ПРИМЕНЕНИЕ МЕЛАМИНОВОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ СБОРА И/ИЛИ ОБРАБОТКИ БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБРАЗЦОВ И В ПОЛУЧЕНИИ УСТРОЙСТВА ДЛЯ СБОРА Российский патент 2024 года по МПК A61B10/02 G01N33/543 G01N33/94 

Для настоящего изобретения заявляется приоритет по предыдущей заявке на получение патента Китая с номером 202210594528.0, поданной 27 мая 2022 г., а также по предыдущей заявке на получение патента США с номером 63/350,572, поданной 9 июня 2022 г., при этом их описание, формулы изобретения и чертежи представлены в качестве части настоящего изобретения посредством ссылки.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к технической области диагностики in vitro, в частности, оно относится к новому применению меламиновой губки в диагностике in vitro и, в частности, к применению меламиновой губки при сборе или обработке биологического образца.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Сбор или обработка биологического образца является ключевым этапом процесса диагностики in vitro и прямо связан/связана с точностью и чувствительностью результатов диагностики. В существующих способах сбора или обработки биологического образца, как правило, применяется головка из губки для обработки биологического образца или фильтрационная мембрана для фильтрации биологического образца, но ввиду того, что головка из губки или фильтрационная мембрана обладает адсорбирующим действием в отношении целевого определяемого вещества в образце, особенно на маркерах обнаружения с низким содержанием или легкостью адсорбции, целевые для определения вещества трудно поддаются обнаружению, что приводит к ложному результату обнаружения или отсутствию результата обнаружения, а также ложноотрицательным или ложноположительным результатам диагностики. Таким образом, имеется срочная потребность в поиске устройства, которое могло бы значительно снизить адсорбцию целевого определяемого вещества во время сбора и обработки биологического образца или которое могло бы значительно усилить эффект элюирования целевого определяемого вещества для восстановления достоверности биологических образцов и повышения чувствительности обнаружения вещества.

РАСКРЫТИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Стремясь устранить недостатки уровня техники, в настоящем изобретении представлено применение меламиновой губки при сборе или обработке биологического образца. Головка для сбора биологического образца, блок для сбора биологического образца или фильтрационная мембрана, полученная с использованием меламиновой губки, применяется для сбора или обработки биологического образца, что может значительно снизить адсорбцию целевого определяемого вещества или может значительно усилить эффект элюирования целевого определяемого вещества, тем самым повышая чувствительность обнаружения целевого определяемого вещества и предотвращая ложный результат обнаружения или отсутствие результата обнаружения.

Меламиновая губка, также известная как наногубка и триполицианамидная губка, представляет собой гибкий, эластичный, водоабсорбирующий материал губки со структурой, имеющей открытые поры, выполненный из триполицианамида в качестве основного исходного материала посредством полимеризации, вспенивания и других процессов. Его характеристики отражаются в его тонкой трехмерной трафаретной структуре, а также он обладает превосходными разнообразными свойствами, такими как звукопоглощение, огнестойкость, теплоизоляция, устойчивость к влаге и теплу, гигиеническая безопасность и хорошие свойства вторичной переработки. Благодаря этим характеристикам, продукт находит широкое применение в аэрокосмической и навигационной областях, областях электронных изделий, областях повседневной уборки и других областях.

Таким образом, с одной стороны, в настоящем изобретении представлено устройство для сбора биологического образца, которое содержит меламиновый материал для абсорбции образца. В некоторых вариантах реализации, меламиновый материал содержит меламиновый пористый материал. Меламиновый пористый материал содержит меламиновую губку.

В некоторых вариантах реализации, меламиновая губка имеет плоскую пленкоподобную структуру или трехмерную блокоподобную структуру.

В некоторых вариантах реализации, плоская пленкоподобная структура представляет собой фильтрационную мембрану, которая имеет любую форму из круглой, квадратной, эллипсоидной и многоугольной; а блокоподобная структура представляет собой цилиндр, кубоид, куб, конус или любое другое трехмерное тело, или она представляет собой любое одно из головки из губки, блока из губки и полосы из губки с блокоподобной структурой.

В некоторых вариантах реализации, биологический образец является любым из образца биологической текучей среды, волос, мышц, тканей и органов, взятого из организма.

В некоторых вариантах реализации, биологическая текучая среда представляет собой любое из слюны, мочи, крови, мокроты, лимфы, плазмы, спермы, легочных аспиратов и спинномозговой жидкости.

В некоторых вариантах реализации, определяемое вещество в биологическом образце представляет собой любое из низкомолекулярных наркотических веществ, вызывающих зависимость, клеток, нуклеиновых кислот, белков и аминокислот.

В некоторых вариантах реализации, низкомолекулярные наркотические вещества, вызывающие зависимость, включают в себя тетрагидроканнабинол (ТНС) или подобные ему вещества. В некоторых вариантах реализации, ТНС включает в себя Δ9-ТНС, также известный как тетрагидроканнабинол, Δ9-тетрагидроканнабинол, Δ1-ТНС (согласно старой номенклатуре) и дронабинол (химически синтезированное наркотическое вещество). В некоторых вариантах реализации, низкомолекулярные наркотические вещества, вызывающие зависимость, включают в себя Δ9-ТНС-СООН или Δ9-ТНС.

В некоторых вариантах реализации, в настоящем изобретении представлено устройство для сбора биологического образца, содержащее стержень, конец которого покрыт гидрофильным волокнистым наполнителем для абсорбции образца, причем волокнистый наполнитель последовательно размещен на конце в электростатическом поле в определенном направлении с образованием слоя в форме щетки для покрытия конца стержня, при этом волокнистый наполнитель перпендикулярен поверхности стержня, а волокна представляют собой меламиновые волокна.

В некоторых вариантах реализации, слой в форме щетки имеет одинаковую толщину для абсорбции биологического образца под действием капиллярного эффекта.

В некоторых вариантах реализации, толщина волокнистого наполнителя находится в диапазоне от 0,5 до 3 мм, а масса волокнистого наполнителя находится в диапазоне от 1,0 до 22,0 дтекс.

В некоторых вариантах реализации, конец имеет геометрическую форму круга.

В некоторых вариантах реализации, конец имеет геометрическую форму направленной круглой арки.

В некоторых вариантах реализации, устройство применяют для улучшения сбора жидких образцов или образцов, состоящих из клеток.

С другой стороны, в настоящем изобретении представлен способ получения устройства для сбора биологического образца, включающий следующие этапы, на которых: используют адгезив для сцепления слоев волокна на конце стержня; размещают волокнистый наполнитель в электростатическом поле и последовательно наносят волокнистый наполнитель на конец в определенном направлении с образованием слоя в форме щетки, причем волокна представляют собой меламиновые волокна.

Способ обработки биологического образца включает в себя этап, на котором вводят биологический образец в контакт с абсорбирующим материалом, содержащим меламиновый материал.

В некоторых вариантах реализации, абсорбирующему материалу позволяют абсорбировать биологический образец. Биологический образец представляет собой образец текучей среды или жидкости.

В некоторых вариантах реализации, биологический образец представляет собой одно или более из слюны, мочи и крови.

В некоторых вариантах реализации, после того как абсорбирующему материалу позволили абсорбировать биологический образец, часть образца выпускают из абсорбирующего материала, а затем выпущенный образец используют для обнаружения анализируемого вещества.

В некоторых вариантах реализации, выпуск включает в себя сжатие абсорбирующего материала или элюирование абсорбирующего материала обрабатывающей жидкостью для растворения образца.

В некоторых вариантах реализации, обнаружение включает обнаружение выпущенного биологического образца с помощью тест-элемента.

В некоторых вариантах реализации, тест-элемент содержит иммунологическую тест-полоску, предназначенную для обнаружения.

В некоторых вариантах реализации, анализируемое вещество содержит ТНС или подобные ему вещества.

С другой стороны, в настоящем изобретении представлено применение, включающее в себя применение меламинового материала для сбора и/или обработки биологических образцов. В некоторых вариантах реализации, меламиновый материал содержит меламиновый пористый материал. В некоторых вариантах реализации, меламиновый материал содержит меламиновый пористый водоабсорбирующий материал.

В некоторых вариантах реализации, меламиновая губка имеет плоскую пленкоподобную структуру или трехмерную блокоподобную структуру.

В некоторых вариантах реализации, плоская пленкоподобная структура представляет собой фильтрационную мембрану имеет любую форму из круглой, квадратной, эллипсоидной и многоугольной; а блокоподобная структура представляет собой цилиндр, кубоид, куб, конус или любое другое трехмерное тело, или она представляет собой любое одно из головки из губки, блока из губки и полосы из губки с блокоподобной структурой.

В некоторых вариантах реализации, биологический образец является любым из образца биологической текучей среды, волос, мышц, тканей и органов, взятого из организма.

В некоторых вариантах реализации, биологическая текучая среда представляет собой любое из слюны, мочи, крови, мокроты, лимфы, плазмы, спермы, легочных аспиратов и спинномозговой жидкости.

В некоторых вариантах реализации, определяемое вещество в биологическом образце представляет собой любое из низкомолекулярных наркотических веществ, вызывающих зависимость, клеток, нуклеиновых кислот, белков и аминокислот.

В некоторых вариантах реализации, низкомолекулярные наркотические вещества, вызывающие зависимость, включают в себя тетрагидроканнабинол (ТНС) или подобные ему вещества. В некоторых вариантах реализации, ТНС включает в себя Δ9-ТНС, также известный как тетрагидроканнабинол, Δ9-тетрагидроканнабинол, Δ1-ТНС (согласно старой номенклатуре) и дронабинол (химически синтезированное наркотическое вещество). В некоторых вариантах реализации, низкомолекулярные наркотические вещества, вызывающие зависимость, включают в себя Δ9-ТНС-СООН или Δ9-ТНС.

С другой стороны, в настоящем изобретении представлено новое применение меламинового материала, которое может снизить адсорбцию ТНС или подобных веществ. В некоторых вариантах реализации, меламиновый материал применяют для сбора биологических образцов и снижения адсорбции ТНС или подобных веществ в биологических образцах.

В некоторых вариантах реализации, меламиновый материал содержит меламиновый пористый материал. В некоторых вариантах реализации, меламиновый материал содержит меламиновую губку.

В некоторых вариантах реализации, биологический образец представляет собой слюну, мочу и кровь.

Еще с одной другой стороны, в настоящем изобретении представлено устройство для обнаружения, содержащее меламиновую губку для контакта с жидким биологическим образцом и тест-элемент, содержащий тест-зону, причем меламиновая губка расположена выше относительно тест-зоны.

Настоящее изобретение обладает следующими полезными эффектами: было обнаружено, что меламиновая губка может применяться для сбора и обработки диагностических образцов в процессах исследования и разработки, а также получения реагентов для диагностики in vitro, что может значительно снизить адсорбцию маркеров обнаружения в процессах сбора и обработки биологического образца для восстановления достоверности биологических образцов и повышения чувствительности обнаружения вещества.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

На ФИГ. 1 показан конструктивный вид сверху тест-полоски в конкретном варианте реализации.

На ФИГ. 2 показано схематическое изображение трехмерной конструкции тест-полоски в конкретном варианте реализации.

На ФИГ. 3 показана колориметрическая карта (стандарт) для обнаружения наркотического вещества, вызывающего зависимость, согласно настоящему изобретению.

На ФИГ. 4 показаны значения показателей флуоресценции (Х1/Х2) в зоне обнаружения на тест-полоске после абсорбции стандартов с ТНС 20 нг/мл различными материалами и сжатия (Вариант реализации 2.3) (№1-3 - меламиновые губки, а №4-6 - полипропилен).

На ФИГ. 5А показано изображение результатов обнаружения и результатов контрольного испытания образцов, выпущенных путем сжатия после абсорбции стандартов мочи 20 нг/мл различными материалами.

На ФИГ. 5В показано изображение результатов обнаружения и результатов контрольного испытания образцов, выпущенных путем сжатия после абсорбции стандартов мочи 30 нг/мл различными материалами.

На ФИГ. 6А показан график пикового значения стандартного раствора 100 нг/мл тетрагидроканнабинола Δ9-ТНС (введенный объем 10 мкл).

На ФИГ. 6В показан график пикового значения ВЭЖХ при введенном объеме образцов 10 мкл после абсорбции 500 мкл Δ9-ТНС 100 нг/мл головкой для сбора образца, выполненной из меламиновой губки, сжатия и выпуска.

На ФИГ. 6С показан график пикового значения ВЭЖХ при введенном объеме образцов 10 мкл после абсорбции 500 мкл Δ9-ТНС 100 нг/мл головкой из губки (полипропиленовой губки), выполненной из полипропилена, сжатия и выпуска.

На ФИГ. 7 показана хроматограмма сканирующего анализа с инфракрасным светом, которому подвергнута меламиновая губка.

На ФИГ. 8 показана хроматограмма сканирующего анализа с инфракрасным светом, которому подвергнута полипропиленовая губка.

Подробное описание

Структуры, входящие в объем настоящего изобретения, или использованные технические термины дополнительно описаны ниже. Если отсутствует особое указание, их следует трактовать и интерпретировать в соответствие с общепринятой в области техники терминологией.

Обнаружение

Обнаружение означает проведение анализа или испытание на присутствие или отсутствие вещества или материала, такого как, но без ограничения, химические элементы, органические соединения, неорганические соединения, метаболиты, наркотические вещества или метаболиты наркотических веществ, органическая ткань или ее метаболиты, нуклеиновые кислоты, белки или полимеры. Кроме того, обнаружение означает испытание для определения количества веществ или материалов. Также, анализ также означает иммунодетекцию, химическое обнаружение, ферментативное обнаружение, газовую хроматографию, масс-спектрометрию, амплификацию нуклеиновой кислоты и т.п. Для обнаружения анализируемых веществ в образцах может применяться любой инструмент, любой способ и любое устройство для обнаружения, которые могут обнаруживать анализируемые вещества в образцах. Подразумевается только то, что эти образцы обрабатываются меламиновыми губками или меламиновыми материалами из настоящего изобретения и фильтруются для обнаружения.

Образцы или пробы

Образцы, собираемые или обрабатываемые посредством меламиновых губок из настоящего изобретения, содержат биологические текучие среды (например, биологические жидкости или клинические образцы). Образцы или пробы здесь используются взаимозаменяемым образом и могут иметь одинаковое значение. Жидкие образцы или образцы текучей среды могут быть получены из твердых или полутвердых образцов, в том числе образцов выделений, биологической ткани и пищи. Твердые или полутвердые образцы могут быть преобразованы в жидкие образцы любым подходящим способом, таким как смешивание, разминание, размачивание, инкубирование, растворение или использование энзимолиза в подходящем растворе (например, воде, фосфатном растворе или других буферных растворов) для расщепления твердых образцов. «Биологические образцы» включают в себя образцы, взятые от животных, растений и пищи, такие как моча, слюна, кровь и их компоненты, спинномозговая жидкость, вагинальные выделения, сперму, кал, пот, выделения, ткань, органы, опухоли, культуры тканей и органов, клеточные культуры и среды, взятые от человека или животных. Предпочтительным биологическим образцом является моча, а другим предпочтительным биологическим образцом является слюна. Образцы пищи включают в себя вещества после переработки пищи, готовые продукты, мясо, сыр, вино, молоко и питьевую воду. Образцы растений включают в себя ткань растения, клеточные культуры растений и среды, взятые из любого растения. «Образцы окружающей среды» получают из окружающей среды (например, жидкие образцы, взятые из озер или других водоемов, образцы сточных вод, образцы почвы, образцы грунтовых вод, морской воды и жидких отходов). Образцы окружающей среды также могут включать в себя сточную воду или другие водные отходы.

Благодаря применению подходящей меламиновой губки по настоящему изобретению может быть собран и обработан любой образец для снижения адсорбции анализируемых веществ. Предпочтительно, благодаря применению меламиновой губки по настоящему изобретению обеспечивается сбор низкомолекулярных наркотических веществ из слюны и мочи. Безусловно, образцы, собранные или обработанные путем применения меламиновой губки по настоящему изобретению, могут представлять собой образцы в любой из представленных выше форм, изначально являющиеся твердыми или жидкими, до тех пор, пока эти жидкости или жидкие образцы могут абсорбироваться меламиновой губкой.

Если для обнаружения используют тест-элемент, то он в целом имеет зону нанесения образца. Здесь зона нанесения образца в целом выполнена из водоабсорбирующего материала, при этом жидкие образцы или образцы текучей среды могут абсорбироваться под действием капиллярных или других свойств материала абсорбирующего элемента, чтобы образцы текучей среды протекали в зону нанесения образца. Материал зоны нанесения образца для образцов текучей среды может представлять собой любой материал, который может абсорбировать жидкости, такой как меламиновая губка по настоящему изобретению или смесь губки и фильтрующей бумаги с меламиновой губкой, полиэфирное волокно, гель, нетканые полотна, хлопок, полиэфирные пленки, нити и т.д. Меламиновая губка может быть включена в водоабсорбирующие материалы с немеламиновой губкой, так что адсорбирующее действие этих водоабсорбирующих материалов на анализируемые вещества в образцах также может быть снижено. Когда требуется обнаружение, буферный раствор наносят на зону нанесения образца для растворения образцов, чтобы растворенные образцы протекали в тест-элемент или элемент обнаружения.

Ниже и выше по потоку

Деление на ниже или выше по потоку осуществляется в отношении направлении потока жидкости, в целом жидкость или текучая среда течет из зоны выше по потоку в зону ниже по потоку. Жидкость попадает в зону выше по потоку из зоны ниже по потоку, и жидкость также может течь по зоне выше по потоку в зону ниже по потоку. Это деление в целом осуществляется в зависимости от направления потока жидкости. Например, в случае некоторых материалов, в которых для поддержания потока жидкости используется капиллярная сила, жидкость может преодолевать силу притяжения и течь в направлении, противоположном силе притяжения. В это же время, деление на выше и ниже по потоку осуществляется в зависимости от направления потока жидкости. Например, в устройстве для обнаружения, согласно настоящему изобретению, после абсорбции образца текучей среды или жидкого образца тест-элементом, текучая среда может течь из зоны 101 нанесения образца на тест-элементе в зону 103 обнаружения на тест-элементе 1, и в это же время, поток жидкости из зоны 101 нанесения образца в зону 103 обнаружения происходит из места выше по потоку в место ниже по потоку. В процессе циркуляции он проходит через тест-зону 102, а на тест-зоне предусмотрена зона 105 обнаружения и зона 106 контроля результата теста. Тест-зона может представлять собой пленку из полиэфирного волокна, а зона нанесения образца может представлять собой стекловолокно. В это же время, зона нанесения образца или зона 101 абсорбции находится выше по потоку относительно зоны нанесения образца на тест-элементе.

Тест-элементы

Так называемые «тест-элементы», упомянутые в настоящем документе, относятся к элементам, которые могут обнаруживать то, содержатся ли интересующие анализируемые вещества в образцах или пробах. Это обнаружение основано на любых технических принципах, таких как иммунология, химия, электричество, оптика, молекулы, нуклеиновые кислоты, физика и т.д. После того, как образцы собраны или обработаны путем применения меламиновой губки, представленной в настоящем изобретении, образцы, которые проходят через меламиновую губку, могут быть непосредственно нанесены на тест-элементы для испытания или анализа.

Тест-элементы, упомянутые в настоящем документе, могут быть выбраны из тест-полоски для латерального потока, которая может обнаруживать широкий ряд анализируемых веществ. Безусловно, в настоящем изобретении также могут применяться другие подходящие тест-элементы. Различные тест-элементы могут быть объединены для применения в настоящем изобретении. Одной формой является тест-бумага. Тест-бумага для анализа анализируемых веществ (таких как наркотические вещества или метаболиты, являющихся показательными в отношении медицинских состояний) в образце может быть представлена в различных формах, таких как формы иммуноферментного или химического анализа. В тест-бумаге может использоваться метод конкурентного или неконкурентного анализа. Тест-бумага в целом содержит водоабсорбирующий материал с зоной добавления образца, зоной реагента и тест-зоной. Образец текучей среды или жидкости добавляют в зону добавления образца и он течет в зону реагента за счет капиллярного действия. Если анализируемое вещество присутствует, то образец связывается с реагентом в зоне реагента. Затем образец продолжает течь в тест-зону. В случае других реагентов, если молекулы, которые специфично связываются с анализируемыми веществами, иммобилизуются в тест-зоне, то эти реагенты вступают в реакцию с анализируемыми веществами (при наличии) в образце и связываются с анализируемыми веществами в этой зоне, или связываются с определенным реагентом в зоне реагента. Метка, используемая для отображения сигнала обнаружения, находится в зоне реагента или отдельной зоне мечения.

Типичный метод неконкурентного анализа предполагает то, что сигнал будет вырабатываться, если анализируемые вещества содержатся в образце, но сигнал не будет вырабатываться, если анализируемые вещества не содержатся в образце. Чем больше в образце количество анализируемых веществ, концентрация которых превышает пороговое значение, тем сильнее сигнал. В конкурентном методе сигнал будет вырабатываться, если анализируемые вещества не содержатся в образце, и сигнал не будет вырабатываться, если анализируемые вещества содержатся. Подобным образом, чем больше в образце количество анализируемых веществ, количество которых превышает пороговое значение, тем слабее сигнал, вырабатываемый в зоне сигнала, в которой они находятся. Здесь «пороговое значение» представляет собой клиническое или общее значение, и оно может быть отрегулировано в зависимости от различных ситуаций. Например, когда обнаружения анализируемых веществ используют конкурентный метод, в качестве маркеров для выработки сигнала используются частицы золота (черные или фиолетовые). В целом, когда концентрация в образце превышает пороговое значение, есть надежда, что сигнал не будет вырабатываться, указывая на положительный результат. Когда концентрация в образце меньше порогового значения, есть надежда, что сигнал будет вырабатываться, указывая на отрицательный результат. Сигнал может иметь форму линии, круглой точки или любую другую форму. Когда имеется цветная линия, как правило, используется стандартная цветовая карта для сравнения концентрации цвета или глубины цвета для оценки стандарта отрицательного результата или положительного результата. Как правило, чем меньше анализируемых веществ присутствует в образце, тем темнее цветная линия. В отличие от этого, чем больше содержание анализируемых веществ в образце, тем светлее цветная линия, что указывает на количественный уровень или концентрацию содержания анализируемых веществ в образце.

Тест-элементы могут представлять собой тест-бумагу, которая может быть выбрана из материалов, которые абсорбируют или не абсорбируют воду. Тест-бумага может содержать широкий ряд материалов для передачи жидкого образца. Один из материалов тест-бумаги может покрывать другой материал, например, фильтрационная бумага покрывает нитроцеллюлозную мембрану. Одна из зон тест-бумаги может быть выбрана из одного или более материалов, тогда как другая зона выбрана из другого, отличающегося одного или более материалов. Тест-бумага может быть приклеена к некоторой подложке или твердой поверхности для повышения силы удерживания тест-бумаги.

Анализируемые вещества обнаруживаются системой для вырабатывания сигналов, например, путем использования одного или более ферментов, которые специфически вступают в реакцию с анализируемыми веществами, а также путем использования способа иммобилизации специфического связывающего вещества на тест-бумаге для обнаружения, как было описано выше, одна или более комбинаций системы для вырабатывания сигналов иммобилизуются на тест-зоне анализируемого вещества на тест-бумаге. Вещество, вырабатывающее сигналы, может находиться в зоне добавления образца, зоне реагента или тест-зоне, или на всей тест-бумаге, и вещество может заполнять собой один или более материалов тест-бумаги. Раствор, содержащий вещество, вырабатывающее сигнал, добавляют на поверхность тест-бумаги или один или более материалов тест-бумаги погружают в раствор, содержащий вещество, вырабатывающее сигнал. Тест-бумагу, на которую был добавлен раствор, содержащий вещество, вырабатывающее сигнал, сушат. Здесь сигналом может быть любая сигнальная система, такая как цветные частицы, такие как частицы золота, частицы латекса или окрашенные частицы, а также, безусловно, флуоресцентные вещества.

Соответствующие зоны тест-бумаги могут быть расположены следующим образом: зона 101 добавления образца, зона реагента, тест-зона 103, зона контроля, зона определения того, является ли образец испорченным или нет, и зона абсорбции жидкого образца. Зона контроля расположена за тест-зоной. Все зоны могут быть расположены на полоске из тест-бумаги с использованием только одного материала. Кроме того, для разных зон могут быть использованы разные материалы. Соответствующие зоны могут находиться в прямом контакте с жидким образцом, или разные зоны расположены в соответствии с направлением потока жидкого образца, а хвостовой конец каждой зоны соединен и наложен сверху на передний конец другой зоны. Используемыми материалами могут быть материалы, обладающие улучшенным водоабсорбирующим свойством, такие как фильтрационная бумага, стекловолокно или нитроцеллюлозные мембраны. Тест-бумага также может принимать другие формы.

В целом, общеиспользуемая полоска реагента представляет собой полоску реагента из нитроцеллюлозной мембраны, то есть зона обнаружения содержит нитроцеллюлозную мембрану (NC), а специфические связывающие молекулы иммобилизуются на нитроцеллюлозной мембране для отображения результатов обнаружения; она также может представлять собой мембрану из ацетата целлюлозы или нейлоновую мембрану и т.д. Например, полоски реагента или устройства, содержащие полоски реагента, описаны в следующих патентах: US 4857453; US 5073484; US 5119831; US 5185127; US 5275785; US 5416000; US 5504013; US 5602040; US 5622871; US 5654162; US 5656503; US 5686315; US 5766961; US 5770460; US 5916815; US 5976895; US 6248598; US 6140136; US 6187269; US 6187598; US 6228660; US 6235241; US 6306642; US 6352862; US 6372515; US 6379620; и US 6403383. Bee тест-полоски и подобные устройства с тест-полосками, раскрытые в указанных выше патентных документах, могут быть применены к тест-элементам или устройствам для обнаружения, согласно настоящему изобретению, для обнаружения анализируемых веществ, например, для обнаружения анализируемых веществ в образце.

Полоски реагента для обнаружения, применяемые к настоящему изобретению, в целом могут называться тест-полосками для латерального потока. Специфические структуры и принципы обнаружения у этих полосках реагента для обнаружения являются технологиями, которые хорошо известны специалисту в данной области техники из уровня техники. Обычная полоска реагента для обнаружения (ФИГ. 1) имеет зону сбора образца или зону 101 добавления образца, зону маркирования (не показана), зону 103 обнаружения и зону абсорбции воды. Зона сбора образца содержит подушечку для приема образца. Зона маркирования содержит подушечку маркирования. Зона абсорбции воды может содержать подушечку для абсорбции воды. Зона обнаружения содержит необходимые химические вещества, такие как иммунологические реагенты или ферментативные химические реагенты, которые могут обнаруживать то, содержится ли анализируемое вещество или нет. В целом, общеиспользуемая полоска реагента для обнаружения представляет собой полоску реагента в виде нитроцеллюлозной мембраны, то есть зона 103 обнаружения содержит нитроцелюллозную мембрану, и она является зоной для отображения результатов обнаружения путем иммобилизации специфических связывающих молекул на нитроцеллюлозной мембране; она также может представлять собой мембрану из ацетата целлюлозы или нейлоновую мембрану и т.д. Безусловно, зона контроля результата обнаружения может быть расположена ниже зоны обнаружения. Как правило, зона контроля и зона обнаружения представлены в форме горизонтальных линий, представляющих собой линии обнаружения или контрольные линии. Такие полоски реагента для обнаружения представляют собой обычные полоски реагента и, безусловно, они могут быть полосками реагента других типов, в которых для обнаружения используется капиллярное действие. Кроме того, общие полоски реагента для обнаружения имеют компоненты сухого химического реагента, такие как иммобилизованные антитела или другие реагенты. При их контакте с жидкостью, она течет по полоскам реагента за счет капиллярного действия, и в потоке компоненты сухого реагента растворяются в жидкости, тем самым переходя в следующую зону, в которой обрабатываются сухие реагенты для выполнения необходимого обнаружения. Поток жидкости проходит в основном за счет капиллярного действия. Здесь все они могут быть применены к устройству для обнаружения по настоящему изобретению или расположены в камере для обнаружения для того, чтобы находиться в контакте с жидким образцом, или использоваться для обнаружения присутствия или отсутствия анализируемого вещества в жидком образце, попадающем в камеру для обнаружения, или его количества.

В дополнение к этому, указанные выше тест-полоски или тест-полоски для латерального потока используются для вхождения в контакт с жидким образцом для тестирования того, содержит ли жидкий образец анализируемое вещество, сам тест-элемент по настоящему изобретению может использоваться в качестве устройства для обнаружения анализируемого вещества в образце, так что устройство для обнаружения здесь эквивалентно тест-элементу. Например, после смешивания образца текучей среды с жидкостью для обработки, для обнаружения используется непосредственно тест-элемент. Как будет подробно описано ниже, для обнаружения может использоваться отдельно тест-элемент, тогда как приемное устройство используется для обработки образца текучей среды.

Анализируемые вещества

Примеры, в которых могут использоваться анализируемые вещества, входящие в объем настоящего изобретения, включают в себя некоторые низкомолекулярные вещества, в том числе наркотические вещества (например, наркотические вещества, вызывающие зависимость). «Наркотические вещества, вызывающие зависимость» (DOA), предполагают применение наркотических веществ в немедицинских целях (как правило, способствующих парализации нервов). Зависимость от этих наркотических веществ повлечет за собой вред физическому и психическому здоровью, вызывая злоупотребление, пристрастие и/или смерть. Примеры наркотических веществ, вызывающих зависимость, включают в себя кокаин; амфетамин AMP (например, «Black Beauty», белые таблетки амфетамина, декстроамфетамин, таблетки декседрина, «Beans»); метамфетамин МЕТ (крэнк, метамфетамин, кристаллический метамфетамин, спид); барбитурат BAR (такой как Валиум®, Roche Pharmaceuticals, Натли, Нью-Джерси); седативные средства (т.е. снотворное); диэтиламид лизергиновой кислоты (LSD); ингибиторы (успокоительные, смеси героина и метамфетамина («goofball»), «barbs», «blue devils», нембутал («yellow jackets»), метаквалон); трициклические антидепрессанты (ТСА, т.е. имипрамин, амитриптилин и доксепин); метилендиоксиметамфетамин MDMA; фенциклидин (РСР); тетрагидроканнабинол (ТНС, марихуана, каннабис, гашиш, конопля и т.д.); опиаты (т.е. морфин МОР или опиум, кокаин СОС; героин, оксикодон); анксиолитики и седативно-снотворные средства, при этом анксиолитики являются классом наркотических веществ, которые в основном используются для снижения тревожности, напряжения и чувства страха, а также стабилизации настроения, и обладают снотворными и седативными действиями, в том числе бензодиазепины BZO, атипичные BZ, слитый диазоний NB23Cs, бензодиазепины, лиганды для рецепторов BZ и BZ с открытыми кольцами, производные дифенилметана, карбоксилаты пиперазина, карбоксилаты пиперидина, хиназолиноны, производные тиазина и тиазола, другие гетероциклы, седативные/анальгетические средства по типу имидазола (такие как оксикодон OXY, метадон MTD), производные пропиленгликоля - карбаматы, алифатические соединения, производные антрацена и т.д. Устройство для обнаружения, в котором применяется настоящее изобретение, также может применяться для обнаружения наркотических веществ, которые относятся к медицинским целям, но могут быть подвержены передозировке, такие как трициклические антидепрессанты (имипрамин или аналоги) и ацетаминофен. Эти наркотические вещества будут метаболизироваться в низкомолекулярные вещества после абсорбции организмом человека. Эти низкомолекулярные вещества находятся в крови, моче, слюне, поте и других биологических жидкостях или в некоторых других текучих средах организма.

Например, анализируемые вещества, обнаруживаемые посредством настоящего изобретения, включают в себя, но без ограничения, креатинин, билирубин, нитрит, белки (неспецифические), гормоны (например, хорионический гонадотропин человека, гормон прогестерон, фолликулостимулирующий гормон и т.д.), кровь, лейкоциты, сахар, тяжелые металлы или токсины, бактериальные вещества (такие как белки или углеводы к специфическим бактериям, например, Escherichia coli 0157:Н7, Staphylococcus, Salmonella, Clostridium, Campylobacter, L. monocytogenes, Vibrios или Bacillus cereus) и вещества, связанные с физиологическими характеристиками в образцах мочи, такими как рН и пропорция. В любом другом клиническом химическом анализе мочи может использоваться форма обнаружения латерального потока для взаимодействия с устройством для обнаружения, согласно настоящему изобретению.

Меламиновый материал

Основным компонентом меламинового материала, описанного в настоящем документе, является меламиновая смола и фенольная смола, которая является продуктом сополиконденсации, в основном состоящим из меламина, фенола и формальдегида. Материал, используемый в настоящем изобретении для обработки или сбора образцов, представляет собой материал, полученный путем полимеризации меламина в качестве основного сырьевого материала, или материал, синтезированный непосредственно путем использования формальдегида и меламина в качестве сырьевых материалов. В некоторых вариантах реализации, материал по настоящему изобретению содержит пористый материал, полученный процессом вспенивания после непосредственного синтеза формальдегида и меламина в качестве сырьевых материалов. Здесь «вспенивание» может использоваться для получения материалов, содержащих микропоры или множество пор, любым существующим способом. Процесс вспенивания также известен из уровня техники, например, пенную смолу, вспомогательное вещество для вспенивания и связующую смолу (получение конечного адгезивного продукта) смешивают; при этом обработку пены выполняют следующим образом: 80 частей этиленвинилацетата (EVA), 20 частей АРАО РТ 3385, 20 частей азодикарбонамида, 19 частей СаСО и 0,6 части дикумилпероксида смешивают между собой и помещают в форму для вспенивания, а закрытые поры разламывают посредством механического усилия, так что может быть получена вспененная губка. Ее плотность (d), в целом, составляет 0,028 г/см, а твердость при сжатии 25% составляет 1,9 КПа. Как и при вспенивании, один и тот же материал и разные процессы производства дадут разные вещи. Способ осуществления вспенивания также может выполняться в соответствии со схемой, описанной в патенте Китая на изобретение, опубликованном патенте CN110774604 В, и любая технология из описания патента может быть использована в качестве специфического варианта реализации настоящего изобретения для получения вспененной губки. Способ получения вспененного материала также может выполняться посредством любого технического решения из опубликованной заявки на получение патента Китая, публикации № CN107553920A, в которой конкретно описан способ открытия пор для вспененной губки, а вспененный материал, полученный способом, раскрытым в этой заявке на получение патента, также может быть использован для меламинового материала по настоящему изобретению для обработки вспениванием. Можно понять, что способ вспенивания представляет собой лишь способ получения пористого материала и, безусловно, для получения пористого материала может быть использован любой другой способ.

Безусловно, в некоторых вариантах реализации, меламиновый материал или меламиновый пористый материал, который также известен, как меламиновый вспененный материал, согласно настоящему изобретению, может быть куплен, и многие существующие коммерческие компании специализируются на получении этого материала. Также может выполняться специально отрегулированная обработка, при которой производственная компания сообщает соотношение формальдегида к меламину или необходимый размер пор, количество пор на единицу объема и т.д. Таким образом, могут быть получены необходимые пористые материалы.

В некоторых вариантах реализации, меламиновый материал здесь представляет собой пористый водоабсорбирующий материал. Здесь «водоабсорбирующий» означает то, что жидкость может быть абсорбирована и при этом она удерживается в материале. Образец в целом абсорбируется за счет капиллярного действия. В некоторых вариантах реализации, после абсорбции жидкости пористым материалом, жидкость также может быть выпущена из пористого материала. Здесь под выпуском имеется ввиду то, что пористый материал может быть физически сжат для того, чтобы позволить жидкости вытечь из пористого материала. В качестве альтернативы, некоторые жидкости используются для смачивания пористого материала, так что жидкий образец, абсорбированный материалом, растворяется в жидкости для обработки. Здесь жидкость для обработки является не жидким образцом, а реагентом, используемым для растворения образца, таким как некоторые реагенты для регулирования рН, буферные растворы и растворы для лизиса. Также существует множество различных способов сжатия, все из которых направлены на уменьшение объема пористого материала в некоторой точке для выпуска абсорбированного жидкого образца из пористого материала, и это происходит за счет сжатия пористого материала и вытекания жидкости из него.

В существующей традиционной промышленности так называемая меламиновая губка, которая также известна, как меламиновая губка или меламин-меламиновая губка, является новым звукопоглощающим, теплоизоляционным и теплосберегающим материалом, успешно созданным в 1990-ых годах благодаря международным усилиям. В дополнение к ее превосходному звукопоглощению, теплоизоляции и огнеупорности, меламиновая губка обладает такими преимуществами, как высокая огнестойкость, защита окружающей среды, гигиенические свойства и безопасность по сравнению с подобными изделиями, такими как стекловата и полиуретановая губка.

Однако авторами настоящего изобретения было обнаружено, что при использовании этого специального материала для абсорбции и обработки образца, адсорбция анализируемого вещества может быть снижена. В частности, в образце может быть значительно улучшена адсорбция таких веществ, как тетрагидроканнабинол (ТНС). В существующих тестах зависимости от наркотических веществ проблема адсорбции тетрагидроканнабинола является серьезной и она заключается в том, что материал обычного устройства для сбора обладает адсорбирующим действием в отношении ТНС (тетрагидроканнабинола) в образце, что приводит к отсутствию результатов или ложноотрицательным результатам обнаружения. Например, когда концентрация ТНС в образце составляет А, содержание ТНС в образце, собранном с помощью обычного устройства для сбора и выжатого из средства для сбора, составляет менее А или намного менее А, значение теста, полученное таким образом, отличается от реального значения в текущем образце, и такая ошибка может привести к отсутствию результата обнаружения. В частности, в некоторых изделиях, в которых используются реагенты для диагностики in vitro, сбор образца в целом осуществляют с помощью устройства для сбора, а затем его выжимают из устройства для сбора, после чего выжатый образец тестируют. Если материал, используемый для абсорбции образца только в качестве устройства для сбора, обладает адсорбирующим действием, зачастую это будет приводить к отсутствию результатов или ложноотрицательным результатам обнаружения. Безусловно, иногда нет необходимости в использовании устройства для сбора с целью сбора образца, и иногда необходимо выполнить предварительную обработку образца перед тестированием, такую как фильтрация, растворение или элюирование примесей в образце перед тестированием. Ввиду того, что используемый фильтрационный материал обладает адсорбирующим свойством в отношении анализируемого вещества, это также приведет к расхождениям между результатами тестирования и фактическими результатами. После использования меламинового материала по настоящему изобретению для сбора и обработки образца было обнаружено, что анализируемое вещество, в частности, ТНС, редко адсорбируется, так что полученное значение обнаружения близко к реальному значению самого образца, что предотвращает отсутствие результатов или ложноотрицательные неверные результаты обнаружения.

В некоторых вариантах реализации, тетрагидроканнабинол здесь в целом включает в себя Δ9-ТНС (Δ9-тетрагидроканнабинол), молекулярной формула которого является С₂₁Н₃₀О₂, а химической структурой которого является следующая структура, или же она включает некоторые подобные ей вещества:

В некоторых других вариантах реализации, тетрагидроканнабинол здесь в целом включает в себя 11-десметил-Л9-тетрагидроканнабинол-9-карбоновую кислоту (11-нор-Д9-ТНС-9СООНД9-тетрагидроканнабинол), молекулярной формула которого является С21Н28О4, химической структурой которого является следующая структура, или же она включает подобные ей вещества:

Здесь под подобными веществами подразумеваются те, главная структура которых подобна тетрагидроканнабинолу, но группы в соответствующих химических пространственных структурах имеют разные заместители и разные химические заместители, однако при этом их главные структуры являются одинаковыми или подобными тетрагидроканнабинолу.

В некоторых вариантах реализации, меламиновый материал, используемый в настоящем изобретении, применяют для сбора или обработки образца, так что адсорбирующее действие на анализируемое вещество может быть снижено. Здесь «сбор» относится к тому, что устройство для сбора, изготовленное или выполненное из меламин-содержащего материала, используется для абсорбции образца или абсорбции образца текучей среды, который может быть выжат непосредственно из абсорбента после абсорбции, или жидкого образца, элюированного из абсорбента. Этот сбор может быть предназначен для абсорбции образца или для абсорбции образца из тела человека или организма, например, для сбора образцов из слюны и мокроты из полости рта человека или животного, или забор некоторых образцов из образцов мочи и кала человека для последующего обнаружения. Безусловно, меламиновый материал по настоящему изобретению также может применяться для непосредственного сбора твердого образца или полутвердого образца, которые затем сушат и впоследствии помещают на хранение или транспортируют, а при необходимости в проведении обнаружения, образец на устройстве для сбора растворяют жидкостью и он становится жидким образцом. В некоторых вариантах реализации, пористый материал, содержащий меламиновый материал, может применяться для абсорбции образца жидкости или текучей среды с последующим помещением на хранение или транспортировкой в место проведения обнаружения, при этом образец текучей среды выжимают из пористого материала перед обнаружением, после чего на образце текучей среды проводят обнаружение. В некоторых вариантах реализации, полностью всю часть для абсорбции образца из устройства для сбора состоит из меламинового материала или меламинового пористого материала (меламиновой губки). Безусловно, часть для абсорбции образца может в основном состоять из меламинового материала или меламинового пористого материала (меламиновой губки), а также содержать другие немеламиновые материалы, например, меламиновый материал составляет 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% и 99% от всего абсорбирующего материала.

Здесь «адсорбция» в основном относится к адсорбции анализируемого вещества в образце путем сбора материала при сборе или обработке жидкого образца. Эта адсорбция может представлять собой физическую адсорбцию или адсорбцию за счет химических связей на материале, взаимодействующих с химическими группами анализируемого вещества, следовательно, элюирование из материала для сбора также является относительно затрудненным в традиционных способах. В настоящем изобретении неожиданно было обнаружено, что когда для сбора образца применяют меламин-содержащий материал или меламиновый пористый материал, анализируемое вещество меньше поддается адсорбции и большая часть или большинство анализируемого вещества может быть элюировано, или после сжатия абсорбирующего материала, большинство анализируемого вещества может вытечь из абсорбирующего материала с жидким образцом, при этом малая часть анализируемого вещества остается в абсорбирующем материале. Не ясно, что приводит к снижению «адсорбции» при применении меламинового материала для сбора или обработки образца, возможно это происходит за счет двойного действия физических или химических процессов.

Здесь следует особо отметить то, что меламиновый материал может быть материалом без пор или материалом с порами. В некоторых предпочтительных вариантах реализации, он представляет собой водоабсорбирующий материал с порами, и здесь поры могут быть получены в целом с помощью технологий вспенивания. Безусловно, меламиновый материал также может применяться для линиеподобных и волоконноподобных нитевидных форм. Каждое волокно из этих волокон или нитей не имеет структуру поры, но при объединении множества волокон вместе, между волокнами образуются промежутки или поры, такие как микропоры и тонкие промежутки. Образец также может быть абсорбирован или обработан за счет капиллярного действия. Например, также возможно применять волокна, выполненные из меламинового материала, для получения хлопковых флок-тампонов. Способы получения хлопковых флок-тампонов явным образом раскрыты в уровне техники, см., например, следующие патенты: US8,114,027, US8,317,728, US 8,979,784, US 9,011,358, US 9,173,779, US 10,327,741, AU2004226798, JP4579902, ZL200610099310.9 в отношении конкретного способа получения. Таким образом, так называемый меламиновый материал здесь может представлять собой пористый материал или материал с порами. Четких требований в отношении размера пор нет. В целом, также подходят поры с капиллярным действием или пористые материалы, которые абсорбируют жидкие образцы. Безусловно, он может быть применен для обеспечения абсорбирующего материала на тест-элементе. Таким образом, в дополнение к прямому применению пористого меламинового материала для абсорбции или обработки образца, другие «водоабсорбирующие» устройства, выполненные из меламинового материала, также могут применяться для абсорбции или обработки образца, например, зона 101 нанесения образца на тест-элементе может представлять собой волокнистую подушечку, выполненную из меламинового материала, для нанесения или приема образца, чтобы текучая среда могла течь по подушечке для образца.

Здесь «обработка» относится к обработке образца с помощью меламин-содержащего материала или меламинового пористого материала перед обнаружением. Здесь обработка может включать в себя сбор или она может включать в себя обеспечение прохождения или протекания образца через меламин-содержащий материал или меламиновый пористый материал, так что для обеспечения обработки образца перед проведением на нем обнаружения предполагается, что анализируемое вещество не будет повреждено, как фильтрация для удаления примесей, например, некоторые другие примеси, которые не являются целевыми веществами в слюне, должны быть отфильтрованы, такие как белки или ферменты, или фильтрация крови для удаления эритроцитов и т.д. Таким образом, в некоторых вариантах реализации, меламин-содержащий материал или меламиновый пористый материал может применяться в качестве устройства для сбора, а также он может применяться для получения части тест-полоски, например, в качестве материала для зоны нанесения образца на тест-полоске или в качестве материала для зоны маркирования, или материала зоны обнаружения. В итоге, меламиновые пористые материалы могут быть получены индивидуальным образом и имеется пористый материал, который может обеспечивать поток образцов текучей среды за счет капиллярного действия. Здесь пористый материал может иметь множество пор с капиллярным действием или он может быть пористым материалом, образованным способом «вспенивания».

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ВАРИАНТОВ РЕАЛИЗАЦИИ

Настоящее изобретение будет дополнительно подробно описано далее в сочетании с вариантами реализации. Следует отметить, что представленные далее варианты реализации предназначены для упрощения понимания настоящего изобретения, но никоим образом его не ограничивают. Представленные далее варианты реализации настоящего изобретения являются лишь ограниченными примерами сущности настоящего изобретения, объем которого определен формулой настоящего изобретения.

Вариант реализации 1. Получение устройства для обнаружения латерального потока для иммуноферментного обнаружения, представленного в настоящем изобретении

Устройство для обнаружения латерального потока путем иммуноферментного обнаружения нового коронавируса, полученное в данном варианте реализации, показано на ФИГ. 1 и 2, содержит тест-полоску и, в соответствии с направлением потока жидкости сверху вниз, последовательно содержит зону 101 образца, зону 102 мечения, зону 103 обнаружения и водоабсорбирующую зону 104. Водоабсорбирующую зону готовят с использованием обычной водоабсорбирующей фильтрационной бумаги в качестве водоабсорбирующей подушечки; в зоне 101 образца используется подушечка для нанесения образца, материалом которой является стекловолокно, так что образец, добавляемый через отверстие S для добавления образца, протекает на стекловолокно, которое затем смешивается с образцом для протекания в зону 102 мечения; зона мечения представляет собой подушечку для мечения, содержащую частицы для мечения (такие как частицы золота, флуоресцентные частицы, частицы латекса или красители, или другие окрашенные вещества для мечения), конъюгированные антигены или антитела, затем смесь для мечения распыляют на полиэфирную пленку посредством распылительного оборудования для получения подушечки для мечения, и вещество для мечения на подушечке для мечения может течь вместе с потоком жидкости; в зоне обнаружения используется нитроцеллюлозная мембрана, антитела или антигены на линии обнаружения растворяются буферным раствором ФСБ, а затем используют оборудование с точечной мембраной для черчения линии на нитроцеллюлозной мембране, так что расстояние между разными антителами составляет от 3 до 8 миллиметров, а затем нитроцеллюлозную мембрану помещают в печь для сушки для резервного использования, антитела, антигены или другие связывающие вещества, обрабатываемые на мембране, в целом являются неподвижными, и зона обнаружения содержит зону 105 обнаружения и зону 106 контроля результата обнаружения.

После соответствующей подготовки водоабсорбирующей зоны 104, зоны 101 образца, зоны 102 мечения и зоны 103 обнаружения их объединяют таким образом, что один конец подушечки для нанесения образца накладывается на один конец подушечки для мечения, другой конец подушки для мечения накладывается на нитроцеллюлозную мембрану, а на нитроцеллюлозную мембрану на одном конце контрольной линии накладывается водоабсорбирующая фильтрационная бумага, таким образом, формируется вся тест-полоска и затем собирается в тест-карту, причем отверстие S для добавления образца на тест-карте соответствует подушечке для нанесения образца, нитроцеллюлозная мембрана соответствует окну уровня и, кроме того, отверстие S для добавления образца расположено ниже относительно отверстия В для буферного раствора.

Когда для получения тест-элемента используют способ наложения, он может быть прямым способом двойных антител или непрямым способом. Например, если в образце необходимо обнаружить антиген А1, на подушечке для мечения может обрабатываться первое антитело АВ1 к антигену А1, а на линии обнаружения иммобилизуется второе антитело АВ2 к антигену А1. Если содержание антигена А1 в образце больше, то меченых веществ, захваченных на линии обнаружения, больше, а цвет - темнее, что указывается на повышенное содержание.

В некоторых других вариантах реализации, когда для теста используют конкурентный метод, например, когда необходимо обнаружить наркотические вещества, вызывающие зависимость, в моче или слюне, такие как ТНС (низкомолекулярное наркотическое вещество, гаптен - слабо иммуногенный), антитела, соответствующие антигенам с ТНС, обрабатывают на подушечке для мечения и связывают с окрашенными частицами, а антигены с ТНС или подобными веществами обрабатывают на линии обнаружения. Если образец содержит ТНС, то ТНС связывается с антителами окрашенных частиц, и когда он течет к линии обнаружения, антигены на линии обнаружения и анализируемое вещество в образце конкурентно связываются с антителами, так что если в образце содержится большее количество малых молекул, то окрашенных частиц, захваченных на линии обнаружения, меньше, а цвет - светлее или тусклее, что указывает на положительный результат; и наоборот, если в образце содержится меньшее количество малых молекул, то окрашенных частиц, захваченных на линии обнаружения, больше, а цвет - темнее или насыщеннее, что указывает на отрицательный результат.

Эти тест-полоски могут использоваться для обнаружения отдельно анализируемого вещества или они могут быть помещены в тест-карту для обнаружения, например, предусмотрено окошко для чтения результатов и окошко для капания жидкости в тест-карту, окошко для капания жидкости в целом расположено над зоной нанесения образца, а окошко для чтения результатов обнаружения расположено над зоной обнаружения.

Вариант реализации 2: Влияние устройств для сбора образца, произведенных с различными губками, на результаты обнаружения Δ9-ТНС

Δ9-ТНС, также известный, как тетрагидроканнабинол, Δ9-тетрагидроканнабинол, Δ1-ТНС (согласно старой номенклатуре) и дронабинол (химически синтезированный лекарственный препарат), вкратце - ТНС, является основным психоактивным веществом, присутствующим в каннабисе, а изначально он присутствует в смоле, секретируемой тычинками цветков женского типа растения Moraceae Cannabis sativa L.. После вдыхания каннабиса, содержащего этот продукт, люди становятся возбужденными и заторможенными, а после его курения поток мыслей усиливается и замедляется, и люди обретают чувство эйфории; или же люди впадают в депрессию и панику. После длительного применения психика людей искажается и они становятся сильно недееспособными. Он является строго контролируемым веществом. Однако в ходе разработки реагентов для диагностики Δ9-ТНС in vitro было обнаружено, что Δ9-ТНС очень легко адсорбируется традиционной головкой для сбора образца из губки, что приводит к невозможности обнаружения и отображению ложноотрицательных результатов обнаружения. Выше.

Полоска реагента для ТНС: когда для теста используют конкурентный метод, например, когда необходимо обнаружить наркотические вещества, вызывающие зависимость, в моче или слюне, такие как ТНС (низкомолекулярное наркотическое вещество, гаптен - слабо иммуногенный), антитела, соответствующие антигенам с ТНС, обрабатывают на подушечке для мечения и связывают с окрашенными частицами, а антигены с ТНС или подобными веществами обрабатывают на линии обнаружения. Если образец содержит ТНС, то ТНС связывается с антителами окрашенных частиц, и когда он течет к линии обнаружения, антигены на линии обнаружения и анализируемое вещество в образце конкурентно связываются с антителами, так что если в образце содержится большее количество малых молекул, то окрашенных частиц, захваченных на линии обнаружения, меньше, а цвет - светлее или тусклее, что указывает на положительный результат; и наоборот, если в образце содержится меньшее количество малых молекул, то окрашенных частиц, захваченных на линии обнаружения, больше, а цвет - темнее или насыщеннее, что указывает на отрицательный результат.

Вариант реализации 2,1: Влияние на результаты обнаружения Δ9-ТНС на планшете в образцах слюны (конкурентный метод) колориметрическим методом с мечением частицами золота

В этом варианте реализации получают, соответственно, стандартные растворы образца (приготовленные со слюной), содержащие 20, 40, 60 и 80 нг/мл Δ9-ТНС, и для сбора образца используют две головки из губки, выполненные из разных материалов, первая из которых представляет собой головку из губки, выполненную из меламиновой губки, вторая из которых представляет собой головку из губки (полипропиленовой губки, рр), выполненную из полипропилена, размеры головок из губки идентичны, а объем адсорбции при сборе образца составляет 2 мл. После физического выжимки образца, 0,12 мл образца берут для капания в зону нанесения образца на полоске реагента для обнаружения, содержание Δ9-ТНС в образце обнаруживают конкурентным методом и через 10 минут осуществляют считывание и контрастное фотографирование. Результаты обнаружения делят на G1-G10 в соответствии с колориметрической картой (ФИГ. 3), на которой все, что меньше или равно G4, представляет собой положительный результат, все, что выше G4, представляет собой отрицательный результат, конкретные результаты показаны в Таблице 1; чем выше показатель, тем меньше содержание наркотических веществ.

Как можно увидеть из Таблицы 1, по сравнению с традиционной головкой для сбора образца, полученной в контроле (полипропиленовая губка), результаты обнаружения образцов, собранных путем использования головки для сбора образца, выполненной из меламиновой губки, сильно отличаются. Когда образец содержит 20 нг/мл Δ9-ТНС, результат обнаружения головкой для сбора образца, выполненной из меламиновой губки, является G6, что значительно выше, чем результат обнаружения (G8) в контроле. Когда образец содержит 40, 60 и 80 нг/мл Δ9-ТНС, результат обнаружения головкой для сбора образца, выполненной из меламиновой губки, является G2 или G1, что ниже, чем G4, и он является положительным, тогда как результат обнаружения в контроле является G5, и имеет место ложноотрицательный результат. Результат обнаружения головкой для сбора образца, выполненной из меламиновой губки, значительно выше, чем результат в контроле. Можно увидеть, что головка для сбора образца, выполненная из меламиновой губки, может существенно повысить чувствительность обнаружения Δ9-ТНС в образце, причиной чего является то, что меламиновая губка может значительно снизить адсорбцию Δ9-ТНС в ходе сбора образца и восстановить достоверность образцов, чтобы можно было предотвратить получение ложноотрицательных результатов.

Вариант реализации 2.2: Влияние на результаты обнаружения Δ9-ТНС на планшете в образцах слюны (конкурентный метод) методом с мечением частицами золота и считыванием цвета

Помимо сравнения цвета, для оценки и считывания значений теста используют устройство для более точного считывания результатов теста, а именно устройства для определения Δ9-ТНС в слюне с помощью коллоидного золота (детектор следов наркотических веществ AFS-1000: А202006929.). Чем больше значение Т, тем меньше содержание наркотического вещества в протестированных образцах, см. конкретные результаты в Таблице 2.

Вывод: при тестировании отрицательного раствора между данными контрольной группы и данными экспериментальной группы отсутствует существенная разница; при тестировании положительного раствора, когда все образцы составляют 20 нг/мл, в случае сбора образца с использованием меламиновой губки значение Т составляет от 160 до 190, тогда как для сбора образца с использованием традиционной полипропиленовой губки показатель значения Т составляет от 350 до 370, что представляет собой почти двукратную разницу, свидетельствуя о том, что в случае образцов, собранных с помощью меламиновой губки, адсорбция Δ9-ТНС значительно снижена и близка к реальному значению, тогда как в случае образца, собранного с использованием полипропиленовой губки, могут быть получены ложноотрицательные результаты вследствие сильной адсорбции Δ9-ТНС.

Вариант реализации 2.3: Влияние на результаты обнаружения Δ9-ТНС на планшете в образцах слюны (конкурентный метод) методом считывания флуоресценции

При использовании флуоресцентного мечения, подобно частицам, меченым золотом, меняются только вещества для выработки сигнала на подушечке для мечения. Таким образом, когда для теста используют конкурентный метод, например, когда необходимо обнаружить наркотические вещества, вызывающие зависимость, в моче или слюне, такие как ТНС (низкомолекулярное наркотическое вещество, гаптен - слабо иммуногенный), антитела, соответствующие антигенам с ТНС, обрабатывают на подушечке для мечения и связывают с флуоресцентными веществами, а антигены с ТНС или подобными веществами обрабатывают на линии обнаружения. Если образец содержит ТНС, то ТНС связывается с флуоресцентно сопряженными антителами, и когда он течет к линии обнаружения, антигены на линии обнаружения и анализируемое вещество в образце конкурентно связываются с антителами, так что если в образце содержится большее количество малых молекул, то флуоресцентных веществ, захваченных на линии обнаружения, меньше, что указывает на положительный результат; и наоборот, если в образце содержится меньшее количество малых молекул, то флуоресцентных веществ, захваченных на линии обнаружения, больше, что указывает на отрицательный результат.

Результаты: Показатели Δ9-ТНС в слюне, полученные с помощью флуоресцентной тест-полоски. Чем выше значение Х1/Х2 (тестовая линия Т/контрольная линия результата теста Т), тем более ярко выраженной является линия и тем меньше содержание наркотического вещества в образце. Каждая группа данных в этом эксперименте была повторена трижды, считанные устройством результаты были усреднены, и соответствующие результаты показаны в Таблице 3 ниже (ФИГ. 4).

При тестировании отрицательного раствора между данными контрольной группы и данными экспериментальной группы отсутствует существенная разница; при тестировании положительного раствора, когда все образцы составляют 20 нг/мл, в случае сбора образца с использованием меламиновой губки значение Х1/Х2 составляет от 0,9 до 1,173, тогда как для сбора образца с использованием традиционной полипропиленовой губки показатель значения Х1/Х2 составляет от 3,4 до 3,8, что представляет собой почти двукратную разницу, свидетельствуя о том, что в случае образцов, собранных с помощью меламиновой губки, адсорбция Δ9-ТНС значительно снижена и близка к реальному значению, тогда как в случае образца, собранного с использованием полипропиленовой губки, могут быть получены ложноотрицательные результаты вследствие сильной адсорбции Δ9-ТНС. На ФИГ. 4, при концентрации 20 нг/мл, в трех столбцах данных слева представлены значения показателей флуоресценции при сборе образца с помощью меламиновой губки, а в трех столбцах справа представлены степени абсорбции этих же образцов с помощью традиционной полипропиленовой губки.

Кроме того, также были проведены подобные эксперименты с губкой из поливинилового спирта (PVA) и полиуретановой губкой (PU), результаты которых подобны результатам в случае полипропиленовой губки (РР). Результаты обнаружения в случае головки, выполненной из меламиновой губки, значительно выше результатов в случае губки из поливинилового спирта (PVA) и полиуретановой губки (PU), что указывает на способность адсорбции ТНС у устройства для сбора образца, полученного с помощью меламиновой губки, заметно меньше, чем таковая у губки из поливинилового спирта (PVA) (Вариант реализации 3) и полиуретановой губки (PU).

Вариант реализации 3: Влияние на результаты обнаружения Δ9-ТНС в слюне (конкурентный метод)

В этом варианте реализации для сбора образца из слюны используют две головки из губки, выполненные из разных материалов, первая из которых представляет собой головку из губки, выполненную из меламиновой губки, вторая из которых представляет собой головку из губки (губки из поливинилового спирта, PVA), выполненную из хлопка, размеры головок из губки идентичны, а объем адсорбции при сборе образца составляет 2 мл. После физического выжимки образца, 0,5 мл образца берут для капания на полоску реагента для обнаружения, и содержание Δ9-ТНС в образце обнаруживают конкурентным методом. Известно, что содержание Δ9-ТНС в обычной слюне составляет 20, 40, 60 и 80 нг/мл соответственно, результаты обнаружения делят на G1-G10 в соответствии с колориметрической картой (ФИГ. 3), на которой все, что меньше или равно G4, представляет собой положительный результат, все, что выше G4, представляет собой отрицательный результат, и результаты обнаружения показаны в Таблице 4.

Как можно увидеть из Таблицы 2, в случае образцов слюны, по сравнению с головкой для сбора образца, полученной в контроле (губка из поливинилового спирта PVA), результаты обнаружения Δ9-ТНС в образцах, собранных путем использования головки для сбора образца, выполненной из меламиновой губки, также сильно отличаются. Когда слюна содержит 20 нг/мл Δ9-ТНС, результат обнаружения головкой для сбора образца, выполненной из меламиновой губки, является G6, тогда как результат обнаружения в контроле является G8. Когда слюна содержит от 40 до 60 нг/мл Δ9-ТНС, результат обнаружения головкой для сбора образца, выполненной из меламиновой губки, является G1, что ниже, чем G4, и он является положительным, тогда как результат обнаружения в контроле является G5 или G6, что представляет собой отрицательный результат. Результат обнаружения головкой для сбора образца, выполненной из меламиновой губки, значительно выше, чем результат в контроле. Можно увидеть, что головка для сбора образца, выполненная из меламиновой губки, может существенно повысить чувствительность обнаружения Δ9-ТНС в образце, причиной чего является то, что меламиновая губка может значительно снизить адсорбцию Δ9-ТНС в ходе сбора образца из слюны и восстановить достоверность образцов, чтобы можно было предотвратить получение ложноотрицательных результатов.

Вариант реализации 4: Влияние на результаты обнаружения Δ9-ТНС, AMP, CQC, МЕТ и OPI в слюне, одновременно присутствующих в образцах (конкурентный метод), колориметрическим способом с цветовой картой

Тест-полоску получают в соответствии со способом из Варианта реализации 1 выше, при этом разными являются только целевые вещества. Для получения подробной информации см. способ получения на ФИГ. 1 (другие условия являются теми же).

ТНС: в случае Δ9-ТНС (низкомолекулярное наркотическое вещество, гаптен - слабо иммуногенный), антитела, соответствующие антигенам с Δ9-ТНС, обрабатывают на подушечке для мечения и связывают с окрашенными частицами, а антигены с Δ9-ТНС или подобными веществами обрабатывают на линии обнаружения. Если образец содержит Δ9-ТНС, то Δ9-ТНС связывается с антителами окрашенных частиц, и когда он течет к линии обнаружения, антигены на линии обнаружения и анализируемое вещество в образце конкурентно связываются с антителами, так что если в образце содержится большее количество малых молекул, то окрашенных частиц, захваченных на линии обнаружения, меньше, а цвет - светлее или тусклее, что указывает на положительный результат; и наоборот, если в образце содержится меньшее количество малых молекул, то окрашенных частиц, захваченных на линии обнаружения, больше, а цвет - темнее или насыщеннее, что указывает на отрицательный результат.

AMP: в случае AMP (низкомолекулярное наркотическое вещество, гаптен - слабо иммуногенный), антитела, соответствующие антигенам с AMP, обрабатывают на подушечке для мечения и связывают с окрашенными частицами, а антигены с AMP или подобными веществами обрабатывают на линии обнаружения. Если образец содержит AMP, то AMP связывается с антителами окрашенных частиц, и когда он течет к линии обнаружения, антигены на линии обнаружения и анализируемое вещество в образце конкурентно связываются с антителами, так что если в образце содержится большее количество малых молекул, то окрашенных частиц, захваченных на линии обнаружения, меньше, а цвет - светлее или тусклее, что указывает на положительный результат; и наоборот, если в образце содержится меньшее количество малых молекул, то окрашенных частиц, захваченных на линии обнаружения, больше, а цвет - темнее или насыщеннее, что указывает на отрицательный результат.

СОС: в случае СОС (низкомолекулярное наркотическое вещество, гаптен - слабо иммуногенный), антитела, соответствующие антигенам с СОС, обрабатывают на подушечке для мечения и связывают с окрашенными частицами, а антигены с СОС или подобными веществами обрабатывают на линии обнаружения. Если образец содержит СОС, то СОС связывается с антителами окрашенных частиц, и когда он течет к линии обнаружения, антигены на линии обнаружения и анализируемое вещество в образце конкурентно связываются с антителами, так что если в образце содержится большее количество малых молекул, то окрашенных частиц, захваченных на линии обнаружения, меньше, а цвет - светлее или тусклее, что указывает на положительный результат; и наоборот, если в образце содержится меньшее количество малых молекул, то окрашенных частиц, захваченных на линии обнаружения, больше, а цвет - темнее или насыщеннее, что указывает на отрицательный результат.

МЕТ: в случае МЕТ (низкомолекулярное наркотическое вещество, гаптен - слабо иммуногенный), антитела, соответствующие антигенам с МЕТ, обрабатывают на подушечке для мечения и связывают с окрашенными частицами, а антигены с МЕТ или подобными веществами обрабатывают на линии обнаружения. Если образец содержит МЕТ, то МЕТ связывается с антителами окрашенных частиц, и когда он течет к линии обнаружения, антигены на линии обнаружения и анализируемое вещество в образце конкурентно связываются с антителами, так что если в образце содержится большее количество малых молекул, то окрашенных частиц, захваченных на линии обнаружения, меньше, а цвет - светлее или тусклее, что указывает на положительный результат; и наоборот, если в образце содержится меньшее количество малых молекул, то окрашенных частиц, захваченных на линии обнаружения, больше, а цвет - темнее или насыщеннее, что указывает на отрицательный результат.

OPI: в случае OPI (низкомолекулярное наркотическое вещество, гаптен - слабо иммуногенный), антитела, соответствующие антигенам с OPI, обрабатывают на подушечке для мечения и связывают с окрашенными частицами, а антигены с OPI или подобными веществами обрабатывают на линии обнаружения. Если образец содержит OPI, то OPI связывается с антителами окрашенных частиц, и когда он течет к линии обнаружения, антигены на линии обнаружения и анализируемое вещество в образце конкурентно связываются с антителами, так что если в образце содержится большее количество малых молекул, то окрашенных частиц, захваченных на линии обнаружения, меньше, а цвет - светлее или тусклее, что указывает на положительный результат; и наоборот, если в образце содержится меньшее количество малых молекул, то окрашенных частиц, захваченных на линии обнаружения, больше, а цвет - темнее или насыщеннее, что указывает на отрицательный результат.

Различные количества стандартов получают путем использования той же слюны, первый из которых представляет собой головку из губки, выполненную из меламиновой губки, вторая из которых представляет собой головку из губки (полипропиленовой губки рр), выполненную из хлопка, размеры головок из губки идентичны, а объем адсорбции при сборе образца составляет 2 мл. После физического выжимки образца, 500 микролитров образца берут для капания на зону нанесения образца на полоске реагента для обнаружения, и содержание Δ9-ТНС в образце обнаруживают конкурентным методом. Известно, что в обычной слюне содержатся Л9-ТНС, AMP, СОС, МЕТ и OPI, соответствующие результаты которых показаны в Таблице 5; результаты обнаружения делят на G1-G10 в соответствии с колориметрической картой (ФИГ. 3), на которой все, что меньше или равно G4, представляет собой положительный результат, все, что выше G4, представляет собой отрицательный результат, и результаты обнаружения показаны в Таблице 5.

При тестировании положительного раствора интенсивность цвета линии полоски реагента для ТНС для сбора образца с помощью меламиновой губки является значительно более низкой по сравнению с таковой в случае полипропиленовой губки для сбора образца. Ввиду того, что он представляет собой конкурентный метод, то чем больше интенсивность, тем меньше содержание анализируемого вещества в образце, а также чем меньше интенсивность, тем выше содержание анализируемого вещества в образце после впитывания головкой для сбора образца и ее сжатия. Из представленных выше результатов экспериментов, когда ТНС смешивается с AMP, СОС, МЕТ и OPI, это не влияет на чувствительность других веществ для обнаружения. Это также демонстрирует то, что путем использования меламиновой губки для сбора образца, когда образец содержит широкий ряд малых молекул наркотического вещества, вызывающего зависимость, это не влияет на нормальные результаты обнаружения ТНС и все еще может уменьшать адсорбирующее действие ТНС.

Вариант реализации 5,1: Влияние на результаты обнаружения Δ9-ТНС-СООН в слюне (конкурентный метод) колориметрическим способом

В этом варианте реализации получают, соответственно, растворы образца (приготовленные со слюной), содержащие 20, 40 и 60 нг/мл Δ9-ТНС-СООН, и для сбора образца используют две головки из губки, выполненные из разных материалов, первая из которых представляет собой головку из губки, выполненную из меламиновой губки, вторая из которых представляет собой головку из губки (полипропиленовой губки), выполненную из полипропилена, размеры головок из губки идентичны, а объем адсорбции при сборе образца составляет 2 мл. После физического выжимки образца, 0,12 мл образца берут для капания на полоску реагента для обнаружения и через 10 минут осуществляют считывание и контрастное фотографирование. Чем выше показатель, тем меньше содержание наркотического вещества, при этом стандартный показатель считается больше G4, что является отрицательным результатом, а показатель меньше или равно G4 является положительным результатом. Результаты показаны в Таблице 6.

Получение тест-полоски относится к способу из Варианта реализации 1 и, в частности, оно описано следующим образом: ТНС: в случае Δ9-ТНС-СООН (низкомолекулярное наркотическое вещество, гаптен - слабо иммуногенный), антитела, соответствующие антигенам с Δ9-ТНС-СООН, обрабатывают на подушечке для мечения и связывают с окрашенными частицами, а антигены с Δ9-ТНС-СООН или подобными веществами обрабатывают на линии обнаружения. Если образец содержит Δ9-ТНС-СООН, то Δ9-ТНС-СООН связывается с антителами окрашенных частиц, и когда он течет к линии обнаружения, антигены на линии обнаружения и анализируемое вещество в образце конкурентно связываются с антителами, так что если в образце содержится большее количество малых молекул, то окрашенных частиц, захваченных на линии обнаружения, меньше, а цвет - светлее или тусклее, что указывает на положительный результат; и наоборот, если в образце содержится меньшее количество малых молекул, то окрашенных частиц, захваченных на линии обнаружения, больше, а цвет - темнее или насыщеннее, что указывает на отрицательный результат.

Из представленных выше экспериментальных результатов можно увидеть, что при использовании меламиновой губки для сбора образца из слюны показатель составляет 3 при положительном стандарте 20 нг/мл, тогда как показатель составляет 1 при условии 30 нг/мл, что может прямо считаться положительным результатом (ввиду использования конкурентного метода), и наоборот, при использовании традиционного полипропилена для адсорбции образца показатель составляет от 4,5 до 5 при условии 30 нг/мл, что по-прежнему считается отрицательным результатом. В ней показано, что полипропилен обладает сильным адсорбирующий действием на Δ9-ТНС-СООН при использовании для сбора или обработки образца. В действительности, в образце, выжатом из абсорбционной головки, фактическое содержание Δ9-ТНС-СООН значительно меньше, чем 30 нг/мл.

Вариант реализации 5.2: Влияние на результаты обнаружения Δ9-ТНС-CQOH в слюне (конкурентный метод) машинное автоматическое считывание с мечением золотом

Полоска реагента, полученная способом из Варианта реализации 5.1, и образцы являются теми же, тест-полоски взяты из одной и той же партии, однако способом считывания является не определение цвета невооруженным взглядом, а получение числовых значений непосредственно способом машинного считывания. Машинное считывание Δ9-ТНС-СООН в слюне с помощью коллоидного золота: чем больше значение Т, тем меньше содержание наркотического вещества. Конкретные результаты показаны в Таблице 7.

Вывод: при тестировании отрицательного раствора между данными контрольной группы и данными экспериментальной группы отсутствует существенная разница; при тестировании положительного раствора, когда все образцы составляют 20 нг/мл, в случае сбора образца с использованием меламиновой губки значение Т составляет от 60 до 82, тогда как для сбора образца с использованием традиционной полипропиленовой губки показатель значения Т составляет от 155 до 162, что представляет собой разницу почти в два-три раза, свидетельствуя о том, что в случае образцов, собранных с помощью меламиновой губки, адсорбция Δ9-ТНС-СООН значительно снижена и близка к реальному значению, тогда как в случае образца, собранного с использованием полипропиленовой губки, могут быть получены ложноотрицательные результаты вследствие сильной адсорбции Δ9-ТНС-СООН.

Вариант реализации 5.3: Влияние на результаты обнаружения Δ9-ТНС-СООН на планшете в образцах слюны (конкурентный метод) методом считывания флуоресценции

Полоска реагента, полученная способом из Варианта реализации 2.3, и образцы являются теми же, тест-полоски взяты из одной и той же партии, однако способом считывания является не определение цвета невооруженным взглядом, а получение числовых значений непосредственно способом флуоресцентного считывания. Показатель Δ9-ТНС-СООН на флуоресцентной тест-полоске: чем выше значение X1/Х2, тем более выраженной является линия и тем ниже содержание наркотического вещества в образце. Каждая группа данных в этом эксперименте была повторена трижды, считанные устройством результаты были усреднены, и соответствующие результаты показаны в Таблице 8 ниже.

Вывод: при тестировании отрицательного раствора между данными контрольной группы и данными экспериментальной группы нет существенной разницы; при тестировании положительного раствора числовые значения в контрольной группе значительно выше значений в экспериментальной группе. Степень адсорбции Δ9-ТНС и Δ9-ТНС-СООН в контрольной группе больше, чем в экспериментальной группе, а адсорбционная стойкость головок из губки в экспериментальной группе лучше, чем у головок из губки в контрольной группе.

Вариант реализации 6.1: Влияние на результаты обнаружения Δ9-ТНС на планшете в образцах мочи (конкурентный метод) с помощью колориметрической карты

В этом варианте реализации получают, соответственно, растворы образца (приготовленные с мочой), содержащие 20, 40 и 60 нг/мл Δ9-ТНС, и для сбора образца используют две головки из губки, выполненные из разных материалов, первая из которых представляет собой головку из губки, выполненную из меламиновой губки, вторая из которых представляет собой головку из губки (полипропиленовой губки), выполненную из полипропилена, размеры головок из губки идентичны, а объем адсорбции при сборе образца составляет 2 мл. После физического выжимки образца, 0,12 мл образца берут для капания на полоску реагента для обнаружения и через 10 минут осуществляют считывание и контрастное фотографирование. Показатель в моче по цветовой карте с использованием коллоидного золота: чем выше показатель, тем меньше содержание наркотического вещества, при этом стандартный показатель считается больше G4, что является отрицательным результатом, а показатель меньше или равно G4 является положительным результатом.

Из представленных выше экспериментальных результатов можно увидеть, что (ФИГ. 5А и 5В) при использовании меламиновой губки для сбора образцов из мочи показатель составляет 2 при положительном стандарте 20 нг/мл, тогда как показатель составляет 1 при условии 30 нг/мл, что может прямо считаться положительным результатом (ввиду использования конкурентного метода), и наоборот, при использовании традиционного полипропилена для адсорбции образца показатель составляет 6 при условии 30 нг/мл, что по-прежнему считается отрицательным результатом. В ней показано, что полипропилен обладает сильным адсорбирующий действием на Δ9-ТНС при использовании для сбора или обработки образца. В действительности, в образце, выжатом из абсорбционной головки, фактическое содержание Δ9-ТНС меньше, чем 30 нг/мл.

Вариант реализации 6.2: Влияние на результаты обнаружения Δ9-ТНС и Δ9-THC-COQH на планшете в образцах мочи (конкурентный метод) с помощью флуоресцентного считывания

Машинное считывание концентрации Δ9-ТНС/Δ9-ТНС-СООН в слюне с помощью флуоресценции: чем больше значение Т, тем меньше содержание наркотического вещества в тестируемых образцах.

Вывод: при тестировании отрицательного раствора между данными контрольной группы и данными экспериментальной группы нет существенной разницы; при тестировании положительного раствора числовые значения в контрольной группе значительно выше значений в экспериментальной группе. Степень адсорбции Δ9-ТНС и Δ9-ТНС-СООН в контрольной группе больше, чем в экспериментальной группе, а адсорбционная стойкость головок из губки в экспериментальной группе лучше, чем у головок из губки в контрольной группе.

Вариант реализации 7.1: Влияние на результаты обнаружения Δ9-ТНС на планшете в образцах крови (конкурентный метод) с помощью колориметрической карты

В этом варианте реализации получают, соответственно, растворы образца (подготовленные с цельной кровью), содержащие 20 и 60 нг/мл Δ9-ТНС, и для сбора образца используют две головки из губки, выполненные из разных материалов, первая из которых представляет собой головку из губки, выполненную из меламиновой губки, вторая из которых представляет собой головку из губки (полипропиленовой губки), выполненную из полипропилена, размеры головок из губки идентичны, а объем адсорбции при сборе образца составляет 2 мл. После физического выжимки образца, 80 мкл образца берут для капания на полоску реагента для обнаружения и через 10 минут осуществляют считывание и контрастное фотографирование. Показатель в моче по цветовой карте с использованием коллоидного золота: чем выше показатель, тем меньше содержание наркотического вещества, при этом стандартный показатель считается больше G4, что является отрицательным результатом, а показатель меньше или равно G4 является положительным результатом.

Из представленных выше экспериментальных результатов можно увидеть, что при использовании меламиновой губки для сбора образцов из крови, показатель составляет 6,5 при положительном стандарте 60 нг/мл, однако при использовании традиционного полипропилена для адсорбции образца показатель составляет 8,5. Концентрация образцов крови, собранных с помощью меламиновой губки, выше, чем образцов крови, собранных с помощью полипропилена, так что по-прежнему имеет место преимущество слабой адсорбции при использовании меламиновой губки в качестве устройства для сбора образца при сборе образцов крови.

Вариант реализации 8: Сравнение концентраций Δ9-ТНС в образцах с помощью ВЭЖХ перед и после адсорбции новыми и старыми губками

1. Инструменты и условия: Хроматограф для высокоэффективной жидкостной хроматографии от компании Agilent HPLC-1260; условия хроматографии: Колонка для хроматографии с обращенной фазой С18, длина волны 210 нм, подвижные фазы: воды высокой степени чистоты и ацетонитрил, доля ацетонитрила 70%; расход потока 1 мл/мин, температура колонки 40°С и вводимый объем 10 мкл.

2. Готовят стандартные растворы 5 нг/мл, 25 нг/мл, 50 нг/мл, 75 нг/мл и 100 нг/мл тетрагидроканнабинола для получения калибровочной кривой концентраций и участков пика: у=0,116х+0,002, r=0,99996, R2=0,99992.

3. Отбирают 500 мкл стандартного раствора 100 нг/мл тетрагидроканнабинола Δ9-ТНС (вводимый объем 10 мкл); для сбора образца используют две головки из губки, выполненные из разных материалов, первая из которых представляет собой головку из губки, выполненную из меламиновой губки, вторая из которых представляет собой головку из губки (полипропиленовой губки), выполненную из полипропилена, размеры головок из губки идентичны, а объем адсорбции при сборе образца составляет 500 мкл. После физической выжимки образцов для каждого отбирают 10 мкл вводимых объемов с получением хроматограмм 6А, 6В и 6С, а также Таблицы 12.

Из ФИГ. 6А-6С и Таблицы 12 можно увидеть, что время появления пика по трем разным растворам составляет от 10 до 11 минут. В случае стандарта (без абсорбционной обработки любым материалом) высота его пика составляет 74,845, а его площадь составляет 868,6890, а значение концентрации, полученное по стандартной формуле, составляет 100,770. Причиной количества, составляющего более, чем 100 нг/мл, является ошибка, произошедшая в процессе приготовления. После абсорбции стандарта в такой же концентрации меламиновой губкой выжатый образец вводят путем ВЭЖХ, высота его пика составляет 60,500, его площадь составляет 706,3172, а значение концентрации, полученное по стандартной формуле, составляет 81,935. Это демонстрирует то, что после абсорбции меламиновой губкой 20% целевого вещества теряется по сравнению с неабсорбированным образцом, то есть приблизительно 20% Δ9-ТНС абсорбируется, но 80% Δ9-ТНС остается в выжатом образце. В случае раствора после адсорбции полипропиленовой губкой, после ввода путем ВЭЖХ, высота его пика составляет 13,939, его площадь составляет 161,1271, а значение концентрации, полученное по стандартной формуле, составляет 18,693. Это демонстрирует то, что после адсорбции традиционной полипропиленовой губкой приблизительно 80% Δ9-ТНС адсорбируется, тогда как лишь приблизительно 20% Δ9-ТНС остается в выжатом образце. Таким образом, это свидетельствует о том, что путем абсорбции и выжимки образца посредством новой разработанной меламиновой губки по настоящему изобретению, адсорбция Δ9-ТНС может быть существенно снижена, а чувствительность обнаружения улучшена. Следует отметить, что все высоты пика на сопроводительных чертежах представлены с точностью десятичных разрядов, тогда как представленные в таблице являются фактическими высотами пика.

Вариант реализации 9: Спектры композиционного анализа новых/старых губок

Для анализа специфических химических композиций меламиновой губки из химических композиций на меламиновой губке и общеиспользуемой полипропиленовой синтетической губке был проведен инфракрасный анализ. Были получены следующие конкретные результаты, см. инфракрасный спектр и ФИГ. 7 и 8 для подробной информации. Из представленных выше инфракрасных спектров можно увидеть, что волновые числа меламиновой губки и полипропиленовой губки составляют от 1000 до 1500 см^-1, и абсорбция ими инфракрасного излучения сильно отличается, что свидетельствует о том, что функциональные группы основных композиций двух губок отличаются. Дополнительное сравнение данных демонстрирует то, что основная композиция меламиновой губки представляет собой меламиновую смолу или меламиновую и фенольную смолу, которая представляет собой продукт сополиконденсации меламина, фенола и формальдегида. Губка на ФИГ. 2 представляет собой полипропиленовую синтетическую смолу.

Вариант реализации 10. Контрольные эксперименты при обнаружении антигена нового коронавируса

Способ приготовления тест-бумаги для антигена нового коронавируса, использованный в данном эксперименте, является таким же, как и в Варианте реализации 1. В этом эксперименте используется способ наложения. Чем больше показатель линии Т, тем выше содержание белка в образцах. Меламиновые губки и традиционные губки одного и того же размера и формы используют, соответственно, для сбора 50 мкл образцов N-белка нового коронавируса (стандартов), затем образцы, соответственно, добавляют в 500 мкл раствора для лизиса для экстракции в течение 15 секунд и их в объеме 100 мкл вносят капанием на подложку тест-бумаги для обнаружения, и через 10 минут осуществляют считывание.

Вывод: в случае образцов с концентрацией образца 450 пг/мл показателем без адсорбции губкой является G7, показателем после адсорбции меламиновой губкой является G5, а показателем после адсорбции старой губкой является G4. Можно увидеть, что показатель сбора образца меламиновой губкой ближе к реальному показателю.

Все патенты и публикации, упомянутые в описании настоящего изобретения, указывают на то, что раскрытые в них технологии известны из уровня техники и могут быть использованы в настоящем изобретении. Все патенты и публикации, процитированные в настоящем документе, также перечислены в качестве ссылок, как если бы каждая публикация была конкретно и отдельно включена и процитированы. Настоящее изобретение, описанное в настоящем документе, может быть реализовано при отсутствии любого элемента или элементов, ограничения или ограничений, если такое ограничение конкретно не указано в настоящем документе. Например, термины «содержащий», «по существу состоящий из…» и «состоящий из…» в каждом варианте реализации, представленном в настоящем документе, могут быть заменены любым из оставшихся двух терминов. Указанный «один» в настоящем документе означает лишь «один» и он не исключает того, что включен только один, а также он может означать, что включено два или более. Термины и выражения, используемые в настоящем документе, являются вариантами описания и не ограничиваются ими. Настоящим документом не предполагается то, что эти термины и интерпретации, описанные в настоящем описании, исключают любые эквивалентные фигуры, однако может быть известно, что любые подходящие изменения или модификации могут быть сделаны в пределах объема настоящего изобретения и формулы изобретения. Следует понимать, что все варианты реализации, описанные в настоящем документе, являются предпочтительными вариантами реализации и признаками, и любой средний специалист в данной области техники может произвести некоторые модификации и изменения в зависимости от сущности описания настоящего изобретения, и эти модификации и изменения также считаются входящими в объем настоящего изобретения и объемы, определенные независимыми и зависимыми пунктами формулы изобретения.

Группа изобретений относится к медицине. Применение меламинового материала для сбора и/или обработки биологических образцов, причем указанные биологические образцы содержат тетрагидроканнабинол (ТНС). Применение меламинового материала в получении устройства для сбора, которое выполнено с возможностью снижения адсорбции тетрагидроканнабинола (ТНС) в биологическом образце. Техническим результатом группы изобретений является повышение чувствительности выявления злоупотребления наркотиками при предотвращении ложного обнаружения или отсутствия обнаружения такого злоупотребления. 2 н. и 4 з.п. ф-лы, 8 ил., 13 табл., 10 пр.

1. Применение меламинового материала для сбора и/или обработки биологических образцов, причем указанные биологические образцы содержат тетрагидроканнабинол (ТНС).

2. Применение по п. 1, отличающееся тем, что меламиновый материал представляет собой меламиновый пористый материал или пористый водоабсорбирующий материал.

3. Применение меламинового материала в получении устройства для сбора, которое выполнено с возможностью снижения адсорбции тетрагидроканнабинола (ТНС) в биологическом образце.

4. Применение по п. 3, отличающееся тем, что меламиновый материал представляет собой меламиновый пористый материал.

5. Применение по п. 3, отличающееся тем, что меламиновый материал представляет собой меламиновую губку.

6. Применение по п. 3, отличающееся тем, что биологический образец представляет собой слюну, мочу и кровь.