Способ повышения эффективности вакцинации птиц против вируса гриппа Российский патент 2023 года по МПК A61K31/00 

Изобретение относится к области ветеринарии, а именно к способам, позволяющим повысить эффективность вакцинации птиц против вируса гриппа типа А, подтипа H9N2, за счет повышения естественной резистентности и антиоксидантной защиты организма, снижения стрессочувствительности птицы и интенсивности воспалительных процессов в период вакцинации и в целом оптимизации метаболических процессов.

Грипп птиц по-прежнему остается одним из основных вирусных заболеваний во всем мире, наносящим высокий экономический ущерб птицеводству. Высокая вероятность вспышки пандемии подчеркивает острую потребность в новых эффективных и, главное, широко доступных способах повышения эффективности иммунизации птиц против вируса гриппа.

Из уровня техники известен способ профилактики гриппа типа А птиц, который заключается в том, что одновременно проводят однократную вакцинацию птиц инактивированной эмульгированной вакциной и скармливание химиопрепарата «Абактан-Р» по 20 мг/кг массы тела 1 раз в сутки в течение 14 дней (Патент №2383357 С1 Российская Федерация, МПК А61К 39/145. Способ профилактики гриппа А птиц: №2008138270/13: заявл. 26.09.2008: опубл. 10.03.2010 / В.Н. Смирное, М.М. Зубаиров, Е.В. Чуфарова [и др.]; заявитель ГНУ ВНИИ ветеринарной вирусологии и микробиологии). Однако существуют трудности в приобретении препарата «Абактан-Р» или его синтезе.

Известен способ повышения эффективности вакцинации птиц против гриппа, включающий использование Иммулянта (на растительной основе, заключающийся в применении Echinacea и Nigella sativa) (Eladl АН, Arafat N, El-Shafei RA, Farag VM, Saleh RM, Awadin WF. Comparative immune response and pathogenicity of the H9N2 avian influenza virus after administration of Immulant®, based on Echinacea and Nigella sativa, in stressed chickens. Comp Immunol Microbiol Infect Dis. 2019 Aug; 65:165-175. doi: 10.1016/j.cimid.2019.05.017. Epub 2019 May 21. PMID: 31300109). Недостатком способа являются трудности в приобретении готовой формы препарата и высокая его стоимость, так как этот продукт зарубежного производства.

Известен способ коррекции естественной резистентности и повышения продуктивности при стрессе у птицы. За сутки до стрессового воздействия в воду для выпаивания птице добавляют цитрат лития в дозе 30-35 мг/кг живой массы (Патент №2299562 С1 Российская Федерация, МПК A01K 67/02, A61K 31/00. Способ коррекции естественной резистентности и повышения продуктивности при стрессе у птицы: №2005139195/13: заявл. 16.12.2005: опубл. 27.05.2007 /В.А. Лукичева, Е.Ю. Пеньшина, И.В. Кутищев [и др.]; заявитель ФГОУ ВПО "Московская ветеринарная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина"). Недостатки описываемого способа связаны с отсутствием возможности повышения антиоксидантной защиты организма, снижения воспалительных процессов в период вакцинации и оптимизации метаболических процессов.

Известно применение витамина Е для повышения эффективности иммунизации несушек и их потомства (Zhao GP, Han MJ, Zheng MQ, Zhao JP, Chen JL, Wen J. Effects of dietary vitamin E on immunological stress of layers and their offspring. J Anim Physiol Anim Nutr (Berl). 2011 Jun; 95(3):343-50. doi: 10.1111/j.1439-0396.2010.01060.X. Epub 2010 Sep 29. PMID: 20880292). Недостатки способа определены отсутствием возможности снижения стрессочувствительности птицы и интенсивности воспалительных процессов в период вакцинации, а также в недостаточной оптимизации метаболических процессов.

В качестве прототипа взят способ повышения качества иммунизации птиц при вирусных заболеваниях, который включает применение фармакологического средства «СПАО-комплекс» (Мифтахутдиное, А.В. Влияние антистрессового фармакологического комплекса "СПАО" на эффективность профилактической иммунизации кур против болезни Ньюкасла / А.В. Мифтахутдиное, И.Н. Дихтярук // Аграрная наука. - 2020. - №3. - С. 13-16). Недостатком прототипа является то, что он не применялся при гриппе птиц и его состав не обеспечивает специальное противовоспалительное действие, которое важно в поствакцинальный период.

Эффективность иммунизации птиц связана с технологическими стрессами в птицеводстве, снижением иммунитета на фоне инфекций, предшествующих вакцинации, общим состоянием птицы и характером метаболизма (Spackman Е, Pantin-Jackwood MJ. Practical aspects of vaccination of poultry against avian influenza virus. Vet J. 2014 Dec; 202(3):408-15. doi: 10.1016/j.tvjl.2014.09.017. Epub 2014 Oct 5. PMID: 25296849). Вызванный вирусом гриппа окислительный стресс играет важную роль в регуляции иммунной системы птицы, дополнительно снижая резистентность (Liu М, Chen F, Liu Т, Chen F, Liu S, Yang J. The role of oxidative stress in influenza virus infection. Microbes Infect. 2017 Dec; 19(12):580-586. doi: 10.1016/j.micinf.2017.08.008. Epub 2017 Sep 14. PMID: 28918004). Хронический тепловой стресс может негативно сказываться на иммунном ответе у животных (Jin Y, Ни Y, Han D, Wang М. Chronic heat stress weakened the innate immunity and increased the virulence of highly pathogenic avian influenza virus H5N1 in mice. J Biomed Biotechnol. 2011;2011:367846. doi: 10.1155/2011/367846. Epub 2011 May 29. PMID: 21687549). Сама вакцинация, является стрессором, который может вызывать реакции, препятствующие росту и развитию цыплят (Song, М., Lin, X, Zhao, J., Wang, X, Мао, H, Li, Н, Sun, S., & Lin, H. (2020). High frequency vaccination-induced immune stress reduces bone strength with the involvement of activated osteoclastogenesis in layer pullets. Poultry Science, 99(2), 734-743).

Задачей изобретения является повышение эффективности вакцинации птиц против вируса гриппа типа А, подтипа H9N2, за счет повышения естественной резистентности и антиоксидантной защиты организма, снижения стрессочувствительности птицы и воспалительных процессов, развивающихся на фоне вакцинации, а также оптимизации метаболических процессов.

Технический результат достигается комплексным действием лития, аскорбиновой и янтарной кислот, бутафосфана, L-карнитина, ацетилсалициловой кислоты и глюкозы, который позволяет повысить уровень естественной резистентности и антиоксидантной защиты организма, снизить стрессочувствительности птицы и интенсивность воспалительных процессов, развивающихся на фоне вакцинации, а также оптимизировать метаболические процессы.

Сущность изобретения заключается в том, что способ повышения эффективности вакцинации против гриппа птиц типа А, подтипа H9N2, включает применение фармакологического комплекса, состоящего из цитрата лития, аскорбиновой, ацетилсалициловой и янтарной кислот, бутафосфана, L-карнитина и глюкозы в дозе 185 мг/кг массы тела за три дня до вакцинации, в день вакцинации и сутки после ее проведения при следующем соотношении компонентов (мас. %): цитрат лития - 10,0-12,0; аскорбиновая кислота - 15,0-17,0; янтарная кислота - 10,0-12,0; бутафосфан - 20,0-22,0; L-карнитин - 15,0-17,0; ацетилсалициловая кислота - 8,0-10,0; глюкоза - остальное до 100.

Янтарная кислота используется для повышения внутриклеточной энергетики и активности сукцинатдегидрогеназы (Найденский М.С. Применение янтарной кислоты для стимуляции роста и развития цыплят / М.С. Найденский, В.В. Нестеров, Р.Х. Кармолиев [и др.] // Ветеринария. - 2002. - №12. - С. 44-46).

Стрессочувствительность птицы снижается за счет применения соли лития и его нейропротекторных свойств (Остренко К.С. Органические соли лития - эффективные антистрессовые препараты нового поколения / К.С. Остренко, В.П. Галочкина, Е.М. Колоскова, В.А. Галочкин // Проблемы биологии продуктивных животных. - 2017. №2. С. 5-28).

L-карнитин увеличивает выработку энергии, усиливает жировой обмен и улучшает иммунный статус птиц, что также требует больших затрат энергии (Rehman, Z., Naz, S., Khan, R., & Tahir, M. (2017). An update on potential applications of L-carnitine in poultry. World's Poultry Science Journal, 73(4), 823-830).

Ацетилсалициловая кислота способна ингибировать NF-kappaB, за счет чего проявляются его противовирусные свойства (Mazur I, Wurzer WJ, Ehrhardt С, Pleschka S, Puthavathana P, Silberzahn T, Wolff T, Planz O, Ludwig S. Acetylsalicylic acid (ASA) blocks influenza virus propagation via its NF-kappaB-inhibiting activity. Cell Microbiol. 2007 Jul; 9(7): 1683-94. doi: 10.1111/j. 1462-5822.2007.00902.x. Epub 2007 Feb 23. PMID: 17324159.). Также ацетилсалициловая кислота оказывает противовоспалительное, анальгезирующее и жаропонижающее действие (ВИДАЛЬ-ЭКСПЕРТ: Описание лекарственного препарата: Ацетилсалициловая кислота: [сайт]. - URL: http://www.webvidal.ru/Veterinary/2004/LP_7380000.htm (дата обращения: 24.09.2022 г.)).

Добавление аскорбиновой кислоты в рацион птицы укрепляет ее иммунитет, улучшает показатели продуктивности и стимулирует антиоксидантное звено защиты от оксидативного стресса (El-Senousey Н.K, Chen В, Wang J.Y, Atta А.М, Mohamed F.R, Nie Q.H. Effects of dietary vitamin C, vitamin E, and alpha-lipoic acid supplementation on the antioxidant defense system and immune-related gene expression in broilers exposed to oxidative stress by dexamethasone. Poul. Sci. 2018; 97(1):30-38).

Оптимизацию метаболических процессов обеспечивает Бутафосфан, поддерживая белковый, углеводный и жировой обмены (Панфилова М.Н. Применение препарата на основе бутафосфана для профилактики заболеваний у сельскохозяйственной птицы / М.Н. Панфилова, Н.Н. Жукова // Материалы III Международной научно-практической конференции «Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения». - Ульяновск: ГСХА, 2011, Т. II - С. 151).

Глюкоза обеспечивает все виды метаболизма и является доступным источником энергии для организма птицы (Горчакова О.И. Применение глюкозы в качестве антистрессового препарата при выращивании дебикированного молодняка кур / О.И. Горчакова, В.Ю. Горчаков, А.И. Киселев // Сельскохозяйственный журнал. - 2016. - №9. - С. 407).

Пример.

Для изучения адаптивного иммунного ответа к гриппу птиц на фоне развития вакцинальных стрессов были проведены иммунологические исследования в двух опытных группах и одной контрольной. Вся птица была вакцинирована в возрасте 54 дней вакциной «Интервет» против вируса птичьего гриппа типа А, подтипа H9N2. В 1-ой опытной группе применяли способ, описанный в прототипе: птице перед инъекцией биопрепарата за двое суток до вакцинации, в день вакцинации и в течение двух дней после ее проведения выпаивали СПАО-комплекс в дозе 185 мг/кг массы тела. Во 2-ой опытной группе применяли разработанный способ: птице перед инъекцией биопрепарата за три дня до вакцинации, в день вакцинации и в течение одного дня после ее проведения выпаивали фармакологический комплекс в дозе 185 мг/кг массы тела. В контрольной группе не применяли никаких фармакологических средств и кормовых добавок. Кормление, содержание и профилактические мероприятия во всех группах были идентичными и соответствовали требованиям кросса и программы, принятой на птицефабрике. Оценку эффективности вакцинации проводили через 26 дней после иммунизации, а также в более долгосрочный период - через 50, 65 и 119 дней.

Для оценки напряженности специфического звена иммунной системы из каждой группы было отобрано 25 проб сыворотки крови. Методом ИФА определяли титры антител. Оценка выработки антител осуществлялась с помощью тест-систем BioChek (Голландия) и программного обеспечения BioChek II. Считывание результатов производили с помощью спектрофотометра Тесап (Австрия) на длине волны 405 нм. Титры антител на каждое заболевание оценивали в нескольких возрастах спустя 2-4 недель после вакцинации. Интерпретацию результатов вакцинации проводили путем оценки основных компонентов гуморального ответа после введения вакцины: интенсивность формирования антител, однородность титров и индекс вакцинации.

В 54 дневном возрасте птицы, до вакцинации, была проведена оценка в крови титра антител к вирусу гриппа птиц (таблица 1).

Из данных таблицы 1 следует, что до вакцинации уровень антител в крови кур в возрасте 54 дней был минимальный и варьировал в пределах 8,03%. В сравнении с прототипом средний уровень антител различался в пределах 13,49%. Установлено, что до вакцинации антитела были выявлены у 44-60% исследуемой птицы. Значительная величина коэффициента вариации свидетельствует об отсутствии однородности полученных данных.

После введения вакцины «Интервет» отмечен выраженный поствакцинальный иммунитет (таблица 2).

Из данных таблицы 2 следует, что в возрасте 70 дней, через 26 суток после проведения вакцинации уровень антител соответствовал значениям, характерным для поствакцинального иммунитета. Вместе с тем во 2-ой опытной группе эти данные у кур были выше в сравнении с контрольными показателями на 23,50%. У кур из 1-ой опытной группы уровень антител был выше, чем аналогичный показатель в контрольной группе на 10,30%, и ниже, чем во 2-ой опытной на 10,69%.

Это свидетельствует о том, что разработанный способ способствует усилению иммунного ответа на введение вакцины. Следует отметить, что на этом этапе исследований однородность иммунитета была немного выше в контрольной группе, в которой значение коэффициента вариации было ниже в сравнении с 2-ой опытной на 8,7%. При этом максимальные и минимальные значения титров антител во 2-ой опытной различались в 3,22 раза, в контрольной - в 2,6 раза, в 1-ой опытной - в 3,27 раза.

При исследовании сыворотки крови кур в возрасте 104 дней, или на 54 сутки после введения вакцины, титры антител нарастали. Так, во 2-ой опытной группе этот показатель увеличился в 1,56 раза, в контрольной группе - в 1,60 раза, в 1-ой опытной группе - в 1,57 раза. При этом во 2-ой опытной группе титры антител были на 20,74% выше, чем в контрольной группе. У кур из 1-ой опытной группы уровень антител был выше, чем аналогичный показатель в контрольной группе на 8,02%, и ниже, чем во 2-ой опытной на 10,54%. Максимальные и минимальные значения титров антител во 2-ой опытной группе различались в 3,27 раза, в контрольной группе - в 4,3 раза, в 1-ой опытной - в 3,09 раза. Это подтверждается величиной коэффициента вариации, который во 2-ой опытной группе был на 15,53% ниже в сравнении с контрольной группой, в 1-ой опытной группе этот показатель был на 4,83% ниже, чем в контрольной группе, но выше, чем во 2-ой опытной на 12,67%.

В возрасте кур 119 дней (5 дней после вакцинации) уровень антител в крови продолжал нарастать и во 2-ой опытной группе в сравнении с контрольными данными был выше на 21,44%. У кур из 1-ой опытной группы уровень антител был выше, чем аналогичный показатель в контрольной группе на 20,60%, и ниже, чем во 2-ой опытной на 0,69%. В сравнении с предыдущим исследованием уровень титров антител вырос в 1,38 (2-ая опытная группа), 1,39 (контрольная группа) и 1,55 (1-ая опытная группа) раза. Максимальные и минимальные значения титров антител во 2-ой опытной группе различались в 2,23 раза, в контрольной группе - в 3,96 раза, в 1-ой опытной группе - в 2,77 раза. Это подтверждается величиной коэффициента вариации, который во 2-ой опытной группе был на 7,56% ниже в сравнении с контрольной. В 1-ой опытной группе этот показатель был на 5,43% ниже, чем в контрольной, но выше, чем во 2-ой опытной группе на 2,30%.

По достижении птицей возраста 173 дня (119 дней после вакцинации), уровень антител начинает снижаться. Более ярко это выражено в группе, в которой применялся прототип. Так, в 2-ой опытной группе титр антител снизился на 3,28%, в контрольной - на 22,53%, в 1-ой опытной группе - на 4,27%. Во 2-ой опытной группе в сравнении с контрольными данными уровень титров антител был выше на 51,62%. У кур из 1-ой опытной группы уровень антител был выше, чем аналогичный показатель в контрольной на 49,04%, и ниже, чем во 2-ой опытной на 1,70%. Максимальные и минимальные значения титров антител во 2-ой опытной группе различались в 2,71 раза, в контрольной группе - в 5,17 раза, в 1-ой опытной группе в 4,26 раза. Это подтверждается величиной коэффициента вариации, который во 2-ой опытной группе был на 41,99% ниже в сравнении с контрольной группой. В 1-ой опытной группе этот показатель был на 3,56% ниже, чем в контрольной, но выше, чем во 2-ой опытной группе на 17,99%.

Распределение титров антител по группам указывает на иммунный ответ на введение вакцины на фоне применения разработанного способа (таблица 3).

При первом исследовании крови после вакцинации титры антител в крови кур контрольной группы соответствовали группам титров: 1 группа (56%), 2 группа (32%), 3 группа (12%). Во 2-ой опытной группе титры антител были выше, соответственно распределение титров антител по группам указывало на более высокий уровень иммунитета на фоне применения разработанного способа: 1 группа (28%), 2 группа (52%), 3 группа (8%), 4 группа (12%). В 1-ой опытной группе титры антител были выше, чем в контрольной группе, но ниже, чем во 2-ой опытной, что отражается в распределении титров антител по группам: 1 группа (48%), 2 группа (36%), 3 группа (8%), 4 группа (8%). То есть при введении вакцины на фоне реализации разработанного способа в возрасте 70 дней группы титров антител были выше.

Аналогичная картина отмечалась и при дальнейшем наблюдении. Так, через 54 дня после вакцинации (возраст кур - 104 дня) соотношение титров антител, выявленных в крови кур 2-ой опытной группы, распределилось следующим образом: 2 и 3 группы (по 36%), 4 группа (12%), 5 и 6 группы (по 4%), 7 группа (8%). В контрольной группе распределение было иное, которое подтверждало более низкие значения титров антител: 1 группа (24%), 2 группа (44%), 3 группа (4%), 4 группа (8%), 5 группа (20%). Распределение титров антител в 1-ой опытной группе прототипа подтверждало общую тенденцию установленных закономерностей: 1 группа (24%), 2 группа (32%), 3 группа (20%), 4 группа (8%), 5 и 6 группы (по 4%), 7 группа (8%).

Через 65 дней после вакцинации (возраст кур - 119 дней) условный «сдвиг вправо», сопровождающийся появлением титров большей группы, наблюдался в обеих группах. Соотношение титров антител, выявленных в крови кур 2-ой опытной группы, распределилось следующим образом: 3 группа (32%), 4 группа (20%), 5 группа (16%), 6 группа (12%), 7 группа (12%), 8 группа (8%). В контрольной группе на этом этапе исследования поствакцинального иммунитета распределение было иное, которое подтверждало более низкие значения титров антител: 2 группа (8%), 3 группа (48%), 4 группа (20%), 5 группа (12%), 6 группа (4%), 7 группа (8%). В 1-ой группе распределение титров антител указывало на промежуточный эффект, который был выше, чем в контрольной группе, но ниже, чем в опытной: 2 группа (4%), 3 группа (28%), 4 группа (20%), 5 группа (16%), 6 группа (12%), 7 группа (16%), 8 группа (4%).

Через 119 дней после вакцинации (в возрасте на 173 дней) в крови кур обеих опытных групп наблюдали уменьшение групп титров антител, но, тем не менее, значение указывали на сохранение напряженности поствакцинального иммунитета, более выраженного на фоне применения разработанного способа. Так, соотношение титров антител, выявленных в крови кур 2-ой опытной группы, распределилось следующим образом: 2 группа (8%), 3 группа (4%), 4 группа (32%), 5 группа (40%), 6 группа (12%), 7 группа (4%). В контрольной группе на этом этапе исследования поствакцинального иммунитета также, как и на предыдущих, распределение было иное, которое снова подтверждало более низкие значения титров антител: 1 группа (4%), 2 группа (40%), 3 группа (36%), 4 группа (8%), 5 группа (4%), 6 группа (8%). Распределение титров антител в 1-ой группе и на этом этапе подтверждало общую тенденцию установленных закономерностей формирования поствакцинального иммунитета: 1 группа (8%), 3 группа (4%), 4 группа (32%), 5 группа (40%), 6 группа (16%).

Признаком успешной вакцинации является соотношение анализируемых параметров - среднего титра антител и коэффициента вариации, выражаемого через индекс вакцинации. Индекс вакцинации - логический параметр, демонстрирующий высокие значения при успешно проведенной вакцинации (таблица 4).

Данные таблицы 4 свидетельствуют о высокой эффективности проведенной вакцинации против гриппа птиц. На протяжении 65 дней после вакцинации отмечалось стабильное нарастание данного показателя. При этом во 2-ой опытной группе это было выражено на 14,17% (в возрасте 70 дней), 42,94% (в возрасте 104 дней), 31,37 (в возрасте 119 дней). В 1-ой опытной группе значение индекса вакцинации на разных этапах формирования поствакцинального иммунитета было ниже, чем во 2-ой опытной на 18,0% (в возрасте 70 дней), 20,60% (в возрасте 104 дней), 2,92 (в возрасте 119 дней). В возрасте 70 дней (первое исследование после прививки) индекс вакцинации в 1-ой опытной группе был ниже, чем в контрольной группе на 6,49%, в дальнейшем был выше на 13,50% (в возрасте 104 дней), на 27,53% (в возрасте 104 дней).

В возрасте 173 дней в крови кур 1-ой и 2-ой опытных групп мы установили дальнейшее увеличение значения индекса вакцинации, в контрольной группе, наоборот, наблюдали снижение. Различия индекса вакцинации на этом этапе наблюдений составили 161,38% (2-ая опытная и контрольная группы), 117,75% (1-ая опытная и контрольная группы). В 1-ой опытной группе в сравнении со 2-ой опытной значение индекса вакцинации было ниже на 16,69%.

Представленные данные убедительно свидетельствуют, что применение разработанного способа при вакцинации птиц против гриппа способствует более интенсивному достижению уровня однородности вакцинации на 7,56-41,99%, повышению напряженности поствакцинального иммунитета на 20,74-51,62%, а также сохранению длительности иммунитета. Показатель индекса вакцинации, демонстрирующий высокие значения при успешно проведенной вакцинации, на фоне применения разработанного способа был на 14,17-161,38% выше, чем на фоне основного рациона.

Изобретение относится к области биотехнологии. Сущность изобретения заключается в том, что способ повышения эффективности вакцинации против гриппа птиц типа А, подтипа H9N2, включает применение фармакологического комплекса, состоящего из цитрата лития, аскорбиновой, ацетилсалициловой и янтарной кислот, бутафосфана, L-карнитина и глюкозы, в дозе 185 мг/кг массы тела за три дня до вакцинации, в день вакцинации и сутки после ее проведения, при следующем соотношении компонентов (мас. %): цитрат лития - 10,0-12,0; аскорбиновая кислота - 15,0-17,0; янтарная кислота - 10,0-12,0; бутафосфан - 20,0-22,0; L-карнитин - 15,0-17,0; ацетилсалициловая кислота - 8,0-10,0; глюкоза - остальное до 100. Применение разработанного способа при вакцинации птиц против гриппа способствует более интенсивному достижению уровня однородности вакцинации на 7,56-41,99%, повышению напряженности поствакцинального иммунитета на 20,74-51,62%, а также сохранению длительности иммунитета. Показатель индекса вакцинации, демонстрирующий высокие значения при успешно проведенной вакцинации, на фоне применения разработанного способа был на 14,17-161,38% выше, чем на фоне основного рациона. 4 табл.

Способ повышения эффективности вакцинации против гриппа птиц типа А, подтипа H9N2, включающий применение водорастворимого фармакологического комплекса, состоящего из цитрата лития, аскорбиновой и янтарной кислот, бутафосфана, L-карнитина и глюкозы, в дозе 185 мг/кг массы тела, отличающийся тем, что водорастворимый фармакологический комплекс дополнительно включает ацетилсалициловую кислоту при следующем содержании исходных компонентов: цитрат лития - 10,0-12,0; аскорбиновая кислота - 15,0-17,0; янтарная кислота - 10,0-12,0; бутафосфан - 20,0-22,0; L-карнитин - 15,0-17,0; ацетилсалициловая кислота - 8,0-10,0; глюкоза - остальное до 100, причем выпаивание водорастворимым фармакологическим комплексом проводят за три дня до вакцинации, в день вакцинации и через сутки после ее проведения.