRRS для применения в указанном способе будет обладать консенсусной комплементарной последовательностью ДНК, которая по меньшей мере на 95% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Наиболее предпочтительно, модифицированный живой штамм вируса PRRS для применения в указанном способе будет обладать консенсусной комплементарной последовательностью ДНК, которая по меньшей мере на 98% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Иммуногенная композиция может дополнительно содержать фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество. Иммуногенная композиция может содержать дополнительный антиген от другого вируса, или от бактерии, или от паразита.

В данном изобретении предложен способ профилактики свиного репродуктивно-респираторного синдрома у свиньи, включающий введение указанной свинье иммуногенной композиции, содержащей модифицированный живой штамм вируса свиного репродуктивно-респираторного синдрома свиней (PRRS), при этом указанный штамм вируса PRRS представляет собой штамм DE 14-3073, штамм ES 13-49, штамм IT 14-32 или штамм PL 14-02, и для применения в способе он может быть пересеян по меньшей мере 80 раз, или даже предпочтительно 85 раз, в клетках тканевой культуры. Иммуногенная композиция может дополнительно содержать фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество. Иммуногенная композиция может содержать дополнительный антиген от другого вируса, или от бактериального штамма, или от паразита.

В данном изобретении предложен способ профилактики симптома, вызванного вирусной инфекцией PRRS у свиньи, который включает введение указанной свинье иммуногенной композиции, содержащей модифицированный живой штамм вируса свиного репродуктивно-респираторного синдрома (PRRS), причем консенсусная комплементарная последовательность ДНК указанного штамма PRRS предпочтительно по меньшей мере на 90% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Более предпочтительно, модифицированный живой штамм для применения в указанном способе может также обладать консенсусной комплементарной последовательностью ДНК, которая по меньшей мере на 95% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Наиболее предпочтительно, модифицированный живой штамм для применения в указанном способе может также обладать консенсусной комплементарной последовательностью ДНК, которая по меньшей мере на 98% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Иммуногенная композиция может дополнительно содержать фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество. Иммуногенная композиция может также содержать дополнительный антиген от другого вируса, или от бактериального штамма, или от паразита.

В данном изобретении предложен способ ослабления симптома, вызванного вирусной инфекцией PRRS у свиньи, включающий введение указанной свинье иммуногенной композиции, содержащей модифицированный живой штамм вируса свиного репродуктивно-респираторного синдрома (PRRS), при этом указанный штамм вируса PRRS представляет собой штамм DE 14-3073, штамм ES 13-49, штамм IT 14-32 или штамм PL 14-02, и для применения в способе он может быть пересеян по меньшей мере 80 раз, или даже предпочтительно 85 раз, в клетках тканевой культуры. Иммуногенная композиция может дополнительно содержать фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество. Иммуногенная композиция может также содержать дополнительный антиген от другого вируса, или от бактериального штамма, или от паразита. Вирусная инфекция PRRS может представлять собой инфекцию, вызванную вирулентным гетер о логичным вирусом PRRS, подлежащим модификации, живым вирусным штаммом PRRS в иммуногенной композиции. Два вирусных штамма PRRS считаются гетер о логичными, если геномная консенсусная последовательность каждого вирусного штамма отражает различную филогенетическую группу. Два вирусных штамма PRRS считаются гетерологичными, если комплементарная консенсусная последовательность ДНК каждого вирусного штамма отражает различную филогенетическую группу.

В данном изобретении предложено применение модифицированного живого вирусного штамма PRRS в производстве лекарственного препарата для профилактики или снижения симптома PRRS, при этом модифицированный живой вирус PRRS содержит консенсусную комплементарную последовательность ДНК, которая по меньшей мере на 90% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Предпочтительно, модифицированный живой штамм также может обладать консенсусной комплементарной последовательностью ДНК, которая по меньшей мере на 95% идентична последовательности, выбранной из группы SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Более предпочтительно, модифицированный живой штамм может также обладать консенсусной комплементарной последовательностью ДНК, которая по меньшей мере на 98% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4.

В данном изобретении предложено применение модифицированного живого вирусного штамма PRRS, включающего штамм DE 14-3073, штамм ES 13-49, штамм IT 14-32 или штамм PL 14-02, в производстве лекарственного препарата для профилактики или ослабления симптома PRRS. Модифицированный живой штамм вируса PRRS необходимо пересевать по меньшей мере 80 раз, или предпочтительно 85 раз, в клетках тканевой культуры. Такой пересев в клетках тканевой культуры является эффективным для надлежащего ослабления модифицированного живого штамма вируса PRRS. Ослабленные штаммы вируса PRRS могут вызывать субклиническое, но не клиническое заболевание при введении этих штаммов свиньям. Модифицированные живые штаммы вируса PRRS, пересеваемые по меньшей мере 80 раз, обладают низкой вероятностью возвращения к вирулентности дикого типа.

В данном изобретении предложено применение иммуногенной композиции, содержащей модифицированный живой вирусный штамм PRRS, в производстве лекарственного препарата для профилактики вирусной инфекции PRRS, причем модифицированный живой вирусный штамм PRRS включает консенсусную комплементарную последовательность ДНК, которая по меньшей мере на 90% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Модифицированный живой штамм для такого применения может также обладать консенсусной комплементарной последовательностью ДНК, которая по меньшей мере на 95% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Модифицированный живой штамм для такого применения может также обладать консенсусной комплементарной последовательностью ДНК, которая по меньшей мере на 98% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4.

В данном изобретении предложено применение иммуногенной композиции, содержащей модифицированный живой вирусный штамм PRRS, в том числе штамм DE 14-3073, штамм ES 13-49, штамм IT 14-32 или штамм PL 14-02, в производстве лекарственного препарата для профилактики вирусной инфекции PRRS. Штамм вируса PRRS необходимо пересевать по меньшей мере 80 раз, или предпочтительно 85 раз, в клетках тканевой культуры. Такой пересев в клетках тканевой культуры является эффективным для надлежащего ослабления модифицированного живого штамма вируса PRRS. Ослабленные штаммы вируса PRRS могут вызывать субклиническое, но не клиническое заболевание при введении этих штаммов свиньям. Модифицированные живые штаммы вируса PRRS, пересеваемые по меньшей мере 80 раз, обладают низкой вероятностью возвращения к вирулентности дикого типа. Модифицированные живые штаммы вируса PRRS, пересеваемые 85 раз, обладают низкой вероятностью возвращения к вирулентности дикого типа.

В данном изобретении предложено применение иммуногенной композиции, содержащей модифицированный живой вирусный штамм PRRS, в производстве лекарственного препарата для защиты свиньи от вирусной инфекции PRRS, причем модифицированный живой вирусный штамм PRRS включает консенсусную комплементарную последовательность ДНК, которая по меньшей мере на 90% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Модифицированный живой штамм для такого применения может также обладать консенсусной комплементарной последовательностью ДНК, которая по меньшей мере на 95% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4. Модифицированный живой штамм для такого применения может также обладать консенсусной комплементарной последовательностью ДНК, которая по меньшей мере на 98% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №: 1, SEQ ID №: 2, SEQ ID №: 3 и SEQ ID №: 4.

В данном изобретении предложено применение иммуногенной композиции, содержащей модифицированный живой вирусный штамм PRRS, в том числе штамм DE 14-3073, штамм ES 13-49, штамм IT 14-32 или штамм PL 14-02, в производстве лекарственного препарата для защиты свиньи от вирусной инфекции PRRS. Штамм вируса PRRS необходимо пересевать по меньшей мере 80 раз, или предпочтительно 85 раз, в клетках тканевой культуры. Такой пересев в клетках тканевой культуры является эффективным для надлежащего ослабления модифицированного живого штамма вируса PRRS. Ослабленные штаммы вируса PRRS могут вызывать субклиническое, но не клиническое заболевание при введении этих штаммов свиньям. Модифицированные живые штаммы вируса PRRS, пересеваемые по меньшей мере 80 раз, обладают низкой вероятностью возвращения к вирулентности дикого типа. Модифицированные живые штаммы вируса PRRS, пересеваемые 85 раз, обладают низкой вероятностью возвращения к вирулентности дикого типа.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

Фиг. 1. Филогенетический анализ штамма DE 14-3073, штамма ES 13-49, штамма IT 14-32 или штамма PL 14-02 PRRSV-1 и коммерчески доступных вакцин и некоторых изолятов на основе нуклеотидных последовательностей ORF5, сконструированный методом объединения соседних пар.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

При использовании в последующем обсуждении, термины в единственном числе следует понимать как охватывающие один или более, если иное не указано.

При использовании в данном документе, термин «вирус» может означать или вид вируса, или взаимозаменяемо отдельную инфекционную единицу, которая может содержать нуклеиновые кислоты и белки. Отдельная инфекционная единица может также называться «вирусной частицей» или «вирионом», последние два термина являются синонимами.

При использовании в данном документе «штамм» или «изолят» вируса означает набор генетически гомологичных вирионов. Два вируса должны считаться «гомологичными», если эти вирусы соответствуют одной и той же филогенетической ветви. Два вируса должны считаться «гетерологичными», если эти вирусы соответствуют различным филогенетическим ветвям. Поскольку вирус PRRS обладает высокой частотой мутаций, понятно, что один штамм PRRS включает отдельные вирионы с родственными, но вариабельными генетическими последовательностями. Таким образом, субпопуляции штаммов существуют в рамках каждого штамма PRRS, и генетическая последовательность штамма PRRS представляет собой консенсусную последовательность, так что генетическая последовательность индивидуального члена штамма PRRS может не быть идентичной консенсусной последовательности для того штамма. «Консенсусная» последовательность представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты, в которой каждый остаток нуклеиновой кислоты в данном положении присутствует в >51% полинуклеотидов в штамме или изоляте вируса PRRS.

«Процент идентичности» можно определить путем расчета количества идентичных нуклеотидов или аминокислот в одних и тех же положениях в нуклеиновой кислоте или белке. Расчет процента идентичности включает определение оптимального выравнивания между двумя или более последовательностями. Выравнивание может принимать во внимание вставки и делеции (т.е. «гэпы») в каждой из тестируемых последовательностей, таких как, без ограничения, некодирующие области нуклеиновых кислот и усечения или удлинения полипептидных последовательностей. Компьютерные программы и алгоритмы, такие как средство поиска основного локального выравнивания (BLAST), можно использовать для определения процента идентичности. BLAST представляет собой один из многих источников, предоставляемых Национальным центром биотехнологической информации США. Поскольку генетический код является дегенеративным, и более одного кодона может кодировать данную аминокислоту, кодирующие области нуклеиновых кислот считаются идентичными, если нуклеиновые кислоты кодируют идентичные полипептиды. Таким образом, процент идентичности также может быть рассчитан на основании полипептида, кодируемого нуклеиновой кислотой. Процент идентичности можно рассчитать на основе консенсусных последовательностей полной длины или части геномной последовательности, такой как, например, без ограничения, отдельные открытые рамки считывания (ORF).

При использовании в данном документе, термин «модифицированный живой вирус» применяется к любой отдельной вирусной частице (т.е. «вирион») или к совокупности вирусных частиц, генетическая последовательность которых была изменена относительно генетической последовательности встречающегося в природе вируса дикого типа, при этом все еще вызывая защитный иммунитет против вируса дикого типа. Изменения включают, без ограничения, такие генетические мутации, как вставки и делеции нуклеотидов и транзиции и транс-версии, которые заменяют один нуклеотид на другой нуклеотид.

Изменения можно осуществлять путем адаптирования вируса дикого типа к репликациям в тканевой культуральной системе и продолжения пересева вируса в тканевой культуральной системе, таким образом вирус накапливает генетические мутации. Изменения можно также осуществлять с использованием молекулярных технологий. Ослабленные вирусы образуют подгруппу модифицированных живых вирусов.

При использовании в данном документе, термин «ослабленный» или «ослабление» означает, что способность вируса вызывать или усиливать клиническое заболевание была ослаблена или устранена. Ослабленный вирус все еще может инфицировать клетку-хозяина, или in vitro, или in vivo, и это инфицирование может приводить к субклиническим эффектам в организме хозяина, но это инфицирование не приводит к одному или более симптомам клинического заболевания.

В противоположность, при использовании в данном документе, «инактивированные» вирусы означают вирусы, которые больше не реплицируются в клетке-хозяине. Инактивированные вирусы считаются уничтоженными или мертвыми вирусами. Инактивацию можно осуществить с помощью различных способов, в том числе, но не ограничиваясь этим, химическое изменение вирусных белков, химические или физические изменения в структуре вириона или химические или физические изменения в вирусных нуклеиновых кислотах.

«Антиген» представляет собой любую молекулу, которую возможно специфически детектировать иммунной системой организма. Вирусный антиген, как правило, представляет собой вирусный белок, кодируемый вирусным геномом или полученный из продуктов вирусного генома. Наличие вирусных антигенов можно специфично обнаружить с помощью поверхностных антигенных рецепторов как Т-лимфоцитов-хозяев, так и В-лимфоцитов-хозяев и с помощью молекул антител, синтезированных клетками-хозяевами.

«Иммуногенность» относится к способности антигена вызывать иммунный ответ, причем указанный иммунный ответ включает как антиген-специфические ответы, так и неантигенспецифические ответы или врожденные иммунные ответы. «Защитный иммунитет» представляет собой иммунный ответ, который может ослаблять или предотвращать клинические симптомы, когда иммунизированное животное заражено или подвергается действию патогенного вирусного штамма. Как понятно специалисту в данной области техники, защитный иммунитет может снижаться со временем или в процессе взросления иммунизированных животных. Защитный иммунитет, при использовании в данном документе, должен быть эффективным в течение по меньшей мере четырех месяцев, но предпочтительно по меньшей мере шесть месяцев от последней даты иммунизации. Защитный иммунитет может быть вызван однократной дозой вакцины. Вторую или дополнительную дозу можно применять для усиления или продления защитного иммунного ответа. Например, повышение защитного иммунного ответа у свиноматок может приводить к повышению уровня полученных от матери антител у поросят.

В противоположность антигену «адъювант» представляет собой неспецифический стимулятор иммунного ответа. Адъювант может стимулировать врожденный иммунный ответ путем связывания и активации образраспознающего рецептора (PRR). Такие стимуляторы PRR могут представлять собой, например, вирусные или бактериальные нуклеиновые кислоты, липиды от бактерий или паразитов или бактериальные белки или токсины или любой искусственно созданный аналог таких молекул. Адъюванты также могут включать, без ограничения: неорганические соединения, которые объединяют антигены для облегчения распознавания В-лимфоцитов или поглощения фагоцитами, такие как квасцы, гидроксид алюминия, фосфат алюминия, гидроксофосфат кальция или сульфат аммония; масла; и поверхностно-активные вещества. Адъюванты также могут представлять собой медиаторы иммунной передачи сигнала хозяина, такие как, без ограничения, цитокины, лимфокины, хемокины, интерфероны, анафилатоксины, факторы роста, факторы дифференцировки и адгезивные молекулы.

При использовании в данном документе, «иммуногенная композиция» представляет собой композицию, которая вызывает иммунный ответ при введении животному. Иммуногенная композиция содержит по меньшей мере один антиген и по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.

Антиген может представлять собой целый вирус, бактерию или другой патоген, как живой, так и инактивированный. Антиген может также быть выделенной, очищенной или частично очищенной молекулой антигена от вируса, бактерии или другого патогена. Антиген может представлять полипептид, полисахарид, нуклеиновую кислоту или липид.

При использовании в данном документе, «вакцина» представляет собой иммуногенную композицию, которая предоставляет защиту от, устойчивость к, профилактику или ослабление симптома заболевания, при введении животному, при этом указанный симптом вызван патогенным организмом, например вирусом. Вакцина PRRS может включать, без ограничения, вирусные антигены или интактные вирионы, как живые, так и инактивированные, в композиции с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом.

При использовании в данном документе, термины «лечащий», «лечить» или «лечение» включают, без ограничения, сдерживание, замедление, остановку, ослабление, улучшение или обращение прогрессирования или тяжести существующего симптома, расстройства, патологического состояния или заболевания. Лечение можно применять или оказывать терапевтически.

При использовании в данном документе, термины «профилактический», «предотвращать» или «профилактика» включают без ограничения снижение, уменьшение или ослабление риска возникновения симптома, расстройства, патологического состояния или заболевания и защиту животного от симптома, расстройства, патологического состояния или заболевания. Лечение можно применять или оказывать профилактически.

При использовании в данном документе, «введение животному» включает, но не ограничивается этим, накожное, подкожное, внутримышечное, на слизистую, под слизистую, трансдермальное, пероральное или интраназальное введение. Введение может включать инъекцию или местное введение.

Термин «фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество» относится к тем веществам, которые обычно используют для получения ветеринарных и фармацевтических композиций и должно быть чистым и нетоксичным в используемых количествах. В некоторых вариантах осуществления изобретения фармацевтическая композиция может содержать вспомогательные вещества для модификации, поддержания или сохранения, например, рН, осмолярности, вязкости, чистоты, изотоничности, стерильности, стабильности, адсорбции или проникания композиции. Некоторые примеры приемлемых вспомогательных веществ приведены, например, в Remington's Pharmaceutical Sciences and the Handbook of Pharmaceutical Excipients, 18-е издание, (A.R. Genrmo, ed.), 1990, Mack Publishing Company и более поздние издания и Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Lloyd V. Allen, ed., Pharmaceutical Press, London, UK, 22-e издание, 2012 и включают разбавители, среды, носители, стабилизирующие агенты, консерванты, растворители, суспендирующие агенты, эмульгаторы, противомикробные агенты, антиоксиданты, буферы, хелатирующие агенты, комплексообразующие агенты, углеводы, белки, разбавляющие агенты и/или фармацевтические адъюванты. В некоторых вариантах осуществления изобретения основная среда или носитель в фармацевтической композиции может быть или водным, или неводным. Например, пригодная среда или носитель может представлять собой воду для инъекций, физиологический солевой раствор с другими веществами, обычно используемыми в композициях для парентерального введения.

При использовании в данном документе, термин «свиньи» относится к свиньям, любым животным из рода Sus семейства парнокопытных Suidae.

Следующие экспериментальные примеры являются иллюстрацией модифицированных живых вирусов PRRS. Следующие экспериментальные примеры также являются иллюстрацией иммуногенных композиций, содержащих модифицированные живые вирусы PRRS. Следующие экспериментальные примеры также являются иллюстрацией применения модифицированных живых вирусов PRRS для профилактики или ослабления симптомов PRRS у свиней. Понятно, что другие варианты осуществления и применения будут очевидны для специалистов в данной области техники, и что изобретение не ограничено этими конкретными иллюстративными или предпочтительными вариантами осуществления.

ПРИМЕР 1

Целью этого исследования являлось идентифицировать возможные штаммы для разработки вакцин. В общем 36 полевых изолята PRRS 1 типа оценивали относительно их потенциала в качестве вакцины. Ниже представлено получение предглавного вирусного посевного материала (Pre-MSVs) четырех штаммов вируса PRRS 1 типа (европейского) (PRRSV-1): DE 14-3073, ES 13-49, IT 14-32 и PL 14-02.

Исходное выделение штамма PRRSV-1 было выполнено с использованием сыворотки и тканей легкого, происходящих от стад свиней, у которых обнаружены PRRSV-положительные результаты теста в течение 2013-2014 в Европе. Эти стада свиней не были вакцинированы против PRRSV, но у них наблюдались клинические признаки, характерные для инфекций PRRSV, в том числе репродуктивная недостаточность у беременных первоопоросок и свиней (т.е. выкидыши на позднем сроке, ранний опорос, рождение слабых или мертвых поросят и/или повышение смертности до отъема) и/или замедление роста и респираторные проблемы у поросят.

Выделение вируса осуществляли в первичных культурах альвеолярных макрофагов свиньи (РАМ). Для того чтобы получить культуры РАМ в качестве доноров использовали поросят в возрасте 3 недель. Вкратце, легкие получали в асептических условиях после гуманного умерщвления поросят, а затем промывали фосфатно-солевым буферным раствором для извлечения клеток РАМ. Полученную клеточную суспензию центрифугировали при 800 х g в течение 15 минут при 4°С, и супернатант отбрасывали. Клеточный осадок ресуспендировали в среде Игла в модификации Дульбекко (DMEM) и дважды промывали с использованием DMEM в качестве разбавителя после центрифугирования в указанных выше условиях.

Клетки подсчитывали и высевали в различных держателях (т.е. колбы или планшеты с клеточными культурами различных размеров) в конечной концентрации 3×10⁶ клеток/мл в DMEM, дополненной 10% фетальной бычьей сыворотки (ФБС) и раствором антибиотиков и противогрибковых агентов (100 единиц/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина и 0,25 мкг/мл амфотерицина В). Клетки культивировали при 37°С в атмосфере с 5% СО₂.

Клинические образцы обрабатывали в соответствии с различными процедурами в зависимости от их природы. Таким образом, образцы сыворотки фильтровали через стерильный шприцевой фильтр с диаметром пор 0,22 мкм и хранили при -80°С до использования для выделения вируса. С другой стороны, образцы ткани, включая гланды и легкие, гомогенизировали 1:10 с использованием DMEM в качестве разбавителя. Гомогенаты осветляли путем центрифугирования при 2500 х g в течение 15 минут, а супернатанты фильтровали через стерильный шприцевой фильтр с размером пор 0,22 мкм и хранили при -80°С до использования для выделения вируса.

Для инфицирования культур РАМ среды удаляли, а клинические образцы (т.е. обработанные образцы сыворотки или обработанные образцы ткани) добавляли в различных количествах в зависимости от используемого держателя. Через 1,5 часа при 37°С для адсорбции культуры промывали и добавляли свежую DMEM, дополненную для поддержания жизнеспособности клеток. За культурами наблюдали один раз в сутки относительно цитопатического эффекта (СРЕ). Когда наблюдали СРЕ, культуры собирали. После 3 циклов замораживания и оттаивания клеточный дебрис удаляли путем центрифугирования при 2500 х g при 4°С в течение 15 мин. и надосадочную жидкость замораживали и хранили при -80°С. Наличие вируса свиного репродуктивно-респираторного синдрома (PRRSV) в культуре подтверждали полимеразной цепной реакцией с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР).

Когда не наблюдалось СРЕ, культуры считали отрицательными, и исходные клинические образцы (т.е. образцы сыворотки или образцы ткани) использовали в биоанализе и инокулировали поросятам в возрасте 3 недель, находящимся в изоляции. С этой целью клинические образцы фильтровали и инъецировали поросятам внутримышечным путем. Через одну неделю у поросят, подвергнутых воздействию, отбирали образцы крови для подтверждения виремии с помощью ОТ-ПЦР. Поросят, у которых была подтверждена виремия, умерщвляли, и при вскрытии забирали образцы крови, гланд и легких и использовали для второй попытки выделения вируса в культурах РАМ в соответствии со способом, описанным ранее.

Рост изолятов PRRSV в клеточной линии MARC-145 был испробован только для тех изолятов, которые хорошо росли в РАМ и для которых может быть получен исходный посевной материал. С этой целью клетки MARC-145 высевали в колбы для клеточных культур вместимостью 25 см² в концентрации 5 х 10⁵ клеток/колба и выдерживали при 37°С в атмосфере с 5% СО₂ в DMEM, дополненной 10% ФБС и раствором антибиотиков и противогрибковых агентов (100 единиц/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина и 0,25 мкг/мл амфотерицина В). Предконфлюэнтные культуры инфицировали супернатантами положительных культур РАМ в соответствии с тем же протоколом, описанным для инфицирования культур РАМ. После адсорбции клетки промывали и культивировали в DMEM, дополненной 5% ФБС и ранее указанным раствором антибиотиков и противогрибковых агентов.

После исходного выделения вирусы амплифицировали и для каждого изолята в культурах РАМ был получен первичный исходный вирусный материал (в объеме по меньшей мере 100 мл). С этой целью клетки РАМ культивировали в течение 24 ч при 37°С в атмосфере с 5% СО₂ во флаконах вместимостью 75 см² в концентрации 3×10⁶ клеток/мл в DMEM, дополненной 10% ФБС и раствором антибиотиков и противогрибковых агентов, описанных ранее. Затем среду отбрасывали, клетки промывали свежей DMEM и добавляли вирусный инокулят. Через 1,5 часа при 37°С для адсорбции культуры промывали и добавляли свежую DMEM, дополненную для поддержания жизнеспособности клеток. За культурами наблюдали один раз в сутки относительно СРЕ. Когда большая часть клеток в культуре была уничтожена, культуры собирали. Через 3 цикла замораживания и оттаивания, клеточный дебрис удаляли путем центрифугирования при 2500 х g при 4°С в течение 15 мин., а супернатант, содержащий вирус, замораживали и хранили при -80°С. Титры вируса рассчитывали в соответствии с методом Рида и Менча (1938) и выражали как log TCID₅₀/МЛ. Исходный вирусный материал хранили при -80°С и использовали для различных задач исследования.

Ту же методику использовали для клеточных культур MARC-145. Клеточные культуры MARC-145 инокулировали, как описано ранее для исходного выделения, и поддерживали при 37°С в атмосфере 5% СО₂. Когда СРЕ был очевиден (т.е. поражение приблизительно 70-80% монослоя) или через 5 дней культивирования, если СРЕ не наблюдается, культуры подвергают трем циклам замораживания и оттаивания, осветляют центрифугированием при 2500 х g в течение 15 минут, а супернатанты используют для инокуляции свежих клеточных культур MARC-145. Оставшийся супернатант каждого пассажа хранили при -80°С. В общем 60 пассажей в клеточной линии MARC-145 было осуществлено для каждого изолята PRRSV.

В пассажи 30 и 50 исходный вирусный материал был клонирован с помощью метода бляшкообразования в соответствии со стандартной методологией. Вкратце, 6-луночные планшеты, предварительно засеянные MARC-145, инокулировали, когда культуры были предконфлюэнтными, последовательными разбавлениями каждого исходного вирусного материала от 10¹ до 10⁶. Через 1,5 часа адсорбции инокулят удаляли из каждой лунки, а клетки покрывали свежей средой DMEM, дополненной 5% ФБС, вышеуказанным раствором антибиотиков и противогрибковых агентов и 1% легкоплавкой агарозы. Через 2-4 дня культивирования в зависимости от изолята, под фазово-контрастным микроскопом выбирали отдельные бляшки и собирали их. По меньшей мере пять бляшек выбирали для каждого вируса в каждый цикл очистки, основанный на их полном выделении в монослой, чтобы гарантировать клональную природу отобранных вирусов. Отобранные бляшки использовали в качестве инокулята для следующего цикла очистки. Методику повторяли три раза, чтобы обеспечить то, что полученное вирусное потомство получено от одного единственного вируса.

ПРИМЕР 2

Целью этого исследования являлось дополнительно охарактеризовать изоляты PRRS-1. Часть ORF1, кодирующую nsp2, и ORF 2-7 амплифицировали с помощью ОТ-ПЦР с использованием набора ранее обозначенных праймеров. С этой целью была получена общая РНК от всех исходных вирусных материалов с использованием мини-набора для вирусной РНК QIAMP® (Qiagen, США) в соответствии с инструкциями производителя. Для полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) в качестве темплата использовали 15 мкл общей РНК. Реакцию осуществляли с использованием коммерческого одностадийного набора для ОТ-ПЦР (Superscript III OneStep RT-PCR PLATINUM TAQHIFI®, mvitrogen, США) в соответствии с инструкциями производителя. Продукты ОТ-ПЦР очищали с использованием коммерческого набора (набор для очистки в геле QIAQUICK^®, Qiagen, США) в соответствии с инструкциями производителя. Отдельные последовательности обеих нитей ДНК каждого продукта ПЦР определяли с использованием той же пары праймеров, используемых для ОТ-ПЦР, амплифицируя образцы путем ассиметричной ПЦР с флуоресцентными концевыми группами и анализируя продукты путем электрофореза на генетическом анализаторе ABI prism 310 (Applied Biosystems, США). По меньшей мере два различных продукта ОТ-ПЦР секвенировали для проверки того, что во время амплификации ДНК не произошло ошибок, и что полученные последовательности были корректными. Последовательности корректировали вручную, устраняли ошибки и выравнивали с использованием программного обеспечения Clustal Omega. Полученные последовательности сравнивали с прототипом генотипа 1 PRRSY штаммом Лелистада вируса и вакцинными штаммами, которые составляют основу вакцин PORCILIS^® PRRS (Порцилис, MSD Animal Health) (штамм DV), UNISTRAIN^® PRRS (Юнистрейн, Laboratories Hipra) (штаммм VP-046 BIS) и INGELVAC PRRS FLEX^® EU (Ингельвак, Boehringer Ingelheim) (штамм 94881). Дополнительно, их сравнивали с прототипом генотипа 2 штаммом VR-2332, который представляет собой штамм вакцины INGELVAC PRRS^® MLV (Ингельвак, Boehringer Ingelheim), также коммерчески доступной в Европе.

Рассчитывали нуклеотидное подобие среди полученных изолятов PRRSV, а также подобие между каждым полевым штаммом и вакцинными штаммами, доступными в момент выделения, с целью подтвердить, что изоляты не связаны друг с другом, и что они не являлись производными коммерчески доступных вакцин в момент забора клинического образца. Дополнительно, строили филогенетическое дерево с использованием метода объединения соседних пар и включая VR-2332, прототип американского генотипа, в качестве внешней группы для определения субтипа, к которому принадлежали европейские изоляты. Для оценки статистической надежности древовидных диаграмм рассчитывали бутстреп-величины (случайное число посевов: 123; 1000 повторений). Все филогенетические анализы выполняли с использованием программного обеспечения MEGA 5.0.

PRRSV-1 далее ослабляли путем пересева 10 раз (до Р70) в клетках MARC-145 в среде для роста OPTI-MEM^® I (кат. №31985, Life Technologies), дополненной 2% фетальной бычьей сыворотки (ФБС; кат. №12003С и 12007С производства Sigma и кат. №04-4000DJ производства Gibco) и 50 мкг гентамицина/мл (кат. №15750, Life Technologies), и путем дополнительного пересева еще 15 раз (до Р85) в той же среде для роста, дополненной 2% ФБС без гентамицина. Идентичность 85-ого пассажа (Р85) PRRSV-1 была подтверждена путем непрямого иммунофлуоресцентного анализа (ИФА) с использованием PRRSV-специфичного моноклонального антитела, и Р85 PRRSV-1 считали предисходными посевными материалами вируса (пред-MSV).

Следующую методику использовали для определения титра PRRSV-1. Клетки MARC-145 высевали в 96-луночные планшеты при плотности от 0,75 до 1,5×10⁴ клеток в 100 мкл среды для роста (среда OPTI-MEM^® I, дополненная 5% ФБС и 50 мкг/мл гентамицина). Клетки инкубировали в инкубаторе при 37±2°С и 5±1% СО₂ в течение 48-72 часов до тех пор, пока клетки были более чем на 95% конфлюэнтными. В день титрования все среды удаляли из 96-луночного планшета и заменяли 100 мкл свежей среды для роста.

Десятикратные последовательные разбавления PRRSV-1 готовили с использованием разбавителя (среда OPTI-MEM^® I, 50 мкг/мл гентамицина) и переносили в соответствующие лунки на планшетах, подготовленных как указано выше, вместе с отрицательным контролем, состоящим только из разбавителя, и положительным контролем с известным титром. Титрационные планшеты инкубировали в инкубаторе при 37±2°С с 5±1% СО₂ в течение 4 дней. В конце инкубационного периода для каждого планшета регистрировали наличие индуцированного вирусом цитопатического эффекта (СРЕ) в каждом образце с использованием инвертированного микроскопа. Дозу инфицирования 50% тканевой культуры (TCID₅₀) рассчитывали с использованием метода Рида-Менча, и титр регистрировали как log₁₀ TCID₅₀/МЛ. Диапазон титра Р85 PRRSV-1 составлял 8,1-8,5 log₁₀ TCID₅₀/МЛ.

ПРИМЕР 3

Целью этого исследования было определить последовательности пред-MSV. Для определения геномной последовательности каждого вирусного изолята, вирусы, выращенные в клетках MARC-145, концентрировали и очищали путем ультрацентрифугирования над сахарозной подушкой и экстрагировали РНК с использованием набора со спин-колонкой для вирусов MINELUTE (Qiagen), TRIZOL LS (Invitrogen).

Последовательность полного генома определяли за счет нескольких циклов секвенирования следующего поколения (NGS) с использованием платформы ILLUMINA^® MISEQ^® и/или системы NEXTSEQ500 в Bioreliance (Роквилл, Мэриленд) и ACGT (Уилинг, Иллинойс). Переменные и неопределенные последовательности и гэпы фиксировали и подтверждали путем дидезокси метода секвенирования по Сенгеру, и получали консенсусные последовательности полного генома. Нуклеотидные последовательности выравнивали и сравнивали с выбранным известным PRRSV-1 и коммерческими вакцинными вирусами с использованием устройства для выравнивания нуклеотидов построением филогенетического дерева методом ближайших соседей с помощью программного обеспечения Geneious 10.1.3. (Фигура 1).

Штаммы PRRSV-1 MLV, обозначенные как пред-MSV, депонированы на условиях, которые будут обеспечивать, что доступ к культурам в течение рассмотрения данной патентной заявки специалистом, определенным комиссаром по патентам и торговым маркам, будет предоставляться в соответствии с §1.14, 37 разделом C.F.R. и §122, 35 разделом U.S.С.Депонированный образец будет доступен, как того требуют иностранные патентные законы в странах, в которых копии рассматриваемой заявки или ее результаты зарегистрированы. Однако, необходимо понимать, что доступность депонируемого образца не устанавливает право на практическое осуществление заявленного изобретения в отступление от патентных прав, предоставляемых правительством. Рассматриваемый депонируемый образец культуры будет храниться и станет доступным общественности в соответствии с условиями Будапештского договора о международном признании депонирования микроорганизмов, т.е. он будет храниться с уходом, необходимым для поддержания его жизнеспособности и незагрязненности в течение периода по меньшей мере пять лет после наименее давнего запроса о предоставлении депонируемого образца и в любом случае в течение периода по меньшей мере 30 (тридцать) лет от даты депонирования или в течение обеспечиваемого юридически периода существования любого патента, который может обращаться к раскрытию депонированной культуры. Лицо, осуществляющее депонирование, признает обязанность заменять депонируемый образец, если хранилище будет неспособно предоставлять образец по запросу вследствие состояния депонируемого образца. Все ограничения по доступности рассматриваемой депонируемой культуры общественности будут безоговорочно сняты после отчуждения патента, раскрывающего его. Депонированный образец пред-MSV PRRSV-1 поступил в постоянную коллекцию в патентное хранилище лаборатории Американской коллекции типовых культур, расположенной по адресу 10801, Университетский бульвар, Манассас, Вирджиния, 20110-2209, США, 7 марта 2019 г. в соответствии с условиями Будапештского договора, при этом хранилищем штаммам были присвоены номера доступа РТА-125490 (DE 14-3073); РТА-125489 (ES 13-49); РТА-125488 (IT 14-32) РТА-125487 (PL 14-02).

Безопасность и эффективность иммуногенных композиций и вакцин, содержащих модифицированные живые вирусы свиного репродуктивно-респираторного синдрома, можно определить способами, хорошо известными в данной области техники, включая дозозафисимый эффект, возникновение иммунитета, длительность иммунитета и выделение и передача вируса репродуктивно-респираторного синдрома свиней. Отсутствие возвращения вирулентности любого пред-MSV можно легко определить.

Консенсусные последовательности кДНК для четырех вирусных изолятов PRRS в пассаже 85 (Р85) депонировали в базу данных генетических последовательностей GenBank, аннотированную коллекцию всех общедоступных последовательностей нуклеиновых кислот. Базу данных GenBank поддерживает Национальный центр биотехнологической информации (NCBI), подразделение Национальных институтов здравоохранения США (NIH). GenBank представляет собой часть международного кооперирования баз данных нуклеотидных последовательностей.

Консенсусной последовательности кДНК штамма PRRS DE14-3073 в Р85 был присвоен номер доступа в GenBank МК024324 (SEQ. ID. №: 1). Консенсусная последовательность кДНК, обозначенная SEQ. ID. №: 1, представляет собой:

Консенсусной последовательности кДНК штамма PRRS ESI 3-49 в Р85 был присвоен номер доступа в GenBank MK024325 (SEQ. ID. №: 2). Консенсусная последовательность кДНК, обозначенная SEQ. ID. №: 2, представляет собой:

Консенсусной последовательности кДНК штамма PRRS IT 14-32 в Р85 был присвоен номер доступа в GenBank MK024326 (SEQ. ID. №3). Консенсусная последовательность кДНК, обозначенная SEQ. ID. №: 3, представляет собой:

Консенсусной последовательности кДНК штамма PRRS PL 14-02 в Р85 был присвоен номер доступа в GenBank MK024327 (SEQ. ID. №: 4). Консенсусная последовательность кДНК, обозначенная SEQ. ID. №: 4, представляет собой:

Специалист в данной области техники понимает, что полиаденозиновые хвосты, если присутствуют, каждой из геномных консенсусных последовательностей могут варьироваться по длине относительно представленных выше последовательностей.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> ЭЛАНКО ЮэС ИНК.

ЭЛАНКО ЮК АХ ЛИМИТЕД

<120> ВАКЦИННЫЙ ВИРУС СВИНОГО РЕПРОДУКТИВНО-РЕСПИРАТОРНОГО СИНДРОМА

<130> P3758PC00

<150> EP19382734.2

<151> 2019-08-29

<160> 4

<170> PatentIn версии 3.5

<210> 1

<211> 15081

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> кДНК от вируса свиного репродуктивно-респираторного синдрома

<400> 1

atgatgtgta gggtattttc cctacgtgcg caacactttt tgtgtttgtg tgcctcggag

60

gcgtgggtat agccccgccc cacctcttgg ccctgttcta gcccaacagg tatccttctc

120

tctcggggcg agtgcgccgc ctgctgcttc cttgcagcgg gaaggacctc ccgagtactt

180

ccggagagcg cctgctttac gggatctcca ccctttaacc atgtctggga cgttctcccg

240

gtgcatgtgc accccggcgg ctcgggtgtt ttggaacgcc ggccaagtct tttgcacacg

300

gtgtctcagt gcacggtctc ttctctctcc agagcttcag gacctcagtt ttggtgcact

360

cggcttgttt tacaagccta aagataagct tcattggaaa gttcctgttg gtatacctca

420

ggtagagtgc actccatccg ggtgctgttg gctttcagct attttccctc tggcacgtat

480

gacctccggc aaccacaact ttctccagag acttgtgaag gttgctgacg ttttgtaccg

540

tgatggttgc ttggcgcccc gacatcttcg tgaacttcaa gtttacgagc gcggctgcag

600

ttggtacccg attacgggac ccgtgcccgg gatgggtctg tttgcgaatt ccatgcacgt

660

atccgaccag cctttccctg gtgccaccca tgtgctgact aactcgcctc tgcctcaaca

720

ggcttgtcgg cagccttttt gcccatttga ggaggctcat tctggtttgt tcaagtggaa

780

taaattcgtg atttttatag acccccccct taacggtaga cgccgcatga tgtgggcacc

840

tgaatccgac gattcagcca acttggaggt gttgccgcct gaattagaac gtcaagttga

900

gattctcact cggagtttcc ctgctcacca ccctgtcaac ctcagcgact gggagctttc

960

cgactcccct gaacacggtt tttccttcag cacttatcat tcttctggtt acgttgccaa

1020

aaaccctgac gtgtttgata gcaagtgctg gctttcctgt tttctgagct tgtcgcctga

1080

ggtgtggcat cgtgaggagc tcttggctag cgcatttggt tatcaaacca agtggggcgt

1140

gcatggcaaa tacctccaac gcaggcttca aattaatggc atccgtgctg tggttgatcc

1200

agacggcccc attcacgttg aagcgctgtc ttgcccccag tcttggatca ggcatttgac

1260

tctggacgat gaagtaaccc cagggttcgt tcgcctgacg tctcttcgca tcgtaccgaa

1320

cacagaacct accacctttc gcgtctttcg ttttggggcg cataagtggt atggtgccgc

1380

cggtaaacga gctcgcgcaa agcgtgctgc caagagcgag aaggactcgg ttactgcatc

1440

caaggctgtc caaccaactc ttgcctgtaa aaacaccacc tattccccac caacggacgg

1500

gtcttgtggt tggcatgttc tcgccgccat aatgaaccgg atgttaaatg gtgacttcac

1560

gtccccttta accccgtaca acagaccaga agatgattgg gcatcggatt atgatcttgc

1620

tcaggcgatt caatgtctac aattacctgc taccatagtc cggaatcgcg cctgtcctaa

1680

tgctaaatac ctcataaaac tcaacggagt tcactgggag gtagaggcaa ggtctgggtt

1740

tgcccctcgc tcccttcccc gcgagtgtgt ggtcggtgtt tgctccgaag gctgtgtcgc

1800

aacaccctac ccagagaatg ggctgcctaa gcgggcactt gaggccttag cgtctgctta

1860

cagattgcct tccgattgcg tcagttctgg cattgctgac tttcttgctg acccccctcg

1920

ggagttttgg actcttgaca aaatgctgac ttccccatca ccggagcaat ccggcttttc

1980

tagtctgtac agattgctat tagaggttgt cccgcaaaaa tgcggtgcca cggagggggc

2040

tttcatctat gccgttgaaa ggatgttgaa ggattgtcca agttccaagc aggccatggc

2100

tctcctagca aaagtcaaag tcccatcctc aaaggcctcg tctgtgacct tggatgagtg

2160

ttttcctacg gacgttccgg ccgacttcaa gccagcgtct catgagaagc ctcaaagttc

2220

cggtactgtt gttgtcctgt gttcaccggg agcagaagag tcagaaaaag tgaccctaga

2280

agaagttcgg gagggtggct ataaaaccat ctgccctgca ccccttactg agggtcctaa

2340

tgatgaacag gcacaagtag ctgtcggcga gcagctgagg ctcagcggtt gtggtttggc

2400

agccgggaac gctccagccc cggctggtcc aattgacaca gtaagcagag atcttcccct

2460

tccggacttc atgaaagaaa acatgtccaa taattgggag gatggaccat tggatttgtc

2520

ccaatcggca tcagctgtca tgacaacccc tgtaggagag cacacatcca aaaatccagg

2580

ttctggtatc ggtgacttcc ctgttactgt tcgaggcttt acctcaacgg ggctcgtact

2640

tcgtcacgtt gagcactgcg gtacggagtt gggcgacgac agtccgcctt tggatttgtc

2700

tgattcgcag acctcgaacc ggcctctgga tctatcccta gctgcttggc cagtgaagac

2760

caccgcatct gaccctggct gggttcatgg tagacgcgaa cctgtctttg taaagcctcg

2820

gaatgttttc tctgatggcg attcagttct tcagttcggg ggacctcctg aatctagctc

2880

tgtcaccgag tttgaccgga caaaagatac tccggcggtc gacacccttg tcaacttgac

2940

gactccaaac gaggcccccc ctgtaaccga ttctcgtgaa cttgccgaac tcaaacgccc

3000

gcgtttttcc gcacaagccc taattgaccg aggcggtcca ctcgctgatc tccatgcaga

3060

gataaaaaat cgggtatacg aacaatgcct ccaagcttgt gagcccggta gtcgtgcgac

3120

cccagccacc aagaagtggc ttgacaaaat gtgggatagg gtggacatga gaacttggcg

3180

ctgcacctcg cagttccaag ctggtcgtat tcttgcatcc ctcagtttcc ttcctgacat

3240

gatccgagac acaccacctc ctgtacccag gaagagccgg gttagtgaca gtgtcggtct

3300

gaagcaacta gtgactcagt gggataagaa actgagtgtg gccccccgag aagggcttat

3360

tgagtcagtg ctcgaccaaa ccgttccgcc gcccacggat gtccagcaag gagataccac

3420

ccctccccat gaaccacccg atgcgccgga tttgcctggt cgagtgggta caagcagagg

3480

ttggaagggt cttacgcttt ccggcgcccg cctcgcgggg tctgtcagcc agcgcctcat

3540

ggcatgggtt tttgaagttt actcccatct cccagctttt atgctcacac ttttctcgcc

3600

gcggggctct atggcttcag gtgattggct ttttgcaggt attgttctac ttgctctctt

3660

gctctgtcgc tcttacccaa tactcgggtg cctaccctta ttgggtgtct tttctggttc

3720

tctgcggcgc gttcgtctgg gcgtatttgg ctcttggatg gcttttgctg tatttttatt

3780

cacgactcca tccaacccag tcggttcttc ttgtgagcac gattcgccgg aatgtcacgc

3840

tgagcttctg gctcttgagc agcgccaact ttgggaacct gtgcggggcc ttgtggtggg

3900

cccctcaggt ctcctatgcg tcattcttgg taggttactc ggtgggtcac gttatctctg

3960

gcttgctttc ttacgtctat gcttgcttgc agatttggcc ttttctcttg tttatgtggt

4020

gtcccagggg cgttgccaca agtgctgggg aaagtgtata aggacagccc ccacggaggt

4080

ggctctcaat gtgttccctt tttcgcgcgc cacccgttcc tctcttgtgt ccttgtgtga

4140

tcgattccaa acaccaaaag gggttgatcc ggtgttcttg gcaacaggtt ggcgcgggtg

4200

ctggtgtggt gagagcccca ttcatcaatc acaccaaaaa cccatagctt acgccaactt

4260

ggatgaaaag aagatatctg cccaaacggt agtcgctgtt ccatacgatc ctaaccaagc

4320

tatcaaatgc ctgaaagttt tgcaggcggg gggggccatt gtggaccaac caacacctga

4380

ggtcgttcgt gtatccgaga tccccttttc agctccgttt ttcccgaaag ttccggtcaa

4440

cccagactgc aaggtagtgg tagattcgga cacttttgtg gctgcggttc gttgcggtta

4500

ctcaacaaca caactggttt tgggtcgggg caattttgcc aagttgaatc aggccccttc

4560

taaggcctct gcttacacaa aaacgactgg tggggcctct tatacttttg ctgtagttca

4620

agtgtctgtg tggactctta tccacttcat tctcggcctt tggttgatgt cgcctcaagt

4680

ttgtggtcga ggaacttccg acccatggtg ttcagatcct ttttcgtacc ccacttatgg

4740

cccaggcgtt gtgtgctcgt ctcaactttg tgtatccgcc gatggtgtta ccctaccgtt

4800

gttttcggcc gtggcccgac tttctggcag ggaggtgggg atttttattt tagtgtttgt

4860

ctccttggct gctttagccc atcgctgggc ccttaaggct gacatgttag taatcttttt

4920

agcgttttgt gcttacgcat ggcccatgag ttcctggcta atttgccttt tcccaacact

4980

cttaaggtgg atcaccctcc accctctcac catactttgg gtgcattcat tcttagtgtt

5040

ctgcctgccg gctgccggcg ttctttcatt agggataact ggtcttctct gggcagttgg

5100

acgctttacc caagttgccg gacttatcac accttatgac atccaccaat atacttctgg

5160

gccgcgtggt gcaactgctg tggccacggc tccagagggc acttacatgg ccgccgtccg

5220

gagagctgct ctaactgggc gaactctaat cttcaccccg tctgcggtcg ggtcccttct

5280

cgaaggtgct ttcaggactc ataaaccttg cctcaacacc gtgaatgttg tgggttcttc

5340

cctcggttct ggaggagtct tcaccattga tggcaggaaa actgtcgtca ctgccaccca

5400

cgtgctgaat ggcgacacag ctagagttac cggtgactcc tacaaccgca tgctcacttt

5460

caagaccaat ggtgattatg cctggtccca tgctgatgac tggcagggtg ctgccccagt

5520

ggttaagatt acaaaaggat accgcggtcg tgcttattgg caaacatcaa ccggtgtcga

5580

gcccggtatc attggagagg ggttcgcctt ctgttttacc agctgcggtg actcggggtc

5640

gcctgttata tctgaagctg gtgaccttat cggcatccat actggttcaa acaaacttgg

5700

ttcaggtctt gtgacaaccc ctgaagggga gacctgctca attaaggaaa ctagactttc

5760

tgacctctct aagtattttg cgggtccgtg cgtccctctt ggggacatta agttaagccc

5820

tgccatcatt cctgacatga catctgttcc aagcgacttg gcatcgcttc ttgcttctgt

5880

ccctgtcatg gagggcggtc tctcgactgt tcaacttttg tgtgtctttt ttcttctctg

5940

gcgcatgatg ggtcatgctt ggacacccat cgttgctgtg ggcttctttt tgctgaatga

6000

aatccttcca gcagttttag tccgagccgt gttctctttt gcactctttg tgcttgcatg

6060

ggccaccccc tggtctgcac aggtgcttat gatcagactt cttacagcgt cccttaaccg

6120

gaacaagtct tctctggcgt tttacgcatt cgggggtgtc gtcggcctgg ctgctgaaat

6180

cggaactttt gctggtaaac tacctgaatt gtctcaagct ctttcgacat actgcttttt

6240

gccaagattt cttgctgtat ctagttgtgt tcccatcatc atcatcggtg ggcttcatgt

6300

tctcggcgtg attttgtggc tattcaaata ccggtacctt catgacgtgc tggttggtga

6360

tgggagtttt tcaaaagcct tcttcctacg gtattttgct gagggcaatc tcagaaaggg

6420

tgtttcacaa tcctgtggca tgagtaacga gtccctaacg gctgctttgg cctgcaagtt

6480

gtcgcaagct gaccttgaat ttttatccag cttaacgaac ttcaagtgct ttgtgtctgc

6540

ctctaacatg aaaaatgctg ctggccagta cattgaagca gcgtatgcca aggccctgcg

6600

ccaagagttg gcctctctag ttcaggttga caaaatgaaa ggagttttgg ccaagcttga

6660

ggcctttgct gaaacagcca ccccgtctct agacacgggt gatgtgattg ttctgcttgg

6720

gcaacaccct cacggatccg tcctcgacat aaatgtgggg actgagagga aaactgtgtc

6780

cgtgcaagag acccggagtt tgggcggctc caggtttagt gtttgtactg ttgtgtccaa

6840

tacccctgtg gatgccttaa ccgacatccc acttcaaaca ccaacccccc tttttgagaa

6900

tggtccacgc catcgtagcg acgaagacga tcttaaggtt gagaggaaaa agaaacactg

6960

tgtgtccctc ggcttccaca acatcaacgg taaggtttac tgtaaaattt gggacaagtc

7020

caccggtgat accttttaca cagatgattc ccggtatact caagaccatg tttttcagga

7080

caggtcagcc gactacaggg acagggacta tgaaggtgtg caagccaccc ccccacaggg

7140

atttgatcca aaatctgaaa ccccggttgg cactgtcgtg atcggcggta tcacgtataa

7200

caggtatctg gtaaaaggta gagaggttct ggttctcaag cccgacaact gtcttgaagc

7260

cgccaggttg tctcttgagc aagctctcgc tgggatgggc caaacttgtg acctcacggc

7320

cgctgaagtg gaaaagctaa agcgtatcat cagtcaactt caaggcttga ccactgaaca

7380

agctttaaac tgttagccgc cagcggcttg acccgctgtg gccgcggcgg cttagttgtg

7440

actgaaacgg cggtgaaaat cataaaatac cacaacagaa ctttcacctt aggcccttta

7500

gacttgaaag tcacatccga ggtggaggtg aagaaatcaa ctgagcaagg ccacgctgtt

7560

gtggcaaact tatgttccgg tgttgtcttg atgagacctc acccaccgtc ccttgttgac

7620

gttctcttga aacccggact tgacacgaca cctggtattc aaccggggca tggggccggg

7680

aatatgggcg tggacggttc tatttgggat tttgaaaccg cacctacaaa ggcggaactt

7740

gagttgtcca agcaaataat tcaagcatgt gaagtcaggc gcggggacgc cccgaacctc

7800

caactccctt ataagctcta ccctgttaga ggggatcctg aacggcataa gggtcgcctt

7860

atcaatacca ggttcggaga tttgccctat aaaactcctc aggacaccaa gtccgcgatc

7920

catgcggctt gttgcttgca ccccaatgga gcccccgtgt ctgatggcaa atccacgcta

7980

ggcaccactc ttcaacatgg ttttgagctt tatgtcccca ctgtgcccta tagtgtcatg

8040

gagtaccttg attcacgccc tgacacccct ctcatgctca gcaaacatgg tacttccaag

8100

gctgctgcag aagatctcca aaaatatgat ctgtccaccc aaggatttgt cctgcctggg

8160

gttctgcgcc tagtgcgcaa attcatcttc ggccacatag gtaaggcgcc gccattgttc

8220

cttccatcaa cctatcccgc taagaattct atggcaggga tcaacggtca gaggtttcca

8280

acaaaggatg tccagagcat acctgaaatt gatgagatgt gtgcccgtgc cgtcaaggag

8340

aattggcaaa ctgtgacacc ttgtaccctc aagaagcagt actgttccaa gcctaaaacc

8400

aggaccatcc tgggcaccaa caatttcatt gccctggctc acagatcagc actcagcggc

8460

gtcacccagg catttatgaa gaaggcttgg gagtccccaa ttgctttggg aaaaaataaa

8520

ttcaaagagc tgcattgcac ggttgccggc aggtgccttg aggccgatct ggcctcctgt

8580

gatcgcagca cccccgccat tgtaagatgg tttactgcca acctcctgta tgaacttgca

8640

ggatgtgaag accatttgcc cagctatgtg cttaactgct gtcatgacct cgtggcaaca

8700

caagatggcg ccttcacgaa acgtggtggc ctgtcgtccg gggatcccgt cactagtgtg

8760

tccaacaccg tgtattcact agtgatttat gcccagcaca tggtattgtc agccctgaaa

8820

atgggccacg agattggtct caagttcctc gaggaacagc ttagattcga ggaccttctt

8880

gaaattcagc ccttgctggt atactctgac gaccttgtct tgtatgctga aaaacccact

8940

tttcccaatt accattggtg ggttgaacat ctcgacttga tgttgggttt caagacggac

9000

ccgaagaaaa ctattataac agacaagccc agcttccttg gctgcagaat tgaggcaggg

9060

cgacaactag tccccaatcg tgaccgcatt ctcgccgctc ttgcatacca catgaaggca

9120

cagaacgttt cagagtatta tgcatctgct gctgcagttc ttatggattc atgtgcctgc

9180

atcgaccatg accctgagtg gtatgaggac ctcatctgcg gcatcgccag gtgcgctcgt

9240

caagatggct atagttttcc cggcccggca ttttttatgt ccatgtggga gagactgaaa

9300

agccacaatg agggaaagaa attccgccac tgcggcatct gtgatgccaa ggccgaccac

9360

gcgtccgcct gtggacttga cttgtgtctg tttcactcat attttcacca gcactgccca

9420

gtcactctgg gttgtggtca ctatgccggt tcaaaggaat gccagcagtg tcagtcacct

9480

attggaaccg gcaagtctcc tcttgacact gtgctgaaac aaatcccgta taaacctcct

9540

cgcactgtca tcatgagggt ggacaacaag acaacggccc tcgatccagg gagatatcag

9600

tcccgtcgag gcctcgttgc agtcagaaga ggcattgcag gcaatgaagt cgatcttgct

9660

gatggagact accaggtagt gccccttttg ccgacttgca aagacataaa tatggtgaag

9720

gtcgccagta atgtgctagt tagcaagttc atagtgggac cgccaggttc cggaaagacc

9780

acctggttat tgagtcaggt ccaggatgaa gatgtcattt acacacccac tcatcagacc

9840

atgtttgaca tagtcagtgc tctcaaagtt tgcaggtatt ccataccagg ggcctcagga

9900

ctcccttttc caccgcctgc caggtccggg ccgtgggtta agctcattgc cagcgggcac

9960

gtccccggtc gagtgtcgta cctcgatgag gccggatatt gcaatcattt ggatatactt

10020

agactacttt ctaaaacacc tctcgtgtgc ttgggtgacc ttcagcaact tcaccctgtc

10080

gggttcgatt cccactgtta tgtttttgat caaatgcctc aggagcagct gaccactatt

10140

tatagatttg gtcccaacat ctgcacagcc atccagcctt gctacagaga aaaacttgaa

10200

tccaaggcta ggaacaccag ggtggttttc accacccggc cagtgacctt tggtcaggtg

10260

ttaacaccgt accataaaga tcgcgttggc tctgcgataa caatagattc atcccaaggg

10320

gccacctttg atgttgtgac attacacttg ccatctccga aatccctaaa taaatcccga

10380

gcacttgtgg ccatcactcg ggcgagacat gggttgttca tttacgaccc ccacaaccaa

10440

ctccaggagt tttttaacct gactcctgag cacactgatt gtaacctagt gttcagccgt

10500

ggggacgagc tggtggtttt gagtgcggat aatacagtca caactgtagc gaaggcccta

10560

gaggtgggtc catctcgctt ccgagtgtca gacccgaggt gcaagtctct tttggctgcc

10620

tgttcggcta gtctggaggg gagctgcatg ccgctaccac aagtggcaca caacctgggg

10680

ttttactttt ccccggacag ttcagcattt gcacctctgc cagaagagtt ggcgccacat

10740

tggccagtgg ttacccacca gaacaattgg gcgtggcctg accggcttgt tgccagcatg

10800

cgcccgattg atgcccgcta cagcaaacca atggtcggtg cagggtatgt agtcgggccg

10860

tccacctttc tcggcacccc cggtgtggtg tcatattatc tcacactata cgtcaaaggt

10920

gagcctcagg ccttaccaga aacacttgtt tcaacaggac gtatagccac agactgtcgg

10980

gagtatctcg acacggctga agaagaggca gcaagggaac tcccccacgc attcattggc

11040

gatgtcaaag gtaccacgat tgggggatgt catcacatca catcaaaata tttgcccagg

11100

ttcctgccca aggactctgt tgccgtagta ggagtgagtt cgcctggtag agctgctaaa

11160

gccgtgtgca ctctcaccga tgtgtatctt cccgaactcc gaccatatct gcaacctgaa

11220

acggcatcaa aatgttggaa actcaagtta gatttcaggg acgttcgatt aatggtctgg

11280

aaaggagcta ccgcctactt ccagttggaa gggcttacat ggtcagcgtt gcccgattat

11340

gccaggttta ttcagctgcc caaggacgcc gtggtataca tcgacccatg cataggaccg

11400

gcgactgcca accgcaaggt tgtgcgaacc acggattggc gggccgacct ggcagtgaca

11460

ccgtatgatt acggggccca gcacattctg acaacagctt ggtttgagga cctcgggccg

11520

cagtggaaaa ttttggggtt gcagcccttc aggcgagcgc ttggccttga aaacaccgag

11580

gactgggcga ttcttgcgcg ccgtatgaat gacggcaagg attacattga ctacaattgg

11640

cattgcgtcc gaggacgccc acgcgctatc tacgggcgcg ctcgtgacca tacttaccat

11700

tttgccttgg gcacagaatt gcaggtggag ctgggtaaac cccaactgcc gcctgagctg

11760

gtaccgtgaa cctgaagtga tgcaatgggg ttgttatgga gtaaaatcag ccagctgttt

11820

gtggacgcct tcacagagtt ccttgttagt gtggttgata tcgtcatctt tcttgccata

11880

ctgtttgggt tcaccgtcgc agggtggtta ctggtctttt ttctcagatt ggtttgctcc

11940

gcgattctcc gttcgcgctc tgccattcac tctcccgaac tatcgaaggt cctatgaagg

12000

cctgctaccc aattgcaggc ctgatgtccc acaattcgca ttcaagcacc cattgggtat

12060

gctttggcac atgcgagttt cccaattgat tgacgagatg gtctctcgtc gtgtctacca

12120

gaccatggaa caatcaggtc aagcggcctg gaagcaggta gttggtgagg ccacccttac

12180

gaagctatca aggctcgatg tagttaccca cttccagcac ttggccgcaa cagaggcgga

12240

ttcttgccgc tttcttagct cacgactcgt gatgctaaag aatcttgccg ttggtaatgt

12300

gagcctacag tacaacacca cgtcagacca cgttgaactc atttttccca ctccaggtgc

12360

gaggcccaag ttgaccgatt tcagacaatg gctgatcagt gtccatgctt ctattttttc

12420

ctctgtggcc tcatctgtta ccttgtttgt ggtgctttgg cttcgagtcc caatgctacg

12480

ctatgctttt ggtttccatt ggctcacggc aacacatcat tcgagttaac tattaattac

12540

accatatgca agccctgcct caccagtcaa gcggctaaac aaaggcttga acctggtcat

12600

agcatgtggt gcaggatagg ggacaccagt tgtgaggaga gtgaccacga tgagttgtca

12660

atgaccatcc cgtctgggta cgataacctc aaactcgagg gctattatgc ttggctggcc

12720

ttcctgtcct tttcctacgc ggcccaattc catccggagc tgtttggaat agggaacgtg

12780

tcgcgtgttt ttgtggacaa gcgacaccag ttcatttgtg cggagcatga tggacccaat

12840

tcaaccgtgt ccattaatca taacatctcc gcatcgtacg cggtgtatta ccatcatcag

12900

gtagacggag gtaactggtt ccacttggaa tggctgcggc cgttcttctc ctcctggttg

12960

gtgctcaatg tctcatggtt tctgaggcgt tcgcctgcaa gccctgtttc tcgacgcatc

13020

tatcagatat taagaccaac acgaccgcgg ctgccggttt tatggtcctt caaaacattg

13080

aatgtctcca acctcacacg ggccccgcag cgcaagggac catcccccaa gcgaaacggt

13140

cacaatgtcg ccaagccgtc ggcactcccc agtacatcac gataacggct aacgtgactg

13200

acgaatcata cttgtataac gcagatttgc taatgctttc tgcgtgcctt ttctatgcct

13260

cagaaatgag cgagaaaggc tttaaagtca tctttgggaa cgtctctggc gtcgtttccg

13320

cttgtgtcaa tttcacggat tatgtggctc atgtgaccca acatacccag cagcaccatc

13380

tggtaattga ccacgtccga ttactgcatt tcttgtctcc atccacaatg aggtgggcta

13440

caaccattgc ttgtttggtc gccattctcc tggcgatatg aaatgttctc acagattggg

13500

gtgtttcttg actccgcact cctgcttttg gtggtttttt ttgctgtgta ccggcttgtc

13560

ctggtccttt gtcgatggca acggcaacag ctcgacatac caatacatat ataacttgac

13620

gatatgcgag ctgaacggga ccgcctggtt gtccagccac ttttcttggg cagtcgagac

13680

ctttgtgctt tacccagtcg tgactcatat tctctcactg ggttttctca ccacaagcca

13740

tttttttgac gcgctcggtc tcggtgctgt gtccatcaca ggtttttttg gcaaacggta

13800

cgtactcagc agcatctacg gtgcttgtgc tctcgcagcg ttcgtgtgct ttgccatccg

13860

tgctgctaaa aattgcatgg cttgccgcta cgcccgcacc cggttcacta acttcattgt

13920

agacaaccgg gggaggatcc atcggtggag gtctccaata gtggtggaga aattgggtaa

13980

agctgaaatt ggcagcgacc ttgtcaccat caaacatgtc atcctcgaag gggttaaagc

14040

tcaacccttg acaaggactt ctgctgagca atgggaagcc tagatggttt ttgtgatgag

14100

cctcccgctg cgcaaaatct tgtgctagcc tttagcatta catacacacc tgtaatgata

14160

tatgccctta aggtgtcacg cggtcgactc ctagggctgt tgcacatctt gatattcctg

14220

aactgctctt tcactttcgg gtatatgacg tatgtgcatt ttcagtctgc caaccgtgtt

14280

gcactcactt tgggggccgt tgttgccctc ctgtggggcg tttacagctt cacagaatca

14340

tggaagtttg ttacttccag atgcagattg tgctgcctag gccggcggta cattctggcc

14400

cctgcccacc acgtagaaag tgctgcaggt ctccactcaa tcccagcgtc tggtaaccgc

14460

gcatacgctg tgagaaagcc cggactaaca tcagtgaacg gcactctagt accaggactt

14520

cggagcctcg tgctgggcgg caaacgagct gttaaacgag gagtggttaa cctcgttaag

14580

tatggccggt agaaaccagg gccagaagaa aaagaaaagt acagctccaa tggggaatgg

14640

ccagtcagtc aatcaactgt gccagttgct gggcacaatg atgaagtccc agcgccagcg

14700

acctagggct ggacagacta aaaggaaaaa gtctgagaag ccacattttc ccttggctgc

14760

tgaagatgat attcggcacc acctcaccca gactgaacgc tccctctgct tgcaatcgat

14820

ccagactgct ttcaaccaag gcgcaggaac tgcgtcgctt tcatccagtg ggaaggtcag

14880

ctttcaggtc gagtttatgt tgccggttgc tcatacagtg cgcttaattc gcgtgacttc

14940

tacatccgct agtcaggatg caagttaatt cgacagtcag gtgaatggcc gcgattggcg

15000

tgtggccttt gagtcaccta ttcaattagg gcgatcacat gggggtcata cttattaggc

15060

aagatccatg tgaccgaaat t

15081

<210> 2

<211> 15014

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> кДНК от вируса свиного репродуктивно-респираторного синдрома

<400> 2

atgatgtgta ggggagatac cctacacaca caacactcct ggtgtttgtg tgccttggag

60

gcgtgggtac agccccgccc cacctcttgg cccctgttct agcccaacag gtatccttct

120

ccctcggggc gagtgcgccg cctgctgctc tcttgcagtg ggaaggacct cccgagtatt

180

tccggagagc acctgcttta cgggatctcc accctttaac catgtctggg acgttctccc

240

ggtgcatgtg caccccggct gcccgggtat tttggaacgc cggccaagtc tattgcacac

300

ggtgtctcag tgcgcggcct cttctctctc cagagcttca agacactgat ctcgctgcaa

360

ttggcttgtt ttacaagcca agaaacaagc ttcactggaa ggtccctatt ggcattcctc

420

aagtggagtg caccccatct gggtgctgct ggctctcagc catctttccc atagcgcgca

480

tgacctccgg caaccacaat ttcacccaac gactcataaa ggttgccgat gtgttgtacc

540

gtgatggttg tttgactcgt caacaccttc gtgaacttca agtttatgag cgcggctgca

600

attggtaccc gattacgggg cctgtgcccg gagtggctgt gtatgcgaac tccatgcacg

660

tgtccgacca gccgttccct ggtaccaccc atgtgttaac gaacttgcct ttacctcaac

720

aggcctgtcg gcagccgttc tgtccatttg aggaggctca ttctaacgtg tataggtgga

780

atggactcgc gatttttgtg gattccactt ccgacggccg gtcccgcatg atgtggacac

840

cggggtctag cgactcgact gccttagaag tgctaccacc tggactagga cgtcaagccg

900

aaatcctcac ccggagtttt cctgcccacc accctgttaa cctcgctgac tgggagctca

960

ccgagacccc tgaatccggt ttctccttca gcatgtctca gtcttgtggt taccttgccc

1020

aaaaccctga cgtttttgat ggcaagtgct ggctttcctg tttttttgac ctgccgactg

1080

aggtatggcg tcgtgaggag catctggcta gtgccttcgg ttatcaaact aaatggggcg

1140

tgcatggcaa atacctccag cgcagacttc aaatcaatgg agttcgcgct gtagtcgatc

1200

ctgatggtcc tatccatgtt gaagcgttgt cttgccccca atcttggatc agacacctga

1260

ctctagacgg tgacgtgacc ccaggattcg ttcgcctgat gtctctccgt attgtaccga

1320

acacagaacc ggccactctc ccggtctttc ggtttggagc gcataaatgg tatggcgctg

1380

ccggcaaacg agcccgtgct aggcgtgccg ccagaaatgg gaaggactca gccactgccc

1440

ccacggccac ccaactgatc cctgcctgtg gaacaaccac ttattccccg ccaacagacg

1500

ggtcttgtgg ctggcatgtt ctcgccgcca tagttaatcg gatgatgcat aatgatttta

1560

catctcctct gactcagtat aacagaccac aggacgattg ggcgtccgat tatgaccttg

1620

ctcaggcaat ccagtgtatg cgactgcctg ctactatagt tcgtggtcgt gcctgcccta

1680

acgccaagta ccttataaaa ctcaatggag tccattggga ggtagaggtg aggtctggaa

1740

tggctccgcg tcttctttct cgtgagtgca ttgttggcgt ctgctctgaa ggctgtatcg

1800

caacgcctta ccctgaaggc gagctacccg agcgtgcact agaggccttg gcggctgctt

1860

acagactacc ttccgactgt gtaagttctg gcattgccga cttccttgct gacccacctc

1920

ctcaggaatt ctggaccctc gacaagatgc taacctcccc gtcaccggag cggtccggtt

1980

tctccagttt gtataaatta ctattagagg ttgttccaca aaagtgcgga gctacggagg

2040

gggctttcgt ctatgctgtt gagaggatgt tgaaggactg cccaagctcc aaacaggcaa

2100

tggccctcct ggctaaagtc aaagtcccgt cttcgaaggc cccgtctgtg tccttggacg

2160

agtgtttccc cacggacgtt ccagccgacc ccgagccaac atctcaggaa aagcctcaaa

2220

gttctggcac taccacagtc ctgtgttcgc cgaatacaaa agagtctgag gaggtggcct

2280

tgcaaggcgt tcaggagagc agccacaagg ccgcccactc tgcagtcctt gttgaggaac

2340

ttagcgggaa gcgggcgcag gaggttgccg gcgagctaca ggagttcggc gactgtggct

2400

tggtaatcgg gagtgctcaa gacggcattc tggaggatga gccattggac ttgtcccgat

2460

cagcgttggg ggccacaacg attctcgtga gaaaccaaac acccaacaat tcgggttttg

2520

gcactggtac tcctcctgcc actgttcaag agcccgtctt tacagggctc atgtcttatt

2580

gcgttgagca ttgtaaaacg gagtccgata acagcagttt acctctggat ctgtctaatg

2640

cgcaaacctc ggaccagcct ttaaatctac ccttggctgc ttggccagtg agaaccaccg

2700

catctgaccc tggctgggcc cacggtaggc gtgtgcctgt ctttgtaaag ccccggggca

2760

ctctctccga tggcgattca gtccttctgt ttggggggct ttccgaatcc agctctgtta

2820

tcgagtttga ccaatcgaaa gacgtcccag tgaccgatgc ccccgtcgac ttgaccaccg

2880

cgaacggagc cctctctggg atcgactccc ttgaatttgc tgaactcaag cgcccgcgct

2940

actccgctca agctttgatt gaccgaggtg gtccactagc cgatgttcat gcaaagataa

3000

agagccgggt atatgaacaa tgccttcagg cttgtgagcc cggcagtcgt gcaaccccag

3060

ccaccaggga ttggctcaat aaaatgtggg aaagggttga tatgaagact tggcgctgta

3120

cttcgcagta ccaagctggt cacattctcg cgtctcttaa atttcttcct gacatgatcc

3180

aagacacgcc acctcctgtt cccaggaaga accgagctag tgatcatgcc gaaccaaaac

3240

gtctggtggc gcagtgggac aagaaattga gtgtggtctc ttccccaaaa ccggttgagc

3300

cagcgcctga ccggaccacc cctttgcctg cggacatcca gcaagagggt gttgcctcct

3360

ccgacagatt aacccgtgcg ccagacctcc ctagtcaagt gagcacgggc gggagttgga

3420

aagaccgcat gcttttcggc gctcgtttcg cggagtccat tggtcagcgc atcacagcac

3480

gggtttttga aactttctcc catctcccag cttttgtgct cgcacttttc tcgccgcggg

3540

gcgctatggc ttcaggtgat tggctgtttg caggtattgt tttacttgct ctcctgctct

3600

gtcgccctta cccagtactc gggtgcttac ccttactggg tgtcttttct gggtctgtgc

3660

ggcgtgttcg tctgggtgtt tttggttctt ggatggcttt tgctgtattt ttattctcga

3720

ctccacccga cccagtcggt tcttcttgcg gccacgattc gccggagtgt catgctgagc

3780

ttttggctct tgagcagcgc caactttggg aacctgtgcg cagccttgtt gttggcccct

3840

cgggtctcac gtgcgtcatt tttggtaggt tactcggtgg gtcacgttat ctctggcata

3900

ttctcctacg tttatgcatg cttgcagatt tggccctttc tcttatttat gtggtgtccc

3960

aagggcgttg tcacaagtgt tggggacagt gtataagaac agctcctgca gaagtggctc

4020

ttaacgtctt cccttttttg cgtgccaccc gtgcctctct cgtgtccgtg tgcgaccgat

4080

tccaatcgcc aaaaggtgtt gatcctgtgc acttggcaac cggctggcgt gggtgttggc

4140

gtggtgagag tcctatccac caaccacacc aaaagcccat agcttatgcc aatttagatg

4200

aaaagaaaat atccgccaaa acggtggtcg ctgtcccata tgatcccagt caggccatca

4260

aatgcctaaa agttctacag gcgggaggag ctattgtaga ccagcccacg ccagaggtcg

4320

ttcgcgtgtc tgaaatccct ttctcagccc catttttccc aaatgttccg gtcaacccgg

4380

attgcagggt tgttgtagac tcggacactt ttgtggcagc agtccgctgt ggttactcga

4440

cggcacaatt ggttttgggc caaggcaact tcgccaaatt aaaccaaatc ccccttggga

4500

gttccacctc taccagaacg actggcgggg cttcttacac ccttgctgtg gctcaagtgt

4560

ctgtgtggac cctcgttcat ttcattcttg gtctttggtt cacatcgcct caagtgtgtg

4620

gtcgggggac ctccgacccg tggtgttcaa atcctttttc atatcccact tatggccccg

4680

gagttgtttg ttcctcacga ctctgtgtgt ctgccgacgg ggtcactcta ccattgtttt

4740

cagccgtggc gcagctctcc ggtagagagg tgggaatttt tgttctggtg ctcgtctcct

4800

tgattgctct agctcatcgt atggctctta aggcagatat gttagtggtc tttttggctt

4860

ttgggggtta cgcctggcct atgagctctt ggttaatctg tttctttcct ttactcctga

4920

agtggatcac tcttcaccct ctcaccatgc tttgggtgca ctcgttttta gtgttttgtc

4980

tgcccgcagc cggcgtcctc tcgctgggga taactggcct cctttgggtg actggccgtt

5040

ttacccaggt agccggaatc atcacacctt atgacatcca tcagtacacc tctgggccgc

5100

gtggtgctgc tgctgtggcc accgccccag aaggcactta catggccgcc gttcggagag

5160

ctgccctaac cgggcgaacc ttaatcttca ctccgtccgc agtcgggtct cttcttgaag

5220

gtgctttcag gactcgcaaa ccctgcccta ataccgtgaa tgttgttggt tcttccctcg

5280

gttccggagg agttttcacc attaatggaa agaaaatcgt cgtcaccgct acccatgtgt

5340

tgaacggcga tgcagccaga gtcactggtg actcttacaa ccgcatgcac actttcaaga

5400

ccaatggtga ttacgcctgg tctgatgcag acaactggca aggtgttgcc cccatggtca

5460

aggttgcaaa ggggtatcgc ggtcgtgcct actggcaaac atcaactggt gttgaacccg

5520

gtattgtcgg ggaaggtttc gccttttgct tcactaactg cggtgactcg gggtcacccg

5580

tcatttcaga gtccggtgac ctcatcggga tccataccgg ttcaaataaa ctgggctctg

5640

gccttgtgac aacccctaac ggggagacct gttccatcaa agaaactaaa ctctctgatc

5700

tttccaagta ttttgctggc ccgagtgtcc ctctcgggga caccaagttg agcccgacca

5760

ttatccctga tgtgacatcc attccgagtg acttagcatc gctcctagct tccgtccctg

5820

taatggaagg tggtctttcg accgttcaac tcttgtgtgt cttctttctc ctctggcgta

5880

tgatgggtca tgcctggaca cctgtcgttg ccgtgggttt cttcttgcta aatgaaattc

5940

ttccagcagt tttagttcgt gccgtgtttt ccttcgcact ctttgtgctc gcgtggctta

6000

ccccttggtc cgcacaggtg ctaatgatta gactcctcac agcgtccctt aaccgcaaca

6060

agctttcctt agcgttctac gcactcgggg gcatcgtcgg tttggctgct gaaattggga

6120

ctttcgctgg cagactgcct gatctgtctc aagctctttc gacgtactgc ttcctgccta

6180

gggtcattgc tgtgaccagt tgtgttccca tcatcatcat tggcgggctt catgctctcg

6240

gtgtgatctt gtggttgttc aaatatcggc acctccacgc catgttggtt ggtgacgggg

6300

ctttctcaag tgcattcttc ctgcggtatt ttgcagaggg taaccttagg aagggggttt

6360

cgcagtcctg tggcatgagc aacgaatccc taacggctgc cttagcttgt aagttatcac

6420

aggctgacct agatttcctg tcaagcttga cgaacttcaa atgctttgtg tctgcttcaa

6480

acatgaagaa tgctgctggc caatatatcg aagcagcata tgccaaagct ctgcgccgag

6540

agctggcctc cctagtccag gtcgacaaaa tgaaaggagt cttgtccaag ttggaagctt

6600

ttgctgagac ggccaccccg tcccttgaca caggtgacgt ggttgtgctg ctcgggcaac

6660

atccccatgg atctatcctt gacatcaatg tggggactga aagaaaaact gtgtccgtgc

6720

aagagactcg gaacttgggc ggctccaagt tcagtgtctg tactgttgtg tccaacacac

6780

ctgtggacgc cttgaccgat gttccgcttc aaacaccgac tccgctcttc gagaacggcc

6840

cgcgtcaccg ctgtgaggaa gacgatctta aagtcgagag aatgaggaaa cattgtgtgt

6900

ctctcggctt ccacaatatc aatggcaaaa tttattgcaa agtctgggat aagtccactg

6960

gtgacacctt ttatacggat gattcccggt atacccaaga ctatgctttt caggacaggt

7020

cagccgacta cagagaccgg gactatgagg gtgtgcaagt cgcctctcaa caaggattcg

7080

acccaaagtc tgaaactcct gttggcactg tcatgatcgg cggcatcatg tataacaaat

7140

acctagttaa aggcagggaa atcttggtcc ttaaacctga caactgccta gaagccgcca

7200

ggctgtccct tgaacaggcc cttgctggga tgggccagac ttgtgatctc acagccaccg

7260

aagtggaaaa gctaaagcgc atcattagtc aactccaagg tctgaccact gaacaagctt

7320

taaactgtta gccgccagcg gcttgacccg ctgtggccgc ggcggcttgg ttgtaactga

7380

aacggcggta aaaattgtaa aataccacag cagaactttc actttaggcc ctttagactt

7440

aaaagtcgct tctgaagtgg aagtaaagaa atcaactgag cagggccatg ctgttgtagc

7500

aaatttaagt tctggtgtcg tcttgatgag acctcaccca ccgtcccttg tcgatgtcct

7560

cctgaaaccc ggacttgaca caacacccgg cattcaacca gggcatggag ccgggaacat

7620

gggtgttgac ggttctattt gggattttga aactgcaccc acaaaggcag aacttgaatt

7680

gtccaaacaa ataattcaag catgtgaggt cagacgcgga gacgccccga acctacaact

7740

cccttacaag ctctatcctg ttagggggga ccctgagcgc catgccggtc gtctcaccaa

7800

taccaggttt ggagatttgc cttacaagac tccaggagac accaagtctg ccatccatgc

7860

ggcttgttgt ctgcacccca acggggtccc cgtgtctgat ggcaagtcca cactaggcac

7920

tacccttcaa catggttttg agctttatgt tcccacagtg ccctatagtg ttatggagta

7980

ccttgattca cgctctgata cccctcctat gttcactaaa catggcactt ctaaggctgc

8040

tgcagaagac ctccaaaaat atgatttatc cacccaagga tttgtcctgc ctggggtcct

8100

acgccttgtg cgcagatttg tctttggcca catcgggaaa gcaccgccgt tgttcctccc

8160

gtccacttac cctgccaaga actctatggc agggatcaac ggccagagat tcccaacgaa

8220

agacgttcag agtatacctg aaattgatga aatgtgtgcc cgcgccgtta aggaaaattg

8280

gcagaccgtg acgccctgca ccctcaagaa acagttctgt tccaagccca aaaccaggac

8340

cattctgggc accaacaact ttattgccct ggctcaccga tcggcgctca gtggcgtcac

8400

ccaagcattt atgaagaagg cttggaagtc cccgattgcc ctggggaaaa acaaattcaa

8460

agagctacat tgcactgttg ctggcaggtg tcttgaggct gatttggcct cctgtgatcg

8520

tagcaccccg gccatcgtga ggtggtttgc tgccaacctc ctgtacgagc ttgcagggtg

8580

tgaagagtac ttgcctagct atgtactcaa ctgctgccac gacctcgtgg caacacagga

8640

tggtgccttc acaaaacgcg gtggtttgtc atccggtgac cctgttacca gtgtgtcaaa

8700

caccatatat tcactggtga tctatgccca gcacatggtt ttgtcagcct taaaaatggg

8760

tcatgagatt ggtcttaagt ttctcgagga acagctcaaa ttcgaagacc tcctcgaagt

8820

ccagcccatg ttagtgtact ctgacgacct agtcttgtac gccgaaaggc ccaccttccc

8880

taattaccac tggtgggtcg aacaccttga cctaatgctg ggtttcaaaa cggacccgaa

8940

gaaaactgta ataactgata agcccagctt cctcggctgt aaaattgaag cagggcggca

9000

gctagttccc aatcgcgacc gtatcctagc cgctcttgca taccacatga aggcgcaaaa

9060

cgcctcagaa tattatgcat ctgctgctgc gatcctaatg gattcgtgtg cttgcattga

9120

ccacgatcct gagtggtatg aggacctcat ttgtggtatt gcccggtgcg ctcgccaaga

9180

tggctatagt tttccaggcc cggcattttt catgtcgatg tgggaaaaac taaagagcca

9240

caacgaaggg aaaaaattcc gccactgcgg tatctgtgat gccatggccg atcatgcatc

9300

tgcctgtggg cttgatttgt gtttgtttca ttcgcatttt caccagcatt gtccagtcac

9360

tctgaactgc ggtcaccgtg ccggcgcaaa ggaatgtccg cagtgccagt cgccagttgg

9420

ggttagcaaa tcccctctcg acactgtgct agaacaaatt ccatacaaac cccctcgtac

9480

tgtcattatg aaggtgagtg atagaacgac tgtcctcgac ccgggcaggt accagtcccg

9540

tcgtggtctt gttgctgtta agaggggcat tgcaggcaat gaagttgatc ttcctgatgg

9600

agactaccaa gtggtgcctc tcttaccaac ttgcaaagat ataaacatgg taaaggtagc

9660

ttgcaatgta ctgctgagta agttcatagt aggaccacca ggttccggaa aaaccacttg

9720

gttactgagt caagtccagg acgacgatgt catttacaca cccacccatc agaccatgtt

9780

tgatatagtc agtgctctca aggtttgcag gtattctatt ccaggggcct ctgggctccc

9840

ctttccacca cctgccaggt ctgggccgtg ggtcaggctt gttgccagcg ggcacacccc

9900

cggccgagtg tcatacctcg atgaggccgg gtactgcaac catctggaca ttcttaggtt

9960

gctttccaaa acaccccttg tgtgtctggg tgaccttcag caacttcacc ccgtcggctt

10020

taattcctac tgctatgtgt ttgatcagat gcctcaaaag cagctgacca ccatttacag

10080

gtttggcccc aacatctgtg cagccatcca gccttgttac agggaaaaac ttgaatccaa

10140

ggccaggaac accaggatag tttttactac acggcctgta gctttcgggc aggtcctgac

10200

accataccac aaagatcgca tcggttcagc gataaccata gattcgtctc agggggccac

10260

ttttgacatt gtgactttgc atttaccatc gccaaagtcc ctgaataaat cccgggcact

10320

tgtggccatc actcgggcaa ggcacgggtt gttcatctac gaccctcaca atcagcttca

10380

ggagtttttc aacctagctc ctgagcgtac tgattgtaac cttgtgttta accgtgggga

10440

tgagctagta gtcctgaact cggacaatgc agtcacaacc gtggcgaaag ccctagaggc

10500

aggcccatct cggtttcgag tatctgatcc gaggtgcaag tctctcttgg ccgcttgctc

10560

ggccagccta gaagggagct gcatgccgct gccgcaagtg gcgcacaatc tggggttcta

10620

cttctcccca gatagcccag catttgcacc cctgccgaaa gaactagcgc cacattggcc

10680

ggtggtcact catcagaaca accgggcatg gcctgaccga cttgttgcta gcatgcgtcc

10740

aatcgatgcc cgttacagca agccaatggt cggcgctggg tatgtggtcg ggccatccac

10800

ttttctcggc acccccggcg tggtgtcata ttatctgacg ctgtacgtca ggggtgagcc

10860

ccaggccttg ccagaaacac tcgtgtcaac ggggcgcata gccacagact gtcgagaata

10920

tctcgacgcc gctgaggaag aggtagcaaa agaactaccc cacgcattca ttggtgatgt

10980

caagggtacc acggttgggg ggtgtcatca catcacatca aaacacctac ctaggttcct

11040

acctaaggat tctgttgccg tggttggagt aagttcaccc ggcaaggctg ctaaagccgt

11100

gtgcaccctt actgatgtgt acctaccgga actccggcca tatttgcaac ctgagacagc

11160

gtcaaagtgc tggaagctca aactggactt cagggatgtc cgtctgatgg tctggaaagg

11220

ggcaaccgcc tattttcaat tagaagggct cacatggtcg gcgctgcccg actatgccag

11280

gtttattcag ctgcctaagg aagccgtggt gtacatcgat ccgtgtatag gaccggcaac

11340

agccaaccgc aaagtcgtgc gaaccacaga ctggcgggct gacctggcag tgacaccgta

11400

tgattacggt gctcagtata ttttgacaac agcctggttc gaagacctcg ggccacagtg

11460

gaaaattctg gggttgcaac cttttaggcg atcgcttggc tttgagaaca ccgaagattg

11520

ggcaatcctt gcacgccgta tggatgacgg caaagattac atcgactaca actggaattg

11580

tgttcaaaac cgtccacttg ctatccacgg gcgcgctcgt gaccacacat atcacttcgc

11640

cctcggcaca gagttgcagg tggaactggg caaaccccgg ctgccgccgg agcaagtgca

11700

gtgaacccgg agtgatgcaa tggggtcact gtggagtaaa atcagccagt tgttcgtgga

11760

cgctttcact gagttcctcg ttagtgtggt tgacattgtc attttccttg ccatactgtt

11820

tgggttcaca gtcgccgggt ggctactggt cttccttttc agaatggttt gctccgcgat

11880

tctccgttcg cgctctgcca tttactctcc cgaactatcg aaggtcctat gaaggcctgc

11940

tacccaactg caggccagat gtcccacaat tcgcattcaa gcatccactg ggcttgcttt

12000

ggcatatgcg agtttcccat ttgattgatg aaatggtctc ccgtcgtatt taccagacta

12060

tggaacattc aggtcaagcc gcttggaagc aagtggtcgc tgaggctacc ctcacaaaac

12120

tatcaaggct tgacgtagtc actcatttcc aacatctggc cgcggtggag gcggattctt

12180

gccgcttcct cagctcacga cttgcaatgt tgaaaaacct tgccgttggc aatgtgagct

12240

tgcagtataa caccacattg gacagagttg agctcgtctt ccctacgccg ggttcgagac

12300

ccaagttgac tgatttcaga caatggctca tcagtgttca cgcttccatc ttctcttctg

12360

tagcttcgtc tgtcaccttg ttcatagtgc tctggcttcg aattccagcc ttacgctatg

12420

tttttggttt ccattggccc acggtaatac atcattcgag ctaaccatca actatacaat

12480

atgtatgccc tgtcttaccc gccaagcggc tagtcagagg ctcgagcctg gccgcaacat

12540

gtggtgtaga atagggtacg acagctgtga agaacgtgac catgatgagc tgtcaatgtc

12600

catcccgtct gggtacgaca acctcaaact cgagggttat tacgcttggc tggcattctt

12660

gtccttctcc tacgccgctc aattccatcc agaattgttc ggaataggga atgtgtcacg

12720

cgttttcgtg gacaaacaac accaagccat ttgtgctgtg catgacggac aaaattccac

12780

catatccgct gagtacaaca tttctgcatt gtacgcggca tactaccacc accaagtaga

12840

cgggggcaac tggtttcatc tagaatggct gcggccattc ttttcttcct ggctggtgct

12900

caatatttca tggtttctga ggcgttcgcc tgcaagccct gcttctcggc gcatctatca

12960

gatgttaaga ccaacacaac tgcggctgcc ggtttcatgg tccttcagaa cattgaatgc

13020

cttcgacacg gagcctcaac aacgcaaaat ggcccttccc ttcggaagcc gtcgcaatgt

13080

cgtgaagccg ttggcacccc tcagtacatc acaattacgg cgaatgtgac cgatgaatca

13140

tatttgtaca acgctgactt gctgatgctt tctgcgtgcc tcttttacgc ctctgaaatg

13200

agcgagaaag gcttcaaagt catcttcggg aacgtttctg gcgttgtctc tgcctgcgtt

13260

aattttacag actatgtggc ccatgtgact caacacaccc agcagcatca cctggtaatt

13320

gatcacattc gattgcttca cttcttgtca ccgtctgcaa tgaggtgggc tacaaccatt

13380

gcttgcttgc tcgccattct cttggcgata tgagatgttc tcacaaactg gagccttcct

13440

cgactccgca ctcttgctcc tggtggcttt ttttgctgtg taccggcttg ttctggtcct

13500

ttgccgatgg caacggcaac agcccgacat accaatacat atataacttg acgatatgcg

13560

agctgaatgg gaccgagtgg ttgtctaacc attttaattg ggccgtcgaa acctttgtgc

13620

tctacccagt cgcaactcac attatttcac tgggttttct tacaacaagt catttccttg

13680

atgcgctcgg tctcggcgct gtgtccgtca ccggatttta caacaaccgg tatgtgctaa

13740

gcagtgtcta ctgcgcctgt gcttttgcag cactcgtgtg ctttgtcatc cgtgccgcta

13800

aaaattgcat ggcttgccgc tatgcccgca cccggtttac taatttcatc gtggacaacc

13860

gggggaggat ccaccgatgg aagtctccaa tagtggtgga gaagttgggg aaagctgagg

13920

ttggtagcga ccttgtcacc atcaaacatg ttgtccttga aggggttaaa gctcaacctt

13980

tgacgaggac ttcggctgag caatgggaag cttagacaat ttttgcggtg atcctgccgc

14040

cgtacaaaag cttgtgctgg cctttagcat tacatataca cctataatga tatacgccct

14100

taaggtgtca cgcggccgac tcttaggact attgcacatc ctaatattct tgaattgttc

14160

tttcacattt gggtatatga cttatgcgca ttttcaatcc accagtcgtg tcgcgcttgc

14220

tctgggggct gttgtcaccc tcctgtgggg catttacagt cttacagagt catggaagtt

14280

tgtcgcttcc agatgcagaa tgtgttgtct aggccggcga tacatcctgg cccctgccca

14340

tcacgtagaa agtaccgcag gtctccattc aatcccagcg tttggcaacc gagcatacgc

14400

tgtgagaaag cccggactaa catcagtgaa cggcactctg gtaccaggac ttcggagcct

14460

cgtgctgggc ggcaaacgag ctgttaaacg aggagtggtt aacctcgtca agtatggccg

14520

gtaaaagcca gagccagaag aaaaagaaaa atacagctcc aatggggaat ggccagccag

14580

tcaatcaact gtgccaattg ctgggttcga tgataaggtc ccagcgccag caacctagga

14640

gaggacaggc gaaaaaaaga aagcctgata agccacattt tcccctagct gctgaagatg

14700

acattcggca ccacctcacc cagactgaac gttccctctg cttgcaatcg atccaaacgg

14760

cttttaacca aggcgcaggt gttgcgtcgc tttcatccag cgggaaggtc agttttcagg

14820

ttgagttcat gttgccggtt gctcatacag tgcgcctaat tcgcgtgact tctgcatccg

14880

ctagtcagaa tgtagattaa tttgacagtc aggtgaatga ccacgattga cgtgtggcct

14940

ctaagtcacc tattcaatta gggcgatcac atgggggtca aacttaattg ggcgagaacc

15000

atgtgaccga aatt

15014

<210> 3

<211> 14876

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> кДНК от вируса свиного репродуктивно-респираторного синдрома

<400> 3

atgatgtgta gggtatcccc cttgtttttg cagcactcct agtgtttgtg tgcctcggag

60

gcgtgggtac agccccgccc cacctcttgg cccctgtcct aacccgacag gtacccttct

120

ccctcggggc gagcgcgccg cctgctgctt tcttgcggcg ggaaggacct cccgagtatt

180

tctggagagc acctgcttta cgggatctcc accctttaac catgtctggg atgttctccc

240

ggtgcatgtg caccccggct gctcgggtgt tttggagtgc cggtcaagtc tattgcacac

300

ggtgtctcag tgcacggcct cttctccctc cagggctgca agacactgac ctcgcagcaa

360

ttggcttgtt ctacaagccc aaagataaac ttcactggaa agttcctatc ggcatccctc

420

aggtggagtg tactccgtct ggatgctgct ggctctcggc catcttcccc ttggcgcgca

480

tgacctccgg caaccacaac ttttctcagc gactcataaa agttgccgaa gtgttgtacc

540

gtgatggctg tttgactccc cgacaccttc gtgagcttca agtttacgag cgtggttgca

600

gttggtaccc gatcaccggg cccgtgcccg gagtaggtgt gtacgcgaac tccatgcacg

660

tgtccgatca atcgtttcct ggtgccactc atgtgctgac gaacttgcct ctacctcagc

720

aagcttgtcg acagcctttc tgtccattcg atgaggcccg ctctgacgtg tacaagtgga

780

acgaatttgt ggttttcgtg gattcctcct ccggcggtca attacgcatg atgtggatgc

840

cgggatccga tgattcggtc gccattgaag cattatcgcc tgagttggaa cgtcaggttg

900

aaatccttgt tcggagtttc cctgcccacc accctgttaa cattgccgac tgggagcttg

960

ctgagtcccc ggagcacggt ttttccttcg gcacgtctca tcctagtggt taccttaccc

1020

gagacccttg gggttttgat ggcaaatgtt ggctctcttg cttcttgggc ctcccgacta

1080

gagttcagca tcatgaggag tacctagccg acgccttcgg ttaccaaacc aagtggggcg

1140

tgcacggtag gtatcttcag cgcaggcttc aagtcaacgg tgtccgtgct gtggttgatc

1200

ctgacggccc catccacgtt gaagcgctgt cttaccccca gtcttggatc aggcacctga

1260

cttttgacga tgatgttacc ccaggattcg ttcgcctgat gtctcttcgc attgtgccga

1320

atacagaacc taccactctc ccaattttcc ggtttggggc gcataaatgg tatggagcag

1380

ctggcaaacg agctcgcgcc aagcgtgctg ccaaaaacaa gggggattcg aattccaccc

1440

ccgaagtcgc ccgagtggct tctaccagtg aggttgttac ctattcccca ccggcagacg

1500

ggtcttgtgg ctggcatgtt gttgccgcca tgatgaacca catgatgaac ggtaaactca

1560

cgtccccttt gactccgtac aacagaccag aggacgactg ggcttctgat tatgatcttg

1620

tcaagataat tcaatatttg caactgcccg caaccgtagt tcgggcccgt acttgtccca

1680

acgctaagta ccttgtcaaa ctcaatgggg tccattggga agttgagatg aggccagaag

1740

tagctccttg ctctctttcc cgcgaatgtg tggttggtgt ctgttctgag ggctgtgttg

1800

cgtcgcctct tccagaaggg gggctgcctg accgcgcact tgaggccctg gcgtccgctt

1860

acagattgcc ttccgactgc gttggtgatg ctgttgctga cttcctctcc agcccgccct

1920

ctcaagaatc ctggaccctc gataaaatgt tgacctcccc atcaccagag cagtccggtt

1980

tttctagctt gtacaaactg ctactggagg ttgttccgca gaagtgcgga gccacggagg

2040

gggccttcgt ctatgctgtt gagaggatgc tgaaagattg tccgagcccc aaacaggcca

2100

tggccctttt gggaaaaatc aaaatcccat cctcaaaagc ctcgtccgtg tccttagacg

2160

agtgctttcc cactgatgtt ttgcaagagg gtaaccacag gacctcccac cccgtggctc

2220

ctgctgatgg acttgacaaa cagcaagcac cgttggttga ggatgaacaa ttaggattcg

2280

gtggtcacga ttcggccgtt gcggcggtca gtggcaatca ggagagtgaa ccgttggacc

2340

tttcccgatc ggcaccagtt gtaacaacga ccttcgtcga agggcgagtg cccggcgacc

2400

cgggcccctg caccagcgac cgctccgctg ttgttcaaga gttagttgag cgatgtgacg

2460

cggagtcaaa tgacggcagt ttgcccctgg atgtgactaa agtgcaaacc cccaatcaac

2520

ctctggatct atctctagct gcttggccag tgaagaccac tgcatctgac cccggttggg

2580

ttgacggtag acgcgaaccc gtcttcgtca agcctcgcgg tgctttctct gacagtgagt

2640

cggtcttccg gtttggagga gtttctgaga ccggccctgt catcgggttt gatcgggtaa

2700

aagaaattcc ggcggctgac acccccatcg acttaacaat ctcaaaagag actctttccg

2760

gggcagaccc ctctgagttc gccgcactta agcgcccgcg tttctccgct caagccttga

2820

ttgaccgagg tggcccactt gctgatgcct gtgcaaagat aaagaatcga gtgtatgagc

2880

ggtgcctcca ggcttgcgaa cctggcagtc gtgcgactcc agccacaaag gagtggctcg

2940

acaagatgtg ggaaagggtc gacatgaaga cttggcattg tacctcgcag ttccaaacag

3000

tctatattct cgggcccctt aaattcctat cagatatgat tagtgacacg ccacctcctg

3060

tccctaggag ggatcggttt agtgacagtg ccagcttgaa acaattagcg gcacagtggg

3120

atgagaaatt gaacacagtc cccccccaag ggccggttga gccggggctt agtcgagccg

3180

ccccctcgcc tgcgaatgcc cagcgagaag gcatcaaccc ctccgatgag ccaccccaaa

3240

cgccgaaccc ctctggacaa actgttgctg atgggggtgt caaaagactt gtgtccttcg

3300

gcgtccgcct tgtagggtcc accagccagc gccttatgac atgggttttt gaaatttact

3360

cccatctccc agcttttatg ctcacactat tctcgccgcg gggctctatg gttgcaggtg

3420

attggttgtt tgcaggtgtt gtgttacttg ctctcttgtt ttgtcgttct tacccagtgc

3480

tcggatgcct tcccttattg ggtgtctttt ctggttctgt acggtgtgtt cgtctgggcg

3540

tttttggttc ttggatggct tttgctgtat ttttattctc aactccaacc aacccagtcg

3600

gttcttcttg tgaccacgat tcgccggagt gtcatgctga gcttttggct cttgagcagc

3660

gccaactttg ggaacctgtg cgcggccttg tggtggggcc ctcgggcctc ctatgcgtca

3720

ttcttggcaa gctactcggt gggtcacgtt atctctggca tgttctctta cgtttatgca

3780

tgcttgcgga tttggccttt tctcttattt atgtggtgtc ccaagggcgt tgtcacaagt

3840

gttggggaaa atgtataagg acggctccag ccgaggtggc cctcaacata ttccctttct

3900

cacgtgccac ccgtgcttcc cttgtatcct tgtgcgatcg gttccaagcg ccaaaagggg

3960

ttgaccccgt acacttggca acagggtggc gcgggtgttg gcgcggtgag agccctattc

4020

atcaggcgca ccagaaacct atagcttatg ccaacttgga tgagaagaaa atatccgccc

4080

aaacagtggt tgctgtccct tatgacccca gtcaggccgt caaatgtttg aaagttctgc

4140

aggcgggggg ggccatcgta gatcagcccg tacctgaagt ggtccgtgtg tccgagatcc

4200

ctttttcggc tccattcttc ccaaaagttc cagtcaaccc agattgcagg gttgtggtgg

4260

attcggacac tttcgtggct gcagtccgct gtggttactc gacaacgcaa ctggtcttgg

4320

gtcaaggcaa ctttgccaag ttgaacaaca cccctctcaa gaattccgtt tccaccaaga

4380

cgattggagg ggcctcttac acccttgccg tggttcaggt gtccgtgtgg actcttgttc

4440

attttgtaat cggtctttgg ttaatgtcgc ctcaagtgtg tggccgaggg acctctgacc

4500

cttggtgctc aaatcctttt tcatatccta cttatggtcc cggggttgtg tgttcctccc

4560

ggctttgtgt gtctgccgat ggagtcactc taccattgtt ttcagctgtg gcccaactgt

4620

ctggtagaga ggttgggatc tttattttgg tgtttgtctc tttaatcgcc ttggctaacc

4680

gcctagctct taagtctgac atattagtgg tatttctggc actttgtgct tatgcttggc

4740

ccatgagctc ctggctaatc tgtttctttc ctatactctt gaggtggatc accctccacc

4800

ctcttaccat gctttgggtg cattcgttct tagtattctg tttgccagcc gccggtgtcc

4860

tgtcaatagg ggttactggc tttctttggg cgattggtcg tttcacacaa gtcgccggaa

4920

ttatcacacc ttatgacatt catcaataca cctccgggcc acgcggtgcg gctgctgtag

4980

caacggcccc agagggtact tacatggcag ccgtccggag ggccgccctg accggacgga

5040

ctttaatttt taccccatct gcagttgggt ctctccttga gggcgctttc aggacccaca

5100

agccctgtct caacaccgta aatgtcgtag gttcttccct cggttctgga ggggtcttca

5160

ctatcgacgg cagaaagact gtcattactg ctgcccatgt attgaacggt gacaccgcta

5220

gggtcaccgg cgactcctat aatcgcatgc acacttttaa aaccaatggt gattatgcct

5280

ggtcccatgc tgacgattgg cagggccctt ctcccatagt caaagtcgcg aagaggtatc

5340

gcggccgcgc ttactggcaa acatcgactg gtgtcgaacc aggcatcatc ggggaagggt

5400

tcgctttctg tttcaccaat tgtggcgatt caggttcacc tgtcatctct gaagctggcg

5460

acctcatcgg gatccatact ggttcaaata aacttggatc tggacttgtg accgcccctg

5520

acggggaaac ctgctccatc aaagagacca aactttctga cctatctagg tactttgcag

5580

gtccaagcgt ccctctcgga gacataaagt tgagtccagc tatcatccct gatgtggcct

5640

ctgtcccgag tgacttggca tcacttcttg cttccgtgcc tgtgatggag ggcggccttt

5700

cgaccgttca acttctgtgt gttttcttcc ttctttggcg catgatgggc catgcctgga

5760

cccccgtcgt tgctgtgggc ttctttttgc tgaacgaaat cctcccagca gtcttagtcc

5820

gcgctgtgtt ttcttttgca ctctttgtgc ttgcatgggt caccccctgg tctgcacagg

5880

tgctgatgat cagactcctc acggcagcac tcaatcgtaa caggttttcc ttggtctttt

5940

acgcactcgg gggcgtcgtc ggcttggctg ctgagattgg gacttttgct ggtaaactga

6000

ctgaactgtc ccaggccttg tccacatact gcttcttacc tagggttgct gccatgacta

6060

gttgcgttcc catcatcatc atcggtgggc tccacaccct tggtgtgatt ctgtggctgt

6120

tcaaataccg tggtctccac aacatgctgg tcggtgatgg gagtttctca agcgccttct

6180

ttctgcggta ttttgcagaa ggcaatctaa ggaaaggcgt ttcgcagtct tgtggcatga

6240

gtaatgaatc tttaacggct gccctggcct gtaagttgtc acaggctgac ctagattttc

6300

tgtccagcct gacgaacttc aagtgctttg tgtctgcctc aaacatgaaa aatgctgctg

6360

gccagtacat tgaagcagcg tacgccaagg ccctgcgtca ggagttagct tctctagtcc

6420

aagttgataa aatgaaagga gtcctgtcca agctcgaagc ttttgctgaa acagcaaccc

6480

catccctgga cacaggagat gtgattgttc tactcgggca acatcctcac gggtccgttc

6540

ttgacatcaa tgttgggact gaaaggaaga ccgtgtcagt gcaagagacc cggagcctag

6600

gcgggtctaa attcagtgtc tgcaccgttg tgtccaacac accagtcgac accttgaccg

6660

gcatcccact tcaaacgccg accccactct ttgaaaatgg cccgcgccac cgcggtgagg

6720

atgacgacct taaagttgag aggatgaaga aacactgcgt ctccctcggt ttccataaca

6780

tcaatggcaa aatttactgc aaggtctggg acaagtccac cggagacacc ttctacacgg

6840

atgattcccg gtatacccaa gactatgcct ttcaggacag atcggctgat tacagagaca

6900

gagattatga gggtgtgcaa actgcccctc aacaaggatt tgacccgatg tctgaaaccc

6960

ccgttggtat tatcgtgatt ggcggtgtca cgtacaacag gtacttagct aaaggcaagg

7020

aggttttgat ccccaaacct gataaccatc tcgaggccgc taggctttcc ctcgagcaag

7080

ccctcgctgg gatgggccaa acttgtgatc ttacggctgt cgaggtggag aagttgaagc

7140

gcattatcag tcaactccaa ggcttgacca ctgagcaggc tttaaactgt tagccgccag

7200

cggcttgacc cgctgtggcc gcggcggctt agttgtgaca gaaacggcgg tgaagattgt

7260

gaaataccac agtagaactt tcaccttggg tcctctagac ttgaaagtca cttctgaggc

7320

ggaagtaaag aaatcaactg agcagggcca cgctgttgtg gcaaacttat gctccggtgt

7380

cgtcttaatg aggcctcacc cgccatctct cgttgatgta cttctggtgc ccggacttga

7440

cacagcaccc ggcattcaac cagggcatgg ggccggaaac atgggtgtga acggtgctat

7500

ttgggatttc gagactgcac ccactaaggc agagctcgag ttgtccaagc agataatcca

7560

ggcctgtgag gttaggcgcg gggacgcccc gaatctccag ctcctctaca agctttaccc

7620

tgttaggggg gatcctgaac ggcgcaatgg ctgtctcatc aacaccaggt tcggagattt

7680

gccctataag actcctcaag acaccaagtc cgcgatccac gcggcttgct gcctgcaccc

7740

cgatggggcc ccggtgtctg atggcaagtc tacattaggt tccaccctcc aacgtggttt

7800

tgagctttac gtccccacag tgccttacag tgttttggag taccttgatt cacgccctga

7860

cacccccctc atgtgtacca aacatggcac ttctgaggct gctgcggagg acctccaaaa

7920

atacaacctg tccactcaag gatttgtcct gcctggagtc cttcgtttag ttcgcagatt

7980

cattttcggc catatcggaa aggcgccacc gttgtacctc ccatcaacct atcctgccaa

8040

aaactccatg gcagggatta atggccaaag gtttccgaca aaggatgtcc agagcatacc

8100

tgaaattgac gaaatgtgcg ctcgcgccgt caaagagaat tggcagactg tgacgccttg

8160

caccctcaag aagcagtact gttccaaacc caaaactaga accatcctgg gcactaacaa

8220

cttcattgcc ttggcgcaca gatcagcact cagtggtgtc acccatgcgt tcatgaagaa

8280

agcctggaaa tctccaattg ccttgggaaa gaacaaattt aaggagttgc actgtactgt

8340

cgccggcagg tgccttgagg ccgacttggc ttcctgtgat cgcagcaccc cagccatcgt

8400

aaggtggttt actgctaatc ttttgtatga acttgcaggg tgtgaggagt acttgcctag

8460

ctatgtgctc aactgctgtc atgatctcgt ggcaactcag gatggcgctt ttacaaagcg

8520

tggtggtctg tcgtctgggg accccgttac cagtgtgtcc aacactgtgt actcactggt

8580

gatttacgcc cagcacatgg tgctgtcagc actgaagatg ggccacgaaa ttggcctcaa

8640

gttcctcgag gaacaactca agttcgagga ccttattgaa attcagccca tgttggtgta

8700

ctctgatgac ctcgtcttgt atgctgagaa gcccaccttt cctaattacc actggtgggt

8760

cgagcacctt gatttgatgc tgggtttcaa gacggaccca aaaaaaacta ttataactga

8820

caaacccagc tttctcggct gcagaattga ggcagggcgg cagttagtcc ccaatcgcga

8880

ccgcatcctg gccgcccttg cataccacat gaaagcgcag aacgcttcag aatattacgc

8940

gtctgctgcc gcaatcctga tggattcatg tgcttgtatt gactatgacc ctgagtggta

9000

tgaggatctc atctgcggca ttgcccggtg cgctcgtcaa gatggctata gttttccagg

9060

cccgccattt tttatgtcca tgtgggaaaa gctgaaaagt cacaatgaag ggaaaaaatt

9120

ccgccactgc ggtatctgtg atgccaaggc tgaccatgcg tccgcctgcg ggcttgattt

9180

gtgtttgttc cattctcact ttcatcagca ttgcccagtc atgcttagct gtggtcatca

9240

cgctggttta aaagaatgcc cgcagtgtca gtcaccagtc ggggctggca agtcccctct

9300

tgacaccgtg ttgcaacaaa tcccgtataa accaccccga actgtcataa tgaaggtgaa

9360

cagtaaaaca acagcccttg acccggggag gtatcagtcc cgtcggggtc ttgtcgcagt

9420

caagagggga attgcaggca atgaggttga tctcgctgac ggggactacc aggtggtacc

9480

cctcctgccg acctgcagag acataaatat ggtgaaggtg gcttgcaatg tactactcag

9540

caaattcata gtagggccac ccggctccgg aaagactacc tggttgctga accaagtcca

9600

agatgatgat gttatctata cacccaccca tcagaccatg tttgatatag tcagtgctct

9660

taaggtttgc aggtattcaa tcccaggagc ctcaggactc ccttttccac cgcctgccag

9720

atccggacca tgggtcaggc ttatcgccag cgggcacatc cctggccggg tctcatacct

9780

tgacgaggcc gggtattgca atcatctgga catcctcaga ctgctttcca aaacacccct

9840

cgtgtgtttg ggcgatcttc aacaacttca ccctgtcggc tttgattcct gttgttatgt

9900

ttttaatcag atgccacaca aacagctgac caccatttac aggttcggcc ctaatatctg

9960

tgccgccatc cagccttgtt acagggagaa gcttgaatcc aaggcaagaa acaccagggt

10020

ggttttcacc actcaacctg tggcctatgg tcaagtgctg acaccatttc acaaggatcg

10080

cgtagactca gccataacca tagattcatc tcagggtgcc acctttgacg tcgtgacgtt

10140

acacttgccg acgccaaaat ccctgaacaa atcccgagca cttgtggcta tcacccgggc

10200

gaggcatggg ctgttcatct atgatcctca taaccaactt caggagttct tcaacctaac

10260

ccctgagcgc acggattgca accttgtgtt caaccgtggg gatgaactgg tcgtcctgga

10320

tccagataat gcagtcacga ccgtagccaa ggccctgggg gccggcccgt ctcaattccg

10380

ggtgtccgat ccgaggtgca agtccctctt ggccgcttgc tcagtcagcc tggaaggtgg

10440

ctgcatgccg ctgccgcagg tggcccataa tttggggttt tatttctccc cagacagtcc

10500

ggcgtttgca cctctgccaa aagaactggc accacattgg ccggtggtta cctgccagaa

10560

caaccgggca tggcctgatc gactcgttgc cagcatgcgc ccgattgacg cccgttacag

10620

caagcctatg gttggtgcgg ggtatgttgt tgggccgtcc acctttcttg gaacccctgg

10680

tgtagtgtca tattacctca cactgtacat caagggtgag ccccaagccc taccagaaac

10740

actcgtttcg acagggcgta tagccacaga ctgccgggaa taccttgata cagctgaaga

10800

agaagcagct aaagaactcc ctcatgcttt cataggtgat gtcaaaggca ccacagtagg

10860

ggggtgtcac cacattacat caaaatactt acccaggtcc ctacccaagg actctgttgc

10920

agtggttggg gtgagctcac ctggcaaggc tgccaaagcg gtgtgcactc tcactgatgt

10980

gtacctccct gaccttcggc cgtatctgca accagagaca gcatcaaaat gctggaaact

11040

caaattggac ttcagggacg tcagattgat ggtttggaaa ggggccactg cctatttcca

11100

attggaagga ctcacatggt cggcattacc cgactatgcc aggttcattc agctacccaa

11160

agatgccgta gtatacattg acccgtgtat aggaccggca acggccaacc gcaaggttgt

11220

gcgaaccact gactggcgag ctgacctggc ggtaacaccg tatgattacg gtgcccagac

11280

tattctgaca acagcctggt tcgaggacct cggaccacaa tggaaaatcc tggggctgca

11340

gccctttaag cgggcatttg gcctcgaaaa cactgaagac tgggcaatcc tcgcacgccg

11400

tatgagtgac ggcagagatt acaccgacta caactggact tgtgttcgag aacgcccgca

11460

cgctatctac gggcgcgctc gtgaccacac gtatcatttc gcccctggca cagaattgca

11520

ggtagaactg ggcaaacccc ggctgccgct tgagtgagta ctgcggctcg aaagccatgc

11580

aatggggtca ctgtggagta agatcactca gctgtttgtg gatgccttca ctgaattcct

11640

tgttagtgtg gttgacattg ttatcttcct tgccatacta ttcgggttca cagtcgcagg

11700

atggttactg gtctttctac tcagagtggt ttgctccgcg attctccgtt cgcgcactgc

11760

cattcactct cccgaattat cgaaggtcct atgaaggcct gctgcccaat tgcagaccgg

11820

atgttccaca attcgcaatc aagcatccat tgggcatcct ttggcacatg cgagtttccc

11880

atctaattga tgaaatggtc tctcgtcgtg tctaccaaac catggaacat tcaggccaag

11940

cggcctggaa gcaggcagtt gctgaagcca cacttacaaa gctatcgcag cttgacatgg

12000

tcacccactt ccagcatctt gccgcagtgg aagcggattc ttgtcgcttc ctcagttcgc

12060

gactcgtgat gctaaaaaac cttgctgtcg gcaatgtaag tctgctgtac aataccacat

12120

tggaccgtgt tgaactcatt ttccccacgc caggtgcgag gcccaaattg accgatttca

12180

gacaatggct catcagtgtt catgcttcta ttttctcttc tgtagcttcg tcagtcactt

12240

tgtttgtagt gctttggctt cgaattccag tgctacgcta tgtttttggt ttccattggc

12300

ccacggcaac acgtcgttcg aactgaccat caattacacc gtatgcaagc cttgcattac

12360

tagacaagct gctgcccaac gactcgagcc tggtcgtaac atgtggtgca aaattgggta

12420

cgatcactgt gaagagcgtg atcacgatga gttgtcaatg gccatcccgt ccgggtacga

12480

caacactaaa cttgaaggct attatgcttg gcttgccttc ttgtcttttt cttatgcggc

12540

ccagtttcat ccagagctgt ttggaatagg gaatgtgtca cacgttttcg tggacaagca

12600

gcatcaattc atctgtgccg agcatgatgg gcaaaattca accataccca acccacacaa

12660

catctctgca ttgtatgcgg tgtattatca ccaccaagtg gacgggggca actggttcca

12720

tctagaatgg ctgcggccat tcttctcctc ctggttggtg ctcaatattt catggtttct

12780

gaggcgttcg cctgcaagcc ctgtttctcg acgcatctat cagatattaa aaccaacaca

12840

accgcggctg ccggtttcat ggtccttcaa gacattagct gttcccaacc ccatgagaga

12900

tcgggcacgc ggtcgtccgt tcgcgggaag ccatcccaat gtcgtacagc catcggcacc

12960

cccctgtaca tcacgctaac ggcgaatgtg actgatgaat cttatttgta caatgctgat

13020

ttattgatgc tttctgcttg cctgttttac gcctcggaaa tgagtgagaa gggcttcaaa

13080

gtcatttttg gaaacgtctc tggtgttgtt tccgcgtgcg tcaatttcac agactatgtt

13140

acccatgtga ctcagcatac ccaacagcat catctggtag tcaaccatat ccggttgctg

13200

cactttatga caccgtcaac gatgaggtgg gccacaacca tcgcttgttt gctcgccatt

13260

ttattggcga tatgagatgt tttcccagat tggggcgttt tttgactcct cactcttact

13320

tctggtggct ttctttgttg tgtaccggtt tatcctggtc ctttgccgat ggcgacggca

13380

acagcccgac ataccaatac atatataact tgacgatatg tgagctgaat gggaccacct

13440

ggctgtccaa caatttttac tgggcagtcg aaacttttgt gctttacccg gtggtgaccc

13500

acatcgtctc actgggtttc ctcacaacta gccatttctt tgacgcgctc ggcctcggag

13560

ctgtgtccgc tgtgggattt gctggcgggc ggtatgtcct cagcagcata tacggcgttt

13620

gtgcattcgc agcgctcgtg tgtttcatca tccgtgttgt taaaaattgc atggcgtgcc

13680

gctatgcccg tactcggttc accaacttca ttgttgacga ccgaggaaga attcacagat

13740

ggaagtcccc aatagtggtg gaaaaaatgg gtaaggccga agttggcagc agtctcgtca

13800

ccatcaagca tgttgttctc gaaggggtta aagctcaacc cttgacgagg actccggctg

13860

agcaatggga agcctagatg acttttgcta tgattccgcc gctacacaaa agcttctact

13920

agctttcagt atcacataca cacctgttat gatatacgcc cttaaggtat cacgcggccg

13980

acttttgggg cttttgcaca tcttgatttt cctgaattgt tccttcacat tcggatacat

14040

gacccatgag cgtttccatt ccaccaatcg tgtggcgctt actatgggag ctgttgtcgc

14100

tctcctgtgg ggcatctata gcctcacaga atcatggaag tttattactt ccaggtgcag

14160

attgtgttgc ctaggccggc aatacatcct ggcccctgcc caccacgtag aaagtgccgc

14220

aggactccat tcaatcccgg cgtctggcaa ccgagcatac gccgtgagaa agcccggatt

14280

aacatcagtg aacggcactt tagtaccagg gcttcggagc ctcgtgttgg gcggcaagcg

14340

agctgttaaa cgaggagtgg ttaacctcgt caaatatggc cggtaaaaac cagagccaga

14400

agaagaagaa aaatacagct ccaatgggga atggccagtc agtcaatcaa ctgtgtcagt

14460

tgctgggcac gatgatgaga tcccagcgcc agcgatccaa ggggggacag gccaaaaaga

14520

aaaagcttga gaagccgcat ttccccctgg ccgctgaaga tgatgtccgg caccacctca

14580

cccaaaccga acgttccctt tgtctgcaat cgatccagac agcctttaat caaggtgcgg

14640

gaactgcgtc gctttcatcc agtgggaagg tcggttttca ggttgagttt atgctgccgg

14700

ttcctcatac ggtgcgcctg attcgcgtga cttccacatc cgccagtcag ggtgcaaatt

14760

aatttgatag tcaggtgaat ggccacgatt ggcgtgtggc ctctgagtca cctattcaat

14820

tagggcgatc acatgggggc tagacttaat caggcgagaa ccatgtgacc gaaatt

14876

<210> 4

<211> 15043

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> кДНК от вируса свиного репродуктивно-респираторного синдрома

<400> 4

atgatgtgta ggggagatac cctacacaca caacactcct agtgtttgtg taccttggag

60

gcgagggtac agccccgccc cactccttgg cccctgtttc agcccaacag ggacccttct

120

ccctcggggc gagtgtgccg cctgctgctc tctcgcagcg ggaaggacct cccgagtatt

180

tccggagagc acctgcttca cgggatctcc accctttaac catgtctggg atgttctccc

240

ggtgcatgtg caccccggct gcccgggtat tttggaacgc cggccaagtc ttttgcacac

300

ggtgtctcag tgcgcggtct cttctccctc tagagcttca ggactctgac ctcggcgctg

360

ttggctgttt ttataagcct agggacaagc ttcattggaa ggtccccatg ggcatccctc

420

aggtggagtg cactccatcc ggatgctgtt ggctcgcagc catttttcct atagcgcgta

480

tgacctccgg caatcacaat ttctcccagc gacttgtgaa agttgctgat gttttgtacc

540

gcgacggttg tctaacacct caacaccttc gtgaactcca agtttacgaa cgcggctgca

600

actggtaccc gatcacgggg ccagtgcccg ggatgggttt atttgcgaac tccgtgcacg

660

tgtctgacca gccgttcccc ggcgccactc atgtgttaac caactcacca ttgcctcagc

720

aggcttgtcg acagccgttc tgtccatttg aggtggctca ttctaacgta tacaggtggg

780

gggagtttgt gatctttgtg gactctcctt ccggcggtcg atcgcgtatg atgtggacac

840

cgggatccag tgactcggct gccctagaag cgttaccgtc cgcattagaa cgtcaggccg

900

gagtccttgt tcgaagtttc cctgcccacc accccgtcga ccttgctgac tgggagctta

960

ccgaatcccc tgaacacggt ttttccttca gcacatttca ttcttgtggt taccttgctc

1020

aaaaccccga aagttttgac ggtaagtgct ggctttcctg cttcctgggc ttgccgaccg

1080

gcgtgcggcg ttgtgaggaa tttttagctg gcgcctttgg ttatcaaacc aaatgggggg

1140

tgcacggaaa gtacctccaa cgtaggcttc agattaacgg ccttcgcgct gtggtcgatc

1200

ctgacggtcc catccatgtt gaagcacttt cttgtcccca gtcttggatc aggcatctga

1260

cttttgacga tgatgtcacc ccgggattcg ttcgcttaac atcccttcgc attgtgtcaa

1320

atacagagac cacctcctcc cagatctttc ggttcggggc gcataagtgg tacggcgctg

1380

ccggcaagcg ggctcgcgct aagcgtgctg caaagagtga gaagaaatcg gttcccaccc

1440

ccgagactgt tccgctgacc cccgcctgtg gagtcaccat ctattcccca ccggcagacg

1500

ggtcctgtgg ttggcatgcc cttgccgcca tattgaacca gatgatgaac ggtgacttca

1560

cgtccccttt gcctcagtac aacaggccag aggatgattg ggcctctgac aacgaccttg

1620

ctcaagcaat tcaactcctg cgactaccgg ctaccatagt tcggactcgt gcctgtccta

1680

atgccaggta ccttataaag ctgaatgggg ttcactggga agtggaggag aggctgggga

1740

cggctctttg ctccctttct cgtgaatgtg tggttggtgt ttgctctgaa ggctgtgtcg

1800

catcgcctta tccaacagac ggggtaccag agcgtgcact cgaggccttg gcatctgctt

1860

acagactacc ctccgattgt gtttgctctg gtatttctga cttccttacc gaaccgcctc

1920

ctcaggaact ctggactctc gacaggatgt tgacctctcc atcacctgag cggtccggct

1980

tctccagttt gtataaatta ctgctcgagg ttgtccctca aaaatgcggt gctacggaag

2040

gggctttcac ctatgctgtt gagagaatgt tgagggactg ccgaagctcc aaacaagcca

2100

tggctctttt ggcgaaaatt aaagttccgt cttcaaaggc ttcatctgtg tccctggacg

2160

agtgtttccc tacgggtgct ccaggtgatt ctgagccagc acttcaggag gggcctcgaa

2220

gcctcggtgc tgccgttgtc ccatgcctgc ctggtgcaaa aggattcgag gaagcagccc

2280

cggaaggggt tcatgagaat ggctacgatg ccacccaccc tgcgctcttt gctgagcgtt

2340

ctaccaacga gcaggcacga atggcagccg gtaggcaatt ggggttcagc gatcgtgatt

2400

tggcagtcaa gaacattaat gaaggtgatt cggtctcggt tggtccaaca gaaggcacac

2460

tcaatggtca gggagacgaa ccactggatt tgtcccgacc agcactgacc actacaacga

2520

cccttatggg agaacgagaa cccgacaacc ctggttctga tgccggtgct tcccctgata

2580

ctgttcgaga attttccttg acggggctca cattccgtca tgttgagcac tgtggtacgg

2640

agtcgggtga cagcgattcg cctttggatt tgtctgacac gcagacccag gaccaacctt

2700

tagatctatc cctggcctct tggccagtga aagctaccgc atctgacccc ggctgggttc

2760

acggtaggcg tgagcctgtc tttgtgaagc ctcgaaatgc tttctctgat ggcgattcag

2820

tccttcagtt tggagggctt tctgaacccg gctctgtcat cgagcctgac cagataaaag

2880

gtgccccggt gactgacacc cctaccgacc taacgacttc tgacgagtcc tttcccgcag

2940

gtgatcctct tgaactcgct gagcttaagc gcccacagtt ctccgtacag gccttaattg

3000

atcgaggggg cccacttgct gcattttatg caaaaataaa gaatcgggta tatgaacagt

3060

gcctccaagc ctgtgagccc ggtagtcgtg caaccccggc cactaaggag tggctcaaca

3120

aaatgtgggg tagggtagac atgaagactt ggcgttgtac ttcgcagttc gaagctggtc

3180

gctctcttgc gtcccttgaa ttcctccctg atatgatcaa cgacactcca ccccctgttc

3240

ccaggaataa ccgggtcagt gacgacgccg gcttgaagca actggtagca caatgggata

3300

agaaattgag cgcacccccc cccccaaaac tggttgggcc agtgatcgac cagagcgccc

3360

tcccaccagc aggtgtccaa caggaaaata tcaccccttc cgatgggccg cctcaagcgc

3420

cggattttcc tggtcgagcg ggtacaggca gaggttggaa aggctttgtg ctttccggca

3480

ctcgtcttgc agagtctgtt agtcagcgcc ttatgacgtg ggtttttgaa gtctactccc

3540

atctcccagc ttttatgctc gcacttttct cgccacgggg ctctatggtt ccaggtgatt

3600

ggttgtttgc aggtgttgtg ttacttgctc tcttgctctg tcgttcttac ccagtactcg

3660

ggtgtctacc cttactgggt gtattttctg gttctctacg gtgtgttcgt ctgggtgttt

3720

ttggttcttg gatggctttt gctgtatttt tattctcaac tccagccgat ccagtcggtt

3780

cttcttgtga ccacgattcg ccgaagtgtc atgctgagct tttggctctt gagcagcgcc

3840

aactttggga acctgtgcgc ggccttgttg tgggcccctc gggtctctta tgcgtcattc

3900

ttggcaagtt actcggtggg tcacgttatc tctggcatgt tttcttacgt ttatgcatgc

3960

ttgcggattt ggccctttct cttgtttatg tggtgtccca ggggcgttgt cgcaggtgtt

4020

ggggaaagtg tataaggaca gctcctatgg aggtggccct caacgtattc cctttttcgc

4080

gtgccacccg ctcctctctc gtgtccttgt gtgatcgttt tcaaacgcca aaaggggttg

4140

atcctgtgca cctggcaacg ggttggcgcg ggtgctggtg cggtgagagt cccatccatc

4200

aatcacatca aaagcccata gcttatgcca atttggatga aaagaaaata tctgcccaaa

4260

cagtagtcac tgtcccatat gatcccagtc aggctgtcaa gtgcctaaaa gttttgcagg

4320

cagggggggc catcgtagac cagcccacac ctgaggtcgt tcgtgtgtcc gagatcccct

4380

tctcagcccc atttttccca aaagttcccg tcaacccaaa ttgccgggtt gtagtggatt

4440

cagacacttt cgtggccgca gtccgatgcg gttactcaac agcacaactg gttctaggcc

4500

gtggtaactt tgctaagtta aatcaggccc ctcccaaaaa ctctgccctc accaaagcaa

4560

ctggtggggc ttcttacacc cttgctgtgg ctcaagtgtc tgtgtggact cttgttcatt

4620

tcatccttgg catttggctc acaacacctc aagtgtgtgg acgagggacc gtcgacccat

4680

ggtgtacaaa ccccttttcg taccccactt acggccccgg agttgtgtgc tctgctcgac

4740

tttgtgtgtc cgccgacggg gttaccctgc cgttgttctc tgccgtggca cagctctccg

4800

gtagggaggt agggatcttc attttggtac tcgcctcttt gggtgctctt gtccaccgcc

4860

tggctcttaa ggcagacatg ttaatggtct ttttggcttt ttgtgcttac gcctggccta

4920

tgagctcctg gttgatttgc ttcttcccca tactcttgaa gtgggtcaca cttcaccccc

4980

tcaccatgtt ttgggtacac tcatttttag tgttttgtct gccagcagcc ggtatcctct

5040

cactgggagt gactggtctt ctctgggcaa ttggccgctt tacccaggtt gccggaatta

5100

ttacacctta tgacatccat cagtacacct ctgggccacg tggtgcggcg gctatagcca

5160

cagcccctga aggcacttac atggccgccg tccggagagc cgctttaact gggcgaactt

5220

tgatcttcac cccgtcagca gtaggatccc ttcttgaggg agcctttagg acccgtaaac

5280

cctgcctcaa caccgtgaat gtcgtgggct cttcccttgg ttcaggaggg gttttcaccg

5340

ttggtggaaa gaaaataatc gtcaccgcag cccacgtgct gaatggtgac acggctagag

5400

tcaccggtga ctcctacaac cgcttgcaca ccttcaatac taatggtgat tacgcctggt

5460

ctcatgctga agactggcag ggcgttgccc ctgcagtcaa cattgcgaag gggtaccgcg

5520

gccgcgccta ttggcaaacg tcaaccggtg tcgagcccgg agttgttggg ggagggtttg

5580

ccttctgttt tactaactgc ggagactcgg ggtcacctgt tatctcagaa tctggtgatc

5640

ttattgggat tcacaccggc tcaaacaaac tcggctctgg tcttgtaaca acccctgaag

5700

gggaaacctg cactattaaa gaaaccaagc tctctgacct ttctaaacac tttgcaggcc

5760

caagcgttcc cctcggggac atcaaattga gtccggccat tatccctgac gtgacatcca

5820

ttccgagtga cttggcgtcg ctcttgactt ctgtccctgt aatggaaggc ggcctctcga

5880

ccgtccaact tttgtgtgtc tttttccttc tctggcgcat gatgggccat gcctggacac

5940

ccgttgttgc cgtgggcttc ttcctgctga atgaaatcct cccagcagtc ttggtccgga

6000

ctgtgttttc ttttgcactc tttgtgctgg catgggcaac cccttggtct gcacaggttt

6060

taatgatcag gcttctcacg gcatctctca atcgtaacag gtcttcttta gtgttctacg

6120

catttggagg catcgtcggc ttggccgttg aaatcgggac cttctctggc agattgcctg

6180

cattgtctca agccctttcg acatattgct ttttacccag agcccttgtc atgaccagct

6240

gtgtccccac cattatcatt gggggattcc atatcctcgg tgtaatcttg tggttgttca

6300

aataccggta cctccacaac atgctggtcg gtgatgggag tttttcaagc gcctttttcc

6360

tacggtattt tgctgaaggc aatctcagga agggtgtctc aaagtcttgt ggcatgagta

6420

acgagtccct aacggctgca ctggcctgca aattatcaca ggctgacctt gattttctat

6480

ccagcttgac gaacttcaag tgctttgtat ccgcttcaaa catgaaaaat gctgccggcc

6540

agtacattga agcagcgtat gccaaggccc tgcgccaaga gttggcctcc ctagttcaag

6600

tcgacaaaat gaaaggagtc ttgtccaagc tcgaagcttt tgctgagaca gccactccgt

6660

cccttgacgc gggtgacgtg atcgttcttc taggacaaca tcctcacggg tctgttctcg

6720

acatcaatgt gggggctgaa aggaaaactg tatctgtaca agagacccgg agtctaggcg

6780

gctccaaatt cagcgtctgc actgtcgtgt ccaacacacc catcgatgcc ttaactagta

6840

ttccactcca gacaccaacc ccactcttcg agaatggtcc gcgtcatcgt ggcgaggagg

6900

acgatctcaa agttgagagg atgaagaaac actgtgtgtc cctcggcttt cacaacatca

6960

atggcaaagt ttactgtaaa atttgggaca agtctaccgg cgacaccttc tacacagatg

7020

attcccggta tacccaggac tatgcttttc aagacagatc agtcgattac agggacaggg

7080

actatgaggg cgtacaaacc gtctcccatc agggattcga tccaaagtcc gaaacccctg

7140

tcggcactgt tgtgatcggc ggcattacgt ataacaggta tctgacaaag ggtaaagaaa

7200

ttctggttcc caggcctgac aactgccttg aagctgctaa attgtcctta gagcaagctc

7260

tcgccgggat gggtcagact tgcgaactta cgaccgccga gatggaaaag ttgaagcgca

7320

tcattagtca actccaaggt ttgaccactg aacaagcttt aaactgctag ccgccagcgg

7380

cttgacccgc tgtggccgcg gcggcttagt tgtgactgaa acggcggtaa aaattgtgaa

7440

ataccatagt agaactttta ccttaggctc cttagacctg aaggtcgctt ccgaggtaga

7500

ggttaaaaag tcagctgagc aaggccacgc tgttgtggca aacttatgct ccggtgtcat

7560

tttgatgaga ccccacccac cgtcccttgt tgatgttctt ctgaaacccg gacttgacac

7620

aaaacccggc attcaaccag ggcatggggc cgggaacatg ggcgtggatg gttctacttg

7680

ggattttgag accgcgccca caaaggcaga gcttgagtta tcgaagcaga taatccaagc

7740

atgtgaagtt aggcgcggag acgctcccaa cctccaactc ccttacaaac tttaccctgt

7800

cagggggaac cctgagcggc atgacggccg tctcactaac accaggtttg gagatttgcc

7860

ttacaagacc cctcaggaca ctaaatccgc aatccacgcg gcttgttgcc tgcatcccaa

7920

tggggtcccc gtatctgatg gcaaatctac actaggtacc actcttcaac atggtttcga

7980

gctttatgtc cctaccgtgc cctatagtgt catggagtac cttgattcgc gttctgacac

8040

ccctctcatg tgtactagac atggcacttc caaagctgcc gcagaggacc tccaaaagta

8100

tgatttatcc acccaggggt ttgtcctgcc tggggtccta cgccttgtgc gcaagtttgt

8160

ttttggccat gttggtaagg caccgccatt gttccttcca tcaacctacc ccgcaaaaaa

8220

ctccatggca ggggtcaatg gccaaaggtt tcctacaaaa gatgttcaga gcatacctga

8280

agttgatgaa atgtgtgctc gcgccgtcaa ggagaattgg caaactgtga cgccttgtac

8340

tcttaagaaa cagtactgct ccaagctcaa aaccagaacc atcctgggca ccaacaattt

8400

tattgcccta gcccacagat cggcgctgag tggcgtcacc caggctttta tgaagaaggc

8460

ctggaattcc ccaattgcct tggggaaaaa taaattcaaa gagctgcact gtgttgtcgc

8520

cggcaggtgc cttgaggctg atctggcctc ctgtgaccgc agcacccctg ccgttgtaag

8580

atggtttgtt gccaacctcc tgtacgaact cgcggggtgt gaagagtatt tgcctagcta

8640

tgtgctcaat tgctgccatg atctcgtagc aacacaggat ggtgccttta cgaaacgcgg

8700

tggcctgtcg tctggggacc ccgtcactag cgtgtccaac actgtgtatt cactgataat

8760

ttatgcccag catatggtgt tatcagcttt gaaaatgggt cacgaaattg gtctcaagtt

8820

ccttgaggaa cagcttaaat tcgaagacct tcttgaaatt cagcccatat tggtgtattc

8880

tgatgacctc gtattgtatg ccgaaagacc aacttttccc aactaccact ggtgggttga

8940

gcatcttgac ctaatgctgg gcttcaaaac ggacccggca aaaaccgtca taaccgacaa

9000

gcccagcttc ctcggctgta gaattgaggc agggcggcag ctagttccca atcgcgaccg

9060

catcctggct gctctcgcat accacatgaa ggcgcagaac gcctcagagt attatgcgtc

9120

tgctgctgca atcctaatgg attcatgtgc ttgcattgac cacgaccctg agtggtatga

9180

ggacctcatt tgcggtattg cccggtgcgc ccgccaggat ggttacagct tcccaggtcc

9240

accatttttc atgtctatgt gggagaaatt gagaagtcat aatgagggga agaaattccg

9300

ccattgcggc atctgcgacg ccaaagccga ccatgcgtcc gcttgcgggc ttgatttgtg

9360

tttgttccat tcgcactttc atcaacactg cccagtcact cttaactgcg gtcatcatgc

9420

cggttcaaag gaatgttcgc ggtgccagtc acctgttggg gctggaaaat cacctcttga

9480

tgccgtgcta gaacaaattc catacaaacc tcctcgcact gtcatcatga atgtgaacag

9540

tggaacgacg gcccttgatc cagggaggta ccagtcccgt cgtggcctcg ttgcagttaa

9600

gaggggtatc gcaggtaatg aagttgatct ccctgatgga gactatcaag tggtgcctct

9660

tttaccgact tgcaaagaca taaacatggt gaaggtggct tgcaatgtgc tgctcagtaa

9720

gttcatagtg gggccgccag gttccgggaa aaccacctgg ctattgagtc aagttcagga

9780

cgatgacgtc atttacacac ctacccacca gaccatgtat gacatagtta gcgccctcaa

9840

ggtttgtagg tattctatcc caggagcctc gggacttcct tttccgccac ctgccagatc

9900

cgggccgtgg gttaggcttg ttgctagcgg ctacgtccct ggccgagtgt catacctcga

9960

tgaggctgga tattgcaatc acctggacat tcttagactg ctttctaaaa caccccttgt

10020

ttgtttgggt gacctccagc aacttcaccc tgtcggcttt gattcctact gttatgtgtt

10080

tgatcagatg cctcagaagc agttgactac catttataga ttcggtccta acatctgtgc

10140

agccatacag ccttgttaca gggagaaact cgaatccaag gctaggaata ccagggtggt

10200

cttcaccacc cgacctgtgg cctttggcca ggtgctgaca ccataccata aagatcgcgt

10260

cgactccgcg ataaccatag attcgtcaca gggggccacc ttcgacattg taacgttgca

10320

tttgccatca ccaaaatcct taaacaaatc ccgagcactt gtagccatca ctcgggctag

10380

gcacgggttg ttcatttacg atccccataa ccagctcagg gagtttttca acctgacccc

10440

tgagcgtact gaatgcaacc tcgtgttcag ccgtggggat gagctggtgg ttctgaacgc

10500

ggacaatgca gtcacgactg tagtaaaagc cctagaggtg ggttcatccc agtttcgagt

10560

gtcagacccg aggtgtaaat ctctcttagc tgcttgttca gccagtctgg aggggagctg

10620

tatgccgtta ccccaagttg ctcataacct agggttttat ttttcccctg acagtccggc

10680

atttgcaccc ctgccaaaag agttggcacc acattggcca gtagttactc accagaataa

10740

tcgggcatgg ccagaccggc tcgtcgctag catgcgccca attgatgctc gctacagtaa

10800

accaatgatt ggtgctggtt atgtagtcgg accatccacc tttctcggca ctcctggcgt

10860

agtgtcatac tatctcaccc tatacattag gggtgagccc caggccttgc cagaaacact

10920

cgtgtcaaca ggacgcatag ccacagattg tcgggagtat cttgatacag ccgaggaaaa

10980

tgcggcaaaa gaactccctc acgcatttat tggtgatgtg aaaggcacta cggtcggtgg

11040

gtgccatcat attacatcaa aatacctgcc taggaccttg cctaaggact ctgttgccgt

11100

ggtcggagtg agttcgcccg gcaaggctgc taaagccatg tgtaccctca ccgatgtgta

11160

ccttcctgaa ctccgaccat atctgcaacc aaagacggca tcaaaatgct ggaaactcaa

11220

gttagacttc agggacgtcc gactgatggt ctggaagggg gctaccgcct acttccagct

11280

tgaagggctc acatggtctg cgctgcctga ttacgccagg ttcatccagc tacccacgaa

11340

tgccgtcgtg tacatcgacc cgtgcatagg accggcagca gccaaccgta aagttgtgcg

11400

aaccacggat tggagagcgg acctggcggt aacaccatat gactacggtg ctcaaaccat

11460

tctgacgaca gcctggttcg aggacctcgg gccacagtgg aaaattttag gactacagcc

11520

cttcaggcga gcattaggct ttgacaacac tgaggactgg gcaattcttg cacgccgtat

11580

ggatgacggt aaggattaca ttgactacaa ctggagttgt gttcgaaacc gcccatgcgc

11640

tatccatgga cgtgcgcgtg accacaccta tcattttgct catggtacgg aattaggggt

11700

ggagctgggt aaacctcggt taccgcctga ataagacccc cttgaaccca aagcaatgcg

11760

atgggttcat tatggagcaa aatcagtcaa ttgttcgtgg acgcttttac cgaattcctt

11820

gttagcgtgg ttgatattgt catctttctt gccatattgt tcgggttcac agtcgctgga

11880

tggctcctgg tcttttttct cagagtggtt tgctccgcga ttctccgttc gcgctctgcc

11940

attcactctc ccgagttatc gaaggtccta tgagggcctg ctgcccaatt gcaaaccaga

12000

tgtcccacaa ttcgcaatca agcacccact aggtttgctc tggcacatgc gagtctctca

12060

gttaatcgac gagatggtct ctcgtcgcat ttaccagacc atggaacact caggtcaggc

12120

agcctggaag caggtagtca gtgaggccac ccttacaaag ttgtcaaggc tcgatgtagt

12180

tgcccatttc caacatttgg ctgcagtgga ggcggattcc tgcaacttcc tcagctcacg

12240

acttgtgatg ctgaaaaatt tagctgtcgg taacgtgagt gtattttaca acgccacgtt

12300

ggaccgcgtt gaactcgtct tccccacgcc aggcacgagg cccaaattga ccgactttag

12360

gcaatggctt atcagcgtgc atgcttccat tttctcctct gtggcttcat cggttacctt

12420

gttcatggtg ctttggcttc gggttccaac tctacgctat gtttttggtt tccattggcc

12480

cacggcaaca cgtcattcga gctgaccatc aactacacca tatgtatgcc ctgtcccacc

12540

agccaagcgg ctcaacaaag gctcgaaccc ggtcgtaata tgtggtgcaa gattggatac

12600

tctacgtgcg aggagcatga tcacgatgaa ctgtcgatgg ctataccacc tgggtatgac

12660

aatctcaaac ttgaaggcta ttatgcatgg ttggctttct tgtccttttc ttacgcggct

12720

caattccatc cggagttatt cggaataggg aatgtgtcgc gcgttttcgt ggacaagcag

12780

catcagttca tttgcgccga gcatgatgga cccaattcaa ccgtaaccac tggacataac

12840

atttccgcat tgtatgcggt gtactaccat caccaagttg acgggggcaa ctggtttcat

12900

ttagaatggc tgcggccgtt cttctcctcc tggctggtgc tcaatatctc atggtttctg

12960

aggcgttcgc ctgcaagccc tgtttctcga cgcatctatc agatattaag accaacacga

13020

ccgcggctgc cggtttcatg gtccttcaga acatcgactg cctctcagca gcgcagagga

13080

gtgctcccgt cataaagtca tctcaatgcc gtgaagccat tggtacccca cagtacatta

13140

cgataacagc aaatgtgacc gatgaagcgt atttgtacaa tgcagactta ctgatgcttt

13200

ctgcatgcct tttctatgcc tcagaactga gcgagaaagg ctttaaagtt atctttggga

13260

atatctccgg tgtcgtctct gcatgcgtca atttcacgga ttatgtgact catgtgactc

13320

aacacacaca acagcatcat ttggtgatcg atcacgttcg gttgctgcat ttcctgacac

13380

cgtcagtgat gaggtgggct acaaccatcg cttgcttact tgccatcctt ctggcgatat

13440

gagatgttct cacaaattgg ggtgtttttc gactctgtat tcctgctcct ggtggctttc

13500

tttgctgtgt accggcttgt cctggtcctt tgtcgatggc aacggcgaca gctcgacata

13560

ccaatatata tataatttga cgatatgcga gctgaatgga accaaatggt tgtccaacca

13620

ttttgattgg gcagtcgaga ctttcgtgct ttacccggtc accactcaca tcatctcatt

13680

gggtttcctc acaacaagcc atttttttga cgcgctcggt cttagcgctg tatccattgt

13740

aggatttgct gatgagcggt acgtacttag tggtgtgtac ggtgcttgtg cttttgccgc

13800

gctcgtgtgt tttgtcatcc gtgctgctaa gaactgtatg gcttgtcgct atgcccgtac

13860

ccggttcacc aatttcattg tggacgaccg gggggaaatc caccgctgga agtcaccgat

13920

agtggtggaa aagttgggca aagctgaagt cggtgatgct cttgtcacca tcaagcatgt

13980

cgtcattgaa ggggttaaag ctcaaccctt gacgagaact tcggccgagc aatggcaaac

14040

ctagatgact tctgcaatga tcccactgcc gcgcaaaagc ttgtgctagc cttcagtatt

14100

acatacacac ctataatgat atatgccctc aaagtgtcac gcggccggct cctggggctg

14160

ttgcacatcc tgatatttct gaactgttct ttcacgtttg ggtacatgac gtatgtgcat

14220

tttcaatcca ccaatcgtgt cgcgcttact atgggggctg ttgttgccct tttgtggggc

14280

atctatagtt ttacagaatc atggaggttt gtcacctcca ggtgcagact gtgttgccta

14340

ggccggcgat acattctggc ccctgcccat cacgtggaaa gtgccgcagg tctccattca

14400

atcccagcgt ctggcaaccg agcatacgct gtgagaaagc ccggactaac atcagtgaac

14460

ggcactctag taccaggact tcggagcctc gtgctgggcg gcaaacgagc tgttaaacgg

14520

ggagtggtta acctcgtcaa gtatggccgg taagaaccag agccagaaga aaaagcaaaa

14580

tacagctcct atggggaatg gccagtcagt caatcaactg tgccagctgc tgggtgtaat

14640

gatgaaatcc cagcgccaac ggcctagggg aggacaggca aaaaagaaaa agcctgagaa

14700

gccacatttc cccctggctg ctgaggatga cattcggcac cacctcaccc aaactgaacg

14760

ttctctctgc ttgcaatcga tccaaacggc tttcaaccaa ggcgcaggaa ttgcgtcgct

14820

ttcacccagc gggaaggtca gttttcaggt tgagtttatg ttgccggttg ctcatacagt

14880

gcgcttgatt cgcgtgactt ctacacccgt cagtcagggt gctagttaat ttgacagtca

14940

ggtgaatggc cgcgattgac gtgtggcctc taagtcacct attcaattag ggcgatcaca

15000

tgggggttac acttaattag gcgagaacca tgtgaccgaa att

15043

<---

Данное изобретение относится к биотехнологии, вирусологии и ветеринарии. Представлен модифицированный живой вирус свиного репродуктивно-респираторного синдрома (PRRS). Консенсусная комплементарная последовательность ДНК указанного штамма PRRS по меньшей мере на 95% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4. Представлена иммуногенная композиция, содержащая модифицированный живой штамм вируса PRRS, и вакцина для лечения или профилактики симптома свиного репродуктивно-респираторного синдрома у свиньи, содержащая модифицированный живой штамм вируса PRRS. Указанный штамм вируса PRRS представляет собой штамм DE 14-3073, обозначенный PTA-125490; штамм ES 13-49, обозначенный PTA-125489; штамм IT 14-32, обозначенный PTA-125488, или штамм PL 14-02, обозначенный PTA-125487. Предложено применение вакцины, содержащей модифицированный живой штамм вируса PRRS, для лечения или профилактики симптома свиного репродуктивно-респираторного синдрома у свиньи. Заявленное изобретение обеспечивает защиту от гетерологичного вирулентного штамма IT 14-25. Заявленный штамм обладает значительной эффективностью в качестве иммуногенной композиции, поскольку вызывает защитный иммунитет против гетерологичного штамма PRRSV типа 1 при введении в качестве вакцины. 4 н. и 5 з.п. ф-лы, 1 ил., 3 пр.

1. Модифицированный живой штамм вируса свиного репродуктивно-респираторного синдрома (PRRS) для лечения или профилактики симптома, вызванного вирусом PRRS, причем консенсусная комплементарная последовательность ДНК указанного штамма PRRS по меньшей мере на 95% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4.

2. Модифицированный живой штамм вируса PRRS по п. 1, отличающийся тем, что консенсусная комплементарная последовательность ДНК указанного штамма PRRS по меньшей мере на 98% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4.

3. Модифицированный живой штамм вируса PRRS по п. 1, отличающийся тем, что указанный штамм PRRS представляет собой штамм DE 14-3073, обозначенный PTA-125490; штамм ES 13-49, обозначенный PTA-125489; штамм IT 14-32, обозначенный PTA-125488, или штамм PL 14-02, обозначенный PTA-125487.

4. Штамм PRRS по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что указанный штамм вируса PRRS пересевают по меньшей мере 85 раз в клетках тканевой культуры.

5. Иммуногенная композиция, содержащая модифицированный живой штамм вируса PRRS, имеющий консенсусную комплементарную последовательность ДНК, которая по меньшей мере на 98% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4, и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, стабилизатор, солюбилизатор или разбавитель.

6. Иммуногенная композиция по п. 5, отличающаяся тем, что модифицированный живой штамм вируса PRRS представляет собой штамм DE 14-3073, обозначенный PTA-125490; штамм ES 13-49, обозначенный PTA-125489; штамм IT 14-32, обозначенный PTA-125488, или штамм PL 14-02, обозначенный PTA-125487.

7. Иммуногенная композиция по любому из пп. 5, 6, дополнительно содержащая адъювант.

8. Вакцина для лечения или профилактики симптома свиного репродуктивно-респираторного синдрома у свиньи, содержащая модифицированный живой штамм вируса PRRS, причем указанный штамм вируса PRRS представляет собой штамм DE 14-3073, обозначенный PTA-125490; штамм ES 13-49, обозначенный PTA-125489; штамм IT 14-32, обозначенный PTA-125488, или штамм PL 14-02, обозначенный PTA-125487.

9. Применение вакцины, содержащей модифицированный живой штамм вируса PRRS по любому из пп. 1-4, для лечения или профилактики симптома свиного репродуктивно-респираторного синдрома у свиньи.