СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ РАКА НА МОДЕЛЯХ, ИМЕЮЩИХ МУТАЦИИ ESR1 Российский патент 2024 года по МПК A61K31/137 A61P35/00 A61P35/04 

Ссылка на родственные заявки

[0001] Настоящая заявка испрашивает приоритет согласно 35 U.S.С. §119(e) в соответствии с находящейся на рассмотрении заявкой на выдачу патента Соединенных Штатов Америки №62/776338, поданной 6 декабря 2018 года. Полное содержание упомянутой выше заявки тем самым включено в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте, включая графические материалы.

Область техники, к которой относится настоящее изобретение

[0002] Настоящее раскрытие относится к способам обеспечения противоопухолевой активности с использованием элацестранта на моделях рака, имеющих мутации ESR1, устойчивых к стандарту лечебных терапевтических средств. Настоящее раскрытие также относится к способам лечения эстроген-положительных (ER+) раковых заболеваний с наличием мутаций ESR1, которые могут способствовать эндокринной устойчивости, при этом рак эффективно лечат с использованием элацестранта.

Предшествующий уровень техники настоящего изобретения

[0003] Рак молочной железы делится на три подтипа на основании экспрессии трех рецепторов: рецептора эстрогена (ER), рецептора прогестерона (PR) и рецептора эпидермального фактора роста человека-2 (Her2). Надэкспрессия ER обнаруживается у многих больных с раком молочной железы. ER-положительный (ER+) рак молочной железы составляет две трети всех случаев рака молочной железы. Помимо рака молочной железы, эстроген и ER связаны, например, с раком яичника, раком толстой кишки, раком предстательной железы и раком эндометрия.

[0004] ER могут активироваться эстрогеном и перемещаться в ядро для связывания с ДНК, тем самым регулируя активность различных генов. См., например, Marino et al., "Estrogen Signaling Multiple Pathways to Impact Gene Transcription," Curr. Genomics 7(8): 497-508 (2006); и Heldring et al., "Estrogen Receptors: How Do They Signal and What Are Their Targets," Physiol. Rev. 87(3): 905-931 (2007).

[0005] Средства, которые ингибируют продуцирование эстрогена, такие как ингибиторы ароматазы (AI, например, летрозол, анастрозол и экземестан), или средства, которые непосредственно блокируют активность ER, такие как селективные модуляторы рецепторов эстрогена (SERM, например, тамоксифен, торемифен, дролоксифен, идоксифен, ралоксифен, лазофоксифен, арзоксифен, мипроксифен, левормелоксифен и ЕМ-652 (SCH 57068)), а также селективные деструкторы рецепторов эстрогена (SERD, например, фулвестрант, TAS-108 (SR16234), ZK191703, RU-5861068, ARNDC-0861068, ARNDC-08 810), GW5638/DPC974, SRN-927, ICI182780 и AZD9496), использовались ранее или находятся в разработке для лечения ER-положительных раковых заболеваний молочной железы.

[0006] SERM и AI часто используют в качестве вспомогательной системной терапии первой линии при ER-положительном раке молочной железы. AI подавляют продуцирование эстрогена в периферических тканях, блокируя активность ароматазы, которая превращает андроген в эстроген в организме. Однако AI не может остановить продуцирование эстрогена яичниками. Таким образом, AI в основном используют для лечения женщин в постменопаузе. Кроме того, поскольку AI более эффективны, чем SERM тамоксифен, с меньшим количеством серьезных побочных эффектов, AI также можно использовать для лечения женщин в пременопаузе с подавленной функцией яичников. См., например, Francis et al., "Adjuvant Ovarian Suppression in Premenopausal Breast Cancer," the N. Engl. J. Med, 372:436-446 (2015).

[0007] Устойчивость к эндокринной терапии представляет собой сложный аспект ведения больных с положительным по рецепторам эстрогена (ER+) раком молочной железы. Недавние исследования показали, что приобретенная устойчивость может развиваться после лечения ингибиторами ароматазы за счет появления мутаций в гене рецептора эстрогена 1 (ESR1). Хотя первоначальное лечение этими средствами может быть успешным, у многих больных в конечном итоге возникает рецидив устойчивого к лекарственному средству рака молочной железы. Мутации, влияющие на ER, появились как один из возможных механизмов развития этой устойчивости. См., например, Robinson et al., "Activating ESR1 mutations in hormone-resistant metastatic breast cancer," Nat Genet. 45:1446-51 (2013). Мутации в лиганд-связывающем домене (LBD) ER обнаруживаются в 20-40% образцов метастатических ER-положительных опухолей молочной железы от больных, которые получали хотя бы одну линию эндокринного лечения. Jeselsohn, et al., "ESR1 mutations-a mechanism for acquired endocrine resistance in breast cancer," Nat. Rev. Clin. Oncol, 12:573-83 (2015).

[0008] Следовательно, сохраняется потребность в более длительных и эффективных терапевтических средствах, нацеленных на ER, для преодоления некоторых проблем, связанных с современными эндокринными терапевтическими средствами, и для борьбы с развитием устойчивости.

Краткое раскрытие настоящего изобретения

[0009] Согласно одному аспекту настоящее раскрытие относится к способу ингибирования и разрушения положительного по мутантному рецептору эстрогена альфа рака у субъекта, предусматривающему введение субъекту терапевтически эффективного количества элацестранта или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.

[0010] Варианты осуществления этого аспекта настоящего изобретения могут включать в себя один или несколько из следующих необязательных признаков. Согласно некоторым вариантам осуществления положительный по мутантному рецептору эстрогена альфа рак содержит одну или несколько мутаций, выбранных из группы, состоящей из D538G, Y537X1_1, L536X₂, Р535Н, V534E, S463P, V392I, E380Q и их комбинаций, при этом X₁ представляет собой S, N или С; и Х₂ представляет собой R или Q. Согласно некоторым вариантам осуществления мутация представляет собой Y537S. Согласно некоторым вариантам осуществления мутация представляет собой D538G. Согласно некоторым вариантам осуществления положительный по мутантному рецептору эстрогена альфа рак является устойчивым к лекарственному средству, выбранному из группы, состоящей из противоэстрогенных средств, ингибиторов ароматазы и их комбинаций. Согласно некоторым вариантам осуществления положительный по мутантному рецептору эстрогена альфа рак выбран из группы, состоящей из рака молочной железы, рака матки, рака яичника и рака гипофиза. Согласно некоторым вариантам осуществления положительный по мутантному рецептору эстрогена альфа рак представляет собой запущенный или метастатический рак молочной железы. Согласно некоторым вариантам осуществления положительный по мутантному рецептору эстрогена альфа рак представляет собой рак молочной железы. Согласно некоторым вариантам осуществления субъект представляет собой женщину в постменопаузе. Согласно некоторым вариантам осуществления субъект представляет собой женщину в пременопаузе. Согласно некоторым вариантам осуществления субъект представляет собой женщину в постменопаузе, заболевание которой рецидивирует или прогрессирует после предшествующего лечения селективными модуляторами рецептора эстрогена (SERM) и/или ингибиторами ароматазы (AI). Согласно некоторым вариантам осуществления элацестрант вводят субъекту при дозе от приблизительно 200 мг/сутки до приблизительно 500 мг/сутки. Согласно некоторым вариантам осуществления элацестрант вводят субъекту при дозе приблизительно 200 мг/сутки, приблизительно 300 мг/сутки, приблизительно 400 мг/сутки или приблизительно 500 мг/сутки. Согласно некоторым вариантам осуществления элацестрант вводят субъекту при дозе, которая является максимальной переносимой дозой для субъекта. Согласно некоторым вариантам осуществления способ дополнительно предусматривает идентификацию субъекта для лечения путем измерения повышенной экспрессии одного или нескольких генов, выбранных из ABL1, АКТ1, АКТ2, ALK, АРС, AR, ARID 1 A, ASXL1, ATM, AURKA, ВАР, ВАР1, BCL2L11, BCR, BRAF, BRCA1, BRCA2, CCND1, CCND2, CCND3, CCNE1, CDH1, CDK4, CDK6, CDK8, CDKN1A, CDKN1B, CDKN2A, CDKN2B, СЕВРА, CTNNB1, DDR2, DNMT3A, E2F3, EGFR, EML4, ЕРНВ2, ERBB2, ERBB3, ESR1, EWSR1, FBXW7, FGF4, FGFR1, FGFR2, FGFR3, FLT3, FRS2, HIF1A, HRAS, IDH1, IDH2, IGF1R, JAK2, KDM6A, KDR, KIF5B, KIT, KRAS, LRP1B, МАР2К1, МАР2К4, MCL1, MDM2, MDM4, MET, MGMT, MLL, MPL, MSH6, MTOR, МУС, NF1, NF2, NKX2-1, NOTCH1, NPM, NRAS, PDGFRA, PIK3CA, PIK3R1, PML, PTEN, PTPRD, RARA, RBI, RET, RICTOR, ROS1, RPTOR, RUNX1, SMAD4, SMARCA4, SOX2, STK11, TET2, TP53, TSC1, TSC2 и VHL. Согласно некоторым вариантам осуществления один или несколько генов выбраны из АКТ1, AKT2, BRAF, CDK4, CDK6, PIK3CA, PIK3R1 и MTOR. Согласно некоторым вариантам осуществления отношение концентрации элацестранта или его соли или сольвата в опухоли к концентрации элацестранта или его соли или сольвата в плазме (Т/Р) после введения составляет по меньшей мере приблизительно 15.

[0011] Согласно другому аспекту настоящее раскрытие относится к способу лечения устойчивого к лекарственному средству положительного по рецептору эстрогена альфа рака у субъекта, имеющего мутантный рецептор эстрогена альфа, при этом способ предусматривает введение субъекту терапевтически эффективного количества элацестранта или его фармацевтически приемлемых соли или сольвата, при этом мутантный рецептор эстрогена альфа содержит одну или несколько мутаций, выбранных из группы, состоящей из D538G, У537Х1_1, L536X₂, Р535Н, V534E, S463P, V392I, E380Q и их комбинаций, при этом X₁ представляет собой S, N или С; и Х₂ представляет собой R или Q.

[0012] Варианты осуществления этого аспекта настоящего изобретения могут включать в себя один или несколько из следующих необязательных признаков. Согласно некоторым вариантам осуществления рак является устойчивым к лекарственному средству, выбранному из группы, состоящей из противоэстрогенных средств, ингибиторов ароматазы и их комбинаций. Согласно некоторым вариантам осуществления противоэстрогенные средства выбраны из группы, состоящей из тамоксифена, торемифена и фулвестранта, а ингибиторы ароматазы выбраны из группы, состоящей из эксеместана, летрозола и анастрозола. Согласно некоторым вариантам осуществления устойчивый к лекарственному средству положительный по рецептору эстрогена альфа рак выбран из группы, состоящей из рака молочной железы, рака матки, рака яичника и рака гипофиза. Согласно некоторым вариантам осуществления рак представляет собой запущенный или метастатический рак молочной железы. Согласно некоторым вариантам осуществления рак представляет собой рак молочной железы. Согласно некоторым вариантам осуществления субъект представляет собой женщину в постменопаузе. Согласно некоторым вариантам осуществления субъект представляет собой женщину в пременопаузе. Согласно некоторым вариантам осуществления субъект представляет собой женщину в постменопаузе, заболевание которой рецидивирует или прогрессирует после предшествующего лечения с помощью SERM и/или AI. Согласно некоторым вариантам осуществления субъект экспрессирует по меньшей мере один мутантный рецептор эстрогена альфа, выбранный из группы, состоящей из D538G, Y537S, Y537N, Y537C, E380Q, S463P, L536R, L536Q, Р535Н, V392I и V534E. Согласно некоторым вариантам осуществления мутация включает в себя Y537S. Согласно некоторым вариантам осуществления мутация включает в себя D538G. Согласно некоторым вариантам осуществления способ дополнительно предусматривает идентификацию субъект для лечения путем измерения повышенной экспрессии одного или нескольких генов, выбранных из ABL1, АКТ1, АКТ2, ALK, АРС, AR, ARID1A, ASXL1, ATM, AURKA, ВАР, ВАР1, BCL2L11, BCR, BRAF, BRCA1, BRCA2, CCND1, CCND2, CCND3, CCNE1, CDH1, CDK4, CDK6, CDK8, CDKN1A, CDKN1B, CDKN2A, CDKN2B, СЕВРА, CTNNB1, DDR2, DNMT3A, E2F3, EGFR, EML4, ЕРНВ2, ERBB2, ERBB3, ESR1, EWSR1, FBXW7, FGF4, FGFR1, FGFR2, FGFR3, FLT3, FRS2, HIF1A, HRAS, IDH1, IDH2, IGF1R, JAK2, KDM6A, KDR, KIF5B, KIT, KRAS, LRP1B, MAP2K1, MAP2K4, MCL1, MDM2, MDM4, MET, MGMT, MLL, MPL, MSH6, MTOR, MYC, NF1, NF2, NKX2-1, NOTCH 1, NPM, NRAS, PDGFRA, PIK3CA, PIK3R1, PML, PTEN, PTPRD, RARA, RBI, RET, RICTOR, ROS1, RPTOR, RUNX1, SMAD4, SMARCA4, SOX2, STK11, TET2, TP53, TSC1, TSC2 и VHL. Согласно некоторым вариантам осуществления один или несколько генов выбраны из АКТ1, АКТ2, BRAF, CDK4, CDK6, PIK3CA, PIK3R1 и MTOR. Согласно некоторым вариантам осуществления элацестрант вводят субъекту при дозе от приблизительно 200 до приблизительно 500 мг/сутки. Согласно некоторым вариантам осуществления элацестрант вводят субъекту при дозе приблизительно 200 мг, приблизительно 300 мг, приблизительно 400 мг или приблизительно 500 мг. Согласно некоторым вариантам осуществления элацестрант вводят субъекту при дозе приблизительно 300 мг/сутки. Согласно некоторым вариантам осуществления отношение концентрации элацестранта или его соли или сольвата в опухоли к концентрации элацестранта или его соли или сольвата в плазме (Т/Р) после введения составляет по меньшей мере приблизительно 15.

[0013] Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют значение, обычно известное рядовому специалисту в области, к которой относится настоящее изобретение. В настоящем документе описываются способы и материалы для применения в настоящем изобретении; также могут быть использованы другие подходящие способы и материалы, известные в уровне техники. Материалы, способы и примеры являются исключительно иллюстративными и не предназначены для ограничения. Все публикации, заявки на выдачу патентов, патенты, последовательности, объекты баз данных и другие ссылочные материалы, упоминаемые в настоящем документе, включены посредством ссылки в полном своем объеме. В случае конфликта регулирующим будет настоящее описание, в том числе определения.

[0014] Другие признаки и преимущества настоящего изобретения станут очевидными из подробного раскрытия и графических материалов, а также из формулы изобретения.

Краткое описание графических материалов

[0015] Следующие графические материалы представлены в качестве примера и не предназначены для ограничения объема заявляемого изобретения.

[0016] Фиг. 1. Репрезентативные изображения, представленные в верхнем ряду, показывают опухолевые клетки, обработанные контролем в виде среды-носителя для линий мутантных раковых клеток клона 1 Y537S, клона 2 Y537S, клона 1 D538G, клона 2 D538G и клона 1 S463P. На изображениях, представленных в нижнем ряду, показаны опухолевые клетки клона 1 Y537S, клона 2 Y537S, клона 1 D538G, клона 2 D538G и клона 1 S463P, обработанные элацестрантом при 100 нМ.

[0017] Фиг. 2. Среднее +/- SEM объемов опухоли с течением времени на мышиных моделях ксенотрансплантата, обработанных контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30, 60 и 120 мг/кг) и фулвестрантом (1 мг/доза).

[0018] Фиг. 3А. Кратность изменения относительно контроля рецептора прогестерона (PgR) для моделей опухолевых клеток, имеющих мутации дикого типа, S463P, D538G и Y537S, обработанных контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (10, 100 и 1000 нМ), Е2 (10 пМ) и фулвестрантом (10, 100 1000 нМ).

[0019] Фиг. 3В. Кратность изменения относительно контроля роста, регулируемого эстрогеном (GREB1), в моделях опухолевых клеток, имеющих мутации дикого типа, S463P, D538G и Y537S, обработанных контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (10, 100 и 1000 нМ), Е2 (10 пМ) и фулвестрантом (10, 100 1000 нМ).

[0020] Фиг. 3С. Кратность изменения относительно контроля фактора «трилистника» 1 (TFF1) в моделях опухолевых клеток, имеющих мутации дикого типа, S463P, D538G и Y537S, обработанных контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (10, 100 и 1000 нМ), Е2 (10 пМ) и фулвестрантом (10, 100 1000 нМ).

[0021] Фиг. 4А. Среднее +/- SEM объемов опухоли с течением времени у бестимусных голых мышей с имплантированным ксенотрансплантатом PDX ST2535-HI (предварительно обработанных тамоксифеном, ингибитором ароматазы и фулвестрантом) с мутацией ESR1:D538G, обработанных контролем в виде среды-носителя и элацестрантом (30 и 60 мг/кг).

[0022] Фиг. 4 В. Среднее+/- SEM объемов опухоли с течением времени у бестимусных голых мышей с имплантированным ксенотрансплантатом PDX CTG-1211-HI (предварительно обработанных тамоксифеном, ингибитором ароматазы и фулвестрантом) с мутацией ESR1:D538G, обработанных контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза).

[0023] Фиг. 4С. Среднее +/- SEM объемов опухоли с течением времени у бестимусных голых мышей с имплантированным ксенотрансплантатом PDX WHIM43-HI (предварительно обработанных тамоксифеном, ингибитором ароматазы и фулвестрантом) с мутацией ESR1:D538G, обработанных контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза).

[0024] Фиг. 5А. Кратность изменения относительно контроля в виде среды-носителя содержания мРНК рецептора прогестерона (PgR) на модели ксенотрансплантата PDX ST2535-HI (с предварительной обработкой тамоксифеном, ингибитором ароматазы и фулвестрантом) с мутацией ESR1:D538G, обработанной контролем в виде среды-носителя и элацестрантом (30 и 60 мг/кг).

[0025] Фиг. 5В. Вестерн-блоттинг, иллюстрирующий экспрессию PgR на модели ксенотрансплантата PDX ST2535-HI с мутацией ESR1:D538G, обработанной контролем в виде среды-носителя и элацестрантом (30 и 60 мг/кг).

[0026] Фиг. 5С. Кратность изменения относительно контроля в виде среды-носителя содержания мРНК рецептора прогестерона (PgR) на модели ксенотрансплантата PDX CTG-1211-HI (с предварительной обработкой тамоксифеном, ингибитором ароматазы и фулвестрантом) с мутацией ESR1:D538G, обработанной контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза).

[0027] Фиг. 5D. Вестерн-блоттинг, иллюстрирующий экспрессию PgR на модели ксенотрансплантата PDX CTG-1211-HI с мутацией ESR1:D538G, обработанной контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом.

[0028] Фиг. 5Е. Кратность изменения относительно контроля в виде среды-носителя содержания мРНК рецептора прогестерона (PgR) на модели ксенотрансплантата PDX WHIM43-HI (с предварительной обработкой тамоксифеном, ингибитором ароматазы и фулвестрантом) с мутацией ESR1:D538G, обработанной контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза).

[0029] Фиг. 5F. Вестерн-блоттинг, иллюстрирующий экспрессию PgR на модели ксенотрансплантата PDX WHIM43-HI с мутацией ESR1:D538G, обработанной контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом.

[0030] Фиг. 6А. Среднее +/- SEM объемов опухоли с течением времени на модели PDX ST941-HI, содержащей мутацию ESR1:Y537S, обработанной контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза), дозой 1 serd1 и дозой 2 serd1.

[0031] Фиг. 6 В. Среднее +/- SEM объемов опухоли с течением времени на модели PDX ST941-HI, содержащей мутацию ESR1:Y537S, обработанной контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза), дозой 1 serd2 и дозой 2 serd2.

[0032] Фиг. 7А. Кратность изменения относительно контроля в виде среды-носителя содержания мРНК рецептора прогестерона (PgR) на модели PDX ST941-HI, содержащей мутацию ESR1:Y537S, обработанной контролем в виде среды-носителя, фулвестрантом (3 мг/доза), элацестрантом (30 мг/кг), дозой 1 serd1, дозой 2 serd1, дозой 1 serd2 и дозой 2 serd2.

[0033] Фиг. 7В. Вестерн-блоттинг, иллюстрирующий модель PDX ST941-HI, содержащую мутацию ESR1:Y537S, демонстрирующую экспрессию PgR, обработанную контролем в виде среды-носителя, фулвестрантом (3 мг/кг), элацестрантом (30 мг/кг), дозой 1 serdl и дозой 2 serdl.

[0034] Фиг. 7С. Вестерн-блоттинг, иллюстрирующий модель PDX ST941-HI, содержащую мутацию ESR1:Y537S, демонстрирующую экспрессию PgR, обработанную контролем в виде среды-носителя, фулвестрантом (3 мг/кг), элацестрантом (30 мг/кг), дозой 1 serd2 и дозой 2 serd2.

[0035] Фиг. 8А. In vitro жизнеспособность клеток (% контроля), представленная относительно Log[концентрация (мкМ)] для линии клеток PDX ST941-HI.

[0036] Фиг. 8В. Кратность изменения относительно контроля в виде среды-носителя содержания мРНК рецептора прогестерона (PgR), нанесенного на график по отношению к концентрации элацестранта (0, 10, 100 и 1000 нМ) и фулвестранта (0, 10, 100 и 1000 нМ), используемых при обработке in vitro линии клеток ST941-HI, полученной из PDX.

[0037] Фиг. 9А. Среднее +/- SEM объемов опухоли у мышей с имплантированными PDX ST941-HI, содержащими мутацию ESR1:Y537S, нанесенное на график по отношению ко времени и обработке их контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (10, 30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза).

[0038] Фиг. 9В. Кратность изменения относительно контроля экспрессии мРНК рецептора прогестерона (PgR) на модели PDX ST941-HI, нанесенная на график по отношению к обработке ее контролем в виде среды-носителя, фулвестрантом (3 мг/доза) и элацестрантом (10, 30 и 60 мг/кг).

[0039] Фиг. 10А. Среднее +/- SEM объемов опухоли с течением времени у мышей с имплантированными ксенотрансплантатом PDX WHIM20 с мутацией ESRl:Y537S^hom, обработанных контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза).

[0040] Фиг. 10В. Кратность изменения относительно контроля в виде среды-носителя рецептора прогестерона (PgR) на модели ксенотрансплантата PDX WHIM20 с мутацией ESRl:Y537S^hom, обработанной контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза).

[0041] Фиг. 10С. Кратность изменения относительно контроля фактора «трилистника» 1 (TFF1) на модели ксенотрансплантата PDX WHIM20 с мутацией ESRl:Y537S^hom, обработанной контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза).

[0042] Фиг. 10D. Кратность изменения относительно контроля роста, регулируемого эстрогеном (GREB1) на модели ксенотрансплантата PDX WHIM20 с мутацией ESRl:Y537S^hom, обработанной контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза).

[0043] Фиг. 10Е. Вестерн-блоттинг, иллюстрирующий модель ксенотрансплантата PDX WHIM20 с мутацией ESRl:Y537S^hom, демонстрирующую экспрессию PgR, обработанную контролем в виде среды-носителя, фулвестрантом (3 мг/доза) и элацестрантом (30 и 60 мг/кг).

Подробное раскрытие настоящего изобретения

[0044] Используемый в настоящем документе элацестрант или «RAD1901» представляет собой перорально биодоступный селективный деструктор рецептора эстрогена (SERD) и характеризуется следующей химической структурой

в том числе его соли, сольваты (например, гидрат) и пролекарства. Доклинические данные показали, что элацестрант эффективен в ингибировании роста опухоли на моделях ER+рака молочной железы с ESR1 как дикого типа, так и мутантными. Согласно некоторым вариантам осуществления, описываемым в настоящем документе, элацестрант вводят в виде бис-гидрохлоридной (•2HCl) соли, характеризующейся следующей химической структурой

[0045] Для женщины в постменопаузе рассматриваемый стандарт лечения ER+ раковых заболеваний, таких как рак молочной железы, предусматривает ингибирование пути ER посредством 1) ингибирования синтеза эстрогена (ингибиторов ароматазы (AI)); 2) непосредственного связывания с ER и модулирования его активности с использованием SERM (например, тамоксифена); и/или 3) непосредственного связывания с ER и обеспечения разложения рецептора с использованием SERD (например, фулвестранта). У женщины в пременопаузе рассматриваемый стандарт лечения будет дополнительно предусматривать подавление яичников посредством овариэктомии или агониста гормона, высвобождающего лютеинизирующий гормон (LHRH). Несмотря на то, что больные обычно хорошо реагируют на клинически одобренные методы лечения, мутации ESR1 могут часто возникать (например, 20-40%) при метастатическом раке молочной железы и могут способствовать развитию эндокринной устойчивости. Хотя реакция мутаций ESR1 на AI и/или SERD до конца не изучена, недавние данные анализа ctDNA в испытании PALOMA-3 палбоциклиба и фулвестранта по сравнению с плацебо и фулвестрантом продемонстрировали тенденцию к отбору мутации ESR1 Y537S после лечения фулвестрантом. Эти данные показывают тенденцию ESR1 к мутированию в сочетании с необходимостью внутримышечной дозы фулвестранта и подчеркивают необходимость в новых и/или улучшенных перорально биодоступных эндокринных методах лечения, которые обладают эффективностью против ESR1 и всех мутаций ESR1.

[0046] Неожиданная эффективность элацестранта в отношении целевых опухолей, плохо отвечающих на лечение фулвестрантом, и в опухолях, экспрессирующих мутантный ERα, может быть связана с уникальными взаимодействиями между элацестрантом и ERα. Структурные модели ERα, связанного с элацестрантом и другими ERα-связывающими соединениями, анализировали для получения информации о специфических связывающих взаимодействиях. Компьютерное моделирование показало, что на взаимодействия элацестрант-ERα вряд ли могут повлиять мутанты LBD ERα, например, мутант Y537X, где X представлял собой S, N или С; D538G и S463P, на которые приходится приблизительно 81,7% мутаций LBD, обнаруженных в недавнем исследовании образцов метастатических ER-положительных опухолей молочной железы от больных, которые получали по меньшей мере одну линию эндокринного лечения. Это привело к идентификации специфических остатков в С-концевых лиганд-связывающих доменах ERα, которые имеют важное значение для связывания, информации, которая может быть использована для разработки соединений, которые связывают и антагонизируют не только ERα дикого типа, но также определенные мутации и их варианты.

[0047] На основании этих результатов в настоящем документе представлены способы ингибирования роста или обеспечения регрессии ERα-положительных рака или опухоли у субъекта, нуждающегося в этом, путем введения субъекту терапевтически эффективного количества элацестранта или его сольвата (например, гидрата) или соли. Согласно некоторым вариантам осуществления введение элацестранта или его соли или сольвата (например, гидрата) обладает дополнительными терапевтическими преимуществами в дополнение к ингибированию роста опухоли, включающими в себя, например, ингибирование пролиферации раковых клеток или ингибирование активности ERα (например, путем ингибирования связывания эстрадиола или путем разложения ERα). Согласно некоторым вариантам осуществления способ не оказывает негативных эффектов на мышцы, кости, молочную железу и матку.

[0048] Согласно некоторым вариантам осуществления способов ингибирования роста опухоли или регрессии, представленных в настоящем документе, способы дополнительно предусматривают стадию определения того, имеет ли больной опухоль, экспрессирующую ERα, до введения элацестранта или его сольвата (например, гидрата) или соли. Согласно некоторым вариантам осуществления способов ингибирования роста опухоли или регрессии, представленных в настоящем документе, способы дополнительно предусматривают стадию определения того, имеет ли больной опухоль, экспрессирующую мутантный ERα, до введения элацестранта или его сольвата (например, гидрата) или соли. Согласно некоторым вариантам осуществления способов ингибирования роста опухоли или регрессии, представленных в настоящем документе, способы дополнительно предусматривают стадию определения того, имеет ли больной опухоль, экспрессирующую ERα, которая отвечает или не отвечает на лечение AI, SERD (например, фулвестрантом) и/или SERM (например, тамоксифеном), до введения элацестранта или его сольвата (например, гидрата) или соли. Такие определения могут быть осуществлены с использованием любого способа выявления экспрессии, известного в уровне техники, и могут быть выполнены in vitro с использованием образца опухоли или ткани, выделенного у субъекта.

[0049] В способах, описываемых в настоящем документе, элацестрант демонстрирует ингибирование роста на нескольких моделях PDX, имеющих мутации ESR1:D538G и ESR1:Y537S, в том числе на моделях, которые устойчивы к палбоциклибу, устойчивы к фулвестранту и которые ранее лечили ингибиторами ароматазы/тамоксифеном/фулвестрантом. Элацестрант, как также продемонстрировали, и разлагает ER, и ингибирует передачу сигнала ER на моделях PDX, имеющих мутацию ESR1:D538G. Элацестрант является эффективным и in vitro, и in vivo на модели ST941-HI, которая имеет мутацию Y537. Кроме того, два SERD, имеющие боковые цепи акриловой кислоты, демонстрировали частичное ингибирование роста in vivo на модели PDX ST941-HI. Фулвестрант, тогда как является эффективным in vitro, демонстрировал отсутствие активности in vivo на модели PDX ST941-HI. В то время как и элацестрант, и фулвестрант демонстрируют частичную эффективность на модели WHIM20, содержащей мутацию ESR1:Y537S, несмотря на то, что оба средства разлагают ER и ингибируют передачу сигнала ER, роль элацестранта и его комбинации с ингибиторами других онкогенных факторов роста опухоли обеспечивает успехи в лечении опухолей с повышенной эффективностью.

[0050] Роль мутаций ESR1 в эндокринной устойчивости и их влияние на эффективность методов эндокринного лечения представляет собой сложную взаимосвязь. Действительно, недавние данные анализа ctDNA в испытании PALOMA3 палбоциклиба и фулвестранта по сравнению с плацебо и фулвестрантом продемонстрировали тенденцию к отбору мутации ESR1:Y537S после лечения фулвестрантом. Это исследование показывает, что могут наблюдаться определенные случаи мутаций ESR1, при которых фулвестрант может иметь ограниченную активность. Следовательно, приведенные в настоящем документе исследования, показывающие эффективное применение элацестранта в качестве лечения раковых заболеваний, обладающего эффективностью против всех мутаций ESR1, являются многообещающим открытием.

Определения

[0051] Следует применять следующие используемые в настоящем документе определения, если не указано иное.

[0052] Используемые в настоящем документе термины «RAD1901» и «элацестрант» относятся к одному и тому же химическому соединению и используются взаимозаменяемо.

[0053] Используемый в настоящем документе термин «ингибирование роста» ERα-положительной опухоли может относиться к замедлению скорости роста опухоли или полному прекращению роста опухоли.

[0054] Используемый в настоящем документе термин «регрессия опухоли» или «регрессия» ERα-положительной опухоли может относиться к снижению максимального размера опухоли. Согласно некоторым вариантам осуществления введение комбинации, описываемой в настоящем документе, или ее сольватов (например, гидрата) или солей может приводить к уменьшению размера опухоли по сравнению с исходным уровнем (т.е. с размером до начала лечения) или даже к устранению или частичному устранению опухоли. Соответственно, согласно некоторым вариантам осуществления способы регрессии опухоли, представленные в настоящем документе, могут быть, в качестве альтернативы, охарактеризованы, как способы снижения размера опухоли по сравнению с исходным уровнем.

[0055] Используемый в настоящем документе термин «опухоль» представляет собой злокачественную опухоль и используется взаимозаменяемо с термином «рак».

[0056] Используемый в настоящем документе термин «рецептор эстрогена альфа» или «ERα» относится к полипептиду, содержащему, состоящему из или состоящему по сути из аминокислотной последовательности ERα дикого типа, которая кодируется геном ESR1.

[0057] Опухоль, которая является «положительной по рецептору эстрогена альфа», «ERα-положительной», «ER+» или «ERα+», как используется в настоящем документе, относится к опухоли, в которой одна или несколько клеток экспрессируют по меньшей мере одну изоформу ERα.

[0058] Используемый в настоящем документе термин «стандарт лечебных терапевтических средств» относится к средствам, известным и традиционно используемым для лечения раковых заболеваний, таких как рак молочной железы, включающим в себя ингибиторы ароматазы (AI, например, летрозол, анастрозол и эксеместан), селективные модуляторы рецептора эстрогена (SERM, например, тамоксифен, торемифен, дролоксифен, идоксифен, ралоксифен, лазофоксифен, арзофоксифен, мипроксифен, левормелоксифен и ЕМ-652 (SCH 57068)) и/или селективные деструкторы рецептора эстрогена (SERD, например, фулвестрант, TAS-108 (SR16234), ZK191703, RU58668, GDC-0810 (ARN-810), GW5638/DPC974, SRN-927, ICI182782 и AZD9496).

Способы лечения

[0059] Согласно некоторым вариантам осуществления настоящее раскрытие относится к способу ингибирования и разрушения положительного по мутантному рецептору эстрогена альфа рака у субъекта, предусматривающему введение субъекту терапевтически эффективного количества элацестранта или его фармацевтически приемлемых соли или сольвата.

[0060] Согласно другим вариантам осуществления настоящее раскрытие относится к способу лечения устойчивого к лекарственному средству положительного по рецептору эстрогена альфа рака у субъекта, имеющего мутантный рецептор эстрогена альфа, при этом способ предусматривает введение субъекту терапевтически эффективного количества элацестранта или его фармацевтически приемлемых соли или сольвата, при этом мутантный рецептор эстрогена альфа содержит одну или несколько мутаций, выбранных из группы, состоящей из D538G, Y537X₁, L536X₂, Р535Н, V534E, S463P, V392I, E380Q и их комбинаций, при этом X₁ представляет собой S, N или С; и Х₂ представляет собой R или Q.

Введение элацестранта

[0061] Элацестрант или его сольваты (например, гидраты) или соли при введении субъекту оказывают терапевтический эффект в отношении одного(одной) или нескольких раковых заболеваний или опухолей. Ингибирование роста опухоли или регрессия могут быть локализованы в отдельной опухоли или в ряде опухолей в определенных ткани или органе, или могут быть системными (т.е. поражать опухоли во всех тканях или органах).

[0062] Поскольку элацестрант, как известно, преимущественно связывает ERα по сравнению с рецептором эстрогена бета (ERβ), если не указано обратное, термины «рецептор эстрогена», «рецептор эстрогена альфа», «ERα», «ER» и «ERα дикого типа» используются взаимозаменяемо в настоящем документе. Согласно некоторым вариантам осуществления ER+ клетки надэкспрессируют ERα. Согласно некоторым вариантам осуществления больной имеет одну или несколько клеток в опухоли, экспрессирующих одну или несколько форм ERβ. Согласно некоторым вариантам осуществления ERα-положительные опухоль и/или рак ассоциированы с раком молочной железы, матки, яичника или гипофиза. Согласно некоторым из таких вариантов осуществления больной имеет опухоль, расположенную в ткани молочной железы, матки, яичника или гипофиза. Согласно таким вариантам осуществления, если больной имеет опухоль, расположенную в молочной железе, то опухоль может быть ассоциирована с внутрипротоковым раком молочной железы, который может быть или может не быть положительным по HER2, и, что касается HER2+ опухолей, опухоли могут экспрессировать высокий уровень или низкий уровень HER2. Согласно другим вариантам осуществления больной имеет опухоль, расположенную в других ткани или органе (например, в кости, мышце, головном мозге), но тем не менее, она ассоциирована с раком молочной железы, матки, яичника или гипофиза (например, опухоли, происходящие из миграции или метастазирования рака молочной железы, матки, яичника или гипофиза). Соответственно, согласно некоторым вариантам осуществления способов ингибирования роста опухоли или регрессии опухоли, представленных в настоящем документе, опухоль, на которую нацеливаются, представляет собой метастатическую опухоль и/или опухоль, характеризующуюся надэкспрессией ER, в других органах (например, костях и/или мышцах). Согласно некоторым вариантам осуществления опухоль, на которую нацеливаются, представляет собой опухоль и/или рак головного мозга. Согласно некоторым вариантам осуществления опухоль, на которую нацеливаются, может быть более чувствительной к лечению элацестрантом, чем к лечению другим SERD (например, фулвестрантом, TAS-108 (SRI6234), ZK191703, RU58668, GDC-0810 (ARN-810), GW5638/DPC974, SRN-927 и AZD9496), ингибиторами Her2 (например, трастузумабом, лапатинибом, адо-трастузумабом эмтанзином и/или пертузумабом), химиотерапией (например, абраксаном, адриамицином, карбоплатином, цитоксаном, даунорубицином, доксилом, элленсом, флуороурацилом, гемзаром, хелавеном, лксемпрой, метотрексатом, митомицином, микоксантроном, навелбином, таксолом, таксотером, тиотепой, винкристином и кселодой), ингибитором ароматазы (например, анастрозолом, эксеместаном и летрозолом), селективными модуляторами рецептора эстрогена (например, тамоксифеном, ралоксифеном, лазофоксифеном и/или торемифеном), ингибитором ангиогенеза (например, бевацизумабом) и/или ритуксимабом.

[0063] В дополнение к демонстрации способности элацестранта ингибировать рост опухоли в опухолях, экспрессирующих ERα дикого типа, элацестрант обладает способностью ингибировать рост опухолей, экспрессирующих мутантную форму ERα, а именно Y537S ERα. Оценивания с помощью компьютерного моделирования примеров мутаций ERα, показали, что ни одна из этих мутаций не должна была влиять на LBD или специфически препятствовать связыванию элацестрантом, например, ERα, включающего в себя один или несколько мутантов, выбранных из группы, состоящей из ERα с мутацией Y537X, при этом X представляет собой S, N или С, ERα с мутацией D538G и ERα с мутацией S463P. На основе этих результатов в настоящем документе представлены способы ингибирования роста или обеспечения регрессии опухоли, которая является положительной по ERα, включающему в себя одного или несколько мутантов ERα по лиганд-связывающему домену (LBD), выбранных из группы, состоящей из Y537X1, при этом XI представляет собой S, N или С, D538G, L536X2, при этом Х2 представляет собой R или Q, Р535Н, V534E, S463P, V392I, E380Q, особенно Y537S, у субъекта с раком, путем введения субъекту терапевтически эффективного количества элацестранта или его сольватов (например, гидратов) или солей. Используемый в настоящем документе термин «мутантный ERα» относится к ERα, содержащему одну или несколько замен или делеций, и его вариантам, содержащим, состоящим из или состоящим по сути из аминокислотной последовательности, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98%, по меньшей мере на 99% или по меньшей мере на 99,5% идентичной по отношению к аминокислотной последовательности ERα.

[0064] В дополнение к ингибированию роста опухоли рака молочной железы на животной модели ксенотрансплантата элацестрант демонстрирует значительное накопление в опухолевых клетка и способность преодолевать гематоэнцефалический барьер. Способность преодолевать гематоэнцефалический барьер подтверждается демонстрацией того, что введение элацестранта существенно продлевает выживаемость на модели ксенотрансплантата с метастазисом в головном мозге. Соответственно, согласно некоторым вариантам осуществления способов ингибирования роста опухоли или регрессии опухоли, представленных в настоящем документе, ERα-положительная опухоль, на которую нацеливаются, располагается в головном мозге или где-либо еще в центральной нервной системе. Согласно некоторым из таких вариантов осуществления ERα-положительная опухоль главным образом связана с раком головного мозга. Согласно другим вариантам осуществления ERα-положительная опухоль представляет собой метастатическую опухоль, которая главным образом связана с другим типом рака, таким как рак молочной железы, матки, яичника или гипофиза, или опухоль, которая мигрировала из других ткани или органа. Согласно некоторым из таких вариантов осуществления опухоль представляет собой метастазы головного мозга, такие как метастазы рака молочной железы в головной мозг (ВСВМ). Согласно некоторым вариантам осуществления способов, раскрываемых в настоящем документе, элацестрант или его сольваты (например, гидраты) или соли накапливаются в одной или нескольких клетках в целевой опухоли.

[0065] Согласно некоторым вариантам осуществления способов, раскрываемых в настоящем документе, элацестрант или его сольваты (например, гидраты) или соли предпочтительно накапливаются в опухоли при отношении Т/Р (концентрация элацестранта в опухоль/концентрация элацестранта в плазме) приблизительно 15 или выше, приблизительно 18 или выше, приблизительно 19 или выше, приблизительно 20 или выше, приблизительно 25 или выше, приблизительно 28 или выше, приблизительно 30 или выше, приблизительно 33 или выше, приблизительно 35 или выше, или приблизительно 40 или выше.

Дозировка

[0066] Терапевтически эффективное количество комбинации элацестранта или его сольватов (например, гидратов) или солей для применения в способах, раскрываемых в настоящем документе, представляет собой количество, которое при введении за определенный промежуток времени приводит к достижению одного или нескольких терапевтических показателей (например, замедление или устранение роста опухоли, что приводит к регрессии опухоли, прекращению симптомов и т.д.). Комбинация для применения в раскрываемых в настоящем документе способах может быть введена субъекту один раз или несколько раз. Согласно таким вариантам осуществления, при которых соединения вводят несколько раз, их можно вводить с интервалами, например, один раз в сутки, через сутки, один раз в неделю или один раз в месяц. В качестве альтернативы, их можно вводить с нерегулярными интервалами, например, по мере необходимости на основании симптомов, состояния здоровья больного и т.п. Терапевтически эффективное количество комбинации может быть введено один раз в сутки на протяжении одних суток, по меньшей мере 2 суток, по меньшей мере 3 суток, по меньшей мере 4 суток, по меньшей мере 5 суток, по меньшей мере 6 суток, по меньшей мере 7 суток, по меньшей мере 10 суток или по меньшей мере 15 суток. Необязательно, состояние рака или регрессию опухоли контролируют в ходе или после лечения, например, с помощью FES-PET сканирования субъекта. Дозировка комбинации, вводимой субъекту, может быть повышена или снижена в зависимости от состояния рака или выявляемой регрессии опухоли.

[0067] В идеале, терапевтически эффективное количество не превышает максимальной переносимой дозировки, при которой 50% или больше получающих лечение субъектов, испытывают тошноту или другие токсические реакции, которые препятствуют дальнейшим введениям лекарственного средства. Терапевтически эффективное количество может варьировать для субъекта в зависимости от ряда факторов, в том числе от изменчивости и степени выраженности симптомов, пола, возраста, массы тела или общего состояния здоровья субъекта, способа введения и типа соли или сольвата, изменчивости в чувствительности к лекарственному средству, конкретного типа заболевания и т.п.

[0068] Примеры терапевтически эффективных количеств элацестранта или его сольватов (например, гидратов) или солей для применения в способах, раскрываемых в настоящем документе, включают в себя без ограничения дозировку от приблизительно 150 до приблизительно 1500 мг, от приблизительно 200 до приблизительно 1500 мг, от приблизительно 250 до приблизительно 1500 мг или от приблизительно 300 до приблизительно 1500 мг один раз в сутки для субъектов, имеющих устойчивые вызванные ER опухоли или раковые заболевания; дозировку от приблизительно 150 до приблизительно 1500 мг, от приблизительно 200 до приблизительно 1000 мг, или от приблизительно 250 до приблизительно 1000 мг, или от приблизительно 300 до приблизительно 1000 мг один раз в сутки для субъектов, имеющих как вызванные ER опухоли и/или раковые заболевания дикого типа, так и устойчивые опухоли и/или раковые заболевания; и дозировку от приблизительно 300 до приблизительно 500 мг, от приблизительно 300 до приблизительно 550 мг, от приблизительно 300 до приблизительно 600 мг, от приблизительно 250 до приблизительно 500 мг, от приблизительно 250 до приблизительно 550 мг, от приблизительно 250 до приблизительно 600 мг, от приблизительно 200 до приблизительно 500 мг, от приблизительно 200 до приблизительно 550 мг, от приблизительно 200 до приблизительно 600 мг, от приблизительно 150 до приблизительно 500 мг, от приблизительно 150 до приблизительно 550 мг или от приблизительно 150 до приблизительно 600 мг один раз в сутки для субъектов, имеющих в основном вызванные ER опухоли и/или раковые заболевания дикого типа. Согласно некоторым вариантам осуществления дозировка соединения формулы I (например, элацестранта) или его соли или сольвата для применения в раскрываемых в настоящем документе способах, общих для взрослого субъекта, может составлять приблизительно 200 мг, 400 мг, от 30 мг до 2000 мг, от 100 мг до 1500 мг или от 150 мг до 1500 мг перорально один раз в сутки. Такая дозировка один раз в сутки может быть достигнута посредством однократного введения или нескольких введений.

[0069] Введение дозы элацестранта при лечении рака молочной железы, в том числе устойчивых штаммов, а также случаев с экспрессией мутантного(ых) рецептора(ов), варьирует от 100 мг до 1000 мг в сутки. Например, доза элацестранта может составлять 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900 или 1000 мг в сутки. В частности, отмечены 200 мг, 400 мг, 500 мг, 600 мг, 800 мг и 1000 мг в сутки. Необычайно длительный период полужизни элацестранта у людей после перорального введения делает этот вариант особенно целесообразным. Соответственно, лекарственное средство может быть введено как 200 мг два раза в сутки (общая суточная доза 400 мг), 250 мг два раза в сутки (общая суточная доза 500 мг), 300 мг два раза в сутки (общая суточная доза 600 мг), 400 мг два раза в сутки (общая суточная доза 800 мг) или 500 мг два раза в сутки (общая суточная доза 1000 мг). Согласно некоторым вариантам осуществления введение дозы является пероральным.

[0070] Согласно некоторым вариантам осуществления способов, раскрываемых в настоящем документе, элацестрант или его сольват (например, гидрат) или соль предпочтительно накапливается в опухоли при отношении Т/Р (концентрация элацестранта в опухоли/концентрация элацестранта в плазме) приблизительно 15 или выше, приблизительно 18 или выше, приблизительно 19 или выше, приблизительно 20 или выше, приблизительно 25 или выше, приблизительно 28 или выше, приблизительно 30 или выше, приблизительно 33 или выше, приблизительно 35 или выше, или приблизительно 40 или выше.

[0071] Элацестрант или его сольваты (например, гидраты) или соли можно вводить субъекту один раз или несколько раз. Согласно таким вариантам осуществления, если соединения вводят несколько раз, то они могут быть введены с интервалами, например, один раз в сутки, через сутки, один раз в неделю или один раз в месяц. В качестве альтернативы, они могут быть введены с нерегулярными интервалами, например, по мере необходимости на основании симптомов, состояния здоровья больного и т.п.

Состав

[0072] Согласно некоторым вариантам осуществления элацестрант или его сольваты (например, гидраты) или соли вводят как часть одного состава. Например, элацестрант или его сольваты (например, гидраты) или соли составляют в одну пилюлю для перорального введение или в однократную дозу для инъекции. Согласно некоторым вариантам осуществления введение соединений в одном составе улучшает соблюдение больным режима и схемы лечения.

[0073] Согласно некоторым вариантам осуществления состав, содержащий элацестрант или его сольваты (например, гидраты) или соли, может дополнительно содержать одно или несколько фармацевтических вспомогательных средств, носителей, адъювантов и/или консервантов.

[0074] Элацестрант или его сольваты (например, гидраты) или соли для применения в раскрываемых в настоящем документе способах могут быть составлены в единичные дозированные формы, что означают физически дискретные единицы, подходящие в качестве единичной дозировки для субъектов, проходящих лечение, при этом каждая единица содержит заранее определенное количество активного материала, рассчитанное на достижение желаемого терапевтического эффекта, необязательно в сочетании с подходящим фармацевтическим носителем. Единичная дозированная форма может быть предназначена для однократной суточной дозы или одной из нескольких суточных доз (например, от приблизительно 1 до 4 или более раз в сутки). При использовании нескольких суточных доз единичная дозированная форма может быть одинаковой или разной для каждой дозы. Согласно некоторым вариантам осуществления соединения могут быть составлены для контролируемого высвобождения.

[0075] Элацестрант или его сольваты (например, гидраты) или соли, а также соли или сольваты для применения в раскрываемых в настоящем документе способах могут быть составлены согласно любому доступному традиционному способу. Примеры предпочтительных дозированных форм включают в себя таблетку, порошок, мелкую гранулу, гранулу, покрытую таблетку, капсулу, сироп, пастилку, ингаляционную форму, суппозиторий, инъекционную форму, мазь, глазную мазь, глазные капли, назальные капли, ушные капли, катаплазму, лосьон и т.п. В составе могут быть использованы обычно используемые добавки, такие как разбавитель, связующее, разрыхлитель, смазочное средство, краситель, ароматизатор и при необходимости стабилизатор, эмульгатор, усилитель абсорбции, поверхностно-активное средство, регулятор рН, антисептическое средство, антиоксидант и т.п. Кроме того, составление также осуществляют путем объединения композиций, которые обычно используют в качестве сырьевого материала для фармацевтического состава, согласно традиционным способам. Примеры таких композиций включают в себя, например, (1) масло, такое как соевое масло, говяжий жир и синтетический глицерид; (2) углеводород, такой как жидкий парафин, сквалан и твердый парафин; (3) сложноэфирное масло, такое как октилдодецилмиристиновая кислота и изопропилмиристиновая кислота; (4) высший спирт, такой как цетостеариловый спирт и бегениловый спирт; (5) силиконовую смолу; (6) силиконовое масло; (7) поверхностно-активное средство, такое как сложный эфир полиоксиэтиленовой жирной кислоты, сложный эфир сорбитана и жирной кислоты, сложный эфир глицерина и жирной кислоты, сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана и жирной кислоты, твердое полиоксиэтиленовое касторовое масло и блок-сополимер полиоксиэтилена и полиоксипропилена; (8) водорастворимые макромолекулы, такие как гидроксиэтилцеллюлоза, полиакриловая кислота, карбоксивиниловый полимер, полиэтиленгликоль, поливинилпирролидон и метилцеллюлоза; (9) низший спирт, такой как этанол и изопропанол; (10) мультивалентный спирт, такой как глицерин, пропиленгликоль, дипропиленгликоль и сорбит; (11) сахар, такой как глюкоза и тростниковый сахар; (12) неорганический порошок, такой как безводная кремниевая кислота, алюмосиликат магния и силикат алюминия; и (13) очищенную воду и т.п. Добавки для применения в вышеуказанных составах могут включать в себя, например, 1) лактозу, кукурузный крахмал, сахарозу, глюкозу, маннит, сорбит, кристаллическую целлюлозу и диоксид кремния в качестве разбавителя; 2) поливиниловый спирт, поливиниловый эфир, метил целлюлозу, этилцеллюлозу, аравийскую камедь, трагакант, желатин, шеллак, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, поливинилпирролидон, блок-сополимер полипропиленгликоля и полиоксиэтилена, меглумин, цитрат кальция, декстрин и т.п. в качестве связующего; 3) крахмал, агар, желатиновый порошок, кристаллическую целлюлозу, карбонат кальция, бикарбонат натрия, цитрат кальция, декстрин, пектиновую кислоту, карбоксиметилцеллюлозу/кальций и т.п. в качестве разрыхлителя; 4) стеарат магния, тальк, полиэтиленгликоль, оксид кремния, конденсированное растительное масло и т.п. в качестве смазочного средства; 5) любые красители, при этом в качестве красителя подходят те, добавление которых является фармацевтически приемлемым; 6) какао-порошок, ментол, ароматизатор, масло мяты перечной, порошок корицы в качестве ароматизатора; и 7) антиоксиданты, добавление которых приемлемо с фармацевтической точки зрения, такие как аскорбиновая кислота или альфа-токоферол.

[0076] Элацестрант или его сольваты (например, гидраты) или соли для применения в раскрываемых в настоящем документе способах могут быть составлены в фармацевтическую композицию в виде одного или нескольких активных соединений, описываемых в настоящем документе, и физиологически приемлемого носителя (также называемого фармацевтически приемлемым носителем, или раствором, или разбавителем). Такие носители и растворы включают в себя фармацевтически приемлемые соли и сольваты соединений, используемых в способах в соответствии с настоящим изобретением, и смеси, содержащие два или более из таких соединений, фармацевтически приемлемых солей соединений и фармацевтически приемлемых сольватов соединений. Такие композиции получают согласно приемлемым фармацевтическим процедурам, таким как описанные в работе Remington's Pharmaceutical Sciences, 17^th edition, ed. Alfonso R. Gennaro, Mack Publishing Company, Eaton, Pa. (1985), которая включена в настоящий документ посредством ссылки.

[0077] Термин «фармацевтически приемлемый носитель» относится к носителю, который не вызывает аллергической реакции или другого нежелательного эффекта у больных, которым его вводят, и является совместимым с другими ингредиентами в составе. Фармацевтически приемлемые носители включают в себя, например, фармацевтические разбавители, вспомогательные средства или носители, соответствующим образом выбранные с учетом предполагаемой формы введения и согласующиеся с общепринятой фармацевтической практикой. Например, твердые носители/разбавители включают в себя без ограничения камедь, крахмал (например, кукурузный крахмал, прежелатинизированный крахмал), сахар (например, лактозу, маннит, сахарозу, декстрозу), целлюлозный материал (например, микрокристаллическую целлюлозу), акрилат (например, полиметилакрилат), карбонат кальция, оксид магния, тальк или их смеси. Фармацевтически приемлемые носители, кроме того, могут включать в себя незначительные количества вспомогательных веществ, таких как увлажняющие или эмульгирующие средства, консерванты или буферы, которые повышают срок хранения или эффективность терапевтического средства.

[0078] Элацестрант или его сольваты (например, гидраты) или соли в свободной форме можно превратить в соль традиционными способами. Используемый в настоящем документе термин «соль» не является ограниченным, если соль образована с элацестрантом или его сольватами (например, гидратами) или солями и является фармакологически приемлемой; предпочтительные примеры солей включают в себя гидрогалогенидную соль (например, хлористоводородную, бромистоводородную, йодистоводородную и т.п.), соль неорганической кислоты (например, сульфат, нитрат, перхлорат, фосфат, карбонат, бикарбонат и т.п.), органическую карбоксилатную соль (например, ацетатную соль, малеатную соль, тартратную соль, фумаратную соль, цитратную соль и т.п.), органическую сульфонатную соль (например, метансульфонатную соль, этансульфонатную соль, бензол сульфонатную соль, толуол сульфонатную соль, камфорсульфонатную соль и т.п.), соль аминокислоты (например, аспартатную соль, глутаматную соль и т.п.), соль четвертичного аммония, соль щелочного металла (например, соль натрия, соль калия и т.п.), соль щелочноземельного металла (соль магния, соль кальция и т.п.) и т.п. Кроме того, хлористоводородная соль, сульфатная соль, метансульфонатная соль, ацетатная соль и т.п.предпочтительны в качестве «фармакологически приемлемой соли» соединений в соответствии с настоящим изобретением.

[0079] Изомеры элацестранта или его сольватов (например, гидратов) или солей (например, геометрические изомеры, оптические изомеры, ротамеры, таутомеры и т.п.) могут быть очищены с использованием общих средств разделения, включая, например, перекристаллизацию, оптическое разделение, такое как способ диастереомерных солей, способ ферментативного фракционирования, различные хроматографии (например, тонкослойная хроматография, колоночная хроматография, хроматография со стеклянной колонкой и т.п.), до одного изомера. Термин «один изомер» в настоящем документе включает в себя не только изомер, имеющий чистоту 100%, но также изомер, включающий в себя изомер, отличный от целевого, который имеется даже при традиционной операции очистки. Кристаллический полиморф иногда существует для элацестранта или его сольватов (например, гидратов) или солей и/или фулвестранта, и все их кристаллические полиморфы включены в настоящее изобретение. Кристаллический полиморф иногда является отдельным, а иногда смесью, и то, и другое включены в настоящий документ.

[0080] Согласно некоторым вариантам осуществления элацестрант или его сольваты (например, гидраты) или соли могут иметь форму пролекарства, что означает, что они должны претерпевать некоторое изменение (например, окисление или гидролиз) для достижения своей активной формы. В качестве альтернативы, элацестрант или его сольваты (например, гидраты) или соли могут представлять собой соединение, полученное путем преобразования исходного пролекарства в его активную форму.

Путь введения

[0081] Пути введения элацестранта или его сольватов (например, гидратов) или солей включают в себя без ограничения местное введение, пероральное введение, внутрикожное введение, внутримышечное введение, внутрибрюшинное введение, внутривенное введение, интравезикальную инфузию, подкожное введение, чрескожные введение и трансмукозальное введение. Согласно некоторым вариантам осуществления путь введения является пероральным.

Профилирование генов

[0082] Согласно некоторым вариантам осуществления способы ингибирования роста опухоли или регрессии опухоли, представленные в настоящем документе, дополнительно предусматривают профилирование генов субъекта, при этом ген, подлежащий профилированию, представляет собой один или несколько генов, выбранных из группы, состоящей из ABL1, АКТ1, АКТ2, ALK, АРС, AR, ARID1A, ASXL1, ATM, AURKA, ВАР, ВАР1, BCL2L11, BCR, BRAF, BRCA1, BRCA2, CCND1, CCND2, CCND3, CCNE1, CDH1, CDK4, CDK6, CDK8, CDKN1A, CDKN1B, CDKN2A, CDKN2B, СЕВРА, CTNNB1, DDR2, DNMT3A, E2F3, EGFR, EML4, ЕРНВ2, ERBB2, ERBB3, ESR1, EWSR1, FBXW7, FGF4, FGFR1, FGFR2, FGFR3, FLT3, FRS2, HIF1A, HRAS, IDH1, IDH2, IGF1R, JAK2, KDM6A, KDR, KIF5B, KIT, KRAS, LRP1B, MAP2K1, MAP2K4, MCL1, MDM2, MDM4, MET, MGMT, MLL, MPL, MSH6, MTOR, MYC, NF1, NF2, NKX2-1, NOTCH1, NPM, NRAS, PDGFRA, PIK3CA, PIK3R1, PML, PTEN, PTPRD, RARA, RBI, RET, RICTOR, ROS1, RPTOR, RUNX1, SMAD4, SMARCA4, SOX2, STK11, TET2, TP53, TSC1, TSC2 и VHL. Согласно другим вариантам осуществления ген, подлежащий профилированию, представляет собой один или несколько генов, выбранных из группы, состоящей из AKT1, AKT2, BRAF, CDK4, CDK6, PIK3CA, PIK3R1 и MTOR.

[0083] Согласно некоторым вариантам осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения субпопуляции больных раком молочной железы, при этом указанная субпопуляция характеризуется повышенной экспрессией одного или нескольких генов, раскрываемых выше, и лечения указанной субпопуляции с помощью эффективной дозы элацестранта или его сольватов (например, гидратов) или солей согласно вариантам осуществления введения дозы, описываемым в настоящем раскрытии.

Корректировка дозы

[0084] Помимо установления способности элацестранта ингибировать рост опухоли, элацестрант ингибирует связывание эстрадиола с ER в матке и гипофизе. В этих экспериментах связывание эстрадиола с ER в ткани матки и гипофиза оценивали с помощью визуализации FES-PET. После лечения элацестрантом наблюдаемый уровень связывания ER был на уровне исходного значения или ниже. Эти результаты показывают, что антагонистический эффект элацестранта в отношении активности ER можно оценивать с помощью сканирования в режиме реального времени. На основании этих результатов в настоящем документе представлены способы мониторинга эффективности лечения элацестрантом или его сольватами (например, гидратами) или солями в комбинированной терапии, раскрываемой в настоящем документе, путем измерения связывания эстрадиола с ER в одной или нескольких целевых тканях, при этом уменьшение или исчезновение связывания указывает на эффективность.

[0085] Кроме того, представлены способы корректировки дозировки элацестранта или его сольватов (например, гидратов) или солей в комбинированной терапии, раскрываемой в настоящем документе, на основании связывания эстрадиола с ER. Согласно некоторым вариантам осуществления этих способов связывание измеряют в некоторой точке после одного или нескольких введений первой дозировки соединения. Если связывание эстрадиола с ER не нарушено, или наблюдается снижение ниже заданного порога (например, снижение связывания по сравнению с исходным уровнем менее чем 5%, менее чем 10%, менее чем 20%, менее чем 30% или менее чем 50%), то первая дозировка считается слишком низкой. Согласно некоторым вариантам осуществления эти способы предусматривают дополнительную стадию введения увеличенной второй дозировки соединения. Эти стадии можно повторять, многократно увеличивая дозировку до тех пор, пока не будет достигнуто желаемое снижение связывания эстрадиола с ER. Согласно некоторым вариантам осуществления эти стадии могут быть включены в способы ингибирования роста опухоли, представленные в настоящем документе. В этих способах связывание эстрадиола с ER может служить индикатором ингибирования роста опухоли или дополнительным средством оценки ингибирования роста. Согласно другим вариантам осуществления эти способы можно использовать в сочетании с введением элацестранта или его сольватов (например, гидратов) или солей для целей, отличных от ингибирования роста опухоли, включая, например, ингибирование пролиферации раковых клеток.

[0086] Согласно некоторым вариантам осуществления способы, представленные в настоящем документе, для корректировки дозировки элацестранта или его соли или сольвата (например, гидрата) в комбинированной терапии предусматривают

(1) введение первой дозировки элацестранта или его соли или сольвата (например, гидрата) (например, от приблизительно 350 до приблизительно 500 или от приблизительно 200 до приблизительно 600 мг/сутки) в течение 3, 4, 5, 6 или 7 суток;

(2) выявление активности связывания эстрадиола с ER; при этом

(i) если активность связывания ER не выявляется или ниже предварительно определенного порогового уровня, продолжают вводить первую дозировку (т.е. поддерживают уровень дозировки); или

(ii) если активность связывания ER выявляется или выше предварительно определенного порогового уровня, вводят вторую дозировку, которая больше первой дозировки (например, первая дозировка плюс от приблизительно 50 до приблизительно 200 мг) в течение 3, 4, 5, 6 или 7 суток, затем переходят к стадии (3);

(3) выявление активности связывания эстрадиола с ER; при этом

(i) если активность связывания ER не выявляется или ниже предварительно определенного порогового уровня, продолжают вводить вторую дозировку (т.е. поддерживают уровень дозировки); или

(ii) если активность связывания ER выявляется или выше предварительно определенного порогового уровня, вводят третью дозировку, которая больше второй дозировки (например, вторая дозировка плюс от приблизительно 50 до приблизительно 200 мг) в течение 3, 4, 5, 6 или 7 суток, затем переходят к стадии (4);

(4) повторение описанных выше стадий для четвертой дозировки, пятой дозировки ит.д., до тех пор, пока не будет выявлено отсутствие активности связывания ER.

[0087] Согласно некоторым вариантам осуществления настоящее изобретение относится к применению визуализации PET для выявления и/или лечения чувствительных к ER или устойчивых к ER раковых заболевания.

[0088] Следующие примеры представлены для лучшей иллюстрации заявляемого изобретения и не должны интерпретироваться как ограничение объема настоящего изобретения. В той степени, в которой упоминаются конкретные материалы, они являются исключительно иллюстративными и не предназначены для ограничения настоящего изобретения. Специалист в данной области сможет разработать эквивалентные средства или реагенты, без излишней изобретательской деятельности и не выходя за рамки настоящего изобретения. Следует учитывать, что в описанные в настоящем документе процедуры можно внести множество изменений, не выходя при этом за пределы объема настоящего изобретения. Авторы настоящего изобретения предусматривают включение таких вариантов в объем настоящего изобретения.

ПРИМЕРЫ

Материалы и способы

Тестируемые соединения

[0089] Элацестрант, используемый в приведенных ниже примерах, представлял собой (6R)-6-(2-(N-(4-(2-(этиламино)этил)бензил)-N-этиламино)-4-метоксифенил)-5,6,7,8-тетрагидронафтален-2-ола дигидрохлорид, изготовленный, например, компанией IRIX Pharmaceuticals, Inc. (Florence, SC). Элацестрант хранили в виде сухого порошка, составленного для применения в виде гомогенной суспензии в 0,5% (мас./об.) метилцеллюлозы в деионизированной воде, и для животных моделей вводили перорально. Тамоксифен, ралоксифен и эстрадиол (Е2) получали из компании Sigma-Aldrich (St. Louis, МО) и вводили путем подкожной инъекции. Фулвестрант получали из компании Tocris Biosciences (Minneapolis, MN) и вводили путем подкожной инъекции. Другие лабораторные реагенты приобретали у компании Sigma-Aldrich, если не отмечено иное.

Модели PDX

[0090] Опухоли пересаживали в виде фрагментов бестимусным голым мышам (Nu (NCR)-Foxnlnu). Полученные от больных фрагменты ксенотрансплантата CTG-1211 (Champions Oncology), ST2535 (START) и WHIM43 (Horizon) имплантировали мышам без добавления эстрадиола. Всех мышей содержали в свободном от патогенов помещении, в индивидуально вентилируемых клетках со стерилизованной и беспыльной подстилкой из початков, с доступом к стерилизованному корму и воде ad libitum, в условиях цикла света и темноты (12-14-часового циркадного цикла искусственного освещения) и при контролируемой комнатной температуре и влажности. Опухоли измеряли два раза в неделю штангенциркулем Вернье, объемы рассчитывали с использованием формулы (L*W2)*0,52. Элацестрант вводили перорально один раз в сутки на протяжении всего исследования. Фулвестрант вводили подкожно один раз в неделю.

Количественная PCR в режиме реального времени (RT-qPCR)

In vivo модели ксенотрансплантата

[0091] В конце исследования опухоли измельчали с помощью импактора CryoPREP™ (Covaris) и общую РНК экстрагировали с помощью мини-набора RNeasy (Qiagen). qPCR выполняли с использованием Taqman Fast Virus 1-Step Master Mix и зондов TaqMan™ (Applied Biosystems). Значения Ct анализировали для оценки относительных изменений экспрессии мРНК PgR (рецептора прогестерона) с GAPDH в качестве внутреннего контроля с использованием способа 2-ДДСТ.

In vitro модели ксенотрансплантата

[0092] В конце обработки клетки лизировали лизисным буфером из набора 1-Step Cells-to-Ct и лизаты обрабатывали в соответствии с инструкциями производителя. qPCR выполняли с использованием 1-Step Master Mix и зондов TaqMan™ (Applied Biosystems). Значения Ct анализировали для оценки относительных изменений экспрессии мРНК PgR (рецептора прогестерона) с GAPDH в качестве внутреннего контроля с использованием способа 2-ДДСТ.

Эффективность средства

[0093] Для всех исследований, начиная с суток 0, размеры опухоли измеряли с помощью цифрового штангенциркуля и данные, в том числе индивидуальные и средние оцениваемые объемы опухоли (среднее TV±SEM), регистрировали для каждой группы; объем опухоли рассчитывали с использованием формулы (Yasui et al. Invasion Metastasis 17: 259-269 (1997), которая включена в настоящий документ посредством ссылки): TV=ширина² × длина × 0,52. Каждые группу или исследование заканчивали, когда оцениваемый средний объем опухоли в группе достигал конечной точки объема опухоли (TV) (конечная точка времени составляла 60 дней, конечной точкой объема было среднее значение группы 2 см³), при этом отдельных мышей, достигавших объема опухоли 2 см³ или больше, исключали из исследования, и последнее измерение включали в среднее значение группы до тех пор, пока среднее значение не достигало конечной точки объема, или пока исследование не достигло конечной точки времени.

Вычисления эффективности и статистический анализ

[0094] Значения % ингибирования роста опухоли (% TGI) рассчитывали в единственной точке времени (когда контрольная группа достигала объема опухоли или конечной точки времени) и регистрировали для каждой группы лечения (Т) по сравнению с контролем (С) с использованием начального (i) и окончательного (f) измерений опухоли по формуле (Corbett ТН et al. In vivo methods for screening and preclinical testing, hi: Teicher B, ed., Anticancer Drug Development Guide. Totowa, NJ: Humana. 2004: 99-123) % TGI=1 - Tf- Ti/Cf- Ci.

Статистический анализ

[0095] Статистический анализ выполняли с использованием GraphPadPrism 7.0 и данные обычно выражали в виде среднего значения ± SEM/SD. Сравнения групп лечения выполняли с использованием однофакторного анализа ANOVA, статистические анализы выполняли с апостериорным критерием Даннетта. Статистические показатели выражали следующим образом: н.з. - не значимое; * р<0,05; ** р<0,01; *** р<0,001; **** р<0,0001.

Сбор образцов

[0096] В конечной точке опухоли удаляли. Один фрагмент мгновенно замораживали, в то время как другой фрагмент помещали в 10% NBF по меньшей мере на 24 часа, фиксировали формалином и заливали парафином (FFPE). Мгновенно замороженные образцы хранили при -80°С; FFPE блоки хранили при комнатной температуре.

Вестерн-блоттинг

[0097] Клетки или опухоли собирали после введения дозы и анализировали экспрессию белка с использованием стандартных методик и следующих антител: ERa, PR (Cell Signaling Technologies, № по каталогу 13258, №3153) и винкулин: Sigma-Aldrich, №v9131). Экспрессию белка количественно оценивали с использованием программного обеспечения AzureSpot и нормализовали по экспрессии винкулина.

Примеры

[0098] На фиг. 1 видно, что элацестрант ингибирует пролиферацию и передачу сигнала ER в in vitro моделях, содержащих различные мутации ESR1, в том числе в линиях раковых клеток клона 1 Y537S, клона 2 Y537S, клона 1 D538G, клона 2 D538G и клона 1 S463P. Иллюстративные изображения, представленные в верхнем ряду, визуализируют опухолевые клетки, обработанные контролем в виде среды-носителя, для линий мутированных раковых клеток клона 1 Y537S, клона 2 Y537S, клона 1 D538G, клона 2 D538G и клона 1 S463P. На изображениях, представленных в нижнем ряду, визуализируются опухолевые клетки клона 1 Y537S, клона 2 Y537S, клона 1 D538G, клона 2 D538G и клона 1 S463P, обработанные элацестрантом при 100 нМ.

[0099] На фиг. 2 видно, что элацестрант продемонстрировал зависимое от дозы ингибирование роста опухоли и регрессию опухоли на моделях ксенотрансплантата бестимусных голых мышей. На фиг. 2 показано среднее +/- SEM объемов опухоли с течением времени на мышиных моделях ксенотрансплантата, которые обрабатывали контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30, 60 и 120 мг/кг) и фулвестрантом (1 мг/доза).

[00100] На фиг. 3А-3С видно, что элацестрант ингибирует передачу сигнала ER in vitro в моделях, содержащих различные мутации ESR1, при этом на иллюстративных гистограммах показано снижение маркеров пролиферации в моделях ксенотрансплантатов in vitro. На фиг. 3А представлена кратность изменения относительно контроля рецептора прогестерона (PgR) для моделей опухолевых клеток, имеющих мутации дикого типа, S463P, D538G и Y537S, обрабатываемых контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (10, 100 и 1000 нМ), Е2 (10 пМ) и фулвестрантом (10, 100 1000 нМ). На фиг. 3В представлена кратность изменения относительно контроля роста, регулируемого эстрогеном (GREB1), на моделях опухолевых клеток, имеющих мутации дикого типа, S463P, D538G и Y537S, обработанных контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (10, 100 и 1000 нМ), Е2 (10 пМ) и фулвестрантом (10, 100 1000 нМ). На фиг. 3С представлена кратность изменения относительно контроля фактора «трилистника» 1 (TFF1) на моделях опухолевых клеток, имеющих мутации дикого типа, S463P, D538G и Y537S, обработанных контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (10, 100 и 1000 нМ), Е2 (10 пМ) и фулвестрантом (10, 100 1000 нМ).

[00101] На фиг. 4А-4С видно, что элацестрант продемонстрировал зависимое от дозы ингибирование роста опухоли на множестве моделей PDX, имеющих мутацию ESR1:D538G. На фиг. 4А показано среднее +/- SEM объемов опухоли с течением времени у бестимусных голых мышей, которым имплантировали ксенотрансплантат PDX ST2535-HI (с предварительной обработкой тамоксифеном, ингибитором ароматазы и фулвестрантом) с мутацией ESR1:D538G, которых обрабатывали контролем в виде среды-носителя и элацестрантом (30 и 60 мг/кг). На фиг. 4 В показано среднее +/- SEM объемов опухоли с течением времени у бестимусных голых мышей, которым имплантировали ксенотрансплантат PDX CTG-1211-HI (с предварительной обработкой тамоксифеном, ингибитором ароматазы и фулвестрантом) с мутацией ESR1:D538G, которых обрабатывали контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза). На фиг. 4С показано среднее +/- SEM объемов опухоли с течением времени у бестимусных голых мышей, которым имплантировали ксенотрансплантат PDX WHIM43-HI (с предварительной обработкой тамоксифеном, ингибитором ароматазы и фулвестрантом) с мутацией ESR1:D538G, которых обрабатывали контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза).

[00102] На фиг. 5A-5F показано, что элацестрант разрушает ER и ингибирует передачу сигнала ER на моделях PDX, имеющих мутации ESR1:D538G, на моделях ксенотрансплантата у бестимусных голых мышей. На фиг. 5А показана кратность изменения относительно контроля в виде среды-носителя содержания мРНК рецептора прогестерона (PgR) на модели ксенотрансплантата PDX ST2535-HI (с предварительной обработкой тамоксифеном, ингибитором ароматазы и фулвестрантом) с мутацией ESR1:D538G, которую обрабатывали контролем в виде среды-носителя и элацестрантом (30 и 60 мг/кг). На фиг. 5В проиллюстрирован вестерн-блоттинг, демонстрирующий экспрессию PgR на модели ксенотрансплантата PDX ST2535-HI с мутацией ESR1:D538G, которую обрабатывали контролем в виде среды-носителя и элацестрантом (30 и 60 мг/кг). На фиг. 5С показана кратность изменения относительно контроля в виде среды-носителя содержания мРНК рецептора прогестерона (PgR) на модели ксенотрансплантата PDX CTG-1211-HI (с предварительной обработкой тамоксифеном, ингибитором ароматазы и фулвестрантом) с мутацией ESR1:D538G, которую обрабатывали контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза). На фиг. 5D проиллюстрирован вестерн-блоттинг, демонстрирующий экспрессию PgR на модели ксенотрансплантата PDX CTG-1211-HI с мутацией ESR1:D538G, обработанной контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом. На фиг. 5Е показана кратность изменения относительно контроля в виде среды-носителя содержания мРНК рецептора прогестерона (PgR) на модели ксенотрансплантата PDX WHIM43-HI (с предварительной обработкой тамоксифеном, ингибитором ароматазы и фулвестрантом) с мутацией ESR1:D538G, которую обрабатывали контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза). На фиг. 5F проиллюстрирован вестерн-блоттинг, демонстрирующий экспрессию PgR на модели ксенотрансплантата PDX WHIM43-HI с мутацией ESR1:D538G, которую обрабатывали контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом.

[00103] На фиг. 6А-6 В показано, что элацестрант демонстрирует большее ингибирование роста опухоли, чем препараты сравнения SERD на моделях PDX ST941-HI, имеющих мутации ESR1:Y537S. На фиг. 6А показано среднее +/- SEM объемов опухоли с течением времени на модели PDX ST941-HI, содержащей мутацию ESR1:Y537S, которую обрабатывали контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза, подкожно, один раз в сутки), дозой 1 serdl, и дозой 2 serdl. На фиг. 6 В показано среднее +/- SEM объемов опухоли с течением времени на модели PDX ST941-HI, содержащей мутацию ESR1:Y537S, которую обрабатывали контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза), дозой 1 serd2 и дозой 2 serd2.

[00104] На фиг. 7А-7С показано, что элацестрант демонстрирует большее ингибирование роста опухоли, чем препараты сравнения SERD на моделях PDX ST941-HI, имеющих мутации ESR1:Y537S. На фиг. 7А показана кратность изменения относительно контроля в виде среды-носителя по сравнению с содержаниями мРНК рецептора прогестерона (PgR) на модели PDX ST941-HI, содержащей мутацию ESR1:Y537S, которую обрабатывали контролем в виде среды-носителя, фулвестрантом (3 мг/доза), элацестрантом (30 мг/кг), дозой 1 serdl, дозой 2 serd1, дозой 1 serd2 и дозой 2 serd2. На фиг. 7В представлен вестерн-блоттинг для модели PDX ST941-HI, содержащей мутацию ESR1:Y537S, демонстрирующей экспрессию PgR, которую обрабатывали контролем в виде среды-носителя, фулвестрантом (3 мг/кг), элацестрантом (30 мг/кг), дозой 1 serd1 и дозой 2 serdl. На фиг. 7С представлен вестерн-блоттинг для модели PDX ST941-HI, содержащей мутацию ESR1:Y537S, демонстрирующей экспрессию PgR, которую обрабатывали контролем в виде среды-носителя, фулвестрантом (3 мг/кг), элацестрантом (30 мг/кг), дозой 1 serd2 и дозой 2 serd2.

[00105] На фиг. 8А-8В представлено оценивание элацестранта и фулвестранта и их соответствующих активностей in vitro. На фиг. 8А представлена in vitro жизнеспособность клеток (% контроля) относительно log[концентрация (мкМ)] для клеточной линии PDX ST941-HI. На фиг. 8В показана кратность изменения относительно контроля в виде среды-носителя содержания мРНК рецептора прогестерона (PgR), нанесенного на график по отношению к концентрации элацестранта (0, 10, 100 и 1000 нМ) и фулвестранта (0, 10, 100 и 1000 нМ), используемых при обработке in vitro клеточной линии ST941-HI, полученной из PDX.

[00106] На фиг. 9А-9В представлено оценивание элацестранта и фулвестранта и их соответствующих активностей in vitro. На фиг. 9А показано среднее +/- SEM объемов опухоли у мышей, которым имплантировали PDX ST941-HI, содержащий мутацию ESR1:Y537S, нанесенное на график по отношению ко времени и обработке их контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (10, 30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза). На фиг. 9В показана кратность изменения относительно контроля экспрессии мРНК рецептора прогестерона (PgR) на модели PDX ST941-HI, нанесенная на график по отношению к обработке их контролем в виде среды-носителя, фулвестрантом (3 мг/доза) и элацестрантом (10, 30 и 60 мг/кг).

[00107] На фиг. 10A-10D показано, что элацестрант и фулвестрант демонстрируют частичную эффективность на модели мутантного PDX ESR1, имеющей дополнительные онкогенные мутации. На фиг. 10А показано среднее +/- SEM объемов опухоли с течением времени у мышей, которым имплантировали ксенотрансплантат PDX WHIM20 с мутацией ESRl:Y537S^hom, с обработкой контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза). На фиг. 10 В представлена кратность изменения относительно контроля в виде среды-носителя рецептора прогестерона (PgR) в ксенотрансплантате PDX WHIM20 с мутацией ESRl:Y537S^hom, обработанном контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза). На фиг. 10С представлена кратность изменения относительно контроля фактора «трилистника» 1 (TFF1) в ксенотрансплантате PDX WHIM20 с мутацией ESRl:Y537S^hom, обработанном контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза). На фиг. 10D представлена кратность изменения относительно контроля роста, регулируемого эстрогеном (GREB1) в ксенотрансплантате PDX WHIM20 с мутацией ESRl:Y537S^hom, обработанном контролем в виде среды-носителя, элацестрантом (30 и 60 мг/кг) и фулвестрантом (3 мг/доза). На фиг. 10Е представлен вестерн-блоттинг ксенотрансплантата PDX WHIM20 с мутацией ESRl:Y537S^hom, демонстрирующего экспрессию PgR и обработанного контролем в виде среды-носителя, фулвестрантом (3 мг/доза) и элацестрантом (30 и 60 мг/кг).

Другие варианты осуществления

[00108] Все публикации и патенты, упомянутые в настоящем раскрытии, включены в настоящий документ посредством ссылки в той же степени, как если бы каждая отдельная публикация или заявка на выдачу патента были специально и индивидуально указаны для включения посредством ссылки. Если значение терминов в любом из патентов или публикаций, включенных посредством ссылки, противоречит значению терминов, используемых в настоящем раскрытии, предполагается, что значение терминов в настоящем раскрытии является определяющим. Кроме того, предшествующее обсуждение раскрывает и описывает исключительно иллюстративные варианты осуществления настоящего изобретения. Специалист в данной области техники легко поймет из такого обсуждения, а также из прилагаемых графических материалов и формулы изобретения, что в них могут быть внесены различные изменения, модификации и вариации, не выходящие за рамки сути и объема настоящего изобретения, который определяется следующей формулой изобретения.

Изобретение относится к онкологии. Предложено применение элацестранта или его фармацевтически приемлемой соли в способе ингибирования и разрушения отрицательного по рецептору эпидермального фактора роста человека-2 и положительного по мутантному рецептору эстрогена альфа рака молочной железы у субъекта, причем указанный субъект предварительно обработан тамоксифеном, ингибитором ароматазы и фулвестрантом. Положительный по мутантному рецептору эстрогена альфа рак молочной железы содержит одну или несколько мутаций, выбранных из группы, состоящей из D538G, Y537X1, L536X2, P535H, V534E, S463P, V392I, E380Q и их комбинаций, при этом X₁ представляет собой S, N или C; и X₂ представляет собой R или Q. Изобретение обеспечивает лечение рака молочной железы, который является устойчивым к противоэстрогенным средствам, ингибиторам ароматазы или их комбинациям. 17 з.п. ф-лы, 10 ил., 1 пр.

1. Применение элацестранта или его фармацевтически приемлемой соли в способе ингибирования и разрушения отрицательного по рецептору эпидермального фактора роста человека-2 (Her2) и положительного по мутантному рецептору эстрогена альфа рака молочной железы у субъекта, предусматривающем введение субъекту терапевтически эффективного количества элацестранта или его фармацевтически приемлемой соли, причем указанный субъект предварительно обработан тамоксифеном, ингибитором ароматазы и фулвестрантом.

2. Применение элацестранта или его соли по п. 1, при котором HER2-отрицательный, положительный по мутантному рецептору эстрогена альфа рак молочной железы содержит одну или несколько мутаций, выбранных из группы, состоящей из D538G, Y537X₁, L536X₂, P535H, V534E, S463P, V392I, E380Q и их комбинаций, при этом X₁ представляет собой S, N или C; и X₂ представляет собой R или Q.

3. Применение элацестранта или его соли по п. 2, при котором мутация представляет собой Y537S.

4. Применение элацестранта или его соли по п. 2, при котором мутация представляет собой D538G.

5. Применение элацестранта или его соли по любому из пп. 1-4, при котором HER2- отрицательный, положительный по мутантному рецептору эстрогена альфа рак молочной железы является устойчивым к или прогрессирует по отношению к лекарственному средству, выбранному из группы, состоящей из противоэстрогенных средств, ингибиторов ароматазы и их комбинаций.

6. Применение элацестранта или его соли по любому из пп. 1-5, при котором HER2- отрицательный, положительный по мутантному рецептору эстрогена альфа рак молочной железы представляет собой запущенный или метастатический рак молочной железы.

7. Применение элацестранта или его соли по любому из пп. 1-6, при котором субъект представляет собой женщину в постменопаузе.

8. Применение элацестранта или его соли по любому из пп. 1-6, при котором субъект представляет собой женщину в пременопаузе.

9. Применение элацестранта или его соли по любому из пп. 1-6, при котором субъект представляет собой женщину в постменопаузе, заболевание которой рецидивирует или прогрессирует после предшествующего лечения селективными модуляторами рецептора эстрогена (SERM) и/или ингибиторами ароматазы (AI).

10. Применение элацестранта или его соли по любому из пп. 1-9, при котором элацестрант вводят субъекту в дозе от 200 мг/сутки до 500 мг/сутки.

11. Применение элацестранта или его соли по любому из пп. 1-10, при котором элацестрант вводят субъекту в дозе 200 мг/сутки, 300 мг/сутки, 400 мг/сутки или 500 мг/сутки.

12. Применение элацестранта или его соли по любому из пп. 1-9, при котором элацестрант вводят субъекту при дозе, которая является максимальной переносимой дозой для субъекта.

13. Применение элацестранта или его соли по любому из пп. 1-12, при этом способ дополнительно предусматривает идентификацию субъекта для лечения путем измерения повышенной экспрессии одного или нескольких генов, выбранных из ABL1, AKT1, AKT2, ALK, APC, AR, ARID1A, ASXL1, ATM, AURKA, BAP, BAP1, BCL2L11, BCR, BRAF, BRCA1, BRCA2, CCND1, CCND2, CCND3, CCNE1, CDH1, CDK4, CDK6, CDK8, CDKN1A, CDKN1B, CDKN2A, CDKN2B, CEBPA, CTNNB1, DDR2, DNMT3A, E2F3, EGFR, EML4, EPHB2, ERBB2, ERBB3, ESR1, EWSR1, FBXW7, FGF4, FGFR1, FGFR2, FGFR3, FLT3, FRS2, HIF1A, HRAS, IDH1, IDH2, IGF1R, JAK2, KDM6A, KDR, KIF5B, KIT, KRAS, LRP1B, MAP2K1, MAP2K4, MCL1, MDM2, MDM4, MET, MGMT, MLL, MPL, MSH6, MTOR, MYC, NF1, NF2, NKX2-1, NOTCH1, NPM, NRAS, PDGFRA, PIK3CA, PIK3R1, PML, PTEN, PTPRD, RARA, RB1, RET, RICTOR, ROS1, RPTOR, RUNX1, SMAD4, SMARCA4, SOX2, STK11, TET2, TP53, TSC1, TSC2 и VHL.

14. Применение элацестранта или его соли по п. 13, при котором один или несколько генов выбраны из AKT1, AKT2, BRAF, CDK4, CDK6, PIK3CA, PIK3R1 и MTOR.

15. Применение элацестранта или его соли по любому из пп. 1-14, при котором отношение концентрации элацестранта или его соли в опухоли к концентрации элацестранта или его соли в плазме (T/P) после введения составляет по меньшей мере 15.

16. Применение элацестранта или его соли по п. 5, при котором противоэстрогенные средства выбраны из группы, состоящей из тамоксифена, торемифена и фулвестранта, а ингибиторы ароматазы выбраны из группы, состоящей из эксеместана, летрозола и анастрозола.

17. Применение элацестранта или его соли по п. 2, при котором указанный субъект экспрессирует по меньшей мере один мутантный рецептор эстрогена альфа, выбранный из группы, состоящей из D538G, Y537S, Y537N, Y537C, E380Q, S463P, L536R, L536Q, P535H, V392I и V534E.

18. Применение элацестранта или его соли по п. 11, при котором элацестрант вводят субъекту в дозе 300 мг/сутки.