КОМБИНАЦИЯ ЛАКТОБАКТЕРИЙ ДЛЯ ОБЛЕГЧЕНИЯ СИНДРОМА РАЗДРАЖЕННОГО КИШЕЧНИКА И ДЛЯ ОБЛЕГЧЕНИЯ ДРУГИХ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНЫХ РАССТРОЙСТВ Российский патент 2023 года по МПК C12N1/20 A61K35/747 A61P1/00 A61P1/12 A61P1/14 

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к области желудочно-кишечных расстройств и, более конкретно, к применению комбинации живых лактобактерий для облегчения нежелательных желудочно-кишечных проблем со здоровьем, таких как синдром раздраженного кишечника (IBS), абдоминальная боль, дискомфорт в животе, вздутие живота, жидкий стул и запор.

Предпосылки создания изобретения

Синдром раздраженного кишечника (IBS) представляет собой хроническое рецидивирующее желудочно-кишечное заболевание, которым страдает 5-20% населения Америки. Выявлен ряд факторов риска IBR, в том числе женский пол, психологические проблемы, стресс, пищевая непереносимость и избыточный бактериальный рост в тонком кишечнике (Aagaard et al., 2013). Кардинальные симптомы IBR включают абдоминальную боль, вздутие живота, и изменения в работе кишечника (Aagaard et al., 2013). Патофизиология синдрома определена, и никакие структурные аномалии кишечника ему не сопутствуют. Качество жизни людей с IBR серьезно ухудшается, что серьезно сказывается на системе здравоохранения и посещениях врачей первичного звена и гастроэнтерологов (Coffin et al., 2004). Фактически, IBR является наиболее частым диагнозом в практике гастроэнтерологии и одним из наиболее частых диагнозов в практике оказания первичной медицинской помощи (Peery et al., 2012). На основании специфической симптоматики пациентов с IBR можно подразделить на три основные группы: с преобладанием запора (IBR-С), с преобладанием диареи (IBR-D) и смешанного типа (IBR-М), каждая из которых имеет приблизительно равное распределение. Эти симптомы IBR беспокоят пациентов, приводят к снижению качества жизни и мешают социальному взаимодействию (Coffin et al., 2004).

Конечной целью лечения IBR является облегчение множества симптомов этого состояния с использованием одного хорошо переносимого средства. Лекарственные терапии могут облегчить некоторые симптомы, связанные с этим состоянием, но ни одна из них не является исцеляющей. Следовательно, перспективы долгосрочной эффективности лечения ограничены, принимая во внимание существующие варианты лечения. Существует очевидная потребность в процедурах облегчения IBR, которые являются безопасными, эффективными и экономичными (Foxx-Orenstein, 2006).

Пробиотики представляют собой живые микроорганизмы, которые при введении в адекватных дозах полезны для здоровья хозяина. В последние годы пробиотики стали широко использоваться для облегчения симптомов при различных желудочно-кишечных расстройствах. Поскольку дисбиоз может быть частью многофакторной этиологии IBR, различные пробиотики были протестированы в клинических испытаниях для определения их эффективности, и результаты были включены в некоторые мета-анализы и обзорные статьи (Ford et al., 2014b; Hoveyda et al. al., 2009; McFarland, Dublin, 2008; Ortiz-Lucas et al., 2013; Whelan, Myers, 2010; Yoon et al., 2015). Невозможно сделать однозначных выводов относительно эффективности штамм-специфических пробиотиков для облегчения симптомов IBR. Сильные эффекты плацебо, психологические факторы и гендерные эффекты затрудняют интерпретацию результатов исследования (Ford and Moayyedi, 2010; Lyra et al., 2016; Moayyedi et al., 2010).

Пробиотические продукты, содержащие лактобактерии и бифидобактерии, уже были протестированы на улучшение IBR (Niv et al., 2005; O’Mahony et al., 2005). Положительные результаты были отмечены с некоторыми штаммами Lactobacillus, например, Ducrotté et al., которые сообщили об исчезновении всех симптомов IBR, включая абдоминальную боль, у 214 пациентов, получавших в течение 4 недель L. plantarum 299V (Ducrotté et al., 2012). Halpern et al. отметили значительное снижение индекса симптомов IBR при употреблении капсулы, содержащей 5×10⁹ убитых нагреванием L. acidophilus (Halpern et al., 1996). Другие штаммы Lactobacillus, такие как L. salivarius UCC4331, не показали какого-либо терапевтического преимущества по сравнению с плацебо у 75 пациентов (O'Mahony et al., 2005), равно как и L. reuteri ATCC55730 (Niv et al., 2005), что позволяет предположить, что некоторые штаммы Lactobacillus могут быть более эффективным при этом показании, чем другие.

Хотя продукты, включающие штаммы Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei и/или Lactobacillus rhamnosus, в прошлом были протестированы в ходе клинических исследований (Beausoleil et al., 2007; Gao et al., 2010; Maziade et al., 2015; Sampalis et al., 2010), эти клинические испытания никогда не демонстрировали и не предполагали эффективность лактобактерий для облегчения синдрома раздраженного кишечника (IBR), абдоминальной боли, вздутия живота и/или запора.

Соответственно, существует потребность в комбинации бактериальных штаммов, которые эффективны для облегчения желудочно-кишечных расстройств, таких как синдром раздраженного кишечника (IBS), абдоминальная боль, вздутие живота и/или запор.

Настоящее изобретение направлено на удовлетворение этих и других потребностей, как будет очевидно при рассмотрении раскрытия и описания отличительных признаков изобретения, представленных далее.

Сущность изобретения

Изобретение относится к применению комбинации живых лактобактерий для облегчения нежелательных желудочно-кишечных проблем со здоровьем, таких как синдром раздраженного кишечника (IBS), абдоминальная боль, дискомфорт в животе, вздутие живота, жидкий стул и запор.

В соответствии с одним конкретным аспектом, изобретение относится к способу для облегчения желудочно-кишечного расстройства у субъекта, нуждающегося в этом, включающему введение указанному субъекту комбинации живых Lactobacillus acidophilus, живых Lactobacillus casei и живых Lactobacillus rhamnosus, где указанное желудочно-кишечное расстройство выбрано из группы, состоящей из синдрома раздраженного кишечника (IBS), абдоминальной боли, вздутия живота и запора.

В соответствии с другим конкретным аспектом, изобретение относится к способу для улучшения качества жизни субъекта, страдающего синдромом раздраженного кишечника (IBS), включающему введение указанному субъекту комбинации живых Lactobacillus acidophilus, живых Lactobacillus casei и живых Lactobacillus rhamnosus, где указанное введение обеспечивает указанному субъекту по меньшей мере один благоприятный эффект, выбранный из группы, состоящей из следующих: удовлетворенность работой кишечника, минимальное влияние IBS, мешающее нормальной деятельности, улучшенное ощущение своего тела, сокращение избегания пищи, повышенное социальное взаимодействие, уменьшенная сексуальная дисфункция и улучшенные взаимоотношения.

В соответствии с другим конкретным аспектом, изобретение относится к способу для облегчения синдрома раздраженного кишечника (IBS) у субъекта-человека, нуждающегося в этом, включающему введение указанному субъекту комбинации живых Lactobacillus acidophilus CL1285®, живых Lactobacillus casei LBC80R® и живых Lactobacillus rhamnosus CLR2®.

В соответствии с другим конкретным аспектом, изобретение относится к альтернативному лекарственной терапии способу для профилактики и/или лечения синдрома раздраженного кишечника (IBS), включающему: (i) идентификацию субъекта-человека, нуждающегося в лекарственной терапии для профилактики и/или лечения IBS; и (ii) введение указанному субъекту-человеку питательно приемлемой композиции, включающей комбинацию живых микроорганизмов, которые включают живые Lactobacillus acidophilus, живые Lactobacillus casei и живые Lactobacillus rhamnosus, в дополнение к, или вместо, указанной лекарственной терапии.

В соответствии с другим конкретным аспектом, изобретение относится к композиции для облегчения желудочно-кишечного расстройства у субъекта, нуждающегося в этом, при этом композиция включает комбинацию живых Lactobacillus acidophilus CL1285®, живых Lactobacillus casei LBC80R®, живых Lactobacillus rhamnosus CLR2®, где указанное желудочно-кишечное расстройство выбрано из группы, состоящей из синдрома раздраженного кишечника (IBS), абдоминальной боли, испытываемой в течение нескольких дней боли, вздутия, консистенции стула и частоты стула.

В соответствии с другим конкретным аспектом, изобретение относится к композиции для облегчения синдрома раздраженного кишечника (IBS) у субъекта, нуждающегося в этом, при этом композиция включает комбинацию живых Lactobacillus acidophilus CL1285®, живых Lactobacillus casei LBC80R® и живых Lactobacillus rhamnosus CLR2®.

В соответствии с другим конкретным аспектом, изобретение относится к применению комбинации живых Lactobacillus acidophilus, живых Lactobacillus casei и живых Lactobacillus rhamnosus для облегчения желудочно-кишечного расстройства у субъекта, нуждающегося в этом, где указанное желудочно-кишечное расстройство выбрано из группы, состоящей из синдрома раздраженного кишечника (IBS), абдоминальной боли, вздутия живота и запора.

В соответствии с другим конкретным аспектом, изобретение относится к применению комбинации живых Lactobacillus acidophilus CL1285®, живых Lactobacillus casei LBC80R® и живых Lactobacillus rhamnosus CLR2® для профилактики, лечения и/или облегчения синдрома раздраженного кишечника (IBS) у субъекта, нуждающегося в этом.

Подробное описание предпочтительных вариантов осуществления

Изобретение относится к профилактике, лечению и/или облегчению желудочно-кишечных расстройств у субъектов.

В контексте настоящей заявки термин “желудочно-кишечное расстройство” относится к желудочно-кишечным расстройствам, которые характеризуются симптомами, такими как абдоминальная боль, вздутие живота и запор (например, консистенция и частота стула). Термин охватывает, но не ограничивается этим, синдром раздраженного кишечника (IBS), который включает IBS с преобладанием запора (IBR-С), IBS с преобладанием диареи (IBR-D) и IBS смешанного типа (IBR-М).

В контексте настоящей заявки термин “облегчение желудочно-кишечного расстройства” или “облегчение синдрома раздраженного кишечника” или “облегчение IBS” охватывает полезные для здоровья эффекты, включая, но не ограничиваясь этим, стабилизацию, лечение, исцеление, ослабление, облегчение, изменение, залечивание, уменьшение прогрессирования, улучшение, нормализацию или воздействие на заболевание или состояние, симптом заболевания или состояния или риск (или предрасположенность) развития заболевания или состояния. Термин охватывает по меньшей мере облегчение нежелательных проблем со здоровьем, включая, но не ограничиваясь этим, абдоминальную боль, длительную абдоминальную боль (непрерывную или нет), вздутие живота, проблемы с консистенцией и/или частотой стула (например, запор), снижение качества жизни (QOL), связанное с одним или несколькими из вышеперечисленных, и неадекватное облегчение таких проблем со здоровьем при лечении лекарственными средствами или другими методами.

В контексте настоящей заявки термин “субъект” включает живые организмы, у которых могут возникать желудочно-кишечные расстройства. Термин “субъект” включает животных (например, млекопитающих (например, кошек, собак, лошадей, свиней, коров, коз, овец, грызунов (например, мышей или крыс), кроликов, белок, медведей, приматов (например, шимпанзе, обезьян, горилл и людей)), а также птиц (например, кур, уток, пекинских уток, гусей) и их трансгенные виды. Предпочтительно, субъектом является человек или примат, не являющийся человеком (например, шимпанзе, обезьяна, макак, горилла). Более предпочтительно, субъектом является человек. Еще более предпочтительно, субъектом является человек, нуждающийся в лечении и имеющий, или который может иметь, одну или более нежелательных проблем со здоровьем и/или симптомы, такие как абдоминальная боль, вздутие живота и запор.

В соответствии с одним конкретным аспектом, изобретение обеспечивает применение комбинации живых лактобактерий для профилактики, лечения и/или облегчения желудочно-кишечных расстройств, в частности IBS. В соответствии с одним конкретным вариантом осуществления, комбинация живых лактобактерий включает живые Lactobacillus acidophilus, живые Lactobacillus casei и живые Lactobacillus rhamnosus.

В вариантах осуществления комбинация включает около 1-10% L. acidophilus, 70-90% L. casei и около 5-20% L. rhamnosus колониеобразующих единиц (КОЕ) комбинации.

В одном конкретном варианте осуществления Lactobacillus acidophilus представляют собой Lactobacillus acidophilus CL1285®, депонированный в Национальной коллекции культур микроорганизмов (CNCM) в Париже, № депозита CNCM I-4099, Lactobacillus casei представляет собой Lactobacillus casei LBC80R®, депонированный в CNCM под № депозита CNCM I-3989, и Lactobacillus rhamnosus представляет собой Lactobacillus rhamnosus CLR2®, депонированный в CNCM под № депозита CNCM I-3990.

В вариантах осуществления изобретение включает введение одновременно по меньшей мере 10 миллиардов, или по меньшей мере 20 миллиардов, или по меньшей мере 30 миллиардов, или по меньшей мере 40 миллиардов, или по меньшей мере 50 миллиардов, или по меньшей мере 75 миллиардов, или по меньшей мере 100 миллиардов, или по меньшей мере 150 миллиардов, или по меньшей мере 200 миллиардов указанной комбинации лактобактерий.

В вариантах осуществления изобретение включает введение комбинации живых лактобактерий один раз в день, два раза в день, три раза в день или более.

В вариантах осуществления комбинацию живых лактобактерий вводят в виде питательно приемлемой композиции. В контексте настоящей заявки термин "питательно приемлемая композиция" относится к веществу, например продукту питания, который при приеме внутрь обеспечивает питательную поддержку и питательные вещества, такие как углеводы, жиры, белки, витамины и/или минералы и т.д. После ее приема, в дополнение к обеспечению полезных эффектов для здоровья (например, облегчение нежелательных желудочно-кишечных проблем), питательно приемлемая композиция также будет обеспечивать энергию, как и любой другой продукт питания. Питательно приемлемая композиция в соответствии с изобретением существенно отличается от композиций, используемых в лекарственной терапии, при этом питательно приемлемая композиция состоит из пищевых ингредиентов (предпочтительно натуральных ингредиентов), которые признаны безопасными, нетоксичными для человека и по существу не имеют побочных эффектов, связанных с обычными прописываемыми лекарствами (например, головная боль, тошнота, аллергия и т.д.).

Тем не менее, питательно приемлемая композиция может также содержать дополнительные безопасные и нетоксичные компоненты, такие как консерванты, солюбилизирующие агенты, стабилизаторы, эмульгаторы, смягчающие средства, красители, ароматизаторы, антиоксиданты и т.д.

Питательно приемлемая композиция может быть представлена в твердой форме, в сухой форме или в жидкой форме для перорального введения. Питательно приемлемая композиция может быть представлена в различных формах пищевых продуктов или пищевых добавок для приема внутрь, включая, но не ограничиваясь этим, молоко, йогурт, творог, кисломолочные продукты, ферментированные продукты на основе молока, ферментированные продукты на основе сои, продукты на основе ферментированных злаков, порошки на молочной основе, смеси для детского питания, белковые концентраты, например которые используются в больницах и т.д.

В вариантах осуществления питательно приемлемая композиция включает комбинацию лактобактерий, а также ферментированные белки, включая, но не ограничиваясь этим, ферментированные соевые белки, ферментированные молочные белки, ферментированные рисовые белки, ферментированные белки гороха, ферментированные белки конопли, ферментированные белки миндаля и ферментированные белки насекомых (например, белки личинок).

Комбинация лактобактерий и питательно приемлемая композиция могут быть интегрированы в любой подходящий носитель для пероральной доставки, например гель, капсулу, таблетку, суспензию или любой другой подходящий носитель, известный специалистам в данной области. Предпочтительно количество лактобактерий, включенное в одну капсулу, в одну таблетку, в определенный объем суспензии или т.п., находится в диапазоне от примерно 10 миллиардов до 200 миллиардов.

Изобретение также охватывает наборы и контейнеры, включающие несколько доз питательно приемлемой композиции, включая, например, блистерные упаковки, повторно закрываемые флаконы и т.п., включающие определенное количество композиции (например, 25 мл, 50 мл, 100 мл или более) или некоторое количество капсул или таблеток (например, 10, 15, 25, 50 или более). Такой набор или контейнер предпочтительно может включать инструкции в форме брошюры или любого другого печатного носителя с указанием количества вводимой композиции, инструкции по применению, инструкции по смешиванию компонентов (например, если в форме порошка) и т.д.

Изготовление питательно приемлемой композиции в соответствии с изобретением находится в пределах компетенции специалистов в данной области. Например, лактобактерии можно включить в подходящий питательно приемлемый носитель. В качестве альтернативы, питательно приемлемая композиция, содержащая комбинацию лактобактерий, может быть получена путем ферментации живых лактобактерий в подходящей среде для получения фермента, включающего лактобактерии и ферментированные белки (например, ферментированные соевые белки, ферментированные молочные белки, ферментированные рисовые белки, ферментированные белки гороха, ферментированные белки конопли и др.).

ПРИМЕР

Следующий пример служит для иллюстрации масштаба применения настоящего изобретения, а не для ограничения его объема. Можно осуществить модификации и изменения, не забывая о цели и объеме изобретения. Даже несмотря на то, что могут быть использованы другие методы или эквивалентные продукты, которые эквивалентны тем, которые можно найти в настоящей заявке, для тестирования или реализации настоящего изобретения, в настоящей заявке описаны материал и предпочтительные методы.

Пример 1: Lactobacillus acidophilus CL1285®, L. casei LBC80R® и L. rhamnosus CLR2® улучшают качество жизни(QOL) и симптомы IBS-C, IBS-D: Двойное слепое рандомизированное плацебо-контролируемое исследование

Целью этого клинического испытания была оценка эффективности патентованного пробиотического продукта, Lactobacillus acidophilus CL1285® + Lactobacillus casei LBC80R® + Lactobacillus rhamnosus CLR2® для облегчения специфических IBS-связанных симптомов, улучшения качества жизни, эффекта на консистенцию и частоту стула и достижения адекватного облегчения (AR) у здоровых в другом отношении взрослых субъектов с синдромом раздраженного кишечника подтипов с преобладанием запора (IBS-C), диареи (IBS-D) и смешанного подтипа (IBS-M).

Материалы и методы

План эксперимента, осуществление исследования и сбор данных

Протокол этого проспективного двойного слепого рандомизированного плацебо-контролируемого исследования был одобрен независимым IRB, IntegReview. Все участвующие в исследовании субъекты подписали информированное согласие. Субъектов возраста 18 лет или старше набирали в 3 центрах клинических испытаний, расположенных в Калифорнии, США.

Субъекты принимали 2 капсулы Активного продукта или Плацебо вместе с завтраком каждый день. Каждая капсула Активного продукта содержала 50 миллиардов КОЕ живых организмов (L.acidophilus CL1285®, L.casei LBC80® и L.rhamnosus CLR2®) плюс инертные ингредиенты. Капсулы Плацебо содержали только инертные ингредиенты.

Субъекты должны были соответствовать Римским критериям III для IBS (Shih and Kwan, 2007). Римские критерии III включают наличие повторяющиейся абдоминальной боли или дискомфорта не менее 3 дней в месяц в течение последних 3 месяцев, связанных с 2 или более из следующего: улучшение дефекации, начало, связанное с изменением частоты стула, и начало, связанное с изменением формы (внешнего вида) стула. Симптоматика должна проявиться по меньшей мере за 6 месяцев до постановки диагноза.

Субъекты должны были пройти 7-дневный вводный период приема плацебо, чтобы продемонстрировать комплаентность для приема исследуемого продукта (IP), и вести ежедневные дневники, документирующие прием IP, частоту стула, консистенцию стула в соответствии с Бристольской шкалой стула (BSC), тяжесть боли и сопутствующие лечения. Успешное завершение вводного периода также требовало наличия абдоминальной боли не менее 2 дней, связанной как минимум с 2 из следующего: улучшение дефекации, начало, связанное с изменением частоты стула, и начало, связанное с изменением формы или внешнего вида стула. Потенциальные субъекты с диагностированным желудочно-кишечным заболеванием, отличным от IBS, предшествующей операцией на брюшной полости или системным заболеванием, которое может исказить результаты исследования или поставить под угрозу безопасность, ожидаемой продолжительностью жизни менее 6 месяцев, беременные или кормящие, с непереносимостью лактозы, иммунодефицитом, расстройством пищевого поведения, недавно применявшие антибиотики, с аллергией на исследуемый продукт или ежедневно употребляющие пробиотики, ферментированное молоко или йогурт, исключались. После успешного завершения вводного периода 113 субъектов были рандомизированы в соотношении 2:1 для приема Активного исследуемого продукта или Плацебо.

Субъекты возвращались в исследовательский центр с 6-недельными интервалами в течение в общей сложности 12 недель исследования. При каждом посещении субъекты заполняли две анкеты: IBS-SSS (шкала тяжести симптомов) и IBS-QOL (качество жизни(QOL), которое включает общий балл и оценку QOL в восьми валидированных областях определения: дисфория, мешающее деятельности влияние, ощущение своего тела, беспокойство о здоровье, отказ от пищевых продуктов, социальная реакция, сексуальные отношения и взаимоотношения; см. “Information Sheet on the Irritable Bowel Syndrome-Quality of Life Measure (IBS-QOL)”, опубликованный Вашингтонским университетом, который доступен в Интернете).

При каждом посещении субъектов спрашивали, получили ли они адекватное облегчение симптомов IBS. Субъекты продолжали регистрировать консистенцию и частоту стула, тяжесть симптомов, потребление IP и сопутствующие лечения в дневниках, которые собирались при каждом визите и проверялись на разборчивость и полноту сведений. Возвращенный IP подсчитывали для оценки комплаентности, и новый IP выдавали при визите 3. Субъектов опрашивали о любых нежелательных явлениях (AE), отмеченных в дневнике, для определения дат начала и выздоровления, а также степени тяжести. AE, о которых были сообщения, были впоследствии классифицированы исследователем, что касается их связи с IP (связанные, возможно связанные, вряд ли связанные, не связанные).

Конечные точки исследования

Конечные точки исследования включали изменение оценки абдоминальной боли, оценки вздутия, количества дней с болью, улучшения оценок по IBS-SSS и IBS-QOL (включая области определения QOL) и AR. Изменения частоты стула и консистенции стула в период испытания исследовали в рамках подтипов IBS и в рамках подгрупп подтипа IBS и пола. Конечные точки безопасности включали случаи возникновения, тяжесть и связь IP с сообщенными неблагоприятными явлениями.

Исследуемые популяции

Модифицированную популяцию пациентов, включенных в испытание(mITT), определляли как субъектов, которые были рандомизированы и получили по меньшей мере одну дозу IP; эту популяцию использовали для анализа эффективности и анализа безопасности.

Обработка данных

Данные собирали на бумажных исходных документах в исследовательских центрах и вводили в реляционную базу данных на базе Интернета. Мониторинг на месте 100% полей клинических данных по сравнению с исходным документом осуществлялся специалистами по клиническим исследованиям (CRA); запросы делались по мере необходимости для их разрешения командой исследователей. После того, как все данные были введены и все запросы разрешены, база данных была жестко заблокирована для анализа. Затем специалист по биостатистики извлекал файлы данных и сопоставлял ID номера субъектов с назначенным лечением, чтобы демаскировать данные исследования.

Статистический анализ

Число прошедших скрининг субъектов, число рандомизированных, число выбывших досрочно и число завершивших испытание были сведены в таблицу по группам лечения.

Популяция mITT в целом была проанализирована на конечные точки симптомов и конечные точки качества жизни, вместе с субпопуляциями IBS подтипа и пола. Изменения консистенции и частоты стула были проанализированы для подтипов IBS-С и IBS-D, а также по полу внутри подтипа.

Описательную статистику рассчитывали для исходных и демографических характеристик и сводили в таблицу по группам лечения. Описательная статистика включала средние значения, стандартные отклонения, медианные значения, диапазоны и проценты, в зависимости от формы каждой переменной. К исходным характеристикам инференциальные методы не применялись.

Комплаентность рассчитывали как процент от предполагаемого использованного IP, определяемый подсчетом возвращенных бутылок и по дневникам субъектов на неделях 6 и 12, и сравнивали между группами. Комплаентность также определяли как потребление 70% или более от предполагаемого IP и анализировали с использованием критерия хи-квадрат.

Анализировали изменение в оценках между визитом 2 и визитом 4 в двух группах лечения для IBS-SSS, IBS-QOL в целом и в отдельных областях, тяжести боли, дней с болью за последние 10 дней, тяжести вздутия, удовлетворенности работой кишечника и мешающего влияния IBS на жизнь в целом. Консистенцию стула оценивали сами субъекты с использованием BSC и регистрировали в своих дневниках на ежедневной основе, а ежедневная частота стула определялась по кратности стула, отмеченной в дневнике. Сравнивали изменения средней консистенции стула и частоты стула в течение 7-дневного подготовительного периода с последними 7 днями исследования. Оценки консистенции стула выражали как средние BSC баллы в неделю, а частоту стула выражали как средн.. кратность стула в день.

Анализ данных показал, что конечные точки эффективности необходимо оценивать в рамках подтипов IBS и для каждого пола отдельно, и многие размеры выборки подгруппы были небольшими. Был отмечен большой эффект плацебо для многих конечных точек. Поэтому было решено контролировать эффект плацебо, сравнивая изменения в группах Активный продукт vs. Плацебо; среднее улучшение от визита 2 до визита 4 рассчитывали для каждой группы лечения, а затем значение Плацебо вычитали из значения Активного продукта, делили на значение Плацебо и умножали на 100. Например, среднее изменение тяжести боли 15,0 в группе Активного продукта по сравнению со средним изменением 10,0 в группе Плацебо было представлено как 50% улучшение в группе Активного продукта по сравнению с Плацебо. Этот подход использовали для сравнения изменений в IBS-SSS, IBS-QOL и отдельных областях, тяжести боли, количестве дней с болью, тяжести вздутия, удовлетворенности работой кишечника и мешающем влиянии IBS на жизнь в целом. Этот же метод использовали для сравнения изменений консистенции и частоты стула.

Анализ изменения консистенции и частоты стула осуществляли у субъектов с IBS-С и IBS-D подтипами, а также у субъектов мужского и женского пола в рамках этих подтипов. Внутри каждого подтипа процент “улучшения” определяли как процентное изменение в желаемом направлении для этого подтипа. Таким образом, в таблицах, представляющих результаты, “улучшение” представлено как положительное изменение для обоих подтипов, но определение отличается: для IBS-С подтипа увеличение среднего балла по шкале BSC (соответствующее размягчению стула) и увеличение частоты стула были положительными оценками, указывающими на улучшение для этой конечной точки. Для субъектов с IBS-D снижение среднего балла по шкале BSC (указывающее на более плотный стул) и уменьшение частоты стула были представлены как улучшение с использованием положительных чисел.

На момент написания протокола AR было общей первичной конечной точкой в исследованиях IBS и было принято в качестве конечной точки для этого исследования. Было показано, что конечная точка IBS-AR является клинически и статистически значимым преимуществом в исследованиях терапии IBS с алозетроном (Camilleri et al. 1999), циланзетроном и тегасеродом (Kellow et al., 2003; Tack et al., 2005). AR состоит из одного вопроса: “Были ли у вас адекватные облегчения симптомов IBS за последнюю неделю?”.

Безопасность оценивали путем подсчета процента субъектов с нежелательными явлениями в группах Активного продукта и Плацебо и их описательного сравнения. Конкретные категории нежелательных явлений были представлены в виде таблиц. Сравнения субъектов с конкретными нежелательными явлениями были описательными.

Результаты

В исследование было зачислено в общей сложности 113 субъектов, из которых 86 субъектов (76,1%) завершили исследование. Процент завершивших исследование составил 73,0% в группе Плацебо и 77,6% в группе Активного продукта. Причинами преждевременного завершения исследования были прекращение наблюдения из-за утраты связи с пациентом (10,6%), отзыв информированного согласия (7,1%) и другие/неизвестные причины (6,1%). Ни один из субъектов не выбыл из-за нежелательных явлений.

Демографические данные и исходные характеристики субъектов

Распределение демографических и исходных характеристик mITT популяции представлено в Таблице 1. Группы приема Плацебо и Активного продукта были сопоставимы по возрасту, полу и расе.

Таблица 1
Демографические данные и исходные характеристики субъектов при скрининговом визите по группам лечения, mITT популяция Плацебо Активный продукт Возраст (сколько лет)
Среднее значение
SD
n 39,9
14,0
37 40,6
13,4
76 Пол (#, %)
Мужской
Женский
n 16 (43,2%)
21 (56,8%)
37 29 (38,2%)
47 (61,8%)
76 Раса/этническая группа (#, %)
Люди белой расы, не латиноамериканцы
Азиаты
Латиноамериканцы
Коренные американцы
Афроамериканцы или люди черной расы
Другие 14 (37,8%)
2 (5,4%)
7 (18,9%)
1 (2,7%)
13 (35,1%)
0 31 (40,8%)
3 (3,9%)
15 (19,7%)
0
25 (32,9%)
2 (2,6%)

Распределение подтипов IBS

113 пациенты были классифицированы исследователями в каждом центре как IBS-C, IBS-D или IBS-M на основании их симптомов и истории болезни при зачислении в исследование. Распределение субъектов на три подтипа в клинических центрах было разным, как показано в Таблице 2.

Таблица 2
Количество и процент субъектов в каждом IBS подтипе, определенные исследовательским центром, mITT популяция IBS-C IBS-D IBS-M Всего Garden Grove 12 (75,0%) 1 (6,3%) 3 (18,6%) 16 (100,0%) San Francisco 12 (23,5%) 22 (43,1%) 18 (34,6%) 52 (100,0%) Westlake 16 (35,6%) 29 (64,4%) 0 45 (100,0%) Всего 40 (35,7%) 52 (46,4%) 21 (18,6%) 113 (100,0%)

Комплаентность

Прием назначенной дозы субъектами в группе Плацебо составил 87,0±17,8%, тогда как в группе Активного продукта прием составил 77,3±19,9%. На основании протокола, 84,4% субъектов в группе Плацебо и 87,3% субъектов в группе Активного продукта, которые приняли по меньшей мере 70% предназначенного IP, были определены как комплаентные.

Шкала оценки тяжести симптомов IBS - IBS-SSS

IBS-SSS состоит из вопросов, касающихся тяжести абдоминальной боли, количества дней с болью за последние 10 дней, тяжести вздутия живота, удовлетворенности работой кишечника и степени, в которой IBS мешает жизни субъекта в целом. Все это, за исключением дней с болью, оценивали по шкале Likert с оценками от 0 до 100. Когда была подсчитана общая оценка, никакого среднего улучшения 30% или больше в пользу групп Активного продукта не было продемонстрировано.

Ни в одной подгруппе пациентов изменение тяжести абдоминальной боли не достигло 30% для группы Активного продукта по сравнению с группой Плацебо. Однако клиническое улучшение было отмечено во многих подгруппах для отдельных симптомов, составляющих IBS-SSS. Таблица 3 показывает, что самый высокий процент улучшения в оценках IBS-SSS вопросов наблюдали в IBS-D подтипе, особенно у женщин, у которых процент улучшения варьировался от 50% до 144% в пользу лечения Активным продуктом. Мужчины в подтипе диареи показали меньшее улучшение в “удовлетворенности работой кишечника” (43%) и “мешающем влиянии на активность” (39%). Преимущество в IBS-C подтипе было продемонстрировано в “днях с болью” у женщин (42%) и в “удовлетворенности работой кишечника” как у мужчин, так и у женщин (30% и 33%).

Таблица 3
Отдельные IBS-SSS вопросы, которые показали среднюю разницу 30% или больше в пользу лечения Активным продуктом, mITT популяция Конечная точка Группа Улучшение оценки, V2-V4
Среднее значение±SD (n) % Улучшения Активный продукт vs. Плацебо Симптомы Плацебо Активный продукт Дни/боль IBS-M ♀♂ 1,00±1,00 (3) 2,25±4,17 (8) 125% IBS-C ♀ 2,14±2,97 (7) 3,03±3,74 (14) 42% Тяжесть вздутия IBS-D ♀♂ 11,31±21,27 (13) 21,33±23,82 (27) 89% IBS-D ♀ 16,56±15,54 (9) 24,83±24,65 (18) 50% Удовлетворенность работой кишечника IBS-C ♀♂ 23,27±20,37 (11) 30,71±24,12 (21) 32% IBS-C ♀ 24,71±25,34 (7) 32,21±24,20 (14) 30% IBS-C ♂ 20,75±9,25 (4) 27,71±25,57 (7) 33% IBS-D ♀♂ 23,00±19,77 (13) 37,82±30,95 (27) 64% IBS-D ♀ 21,44±29,50 (9) 37,72±35,81 (18) 76% IBS-D ♂ 26,50±31,10 (4) 38,00±19,58 (9) 43% Все женщины 24,61±25,86 (18) 35,92±29,66 (40) 46% Влияние на жизнь IBS-D ♀♂ 16,00±21,67 (11) 32,81±26,91 (26) 105% IBS-D ♀ 14,38±20,89 (8) 35,18±30,58 (17) 144% IBS-D ♂ 20,33±27,97 (3) 28,33±18,91 (9) 39% IBS-M ♀♂ 13,00±33,20 (4) 22,80±23,64 (10) 75% Все женщины 16,88±25,85 (17) 26,49±30,73 (40) 57%

Во многих из подгрупп процент, показывающий преимущество лечения Активным продуктом по сравнению с Плацебо по отдельным вопросам был значительно выше определенного авторами изобретения порога 30%.

Качество жизни - IBS QOL общие оценки

Общие оценки IBS-QOL исследовали для всей популяции, в рамках IBS-C и IBS-D подтипов и пола, а также для каждого пола в рамках подтипа. Процент улучшения в группах Активный продукт vs. Плацебо (Таблица 4) был сопоставимым с результатами, полученными в IBS-SSS, с положительными ответами, сконцентрированными в IBS-D подтипе и у женщин. У мужчин IBS-D подтипа наблюдали более низкую степень улучшения (38%) для Активного продукта.

Таблица 4
Улучшение общей оценки QOL, которая показала среднюю разницу 30% или больше в пользу лечения Активным продуктом, mITT популяция Группа (n) Подгруппа (n) Улучшение оценки, Визит 2 - Визит 4, Среднее значение ± SD (n) % Улучшения, Активный продукт vs. Плацебо Плацебо Активное средство Женщины и мужчины Все (85) 18,44±23,15 (27) 24,01±22,39 (58) 30% IBS-D (37) 15,44±13,10 (11) 25,40±23,47 (26) 65% Женщины Все (55) 11,03±18,86 (17) 21,40±20,72 (38) 94% IBS-C (20) 10,29±27,84 (7) 20,70±18,72 (13) 101% IBS-D (25) 12,78±11,61 (8) 22,40±24,78 (17) 75% Мужчины IBS-D (12) 22,55±16,70 (3) 31,05±20,94 (9) 38%

Оценки качества жизни IBS-QOL по отдельным областям

Терапевтический эффект Активного IP по сравнению с Плацебо был продемонстрирован у женщин для общих QOL оценок (Таблица 4) и в каждой из восьми областей определения (Таблица 5). Эффект в женской подгруппе наблюдали в обоих подтипах IBS-C и IBS-D. В мужской IBS-D подгруппе терапевтический эффект наблюдался для общей QOL оценки и в четырех областях определения.

Таблица 5
Оценки для восьми областей определения IBS-QOL, mITT популяция. Изменения средних оценок для областей определения, которые составили 30% или больше в пользу лечения Активным продуктом, выделены жирным шрифтом Подтипы и пол Область Все субъекты IBS-C IBS-D IBS-M Женщины Мужчины IBS-C женщины IBS-C мужчины IBS-D женщины IBS-D мужчины Дисфория 33,6 32,2 48,0 3,1 62,8 6,2 139,9 -10,8* 39,5 66,7 Мешающее влияние на активность 42,9 27,8 78,1 8,9 208,4 -9,4* 1704,9 -28,4* 84,2 59,4 Ощущение своего тела 18,5 -17,7* 95,5 -8,6* 67,0 - 9,4* 18,4 -22,2* 166,7 27,8 Беспокойство о здоровье 45,2 19,1 112,2 46,6 80,3 19,1 32,8 11,1 131,8 19,1 Избегание пищевых продуктов 3,5 29,9* 73,5 37,2 82,5 -33,0* -25,2* -33,7* 641,9 -31,4* Социальное взаимодействие 36,4 65,3 29,5 -15,1* 112,6 -7,3* 2331,5 -9,3* 25,0 33,6 Сексуальное поведение 35,7 35,0 13,4 583,9 88,8 1,9 59,3 -9,3* 16,5 0 Взаимосвязи 29,1 2,5 68,4 51,0 69,9 4,2 91,6 -21,8* 41,7 133,1 *Отрицательное число показывает, что улучшение было больше в группе Плацебо, чем в группе Активного продукта

Адекватное облегчение

Что касается исследования популяции в целом, не было никакой разницы между двумя группами исследования, касающейся AR симптомов IBS при Визитах 2, 3 и 4. Был отмечен сильный эффект плацебо.

Авторы изобретения дополнительно проанализировали данные от каждого из IBS подтипов, чтобы найти какую-либо разницу в AR IBS в рамках подтипов при любом визите в период исследования. Никакой разницы не было обнаружено между двумя группами исследования в каком-либо из трех подтипов IBS. Анализ подгрупп мужчин и женщин и подгрупп разного пола в каждом из 3 подтипов IBS дал аналогичные результаты.

Консистенция стула

В анализе консистенции стула положительное изменение (“улучшение”) указывает на более высокую BSC оценку в IBS-C и более низкую BSC оценку в IBS-D. Таблица 6 показывает процентное изменение, Активный продукт vs. Плацебо, для подгрупп с изменениями 30% или больше при приеме Активного продукта по сравнению с Плацебо.

Таблица 6
Подгруппы, которые показали среднюю разницу 30% или больше для улучшения консистенции стула, mITT популяция Конечная точка IBS подтипы и пол Эффект лечения,
Визит 2 - Визит 4 % Улучшения,
Активный продукт vs. Плацебо Плацебо (n) Активное средство (n) Консистенция стула, BSC IBS-C ♂ 1,06±1,01 (4) 1,81±1,16 (8) 71% IBS-D ♀♂ 0,93±1,37 (7) 1,78±1,42 (20) 91% IBS-D ♀ 0,95±1,68 (5) 1,88±1,58 (13) 98% IBS-D ♂ 0,88± 0,18 (2) 1,57±1,13 (7) 78%

Средняя консистенция стула улучшалась для обеих групп лечения Плацебо и Активным продуктом. Средние изменения в группе Плацебо типично составляли примерно один пункт по BSC шкале, с диапазоном от 0,88 до 1,50, и примерно 1,75 пунктов по BSC шкале в группе Активного продукта, с диапазоном от 1,17 до 1,88. Процент изменения отражал то, что наблюдали в конечных точках, представленных выше: мужчины и женщины в группе Активного продукта в подтипе IBS-D продемонстрировали самый сильный ответ по сравнению с Плацебо. Для мужчин в IBS-C подтипе было преимущество Активного продукта по сравнению с Плацебо, но это не наблюдалось ни для IBS-C группы в целом, ни для женщин с IBS-C. Самую большую разницу между группами лечения наблюдали в IBS-D подтипе, как у мужчин, так и у женщин. Мужская подгруппа и подгруппа мужчин с IBS-C также показали улучшение консистенции стула vs. Плацебо.

Частота стула

В анализе частоты стула положительное изменение (“улучшение”) указывает на повышенную частоту в IBS-C и пониженную частоту в IBS-D. В обеих группах Плацебо и Активного продукта частота стула улучшалась в обоих IBS-C и IBS-D подтипах, при этом субъекты в IBS-C подтипе имели более частый стул в последнюю неделю исследования, чем в течение вводного периода, тогда как субъекты в IBS-D подтипе сообщали о снижении частоты стула по сравнению с этим периодом. Таблица 7 показывает подтипы IBS и подгруппы, в которых Активный продукт превосходил Плацебо для улучшения частоты стула на 30% или больше.

Таблица 7
Подгруппы, которые показали среднюю разницу 30% или больше, что касается улучшения в частоты стула, mITT популяция Конечная точка Подтип Улучшение в оценке от Визита 2 до Визита 4
(среднее значение, SD) % Улучшения, Активный продукт vs. Плацебо Частота стула/день Плацебо (n) Активное средство (n) IBS-C ♀♂ 0,27±0,65(11) 0,77±0,81 (22) 185% IBS-C ♀ 0,29±0,49 (7) 0,57±0,76 (14) 97% IBS-C ♂ 0,25±0,96 (4) 1,13±0,83 (8) 352% IBS-D ♀♂ 0,57±2,28 (7) 1,45±1,76(20) 154% IBS-D ♀ 1,20± (5) 1,62±2,02 (13) 35% IBS-D ♂ -1,00± без SD (2) 1,14± 1,21 (7) 214%

Специфические для исследовательского центра эффекты

Клинический центр Garden Grove имел особенно интересную подгруппу субъектов: из 16 субъектов, лечившихся в Garden Grove, 12 были женщины с тяжелым хроническим запором, трудноподдающимся лечению. В этой подгруппе средняя ежедневная частота стула (важная конечная точка для IBS-C, согласно руководящему документу FDA) увеличивалась в среднем на 0,25 частота стула/день в группе Плацебо и на 0,75 частота стула/день в подгруппе Активного продукта, что означает 200% увеличение для Активного продукта vs. Плацебо. Следует также отметить, что для этого клинического центра субъекты, рандомизированные для лечения Активным средством, имели меньшую среднюю частоту стула в неделю на исходном уровне, чем субъекты в группе Плацебо (0,38 частота стула/день vs. 0,75 частота стула/день), что дает большее увеличение частоты стула в группе Активного продукта.

Таблица 8
Улучшение ежедневной частоты стула по визитам и группам лечения, Garden Grove Site с IBS подтипа запора, mITT популяция Визит 2 Визит 4 Улучшение (от Визита 2 до Визита 4) % Улучшения, Активный продукт vs. Плацебо Частота стула/день Плацебо Активный продукт Плацебо Активный продукт Плацебо Активноый продукт Среднее значение 0,75 0,38 1 1,13 0,25 0,75 200% SD 0,5 0,74 0 0,64 0,5 0,89 n 4 8 4 8 4 8

Безопасность

В общей сложности 7 субъектов сообщили об одном или более AE в период исследования; 3 из этих субъектов были в группе Плацебо, а 4 были в группе Активного продукта. Были сообщения в общей сложности о 14 AE от 7 субъектов; все были легкой или средней степени тяжести, за исключением сильных судорог, о которых сообщил один субъект в группе Активного продукта. Четыре события были расценены исследователем как возможно связанные с исследуемым продуктом: сухость во рту с повышенной жаждой, учащенное дыхание, тошнота и слабость. Обо всех этих явлениях сообщил один субъект в группе Плацебо; сухость во рту и повышенная жажда сохранялись на протяжении всего периода исследования, но исчезли за день до последнего визита субъекта в исследовании. Никакие AE не были расценены как определенно связанные с исследуемым продуктом, и не было никаких серьезных AE.

Обсуждение

Открытие эффективного лечения IBS было целью исследований лекарственных препаратов и пробиотиков в последние годы. Хотя исследуемые популяции многих пробиотических исследований были небольшими, было опубликовано несколько метаанализов, и было показано, что определенные виды и штаммы пробиотиков более эффективны, чем другие, в смягчении симптомов IBS (McFarland and Dublin, 2008; Ortiz-Lucas et al., 2013). Изучение IBS осложняется тем фактом, что пациенты часто демонстрируют психологический профиль тревоги и депрессии (Ford et al., 2014a); эти психологические эффекты могут усугубляться отсутствием эффективного лечения и общественным восприятием IBS как несерьезного состояния. При оценке лечения также необходимо учитывать влияние расы, этнической принадлежности, режима питания и культуры (Fava et al., 2013; Hughes, 2012).

В этом исследовании оценивали эффект комбинированных L. acidophilus CL1285®, L.casei LBC80R® и L. rhamnosus CLR2® на симптомы IBS и качество жизни в трех подтипах IBS: IBS-С, IBS-D и IBS-М. Как сообщалось во многих исследованиях, Плацебо продукт, используемый в этом исследовании, вызывал улучшение симптомов IBS, достигая уровня терапевтического эффекта, такого как описано в руководстве FDA. В соответствии с этим руководством, улучшение 30% при использовании Активного продукта по сравнению с Плацебо было определено как значительное повышение терапевтической ценности для изменения конечных точек исследования в QOL (в целом и в разных областях) и изменений в абдоминальной боли, вздутии живота, количестве дней с болью, удовлетворении работой кишечника и мешающем влиянии на жизнь в целом. Штаммы в Активном продукте были эффективны по сравнению с Плацебо в одновременном облегчении клинических симптомов IBS-C и IBS-D до разной степени как у мужчин, так и у женщин. Частота стула была улучшена в обоих подтипах; консистенция стула, измеренная по шкале BSC, улучшилась у субъектов мужского и женского пола с IBS-D и у субъектов мужского пола с IBS-C подтипом. Эти конечные точки являются такими, которые в настоящее время рекомендованы регулирующими органами США и Европы для демонстрации эффективности в испытаниях лекарственных средств с участием пациентов с IBS-C и IBS-D. Эти результаты показывают, что эти симптоматические преимущества отражали параллельные тенденции в оценке IBS-QOL, разработанной специально для IBS (Drossman et al., 2000).

Субъекты женского пола, в частности IBS-D подтипа, имели хороший ответ на Активный продукт, что касается частоты и консистенции стула, и показывали наилучшие ответы с точки зрения улучшения симптомов и QOL. Хотя ответы мужчин были также хорошими, что касается частоты и консистенции стула, ответ на Активный продукт по сравнению с Плацебо был менее впечатляющим, чем в женской подгруппе.

Симптоматический ответ, наблюдаемый в обоих подтипах IBS-C, и IBS-D, предполагает, что указанные 3 штамма лактобактерий эффективны для облегчения симптомов и улучшения QOL при этом показании.

Профиль безопасности продукта, используемого в этом исследовании, был задокументирован в предыдущих клинических испытаниях (Beausoleil et al., 2007; Gao et al., 2010; Sampalis et al., 2010) и исследовании улучшения качества (Maziade et al., 2015). Механизм действия исследуемого продукта был продемонстрирован при некоторых патологиях кишечника, но не изучался в настоящем исследовании (Auclair et al., 2015). Интересно, что терапевтические преимущества, наблюдаемые с этими 3 штаммами лактобактерий по сравнению с плацебо, превосходят наблюдаемые в исследованиях лекарственных средств, которые не лишены значительных побочных эффектов (Cremonini et al., 2003; Kellow et al., 2003; Tack et al., 2005) . Одобренные препараты показали худшие профили безопасности, чем схемы с пробиотиками, которые продемонстрировали благоприятный профиль безопасности.

Интересно отметить, что немногие исследования оценивали эффекты пробиотиков на качество жизни, а из тех, которые оценивали, многие не обнаружили значительного улучшения (Halpern et al., 1996; Kellow et al., 2003; Kim et al., 2003; Moayyedi et al., 2010; Niv et al., 2005). Несколько исследований показали улучшение в некоторых областях (Guglielmetti et al., 2011; Kajander et al., 2008; Lorenzo-Zúñiga et al., 2014; O'Mahony et al., 2005), но, насколько известно авторам настоящего изобретения, никакой эффект на область определения “мешающее влияние на активность” не был ранее задокументирован. O’Mahony et al. обнаружили более низкие IBS-QOL оценки для L.salivarius ssp. и B.infantis для большинства областей определения (O’Mahony et al., 2005).

Данное исследование предоставляет доказательства терапевтических эффектов в определенных подтипах и подгруппах IBS, которые последовательно наблюдались для разных конечных точек: частота и консистенция стула, качество жизни, уменьшение тяжести вздутия, количество дней с болью и удовлетворенность работой кишечника. Полученные результаты согласуются с другими исследованиями, проведенными с пробиотиками и лекарствами (Somberg, 2012).

Низкая частота AE наблюдалась в предыдущих исследованиях, проведенных с исследуемым продуктом. Этот протокол был основан на предыдущих клинических исследованиях, проведенных в Канаде и США, с оптимальной дозировкой продукта. Исследуемый продукт также ранее оценивался у взрослых на связанную с антибиотиком диареию и профилактику C.difficile, продемонстрируя значительное снижение риска диареи во время вспышки C.difficile в Китае (Gao et al., 2010). За последнее десятилетие клинических исследований с участием исследуемого продукта ни в одном из клинических испытаний не было серьезных побочных эффектов (SAE), связанных с исследуемым продуктом (Beausoleil et al., 2007; Gao et al., 2010; Maziade et al. др., 2015; Sampalis et al., 2010).

Выводы

Конкретная комбинация живых бактерий, используемая в этом исследовании, дала результаты, которые различались для разных полов и подтипов. Тем не менее, она имела явное положительное влияние на консистенцию и частоту стула, качество жизни и симптомы IBS у обоих полов без серьезных побочных эффектов. Эти результаты представляют многообещающий терапевтический вариант для пациентов, страдающих IBS.

ЛИТЕРАТУРА

Aagaard, K., Petrosino, J., Keitel, W., Watson, M., Katancik, J., Garcia, N., Patel, S., Cutting, M., Madden, T., Hamilton, H., Harris, E., Gevers, D., Simone, G., McInnes, P. and Versalovic, J., 2013. The Human Microbiome Project strategy for comprehensive sampling of the human microbiome and why it matters. Federation of American Societies for Experimental Biology Journal 27: 1012-1022.

Auclair, J., Frappier, M. and Millette, M., 2015. Lactobacillus acidophilus CL1285, Lactobacillus casei LBC80R, and Lactobacillus rhamnosus CLR2 (Bio-K+): Characterization, Manufacture, Mechanisms of Action, and Quality Control of a Specific Probiotic Combination for Primary Prevention of Clostridium difficile Infection. Clinical Infectious Diseases 60 Supplement 2: S135-143.

Beausoleil, M., Fortier, N., Guénette, S., L'ecuyer, A., Savoie, M., Franco, M., Lachaine, J. and Weiss, K., 2007. Effect of a fermented milk combining Lactobacillus acidophilus Cl1285 and Lactobacillus casei in the prevention of antibiotic-associated diarrhea: a randomized, double-blind, placebo-controlled trial. Canadian Journal of Gastroenterol 21: 732-736.

Camilleri, M., Mayer, E.A., Drossman, D.A., Heath, A., Dukes, G.E., McSorley, D., Kong, S., Mangel, A.W. and Northcutt, A.R., 1999. Improvement in pain and bowel function in female irritable bowel patients with alosetron, a 5-HT3 receptor antagonist. Alimentary Pharmacology & Therapeutics 13: 1149-1159.

Coffin, B., Dapoigny, M., Cloarec, D., Comet, D. and Dyard, F., 2004. Relationship between severity of symptoms and quality of life in 858 patients with irritable bowel syndrome. Gastroentérologie Clinique et Biologique 28: 11-15.

Cremonini, F., Delgado-Aros, S. and Camilleri, M., 2003. Efficacy of alosetron in irritable bowel syndrome: a meta-analysis of randomized controlled trials. Neurogastroenterology & Motility 15: 79-86.

Drossman, D.A., Patrick, D.L., Whitehead, W.E., Toner, B.B., Diamant, N.E., Hu, Y., Jia, H. and Bangdiwala, S.I., 2000. Further validation of the IBS-QOL: a disease-specific quality-of-life questionnaire. American Journal of Gastroenteroloy 95: 999-1007.

Ducrotté, P., Sawant, P. and Jayanthi, V., 2012. Clinical trial: Lactobacillus plantarum 299v (DSM 9843) improves symptoms of irritable bowel syndrome. World Journal of Gastroenterology 18: 4012-4018.

Fava, F., Gitau, R., Griffin, B.A., Gibson, G.R., Tuohy, K.M. and Lovegrove, J.A., 2013. The type and quantity of dietary fat and carbohydrate alter faecal microbiome and short-chain fatty acid excretion in a metabolic syndrome 'at-risk' population. International Journal of Obesity (London) 37: 216-223.

Ford, A.C. and Moayyedi, P., 2010. Meta-analysis: factors affecting placebo response rate in the irritable bowel syndrome. Alimentary Pharmacology & Therapeutics 32: 144-158.

Ford, A.C., Quigley, E.M., Lacy, B.E., Lembo, A.J., Saito, Y.A., Schiller, L.R., Soffer, E.E., Spiegel, B.M. and Moayyedi, P., 2014a. Effect of antidepressants and psychological therapies, including hypnotherapy, in irritable bowel syndrome: systematic review and meta-analysis. American Journal of Gastroenterology 109: 1350-1365; quiz 1366.

Ford, A.C., Quigley, E.M., Lacy, B.E., Lembo, A.J., Saito, Y.A., Schiller, L.R., Soffer, E.E., Spiegel, B.M. and Moayyedi, P., 2014b. Efficacy of prebiotics, probiotics, and synbiotics in irritable bowel syndrome and chronic idiopathic constipation: systematic review and meta-analysis. American Journal of Gastroenterology 109: 1547-1561; quiz 1546, 1562.

Foxx-Orenstein, A., 2006. IBS--review and what's new. Medscape General Medicine 8: 20.

Gao, X.W., Mubasher, M., Fang, C.Y., Reifer, C. and Miller, L.E., 2010. Dose-response efficacy of a proprietary probiotic formula of Lactobacillus acidophilus CL1285 and Lactobacillus casei LBC80R for antibiotic-associated diarrhea and Clostridium difficile-associated diarrhea prophylaxis in adult patients. American Journal of Gastroenterology 105: 1636-1641.

Guglielmetti, S., Mora, D., Gschwender, M. and Popp, K., 2011. Randomised clinical trial: Bifidobacterium bifidum MIMBb75 significantly alleviates irritable bowel syndrome and improves quality of life--a double-blind, placebo-controlled study. Alimentary Pharmacology & Therapeutics 33: 1123-1132.

Halpern, G.M., Prindiville, T., Blankenburg, M., Hsia, T. and Gershwin, M.E., 1996. Treatment of irritable bowel syndrome with Lacteol Fort: a randomized, double-blind, cross-over trial. American Journal of Gastroenterology 91: 1579-1585.

Hoveyda, N., Heneghan, C., Mahtani, K.R., Perera, R., Roberts, N. and Glasziou, P., 2009. A systematic review and meta-analysis: probiotics in the treatment of irritable bowel syndrome. BMC Gastroenterology 9: 15.

Hughes, V., 2012. Microbiome: Cultural differences. Nature 492: S14-15.

Kajander, K., Myllyluoma, E., Rajilić-Stojanović, M., Kyronpalo, S., Rasmussen, M., Jӓrvenpӓӓ, S., Zoetendal, E.G., de Vos, W.M., Vapaatalo, H. and Korpela, R., 2008. Clinical trial: multispecies probiotic supplementation alleviates the symptoms of irritable bowel syndrome and stabilizes intestinal microbiota. Alimentary Pharmacology & Therapeutics 27: 48-57.

Kellow, J., Lee, O.Y., Chang, F.Y., Thongsawat, S., Mazlam, M.Z., Yuen, H., Gwee, K.A., Bak, Y.T., Jones, J. and Wagner, A., 2003. An Asia-Pacific, double blind, placebo controlled, randomised study to evaluate the efficacy, safety, and tolerability of tegaserod in patients with irritable bowel syndrome. Gut 52: 671-676.

Kim, H.J., Camilleri, M., McKinzie, S., Lempke, M.B., Burton, D.D., Thomforde, G.M. and Zinsmeister, A.R., 2003. A randomized controlled trial of a probiotic, VSL#3, on gut transit and symptoms in diarrhoea-predominant irritable bowel syndrome. Alimentary Pharmacology & Therapeutics 17: 895-904.

Lorenzo-Zúñiga, V., Llop, E., Suárez, C., Alvarez, B., Abreu, L., Espadaler, J. and Serra, J., 2014. I.31, a new combination of probiotics, improves irritable bowel syndrome-related quality of life. World Journal of Gastroenterology 20: 8709-8716.

Lyra, A., Hillilӓ, M., Huttunen, T., Mӓnnikkö, S., Taalikka, M., Tennilӓ, J., Tarpila, A., Lahtinen, S., Ouwehand, A.C. and Veijola, L., 2016. Irritable bowel syndrome symptom severity improves equally with probiotic and placebo. World Journal of Gastroenterology 22: 10631-10642.

Maziade, P.J., Pereira, P. and Goldstein, E.J., 2015. A Decade of Experience in Primary Prevention of Clostridium difficile Infection at a Community Hospital Using the Probiotic Combination Lactobacillus acidophilus CL1285, Lactobacillus casei LBC80R, and Lactobacillus rhamnosus CLR2 (Bio-K+). Clinical Infectious Diseases 60 Supplement 2: S144-147.

McFarland, L.V. and Dublin, S., 2008. Meta-analysis of probiotics for the treatment of irritable bowel syndrome. World Journal of Gastroenterology 14: 2650-2661.

Moayyedi, P., Ford, A.C., Talley, N.J., Cremonini, F., Foxx-Orenstein, A.E., Brandt, L.J. and Quigley, E.M., 2010. The efficacy of probiotics in the treatment of irritable bowel syndrome: a systematic review. Gut 59: 325-332.

Niv, E., Naftali, T., Hallak, R. and Vaisman, N., 2005. The efficacy of Lactobacillus reuteri ATCC 55730 in the treatment of patients with irritable bowel syndrome--a double blind, placebo-controlled, randomized study. Clinical Nutrition 24: 925-931.

O'Mahony, L., McCarthy, J., Kelly, P., Hurley, G., Luo, F., Chen, K., O'Sullivan, G.C., Kiely, B., Collins, J.K., Shanahan, F. and Quigley, E.M., 2005. Lactobacillus and Bifidobacterium in irritable bowel syndrome: symptom responses and relationship to cytokine profiles. Gastroenterology 128: 541-551.

Ortiz-Lucas, M., Tobias, A., Saz, P. and Sebastian, J.J., 2013. Effect of probiotic species on irritable bowel syndrome symptoms: A bring up to date meta-analysis. Revista Espanola de Enfermedades Digestivas 105: 19-36.

Peery, A.F., Dellon, E.S., Lund, J., Crockett, S.D., McGowan, C.E., Bulsiewicz, W.J., Gangarosa, L.M., Thiny, M.T., Stizenberg, K., Morgan, D.R., Ringel, Y., Kim, H.P., Dibonaventura, M.D., Carroll, C.F., Allen, J.K., Cook, S.F., Sandler, R.S., Kappelman, M.D. and Shaheen, N.J., 2012. Burden of gastrointestinal disease in the United States: 2012 update. Gastroenterology 143: 1179-1187 e1171-1173.

Sampalis, J., Psaradellis, E. and Rampakakis, E., 2010. Efficacy of BIO K+ CL1285 in the reduction of antibiotic-associated diarrhea - a placebo controlled double-blind randomized, multi-center study. Archives of Medical Science 6: 56-64.

Shih, D.Q. and Kwan, L.Y., 2007. All Roads Lead to Rome: Update on Rome III Criteria and New Treatment Options. Gastroenterology Report 1: 56-65.

Somberg, J.C., 2012. The human microbiome and therapeutics. American Journal of Therapeutics 19: 247

Tack, J., Müller-Lissner, S., Bytzer, P., Corinaldesi, R., Chang, L., Viegas, A., Schnekenbuehl, S., Dunger-Baldauf, C. and Rueegg, P., 2005. A randomised controlled trial assessing the efficacy and safety of repeated tegaserod therapy in women with irritable bowel syndrome with constipation. Gut 54: 1707-1713.

Whelan, K. and Myers, C.E., 2010. Safety of probiotics in patients receiving nutritional support: a systematic review of case reports, randomized controlled trials, and nonrandomized trials. American Journal of Clinical Nutrition 91: 687-703.

Yoon, H., Park, Y.S., Lee, D.H., Seo, J.G., Shin, C.M. and Kim, N., 2015. Effect of administering a multi-species probiotic mixture on the changes in fecal microbiota and symptoms of irritable bowel syndrome: a randomized, double-blind, placebo-controlled trial. Journal of Clinical Biochemistry and Nutrition 57: 129-134.

* * *

Заголовки включены для ссылки и для помощи в поиске определенных разделов. Эти заголовки не предназначены для ограничения объема описанных в них концепций, и эти концепции могут применяться в других разделах настоящего описания. Таким образом, настоящее изобретение не предназначено для ограничения вариантами осуществления, показанными в настоящей заявке, но должно соответствовать самому широкому объему, согласующемуся с принципами и новыми признаками, раскрытыми в настоящей заявке.

Формы единственного числа включают соответствующие ссылки во множественном числе, если контекст явно не диктует иное. Таким образом, например, ссылка на “соединение” включает одно или несколько таких соединений, а ссылка на “способ” включает ссылку на эквивалентные стадии и способы, известные рядовым специалистам в данной области, которые могут быть модифицированы или заменены способами, описанными в настоящей заявке.

Если не указано иное, все числа, выражающие количества ингредиентов, условия реакции, концентрации, свойства и т.д., используемые в описании и формуле изобретения, следует понимать как модифицируемые во всех случаях термином “около”. По меньшей мере каждый числовой параметр должен толковаться, по меньшей мере, в свете количества сообщаемых значащих цифр и с применением обычных методов округления. Соответственно, если не указано иное, численные параметры, изложенные в настоящем описании и прилагаемой формуле изобретения, являются приблизительными, которые могут варьироваться в зависимости от свойств, которые должны быть достигнуты. Несмотря на то, что числовые диапазоны и параметры, определяющие широкий объем вариантов осуществления, являются приблизительными, численные значения, изложенные в конкретных примерах, сообщаются с максимально возможной точностью. Однако любое числовое значение по своей сути содержит определенные ошибки, возникающие в результате вариаций в экспериментах, опытных измерениях, статистических анализах и т.д.

Должно быть понятно, что примеры и варианты осуществления, описанные в настоящей заявке, предназначены только для иллюстративных целей и что различные модификации или изменения в их свете будут предложены специалистам в данной области техники и должны быть включены в настоящее изобретение и объем прилагаемой формулы изобретения.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложены композиции и способы, связанные с применением комбинации, содержащей 50 миллиардов колониеобразующих единиц (КОЕ) 1-5% живых Lactobacillus acidophilus, 75-85% живых Lactobacillus casei и 5-10% живых Lactobacillus rhamnosus, для облегчения желудочно-кишечного расстройства у субъекта, нуждающегося в этом, выбранного из группы, состоящей из синдрома раздраженного кишечника (IBS), абдоминальной боли, вздутия живота и запора. Также предложены композиции и способы, связанные с применением указанной комбинации для облегчения IBS у субъекта-человека. Также предложен способ лекарственной терапии для профилактики или лечения IBS с использованием указанной комбинации. Изобретение обеспечивает эффективное облегчение желудочно-кишечного расстройства для облегчения желудочно-кишечного расстройства у субъекта, нуждающегося в этом, выбранного из группы, состоящей из IBS, абдоминальной боли, вздутия живота и запора. 7 н. и 29 з.п. ф-лы, 8 табл., 1 пр.

1. Способ облегчения желудочно-кишечного расстройства у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение указанному субъекту комбинации, содержащей 50 миллиардов колониеобразующих единиц (КОЕ) 1-5% живых Lactobacillus acidophilus, 75-85% живых Lactobacillus casei и 5-10% живых Lactobacillus rhamnosus, где указанный Lactobacillus acidophilus представляет собой Lactobacillus acidophilus CL1285^®, депонированный в CNCM в Париже под номером CNCM I-4099, где указанный Lactobacillus casei представляют собой Lactobacillus casei LBC80R^®, депонированный в CNCM под номером CNCM I-3989, и где указанный Lactobacillus rhamnosus представляет собой Lactobacillus rhamnosus CLR2^®, депонированный в CNCM под номером CNCM I-3990, и где указанное желудочно-кишечное расстройство выбрано из группы, состоящей из синдрома раздраженного кишечника (IBS), абдоминальной боли, вздутия живота и запора.

2. Способ по п. 1, где указанное введение включает введение питательно приемлемой композиции, включающей указанную комбинацию лактобактерий.

3. Способ по любому из пп. 1, 2, где указанное введение включает введение указанной комбинации лактобактерий по меньшей мере один раз в день.

4. Способ по любому из пп. 1-3, где указанное введение включает введение капсулы, включающей указанную комбинацию лактобактерий.

5. Способ по любому из пп. 1-4, где указанное введение включает введение фермента, при этом указанный фермент включает ферментированные белки в дополнение к указанной комбинации лактобактерий.

6. Способ по п. 5, где указанные ферментированные белки выбраны из группы, состоящей из ферментированных соевых белков, ферментированных молочных белков, ферментированных рисовых белков, ферментированных белков гороха, ферментированных белков конопли, ферментированных белков миндаля и ферментированных белков насекомых.

7. Способ облегчения синдрома раздраженного кишечника (IBS) у субъекта-человека, нуждающегося в этом, включающий введение указанному субъекту комбинации содержащей 50 миллиардов колониеобразующих единиц (КОЕ) 1-5% живых Lactobacillus acidophilus CL1285^®, 75-85% живых Lactobacillus casei LBC80R^® и 5-10% живых Lactobacillus rhamnosus CLR2^®.

8. Способ по п. 7, где указанный IBS включает по меньшей мере один из IBS с преобладанием запора (IBR-С), IBS с преобладанием диареи (IBR-D) и IBS смешанного типа (IBR-М).

9. Способ по п. 7 или 8, где указанный способ обеспечивает одновременное облегчение нескольких симптомов IBS.

10. Способ по п. 9, где указанные симптомы выбраны из группы, состоящей из абдоминальной боли, вздутия живота и запора.

11. Способ по любому из пп. 7-10, где указанное введение включает введение питательно приемлемой композиции, включающей указанную комбинацию лактобактерий.

12. Способ по любому из пп. 7-11, где указанная комбинация живых Lactobacillus acidophilus, живых Lactobacillus casei и живых Lactobacillus rhamnosus включает около 1-5% L. acidophilus, 75-85% L. casei и 5-10% L. rhamnosus колониеобразующих единиц (КОЕ) комбинации.

13. Способ по любому из пп. 7-12, где указанное введение включает введение указанной комбинации лактобактерий по меньшей мере один раз в день.

14. Способ по любому из пп. 7-12, где указанное введение включает введение капсулы, включающей указанную комбинацию лактобактерий.

15. Способ по любому из пп. 7-14, где указанное введение включает введение фермента, при этом указанный фермент включает ферментированные белки в дополнение к указанной комбинации лактобактерий.

16. Способ по п. 15, где указанные ферментированные белки выбраны из группы, состоящей из ферментированных соевых белков, ферментированных молочных белков, ферментированных рисовых белков, ферментированных белков гороха, ферментированных белков конопли, ферментированных белков миндаля и ферментированных белков насекомых.

17. Cпособ лекарственной терапии для профилактики или лечения синдрома раздраженного кишечника (IBS), включающий: (i) идентификацию субъекта-человека, нуждающегося в лекарственной терапии для профилактики и/или лечения IBS; и (ii) введение указанному субъекту-человеку питательно приемлемой композиции, включающей комбинацию 50 миллиардов колониеобразующих единиц (КОЕ) живых микроорганизмов, включающих 1-5% живых Lactobacillus acidophilus, 75-85% живых Lactobacillus casei и 5-10% живых Lactobacillus rhamnosus, в дополнение к, или вместо, указанной лекарственной терапии, где указанный Lactobacillus acidophilus представляют собой Lactobacillus acidophilus CL1285^®, депонированный в CNCM под номером CNCM I-4099, где указанный Lactobacillus casei представляет собой Lactobacillus casei LBC80R^®, депонированный в CNCM под номером CNCM I-3989, и где указанный Lactobacillus rhamnosus представляет собой Lactobacillus rhamnosus CLR2^®, депонированный в CNCM под номером CNCM I-3990.

18. Cпособ по п. 17, где указанное введение включает введение указанной питательно приемлемой композиции по меньшей мере один раз в день.

19. Cпособ по любому из пп. 17, 18, где указанное введение включает введение капсулы, включающей указанную питательно приемлемую композицию.

20. Способ по любому из пп. 17-19, где указанная комбинация живых Lactobacillus acidophilus, живых Lactobacillus casei и живых Lactobacillus rhamnosus включает 1-5% L. acidophilus, 75-85% L. casei и 5-10% L. rhamnosus колониеобразующих единиц (КОЕ) комбинации.

21. Cпособ по любому из пп. 17-20, где указанная питательно приемлемая композиция принимает форму фермента, включающего ферментированные белки в дополнение к указанной комбинации лактобактерий.

22. Cпособ по п. 21, где указанные ферментированные белки выбраны из группы, состоящей из ферментированных соевых белков, ферментированных молочных белков, ферментированных рисовых белков, ферментированных белков гороха и ферментированных белков конопли.

23. Способ по любому из пп. 17-22, где указанное введение обеспечивает указанному субъекту по меньшей мере один благоприятный эффект, выбранный из группы, состоящей из следующих: удовлетворенность работой кишечника, минимальное влияние IBS, мешающее нормальной деятельности, улучшенное ощущение своего тела, сокращение избегания пищи, повышенное социальное взаимодействие, уменьшенная сексуальная дисфункция и улучшенные взаимоотношения.

24. Композиция для облегчения желудочно-кишечного расстройства у субъекта, нуждающегося в этом, включающая комбинацию, содержащую 50 миллиардов колониеобразующих единиц (КОЕ) 1-5% живых Lactobacillus acidophilus CL1285^®, 75-85% живых Lactobacillus casei LBC80R^®, 5-10% живых Lactobacillus rhamnosus CLR2^®, где указанное желудочно-кишечное расстройство выбрано из группы, состоящей из синдрома раздраженного кишечника (IBS), абдоминальной боли, испытываемой в течение нескольких дней боли, вздутия, консистенции стула и частоты стула.

25. Композиция для облегчения синдрома раздраженного кишечника (IBS) у субъекта, нуждающегося в этом, включающая комбинацию, содержащую 50 миллиардов колониеобразующих единиц (КОЕ) 1-5% живых Lactobacillus acidophilus CL1285^®, 75-85% живых Lactobacillus casei LBC80R^® и 5-10% живых Lactobacillus rhamnosus CLR2^®.

26. Композиция по п. 24 или 25, где указанная композиция включает ферментированные белки в дополнение к указанной комбинации лактобактерий.

27. Композиция по п. 26, где указанные ферментированные белки выбраны из группы, состоящей из ферментированных соевых белков, ферментированных молочных белков, ферментированных рисовых белков, ферментированных белков гороха, ферментированных белков конопли, ферментированных белков миндаля и ферментированных белков насекомых.

28. Композиция по любому из пп. 24-27, где указанная композиция включает 1-5% L. acidophilus, 75-85% L. casei и 5-10% L. rhamnosus колониеобразующих единиц (КОЕ) комбинации.

29. Композиция по любому из пп. 24-28, где указанная композиция представляет собой питательно приемлемую композицию.

30. Применение комбинации, содержащей 50 миллиардов колониеобразующих единиц (КОЕ) 1-5% живых Lactobacillus acidophilus, 75-85% живых Lactobacillus casei и 5-10% живых Lactobacillus rhamnosus для облегчения желудочно-кишечного расстройства у субъекта, нуждающегося в этом, где указанное желудочно-кишечное расстройство выбрано из группы, состоящей из синдрома раздраженного кишечника (IBS), абдоминальной боли, вздутия живота и запора, где указанный Lactobacillus acidophilus представляет собой Lactobacillus acidophilus CL1285^® депонированный под номером CNCM I-4099, где указанный Lactobacillus casei представляет собой Lactobacillus casei LBC80R^® депонированный под номером CNCM I-3989, и где указанный Lactobacillus rhamnosus представляет собой Lactobacillus rhamnosus CLR2^® депонированный под номером CNCM I-3990.

31. Применение по п. 30, где указанное введение обеспечивает указанному субъекту по меньшей мере один благоприятный эффект, выбранный из группы, состоящей из следующих: удовлетворенность работой кишечника, минимальное влияние IBS, мешающее нормальной деятельности, улучшенное ощущение своего тела, сокращение избегания пищи, повышенное социальное взаимодействие, уменьшенная сексуальная дисфункция и улучшенные взаимоотношения.

32. Применение комбинации, содержащей 50 миллиардов колониеобразующих единиц (КОЕ) 1-5% живых Lactobacillus acidophilus CL1285^®, 75-85% живых Lactobacillus casei LBC80R^® и 5-10% живых Lactobacillus rhamnosus CLR2^® для профилактики, лечения или облегчения синдрома раздраженного кишечника (IBS) у субъекта, нуждающегося в этом.

33. Применение по любому из пп. 30-32, где указанная комбинация живых Lactobacillus acidophilus, живых Lactobacillus casei и живых Lactobacillus rhamnosus включает 1-5% L. acidophilus, 75-85% L. casei и 5-10% L. rhamnosus колониеобразующих единиц (КОЕ) комбинации.

34. Применение по любому из пп. 30-33, где указанные живые Lactobacillus acidophilus, живые Lactobacillus casei и живые Lactobacillus rhamnosus присутствуют в композиции, включающей ферментированные белки.

35. Применение по п. 34, где указанные ферментированные белки выбраны из группы, состоящей из ферментированных соевых белков, ферментированных молочных белков, ферментированных рисовых белков, ферментированных белков гороха, ферментированных белков конопли, ферментированных белков миндаля и ферментированных белков насекомых.

36. Применение по любому из пп. 30-35, где указанный субъект принимает 50 миллиардов КОЕ указанной комбинации лактобактерий один раз в день.