Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к новым производным тиокарбамата, включая их фармацевтически приемлемые соли и сольваты. Соединения по настоящему изобретению являются ингибиторами аденозинового рецептора А2А и полезны в качестве терапевтических соединений, в частности, в лечении и/или профилактике онкологических заболеваний.
Предпосылки создания изобретения
Многие иммуносупрессивные механизмы в опухолях являются типичными для физиологической иммунорегуляции в нормальных тканях. Такая иммунорегуляция очень важна для сохранения контроля над иммунной системой с целью блокирования аутореактивного иммунного ответа и предотвращения критического повреждения тканей в ходе текущего иммунного ответа. Недостаточность физиологической иммунорегуляции часто приводит к избыточной иммунной активации, сопровождающей аутоиммунность. Например, CTLA-4 представляет собой физиологический механизм, благодаря которому осуществляется отрицательная регуляция активности Т-клеток путем блокирования костимулирующего сигнала посредством CD28-B7 взаимодействия. Отсутствие или недостаточность механизма CTLA4 вызывает неспецифическую активацию Т-клеток, и мыши, у которых не работает механизм CTLA-4, умирают в течение нескольких недель, при этом у них наблюдается массивная лимфоцитарная инфильтрация тканей. PD-1, при взаимодействии с лигандами PD-L1 и PD-L2, также обеспечивает сигнал, ингибирующий активность Т-клеток. Известно, что недостаточность PD-1 у мышей вызывает различные типы аутоиммунных нарушений в зависимости от генетического штамма.
Кроме трансдукторов иммуносупрессивного сигнала, расположенных на поверхности клетки, например, CTLA-4 и PD-1, в механизмах иммуносупрессии в микроокружении опухоли участвуют противовоспалительные цитокины (IL-10, TGF-β), энзимы (индолеамин-2,3-диоксигеназа) и специализированные иммунорегуляторные клетки (регуляторные Т-клетки, супрессорные клетки миелоидного происхождения - MDSC). Эти иммуносупрессивные механизмы играют важную роль в контроле иммунного ответа в здоровых тканях. Поскольку опухоли используют такие физиологические иммунорегуляторные механизмы для защиты своих собственных тканей от иммунной атаки, эти механизмы, предназначенные для предотвращения воспалительных осложнений, оказываются теперь основными барьерами, препятствующими спонтанному регрессу онкологического заболевания и его иммунотерапии. Идентификация иммуносупрессивных механизмов в опухолях указала на молекулярные мишени для восстановления противоопухолевого иммунного ответа. Таким образом, эти негативные иммунорегуляторные механизмы, так называемые иммунные контрольные точки, стали основным объектом внимания в процессе поиска лекарств. Антитела к PD1, PDL1 и CTLA4 были одобрены в качестве противораковой терапии для большого количества случаев, включая метастатическую меланому, немелкоклеточный рак легкого, почечно-клеточную карциному, лимфому Ходжкина, раковые образования головы и шеи, уротелиальную карциному, гепатоцеллюлярную карциному, а также для лечения пациентов с солидными опухолями, имеющими одну из двух специфических генетических особенностей, известных как дефицит коррекции неспаренных оснований и высокая микросателлитная нестабильность (независимо от типа онкологического заболевания).
Внеклеточный аденозин известен как ингибитор иммунной функции. В то время как внутриклеточный аденозин вовлечен в энергетический обмен, метаболизм нуклеиновых кислот и цикл метионина, внеклеточный аденозин играет важную роль в межклеточной передаче сигналов. Сигнал передается расположенными на клеточной поверхности аденозиновыми рецепторами, сопряженными с G-белком, и оказывает влияние на различные физиологические функции, включая деятельность нервной, сердечно-сосудистой и иммунной систем.
Опухоли содержат высокие уровни внеклеточного аденозина, что позволяет предположить, что опухолевые клетки могут использовать его иммуносупрессивный эффект и энергию, получаемую в процессе катаболизма (Allard et al., Curr. Opin. Pharmacol., 2016, 29, 7-16; Otta A., Frontiers in Immunology, 2016, 7: 109). Такой высокий уровень внеклеточного аденозина, вероятно, обусловлен повышенной экспрессией энзима CD73, который отвечает за продуцирование внеклеточного аденозина. Гиперэкспрессия CD73 наблюдается у большого числа опухолей, так, согласно данным иммуногистохимии, у всех нижеперечисленных опухолей наблюдается экспрессия средних или высоких уровней CD73 более чем на 50% поверхности опухоли (www.proteinatlas.org): опухоли молочной железы, карциноидная опухоль, опухоли шейки матки, колоректальные опухоли, опухоли эндометрия, глиома, меланома, опухоли головы и шеи, опухоли печени, легкого, яичников, поджелудочной железы, предстательной железы, почек, желудка, щитовидной железы и уротелиальные опухоли.
Из четырех известных типов аденозиновых рецепторов аденозиновый рецептор типа А2А (A2AR) является преимущественно экспрессируемым подтипом в большинстве иммунных клеток. Стимуляция A2AR, как правило, обеспечивает иммуносупрессивный сигнал, который ингибирует активность Т-клеток (пролиферация, продуцирование цитокинов, цитотоксичность), NK-клеток (цитотоксичность), NKT-клеток (продуцирование цитокинов, повышение уровня CD40L), макрофагов/дендритных клеток (презентация антигена, продуцирование цитокинов) и нейтрофилов (реакция «кислородного взрыва»). Было обнаружено, что наличие высоких уровней внеклеточного аденозина в опухолях играет значительную роль в уклонении от противоопухолевого иммунного ответа. В частности, было показано, что у мышей с дефицитом A2AR могла самопроизвольно регрессировать инокулированная опухоль, тогда как у мышей дикого типа аналогичная регрессия опухоли не наблюдалась. Для опухоленесущих животных дикого типа были также полезны антагонисты A2AR. Важно, что сокращение численности Т-клеток и NK-клеток негативно влияло на сдерживание роста опухоли антагонистами A2AR, позволяя предположить улучшение клеточного противоопухолевого иммунного ответа. Эффекторные функции Т-клеток и NK-клеток чувствительны к стимуляции A2AR. Кроме того, при активации в присутствии агониста A2AR, эффекторная функция Т-клеток стабильно ухудшается даже после удаления агониста A2AR. Этот результат позволяет предположить, что богатая аденозином среда в опухолях может индуцировать Т-клетки, проявляющие анергию в отношении опухолевых клеток.
Таким образом, учитывая, что рецептор А2А экспрессируется в большинстве иммунных клеток и, в частности, в эффекторных иммунных клетках, таких как Т-клетки и NK-клетки, и учитывая, что рецептор А2А участвует в процессах, происходящих в тканях, где продуцируется аденозин, полагают, что ингибиторы рецептора А2А могут быть полезны во всех случаях онкологических заболеваний.
Следовательно, существует потребность в ингибиторах А2А-рецептора, способных восстанавливать иммунные функции в опухолевой среде.
Известно, что аденозин является эндогенным модулятором ряда других физиологических функций. Например, известно, что на уровне центральной нервной системы (ЦНС) аденозин вызывает седативный, анксиолитический и антиэпилептический эффекты.
Так, ранее ингибиторы А2А-рецептора были разработаны для лечения депрессии и нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Паркинсона или болезнь Альцгеймера (Pinna A., CNS Drugs, 2014, 28, 455). Одним из новейших ингибиторов А2А-рецептора, разработанных для лечения заболеваний ЦНС, является преладенант (Preladenant) (Hodgson RA et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 2009, 330(1), 294-303; Hauser RA et al., JAMA Neurol., 2015, 72(12), 1491-500).
Однако эти ранее разработанные ингибиторы А2А-рецептора были разработаны для проникновения через гематоэнцефалический барьер, поскольку их мишенью являлись А2А-рецепторы в ЦНС.
Учитывая более высокий уровень аденозина в опухолях по сравнению с мозгом, для достижения желаемого эффекта по восстановлению иммунных функций с целью лечения онкологических заболеваний потребуется введение гораздо больших количеств указанных препаратов. Таким образом, чтобы избежать пагубных побочных эффектов, следует предложить ингибиторы А2А-рецепторов, ограниченно проникающие или вообще не проникающие в ЦНС, в противоположность всем ранее разработанным ингибиторам А2А-рецепторов.
Как показано в приведенной ниже практической части, Заявитель настоящим предлагает новые ингибиторы А2А-рецепторов, которые не обладают сколь-нибудь значительной способностью проникновения в ЦНС, и которые, таким образом, могут быть полезны при лечении онкологических заболеваний.
Краткое изложение сущности изобретения
Настоящее изобретение, таким образом, относится к соединению, имеющему Формулу (I)
или фармацевтически приемлемой соли или сольвату такового, где R1 и R2 соответствуют нижеприведенному определению.
В одном варианте осуществления соединения Формулы (I) представляют собой соединения Формулы (Ia)
или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где R1, R1', R2', R3', R4' и R5' соответствуют нижеприведенному определению.
В одном варианте осуществления соединения Формулы (Ia) представляют собой соединения Формулы (Ia-1)
или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где R1, R1', R2', R3', R4' и R5' соответствуют определению для Формулы (Ia).
В одном варианте осуществления соединения Формулы (Ia) представляют собой соединения Формул (Ia-2) или (Ia-3)
или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где R1, R2', R3', R4' и R5' соответствуют определению для Формулы (Ia).
Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение согласно изобретению или его фармацевтически приемлемую соль или сольват и, по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый носитель.
Настоящее изобретение, кроме того, относится к лекарственному средству, содержащему соединение согласно изобретению или его фармацевтически приемлемую соль или сольват.
Настоящее изобретение также предлагает соединение согласно изобретению или его фармацевтически приемлемую соль или сольват для применения в лечении и/или профилактике онкологических заболеваний.
Изобретение, кроме того, относится к соединению согласно изобретению или фармацевтически приемлемой соли или сольвату такового для применения в качестве ингибитора рецепторов А2А.
Также предложен способ получения соединения Формулы (Ia) согласно изобретению или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата, характеризующийся тем, что он включает реакцию сочетания между промежуточным амином Формулы (А)
где X1, X2, R1', R2', R3', R4' и R5' соответствуют определению, приведенному ниже;
и промежуточным соединением Формулы (В)
где R1 соответствует определению ниже, a Y представляет собой галоген, алкилсульфонилокси, имеющий от 1 до 6 атомов углерода, или арилсульфонилокси, имеющий от 6 до 10 атомов углерода.
Настоящее изобретение также относится к промежуточным продуктам синтеза соединений Формулы (А). Определения
В настоящем изобретении следующие термины имеют следующие значения:
Термин "альдегид" означает группу -СНО.
Термин "альдегидалкил" означает группу -алкил-СНО, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "алкенил" означает ненасыщенную гидрокарбильную группу, которая может быть линейной или разветвленной, содержащей одну или более двойных углерод-углеродных связей. Подходящие алкенильные группы содержат от 2 до 6 атомов углерода, предпочтительно от 2 до 4 атомов углерода, еще более предпочтительно от 2 до 3 атомов углерода. Примерами алкенильных групп являются этенил, 2-пропенил, 2-бутенил, 3-бутенил, 2-пентенил и его изомеры, 2-гексенил и его изомеры, 2,4-пентадиенил, и т.п.
Термин "алкенилкарбонил" означает группу -(С=O)-алкенил, где алкенил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "алкенилкарбонилалкил" означает группу -алкил-(С=O)-алкенил, где алкил и алкенил соответствуют определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "алкенилкарбониламино" означает группу -NH-(С=O)-алкенил, где алкенил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "алкенилкарбониламиноалкил" означает группу -алкил-NH-(С=O)-алкенил, где алкил и алкенил соответствуют определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "алкокси" означает группу -О-алкил, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "алкил" означает гидрокарбильный радикал, имеющий формулу CnH2n+1, где n является числом, большим или равным 1. Как правило, алкильные группы согласно настоящему изобретению включают от 1 до 8 атомов углерода, более предпочтительно алкильные группы согласно настоящему изобретению включают от 1 до 6 атомов углерода. Алкильные группы могут быть линейными или разветвленными. Подходящие алкильные группы включают метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил, гептил и октил.
Термин "алкиламиноалкил" означает группу -алкил-NH-алкил, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "алкиламиноалкиламинокарбонил" означает группу -(C=O)-NH-алкил-NH-алкил, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "(алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонил" означает группу -(C=O)-NR1R2, где R1 представляет собой алкильную группу, a R2 представляет собой группу -алкил-NH-алкил, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "алкиламиноалкилкарбонил" означает группу -(С=O)-алкил-NH-алкил, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "алкилкарбонил" означает группу -(С=O)-алкил, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "алкилгетероарил" означает любой гетероарил, замещенный алкильной группой, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "алкилоксикарбонил" означает группу -(С=O)-O-алкил, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "алкилсульфонил" означает группу -SO2-алкил, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "алкилсульфоналкил" означает группу -алкил-SO2-алкил, где соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "алкилсульфонимидоил" означает группу -S(=O)(=NH)-алкил, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "алкилсульфоксид" означает группу -(S=O)-алкил, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "алкилсульфоксидалкил" означает группу -алкил-SO-алкил, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "алкин" означает класс моновалентных ненасыщенных гидрокарбильных групп, где ненасыщенность возникает из-за присутствия одной или более тройных углерод-углеродных связей. Алкинильные группы обычно, и предпочтительно, имеют такое же число атомов углерода, как описано выше в отношении алкильных групп. Неограничивающими примерами алкинильных групп являются этинил, 2-пропинил, 2-бутинил, 3-бутинил, 2-пентинил и его изомеры, 2-гексинил и его изомеры, и т.п.
Термин "алкиналкил" означает группу -алкил-алкин, где алкил и алкин соответствуют определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "алкинкарбонилалкил" означает группу -алкил-(С=O)-алкин, в которой алкил и алкин соответствуют определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "амино" означает группу -NH2.
Термин "аминоалкил" означает группу -алкил-NH2, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "аминоалкиламинокарбонил" означает группу -(С=O)-NH-алкил-NH2, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "аминоалкилкарбониламино" означает группу -NH-(С=O)-алкил-NH2, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "аминокарбонил" означает группу -(C=O)-NH2.
Термин "(аминокарбонилалкил)(алкил)амино" означает группу -NR1R2 где R1 представляет собой алкильную группу, a R2 представляет собой группу -алкил-(С=O)-NH2, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "аминокарбонилалкиламино" означает группу -NH-алкил-(С=O)-NH2, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "аминосульфонил" означает группу -SO2-NH2.
Термин "арил" означает полиненасыщенную ароматическую гидрокарбильную группу, имеющую одно кольцо (т.е. фенил) или множество конденсированных ароматических колец (например, нафтил), обычно содержащую от 5 до 12 атомов; предпочтительно от 5 до 10; еще более предпочтительно арил представляет собой 5- или 6-членный арил. Неограничивающие примеры арила включают фенил, нафталенил.
Термин "карбонил" означает группу -(С=O)-.
Термин "карбониламино" означает группу -NH-(C=O)-.
Термин "циклоалкил" означает циклическую алкильную группу, то есть, моновалентную, насыщенную или ненасыщенную гидрокарбильную группу, имеющую 1 или 2 циклические структуры. Циклоалкил включает моноциклические или бициклические гидрокарбильные группы. Циклоалкильные группы могут содержать 3 или более атомов углерода в кольце и, как правило, согласно настоящему изобретению, содержат от 3 до 10, более предпочтительно от 3 до 8 атомов углерода; еще более предпочтительно циклоалкил представляет собой 5- или 6-членный циклоалкил. Примеры циклоалкильных групп включают, в числе прочих, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил.
Термин "циклоалкилокси" означает группу -О-циклоалкил, где циклоалкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "диалкиламино" означает группу -NR1R2 где R1 и R2 оба независимо друг от друга представляют собой алкильную группу в соответствии с определением, приведенным в настоящем документе.
Термин "диалкиламиноалкил" означает группу -алкил-NR1R2 где R1 и R2 оба независимо друг от друга представляют собой алкильную группу в соответствии с определением, приведенным в настоящем документе.
Термин "диалкиламиноалкиламинокарбонил" означает группу -(C=O)-NH-алкил-NR1R2 где R1 и R2 являются алкильными группами в соответствии с определением, приведенным в настоящем документе.
Термин "диалкиламиноалкилкарбонил" означает группу -(С=O)-алкил-NR1R2, где R1 и R2 являются алкильными группами в соответствии с определением, приведенным в настоящем документе.
Термин "дигидроксиалкил" означает алкильную группу, как определено в настоящем документе, замещенную двумя гидроксильными (-ОН) группами.
Термин "галогено" или "галоген" означает фтор-, хлор-, бром- или йод-.
Термин "гетероарил" означает арильную группу, как определено в настоящем документе, где, по меньшей мере, один атом углерода замещен гетероатомом. Другими словами, данный термин означает одиночные ароматические кольца, содержащие 5-12 атомов углерода, или системы колец, имеющие 2 конденсированных кольца, как правило, содержащие 5-6 атомов; в которых один или более атомов углерода замещены атомами кислорода, азота и/или серы, где гетероатомы азота и серы необязательно могут быть окислены, а гетероатомы азота необязательно могут быть кватернизованы. Неограничивающие примеры таких гетероарилов включают: оксазолил, тиазолил, имидазолил, фуранил и пирролил. Предпочтительно гетероарил представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, более предпочтительно 5- или 6-членный гетероарил представляет собой фурил.
Термин "гетероциклил" означает неароматические, полностью насыщенные или частично ненасыщенные циклические группы (например, 3-7-членные моноциклические, 7-11-членные бициклические, или содержащие, в общей сложности, от 3 до 10 кольцевых атомов), которые имеют, по меньшей мере, один гетероатом в, по меньшей мере, одном кольце, содержащем атомы углерода. Предпочтительно гетероциклил представляет собой 5- или 6-членный гетероциклил. Каждое кольцо гетероциклической группы, содержащей гетероатом, может иметь 1, 2, 3 или 4 гетероатома, выбранных из атомов азота, атомов кислорода и/или атомов серы, где гетероатомы азота и серы могут необязательно быть окислены, а гетероатомы азота необязательно могут быть кватернизованы. Гетероциклическая группа может быть присоединена у любого гетероатома или атома углерода кольца или системы колец, где это позволяет валентность. Кольца многокольцевых гетероциклов могут быть конденсированы, связаны и/или соединены посредством одного или нескольких спиро-атомов. Неограничивающие примеры гетероциклических групп включают: азиридинил, оксиранил, тииранил, пиперидинил, азетидинил, 2-имидазолинил, пиразолидинил, имидазолидинил, изоксазолинил, оксазолидинил, изоксазолидинил, тиазолидинил, изотиазолидинил, пиперидинил, сукцинимидил, 3-индолил, индолинил, изоиндолинил, 2Н-пирролил, 1-пирролинил, 2-пирролинил, 3-пирролинил, пирролидинил, 4Н-хинолизинил, 2-оксопиперазинил, пиперазинил, гомопиперазинил, 2-пиразолинил, 3-пиразолинил, тетрагидро-2Н-пиранил, 2Н-пиранил, 4Н-пиранил, 3,4-дигидро-2Н-пиранил, оксетанил, тиэтанил, 3-диоксоланил, 1,4-диоксанил, 2,5-диоксимидазолидинил, 2-оксопиперидинил, 2-оксопирролодинил, индолинил, тетрагидропиранил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиофенил, тетрагидрохинолинил, тетрагидроизохинолин-1-ил, тетрагидроизохинолин-2-ил, тетрагидроизохинолин-3-ил, тетрагидроизохинолин-4-ил, тиоморфолин-4-ил, 1-оксидо-1-тиоморфолин-4-ил, 1-диоксидо-1-тиоморфолин-4-ил, 1,3-диоксоланил, 1,4-оксатианил, 1,4-дитианил, 1,3,5-триоксанил, 1Н-пирролизинил, тетрагидро-1,1-диоксотиофенил, N-формилпиперазинил и морфолин-4-ил.
Термин "гетероциклилалкиламинокарбонил" означает группу -(C=O)-NH-алкил-гетероциклил, где алкил и гетероциклил соответствуют определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "(гетероциклил)(алкил)аминоалкил" означает группа-алкил- NR1R2, где R1 представляет собой алкильную группу, a R2 представляет собой гетероциклильную группу, где алкил и гетероциклил соответствуют определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "гетероциклилкарбонил" означает группу -(С=O)-гетероциклил, где гетероциклил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "гетероциклилалкил" означает группу -алкил-гетероциклил, где алкил и гетероциклил соответствуют определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "гетероциклилокси" означает группу -О-гетероциклил, где гетероциклил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "гетероциклилсульфонил" означает группу -SO2-гетероциклил, где гетероциклил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "гидроксиалкил" означает группу -алкил-ОН, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "гидроксиалкиламиноалкил" означает группу -алкил-NH-алкил-ОН, где алкил соответствует определению, приведенному в настоящем документе.
Термин "гидроксикарбонил" означает группу -С(=O)-ОН, где карбонил соответствует определению, приведенному в настоящем документе. Другими словами, "гидроксикарбонил" соответствует группе карбоновой кислоты.
Термин "оксо" означает заместителя =O.
Термин "сульфониламино" означает группу -NH-SO2.
Термин "приблизительно", предшествующий цифре, означает отклонение плюс- минус 10% от указанной величины.
Термин "введение" или его вариант (например, "осуществление введения") означает предоставление активного агента или активного ингредиента (например, ингибитора рецептора А2А), отдельно или в составе фармацевтически приемлемой композиции, пациенту, состояние, симптоматика или заболевание которого подлежит лечению или профилактике.
Термины "IC50" или "концентрация полумаксимального ингибирования" означают концентрацию ингибитора, которая необходима для 50%-го ингибирования in vitro.
Термин "ингибитор" означает природное или синтетическое соединение, которое обладает биологическим действием, приводящим к ингибированию или значительному снижению или понижению экспрессии гена и/или белка или которое обладает биологическим действием, приводящим к ингибированию или значительному снижению биологической активности белка. Следовательно, "ингибитор А2А-рецептора" означает соединение, которое обладает биологическим действием, приводящим к ингибированию или значительному снижению или понижению биологической активности А2А-рецептора.
Термин "человек" означает испытуемого любого пола и на любом этапе развития (т.е. новорожденный, ребенок, подросток, юноша/девушка, взрослый).
Термин "пациент" означает теплокровное животное, более предпочтительно, человека, которое/который ожидает получения или получает медицинскую помощь или является/будет являться объектом медицинской процедуры.
Выражение "фармацевтически приемлемый" означает, что ингредиенты фармацевтической композиции совместимы друг с другом и не наносят вреда испытуемому, которому она вводится.
Выражение "фармацевтически приемлемый носитель" означает вспомогательное вещество, которое не вызывает неблагоприятной, аллергической или иной нежелательной реакции при введении животному, предпочтительно человеку. Оно включает все, без исключения, растворители, дисперсионные среды, оболочки, антибактериальные и противогрибковые средства, изотонические и замедляющие абсорбцию вещества, и т.п. Для введения человеку препараты должны отвечать стандартам стерильности, пирогенности, общей безопасности и чистоты в соответствии с требованиями регулирующих органов, например, FDA или ЕМА.
Термин "предлекарство" в контексте настоящего документа означает любое соединение, которое будет модифицировано с образованием лекарственного соединения, при этом упомянутая модификация может происходить либо внутри, либо вне организма, и либо до, либо после того, как предлекарство достигнет области организма, где показано введение данного лекарственного средства.
Термины "осуществлять профилактику", "профилактический" и "профилактика" в контексте настоящего документа означают метод сдерживания или предотвращения развития патологического состояния или заболевания и/или симптомов, сопровождающих таковое, который позволяет пациенту избежать наступления патологического состояния или заболевания или снижает для пациента риск наступления патологического состояния или заболевания.
Термин "пролекарство" в контексте настоящего документа означает фармакологически приемлемые производные соединений Формулы I, такие как, например, сложные эфиры или амиды, продукт биотрансформации которых in vivo генерирует биологически активное лекарственное средство. Пролекарства обычно характеризуются повышенной биодоступностью и легко метаболизируются in vivo в биологически активные соединения.
Термины "осуществление лечения" или "лечение" означают как терапевтическое лечение, так и профилактическое лечение или профилактические меры, где целью является предотвращение или замедление конкретного патологического состояния или заболевания. К тем, кто нуждается в лечении, относятся те, кто уже имеет данное заболевание, а также те, кто предрасположен к развитию данного заболевания или те, у кого надлежит предотвратить развитие данного заболевания. Заболевание, предрасположенность или патологическое состояние испытуемого или млекопитающего успешно "излечены", если после получения лечения в соответствии с настоящим изобретением испытуемый или млекопитающее демонстрируют поддающееся наблюдению и/или измерению снижение или отсутствие одного или более из нижеперечисленного: уменьшение опухоли; и/или облегчение, до некоторой степени, одного или более симптомов, связанных с конкретным заболеванием или патологическим состоянием; снижение заболеваемости и смертности, и улучшение качества жизни. Вышеуказанные параметры для оценки успешности лечения и улучшения течения болезни легко измеримы посредством рутинных процедур, хорошо знакомых врачу.
Термин "доброволец" или "испытуемый" относится к животному, включая человека. В контексте настоящего изобретения испытуемым может быть пациент, т.е. лицо, получающее медицинскую помощь, проходящее или прошедшее курс лечения или контролируемое на предмет развития заболевания. В одном варианте осуществления испытуемый является существом мужского пола. В другом варианте осуществления испытуемый является существом женского пола.
Подробное описание изобретения
Соединения
Настоящее изобретение относится к соединениям, имеющим Формулу (I)
или их фармацевтически приемлемой соли или сольвату, где:
R1 представляет собой 5- или 6-членный гетероарил или 5- или 6-членный арил, где гетероарильные или арильные группы необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из С1-С6 алкила (предпочтительно метил) и галогена (предпочтительно фтор- или хлор-); предпочтительно R1 представляет собой 5-членный гетероарил; более предпочтительно R1 представляет собой фурил;
R2 представляет собой 6-членный арил или 6-членный гетероарил,
где гетероарильные или арильные группы необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из галогена, алкила, гетероциклила, алкокси, циклоалкилокси, гетероциклилокси, карбонила, алкилкарбонила, аминокарбонила, гидроксикарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфонила, аминосульфонила, гетероциклилсульфонила, алкилсульфонимидоила, карбониламино, сульфониламино и алкилсульфоналкила;
указанные заместители необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из оксо, галогено, гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гетероциклилалкила, гидроксиалкила, дигидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила, алкилсульфонила и алкилсульфоналкила;
или гетероарильные или арильные группы необязательно замещены двумя заместителями, которые образуют вместе с атомами, к которым они присоединены, 5- или 6-членное арильное кольцо, 5- или 6-членное гетероарильное кольцо, 5- или 6-членное циклоалкильное кольцо или 5- или 6-членное гетероциклильное кольцо; необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из оксо, галогено, гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гетероциклилалкила, гидроксиалкила, дигидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила, алкилсульфонила и алкилсульфоналкила.
В одном варианте осуществления, в Формуле (I):
R1 представляет собой 5- или 6-членный гетероарил или 5- или 6-членный арил, где гетероарильные или арильные группы необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из С1-С6-алкила (предпочтительно, метила) и галогена (предпочтительно, фтор- или хлор-); предпочтительно R1 представляет собой 5-членный гетероарил; более предпочтительно R1 представляет собой фурил;
R2 представляет собой 6-членный арил или 6-членный гетероарил,
где гетероарильные или арильные группы необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, алкила, гетероциклила, алкокси, циклоалкилокси, гетероциклилокси, карбонила, алкилкарбонила, аминокарбонила, гидроксикарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфонила, аминосульфонила, гетероциклилсульфонила, карбониламино, сульфониламино и алкилсульфоналкила;
указанные заместители необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил) аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила, алкилсульфонила и алкилсульфоналкила.
В одном варианте осуществления, в Формуле (I):
R1 представляет собой 5- или 6-членный гетероарил или 5- или 6-членный арил, где гетероарильные или арильные группы необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из С1-С6 алкила (предпочтительно метил) и галогена (предпочтительно фтор- или хлор-). Предпочтительно R1 представляет собой 5-членный гетероарил; более предпочтительно R1 представляет собой фурил;
R2 представляет собой 6-членный арил или 6-членный гетероарил,
где гетероарильные или арильные группы необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, алкила, гетероциклила, алкокси, циклоалкилокси, гетероциклилокси, карбонила, алкилкарбонила, аминокарбонила, гидроксикарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфонила, аминосульфонила, гетероциклилсульфонила, карбониламино, или сульфониламино;
указанные заместители необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил) аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила.
В предпочтительном варианте осуществления, настоящее изобретение относится к соединениям, имеющим формулу (Ia):
или их фармацевтически приемлемой соли или сольвату, где:
R1 представляет собой 5- или 6-членный гетероарил или 5- или 6-членный арил, где гетероарильные или арильные группы необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из С1-С6 алкила (предпочтительно метил) и галогена (предпочтительно фтор- или хлор-). Предпочтительно R1 представляет собой 5-членный гетероарил; более предпочтительно R1 представляет собой фурил;
X1 и X2 представляют собой независимо С или N каждый;
R1' отсутствует, когда X1 представляет собой N; или когда X1 представляет собой С, R1' представляет собой Н, галоген, алкил, гетероциклил, алкокси, циклоалкилокси, гетероциклилокси, карбонил, алкилкарбонил, аминокарбонил, гидроксикарбонил, гетероциклилкарбонил, алкилсульфоксид, алкилсульфонил, аминосульфонил, гетероциклилсульфонил, алкилсульфонимидоил, карбониламино, сульфониламино, или алкилсульфоналкил;
указанные заместители необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из оксо, галогена, гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гетероциклилалкила, гидроксиалкила, дигидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил) аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила, алкилсульфонила и алкилсульфоналкила;
R2' представляет собой Н, галоген, алкил, гетероциклил, алкокси, циклоалкилокси, гетероциклилокси, карбонил, алкилкарбонил, аминокарбонил, гидроксикарбонил, гетероциклилкарбонил, алкилсульфоксид, алкилсульфонил, аминосульфонил, гетероциклилсульфонил, алкилсульфонимидоил, карбониламино, сульфониламино, или алкилсульфоналкил;
указанные заместители необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из оксо, галогена, гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гетероциклилалкила, гидроксиалкила, дигидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил) аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила, алкилсульфонила и алкилсульфоналкила;
или R1' и R2' образуют вместе с атомами, к которым они присоединены, 5- или 6-членное арильное кольцо, 5- или 6-членное гетероарильное кольцо, 5- или 6-членное циклоалкильное кольцо или 5- или 6-членное гетероциклильное кольцо; необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из оксо, галогено, гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гетероциклилалкила, гидроксиалкила, дигидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила, алкилсульфонила и алкилсульфоналкила.
R3' отсутствует, когда X2 представляет собой N; или когда X2 представляет собой С, R3' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F;
R4' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F; и
R5' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F.
В одном варианте осуществления, в Формуле (Ia):
R1 представляет собой 5- или 6-членный гетероарил или 5- или 6-членный арил, где гетероарильные или арильные группы необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из С1-С6 алкила (предпочтительно метил) и галогена (предпочтительно фтор- или хлор-). Предпочтительно R1 представляет собой 5-членный гетероарил; более предпочтительно R1 представляет собой фурил;
X1 и X2 представляют собой независимо С или N каждый;
R1' отсутствует, когда X1 представляет собой N; или когда X1 представляет собой С, R1' представляет собой Н, галоген, алкил, алкокси, гетероциклилокси, алкилкарбонил, карбонил, аминокарбонил, гидроксикарбонил, гетероциклил, гетероциклилкарбонил, алкилсульфоксид, алкилсульфонил, аминосульфонил или гетероциклилсульфонил;
указанные заместители необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из гидрокси, циано, алкила, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил) аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила и алкилсульфоналкила;
R2' представляет собой Н, алкокси, циклоалкилокси, гетероциклилокси, алкилсульфоксид, карбонил, карбониламино, аминокарбонил, сульфониламино;
где алкокси, циклоалкилокси, гетероциклилокси, алкилсульфоксид, карбонил, карбониламино, аминокарбонил, сульфониламино необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино,
(аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил) аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила, алкилсульфоналкила;
или R1' и R2' образуют вместе с атомами, к которым они присоединены, 5- или 6-членное арильное кольцо, 5- или 6-членное гетероарильное кольцо, 5- или 6-членное циклоалкильное кольцо, 5- или 6-членное гетероциклильное кольцо; необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, циано, алкила, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоналкила.
R3' отсутствует, когда X2 представляет собой N; или когда X2 представляет собой С, R3' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F;
R4' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F; и
R5' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F.
В одном варианте осуществления, в Формуле (Ia):
R1 представляет собой 5- или 6-членный гетероарил или 5- или 6-членный арил, где гетероарильные или арильные группы необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из С1-С6 алкила (предпочтительно метил) и галогена (предпочтительно фтор- или хлор-). Предпочтительно R1 представляет собой 5-членный гетероарил; более предпочтительно R1 представляет собой фурил;
X1 и X2 представляют собой каждый независимо С или N;
R1' отсутствует, когда X1 представляет собой N; или когда X1 представляет собой С, R1' представляет собой Н, галоген, алкил, алкокси, гетероциклилокси, алкилкарбонил, карбонил, аминокарбонил, гидроксикарбонил, гетероциклил, гетероциклилкарбонил, алкилсульфоксид, алкилсульфонил, аминосульфонил или гетероциклилсульфонил;
указанные заместители необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из гидрокси, циано, алкила, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил) аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила;
R2' представляет собой Н, алкокси, циклоалкилокси, гетероциклилокси, алкилсульфоксид, карбонил, карбониламино, аминокарбонил, сульфониламино;
где алкокси, циклоалкилокси, гетероциклилокси, алкилсульфоксид, карбонил, карбониламино, аминокарбонил, сульфониламино необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил) аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила;
или R1' и R2' образуют вместе с атомами, к которым они присоединены, 5- или 6-членное арильное кольцо, 5- или 6-членное гетероарильное кольцо, 5- или 6-членное циклоалкильное кольцо, 5- или 6-членное гетероциклильное кольцо; необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, циано, алкила, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида.
R3' отсутствует, когда X2 представляет собой N; или когда X2 представляет собой С, R3' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F;
R4' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F; и
R5' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F.
В одном частном варианте осуществления настоящего изобретения R1 представляет собой 5- или 6-членный гетероарил или 5- или 6-членный арил, где гетероарильные или арильные группы необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из С1-С6 алкила (предпочтительно метил) и галогена (предпочтительно фтор- или хлор-).
В предпочтительном варианте осуществления R1 представляет собой 5-членный гетероарил; более предпочтительно R1 представляет собой фурил
В одном частном варианте осуществления настоящего изобретения X1 и X2 представляют собой каждый независимо С или N. В другом частном варианте осуществления X1 и X2 оба представляют собой С.
В одном частном варианте осуществления настоящего изобретения R отсутствует, когда X1 представляет собой N.
В другом частном варианте осуществления, когда X1 представляет собой С, R1' представляет собой Н, галоген, алкил, гетероциклил, алкокси, циклоалкилокси, гетероциклилокси, карбонил, алкилкарбонил, аминокарбонил, гидроксикарбонил, гетероциклилкарбонил, алкилсульфоксид, алкилсульфонил, аминосульфонил, гетероциклилсульфонил, алкилсульфонимидоил, карбониламино, сульфониламино, или алкилсульфоналкил; указанные заместители необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из оксо, галогена, гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гетероциклилалкила, гидроксиалкила, дигидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил) аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила, алкилсульфонила и алкилсульфоналкила.
В предпочтительном варианте осуществления, когда X1 представляет собой С, R1' представляет собой Н, галоген, алкил, алкокси, гетероциклилокси, алкилкарбонил, карбонил, аминокарбонил, гидроксикарбонил, гетероциклил, гетероциклилкарбонил, алкилсульфоксид, алкилсульфонил, аминосульфонил или гетероциклилсульфонил; указанные заместители необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из гидрокси, циано, алкила, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил) аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила.
В предпочтительном варианте осуществления, заместители R1' необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, гидрокси, алкила, гетероциклилалкила, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, гетероциклилалкиламинокарбонила, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида и алкилсульфоналкила.
В предпочтительном варианте осуществления, заместители R1' необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из гидрокси, алкила, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоналкила.
В одном частном варианте осуществления настоящего изобретения R2' представляет собой Н, галоген, алкил, гетероциклил, алкокси, циклоалкилокси, гетероциклилокси, карбонил, алкилкарбонил, аминокарбонил, гидроксикарбонил, гетероциклилкарбонил, алкилсульфоксид, алкилсульфонил, аминосульфонил, гетероциклилсульфонил, алкилсульфонимидоил, карбониламино, сульфониламино, или алкилсульфоналкил; указанные заместители необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из оксо, галогена, гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гетероциклилалкила, гидроксиалкила, дигидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила, алкилсульфонила и алкилсульфоналкила.
В предпочтительном варианте осуществления, R2' представляет собой Н, алкокси, циклоалкилокси, гетероциклилокси, алкилсульфоксид, карбонил, карбониламино, аминокарбонил или сульфониламино; где алкокси, циклоалкилокси, гетероциклилокси, алкилсульфоксид, карбонил, карбониламино, аминокарбонил или сульфониламино необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила.
В предпочтительном варианте осуществления заместители R2' необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из оксо, галогена, гидрокси, циано, алкила, гетероциклилалкила, дигидроксиалкила, диалкиламиноалкила, гетероарила, алкилгетероарила, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоналкила.
В предпочтительном варианте осуществления заместители R2' необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из гидрокси, циано, алкила, диалкиламиноалкила, гетероарила, алкилгетероарила, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоналкила.
В другом частном варианте осуществления настоящего изобретения R1' и R2' образуют вместе с атомами, к которым они присоединены, 5- или 6-членное арильное кольцо, 5- или 6-членное гетероарильное кольцо, 5- или 6-членное циклоалкильное кольцо или 5- или 6-членное гетероциклильное кольцо; необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из оксо, галогена, гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гетероциклилалкила, гидроксиалкила, дигидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила, алкилсульфонила и алкилсульфоналкила.
В предпочтительном варианте осуществления R1' и R2' образуют вместе с атомами, к которым они присоединены, 5- или 6-членное арильное кольцо, 5- или 6-членное гетероарильное кольцо, 5- или 6-членное циклоалкильное кольцо, 5- или 6-членное гетероциклильное кольцо; необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из гидрокси, циано, алкила, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоналкила.
В одном частном варианте осуществления настоящего изобретения R3' отсутствует, когда X2 представляет собой N. В другом частном варианте осуществления настоящего изобретения, когда X2 представляет собой С, R3' представляет собой Н или галоген. В предпочтительном варианте осуществления, когда X2 представляет собой С, R3' представляет собой Н или F.
В одном частном варианте осуществления настоящего изобретения R4' представляет собой Н или галоген. В предпочтительном варианте осуществления R4' представляет собой Н или F.
В одном частном варианте осуществления настоящего изобретения R5' представляет собой Н или галоген. В предпочтительном варианте осуществления R5' представляет собой Н или F.
В одном варианте осуществления предпочтительными соединениями Формулы (Ia) являются соединения, имеющие Формулу (Ia-1):
или их фармацевтически приемлемая соль или сольват, где R1, R1', R2', R3', R4' и R5' соответствуют определению для Формулы (Ia).
В одном варианте осуществления предпочтительными соединениями Формулы (Ia-1) являются соединения, имеющие Формулу (Ia-1а):
или их фармацевтически приемлемая соль или сольват, где:
R1 и R3' соответствуют определению для Формулы (Ia); и
R1'' представляет собой алкильную или гетероциклильную группу, замещенную одной или более группами, выбранными из оксо, галогена, гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гетероциклилалкила, гидроксиалкила, дигидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила, алкилсульфонила и алкилсульфоналкила.
Согласно одному варианту осуществления, в Формуле (Ia-1а):
R1 и R3' соответствуют определению для Формулы (Ia); и
R1'' представляет собой алкильную или гетероциклильную группу, замещенную одной или более группами, выбранными из гидрокси, циано, алкила, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоналкила.
Согласно одному варианту осуществления, в Формуле (Ia-1а):
R1 и R3' соответствуют определению для Формулы (Ia); и
R1'' представляет собой алкильную или гетероциклильную группу, замещенную одной или более группами, выбранными из гидрокси, циано, алкила, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида.
В одном частном варианте осуществления настоящего изобретения R1'' представляет собой алкильную или гетероциклильную группу, замещенную одной или более группами, выбранными из оксо, галогена, гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гетероциклилалкила, гидроксиалкила, дигидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила, алкилсульфонила и алкилсульфоналкила.
В предпочтительном варианте осуществления R1'' представляет собой алкильную или гетероциклильную группу, замещенную одной или более группами, выбранными из гидрокси, циано, алкила, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида.
В предпочтительном варианте осуществления R1'' представляет собой алкильную или гетероциклильную группу, замещенную одной или более группами, выбранными из гидрокси, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоналкила.
В одном варианте осуществления предпочтительные соединения Формулы (Ia-1) представляют собой соединения Формулы (Ia-1b):
или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где:
R1 и R3' соответствуют определению для Формулы (Ia);
R1' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F; и
R2'' представляет собой алкильную или гетероциклильную группу, замещенную одной или более группами, выбранными из оксо, галогена, гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гетероциклилалкила, гидроксиалкила, дигидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоскикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила, алкилсульфонила и алкилсульфоналкила.
Согласно одному варианту осуществления, в Формуле (Ia-1b):
R1 и R3' соответствуют определению для Формулы (Ia);
R1' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F; и
R2'' представляет собой алкильную или гетероциклильную группу, замещенную одной или более группами, выбранными из гидрокси, циано, алкила, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоналкила.
Согласно одному варианту осуществления, в Формуле (Ia-1b):
R1 и R3' соответствуют определению для Формулы (Ia);
R1' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F; и
R2'' представляет собой алкильную или гетероциклильную группу, замещенную одной или более группами, выбранными из гидрокси, циано, алкила, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида.
В одном частном варианте осуществления настоящего изобретения R1' представляет собой Н или галоген. В предпочтительном варианте осуществления R1' представляет собой Н или F.
В одном частном варианте осуществления настоящего изобретения R2'' представляет собой алкильную или гетероциклильную группу, замещенную одной или более группами, выбранными из оксо, галогена, гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гетероциклилалкила, гидроксиалкила, дигидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила, алкилсульфонила и алкилсульфоналкиал.
В предпочтительном варианте осуществления R2''алкильную или гетероциклильную группу, замещенную одной или более группами, выбранными из гидрокси, циано, алкила, гидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида.
В предпочтительном варианте осуществления R2'' алкильную или гетероциклильную группу, замещенную одной или более группами, выбранными из гидрокси, циано, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила,
диалкиламиноалкилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоналкила.
В одном варианте осуществления предпочтительные соединения Формулы (Ia-1) представляют собой соединения Формул (Ia-1с) или (Ia-1d):
или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где:
R1 и R3' соответствуют определению для Формулы (Ia);
R1' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F;
R2' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F;
R1i и R1ii представляют собой каждый независимо водород, гидрокси, алкил, алкенил, гетероциклилалкил, гидроксиалкил, дигидроксиалкил, гидроксиалкиламиноалкил, аминоалкил, алкиламиноалкил, диалкиламиноалкил, (гетероциклил)(алкил)аминоалкил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, алкиналкил, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонил, алкилоксикарбонил, аминокарбонил, аминоалкиламинокарбонил, алкиламиноалкиламинокарбонил, диалкиламиноалкиламинокарбонил, гетероциклилалкиламинокарбонил, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонил, алкиламиноалкилкарбонил, диалкиламиноалкилкарбонил, гетероциклилкарбонил, алкенилкарбонил, алкинилкарбонил, алкилсульфоксидалкил или алкилсульфоналкил; и
R2i и R2ii представляют собой каждый независимо водород, гидрокси, алкил, алкенил, гетероциклилалкил, гидроксиалкил, дигидроксиалкил, гидроксиалкиламиноалкил, аминоалкил, алкиламиноалкил, диалкиламиноалкил, (гетероциклил)(алкил)аминоалкил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, алкиналкил, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонил, алкилоксикарбонил, аминокарбонил, аминоалкиламинокарбонил, алкиламиноалкиламинокарбонил, диалкиламиноалкиламинокарбонил, гетероциклилалкиламинокарбонил, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонил, алкиламиноалкилкарбонил, диалкиламиноалкилкарбонил, гетероциклилкарбонил, алкенилкарбонил, алкинилкарбонил, алкилсульфоксидалкил или алкилсульфоналкил.
В одном варианте осуществления, в Формуле (Ia-1с) или (Ia-1d):
R1 и R3' соответствуют определению для Формулы (Ia);
R1' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F;
R2' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F;
R1i и R1ii представляют собой каждый независимо водород, гидрокси, алкил, гидроксиалкил, гидроксиалкиламиноалкил, аминоалкил, алкиламиноалкил, диалкиламиноалкил, (гетероциклил)(алкил)аминоалкил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, алкиналкил, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонил, алкилоксикарбонил, аминокарбонил, аминоалкиламинокарбонил, алкиламиноалкиламинокарбонил, диалкиламиноалкиламинокарбонил, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонил, алкиламиноалкилкарбонил, диалкиламиноалкилкарбонил, гетероциклилкарбонил, алкилсульфоксидалкил, алкилсульфоналкил; и
R2i и R2ii представляют собой каждый независимо водород, гидрокси, алкил, гидроксиалкил, гидроксиалкиламиноалкил, аминоалкил, алкиламиноалкил, диалкиламиноалкил, (гетероциклил)(алкил)аминоалкил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, алкиналкил, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонил, алкилоксикарбонил, аминокарбонил, аминоалкиламинокарбонил, алкиламиноалкиламинокарбонил, диалкиламиноалкиламинокарбонил, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонил, алкиламиноалкилкарбонил, диалкиламиноалкилкарбонил, гетероциклилкарбонил, алкилсульфоксидалкил, алкилсульфоналкил.
В одном варианте осуществления, в Формуле (Ia-1с) или (Ia-1d):
R1 и R3' соответствуют определению для Формулы (Ia);
R1' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F;
R2' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F;
R1i и R1ii представляют собой каждый независимо водород, гидрокси, алкил, гидроксиалкил, гидроксиалкиламиноалкил, аминоалкил, алкиламиноалкил, диалкиламиноалкил, (гетероциклил)(алкил)аминоалкил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, алкиналкил, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонил, алкилоксикарбонил, аминокарбонил, аминоалкиламинокарбонил, алкиламиноалкиламинокарбонил, диалкиламиноалкиламинокарбонил, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонил, алкиламиноалкилкарбонил, диалкиламиноалкилкарбонил, гетероциклилкарбонил, алкилсульфоксидалкил, алкилсульфоналкил; и
R2i и R2ii представляют собой каждый независимо водород, гидрокси, алкил, гидроксиалкил, гидроксиалкиламиноалкил, аминоалкил, алкиламиноалкил, диалкиламиноалкил, (гетероциклил)(алкил)аминоалкил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, алкиналкил, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонил, алкилоксикарбонил, аминокарбонил, аминоалкиламинокарбонил, алкиламиноалкиламинокарбонил, диалкиламиноалкиламинокарбонил, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонил, алкиламиноалкилкарбонил, диалкиламиноалкилкарбонил, гетероциклилкарбонил, алкилсульфоксидалкил, алкилсульфоналкил.
В одном частном варианте осуществления настоящего изобретения R1' представляет собой Н или галоген. В предпочтительном варианте осуществления R1' представляет собой Н или F.
В одном частном варианте осуществления настоящего изобретения R2' представляет собой Н или галоген. В предпочтительном варианте осуществления R2' представляет собой Н или F.
В одном частном варианте осуществления настоящего изобретения R1i и Rii представляют собой каждый независимо водород, гидрокси, алкил, алкенил, гетероциклилалкил, гидроксиалкил, дигидроксиалкил, гидроксиалкиламиноалкил, аминоалкил, алкиламиноалкил, диалкиламиноалкил, (гетероциклил)(алкил)аминоалкил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, алкиналкил, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонил, алкилоксикарбонил, аминокарбонил, аминоалкиламинокарбонил, алкиламиноалкиламинокарбонил, диалкиламиноалкиламинокарбонил, гетероциклилалкиламинокарбонил, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонил, алкиламиноалкилкарбонил, диалкиламиноалкилкарбонил, гетероциклилкарбонил, алкенилкарбонил, алкинилкарбонил, алкилсульфоксидалкил или алкилсульфоналкил.
В предпочтительном варианте осуществления R1i и R1ii представляют собой каждый независимо водород, гидрокси, алкил, гидроксиалкил, гидроксиалкиламиноалкил, аминоалкил, алкиламиноалкил, диалкиламиноалкил, (гетероциклил)(алкил)аминоалкил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, алкиналкил, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонил, алкилоксикарбонил, аминокарбонил, аминоалкиламинокарбонил, алкиламиноалкиламинокарбонил, диалкиламиноалкиламинокарбонил, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонил, алкиламиноалкилкарбонил, диалкиламиноалкилкарбонил, гетероциклилкарбонил, алкилсульфоксидалкил, алкилсульфоналкил.
В предпочтительном варианте осуществления R1i и R1ii представляют собой каждый независимо водород, алкил, гетероциклилалкил, гидроксиалкил, гидроксиалкиламиноалкил, аминоалкил, алкиламиноалкил, диалкиламиноалкил, (гетероциклил)(алкил)аминоалкил или гетероциклилалкиламинокарбонил.
В предпочтительном варианте осуществления R1i и R1ii представляют собой каждый независимо водород, алкил, гидроксиалкил, гидроксиалкиламиноалкил, аминоалкил, алкиламиноалкил, диалкиламиноалкил или (гетероциклил)(алкил)аминоалкил.
В одном частном варианте осуществления настоящего изобретения R2i и R2ii представляют собой каждый независимо водород, гидрокси, алкил, алкенил, гетероциклилалкил, гидроксиалкил, дигидроксиалкил, гидроксиалкиламиноалкил, аминоалкил, алкиламиноалкил, диалкиламиноалкил, (гетероциклил)(алкил)аминоалкил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, алкиналкил, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонил, алкилоксикарбонил, аминокарбонил, аминоалкиламинокарбонил, алкиламиноалкиламинокарбонил, диалкиламиноалкиламинокарбонил, гетероциклилалкиламинокарбонил, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонил, алкиламиноалкилкарбонил, диалкиламиноалкилкарбонил, гетероциклилкарбонил, алкенилкарбонил, алкинилкарбонил, алкилсульфоксидалкил или алкилсульфоналкил.
В предпочтительном варианте осуществления R2i и R2ii представляют собой каждый независимо водород, гидрокси, алкил, гидроксиалкил, гидроксиалкиламиноалкил, аминоалкил, алкиламиноалкил, диалкиламиноалкил, (гетероциклил)(алкил)аминоалкил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, алкиналкил, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонил, алкилоксикарбонил, аминокарбонил, аминоалкиламинокарбонил, алкиламиноалкиламинокарбонил, диалкиламиноалкиламинокарбонил, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонил, алкиламиноалкилкарбонил, диалкиламиноалкилкарбонил, гетероциклилкарбонил, алкилсульфоксидалкил.
В предпочтительном варианте осуществления R2i и R2ii представляют собой каждый независимо водород, алкил, гетероциклилалкил, дигидроксиалкил, диалкиламиноалкил или гетероциклилалкиламинокарбонил. В предпочтительном варианте осуществления R2i и R2ii представляют собой каждый независимо водород, алкил или диалкиламиноалкил.
В одном варианте осуществления предпочтительные соединения Формулы (1а) представляют собой соединения Формул (Ia-2) или (Ia-3):
или их фармацевтически приемлемую соль или сольват, где R1', R2', R3', R4' и R5' соответствуют определению для Формулы (Ia).
В частности, предпочтительные соединения Формулы I согласно настоящему изобретению перечислены в Таблице 1.
и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.
В Таблице 1 термин «соед.» означает «соединение».
Названия соединениям в Таблице 1 были присвоены с использованием ChemBioDraw® Ultra, версия 12.0 (PerkinElmer).
Все ссылки на соединения Формулы I и ее подформул включают ссылки на их энантиомеры, соли, сольваты, полиморфные модификации, многокомпонентные комплексы и жидкие кристаллы.
Соединения согласно настоящему изобретению включают соединения формулы I и ее подформул, как определено выше, включая все их полиморфные модификации и кристаллические формы, пролекарства и изомеры (включая оптические, геометрические и таутомерные изомеры), а также меченные изотопами соединения Формулы I и ее подформул.
Соединения Формулы I и ее подформул могут содержать асимметричный центр и, таким образом, могут существовать в виде различных стереоизомерных форм. Соответственно, настоящее изобретение включает все возможные стереоизомеры и включает не только рацемические соединения, но и индивидуальные энантиомеры и их нерацемические смеси. Когда какое-либо соединение желательно иметь в виде одного энантиомера, его можно получить стереоспецифическим синтезом, путем разделения конечного продукта или любого удобного промежуточного продукта, или методами хиральной хроматографии, которые известны в данной области техники. Разделение конечного продукта, промежуточного соединения или исходного материала может быть выполнено любым подходящим способом, известным в данной области техники.
Соединения по настоящему изобретению могут находиться в форме фармацевтически приемлемых солей. Фармацевтически приемлемые соли соединений Формулы I и ее подформул включают их кислотно-аддитивные и основные соли. Подходящие кислотно-аддитивные соли образуются из кислот, образующих нетоксичные соли. Примеры включают ацетат, адипат, аспартат, бензоат, бесилат, бикарбонат/карбонат, бисульфат/сульфат, борат, камсилат, цитрат, цикламат, эдизилат, эзилат, формиат, фумарат, глюкептат, глюконат, глюкуронат, гексафторфосфат, гибензат, гидрохлорид/хлорид, гидробромид/бромид, гидройодид/йодид, изетионат, лактат, малат, малеат, малонат, мезилат, метилсульфат, нафтилат, 2-напсилат, никотинат, нитрат, оротат, оксалат, пальмитат, памоат, фосфат/гидрофосфат/дигидрофосфат, пироглутамат, сахарат, стеарат, сукцинат, таннат, тартрат, тозилат, трифторацетат и ксинафоат. Подходящие основные соли образуются из оснований, образующих нетоксичные соли. Примеры включают соли алюминия, аргинина, бензатина, кальция, хлорина, диэтиламина, диоламина, лизина, магния, меглумина, оламина, калия, натрия, трометамина, 2-(диэтиламино)этанола, этаноламина, морфолина, 4-(2-гидроксиэтил)морфолина и цинка. Могут быть также образованы гемисоли кислот и оснований, например гемисульфатные и гемикальциевые соли. Предпочтительные фармацевтически приемлемые соли включают гидрохлорид/хлорид, гидробромид/бромид, бисульфат/сульфат, нитрат, цитрат и ацетат.
Когда соединения по настоящему изобретению содержат кислотную группу или основную группу, соединения по настоящему изобретению могут образовывать также внутренние соли, и такие соединения входят в объем изобретения. Когда соединения по настоящему изобретению содержат гетероатом, являющийся донором водорода (например, NH), настоящее изобретение охватывает также соли и/или изомеры, образованные путем переноса указанного атома водорода на основную группу или атом в молекуле.
Фармацевтически приемлемые соли соединений Формулы I и ее подформул могут быть получены одним или несколькими из следующих способов:
(i) путем взаимодействия Формулы I с желаемой кислотой;
(ii) путем взаимодействия Формулы I с желаемым основанием;
(iii) путем удаления кислото- или основно-лабильной защитной группы из подходящего предшественника соединения Формулы I или путем раскрытия кольца подходящего циклического предшественника, например лактона или лактама, с использованием желаемой кислоты; или
(iv) путем превращения одной соли соединения Формулы I в другую путем взаимодействия с подходящей кислотой или с помощью подходящей ионообменной колонки.
Все эти реакции обычно проводят в растворе. Соль может осаждаться из раствора и собираться фильтрованием или может быть получена выпариванием растворителя. Степень ионизации в соли может варьировать от полностью ионизированной до почти неионизированной.
Соединения по настоящему изобретению можно вводить в организм в форме фармацевтически приемлемых солей. Термин "фармацевтически приемлемая соль" включает все приемлемые соли, такие как ацетат, лактобионат, бензолсульфонат, лаурат, бензоат, малат, бикарбонат, малеат, бисульфат, манделат, битартрат, мезилат, борат, метилбромид, бромид, метилнитрат, эдетат кальция, метилсульфат, камсилат, мукат, карбонат, напсилат, хлорид, нитрат, клавуланат, N-метилглюкамин, цитрат, аммониевая соль, дигидрохлорид, олеат, эдетат, оксалат, эдисилат, памоат (эмбонат), эстолат, пальмитат, эзилат, пантотенат, фумарат, фосфат/дифосфат, глюцептат, полигалактуронат, глюконат, салицилат, глутамат, стеарат, гликолиларсанилат, сульфат, гексилрезорцинат, субацетат, гидрабамин, сукцинат, гидробромид, таннат, гидрохлорид, тартрат, гидроксинафтоат, теоклат, йодид, тозилат, изотионат, триэтиодид, лактат, паноат, валерат, и им подобные, которые могут быть использованы в качестве лекарственной формы для модификации характеристик растворимости или гидролиза, или могут быть использованы в лекарственных составах с замедленным высвобождением или пролекарственных препаратах. В зависимости от конкретного функционального назначения соединения по настоящему изобретению, фармацевтически приемлемые соли соединений по настоящему изобретению включают соли, образованные катионами, такими, как натрий, калий, алюминий, кальций, литий, магний, цинк, и основаниями, такими, как аммиак, этилендиамин, N-метил-глутамин, лизин, аргинин, орнитин, холин, N,N'-дибензилэтилендиамин, хлорпрокаин, диэтаноламин, прокаин, N-бензилфенэтиламин, диэтиламин, пиперазин, трис(гидроксиметил)аминометан, и гидроксид тетраметил аммония.
Эти соли могут быть получены стандартными методами, например, взаимодействием свободной кислоты с подходящим органическим или неорганическим основанием. В тех случаях, когда присутствует основная группа, такая как аминогруппа, в качестве лекарственной формы может быть использована соль с кислой реакцией, т.е. гидрохлорид, гидробромид, ацетат, пальмоат, и т.п.
Кроме того, хотя, в целом, в том, что касается солей соединений по настоящему изобретению, предпочтительными являются фармацевтически приемлемые соли, следует отметить, что изобретение, в его самом широком смысле, также включает соли, которые не являются фармацевтически приемлемыми, но которые могут быть использованы, например, для выделения и/или очистки соединений по настоящему изобретению. Например, соли, образованные оптически активными кислотами или основаниями, могут быть использованы для образования диастереоизомерных солей, которые могут облегчить разделение оптически активных изомеров вышеуказанных соединений Формулы I.
Соединения по настоящему изобретению могут находиться в форме фармацевтически приемлемых сольватов. Фармацевтически приемлемые сольваты соединений Формулы I и ее подформул содержат стехиометрические или субстехиометрические количества одной или нескольких фармацевтически приемлемых молекул растворителя, таких как этанол или вода. Термин "гидрат" относится к тому случаю, когда указанным растворителем является вода.
Настоящее изобретение также охватывает, в целом, все фармацевтически приемлемые предлекарства и пролекарства соединений Формулы I и ее подформул.
Также, в случае присутствия спиртовой группы, в лекарственных составах с замедленным высвобождением или пролекарственных препаратах могут использоваться фармацевтически приемлемые сложные эфиры, например ацетат, малеат, пивалоилоксиметил, и т.п., а также сложные эфиры, которые применяются в данной области техники для модификации характеристик растворимости или гидролиза.
Способ получения
Соединения Формулы I могут быть получены различными способами с помощью реакций, известных специалисту в данной области техники.
Изобретение также относится к способу получения соединений Формулы (Ia):
и их фармацевтически приемлемых солей и сольватов, где X1, X2, R1, R1', R2', R3', R4' и R5' соответствуют определению, приведенному для Формулы (Ia);
в том числе:
(a1) взаимодействие соединения Формулы (А)
где X1, X2, R1', R2', R3', R4' и R5' соответствуют определению, приведенному для Формулы (Ia);
с соединением Формулы (В)
где R1 соответствуют определению, приведенному для Формулы (Ia);
Y представляет собой галоген (предпочтительно иод, бром или хлор), алкилсульфонилокси, имеющий 1-6 атомов углерода (предпочтительно метилсульфонилокси или трифторметилсульфонилокси) или арилсульфонилокси, имеющий 6-10 атомов углерода (предпочтительно фенил- или р-толилсульфонилокси), или любую уходящую группу, известную специалистам в данной области техники.
Согласно одному варианту осуществления, стадия (a1) способа по настоящему изобретению может осуществляться в присутствии или в отсутствие оснований. В конкретном варианте осуществления стадию (a1) способа по настоящему изобретению проводят в присутствии оснований, выбранных из группы, включающей, в том числе, триэтиламин (ТЭА; TEA), N,N-Диизопропилэтиламин (DIPEA), пиридин, NaOH, K3PO4, K2CO3, Na2CO3, предпочтительно DIPEA или ТЭА.
Согласно одному варианту осуществления, стадия (a1) способа по настоящему изобретению может осуществляться в присутствии подходящего растворителя, такого, как, например, диметилформамид (ДМФА; DMF), диоксан, тетрагидрофуран (ТГФ; THF), вода или соответствующие смеси, предпочтительно в присутствии ДМФА.
Согласно одному варианту осуществления, стадия (a1) способа по настоящему изобретению может осуществляться при температуре в диапазоне от 20°С до приблизительно 180°С, с микроволновым облучением или без него, в течение периода, варьирующего в диапазоне от 10 минут до нескольких часов, например, от 10 минут до 24 часов.
Соединения формулы (В) могут быть получены в соответствии со следующей Схемой:
Стадия (b1): 5-Аминотиазоло[4,5-d]пиримидин-2,7(3Н,6Н)-дион может быть преобразован в 5-амино-7-гидрокси-3-(2-метоксиэтил)-2Н,3Н-[1,3]тиазоло[4,5-d]пиримидин-2-он.
Согласно одному варианту осуществления, стадия (b1) может осуществляться путем обработки 1-бром-2-метоксиэтаном, 1-йод-2-метоксиэтаном, 1 -мезил-2-метоксиэтаном или 1-тозил-2-метоксиэтаном, предпочтительно 1-бром-2-метоксиэтаном.
Согласно одному варианту осуществления, стадия (b1) способа по настоящему изобретению может осуществляться в присутствии или в отсутствие оснований. В конкретном варианте осуществления стадию (b1) проводят в присутствии оснований, таких как, например, трет-бутоксид натрия, трет-бутоксид калия, NaH, CsOH, NaOH, K2CO3, Na2CO3, предпочтительны трет-бутоксид натрия, трет-бутоксид калия, или NaH.
Согласно одному варианту осуществления, стадия (b1) способа по настоящему изобретению может осуществляться в присутствии подходящего растворителя, такого как ДМФА, диоксан, ТГФ, DMA, предпочтительно в присутствии ТГФ.
Согласно одному варианту осуществления, стадия (b1) способа по настоящему изобретению может осуществляться при температуре в диапазоне от 20°С до приблизительно 180°С, с микроволновым облучением или без него, в течение периода, варьирующего в диапазоне от 10 минут до нескольких часов, например, от 10 минут до 24 часов.
Стадия (b2): 5-амино-7-гидрокси-3-(2-метоксиэтил)-2Н,3Н-[1,3]тиазоло[4,5-d]пиримидин-2-он преобразован в 5-амино-7-хлор-3-(2-метоксиэтил)-2Н,3Н-[1,3]тиазоло[4,5-d]пиримидин-2-он.
Согласно одному варианту осуществления, стадия (b2) проходит в присутствии хлорирующего агента, такого, как, например, POCl3, PCl5, SOCl2, предпочтительно POCl3.
В соответствии с одним вариантом осуществления, стадия (b2) способа по настоящему изобретению проходит в присутствии или в отсутствие подходящего растворителя, предпочтительно в отсутствие растворителей.
Согласно одному варианту осуществления, стадия (b2) способа по настоящему изобретению проходит при температуре в диапазоне от 20°С до приблизительно 180°С, с микроволновым облучением или без него, в течение периода, варьирующего в диапазоне от 10 минут до нескольких часов, например, от 10 минут до 24 часов.
Стадия (b3):
5-амино-7-хлор-3-(2-метоксиэтил)-2Н,3H-[1,3]тиазоло[4,5-d]пиримидин-2-он может быть преобразован в соединение Формулы (D), где R1 соответствует определению, приведенному для Формулы (Ia), путем взаимодействия с соединением Формулы (С), где R1 соответствует определению, приведенному для Формулы (Ia).
Согласно одному варианту, стадия (b3) способа по настоящему изобретению проходит в присутствии подходящего основания.
Согласно одному варианту, стадия (b3) способа по настоящему изобретению проходит в присутствии или в отсутствие подходящего растворителя, такого, как этанол, пропанол, метанол, ТГФ, вода, диоксан или соответствующие смеси, предпочтительно в присутствии этанола.
Согласно одному варианту, стадия (b3) способа по настоящему изобретению может осуществляться при температуре в диапазоне от 20°С до приблизительно 180°С, с микроволновым облучением или без него, в течение периода, варьирующего в диапазоне от 10 минут до нескольких часов, например, от 10 минут до 24 часов.
Стадия (b4):
Соединение Формулы (D), где R1 соответствует определению для Формулы (Ia), может быть преобразовано в соединение Формулы (Е), где R1 соответствует определению для Формулы (Ia).
Согласно одному варианту, стадия (b4) способа по настоящему изобретению может осуществляться в присутствии N,O-Бис(триметилсилил)ацетамида.
Согласно одному варианту, стадия (b4) способа по настоящему изобретению может осуществляться в присутствии или в отсутствие гексаметилдисилазана.
Согласно одному варианту, стадия (b4) способа по настоящему изобретению может осуществляться в присутствии или в отсутствие подходящего растворителя, предпочтительно в отсутствие растворителя.
Согласно одному варианту, стадия (b4) способа по настоящему изобретению может осуществляться при температуре в диапазоне от 20°С до приблизительно 180°С, с микроволновым облучением или без него, в течение периода, варьирующего в диапазоне от 1 до нескольких часов, например, от 1 до 96 часов.
Стадия (b5):
Соединение Формулы (Е), где R1 соответствует определению для Формулы (Ia), может быть преобразовано в соединение Формулы (F), где R1 соответствует определению для Формулы (Ia).
Согласно одному варианту, стадия (b5) способа по настоящему изобретению может осуществляться в присутствии BBr3.
Согласно одному варианту, стадия (b5) способа по настоящему изобретению может осуществляться в присутствии или в отсутствие подходящего растворителя, такого, как дихлорметан (ДХМ; DCM), ТГФ, предпочтительно в присутствии ДХМ.
Согласно одному варианту, стадия (b5) способа по настоящему изобретению может осуществляться при температуре в диапазоне от -20°С до приблизительно 50°С, с микроволновым облучением или без него, в течение периода, варьирующего в диапазоне от 10 минут до нескольких часов, например, от 10 минут до 24 часов.
Стадия (b6):
Соединение Формулы (F), где R1 соответствует определению для Формулы (Ia), может быть преобразовано в соединение Формулы (В), где R1 и Y соответствуют определению для Формулы (Ia).
Согласно одному варианту, стадия (b6) способа по настоящему изобретению может осуществляться с использованием любого реагента, известного специалистам в данной области техники, для преобразования спирта в алкилгалогенид или в эфир алкилсульфоновой или арилсульфоновой кислоты, зависимости от природы Y, в том числе, например, тозилхлорид, мезилхлорид, трифторметансульфонилхлорид, трифторметансульфоновый ангидрид, SOCl2, SO2Cl2, POCl3, PCl5, предпочтительны тозилхлорид или мезилхлорид.
Согласно одному варианту, стадия (b6) способа по настоящему изобретению может осуществляться в присутствии подходящего основания, такого, например, как ТЭА или DIPEA.
Согласно одному варианту, стадия (b6) способа по настоящему изобретению может осуществляться в присутствии или в отсутствие подходящего основания, такого, как ДМФА, ДХМ, ТГФ, предпочтительно в присутствии ДМФА.
Согласно одному варианту, стадия (b6) способа по настоящему изобретению может осуществляться при температуре в диапазоне от -20°С до приблизительно 50°С, с микроволновым облучением или без него, в течение периода, варьирующего в диапазоне от 10 минут до нескольких часов, например, от 10 минут до 24 часов.
В целом, пути синтеза любого отдельного соединения Формулы (I) будут зависеть от конкретных заместителей каждой молекулы и от постоянной доступности необходимых промежуточных соединений. Подобные факторы могут быть оценены специалистами в данной области техники.
Согласно еще одному общему способу, соединения Формулы I могут быть превращены в альтернативные соединения Формулы I с использованием подходящих методов интерконверсии, хорошо известных специалисту в данной области техники.
Кроме того, соединения Формулы I и родственных формул могут быть получены высвобождением соединений Формулы I из одного из их функциональных производных путем обработки сольволизирующим или гидрогенолизирующим агентом.
Предпочтительными исходными материалами для сольволиза или гидрогенолиза являются те, которые соответствуют Формуле I и родственным формулам, но содержат соответствующие защищенные аминогруппы и/или гидроксильные группы вместо одной или более свободных аминогрупп и/или гидроксильных групп, предпочтительно те, которые несут аминозащитную группу вместо атома Н, связанного с атомом N, в частности, те, которые несут R*- N- группу, в которой R* обозначает аминозащитную группу, вместо HN-группы, и/или те, которые содержат гидроксил-защитную группу вместо атома Н гидроксильной группы, например, те, которые соответствуют Формуле I, но несут группу -COOR**, в которой R** обозначает гидроксил-защитную группу, вместо группы -СООН.
Также возможно присутствие в молекуле исходного материала множества идентичных или различных защищенных аминогрупп и/или гидроксильных групп. Если присутствующие защитные группы отличаются друг от друга, они во многих случаях могут подвергаться избирательному отщеплению.
Термин "аминозащитная группа" известен в общем смысле и относится к группам, которые пригодны для защиты (блокирования) аминогруппы от участия в химических реакцяхй, но которые легко удалить после того, как требуемая химическая реакция будет осуществлена в другом месте молекулы. Типичными для таких групп являются, в частности, незамещенные или замещенные ацильные, арильные, аралкоксиметильные или аралкильные группы. Поскольку аминозащитные группы удаляются после требуемой реакции (или последовательности реакций), их тип и размер не являются решающими. Однако предпочтение отдается группам, имеющим 1-20, в частности, 1-8 атомов углерода. Термин "ацильная группа" в отношении рассматриваемого способа следует понимать в более широком смысле. Он включает ацильные группы, полученные из алифатических, аралифитовых, ароматических или гетероциклических карбоновых кислот или сульфоновых кислот, и, в частности, алкоксикарбонильные, арилоксикарбонильные и, особенно, аралкоксикарбонильные группы. Примерами таких ацильных групп являются: алканоил, в частности, ацетил, пропионил и бутирил; аралканоил, в частности, фенилацетил; ароил, в частности, бензоил и толил; арилоксиалканоил, в частности, РОА; алкоксикарбонил, в частности, метокси-карбонил, этоксикарбонил, 2,2,2-трихлорэтоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил (БОК; ВОС) и 2-йодэтоксикарбонил; аралкоксикарбонил, в частности, CBZ ("карбобензокси"), 4-метоксибензилоксикарбонил и FMOC; и арилсульфонил, такой как Mtr. Предпочтительными аминозащитными группами являются БОК и Mtr, далее идут CBZ, Fmoc, бензил и ацетил.
Термин "гидроксил-защитная группа" также известен в общем смысле и относится к группам, которые пригодны для защиты гидроксильной группы от участия в химических реакциях, но легко удаляются после проведения требуемой химической реакции в другом месте молекулы. Типичными для таких групп являются вышеупомянутые незамещенные или замещенные арильные, аралкильные или ацильные группы, кроме того, алкильные группы. Природа и размер гидроксил-защитных групп не имеют решающего значения, так как они удаляются после желаемой химической реакции или последовательности реакций. Предпочтение отдается группам, имеющим 1-20, в частности, 1-10 атомов углерода. Примерами гидроксил-защитных групп являются, помимо прочих, бензил, 4-метоксибензил, п-нитробензоил, п-толуолсульфонил, трет-бутил и ацетил, где особое предпочтение отдается бензилу и трет-бутилу.
Соединения Формулы I и родственных формул отделяют от их функциональных производных - в зависимости от используемой защитной группы - при помощи, например, сильных неорганических кислот, таких, как соляная кислота, хлорная кислота или серная кислота, сильных органических карбоновых кислот, таких как трихлорэтановая кислота, трифторэтановая (трифторуксустная) кислота (ТФУК; TFA), или сульфоновых кислот, таких как бензол- или п-толуолсульфоновая кислота. Присутствие дополнительного инертного растворителя возможно, но не всегда необходимо. Подходящими инертными растворителями предпочтительно являются органические, например, карбоновые кислоты, такие как этановая кислота, простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диоксан, амиды, такие как ДМФА, галогенизированные углеводороды, такие как дихлорметан, а также спирты, такие как метанол, этанол или изопропанол, и вода. Кроме того, пригодны смеси вышеупомянутых растворителей. ТФУК предпочтительно используют в избытке без добавления дополнительного растворителя, а хлорную кислоту предпочтительно используют в виде смеси этановой кислоты и 70%-й хлорной кислоты в соотношении 9:1. Чтобы осуществить расщепление, реакцию следует проводить при температуре от приблизительно 0°С до приблизительно 50°С, предпочтительно от 15°С до 30°С (комнатная температура).
Отщепление групп БОК, OtBu и Mtr можно осуществить, например, используя, предпочтительно, ТФУК в дихлорметане или приблизительно 3-5н HCl в диоксане при 15-30°С, а группу FMOC можно отщепить, используя приблизительно 5-50%-й раствор диметиламина, диэтиламина или пиперидина в ДМФА при 15-30°С.
Защитные группы, которые могут быть удалены гидрогенолизом (например, CBZ, бензил, или удаление амидиногруппы из оксадиазольного производного), могут быть отщеплены, например, при помощи обработки водородом в присутствии катализатора (например, благородного металла, такого как палладий, преимущественно на носителе, таком как углерод). Подходящими растворителями здесь являются вышеуказанные растворители, в частности, например, спирты, такие как метанол или этанол, или амиды, такие как ДМФА. Гидрогенолиз обычно проводят при температурах от приблизительно 0°С до 100°С и давлении от приблизительно 1 до 200 бар, предпочтительно при 20-30°С и 1-10 бар. Гидрогенолиз группы CBZ успешно проходит, например, на 5-10% Pd/C в метаноле или с использованием формиата аммония (вместо водорода) на Pd/C в метаноле/ДМФА при 20-30°С.
Примерами подходящих инертных растворителей являются углеводороды, такие как гексан, петролейный эфир, бензол, толуол или ксилол; хлорированные углеводороды, такие как трихлорэтилен, 1,2-дихлорэтан, тетрахлорметан, трифторметилбензол, хлороформ или дихлорметан; спирты, такие как метанол, этанол, изопропанол, н-пропанол, н-бутанол или трет-бутанол; простые эфиры, такие как диэтиловый эфир, диизопропиловый эфир, ТГФ или диоксан; простые гликолевые эфиры, такие как монометиловый или моноэтиловый эфир этиленгликоля или диметиловый эфир этиленгликоля (диглим); кетоны, такие как ацетон или бутанон; амиды, такие как ацетамид, диметилацетамид, N-метилпирролидон (НМП; NMP), или ДМФА; нитрилы, такие как ацетонитрил; сульфоксиды, такие как диметилсульфоксид (ДМСО; DMSO); дисульфид углерода; карбоновые кислоты, такие как муравьиная кислота или этановая кислота; нитросоединения, такие как нитрометан или нитробензол; сложные эфиры, такие как этилацетат, или смеси указанных растворителей.
Сложные эфиры могут подвергаться гидролизиру, например, с использованием HCl, H2SO4, или с использованием LiOH, NaOH или KOH в воде, воде/ТГФ, воде/ТГФ/этаноле или воде/диоксане, при температурах между 0 и 100°С.
Кроме того, свободные аминогруппы могут быть ацилированы обычным способом с использованием ацилхлорида или ангидрида или алкилированы с использованием незамещенного или замещенного алкилгалогенида, преимущественно в инертном растворителе, таком как дихлорметан или ТГФ, и/или в присутствии основания, такого как триэтиламин или пиридин, при температурах от -60°С до +30°С.
В отношении методов установления и снятия защиты см. Philip J. Kocienski, "Protecting Groups", Georg Thieme Verlag Stuttgart, New York, 1994, и Theodora W. Greene и Peter G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley Interscience, 3rd Edition 1999.
Реакционные схемы, описанные в разделе «Примеры», носят исключительно иллюстративный характер и не должны рассматриваться как каким-либо образом ограничивающие настоящее изобретение.
Промежуточные соединения синтеза
Настоящее изобретение относится также к промежуточным соединениям синтеза Формулы (А)
и ее солей и сольватов, где:
R1' отсутствует, когда X1 представляет собой N; или когда X1 представляет собой С, R1' представляет собой Н, галоген, алкил, гетероциклил, алкокси, циклоалкилокси, гетероциклилокси, карбонил, алкилкарбонил, аминокарбонил, гидроксикарбонил, гетероциклилкарбонил, алкилсульфоксид, алкилсульфонил, аминосульфонилгетероциклилсульфонил алкилсульфонимидоил, карбониламино, сульфониламино или алкилсульфоналкил;
указанные заместители необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из оксо, галогено, гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гетероциклилалкила, гидроксиалкила, дигидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила, алкилсульфонила и алкилсульфоналкила;
R2' представляет собой Н, галоген, алкил, гетероциклил, алкокси, циклоалкилокси, гетероциклилокси, карбонил, алкилкарбонил, аминокарбонил арбонил, гетероциклилкарбонил, алкилсульфоксид, алкилсульфонил, аминосульфонил, гетероциклилсульфонил, алкилсульфонимидоил, карбониламино, сульфониламино или алкилсульфоналкил;
указанные заместители необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из оксо, галогено, гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гетероциклилалкила, гидроксиалкила, дигидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила, алкилсульфонила и алкилсульфоналкила;
или R1' и R2' образуют вместе с атомами, к которым они присоединены, 5-или 6-членное арильное кольцо, 5- или 6-членное гетероарильное кольцо, 5- или 6-членное циклоалкильное кольцо или 5- или 6-членное гетероциклильное кольцо; необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из оксо, галогено, гидрокси, циано, алкила, алкенила, альдегида, гетероциклилалкила, гидроксиалкила, дигидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, алкина, алкокси, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, алкенилкарбониламино, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, алкиламиноалкилкарбонила, диалкиламиноалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, алкенилкарбонила, алкинилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила, алкилсульфонила и алкилсульфоналкила;
R3' отсутствует, когда X2 представляет собой N; или когда X2 представляет собой С, R3' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F;
R4' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F; и
R5' представляет собой Н или галоген, предпочтительно Н или F.
Согласно одному варианту осуществления, промежуточные соединения синтеза Формулы (А), используемые в соответствии со способом по настоящему изобретению, выбираются из группы, включающей:
- 1-(4-((1Н-1,2,3-триазол-5-ил)метокси)-2-фторфенил)пиперазин;
- 1-(2-фтор-4-(проп-2-ин-1-илокси)фенил)пиперазин;
- 2-(2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)фенокси)ацетамид;
- (S)-1-(2-фтор-4-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин;
- (R)-1-(2-фтор-4-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин;
- (R,S)-1-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин;
- (S)-1-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин; и
- (R)-1-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин.
Области применения
Изобретение относится также к применению соединений по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей и сольватов в качестве ингибиторов А2А-рецепторов.
Соответственно, в особенно предпочтительном варианте осуществления, изобретение относится к применению соединений Формулы I и подформул, в частности, указанных в Таблице 1, приведенной выше, или их фармацевтически приемлемых солей и сольватов в качестве ингибиторов А2А-рецепторов.
Соответственно, в другом аспекте, изобретение относится к применению этих соединений или их солей и сольватов для синтеза фармацевтически активных ингредиентов, таких как ингибиторы А2А-рецепторов.
В соответствии со следующей признаком настоящего изобретения предложен способ модуляции активности А2А-рецепторов у пациента, предпочтительно теплокровного животного, еще более предпочтительно человека, нуждающегося в подобном лечении, который состоит во введении указанному пациенту эффективного количества соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и сольвата.
В одном варианте осуществления изобретение относится к применению соединений Формулы I и подформул, в частности, указанных в Таблице 1, приведенной выше, или их фармацевтически приемлемых солей и сольватов для повышения эффективности иммунного распознавания и разрушения раковых клеток.
Таким образом, соединения по настоящему изобретению применимы в качестве лекарственных средств, в частности, для профилактики и/или лечения онкологических заболеваний.
Изобретение относится также к способу лечения или профилактики онкологических заболеваний, который включает введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.
Изобретение также предусматривает применение соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли и сольвата для получения лекарственного средства для лечения и/или профилактики онкологических заболеваний.
Изобретение также предусматривает способ предотвращения развития онкологического заболевания у пациента, состоящий во введении пациенту, нуждающемуся в этом, фармацевтически эффективного количества соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли и сольвата.
Предпочтительно, пациент является теплокровным животным, более предпочтительно - человеком.
Известно множество видов онкологических заболеваний. Онкологическое заболевание может быть метастатическим или неметастатическим. Онкологическое заболевание может быть наследственным или спорадическим. В некоторых вариантах осуществления онкологическое заболевание выбирают из группы, состоящей из лейкемии и множественной миеломы. Дополнительные виды онкологических заболеваний, которые можно лечить с использованием способов по настоящему изобретению, включают, например, доброкачественные и злокачественные солидные опухоли и доброкачественные и злокачественные несолидные опухоли. В частном варианте осуществления онкологические заболевания выбраны из онкологических заболеваний молочной железы, шейки матки, колоректальных онкологических заболеваний, онкологических заболеваний эндометрия, карциномы, глиомы, онкологических заболеваний головы и шеи, печени, легкого, меланомы, онкологических заболеваний яичников, поджелудочной железы, предстательной железы, почек, желудка, щитовидной железы и уротелия. В частном варианте осуществления онкологическое заболевание представляет собой рак молочной железы. В частном варианте осуществления онкологическое заболевание представляет собой карциному. В частном варианте осуществления онкологическое заболевание представляет собой рак шейки матки. В частном варианте осуществления онкологическое заболевание представляет собой колоректальный рак. В частном варианте осуществления онкологическое заболевание представляет собой рак эндометрия. В частном варианте осуществления онкологическое заболевание представляет собой глиому. В частном варианте осуществления онкологическое заболевание представляет собой раковые образования головы и шеи. В частном варианте осуществления онкологическое заболевание представляет собой рак печени. В частном варианте осуществления онкологическое заболевание представляет собой рак легких. В частном варианте осуществления онкологическое заболевание представляет собой меланому. В частном варианте осуществления онкологическое заболевание представляет собой рак яичников. В частном варианте осуществления онкологическое заболевание представляет собой рак поджелудочной железы. В частном варианте осуществления онкологическое заболевание представляет собой рак предстательной железы. В частном варианте осуществления онкологическое заболевание представляет собой рак почек. В частном варианте осуществления онкологическое заболевание представляет собой рак желудка. В частном варианте осуществления онкологическое заболевание представляет собой рак щитовидной железы. В частном варианте осуществления онкологическое заболевание представляет собой рак уротелия.
Примеры солидных опухолей включают, в числе прочих: рак желчных протоков, рак мозга (включая глиобластомы и медуллобластомы), рак молочной железы, карциному, рак шейки матки, хориокарциному, рак толстой кишки, колоректальный рак, рак эндометрия, рак пищевода, рак желудка, глиому, раковые образования головы и шеи, внутриэпителиальную неоплазию (включая болезнь Боуэна и болезнь Пэджета), рак печени, рак легких, нейробластомы, рак ротовой полости (включая плоскоклеточную карциному), рак яичников (в том числе, развивающийся из клеток эпителия, стромальных клеток, зародышевых клеток и клеток мезенхимы), рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак прямой кишки, рак почек (включая аденокарциному и опухоль Вильмса), саркомы (включая лейомиосаркому, рабдомиосаркому, липосаркому, фибросаркому и остеосаркому), рак кожи (включая меланому, саркому Капоши, базально-клеточный рак и плоскоклеточный рак), рак яичек, включая герминогенные опухоли (семиномы и несеминомы, например, тератомы и хориокарциномы), стромальные опухоли, опухоли из зародышевых клеток, рак щитовидной железы (включая аденокарциному щитовидной железы и медуллярную карциному) и рак уротелия.
Примеры солидных опухолей включают, в числе прочих: рак желчных протоков, рак мозга (включая глиобластомы и медуллобластомы), рак молочной железы, рак шейки матки, хориокарциному, рак толстой кишки, рак эндометрия, рак пищевода, рак желудка, внутриэпителиальную неоплазию (включая болезнь Боуэна и болезнь Пэджета), рак печени, рак легких, нейробластомы, рак ротовой полости (включая плоскоклеточную карциному), рак яичников (в том числе, развивающийся из клеток эпителия, стромальных клеток, зародышевых клеток и клеток мезенхимы), рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак прямой кишки, рак почек (включая аденокарциному и опухоль Вильмса, саркомы (включая лейомиосаркому, рабдомиосаркому, липосаркому, фибросаркому и остеосаркому), рак кожи (включая меланому, саркому Капоши, базально-клеточный рак и плоскоклеточный рак), рак яичек, включая герминогенные опухоли (семиномы и несеминомы, например, тератомы и хориокарциномы), стромальные опухоли, опухоли из зародышевых клеток и рак щитовидной железы (включая аденокарциному щитовидной железы и медуллярную карциному).
Примеры несолидных опухолей включают, в числе прочих, гематологические неоплазии. В контексте настоящего документа гематологическая неоплазия это специальный термин, который охватывает лимфоидные заболевания, миелоидные заболевания, и лейкемии, связанные со СПИДом.
Лимфоидные заболевания включают, в числе прочих, острую лимфоцитарную лейкемию и хронические лимфопролиферативные заболевания (например, лимфомы, миеломы и хронические лимфоидные лейкозы). Лимфомы включают, например, болезнь Ходжкина, неходжкинские лимфомы и лимфоцитарные лимфомы. Хронические лимфоидные лейкозы включают, например, Т-клеточные хронические лимфоидные лейкозы и В-клеточные хронические лимфоидные лейкозы.
Кроме того, изобретение относится к применению соединений по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей или сольватов для профилактики и/или лечения фиброза, вызванного радиоактивным облучением, заболеваний соединительной ткани (таких как, например, синдром Шегрена, т.е. склеродермия), хронической бактериальной инфекции (такой как, например, Helicobacter Pylori), аномального рубцевания (келоидов) и полимикробного сепсиса.
Изобретение также относится к способу лечения или профилактики фиброза, вызванного радиоактивным облучением, заболеваний соединительной ткани (таких как, например, синдром Шегрена, т.е. склеродермия), хронической бактериальной инфекции (такой как, например, Helicobacter Pylori), аномального рубцевания (келоидов) и полимикробного сепсиса, состоящему во введении млекопитающему, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.
Кроме того, изобретение предусматривает применение соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли и сольвата для получения лекарственного средства для лечения и/или предотвращения фиброза, вызванного радиоактивным облучением, заболеваний соединительной ткани (таких как, например, синдром Шегрена, т.е. склеродермия), хронической бактериальной инфекции (такой как, например, Helicobacter Pylori), аномального рубцевания (келоидов) и полимикробного сепсиса.
Изобретение также предусматривает способ предотвращения развития у пациента фиброза, вызванного радиоактивным облучением, заболеваний соединительной ткани (таких как, например, синдром Шегрена, т.е. склеродермия), хронической бактериальной инфекции (такой как, например, Helicobacter Pylori), аномального рубцевания (келоидов) и полимикробного сепсиса, состоящий во введении фармацевтически эффективного количества соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли и сольвата пациенту, нуждающемуся в этом.
Лекарственные препараты
Настоящее изобретение предусматривает также фармацевтические композиции, содержащие соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемую соль и сольват и, по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель, наполнитель и/или адъювант. Как указано выше, изобретение охватывает также фармацевтические композиции, которые содержат, в дополнение к соединению по настоящему изобретению, его фармацевтически приемлемую соль и сольват в качестве активного ингредиента, дополнительные терапевтические агенты и/или активные ингредиенты.
Другой целью настоящего изобретения является лекарственное средство, содержащее, по меньшей мере, одно соединение по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль и сольват в качестве активного ингредиента.
В соответствии с дополнительным признаком настоящего изобретения предлагается применение соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли и сольвата с целью получения лекарственного средства для модуляции активности А2А-рецепторов у пациента, нуждающегося в подобном лечении, которое состоит во введении указанному пациенту эффективного количества соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и сольвата.
В целом, для фармацевтического использования, соединения по настоящему изобретению могут входить в состав фармацевтического препарата, содержащего, по меньшей мере, одно соединение по настоящему изобретению и, по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель, наполнитель и/или адъювант, и необязательно одно или несколько дополнительных фармацевтически активных соединений.
Используя неограничивающие примеры, такой препарат может быть в форме, подходящей для перорального введения, для парентерального введения (например, внутривенного, внутримышечного или подкожного введения или внутривенного вливания), для местного введения (включая область глаз), для введения путем ингаляции, при помощи кожного пластыря, имплантата, суппозитория, и т.д. Подобные подходящие лекарственные формы - которые могут быть твердыми, полутвердыми или жидкими, в зависимости от способа введения, - а также используемые для их изготовления методы и носители, разбавители и эксципиенты, будут известны специалисту в данной области; настоящим мы ссылаемся на последнее издание Remington's Pharmaceutical Sciences.
Некоторые предпочтительные, но не ограничивающие примеры таких препаратов включают таблетки, пилюли, порошки, пастилки, саше, облатки, настойки, суспензии, эмульсии, растворы, сиропы, аэрозоли, мази, кремы, лосьоны, мягкие и твердые желатиновые капсулы, суппозитории, капли, стерильные растворы для инъекций и стерильные пакетированные порошки (которые обычно восстанавливают перед использованием) для болюсного введения и/или для продолжительного введения, которые могут находиться в готовой смеси с носителями, наполнителями и разбавителями, подходящими, как таковые, для подобных композиций, например, лактозой, декстрозой, сахарозой, сорбитом, маннитом, крахмалом, гуммиарабиком, фосфатом кальция, альгинатами, трагакантом, желатином, силикатом кальция, микрокристаллической целлюлозой, поливинилпирролидоном, полиэтиленгликолем, целлюлозой, (стерильной) водой, метилцеллюлозой, метил- и пропилгидробензоатом, тальком, стеаратом магния, пищевыми маслами, растительными маслами и минеральными маслами или соответствующими смесями таковых. Композиции могут необязательно содержать другие вещества, которые обычно используются в фармацевтических композициях, например, смазывающие вещества, смачивающие вещества, эмульгирующие и суспендирующие вещества, диспергирующие вещества, дезинтегранты, объемообразующие агенты, наполнители, консерванты, подсластители, ароматизаторы, регуляторы текучести, регуляторы высвобождения, и т.д. Композиции также могут быть составлены таким образом, чтобы обеспечить быстрое, замедленное или отсроченное высвобождение содержащегося в них активного соединения (соединений).
Фармацевтические препараты по настоящему изобретению существуют, предпочтительно, в виде дозированной лекарственной формы и могут быть соответствующим образом упакованы, например, в коробку, блистер, флакон, бутылку, саше, ампулу или в любой другой подходящий сосуд или контейнер с одной или несколькими дозами (который может быть надлежащим образом промаркирован); необязательно в сопровождении одного или нескольких вкладышей, содержащих информацию о продукте и/или инструкцию по применению.
В зависимости от заболевания, которое необходимо предотвратить или лечить, а также способа введения, активное соединение по настоящему изобретению может вводиться в виде однократной суточной дозы; разделенным на одну или более суточных доз; или непрерывно, например, с использованием капельной инфузии.
Краткое описание чертежей
Фигура 1 представляет собой график, показывающий процент цитокинов, высвобождаемых в лимфоцитах периферической крови в присутствии агониста А2а-рецепторов CGS24680, в зависимости от концентрации соединения 7 по настоящему изобретению. ФИГ. 1А относится к культурам клеток цельной крови, стимулированным липополисахаридом, а ФИГ. 1В относится к культурам клеток цельной крови, стимулированным aнти-CD3/CD28.
Фигура 2 представляет собой график, показывающий процент ингибирования pCREB в лимфоцитах периферической крови в зависимости от концентрации соединения 4 по настоящему изобретению.
Фигура 3 представляет собой график, показывающий процент цитотоксичности в зависимости от концентрации соединений 4 и 31 по настоящему изобретению.
Примеры
Настоящее изобретение будет более понятным со ссылкой на следующие примеры. Эти примеры являются репрезентативными для конкретных вариантов осуществления изобретения и не предназначены для ограничения объема изобретения.
Используются следующие сокращения:
БОК (Вос): трет-Бутоксикарбонил,
БСА (BSA): Бис(триметилсилил)ацетамид или бычий сывороточный альбумин, в зависимости от контекста,
Соед. (Cpd): Соединение,
DavePhos: 2-Дициклогексилфосфино-2'-бифенил,
ДХМ (DCM): Дихлорметан,
DIPEA: N,N-диизопропилэтиламин,
ДМФА (DMF): Диметилформамид,
ДМСО (DMSO): Диметилсульфоксид,
Экв. (eq.): Эквивалент(ы),
EtOAc: Этилацетат,
г: Грамм(ы),
ч: Час(ы),
ЧСА (HSA): Человеческий сывороточный альбумин,
ВЭЖХ (HPLC): Высокоэффективная жидкостная хроматография,
ГМДС (HMDS): Гексаметилдисилазан,
л: Литр(ы),
ЖХМС (LCMS): Жидкостная хроматография - масс-спектрометрия
LHMDS: Бис(триметилсилил)амид лития,
М: моль/л,
МеОН: Метанол,
мкг: Микрограмм(ы),
мкмоль: Микромоль (микромоли),
мкл: Микролитр(ы),
мг: Миллиграмм(ы),
мл: Миллилитр(ы),
ммоль: Миллимоль (миллимоли),
мМ: ммоль/л,
мин: Минута (минуты),
моль: Моль (моли),
н. (N): Нормальность,
N2: Азот,
нг: Нанограмм(ы),
нМ: нмоль/л,
НМП (НМП): N-Метил-2-пирролидон,
ЯМР (NMR): Спектроскопия ядерного магнитного резонанса,
Колич. (quant.): Количественный (выход),
СФХ (SFC): Сверхкритическая жидкостная хроматография,
кт или КТ (rt или RT): Комнатная температура,
tBu: трет-бутил,
ТЭА (TEA): Триэтиламин,
ТФУК (TFA): Трифторэтановая (трифторуксусная) кислота,
ТГФ (THF): Тетрагидрофуран,
ТСХ (TLC): Тонкослойная хроматография,
ПВС (VTD): Полочная вакуумная сушилка.
I. Примеры в области химии
Данные масс-спектрометрии, представленные в примерах, описанных ниже, были получены следующим образом:
Данные ЖХМС были получены с использованием Agilent 6130 или 6130В multimode (ESI+APCI).
Методы ЖХМС:
Колонка: XBridge С8 (50X4.6 мм) 5 мкм; Метод: А: 0.1% ТФУК в Н2О, В: 0.1% ТФУК в ацетонитриле (ACN), Скорость потока: 2.0 мл/мин.
Колонка: Zorbax extend С18 (50X4.6 мм) 5 мкм; Метод: А: 10 мМ NH4OAC в Н2О, В: ACN, Скорость потока: 1.2 мл/мин.
Колонка: Zorbax XDB С18 (50X4.6 мм) 3.5 мкм; Метод: А: 0.1% НСООН в H2O, В: ACN, Скорость потока: 1.5 мл/мин.
Колонка: XBridge С8 (50X4.6 мм) 3.5 мкм; Метод: А: 10 мМ NH4HCO3 в Н2О, В: ACN, Скорость потока: 1.2 мл/мин.
Данные ЯМР, представленные в примерах, описанных ниже, были получены следующим образом: 1Н-ЯМР: Bruker DPX 400 МГц. Сокращения для мультиплетности, наблюдаемой в ЯМР-спектрах: s (синглет), d (дублет), t (триплет), q (квадруплет), m (мультиплет), br (широкий).
Чистота оценивалась любым из методов ВЭЖХ:
Метод XB0595TF; КОЛОНКА: XBridge С8 (50X4.6) мм, 3.5 мкм; Градиент элюентов от 0.1% ТФУК в H2O до 0.1% ТФУК в ACN, Скорость потока: 2.0 мл/мин.
Метод: АМ9010А3; КОЛОНКА: Phenomenex gemini NX - С18 (150X4.6), 3.0 мкм; Градиент элюентов от 10 мМ ацетата аммония в воде до ACN, Скорость потока: 1.0 мл/мин.
Метод: XB0595NHC; КОЛОНКА: XBridge С8 (50X4.6) мм, 3.5 мкм; Градиент элюентов от 10 мМ бикарбоната аммония в воде до ACN, Скорость потока: 1.0 мл/мин.
Растворители, реагенты и исходные материалы закупались и использовались в том виде, в каком они были получены от коммерческих поставщиков, если не указано иное.
Названия нижеописанным промежуточным продуктам и соединениям были присвоены с использованием ChemBioDraw® Ultra, версия 12.0 (PerkinElmer).
I.1. Синтез промежуточных соединений
Промежуточное соединение 1: 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло [1,5-с] пиримидин-3(2Н)-ил)этилметансульфонат
Стадия 1: 2,6-диамино-5-тиоцианатопиримидин-4-ол
К перемешиваемому раствору этановой кислоты (27 500 мл) в реакторе при 25-30°С в атмосфере азота добавляют 2,6-диаминопиримидин-4-ол (500 г). Медленно добавляют тиоцианат калия (1 586 г) и температуру повышают до 90±5°С, пока реакционная масса не становится прозрачным раствором. Как только она становится прозрачным раствором, реакционную смесь охлаждают до 15±5°С и по каплям добавляют бром (633 г) в этановой кислоте (750 мл), перемешивают в течение 2 ч при той же температуре. После завершения реакции реакционную смесь нейтрализуют, используя водный раствор аммиака (9 000 мл), и перемешивают в течение 16 ч при 20±5°С. Образовавшийся осадок отфильтровывают и промывают водой (2 500 мл) и метанолом (1 000 мл). Влажный материал сушат в ПВС при 70°С в течение 24 часов, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества бледно-желтого цвета (206 г, колич.). ЖХМС: 184.3 [М+1]+. 1H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.36 (s, 1H), 7.03 (s, 2Н), 6.64 (bs, 2Н).
Стадия 2: 2,5-диаминотиазоло[4,5-(1]пиримидин-7-ол
К перемешиваемому раствору 2,6-диамино-5-тиоцианато-пиримидин-4-ола (стадия 1) (750 г; 4,09 моль) в ТГФ (15 л) добавляют фторид тетрабутиламмония (1M в ТГФ, 6 750 мл) и реакционную массу нагревают до 64±3°С в течение 24 часов. После завершения реакции реакционную смесь охлаждают до 25±5°С в течение 1 часа. Образовавшийся осадок отфильтровывают и промывают ТГФ (2,25 л). Влажное твердое вещество растворяют в воде (6 л) и добавляют концентрированную соляную кислоту (1,5 л). Реакционную смесь перемешивают в течение 4 часов. Реакционную смесь фильтруют и твердый остаток промывают водой (3,75 л) и сушат в течение 1 часа. Влажный материал обрабатывают водой (6 л) и добавляют бикарбонат натрия (3 кг). Реакционную массу перемешивают в течение 4 часов, фильтруют, промывают водой (3,75 л) и сушат в ПВС в течение 16 часов, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (580 г; 78%). ЖХМС: 184.2 [M+1]+. 1H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.84 (s, 1H), 7.89 (s, 2Н), 6.46 (s, 2Н).
Стадия 3: 5-амино-7-гидрокситиазоло [4,5-d] пиримидин-2(3Н)-он
Горячую (80°С) смесь 2,5-диаминотиазоло [4,5-d] пиримидин-7-ола (стадия 2; 570 г, 3,11 моль) и NaNO2 (570 г; 8,26 моль) в воде (5700 мл)) медленно добавляют к горячему раствору (80°С) конц. HCl (11 400 мл, 15 об.). Реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч, завершение реакции контролируют с помощью ВЭЖХ. После завершения реакции смесь охлаждают до 15°С и подщелачивают до рН 12 с помощью гранул NaOH. Реакционную массу нагревают до 80°С в течение 2 часов, затем охлаждают до 35°С и рН доводят до 5-6, используя концентрированную соляную кислоту. Выпавшее в осадок твердое вещество отфильтровывают, промывают водой (5 об.) и сушат в ПВС, получая продукт в виде твердого вещества бледно-коричневого цвета (286 г, 51%). ЖХМС: 185.6 [M+1]+. 1H-HMP (400 МГц, ДМСО-d6): δ 12.08 (s, 1Н), 11.10 (s, 1Н), 6.88 (s, 2Н).
Стадия 4: 5-амино-3-(2-метоксиэтил)тиазоло[4,5-d]пиримидин-2,7 (3Н, 4Н)-дион
5-амино-7-гидрокситиазоло [4,5-d] пиримидин-2(3Н)-он (36,2 г; 0,196 моль, 1 экв) в сухом ДМФА (600 мл) нагревают до 90°С в герметичной пробирке. Реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин при 90°С, затем охлаждают до 30°С. К этой реакционной смеси медленно добавляют 60% NaH (10,4 г, 1,1 экв) и перемешивают в течение 30 мин с последующим добавлением 1-бром-2-метоксиэтана (32,83 г, 1,1 экв). Реакционную смесь снова нагревают до 100°С. Завершение реакции контролируют с помощью ТСХ. После завершения реакции реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, полностью концентрируют и очищают методом хроматографии на колонке с использованием ДХМ / метанола (90:10) с получением искомого соединения в виде белого твердого вещества (20 г, 41%). ЖХМС: 243.6 [М+1]+. 1H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 11.10 (s, 1H), 6.92 (bs, 2H), 3.93 (t, J=6 Гц, 2H), 3.57 (t, J=6 Гц, 2H), 3.23 (s, 3H).
Стадия 5: 5-амино-7-хлор-3-(2-метоксиэтил)тиазоло[4,5-d]пиримидин-2(3Н)-он
5-амино-7-гидрокси-3- (2-метоксиэтил) тиазоло [4,5-d] пиримидин-2 (3Н) -он (10 г, 0,0412 моль) обрабатывают POCl3 (100 мл) и нагревают до 90°С в течение 18 часов в герметичной пробирке. Завершение реакции контролируют с помощью ТСХ. После завершения реакции реакционную смесь концентрируют и добавляют ледяную воду. рН реакционной смеси доводят до 7, используя для этого NaHCO3 и экстрагируют с помощью ДХМ. Органический слой отделяют, сушат над Na2SO4, фильтруют и концентрируют, получая бледно-желтое твердое вещество, которое используют на следующей стадии без дополнительной очистки (6,8 г, 63%). ЖХМС: 261.2 [М+1]+. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.37 (s, 2Н), 4.01 (t, J=5.6 Гц, 2Н), 3.62 (t, J=5.6 Гц, 2Н), 3.23 (s, 3Н).
Стадия 6: N'-(5-амино-3-(2-метоксиэтил)-2-оксо-2,3-дигидротиазоло [4,5-d] пиримидин-7-ил)фуран-2-карбогидразид
К 5-амино-7-хлор-3- (2-метоксиэтил) тиазол [4,5-d] пиримидин-2 (3Н)-ону (6,8 г; 0,026 моль) в этаноле добавляют гидразид пирослизевой кислоты (4,9 г; 0,039 моль) и нагревают до 100°С в закрытой пробирке в течение 19 часов. Реакцию контролируют с помощью ТСХ. После завершения реакции реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, концентрируют при пониженном давлении. К остатку добавляют петролейный эфир с получением твердого вещества, которое отфильтровывают и используют на следующей стадии без дополнительной очистки (7,2 г, 79%). ЖХМС: 351.2 [М+1]+.
Стадия 7: 5-амино-8-(фуран-2-ил)-3-(2-метоксиэтил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
N'-(5-амино-3-(2-метоксиэтил)-2-оксо-2,3-дигидротиазоло[4,5-d]пиримидин-7-ил) фуран-2-карбогидразид (7,2 г; 0,20 моль) обрабатывают БСА (50,8 мл; 11 экв) и ГМДС (76 мл, 25 экв). Реакционную смесь нагревают до 127°С в течение 20 часов. После завершения реакции реакционную смесь охлаждают до 0°С и добавляют метанол (30 мл). Твердое вещество, которое выпало в осадок, отфильтровывают и промывают петролейным эфиром, получая твердое вещество грязно-белого цвета, которое используют на следующей стадии без дополнительной очистки (5,9 г, 87%). ЖХМС: 333.2 [М+1]+.
Стадия 8: 5-амино-8-(фуран-2-ил)-3-(2-гидроксиэтил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
К раствору 5-амино-8- (фуран-2-ил) -3- (2-метоксиэтил) тиазоло [5,4-е] [1,2,4] триазоло [1,5-с] пиримидин- 2 (3Н) -она (5,9 г; 0,017 моль) в сухом ДХМ (100 мл) при -50°С медленно добавляют BBr3 (11,5 г; 2,6 экв) и выдерживают в течение 19 часов при 25-30°С. Реакцию контролирую с помощью ТСХ. После завершения реакции реакционную смесь гасят охлажденной водой (100 мл), затем нейтрализуют 10%-ным раствором бикарбоната натрия, фильтруют и промывают водой, получая бледно-желтое твердое вещество, которое используют на следующей стадии без дополнительной очистки (3,6 г, 65%). ЖХМС: 319.2 [М+1]+. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (s, 2Н), 7.95 (d, J=0.8 Гц, 1Н), 7.24 (t, J=2.8 Гц, 1Н), 6.74-6.74 (m, 1Н), 4.94 (t, J=5.6 Гц, 1Н), 4.01 (t, J=6.4 Гц, 2Н), 3.71 (t, J=6.0 Гц, 2Н).
Стадия 9: 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этилметансульфонат
5-амино-8- (фуран-2-ил) -3- (2-гидроксиэтил) тиазоло [5,4-е] [1,2,4] триазоло [1,5-с] пиримидин-2 (3Н) -он (3,6 г; 0,011 моль) растворяют в сухом ДМФА (95 мл) при 60°С до тех пор, пока реакционная смесь не становится прозрачной. Реакционную массу охлаждают до 0°С и добавляют ТЭА (3 г, 3 экв), а затем мезилхлорид (1,6 г; 1,3 экв). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 48 часов. После завершения реакции добавляют этилацетат (100 мл) и воду (50 мл) и экстрагируют. Органический слой сушат над Na2SO4, фильтруют и выпаривают, получая искомое соединение в виде твердого вещества желтого цвета, которое является аналитически чистым для использования на следующей стадии (3,0 г, 67%). ЖХМС: 397.2 [М+1]+. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.37 (s, 2Н), 7.95 (s, 1Н), 7.25 (d, J=3.6 Гц, 1Н), 6.74-6.74 (m, 1Н), 4.56 (t, J=5.2 Гц, 2Н), 4.26 (t, J=4.8 Гц, 2Н), 3.16 (s, 3Н).
Промежуточное соединение 2: 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)-ацетальдегид
К перемешиваемому раствору 5-амино-8- (фуран-2-ил) -3- (2-гидроксиэтил) тиазоло [5,4-е] [1,2,4] триазоло- [1,5-с] пиримидин-2 (3Н) -она (приготовлен по протоколу, описанному для Промежуточного соединения 1, стадия 8, 3,6 г; 10,74 ммоль) в ТГФ (150 мл) добавляют раствор йодоксибензойной кислоты (IBX) (15,04 г; 53,72 ммоль) в ДМСО (35 мл). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 6 часов. Реакционную смесь разбавляют ДХМ и слои разделяют. Органический слой последовательно промывают насыщенным раствором NaHCO3 и насыщенным солевым раствором. Затем сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный остаток (3,0 г, 75%) используют на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХМС 317 [М+1]+.
I.2. Синтез конечных соединений
Пример 1: 3-(2-(4-(4-((1H-1,2,3-триазоло-4yl)метокси-2фторфенил)пиперазин-1-ил)этил)-5-амино-(8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3H)-он
Стадия 1: трет-бутил 4-(2-фтор-4-гидроксифенил)пиперазин-1-карбоксилат (2)
К смеси 4-бром-3-фторфенола (10 г; 0,052 моль), трет-бутилпиперазин-1-карбоксилата (11,70 г; 0,063 моль), 2-дициклогексилфосфино-2'-бифенила (0,515 г; 0,001 моль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладия (Pd2(dba)3) (0,958 г; 0,001 моль) добавляют бис (триметилсилил) амид лития (115 мл 1,0 М раствора в ТГФ, 0,115 моль) при 0°С в атмосфере азота. Реакционную смесь нагревают при 65°С в течение 24 ч под контролем ТСХ. Неочищенную реакционную смесь нейтрализуют насыщенным NH4Cl и экстрагируют этилацетатом (2×100 мл). Объединенный органический слой концентрируют и очищают хроматографией на колонке с получением указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества (2,25 г, 14,5%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 296.15; наблюдаемое: 297.2 (М+1).
Стадия 2: трет-бутил 4-(2-фтор-4-(проп-2-ин-1-илокси)фенил)пиперазин-1-карбоксилат (3)
К перемешиваемой суспензии гидрида натрия (0,7 г; 0,0304 моль) в ДМФА (10 мл) добавляют трет-бутил-гидроксифенил)пиперазин-1-карбоксилат (2; 4 г; 0,0152 моль) в ДМФА (20 мл) при 0°С в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают в течение 15 мин при 0°С, а затем добавляют пропаргилбромид (2,71 г; 0,0228 моль) в ДМФА (10 мл) и перемешивают в течение 16 ч при комнатной температуре. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь обрабатывают насыщенным NH4Cl (20 мл) и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке (40% этилацетат / гексан в качестве элюента) с получением трет-бутил-4- (2-фтор-4-(проп-2-ин-1-илокси) фенил) пиперазин-1-карбоксилата в виде вязкой жидкости коричневого цвета (3,6 г, 70,8%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 334.17; наблюдаемое: 335.2 (М+1).
Стадия 3: 1-(2-фтор-4-(проп-2-ин-1-илокси)фенил)пиперазин (4)
К перемешиваемому раствору трет-бутил 4- (2-фтор-4- (проп-2-ин-1-илокси) фенил) пиперазин-1-карбоксилата (3; 3,6 г; 10,8 ммоль) в дихлорметане (15 мл) при 0°С по каплям добавляют 4 н. HCl в диоксане (20 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 4 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Соль нейтрализуют раствором бикарбоната натрия, экстрагируют ДХМ и объединенные органические слои промывают рассолом, сушат над сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении, получая 1- (2-фтор-4-(проп-2-ин-1-илокси) фенил) пиперазин в виде твердого вещества коричневого цвета (2,5 г, 99,2%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 234.12; наблюдаемое: 235.2 (М+1).
Стадия 4: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-(проп-2ин-1-илоху)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он (5)
К смеси 1- (2-фтор-4- (проп-2-ин-1-илокси) фенил) пиперазина (4;1 г; 4,3 ммоль) и 2- (5-амино-8- (фуран-2) -ил) -2-оксотиазоло [5,4-е] [1,2,4] триазоло [1,5-с] пиримидин-3 (2Н) -ил) этилметансульфоната (0,9 г; 2,2 ммоль) в N,N-диметилформамиде (15 мл) добавляют DIPEA (0,6 мл; 6,8 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при 120°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ и ЖХМС) реакционную массу концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт промывают смесью диэтилового эфира и ацетонитрила, получая 5-амино-3- (2- (4- (2-фтор-4- (проп-2ин-1-илокси) фенил) пиперазин-1-ил) этил) -8- (фуран-2-ил) тиазоло [5,4-е] [1,2,4] триазоло [1,5-с] пиримидин-2 (3Н)-он в виде твердого вещества коричневого цвета (0,7 г, 57,8%); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 92.63%; ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 534.16; наблюдаемое: 534.8 (М+1).
Стадия 5: 3-(2-(4-(4-((1Н-1,2,3-триазоло-4ил)метокси-2фторфенил)пиперазин-1-ил)этил)-5-амино-(8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4] триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он (Соединение 1)
К перемешиваемому раствору 5-амино-3- (2- (4- (2-фтор-4- (проп-2ин-1-илокси) фенил) пиперазин-1-ил) этил) -8- (фуран-2 -ил) тиазоло [5,4-е] [1,2,4] триазоло [1,5-с] пиримидин-2 (ЗН) -она (5; 0,4 г, 0,7 моль) в ДМФА (4,5 мл) и метаноле (0,5 мл) добавляют иодид меди (0,030 г; 0,014 ммоль) при комнатной температуре. К реакционной смеси по каплям добавляют триметилсилилазид (0,2 мл; 1,4 ммоль) в атмосфере азота при 0°С и нагревают до 100°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь экстрагируют этилацетатом (2×20 мл) и объединенные органические слои промывают рассолом, сушат над сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Продукт обогащают путем промывания диэтиловым эфиром и ацетонитрилом (50:50), получая соединение 1: 3- (2- (4- (4 - ((1Н-1,2,3-триазол-4-ил) метокси)) -2-фторфенил) -пиперазин-1-ил) этил) -5-амино-8- (фуран-2-ил) тиазоло [5,4-е] [1,2,4] триазоло [1,5- с] пиримидин-2 (3Н) -он в виде твердого вещества коричневого цвета (0,115 г, 26,6%). Чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 92.08%; ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 577.18; наблюдаемое: 578.0 (М+1); 1H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 15.12 (brs, 1Н), 8.32 (brs, 2Н), 7.96 (s, 2Н), 7.24 (d, J=3.2 Гц, 1Н), 6.96-6.89 (m, 2Н), 6.79-6.73 (m, 2Н), 5.13 (s, 2Н), 4.08 (t, J=6.0 Гц, 2Н), 2.86 (m, 4Н), 2.72-2.63 (m, 6Н).
Пример 2: 5-((4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси) метил)-1,3,4-оксадиазол-2(3Н)-он
Стадия 1: трет-бутил 4-(4-(2-этокси-2-оксоэтокси)-2-фторфенил)пиперазин-1-карбоксилат (2)
К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-(2-фтор-4-гидроксифенил) пиперазин-1-карбоксилата (1; 2 г; 6,75 ммоль) и этилбромацетата (1,67 г; 10,0 ммоль) в N,N-диметилформамиде (15 мл) добавляют K2CO3 (2,76 г; 20,0 ммоль) и реакционную смесь нагревают при 90°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь разбавляют водой (20 мл) и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке (20% этилацетат / гексан в качестве элюента) с получением продукта в виде коричневой жидкости (1,9 г, 73,6%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 382.19; наблюдаемое: 383.0 (М+1).
Стадия 2: этил 2-(3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенокси)ацетат (3)
К охлажденному льдом раствору трет-бутил-4-(4-(2-этокси-2-оксоэтокси)-2-фторфенил)пиперазин-1-карбоксилата (2; 1,9 г; 5,0 ммоль) в дихлорметане добавляют 4 н. HCl в диоксане (15 мл) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную массу гасят насыщенным раствором бикарбоната натрия, а затем экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая продукт в виде коричневой жидкости (1,00 г, 71,4%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 282.14; наблюдаемое: 283.1 (М+1).
Стадия 3: этил 2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)ацетат (4)
К смеси этил 2- (3-фтор-4- (пиперазин-1-ил) фенокси) ацетата (3; 1,0 г; 3,52 ммоль) и 2- (5-амино-8- (фуран-2-ил) -2-оксотиазоло [5,4-е] [1,2,4] триазоло [1,5-с] пиримидин-3 (2Н) -ил) этилметансульфоната (1,12 г; 2,82 ммоль) в N,N-диметилформамиде (15 мл), добавляют DIPEA (1,3 г; 11,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при 120°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ и ЖХМС) растворитель удаляют при пониженном давлении и очищают перекристаллизацией со смесью диэтилового эфира и ацетонитрила (1:1) для получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества темно-коричневого цвета (0,70 г, 42,5%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 582.18; наблюдаемое: 583.0 (М+1).
Стадия 4: 2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси) ацетогидразид (5)
К раствору этил 2- (4- (4- (2- (5-амино-8- (фуран-2-ил) -2-оксотиазоло [5,4-е] [1,2,4] -триазоло) [1,5-с] пиримидин-3 (2Н) -ил) этил) пиперазин-1-ил) -3-фторфенокси) ацетата (4; 0,2 г; 0,34 ммоль) в этаноле (20 мл) добавляют гидразингидрат (50 мг; 1,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при 90°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ и ЖХМС) растворитель удаляют при пониженном давлении и очищают перекристаллизацией со смесью диэтилэфира и ацетонитрила для получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (150 мг, 76,9%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 568.18; наблюдаемое: 569.0 (М+1).
Стадия 5: 5-((4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси) метил)-1,3,4-оксадиазол-2(3Н)-он (Соединение 2)
К суспензии соединения 5 (0,158 г; 0,27 моль) в 1,4-диоксане (10 мл) и ДМФА (1 мл) добавляют ТЭА (0,084 г; 0,83 моль) и реакционную смесь перемешивают при 100°С в течение 4 часов. После завершения реакции (ТСХ и ЖХМС) растворитель удаляют при пониженном давлении и очищают методом препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения 2 в виде твердого вещества белого цвета (21 мг, 12,7%); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 95.33%; ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 594.16; наблюдаемое: 595.1 (М+1); 1H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 12.52 (brs, 1Н), 8.32 (brs, 2Н), 7.96 (d, J=0.80 Гц, 1Н), 7.25 (d, J=3.20 Гц, 1Н), 6.99-6.92 (m, 2Н), 6.78 (dd, J=2.0 & 8.8 Гц, 1Н), 6.74 (dd, J=1.6 & 3.2 Гц, 1Н), 5.01 (s, 2Н), 4.08 (t, J=6.40 Гц, 2Н), 2.87 (m, 4Н), 2.72-2.63 (m, 6Н).
Пример 3: 5-амино-3-(2-(4-(3-фторпиридин-4-ил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: 1-(3-фторпиридин-4-ил)пиперазин (3)
К перемешиваемому раствору 3-фтор-4-йодпиридина (2; 2 г; 4,48 ммоль, 1 экв) в НМП (20 мл) добавляют DIPEA (0,694 г; 5,38 ммоль, 1,2 экв) и пиперазин (1; 0,484 г; 6,72 ммоль, 1,5 экв) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивают при 80°С в течение 16 часов. После завершения реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Остаток помещают в воду и лиофилизируют. Полученное клейкое твердое вещество растирают с диэтиловым эфиром и н-пентаном, получая 1- (3-фторпиридин-4-ил) пиперазин, 3 (0,750 г, 92%) в виде твердого вещества светло-желтого цвета. ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 181.21; Observed; 182.2 (М+1).
Стадия 2: 5-амино-3-(2-(4-(3-фторпиридин-4-ил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он (Соединение 3)
К раствору 1- (3-фторпиридин-4-ил) пиперазина (3; 0,071 г; 0,392 ммоль, 1 экв) в ДМФА (2 мл) добавляют 2- (5-амино-8- (фуран-2-ил)) -2-оксотиазоло [4,5-е] [1,2,4] триазоло [1,5-с] -пиримидин-1 (2Н) -ил) этилметансульфонат (4; 0,150 г; 0,392 ммоль, 1,03 экв) и DIPEA (0,100 г; 0,775 ммоль, 2 экв) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивают при 80°С в течение 16 часов. После завершения реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом (2×30 мл). Объединенные органические фазы сушат (безводный Na2SO4), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой для получения указанного в заголовке соединения 3 в виде твердого вещества коричневого цвета (0,013 г, 7%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 481.51; наблюдаемое; 482 (М+1). Чистота, ВЭЖХ (XB0595TF.M): 97.75%.
Пример 4: 2-(5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)ацетамид
Стадия 1: Получение 1-(бензилокси)-5-бром-2,4-дифторбензола (2)
К раствору 5-бром-2,4-дифторфенола (1; 20 г; 95,69 ммоль) и бензилбромида (18 г; 105,26 ммоль) в N,N-диметилформамиде (200 мл) добавляют K2CO3 (39,62 г; 287,08 ммоль) и реакционную смесь нагревают при 90°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь разбавляют водой (200 мл) и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке (5% этилацетат / гексан в качестве элюента), получая искомый продукт в виде грязно-белого твердого вещества (24 г, 85%). ЖХМС (ESI, отрицательный йон); m/z: расчетное: 297.98; наблюдаемое; 296.8 (M-1); 1H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.60-7.67 (m, 1Н), 7.55-7.58 (m, 1H), 7.37-7.44 (m, 5Н), и 5.20 (s, 2Н).
Стадия 2: Получение трет-бутил 4-(5-(бензилокси)-2,4-дифторфенил) пиперазин-1-карбоксилат (3)
К раствору 1- (бензилокси) -5-бром-2,4-дифторбензола (2; 24 г; 80,08 ммоль) добавляют N-БОК-пиперазин (16,55 г; 88,88 ммоль), трет-бутоксид натрия (17,06 г; 177,77 ммоль) в толуоле (200 мл) и трет-бутил-Xphos (3,43 г, 8,08 ммоль). Реакционную смесь продувают N2 и добавляют Pd2(dba)3 (3,69 г; 4,04 ммоль). Реакционную смесь нагревают при 115°С в течение 16 ч и после завершения (ТСХ) реакционную смесь охлаждают и фильтруют через целит. Фильтрат концентрируют и очищают хроматографией на колонке (12-15% этилацетат / гексан) с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-коричневого масла (18 г, 55,14%); ЖХМС (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 404.19; наблюдаемое; 405 (М+1); 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.34-7.38 (m, 5Н), 7.26 (t, J=11.60 Гц, 1Н), 6.94 (t, J=8.80 Гц, 1Н), 5.16 (s, 2Н), 3.45 (m, 4Н), 2.90 (t, J=4.8 Гц, 4Н), и 1.42 (s, 9Н).
Стадия 3: трет-бутил 4-(2,4-дифтор-5-гидроксифенил)пиперазин-1-карбоксилат (4)
К прозрачному раствору трет-бутил 4-(5-(бензилокси)-2,4-дифторфенил) пиперазин-1-карбоксилата (3; 18 г; 44,55 ммоль) в этаноле (180 мл) добавляют 10% Pd-C (2,7 г; 15% масс.) и реакционную смесь перемешивают в атмосфере Н2 при комнатной температуре в течение 5 часов. После завершения (ТСХ) реакционную смесь фильтруют через целит и промывают метанолом (500 мл). Фильтрат концентрируют и растирают с диэтиловым эфиром с получением указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества (13 г, 92,6%); ЖХМС (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 314.14; наблюдаемое; 315.2 (М+1); 1Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 6.92 (t, J=8.8 Гц, 1Н), 6.56-6.51 (m, 2H), 3.57 (m, 4H), 2.91 (t, J=4.80 Гц, 4H), и 1.49 (s, 9Н).
Стадия 4: трет-бутил 4-(5-(2-амино-2-охоэтокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-карбоксилат (5)
К суспензии трет-бутил 4-(2,4-дифтор-5-гидроксифенил)пиперазин-1-карбоксилата (4; 10 г; 31,7 ммоль) и бромацетамида (5,25 г; 38,09 ммоль) в N,N-диметилформамиде (100 мл) добавляют K2CO3 (13,14 г; 95,23 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 90°С в течение 5 ч под контролем ТСХ. По завершении реакционную смесь разбавляют водой (100 мл) и неочищенный продукт экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют, концентрируют и растирают с диэтиловым эфиром с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества светло-коричневого цвета (9,5 г, 80,7%); ЖХМС (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 371.17; наблюдаемое; 372.2 (М+1); 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ 6.92 (t, J=11.2 Гц, 1Н), 6.92 (m, 2H), 5.66 (brs, 1H), 4.53 (s, 2H), 3.61 (t, J=5.20 Гц, 4H), 2.98 (t, J=4.40 Гц, 4H), и 1.51 (s, 9H).
Стадия 5: 2-(2, 4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)фенокси)ацетамид (6)
К охлажденному льдом раствору трет-бутил 4- (5- (2-амино-2-оксоэтокси) -2,4-дифторфенил) -пиперазин-1-карбоксилата (5; 8,0 г; 21,5 ммоль) в ДХМ добавляют 4 н. HCl в диоксане (80 мл) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов. После завершения реакции (ТСХ) соль HCl отфильтровывают. Соль растворяют в метаноле и нейтрализуют, используя полимерсвязанную п-толуолсульфоновую кислоту (Tosic acid scavenger resin), чтобы получить свободное основание в виде грязно-белого твердого вещества (3,5 г, 59,9%); ЖХМС (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 271.11; наблюдаемое; 272.1 (М+1); 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.49 (brs, 1Н), 7.43 (brs, 1Н), 7.25 (t, J=11.60 Гц, 1H), 6.75 (t, J=8.80 Гц, 1H), 4.51 (s, 2H), и 2.81-2.86 (m, 8H).
Стадия 6: 2-(5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)ацетамид (Соединение 4)
К смеси 2- (2,4-дифтор-5- (пиперазин-1-ил) фенокси) ацетамида (6; 3,5 г; 12,91 ммоль) и 2- (5-амино-8- (фуран-2-ил)) -2-оксотиазоло [5,4-е] [1,2,4] триазоло [1,5-с] пиримидин-3 (2Н) -ил) -этилметансульфоната (5,88 г; 14,84 ммоль) в N,N-диметилформамиде (70 мл) добавляли DIPEA (8,33 г; 64,57 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 120°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ & ЖХМС) реакционную массу концентрировали до половины объема при пониженном давлении и охлаждали до 0С. Продукт осаждали в виде бледно-желтого твердого вещества, которое отфильтровывали и высушивали. Поскольку чистота оказалась недостаточной плохой, полученное вещество суспендировали в ДМСО (150 мл), нагревали при 110°С в течение 1 часа и фильтровали в горячем состоянии. Фильтрат охлаждали до 0°С, разбавляли метанолом и затем медленно добавляли воду для лучшего осаждения. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа и фильтровали. Твердое вещество промывали водой и метанолом с получением соединения 4 в виде твердого вещества светло-желтого цвета (2,5 г, 34%). Чистота, ВЭЖХ (XB_0595TF.M): 92.4%; ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 571.16; наблюдаемое; 572.0 (М+1); 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (brs, 2Н), 7.95 (t, J=0.8 Гц, 1Н), 7.44 (brs, 1Н), 7.40 (brs, 1Н), 7.27-7.21 (m, 2Н), 6.76-6.72 (m, 2Н), 4.49 (s, 2Н), 4.08 (t, J=6.0 Гц, 2Н), 2.90 (m, 4Н), 2.71 (t, J=6.00 Гц, 2Н), и 2.63 (m, 4Н).
Примеры 5 и 6: (S)-5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он и R)-5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)-пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез трет-бутил 4-(2-фтор-4-(2-(метилтио)этокси)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (2)
К раствору трет-бутил 4-(2-фтор-4-гидроксифенил) пиперазин-1-карбоксилата (1; 0,3 г; 1,102 ммоль, 1 экв) и 1-хлор-2-метилсульфанилэтана (0,168 г; 1,519 ммоль, 1 экв) в N,N-диметилформамиде (3 мл) добавляют K2CO3 (0,419 г; 3,027 ммоль, 2 экв) и реакционную смесь нагревают при 90°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь разбавляют водой (10 мл) и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный остаток очищают хроматографией на колонке (50% этилацетат / гексан в качестве элюента) с получением продукта в виде грязно-белого твердого вещества (0,3 г, 53%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 370.48; наблюдаемое; 370.9 (М+). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.02 (m, 1Н), 6.85 (m, 1H), 6.72 (m, 1H), 4.09-4.12 (m, 2Н), 3.45 (d, J=4.40 Гц, 4Н), 2.80-2.86 (m, 6Н), 2.14 (s, 3Н), и 1.42 (s, 9Н).
Стадия 2: Синтез трет-бутил 4-(2-фтор-4-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (3, 4)
К охлажденному льдом раствору трет-бутил 4-(2-фтор-4-(2-(метилтио)этокси)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (2; 0,3 г; 0,809 ммоль, 1 экв) в этановой кислоте (10 мл), по каплям добавляют перекись водорода (0,187 мл) и перемешивают при неизменной температуре в течение 2 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь вливают в 4 н. раствор NaOH (20 мл) и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке (80% этилацетат / гексан в качестве элюента), получая искомый продукт в виде грязно-белого твердого вещества. (0,29 г, 93%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 386.48; наблюдаемое; 387.9 (М+1). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.02-7.04 (m, 1Н), 6.88-6.92 (m, 1H), 6.75-6.78 (m, 1H), 4.28-4.35 (m, 2Н), 3.45 (d, J=4.52 Гц, 4Н), 3.21-3.27 (m, 1Н), 3.00-3.05 (m, 1H), 2.85-2.87 (m, 4Н), 2.63 (s, 3Н), и 1.41 (s, 9Н).
Рацемическую смесь (0,29 г) подвергали хиральному разделению с помощью СФХ (0,29 г образца растворяли в 3 мл метанола), колонка-Lux А1, подвижная фаза: 70:30 (А: В), А = жидкий CO2, В = метанол, скорость потока: 0,9 мл / мин; длина волны: 220 нм) с получением 130 мг пика 1 (3) и 130 мг пика 2 (4) в виде гразно-белого твердого вещества, соответственно. Примечание. Пик 1 по результатам СФХ произвольно рассматривался в качестве (S)-изомера, а пик 2-в качестве (R)-изомера.
Синтез Соединения 5
Стадия 3: Синтез (S)-1-(2-фтор-4-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазина (5)
К охлажденному льдом раствору трет-бутил (S)-4-(2-фтор-4-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)-пиперазин-1-карбоксилата (3; 0,13 г) в дихлорметане (1 мл) добавляют 4 М HCl в диоксане (1 мл) и реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 1 часа. После завершения реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и комнатной температуре. Полученный остаток растирают с диэтиловым эфиром. Затем его растворяют в метаноле и пропускают через Si-Carbonate для получения свободного основания 5 (0,094 г, 59%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 286.37; наблюдаемое; 287 (М+1).
Стадия 4: Синтез (S)-5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)-пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 5)
Смесь 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3 (2Н)-ил)этилметансульфоната (7; 0,11 г; 0,303 ммоль, 1 экв), (S)-1-(2-фтор-4-(2 (метилсульфинил)-этокси) фенил) пиперазина (5; 0,094 г; 0,33 ммоль, 1,1 экв) и диизопропилэтиламина (0,195 г; 1,514 ммоль, 5 экв) в N,N-диметилформамиде (2 мл) перемешивают при 120°С в течение 16 часов. Ход реакции контролируют с помощью ТСХ. После завершения реакционную смесь разбавляют водой (10 мл) и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют, концентрируют. Полученный неочищенный остаток очищают методом препаративной ВЭЖХ с получением соединения 5 в виде грязно-белого твердого вещества (5 мг). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 586.66; наблюдаемое; 587.2 (М+1). Чистота, ВЭЖХ (XB0595TF.M): 91.67%. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.32 (s, 2Н), 7.95-7.96 (m, 1Н), 7.24-7.25 (m, 1H), 6.93-6.98 (m, 1H), 6.85-6.89 (m, 1H), 6.73-6.74 (m, 2Н), 4.25-4.30 (m, 2Н), 4.09 (s, 2Н), 3.22-3.27 (m, 1H), 3.02 (m, 1Н), 2.87 (m, 5Н), и 2.63 (m, 8Н).
Синтез Соединения 6:
Стадия 1: (R)-1-(2-фтор-4-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин (6)
К охлажденному льдом раствору трет-бутил (R)-4-(2-фтор-4-(2-(метилсульфинил) этокси)-фенил)пиперазин-1-карбоксилата (4; 0,13 г) в дихлорметане (1 мл) добавляют 4 М HCl в диоксане (0,5 мл) и реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 1 часа. После завершения (ТСХ) реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и комнатной температуре. Полученный неочищенный остаток растирают с диэтиловым эфиром. Затем его растворяют в метаноле, пропускают через Si-Carbonate для получения свободного основания 6 (0,094 г). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 286.37; наблюдаемое; 287 (М+1).
Стадия 2: (R)-5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(2-(метилсульфинил)этокси) фенил)-пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он (Соединение 6)
Смесь 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3 (2Н)-ил)этил метансульфоната (7; 0,11 г; 0,303 ммоль, 1 экв), (R)-1-(2-фтор-4-(2-(метилсульфинил)-этокси)фенил)пиперазина (6; 0,094 г; 0,33 ммоль; 1,1 экв) и диизопропилэтиламина (0,195 г; 1,514 ммоль, 5 экв) в 1 N,N-диметилформамиде (2 мл) перемешивают при 120°С в течение 16 часов. Ход реакции контролирую с помощью ТСХ. После завершения реакционную смесь разбавляют водой (10 мл) и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют, концентрируют. Полученный неочищенный продукт подвергают очистке методом препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой с получением соединения 6 в виде грязно-белого твердого вещества. (3 мг). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 586.66; наблюдаемое; 587.2 (М+1). Чистота, ВЭЖХ (XB0595TF.M): 96.6%. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (широкий s, 2Н), 7.95-7.95 (s, 1H), 7.24-7.25 (m, 1Н), 7.00-6.88 (m, 1H), 6.85 (m, 1H), 6.71-6.74 (m, 2Н), 4.25-4.31 (m, 2Н), 4.08 (t, J=6.00 Гц, 2Н), 3.22-3.29 (m, 2Н), 3.00-3.03 (m, 1H), 2.86 (s, 4Н), и 2.62-2.70 (m, 8Н).
Примеры 7, 8а и 8b: (R,S)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)-фенил)-пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]-пиримидин-2(3Н)-он, (+)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он и (-)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез трет-бутил 4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилтио)этокси)-фенил)пиперазин-1-карбоксилата (2)
К раствору трет-бутил 4-(2,4-дифтор-5-гидроксифенил) пиперазин-1-карбоксилата (1; 0,5 г; 1,591 ммоль, 1 экв) и 1-хлор-2-метилсульфанилэтана (0,264 г; 2,386 ммоль, 1,5 экв) в N,N-диметилформамиде (5 мл) добавляют K2СО3 (0,439 г; 3,181 ммоль, 2 экв) и реакционную смесь нагревают при 90°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь разбавляют водой (10 мл) и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке (50% этилацетат / гексан в качестве элюента) с получением продукта в виде грязно-белого твердого вещества (2; 0,5 г, 77%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 388.47; наблюдаемое; 389 (М+1).
Стадия 2: Синтез трет-бутил 4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)-пиперазин-1-карбоксилата (3, 4)
К охлажденному льдом раствору трет-бутил 4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилтио)этокси)-фенил)пиперазин-1-карбоксилата (2; 0,5 г; 0,001 ммоль, 1 экв) в этановой кислоте (10 мл) добавляют по каплям перекись водорода (0,312 мл) и перемешивают при неизменной температуре в течение 2 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь вливают в 4 н. раствор NaOH (20 мл) и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке (80% этилацетат / гексан в качестве элюента), получая продукт в виде грязно-белого твердого вещества (0,38 г, 86%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 404.47; наблюдаемое; 348.9 (M-t-butyl). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.24-7.32 (m, 1H), 6.89-6.94 (m, 1H), 4.39-4.45 (m, 2Н), 3.47 (s, 4Н), 3.05 (m, 2Н), 2.94 (s, 4Н), 2.64 (s, 3Н), и 1.42 (s, 9Н).
Вышеуказанное рацемическое соединение (0,38 г) подвергали хиральному разделению с помощью СФХ (0,38 г образца растворяли в 5 мл метанола, колонка-Lux А1, подвижная фаза: 70:30 (А: В), А = жидкий СО2, В = метанол, скорость потока: 0,9 мл/мин; длина волны: 220 нм) для получения 150 мг пика 1 (3, [α]D=+50.7°, с=1.1, метанол) и 150 мг пика 2 (4, [α]D=-45.2°, с=1.1, метанол) в виде грязно-белых твердых веществ, соответственно.
Стадия 3: Синтез (R,S)-1-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазина (5RS)
К охлажденному льдом раствору трет-бутил (R,S)-4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)-пиперазин-1-карбоксилата (рацемическая смесь 3 и 4; 0,15 г; 0,371 ммоль, 1 экв) в дихлорметане (2 мл) добавляют 4 М HCl в диоксане (0,5 мл) и реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 1 часа. После завершения (ТСХ) реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и комнатной температуре. Полученный остаток растирают с диэтиловым эфиром, получая рацемический продукт. Затем его растворяют в метаноле, пропускают через Si-Carbonate для получения свободного основания (0,09 г). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 304.36; наблюдаемое; 305 (М+1).
Стадия 4 для Соединения 7: Синтез (R,S)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)-фенил)-пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]-пиримидин-2(3Н)-она
К раствору 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этилметансульфоната (6; 105 мг; 0,265 ммоль, 1,0 экв) в ДМФА (2 мл) добавляют (R)-1-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин (5RS, 86,46 мг; 0,278 ммоль) и DIPEA (170,85 мг; 0,001 ммоль, 5 экв). Реакционную массу дегазируют азотом и нагревают до 120°С в течение 16 часов. Ход реакции контролируют с помощью ЖХМС. После завершения реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке Grace с 5% метанолом в ДХМ с получением восстановленного рацемического соединения. Затем его очищают препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения 7 (6 мг, чистота 96%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 604.65; наблюдаемое; 605.2 (М+1). Чистота, ВЭЖХ (XB0595TF.M): 96.68%. 1H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (s, 1H), 7.50 (m,1Н), 7.27-6.97 (m, 3Н), 6.83 (m, 1H), 6.73-6.74 (m, 1Н), 4.36-4.45 (m, 2Н), 4.08 (m, 2Н), 3.25-3.38 (m, 2Н), 3.00-3.06 (m, 2Н), 2.94 (s, 3Н), 2.63-2.71 (m, 2Н), и 2.53-2.58 (m, 6Н).
Стадия 3': Синтез (+)-1-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазина
К охлажденному льдом перемешиваемому раствору трет-бутил (+)-4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)-фенил) пиперазин-1-карбоксилата (4; 500 мг; 1,23 ммоль) в этилацетате (3 мл) добавляют SnCl4 (644 мг; 2,47 ммоль). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток растирают с холодным этилацетатом (2×10 мл), получая неочищенный продукт (580 мг), который используют на следующей стадии. ЖХМС (М+Н) 305.1. [α]D=+24°, с=0.5, метанол.
Стадия 4' для Соединения 8а: Синтез (+)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)-фенил)-пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]-пиримидин-2(3Н)-она.
Получают согласно протоколу, описанному для Соединения 7, начиная с (+)-1-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазина. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (s, 1Н), 7.50 (m, 1Н), 7.27-6.97 (m, 3Н), 6.83 (m, 1H), 6.73-6.74 (m, 1Н), 4.36-4.45 (m, 2Н), 4.08 (m, 2Н), 3.25-3.38 (m, 2Н), 3.00-3.06 (m, 2Н), 2.94 (s, 3Н), 2.63-2.71 (m, 2Н), и 2.53-2.58 (m, 6H). [α]D=+24°, с=0.1, этановая кислота. Абсолютная стереохимия хирального центра неизвестна.
Стадии 3'' и 4'' для Соединения 8b: (-)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он получают согласно протоколу, описанному для Соединения 7, начиная с (-)-4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)-пиперазин-1-карбоксилата (3), приводя на стадии 3'' к (-)-1-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазину. ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 604.65; наблюдаемое; 605.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 98.81%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.32 (brs, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.22-7.28 (m, 2Н), 6.74-6.85 (m, 2Н), 6.73-6.74 (m, 1Н), 4.36-4.45 (m, 2Н), 4.09 (s, 2Н), 3.28-3.30 (m, 1Н), 3.23-3.26 (m, 1Н), 3.00-3.06 (m, 4Н), 2.71-2.94 (m, 3Н), and 2.64 (s, 6Н). [α]D=-39°, с=0.1, этановая кислота. Абсолютная стереохимия хирального центра неизвестна.
Пример 77: 5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфонил)этокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез трет-бутил 4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфонил)этокси)фенил)-пиперазин-1-карбоксилата
В открытом флаконе трет-бутил 4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилтио)этокси)фенил)-пиперазин-1-карбоксилат (20 г; 51,48 ммоль, приготовленный, как описано в Примере 7, Стадия 1) и пероксигидрат мочевины (21,78 г; 231,68 ммоль) нагревают до 90°С. Через 1 час реакционной смеси дают остыть до комнатной температуры. Добавляют около 500 мл этилацетата и перемешивают в течение 0,5 ч, затем фильтруют. Концентрация фильтрата дает неочищенный продукт. Его очищают хроматографией на колонке с использованием 50% этилацетата в петролейном эфире для получения искомого продукта в виде грязно-белого твердого вещества (9 грамм, 42%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: 421.
Стадия 2: Синтез 1-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфонил)этокси)фенил)пиперазингидрохлорида (7)
К охлажденному льдом раствору трет-бутил 4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфонил) этокси)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (9 г; 21,40 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавляют раствор HCl в диэтиловом эфире (50 мл). Перемешивают при 0°С в течение 0,5 часа, дают нагреться до комнатной температуры и перемешивают в течение 16 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и комнатной температуре. Полученный остаток растирают с диэтиловым эфиром, получая чистый продукт (10 г). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: 321 (М+1).
Стадия 3: В перемешиваемую суспензию гидрохлорида 1-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфонил)этокси)фенил)пиперазина (7 г; 22,13 ммоль) в сухом дихлорэтане (70 мл) добавляют триэтиламин (6,259 г; 61,97 ммоль) и свежеприготовленный 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)-ацетальдегид (7 г; 22,13 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 3 ч добавляют триацетоксиборгидрид натрия (9,339 г; 44,26 ммоль). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 24 часов. После завершения реакции реакционную смесь разбавляют дихлорметаном. Отделенный органический слой последовательно промывают насыщенным раствором бикарбоната и насыщенным солевым раствором. Затем его сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке (230-400 силикагель, 5% метанол / дихлорметан в качестве элюента), получая продукт в виде грязно-белого твердого вещества (3,2 г, 26%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: 621 (М+1). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (s, 2Н), 7.95 (d, J=0.92 Гц, 1Н), 7.23-7.29 (m, 2Н), 6.82 (t, J=8.60 Гц, 1H), 6.73-6.74 (m, 1H), 4.40 (t, J=5.64 Гц, 2Н), 4.08 (t, J=5.96 Гц, 2Н), 3.62 (t, J=5.44 Гц, 2Н), 3.07 (s, 3Н), 2.94 (s, 4Н), 2.71 (t, J=6.04 Гц, 2Н), и 2.67-2.68 (m, 4Н),
Пример 78: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(2-(метилсульфонил)этокси) фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез трет-бутил 4-(2-фтор-4-гидроксифенил)пиперазин-1-карбоксилата (2)
К смеси 4-бром-3-фторфенола (1; 10 г; 0,052 моль), трет-бутил пиперазин-1-карбоксилата (11,70 г; 0,063 моль), 2-дициклогексилфосфино-2'-бифенила (0,515 г; 0,001 моль) и Pd2(dba)3 (0,958 г; 0,001 моль) добавляют бис(триметилсилил)амид лития (115 мл 1,0 М раствора в ТГФ; 0,115 моль) при 0°С в атмосфере азота. Реакционную смесь нагревают при 65°С в течение 24 ч под контролем ТСХ. Неочищенную реакционную смесь нейтрализуют насыщенным NH4Cl и экстрагируют этилацетатом (2 × 100 мл). Объединенный органический слой концентрируют и очищают хроматографией на колонке с получением указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества (2,25 г, 14,5%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 296.15; наблюдаемое: 297.2 (М+1).
Стадия 2: Синтез трет-бутил 4-(2-фтор-4-(2-(метилтио)этокси)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (3)
К смеси трет-бутил 4-(2-фтор-4-(2-(метилтио)этокси)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (2; 0,3 г; 1,102 ммоль) и 1-хлор-2-метилсульфанилэтана (0,168 г; 1,519 ммоль) в N,N-диметилформамиде (3 мл) добавляют карбонат калия (0,419 г; 3,027 ммоль) и реакционную смесь нагревают при 90°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь разбавляют водой (10 мл) и экстрагируют этилацетатом. Объединенный органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке (50% этилацетат / гексан в качестве элюента) с получением продукта в виде грязно-белого твердого вещества (0,3 г, 52,8%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 370.48; наблюдаемое: 370.9 (М+). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.02 (m, 1Н), 6.85 (d, J=2.80 Гц, 1Н), 6.72 (d, J=2.00 Гц, 1Н), 4.09-4.12 (m, 2Н), 3.45 (d, J=4.40 Гц, 4Н), 2.80-2.86 (m, 6Н), 2.14 (s, 3Н), и 1.42 (s, 9Н).
Стадия 3: Синтез трет-бутил 4-(2-фтор-4-(2-(метилсульфонил)этокси) фенил)-пиперазин-1-карбоксилата (4)
К раствору трет-бутил 4-[2-фтор-4-(2-метилсульфанилэтокси) фенил]пиперазин-1-карбоксилата (3; 0,5 г; 0,001 ммоль) в 1,4-диоксане (2 мл) добавляют пероксигидрат мочевины (507,49 г; 0,005 ммоль). Смесь нагревают до 85°С в течение 16 часов. После завершения реакции ее концентрируют при пониженном давлении. Остаток помещают в этилацетат и фильтруют. Фильтрат промывают водой, сушат над Na2SO4 и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт подвергают хроматографии на колонке (1% метанол в ДХМ, смесь растворителей в качестве элюента) с получением искомого продукта трет-бутил 4-(2-фтор-4-(2-(метилсульфонил)этокси)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (0,22 г, 40%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 402.48; наблюдаемое: 403.3 (М+1). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.02 (широкий s, 1Н), 6.65-6.72 (m, 2Н), 4.41 (t, J=5.60 Гц, 2Н), 3.64 (s, 4Н), 3.44 (t, J=5.20 Гц, 2Н), 3.07 (s, 3Н), 3.00 (s, 4Н), и 1.50 (s, 9Н).
Стадия 4: Синтез 1-(2-фтор-4-(2-(метилсульфонил)этокси) фенил)пиперазина (5)
К охлажденному льдом раствору трет-бутил 4-[2-фтор-4-(2-метилсульфонилэтокси)фенил]пиперазин-1-карбоксилата (4; 0,22 г; 0,547 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляют 2 М HCl в диэтиловом эфире (2 мл) и реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 1 часа. После завершения (ТСХ) реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и комнатной температуре. Полученный остаток растирают с диэтиловым эфиром, получая чистый продукт. Затем его растворяют в метаноле, пропускают через Si-Carbonate для получения свободного основания (0,105 г неочищенного соединения), непосредственно используемого для следующей стадии.
Стадия 5: Синтез 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(2-(метилсульфонил)этокси)фенил)-пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 78)
К смеси 1-[2-фтор-4-(2-метилсульфинилэтокси)фенил]пиперазина (5; 105 мг; 0,347 ммоль) и 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этилметансульфоната (125 мг; 0,315 ммоль) в N,N-диметилформамиде (2 мл) добавляют DIPEA (204 мг; 1,577 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при 120°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ и ЖХМС) реакционную массу концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с 5%-м метанолом в ДХМ для получения искомого продукта. Затем его очищают препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой для получения указанного в заголовке соединения. ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 602.66; наблюдаемое: 603 (М+1). Чистота, ВЭЖХ (PG_AM9010A3): 93.64%. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (широкий s, 2Н), 7.95 (s, 1H), 7.24 (d, J=3.20 Гц, 1H), 6.87-6.98 (m, 2Н), 6.73-6.74 (m, 2Н), 4.29 (t, J=5.60 Гц, 2Н), 4.08 (t, J=5.60 Гц, 2Н), 3.58 (t, J=5.60 Гц, 2Н), 3.05 (s, 3Н), 2.86 (s, 4Н), и 2.68-2.72 (m, 6Н).
Пример 80: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(8-метилсульфонимидоил) фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез 1,2-дифтор-4-(метилсульфинил)бензола (2)
К охлажденному льдом раствору (3,4-дифторфенил) (метил) сульфана (1; 3,0 г; 18,73 ммоль) в ДХМ добавляют 3-хлорпербензойную кислоту (6,78 г; 39,33 ммоль) и перемешивают реакционную смесь при КТ в течение 16 ч. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь разбавляют ледяной водой (30 мл) и неочищенный продукт экстрагируют ДХМ. Органический слой последовательно промывают водным раствором тиосульфата натрия, 10% NaHCO3, солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке (50% этилацетат / гексан в качестве элюента) с получением указанного в заголовке продукта 2 в виде грязно-белого твердого вещества (2,8 г, 85%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 176.18; наблюдаемое: 177.1 (М+1); 1H-ЯМР (400 МГц, ДМСО:d6): δ 7.83-7.79 (m, 1Н), 7.73-7.66 (m, 1Н), 7.60-7.57 (m, 1Н), 2.78 (s, 1Н).
Стадия 2: Синтез (3,4-дифторфенил)(имино)(метил)-16-сульфанона (3)
К раствору 1,2-дифтор-4-(метилсульфинил)бензола (2; 2,8 г; 15,89 ммоль) в дихлорметане (60 мл) добавляют трифторацетамид (3,59 г; 31,79 ммоль), оксид магния (2,54 г; 63,57 ммоль).) и димер диацетата родия (0,172 г; 0,429 ммоль) и реакционную смесь продувают азотом в течение 2 мин. Добавляют диацетат йодбензола (10,23 г; 31,79 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь фильтруют через слой целита, концентрируют и очищают препаративной хроматографией на колонке с получением указанного в заголовке соединения 3 в виде грязно-белого твердого вещества (0,7 г, 23,0%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 191.20; наблюдаемое; 192.1 (М+1); 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.07-8.02 (m, 1Н), 7.86-7.83 (m, 1H), 7.75-7.71 (m, 1Н), 3.28 (s, 3Н).
Стадия 3: Синтез (3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенил)(имино)(метил)-16-сульфанона (4)
К раствору (3,4-дифторфенил)(имино)(метил)-16-сульфанона (0,7 г; 3,66 ммоль) в N,N-диметилформамиде (10 мл) добавляют пиперазин (0,32 г; 3,66 ммоль) и карбонат калия (1,51 г; 10,98 ммоль) и реакционную смесь нагревают при 100°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь разбавляют водой и неочищенный продукт экстрагируют этилацетатом, промывают рассолом, сушат над Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают препаративной хроматографией на колонке с получением желаемого продукта 4 в виде грязно-белого твердого вещества. ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 257.33; наблюдаемое; 258.1 (М+1).
Стадия 4: Синтез 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(S-метилсульфонимидоил)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 80)
Смесь (3-фтор-4-(пиперазин-1-ил) фенил)(имино)(метил)-1,6-сульфанона (4; 0,14 г; 0,545 ммоль), 2-(5-амино-8-(фуран)-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3 (2Н)-ил)этилметансульфоната (0,18 г; 0,45 ммоль) и DIPEA (0,176 г; 1,36 ммоль) в N,N-диметилформамиде (2 мл) перемешивали при 120°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь разбавляют водой и неочищенный продукт экстрагируют этилацетатом, промывают рассолом, сушат над Na2SO4, фильтруют, концентрируют и очищают препаративной ВЭЖХ, получая указанное в заголовке соединение в виде грязно-белого твердого вещества. ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 557.62; наблюдаемое; 558.1 (М+1). Чистота, ВЭЖХ (XB_0595TF.M): 93.12%.; 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (brs, 2Н), 7.95 (s, 1Н), 7.61-7.57 (m, 2Н), 7.24 (d, J=4.8 Гц, 1Н), 7.15 (t, J=9.2 Гц, 1Н), 6.73-6.72 (m, 1H), 4.14 (s, 1H), 4.10 (t, J=6.00 Гц, 2Н), 3.08 (m, 4Н), 3.03 (s, 3Н), 2.73 (t, J=6.00 Гц, 2Н), 2.67-2.65 (m, 4Н).
Пример 81: 5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-N-(2-(диметиламино)этил)-2,4-дифторбензамид
Стадия 1: Синтез метил 5-амино-2,4-дифторбензоата (2)
К охлажденному льдом раствору 5-амино-2,4-дифтор-бензойной кислоты (1; 1,0 г; 0,017 моль) в метаноле (20,0 мл) добавляют тионилхлорид (2,514 мл; 0,035 моль). Полученную смесь нагревают при 80°С в течение 1 часа. Ход реакции контролируют с помощью ТСХ. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. К реакционной смеси добавляют ДХМ и воду. Объединенный органический слой сушат над сульфатом натрия, концентрируют при пониженном давлении, получая искомый продукт: метил 5-амино-2,4-дифторбензоат (2,8 г, 86,0%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 187.15; наблюдаемое; 188.2 (М+1). 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ 7.35-7.39 (m, 1Н), 6.82-6.87 (m, 1Н), и 3.92 (s, 3Н).
Стадия 2: Синтез метил 2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)бензоата (3)
Смесь метил-5-амино-2,4-дифтор-бензоата (2; 3,0 г; 0,016 моль) и 2-xnop-N-(2-хлорэтил) этанамина гидрохлорида (3,719 г; 0,021 моль) в диэтиленгликольмонометиловом эфире (12 мл) нагревают до 170°С в течение 2,5 часов. Ход реакции контролируют с помощью ТСХ. К реакционной смеси добавляют воду и экстрагируют этилацетатом. Органическую часть удаляют. Затем рН водной части корректируют с помощью бикарбоната натрия и экстрагируют этилацетатом. Объединенную органическую часть сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с получением продукта (1,5 г, 29,9%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 256.25; наблюдаемое; 257.0 (М+1).
Стадия 3: Синтез трет-бутил 4-(2,4-дифтор-5-(метоксикарбонил)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (4)
К охлажденному льдом раствору метил 2,4-дифтор-5-пиперазин-1-ил-бензоата (3; 1,0 г; 0,009 моль) в ДХМ (10 мл) добавляют триэтиламин (1,510 мл; 0,012 моль) и БОК-ангидрид (1,278 мл; 0,006 моль). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов. Ход реакции контролируют с помощью ТСХ. Реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Объединенную органическую часть промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия, концентрируют при пониженном давлении с получением продукта (0,800 г, 58%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 356.37; наблюдаемое; 357.2 (М+1).
Стадия 4: Синтез 5-(4-(трет-бутоксикарбонил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторбензойной кислоты (5)
К перемешиваемому раствору трет-бутил 4-(2,4-дифтор-5-(метоксикарбонил)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (4; 1,0 г; 0,003 моль) в ТГФ и воде (20 мл, 3:1) добавляют гидроксид лития (0,176 г; 0,004 моль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов. Ход реакции контролируют с помощью ТСХ. Реакционную смесь концентрируют для удаления ТГФ. Для достижения кислотного рН добавляют 1,5 н. HCl. Образовавшееся твердое вещество отфильтровывают, получая 5-(4-(трет-бутоксикарбонил) пиперазин-1-ил)-2,4-дифторбензойную кислоту (0,800 г, 97%). ЖХМС (ESI, отрицательный ион) m/z: расчетное: 342.34; наблюдаемое; 341.0 (М-1).
Стадия 5: Синтез трет-бутил 4-(5-((2-(диметиламино)этил)карбамоил)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-карбоксилата (6)
К перемешиваемому раствору 5-(4-(трет-бутоксикарбонил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторбензойной кислоты (5; 0,200 г; 0,0005 моль) в ДХМ (10 мл) добавляют последовательно N1,N1-диметилэтан-1,2-диамин (0,062 г; 0,0007 моль), DIPEA (0,306 мл; 0,002 моль) и раствор Т3Р (0,438 мл; 0,001 моль). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов. Ход реакции контролируют с помощью ТСХ. К реакционной смеси добавляют воду и экстрагируют дихлорметаном. Объединенную органическую часть сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении, получая продукт (0,13 г, 46,4%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 412.48; наблюдаемое; 413.6 (М+1).
Стадия 6: Синтез N-(2-(диметиламино)этил)-2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)-бензамида (7)
К охлажденному льдом раствору трет-бутил 4-(5-((2-(диметиламино) этил) карбамоил)-2,4-дифторфенил) пиперазин-1-карбоксилата (6; 0,200 г; 0,0004 моль) в ДХМ (10 мл) добавляют HCl в растворе диэтилового эфира (0,121 мл, 4 М раствор). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов. Ход реакции контролируют с помощью ТСХ. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Остаток нейтрализуют бикарбонатом натрия и экстрагируют ДХМ. Органическую часть концентрируют, получая N-(2-(диметиламино)этил)-2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)бензамид (0,130 г, 62,28%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 312.36; наблюдаемое; 313.2 (М+1).
Стадия 7: Синтез 5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло-[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-N-(2-(диметиламино)этил)-2,4-дифторбензамида (Соединение 81)
К перемешиваемой смеси 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этилметансульфоната (8; 120 мг; 0,0003 моль) и N-[2-(диметиламино)этил]-2,4-дифтор-5-пиперазин-1-ил-бензамида (7; 113 мг; 0,00036 моль) в ДМФА (5 мл) добавляют DIPEA (0,129 мл; 0,0009 моль). Полученную смесь нагревают до 120°С в течение 16 часов. После завершения реакции реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный остаток очищают препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой для получения искомого продукта. ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 612.66; наблюдаемое; 613.2 (М+1). Чистота, ВЭЖХ (XB_0595TF): 92.76%. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.72 (s, 1Н), 7.52-7.56 (m, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.11-7.17 (m, 1H), 6.63 (t, J=2.00 Гц, 1H), 4.31 (bs, 2H), 3.91 (t, J=7.84 Гц, 2H), 3.83 (m, 4H), 3.63 (t, J=6.12 Гц, 3H), 2.85 (m, 5H), и 2.56 (широкий s, 6H).
Примеры 83 и 84: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(((3R,4R)-4-гидрокситетрагидрофуран-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он и 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(((3S,4S)-4-гидрокситетрагидрофуран-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез 4-амино-3-фторфенола (2)
К перемешиваемому раствору 3-фтор-4-нитрофенола (1; 10 г; 0,064 моль) в этилацетате (140 мл) добавляют Pd/C (4,0 г; 0,038 моль) в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают под давлением водорода из баллона в течение 16 часов. Ход реакции контролируют ТСХ. Реакционную смесь фильтруют через слой целита и фильтрат концентрируют при пониженном давлении, получая 4-амино-3-фторфенол в виде твердого вещества светло-розового цвета (6,9 г, 94%). ЖХМС (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 127.12; наблюдаемое; 128.2 (М+1).
Стадия 2: Синтез 3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенол гидрохлорида (3)
К перемешиваемому раствору 4-амино-3-фторфенола (2; 6,9 г; 0,054 моль) в сульфолане (15 мл) добавляют бис(2-хлорэтил)амин гидрохлорид (13,56 г; 0,076 моль). Реакционную смесь нагревают при 150°С в течение 16 часов. После завершения реакции реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры. Добавляют около 30 мл холодного ацетона и перемешивают при 0°С в течение 0,5 часа. Образовавшееся твердое вещество отфильтровывают и сушат, получая 3-фтор-4-(пиперазин-1-ил) фенол гидрохлорид в виде твердого вещества черного цвета (10 г, 98%). ЖХМС (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 196.23; наблюдаемое; 197.1 (М+1).
Стадия 3: Синтез трет-бутил 4-(2-фтор-4-гидроксифенил)пиперазин-1-карбоксилата (4)
К охлажденному льдом перемешиваемому раствору 3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенол гидрохлорида (3; 3,0 г; 0,015 моль) в ДМФА (30 мл) добавляют триэтиламин до тех пор, пока он не станет основным. Затем добавляют БОК-ангидрид (3,0 мл; 0,041 моль) и реакционную смесь выдерживают при 0°С в течение 0,5 часа. После завершения реакции реакционную смесь разбавляют этилацетатом и водой. Органический слой сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с получением трет-бутил 4-(2-фтор-4-гидроксифенил)пиперазин-1-карбоксилата (1,5 г, 86%). ЖХМС (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 296.34; наблюдаемое; 297.1 (М+1).
Стадия 4: Синтез трет-бутил 4-(2-фтор-4-((4-гидрокситетрагидрофуран-3-ил)окси)-фенил)пиперазин-1-карбоксилата (5)
К перемешиваемому раствору трет-бутил 4-(2-фтор-4-гидроксифенил) пиперазин-1-карбоксилата (4; 1,5 г; 0,005 моль) в диоксане (25 мл) добавляют 3,6-диоксабицикло[3.1.0]гексан (1,089 г; 0,013 моль) и карбонат цезия (2,47 г; 0,008 моль). Реакционную смесь нагревают при 100°С в течение 16 часов. Ход реакции контролируют при помощи ТСХ. Затем реакционную смесь разбавляют 10 мл воды и экстрагируют этилацетатом (10 мл × 2). Объединенный органический слой сушат над безводным MgSO4, концентрируют при пониженном давлении, получая трет-бутил 4-(2-фтор-4-((4-гидрокси-тетрагидрофуран-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-карбоксилат в виде твердого вещества коричневого цвета (0,800 г, 98%). ЖХМС (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 382.43; наблюдаемое; 383.1 (М+1).
Стадия 5: Синтез 4-(3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенокси)тетрагидрофуран-3-ола (6)
К охлажденному льдом раствору трет-бутил 4-(2-фтор-4-((4-гидрокси-тетрагидрофуран-3-ил)окси)-фенил)пиперазин-1-карбоксилата (5; 0,500 г; 0,001 моль) в диоксане (10 мл) добавляют раствор HCl в диоксане (4М раствор, 1 мл). После перемешивания в течение 16 часов при комнатной температуре реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Остаток нейтрализуют 10%-ным раствором бикарбоната натрия и экстрагируют ДХМ. Концентрируя органическую часть, получают 4-(3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенокси)тетрагидрофуран-3-ол (0,250 г, 88%). ЖХМС (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 282.3; наблюдаемое; 283.2 (М+).
Стадия 6: Синтез 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(((3R,4R)-4-гидрокситетрагидрофуран-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]-пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 83) и 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(((3S,4S)-4-гидрокси-тетрагидрофуран-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е]-[1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 84)
К перемешиваемому раствору 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)-этилметансульфоната (7; 0,320 г; 0,00080 моль) в ДМФА (8 мл) добавляют 4-(3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенокси) тетрагидрофуран-3-ол (6; 0,273 г; 0,0009 моль) и N-этил-N-изопропилпропан-2-амин (0,218 мл; 0,002 моль). Реакционную смесь нагревают при 120°С в течение 16 часов. После завершения реакции реакционную смесь концентрируют и остаток очищают препаративной ВЭЖХ. Затем чистый продукт очищают путем хиральной СФХ с получением двух изомеров 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(((3R,4R)-4-гидрокситетрагидрофуран-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (5,29 мг) и 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(((3S,4S)-4-гидрокситетрагидрофуран-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она
Первый элюированный энантиомер: ЖХМС (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 582.61; наблюдаемое; 583.2 (М+1). Чистота, ВЭЖХ (XB_0595TF): 96.23%. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.30 (bs, 2Н), 7.95 (s, 1Н), 7.23 (d, J=3.20 Гц, 1Н), 6.92-6.96 (m, 1H), 6.83-6.87 (m, 1H), 6.70-6.74 (m, 2Н), 5.48 (bs, 1Н), 4.58 (d, J=4.00 Гц, 1H), 4.58 (d, J=4.00 Гц, 1H), 4.07 (t, J=6.40 Гц, 2Н), 3.99-4.03 (m, 1Н), 3.85-3.89 (m, 1H), 3.71-3.74 (m, 1H), 3.55-3.58 (m, 1H), 2.61 (s, 4Н), 2.708 (m, 2Н), и 2.67 (m, 4Н).
Второй элюированный энантиомер: ЖХМС (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 582.61; наблюдаемое; 583.2 (М+1). Чистота, ВЭЖХ (XB_0595TF): 93.44%. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (bs, 2Н), 7.96 (s, 1Н), 7.24 (d, J=3.32 Гц, 1Н), 6.94 (t, J=9.36 Гц, 1Н), 6.83-6.87 (m, 1Н), 6.70-6.74 (m, 2Н), 5.46 (d, J=3.84 Гц, 1H), 4.58 (d, J=3.40 Гц, 1H), 4.16 (s, 1H), 4.08 (t, J=6.24 Гц, 2Н), 4.02-4.03 (m, 1Н), 3.86-3.89 (m, 1Н), 3.72 (d, J=9.96 Гц, 1H), 3.57 (d, J=9.60 Гц, 1Н), 2.9277 (m, 4Н), 2.9363(m, 2Н), и 2.7029 (s, 4Н).
Пример 88: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-5-(2-гидроксиэтокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез (2-(3-бром-4-фторфенокси)этокси)(трет-бутил)диметилсилана (2)
Смесь 3-бром-4-фторфенола (1; 2,3 г; 0,012 моль), (2-бромэтокси)(трет-бутил)диметилсилана (3,74 г; 0,016 моль) в ДМФА (30 мл) и K2СО3 (2,49 г; 0,018 моль) нагревают до 70°С в течение 16 часов. Ход реакции контролируют при помощи ТСХ. После завершения реакции к реакционной смеси добавляют воду (20 мл) и экстрагируют дихлорметаном (30 мл × 2). Объединенную органическую часть промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении, получая указанное в заголовке соединение (2 г, 29%), которое используют на следующей стадии.
Стадия 2: Синтез 1-(5-(2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этокси)-2-фторфенил)-пиперазина (3)
К перемешиваемому раствору 2-(3-бром-4-фтор-фенокси)этокси-трет-бутил-диметил-силана (2; 1,0 г; 0,003 моль) и пиперазина (499 мг; 0,006 моль)) в толуоле (15 мл) добавляют NaOBu-t (412 мг). Полученную смесь дегазируют азотом. Затем добавляют BINAP (107 мг; 0,00017 моль) и ацетат палладия (262 мг; 0,0003 моль) и полученную смесь нагревают до 110°С в течение 16 часов. После завершения реакции реакционную смесь фильтруют и фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный остаток очищают хроматографией на колонке с получением указанного в заголовке соединения (0,3 г, 29,5%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 354.54; наблюдаемое: 355.3 (М+1).
Стадия 3: Синтез 2-(4-фтор-3-(пиперазин-1-ил)фенокси)этан-1-ола (4)
К охлажденному льдом раствору 1-(5-(2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этокси)-2-фторфенил)-пиперазина (3; 0,354 г; 0,0009 моль) в ТГФ (10 мл) медленно добавляют фторид тетрабутиламмония (TBAF) (0,499 мл; 4 M в ТГФ). Полученной смеси дают достичь комнатной температуры и перемешивают в течение 16 часов. После завершения реакции реакционную смесь разбавляют водой и этил ацетатом. Отделенный органический слой сушат над безводным сульфатом натрия, концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с получением указанного в заголовке соединения (0,240 г, 98,99%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 240.28; наблюдаемое: 241.2 (М+1).
Стадия 4: Синтез 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-5-(2-гидроксиэтокси)фенил) пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 88)
К перемешиваемому раствору 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3 (2Н)-ил)этилметансульфоната (0,300 г; 0,0007 моль) в ДМФА (8 мл) добавляют 2-(4-фтор-3-(пиперазин-1-ил)фенокси)этан-1-ол (4; 0,218 г; 0,0009 моль) и DIPEA (0,397 мл; 0,002 моль). Реакционную смесь нагревают до 120°С в течение 16 часов. После завершения реакционную смесь концентрируют и полученный неочищенный продукт очищают препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой с получением указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества. Чистота, ВЭЖХ (XB_0595TF): 98.29%; ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 540.57; наблюдаемое: 541.0 (М+1). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 9.19 (s, 1Н), 8.39-8.45 (bs, 2Н), 7.97 (s, 1H), 7.11 (m, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.59 (m, 2Н), 4.86 (m, 1H), 4.32 (m, 2Н), 3.95-3.98 (m, 4Н), 3.68-3.70 (m, 2Н), 3.63 (m, 3Н), 2.94-3.00 (m, 2Н), и 3.69 (s, 2Н).
Пример 90: 5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(морфолин-3-илметокси) фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез трет-бутил 3-((5-(4-((бензилокси)карбонил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)метил)морфолин-4-карбоксилата (2)
К перемешиваемому раствору бензил 4-(2,4-дифтор-5-гидроксифенил) пиперазин-1-карбоксилата (1; 1,2 г; 2,9 ммоль) и трет-бутил 3-(гидроксиметил) морфолин-4-карбоксилата (1,1 г; 4,3 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляют трифенилфосфин (1,8 г; 6,9 моль), а затем добавляют по каплям DIAD (1,39 г; 6,9 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивают при 110°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь разбавляют водой (20 мл) и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке (20% этилацетат / гексан) с получением указанного в заголовке соединения в виде жидкости коричневого цвета (1,4 г, 63,8%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 547.25; наблюдаемое: 548.1 (М+1).
Стадия 2: Синтез трет-бутил 3-((2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)фенокси)метил)морфолин-4-карбоксилата (3)
К перемешиваемому раствору трет-бутил 3-((5-(4-((бензилокси)карбонил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)метил)морфолин-4-карбоксилата (0,5 г; 0,91 ммоль) в этилацетате (20 мл) добавляют 10% Pd/C (0,2 г) в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают в атмосфере гидрогенизации при комнатной температуре в течение 16 часов. Ход реакции контролируют при помощи ТСХ. После завершения реакционную смесь фильтруют с использованием целита для удаления Pd/C. Объединенный органический слой сушат над безводным Na2SO4 и концентрируют при пониженном давлении, получая указанное в заголовке соединение в виде клейкого твердого вещества коричневого цвета (280 мг, 73,5%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 413.21; наблюдаемое: 414.3 (М+1).
Стадия 3: Синтез трет-бутил 3-((5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)-метил)морфолин-4-карбоксилата (4)
К перемешиваемому раствору трет-бутил 3-((2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)фенокси)метил)-морфолин-4-карбоксилата (3; 100 мг; 0,242 ммоль) и 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этилметансульфоната (86 мг; 0,218 ммоль) в N,N-диметилформамиде (10 мл) в герметичной пробирке на 50 мл добавляют DIPEA (94 мг; 0,726 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при 120°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ и ЖХМС) растворитель удаляют при пониженном давлении. Реакционную массу обрабатывают водой и экстрагируют этил ацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают препаративной ТСХ с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества темно-коричневого цвета (25 мг, 14,4%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 713.26; наблюдаемое: 714.1 (М+1).
Стадия 4: Синтез 5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(морфолин-3-илметокси)-фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 90)
К перемешиваемому раствору трет-бутил 3-((3-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло)[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-4,5-дифторфенокси)-метил)-морфолин-4-карбоксилата (4; 25 мг; 0,035 ммоль) в ДХМ (5 мл) при 0°С, добавляют 4 н. HCl в диоксане (1,5 мл) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который промывают ацетонитрилом с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества коричневого цвета (16 мг, 73,3%); чистота, ВЭЖХ (АМ9010А3): 98.49%; ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 613.20; наблюдаемое: 614.1 (М+1); 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.33 (brs, 1Н), 9.53 (brs, 2Н), 8.41 (brs, 2Н), 7.97 (s, 1Н), 7.40 (t, J=11.20 Гц, 1Н), 7.26 (d, J=3.20 Гц, 1Н), 7.01 (t, J=7.60 Гц, 1H), 6.75-6.74 (m, 1Н), 4.33-4.23 (m, 4Н), 4.02-3.93 (m, 4Н), 3.69-3.62 (m, 6Н), 3.27 (m, 3Н), 2.98 (m, 4Н).
Пример 91: 5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(((3S,4S)-4-фторпирролидин-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез бензил 4-(5-((1-(трет-бутоксикарбонил)-4-гидроксипирролидин-3-ил)окси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-карбоксилата (2)
К суспензии бензил 4-(2,4-дифтор-5-гидроксифенил)пиперазин-1-карбоксилата (6,0 г; 17,22 ммоль) и трет-бутил 6-окса-3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-карбоксилата (3,82 г; 20,67 ммоль) в сухом ДМФА (30 мл), добавляют K2CO3 (7,13 г; 51,67 ммоль) и реакционную смесь нагревают при 100°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с получением указанного в заголовке соединения 2 в виде бесцветной жидкости (3,5 г, 36%); ЖХМС (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 533.57; наблюдаемое: 534.1 (М+1); 1H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.38-7.28 (m, 6Н), 6.89-6.88 (m, 1H), 5.49-5.48 (m, 1H), 5.10-4.65 (m, 2H), 4.15 (m, 1H), 4.05-4.03 (m, 1H), 3.59-3.49 (m, 6H), 2.96-2.88 (m, 4H), 1.40 (s, 9H).
Стадия 2: Синтез бензил 4-(5-(((3S,4S)-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-фторпирролидин-3-ил)окси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-карбоксилата (3)
Раствор бензил 4-(5-((1-(трет-бутоксикарбонил)-4-гидроксипирролидин-3-ил) окси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-карбоксилата (3,5 г; 6,56 ммоль) в дихлорметане (60 мл) охлаждают до -70°С и медленно добавляют DAST (2,11 г; 0,013 ммоль); реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь разбавляют водой и неочищенный продукт экстрагируют дихлорметаном. Органический слой последовательно промывают 10% NaHCO3, водой, рассолом, сушат над Na2SO4, фильтруют и концентрируют, получая неочищенный продукт. Образовавшиеся диастереомеры разделяли хроматографией на кварцевой колонке с отображением в виде пика 1 и пика 2. Энантиомеры, присутствовавшие в пике 1, разделяли с помощью хиральной СФХ. Метод: YMC целлюлоза SC_IPA; 70:30 (А: В), А = жидкий СО2, В = IPA, скорость потока: 0,9 мл / мин; длина волны: 220 нм. Первый пик, элюированный из хиральной колонки, концентрировали с получением указанного в заголовке соединения 3 в виде грязно-белого твердого вещества (0,7 г, 19%); ЖХМС (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 535.56; наблюдаемое; 536.2 (М+1); 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.38-7.29 (m, 6Н), 6.97-6.95(m, 1H), 5.38-5.25 (m, 1Н), 5.11-5.04 (m, 2Н), 3.84-3.79 (m, 7Н), 3.22-3.16 (m, 4Н), 1.42 (s, 9Н).
Стадия 3: Синтез трет-бутил (3S,4S)-3-(2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)фенокси)-4-фторпирролидин-1-карбоксилата (4)
Суспензию бензил 4-(5-(((3S,4S)-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-фторпирролидин-3-ил)окси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-карбоксилата (0,23 г; 0,429 ммоль) в этилацетате (10 мл) соединяют с 10% палладием на угле (0,049 г) и перемешивают под давлением водорода из баллона в течение 5 часов при комнатной температуре. После завершения реакции (ТСХ) реакционную массу фильтруют через слой целита и концентрируют, получая указанное в заголовке соединение 4 в виде твердого вещества светло-коричневого цвета (0,16 г, 92,8%); ЖХМС (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 401.43; наблюдаемое; 402.2 (М+1); 1Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 6.92 (t, J=8.8 Гц, 1Н), 6.56-6.51 (m, 2Н), 3.57 (m, 4Н), 2.91 (t, J=4.80 Гц, 4Н), 1.49 (s, 9Н).
Стадия 4: Синтез трет-бутил (3R,4R)-3-(5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)-4-фторпирролидин-1-карбоксилата (5)
К раствору трет-бутил (3S,4S)-3-(2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)фенокси)-4-фторпирролидин-1-карбоксилата (0,16 г; 0,399 ммоль) и 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этилметансульфоната (0,15 г; 0,39 ммоль) в сухом ДМФА (3 мл), добавляют N,N-диизопропилэтиламин (0,13 г; 0,83 ммоль) и реакционную смесь нагревают в герметичной пробирке при 120°С в течение 16 ч. После завершения реакции (ЖХМС) реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и очищают препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения 5 в виде грязно-белого твердого вещества (0,06 г, 21,4%). ЖХМС (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 701.73; наблюдаемое: 702.3 (М+1); 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.30 (s, 2Н), 7.95 (t, J=0.80 Гц, 1H), 7.30-7.23 (m, 2Н), 6.88 (t, J=8 Гц, 1H), 6.73-6.72 (m, 1H), 5.32 (s, 1H), 5.06-5.04 (m, 1Н), 4.06 (t, J=12 Гц, 2Н), 3.60-3.49 (m, 4Н), 2.92 (s, 4Н), 2.73-2.68 (m, 2Н), 2.67-2.51 (m, 4Н), 1.41 (s, 9Н).
Стадия 5: Синтез 5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(((3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 91)
К охлажденному льдом раствору трет-бутил (3R,4R)-3-(5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло)[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)-4-фторпирролидин-1-карбоксилата (0,06 г; 0,086 ммоль) в дихлорметане (3 мл), добавляют 2 М HCl в диэтиловом эфире (3 мл) под давлением азота. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов. После завершения реакции реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, растирают с диэтиловым эфиром и сушат с получением указанного в заголовке соединения 91 в виде твердого вещества грязно-белого цвета (0,02 г, 38,9%). ЖХМС (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 601.61; наблюдаемое: 602.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB_0595TF): 97.51%; 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): 10.26 (brs, 1Н), 9.83 (brs, 2Н), 8.41 (brs, 2Н), 7.96 (d, J=0.30 Гц, 1H), 7.46-7.43 (m, 1Н), 7.40-7.26 (m, 1H), 7.25-7.08 (m, 1Н), 6.75-6.74 (m, 1H), 5.42 (s, 1Н), 5.26-5.24 (m, 1Н),4.33(m, 2Н), 3.94-3.91 (m, 2Н), 3.64-3.55 (m, 10Н), 3.39-3.27 (m, 2Н), 3.17-3.05 (m, 2Н).
Пример 95: (S)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-((2-оксопирролидин-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез (R)-2-оксопирролидин-3-ил-метансульфоната (6)
К перемешиваемому раствору (3R)-3-гидроксипирролидин-2-она (5; 1,0 г; 9,9 ммоль) в ДХМ (15 мл) добавляют ТЭА (2,0 г; 19,8 ммоль) и мезилхлорид (1,36 г; 11,9 ммоль) при 0°С. Полученную реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. После завершения реакции реакционную смесь гасят раствором NH4Cl и экстрагируют ДХМ. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Сырой продукт очищают хроматографией на колонке с получением чистого продукта (1,2 г, 67,0%); 1H-ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ 5.17 (t, J=7.96 Гц, 1H), 3.53-3.50 (m, 1H), 3.43-3.38 (m, 1H), 3.27 (s, 3H), 2.69-2.64 (m, 1H), 2.43-2.36 (m, 1H).
Стадия 2: Синтез трет-бутил (S)-4-(2,4-дифтор-5-((2-охопирролидин-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (2)
К перемешиваемому раствору трет-бутил-4-(2,4-дифтор-5-гидроксифенил) пиперазин-1-карбоксилата (1; 900 мг; 2,86 ммоль) в ДМФА (20 мл) добавляют K2CO3 (791 мг; 5,73 ммоль)) и (R)-2-оксопирролидин-3-ил метансульфонат (6; 769 мг; 4,3 ммоль) и нагревают при 80°С в течение 16 часов. После завершения реакции реакционную смесь обрабатывают насыщенным раствором NH4Cl и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Неочищенную реакционную смесь очищают хроматографией на колонке с получением указанного в заголовке соединения (900 мг, 78%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 397.18; наблюдаемое: 398.1 (М+1).
Стадия 3: Синтез (S)-3-(2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)фенокси) пирролидин-2-она (3)
К перемешиваемому раствору трет-бутил (S)-4-(2,4-дифтор-5-((2-оксопирролидин-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (2; 900 мг; 2,26 ммоль) в дихлорметане (20 мл) при 0°С, по каплям добавляют 4 н. HCl в диоксане (2,5 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Соль растворяют в метаноле и нейтрализуют, используя полимерсвязанную п-толуолсульфоновую кислоту, чтобы получить свободное основание в виде грязно-белого смолистого вещества (400 мг, 58,2%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 297.13; наблюдаемое: 298.1 (М+1).
Стадия 4: Синтез (S)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-((2-оксопирролидин-3-ил)окси)-фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 95)
К перемешиваемому раствору (S)-3-(2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)фенокси)пирролидин-2-она (3; 350 мг; 1,18 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляют DIPEA (608 мг; 4,71 ммоль) и 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этилметансульфонат (420 мг; 1,06 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 120°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ и ЖХМС) растворитель удаляют при пониженном давлении и реакционную смесь распределяют между водой и этилацетатом. Отделенный органический слой промывают солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4 и фильтруют. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (3% метанол / дихлорметан) с получением указанного в заголовке соединения (250 мг, 34,1%); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 96.08%; ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 597.17; наблюдаемое: 598.0 (М+1); 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ8.31 (brs, 2Н), 8.08 (s, 1H), 7.95 (s, 1Н), 7.24-7.18 (m, 2Н), 6.97 (t,J=8.80 Гц, 1Н), 6.74-6.73 (m,1Н), 4.92 (t, J=7.60 Гц, 1Н), 4.08 (t, J=6.00 Гц, 2Н), 3.27-3.18 (m, 2Н), 2.91 (m, 4Н), 2.73-2.64 (m, 6Н), 2.03-1.98 (m, 1Н).
Пример 96: (R)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-((2-оксопирролидин-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез (S)-2-оксопирролидин-3-ил-метансульфоната (6)
К раствору (S)-3-гидроксипирролидин-2-она (5; 2,0 г; 0,02 моль) в ДХМ (10 мл) добавляют триэтиламин (4,0 г; 0,04 моль) и мезилхлорид (2,49 г; 0,022 моль) при 0°С. Полученную реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. После завершения реакции реакционную смесь гасят раствором NH4Cl и экстрагируют ДХМ. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая (S)-2-оксопирролидин-3-ил-метансульфонат в виде жидкости бледно-желтого цвета (1,4 г, 39,5%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 179.03; наблюдаемое: 180.1 (М+1).
Стадия 2: Синтез трет-бутил (R)-4-(2,4-дифтор-5-((2-оксопирролидин-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (2)
К раствору трет-бутил 4-(2,4дифтор-5-гидроксифенил)пиперазин-1-карбоксилата (1; 1,5 г; 4,8 ммоль) в ДМФА (20 мл) добавляют (S)-2-оксопирролидин-3-ил-метансульфонат (6; 1,3 г; 7,2 ммоль) и K2СО3 (1,32 г; 9,6 ммоль) и нагревают до 90°С в течение 16 часов. После завершения реакции реакционную смесь обрабатывают насыщенным раствором NH4Cl и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Неочищенную реакционную смесь очищают колоночной хроматографией с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества бледно-коричневого цвета (1,0 г, 45,8%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 397.18; наблюдаемое: 398.1 (М+1).
Стадия 3: Синтез (R)-3-(2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)фенокси)пирролидин-2-она (3)
К перемешиваемому раствору трет-бутил 4-[2,4-дифтор-5-[(3R)-2-оксопирролидин-3-ил]окси)фенил]пиперазин-1-карбоксилата (2; 1,0 г; 2,5 ммоль) в дихлорметане (15 мл) при 0°С по каплям добавляют 4 н. HCl в диоксане (10 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Соль растворяют в метаноле и нейтрализуют, используя полимерсвязанную п-толуолсульфоновую кислоту для получения свободного основания в виде смолистого вещества грязно-белого цвета (600 мг, 72,9%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 297.13; наблюдаемое: 298.2 (М+1).
Стадия 4: Синтез (R)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-((2-оксопирролидин-3-ил)окси)-фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 96)
К раствору 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этилметансульфоната (300 мг; 0,76 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляют DIPEA (0,49 г; 3,79 ммоль) и (R)-3-(2,4-дифтор-5-(пиперазин-)1-ил)фенокси)пирролидин-2-он (337 мг; 1,14 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 120°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ и ЖХМС) растворитель удаляют при пониженном давлении и реакционную смесь распределяют между водой и этилацетатом. Отделенный органический слой промывают солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4 и фильтруют. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и очищают с помощью колоночной флэш-хроматографии (3% метанол / дихлорметан) с получением указанного в заголовке соединения. Чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 97,73%; ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 597.17; наблюдаемое: 598.0 (М+1); 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ8.32 (brs, 2Н), 8.09 (s, 1H), 7.95 (s, 1Н), 7.19-7.25 (m, 2Н), 6.97 (t, J=8.64 Гц, 1Н), 6.74 (s, 1H), 4.93 (t, J=7.56 Гц, 2Н), 4.08 (t, J=6.00 Гц, 2Н), 3.18-3.26 (m, 2Н), 2.91 (m, 4Н), 2.64-2.73 (m, 6Н), 1.98-2.03 (m, 1H).
Пример 99: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(морфолин-3-илметокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез трет-бутил 3-((4-(4-((бензилокси)карбонил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)метил)морфолине-4-карбоксилата (2)
К перемешиваемому раствору бензил-4-(2-фтор-4-гидроксифенил) пиперазин-1-карбоксилата (1; 2,0 г; 6,05 ммоль) в толуоле (20 мл) добавляют трет-бутил-3-(гидроксиметил)морфолин-4-карбоксилат (2,63 г; 12,1 ммоль), трифенилфосфин (4,76 г; 12,1 ммоль) и DIAD (2,45 г; 12,1 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивают при 120°С в герметичной пробирке в течение 16 часов. Ход реакции контролируют ТСХ. После завершения реакции реакционную смесь распределяют между водой и этилацетатом и отделенный органический слой промывают солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4 и концентрируют в вакууме с получением неочищенного продукта. Полученное сырое вещество очищают колоночной хроматографией (20% этилацетат / гексан), получая трет-бутил 3-((4-(4-((бензилокси) карбонил) пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)-метил) морфолин-4-карбоксилат (1,0 г, 31,2%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 529.26; наблюдаемое: 530.1 (М+1).
Стадия 2: Синтез трет-бутил 3-((3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенокси)метил)-морфолин-4-карбоксилата (3)
К перемешиваемому раствору трет-бутил 3-((4-(4-((бензилокси)карбонил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)метил)морфолин-4-карбоксилата (2; 600 мг; 1,1 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляют 10% Pd/C (120 мг) при комнатной температуре и перемешивают в атмосфере водорода в течение 16 часов. После завершения реакционную смесь фильтруют, используя целит для удаления Pd/C. Объединенный органический слой сушат над безводным Na2SO4 и концентрируют при пониженном давлении, получая трет-бутил 3-((3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенокси)метил)морфолин-4-карбоксилат в виде клейкого твердого вещества (350 мг, 61,7%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 395.22; наблюдаемое: 396.1 (М+1).
Стадия 3: Синтез трет-бутил 3-((4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е]-[1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)-метил)-морфолин-4-карбоксилата (4)
К перемешиваемому раствору 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этилметансульфоната (200 мг; 0,631 ммоль) и трет-бутил 3-((3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенокси)метил) морфолин-4-карбоксилата (300 мг; 0,756 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляют DIPEA (292 мг; 2,27 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при 100°С в течение 16 часов. Ход реакции контролируют при помощи ТСХ. Реакционную смесь распределяют между водой и этилацетатом. Отделенный органический слой промывают раствором NaHCO3, солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4 и концентрируют при пониженном давлении, получая неочищенный продукт. Неочищенный продукт очищают препаративной ВЭЖХ с получением чистого трет-бутил 3-((4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло)[5,4-е][1,2,4]-триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси) метил) морфолин-4-карбоксилата (80 мг, 21,4%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 695.26; наблюдаемое: 696.1 (М+1).
Стадия 4: Синтез 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(морфолин-3-илметокси)фенил)-пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 99)
К перемешиваемому раствору трет-бутил 3-((4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е]-[1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н-ил))пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)метил)морфолин-4-карбоксилата (4; 80 мг; 0,11 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляют 2н. HCl в диэтиловом эфире (2 мл) и полученную реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. После завершения реакции реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, чтобы получить неочищенное соединение, которое очищают препаративной ВЭЖХ для получения чистого 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(морфолин-3-илметокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она в виде твердого вещества грязно-белого цвета (15 мг, 22%); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 95.90%; ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 595.21; наблюдаемое: 596.1 (М+1); 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (brs, 2Н), 7.95 (m, 1H), 7.24 (dd, J=0.80 Гц and 3.40 Гц, 1Н), 6.92 (t, J=10.00 Гц, 1H), 6.80 (dd, J=2.80 Гц and 14.00 Гц, 1H), 6.73 (dd, J=2.00 Гц and 3.40 Гц, 1Н), 6.67 (dd, J=2.40 Гц and 8.80 Гц, 1H), 4.08 (t, J=6.40 Гц, 2Н), 3.81-3.74 (m, 3Н), 3.67-3.64 (m, 1Н), 3.34 (m, 1H), 3.18 (t, J=10.80 Гц, 1Н), 3.01-2.98 (m, 1H), 2.85 (m, 4Н), 2.77-2.67 (m, 4Н), 2.63 (m, 4Н).
Пример 100: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(морфолин-2-илметокси)
фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез трет-бутил 2-(((метилсульфонил)окси)метил)морфолин-4-карбоксилата (2)
К охлажденной суспензии трет-бутил 2-(гидроксиметил)морфолин-4-карбоксилата (1; 5,0 г; 23,01 ммоль) в сухом ДХМ (50 мл) по каплям добавляют метансульфонилхлорид (3,42 г; 29,92 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь разбавляют водой и неочищенный продукт экстрагируют ДХМ, концентрируют и очищают с помощью колоночной хроматографии (30% этилацетат / гексан в качестве элюента) с получением указанного в заголовке соединения 2 в виде смолистого вещества светло-желтого цвета (6,0 г, 87%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 295.35; наблюдаемое; 196.1 (М+1-100).
Стадия 2: Синтез трет-бутил 2-((4-(4-((бензилокси)карбонил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)метил)морфолин-4-карбоксилата (3)
К суспензии бензил 4-(2-фтор-4-гидроксифенил)пиперазин-1-карбоксилата (2; 0,5 г; 1,51 ммоль) и трет-бутил 2-(((метилсульфонил)окси)метил)морфолин-4-карбоксилата (0,53 г; 1,81 ммоль) в сухом ДМФА (10 мл) добавляют K2CO3 (0,63 г; 4,54 ммоль) и реакционную смесь нагревают при 100°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную массу фильтруют через слой целита (celite pad) и фильтрат концентрируют и очищают хроматографией на колонке (30% этилацетат / гексан в качестве элюента) с получением указанного в заголовке соединения 3 в виде твердого вещества грязно-белого цвета (0,35 г, 39%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 529.61; наблюдаемое: 530.3 (М+1). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.39-7.35 (m, 5H), 7.32-7.00 (m, 1H), 6.97-6.85 (m, 1H), 6.84-6.72 (m, 1H), 5.11 (s, 2H), 3.98-3.96 (m, 2H), 3.86-3.73 (m, 2H), 3.70-3.66 (m, 2H), 3.64-3.43 (m, 2H), 3.38-3.34 (m, 4H), 3.32 (m, 1H), 2.89 (m, 4H).
Стадия 3: Синтез трет-бутил 2-((3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенокси)метил)морфолин-4-карбоксилата (4)
К раствору трет-бутил 2-((4-(4-((бензилокси)карбонил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)метил)морфолин-4-карбоксилата (3; 0,33 г, 0,62 ммоль) в этилацетате (6 мл) добавляют 10%-й палладий на угле (0,060 г) и реакционную смесь перемешивают под давлением водорода из баллона при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь фильтруют через слой целита и фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения 4 в виде твердого вещества светло-коричневого цвета (0,18 г, 65%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 395.48; наблюдаемое: 396.3 (М+1). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 6.95 (t, J=10.00 Гц, 1H), 6.84-6.80 (m, 1H), 6.72-6.70 (m, 1H), 3.96-3.95 (m, 2H), 3.92-3.83 (m, 2H), 3.74-3.67 (m, 2H), 3.65-3.64 (m, 1H), 3.33-2.99 (m, 9H), 1.42 (s, 9H).
Стадия 4: Синтез трет-бутил 2-((4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)-метил)-орфолин-4-карбоксилата (5)
Смесь 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4] триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этилметансульфоната (0,16 г; 0,40 ммоль), трет-бутил 2-((3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенокси)метил)морфолин-4-карбоксилата (4; 0,176 г; 0,444 ммоль) и DIPEA (0,26 г; 2,01 ммоль) в сухом ДМФА (3 мл) нагревают при 120°С в течение 16 часов в герметичной пробирке. После завершения (ТСХ) реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют водой и неочищенное твердое вещество отфильтровывают и очищают колоночной хроматографией (70% этилацетат / гексан в качестве элюента) с получением указанного в заголовке соединения 5 в виде твердого вещества грязно-белого цвета (0,05 г; 16,4%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 695.77; наблюдаемое: 696.0 (М+1). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.30 (brs, 2H), 7.95 (brs, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.92 (m, 1H), 6.83-6.73 (m, 1H), 6.69 (d, J=8.80 Гц, 2Н), 4.08-3.95 (m, 2Н), 3.85-3.83 (m, 2Н), 3.70 (m, 2Н), 3.43 (m, 2Н), 3.33 (m, 1H), 2.85 (m, 4H), 2.68-2.63 (m, 4H), 2.45-2.33 (m, 4H), 1.41 (s, 9H).
Стадия 5: Синтез 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(морфолин-2-илметокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 100)
К охлажденному льдом раствору трет-бутил 2-((4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)метил)морфолин-4-карбоксилата (5; 0,04 г; 0,057 ммоль) в дихлорметане (1 мл) добавляют 2 M HCl в диэтиловом эфире (1 мл) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. После завершения реакции (ТСХ) образовавшееся твердое вещество (соль HCl) отфильтровывают, сушат при пониженном давлении, получая указанное в заголовке соединение 100 в виде грязно-белого твердого вещества (0,014 г, 36%); чистота, ВЭЖХ (XB_0595TF.M): 95.72%; ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 595.35; наблюдаемое: 596.2 (М+1); 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.11 (brs, 1H), 9.39-9.41 (m, 2Н), 8.42 (brs, 2Н), 7.97 (s, 1H), 7.26-7.27 (m, 1H), 7.04 (t, J=9.64 Гц, 1H), 6.90-6.94 (m, 1H), 6.74-6.77 (m, 2H), 4.14 (t, J=3.32 Гц, 2H), 3.99-4.03 (m, 4H), 3.91-3.94 (m, 2H), 3.78 (t, J=12.12 Гц, 1H), 3.60-3.61 (m, 2H), 3.30-3.48 (m, 3Н), 3.271-3.198 (m, 2H), 3.17-3.00 (m, 4H).
Примеры 101 и 102: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(((3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он и 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(((3S,4S)-4-фторпирролидин-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез бензил 4-(2-фтор-4-гидроксифенил)пиперазин-1-карбоксилата (2)
К охлажденному льдом перемешиваемому раствору 4-бром-3-фторфенола (1; 15 г; 0,079 моль) добавляют бензилпиперазин-1-карбоксилат (20,76 г; 0,094 моль), 2-дициклогексилфосфино-2'-бифенил (3,704 г; 0,009 моль), Pd2(dba)3 (7,186 г; 0,008 моль) в ТГФ (100 мл), бис(триметилсилил)амид лития (100 мл). После добавления реакционной смеси дают достичь комнатной температуры. Затем нагревают до 65°С в течение 24 часов. После завершения реакции реакционную смесь гасят насыщенным раствором хлорида аммония и экстрагируют этилацетатом. Объединенный органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией (230-400 силикагель (30% ЕА / петролейный эфир в качестве элюента) с получением продукта в виде грязно-белого твердого вещества (10,00 г, 30,1%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 330.36; наблюдаемое: 331.1 (М+1).
Стадия 2: Синтез бензил 4-(4-((1-(трет-бутоксикарбонил)-4-фторпирролидин-3-ил)окси)-2-фторфенил)пиперазин-1-карбоксилата (3)
К перемешиваемому раствору бензил-4-(2-фтор-4-гидроксифенил)пиперазин-1-карбоксилата (6,8 г; 20,58 ммоль) добавляют трет-бутил 6-окса-3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-карбоксилат (4,986 г; 26,76 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл), Cs2CO3 (10,3 г, 30,88 ммоль). Полученную смесь перемешивают при 100°С в течение 16 часов. Затем фильтруют для удаления неорганических соединений. Неочищенный остаток, полученный при концентрировании фильтрата, очищают колоночной хроматографией (230-400 силикагель (30% ЕА / петролейный эфир в качестве элюента) с получением твердого вещества грязно-белого цвета (6,00 г, 56,0%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 515.58; наблюдаемое: 516.2 (М+1).
Стадия 3: Синтез бензил 4-(4-((-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-фторпирролидин-3-ил)окси)-2-фторфенил)пиперазин-1-карбоксилата (4А и 4В)
К охлажденному льдом перемешиваемому раствору бензил-4-(4-((1-(трет-бутоксикарбонил)-4-гидроксипирролидин-3-ил)окси)-2-фторфенил)пиперазин-1-карбоксилата (3; 6 г; 11,64 ммоль) в ДХМ (30 мл) добавляют DAST (5,816 г; 34,91 ммоль) при -20°С. Полученную смесь перемешивают при -20°С в течение 0,5 часа, а затем при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции реакционную смесь гасят насыщенным раствором NaHCO3 и экстрагируют ДХМ. Объединенный органический слой сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией (230-400 силикагель (30% ЕА / гексан в качестве элюента) с получением двух фракций продукта. Фракция-1 - 1,4 г, Фракция-2 - 900 мг. ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 517.57; наблюдаемое: 518.2 (М+1).
Две указанные фракции дополнительно очищают методом хиральной СФХ (0,5% DEA в IPA, YMC Cellulose-SC) с получением энантиомеров 4А и 4В.
Стадия 4: Синтез трет-бутил (3R,4R)-3-фтор-4-(3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенокси)-пирролидин-1-карбоксилата (5А)
К перемешиваемому раствору бензил-4-(4-(((3R,4R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-фторпирролидин-3-ил)окси)-2-фторфенил)пиперазин-1-карбоксилата (4А, 430 мг; 0,831 ммоль) в этилацетате (10 мл) в атмосфере азота добавляют Pd/C 10% (200 мг). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 32 часов. Затем ее фильтруют через слой целита для удаления Pd/C. Неочищенный остаток, полученный при концентрировании фильтрата, получают в виде клейкого материала. Неочищенный материал используют на следующей стадии без очистки (0,23 г, 69,3%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 383.44; наблюдаемое: 384.3 (М+1).
Стадия 5: Синтез трет-бутил (3R,4R)-3-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло-[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)-4-фторпирролидин-1-карбоксилата (7А)
К перемешиваемому раствору трет-бутил (3R,4R)-3-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло-[5,4-е]][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)-4-фторпирролидин-1-карбоксилата (5А, 100 мг; 0,261 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляют 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)ацетальдегид (82 мг; 0,261 ммоль) и триэтиламин (Et3N) (52 мг; 0,552 ммоль). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов. Затем добавляют NaBH(ОАс)3 (165 мг; 0,522 ммоль) и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 24 часов. По завершении реакционную смесь разбавляют ДХМ. Отделенную органическую часть последовательно промывают насыщенным раствором бикарбоната, насыщенным солевым раствором. После сушки над безводным Na2SO4 его фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией (230-400 силикагель (5% метанол / ДХМ в качестве элюента) с получением продукта в виде грязно-белого твердого вещества (0,025 г, 14,0%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 683.74; наблюдаемое: 684.3 (М+1).
Стадия 6: Синтез 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(((3R,4R)-4-фторпирролидин-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 101)
К охлажденному льдом перемешиваемому раствору трет-бутил (3R,4R)-3-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло)[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)-4-фторпирролидин-1-карбоксилата (7А, 25 мг; 0,037 ммоль) в ДХМ (1 мл) добавляют НСl в эфире (0,073 мл). Полученную смесь перемешивают при 0°С в течение 1 часа. После завершения реакции реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт растирают с эфиром, получая искомый продукт в виде грязно-белого твердого вещества (0,013 г, 52,75%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 583.62; наблюдаемое: 584.0 (М+1). Чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 92.31%. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 9.86 (широкий s, 1H), 9.69 (широкий s, 1H), 9.47 (широкий s, 1H), 8.42 (m, 2H), 7.97 (s, 1H), 7.26 (d, J=3.60 Гц, 1H), 7.06-7.10 (m, 2H), 6.87 (d, J=8.40 Гц, 1H), 6.74-6.76 (m, 1H), 5.49 (m, 1H), 5.07-5.13 (m, 1H), 4.32 (brs, 2H), 3.72-3.92 (m, 2H) 3.62 (d, J=5.20 Гц, 2H), 3.39 (t, J=5.20 Гц, 5Н), и 3.02 (brs, 5H).
Стадия 4: Синтез трет-бутил (3S,4S)-3-фтор-4-(3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенокси)-пирролидин-1-карбоксилата (5В)
К перемешиваемому раствору бензил-4-(4-(((3S,4S)-1-(трет-бутоксикарбонил)-4-фторпирролидин-3-ил)окси)-2-фторфенил)пиперазин-1-карбоксилата (4В, 380 мг; 0,734 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавляют Pd/C 10% (200 мг) в атмосфере азота. Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 32 часов. Затем ее фильтруют через слой целита для удаления Pd/C. Неочищенный остаток, образующийся при концентрировании фильтрата, получают в виде клейкого материала. Неочищенный материал используют на следующей стадии без очистки (0,2 г, 71,04%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 383.44; наблюдаемое: 384.3 (М+1).
Стадия 5: Синтез трет-бутил (3S,4S)-3-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло-[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)-4-фторпирролидин-1-карбоксилата (7В)
К перемешиваемому раствору трет-бутил (3S,4S)-3-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло-[5,4-е]][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2H)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фтор-фенокси)-4-фторпирролидин-1-карбоксилата (5В, 70 мг; 0,187 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляют 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)-ацетальдегид (57 мг; 0,187 ммоль) и триэтиламин (Et3N) (52 мг; 0,548 ммоль). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов. Затем добавляют NaBH(ОАс)3 (77 мг; 0,365 ммоль) и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 24 часов. По завершении реакционную смесь разбавляют ДХМ. Отделенную органическую часть последовательно промывают насыщенным раствором бикарбоната, насыщенным солевым раствором. После сушки над безводным Na2SO4 его фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией (230-400 силикагель (5% метанол / ДХМ в качестве элюента) с получением искомого продукта в виде твердого вещества грязно-белого цвета (0,027 г, 19,9%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 683.74; наблюдаемое: 684.3 (М+1).
Стадия 6: Синтез 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(((3S,4S)-4-фторпирролидин-3-ил)окси)-фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3H)-она (Соединение 102)
К охлажденному льдом перемешиваемому раствору трет-бутил (3S,4S)-3-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло)[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фтор-фенокси)-4-фторпирролидин-1-карбоксилата (7В, 25 мг; 0,037 ммоль) в ДХМ (1 мл) добавляют HCl в эфире (0,073 мл). Полученную смесь перемешивают при 0°С в течение 1 часа. После завершения реакции реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт растирают с эфиром, получая искомый продукт в виде грязно-белого твердого вещества (0,017 г, 69,7%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 583.62; наблюдаемое: 584.4 (М+1). Чистота, ВЭЖХ (XB_0595TF): 93.18%. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.27 (широкий s, 1H), 9.69-9.82 (m, 2H), 8.41 (широкий s, 2H), 7.97 (m, 1H), 7.26-7.27 (m, 1H), 7.05-7.10 (m, 2H), 6.87-6.90 (m, 1H), 6.75 (t, J=1.60 Гц, 1H), 5.49 (d, J=4.00 Гц, 1H), 5.07-5.13 (m, 1H), 4.32 (d, J=5.20 Гц, 2H), 3.73-3.93 (m, 2H), 3.49-3.66 (m, 2H), 3.40-3.44 (m, 3H), 3.30-3.39 (m, 2H), 3.25-3.30 (m, 3H), и 3.07-3.10 (m, 2H).
Пример 111: 5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(((1S,4S)-1-оксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез тетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил-метансульфоната (2)
К охлажденному льдом раствору тетрагидро-2Н-тиопиран-4-ола (2,0 г; 16,94 ммоль) и триэтиламина (4,26 г; 42,2 ммоль) в дихлорметане (30 мл) добавляют [по каплям] метансульфонилхлорид (2,1 г; 18,62 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 12 часов. После завершения реакции реакционную смесь разбавляют водой и неочищенный продукт экстрагируют дихлорметаном. Органический слой сушат, концентрируют и очищают колоночной хроматографией (20% этилацетат / гексан в качестве элюента), получая указанное в заголовке соединение 2 в виде жидкости светло-коричневого цвета (3,1 г, 94%). Неочищенный продукт непосредственно используют на следующей стадии.
Стадия 2: Синтез трет-бутил 4-(2,4-дифтор-5-((тетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил)окси)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (3)
К раствору тетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил-метансульфоната (2; 2,25 г; 11,45 ммоль) и трет-бутил 4-(2,4-дифтор-5-гидроксифенил)пиперазин-1-карбоксилата (3 г; 9,55) ммоль) в N,N-диметилформамиде (10 мл) добавляют K2СО3 (2,69 г; 19,04 ммоль) и реакционную смесь нагревают при 100°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь разбавляют водой (30 мл) и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают солевым раствором, водой, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая неочищенный продукт, который затем очищают хроматографией на колонке (20% этилацетат / гексан в качестве элюента), получая указанное в заголовке соединение 3 в виде грязно-белого твердого вещества (1,7 г, 42,54%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 414.51; наблюдаемое: 415.1 (М+1).
Стадия 3: Синтез трет-бутил 4-(2,4-дифтор-5-((1-оксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил)окси)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (4)
Раствор трет-бутил 4-(2,4-дифтор-5-(тетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил)окси)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (3; 1,7 г; 4,101 ммоль) в этановой кислоте (20 мл) охлаждают до 0°С, добавляют Н2О2 (30%, 2 мл) и реакционную смесь перемешивают при неизменной температуре в течение 1 часа. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь нейтрализуют охлажденным 10%-ным раствором NaOH и неочищенный продукт экстрагируют дихлорметаном. Органический слой промывают рассолом, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая рацемический продукт в виде грязно-белого твердого вещества. Выход: (1,62 г, 91,8%). Изомеры, присутствующие в рацемической смеси, были разделены методом хиральной СФХ. Первый элюированный пик (пик 1) концентрировали, получая указанное в заголовке соединение 4 в виде твердого вещества грязно-белого цвета (0,65 г, 80%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 430.51; наблюдаемое: 431.1 (М+1). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): 7.31 (t, J=12 Гц, 1Н), 6.97-6.93 (s, J=8.8 Гц 1Н), 4.43-4.40 (m, 1H), 3.46-3.16 (m, 4H), 2.96-2.90 (m, 6H), 2.75-2.67 (m, 2H), 2.50-2.30 (m, 2H), 1.86-1.83 (m, 2H), 1.42 (s, 9H).
Стадия 4: Синтез (1s,4s)-4-(2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)фенокси)тетрагидро-2Н-тиопиран-1-оксида (5)
К охлажденному льдом раствору трет-бутил-4-(2,4-дифтор-5-(((1s,4s)-1-оксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил)окси)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (4; 0,48 г; 1,11 ммоль) в дихлорметане (10 мл), добавляют трифторэтановую кислоту (1,3 мл) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов. После завершения реакции (ТСХ) избыток ТФУК удаляют выпариванием и реакционную смесь нейтрализуют, обрабатывая ее полимерсвязанной п-толуолсульфоновой кислотой (tosic asid resin), чтобы получить указанное в заголовке соединение 5 в виде твердого вещества грязно-белого цвета (0,31 г, 84%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 330.39; наблюдаемое: 331.0 (М+1).
Стадия 5: Синтез 5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(((1s,4s)-1-оксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]-триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 111)
Смесь 2-5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этилметансульфоната (0,35 г; 0,88 ммоль), (1s,4s)-4-(2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)фенокси)тетрагидро-2Н-тиопиран-1-оксида (5; 0,32 г; 0,97 ммоль) и DIPEA (0,34 г; 2,64 ммоль) в сухом ДМФА (3 мл) нагревают при 120°С в течение 16 часов в герметичной пробирке. После завершения (ТСХ) реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют водой и неочищенное твердое вещество отфильтровывают и очищают колоночной хроматографией (70% этилацетат / гексан в качестве элюента) с получением указанного в заголовке соединения 111 в виде грязно-белого твердого вещества. ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 630.39; наблюдаемое: 631.1 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB_0595TF.M): 96.25%.
1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.29 (s, 2H), 7.94 (s, 1H), 7.23 (t, J=10.72 Гц, 2H), 6.80 (t, J=8.52 Гц, 1H), 6.72 (t, J=1.72 Гц, 1H), 4.36 (t, J=9.08 Гц, 1H), 4.05 (t, J=7.32 Гц, 2H), 2.90 (s, 6H), 2.79 (d, J=11.56 Гц, 2H), 2.73 (d, J=8.80 Гц, 2H), 2.69 (t, J=9.92 Гц, 4Н), 2.14 (q, J=10.68 Гц, 2H), 1.97 (d, J=12.84 Гц, 2H).
Пример 112: 5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(((1r,4r)-1-оксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез (1r,4r)-4-(2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)фенокси)тетрагидро-2Н-тиопиран-1-оксида (2)
К охлажденному льдом раствору трет-бутил 4-(2,4-дифтор-5-((((1r,4r)-1-оксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил)окси)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (1; 0,3 г; 0,697 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляют трифторэтановую кислоту (1,3 мл) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов. После завершения реакции (ГСХ) избыток ТФУК удаляют выпариванием и реакционную смесь нейтрализуют, обрабатывая ее полимерсвязанной п-толуолсульфоновой кислотой (tosic asid resin), чтобы получить указанное в заголовке соединение 2 в виде грязно-белого твердого вещества (0,20 г, 85%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 330.39; наблюдаемое: 331.0 (М+1).
Стадия 2: Синтез 5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(((1r,4r)-1-оксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]-триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 112)
Смесь 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этилметансульфоната (0,23 г; 0,58 ммоль), (1r,4r)4-(2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)фенокси)тетрагидро-2Н-тиопиран-1-оксида (2; 0,21 г; 0,63 ммоль) и DIPEA (0,23 г; 1,74 ммоль) в сухом ДМФА (2,5 мл) нагревают при 120°С в течение 16 часов в герметичной пробирке. После завершения (ТСХ) реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют водой и неочищенное твердое вещество отфильтровывают и очищают колоночной хроматографией (70% этилацетат / гексан в качестве элюента) с получением указанного в заголовке соединения 3 в виде твердого вещества грязно-белого цвета. ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 630.39; наблюдаемое: 631.1 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB_0595TF.M): 94.36%. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.29 (s, 2H), 7.94 (s, 1H), 7.23 (t, J=11.8 Гц, 2Н), 6.85 (t, J=8.64 Гц, 1Н), 6.72 (t, J=1.72 Гц, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.05 (t, J=7.32 Гц, 2H), 2.93 (brs, 6H), 2.72-2.67 (m, 4H), 2.62 (s, 6H), 2.34-2.32 (m, 2H), 1.85 (d, J=12.84 Гц, 2H).
Примеры 119 и 120: (R)-5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(метилсульфинил)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он и (S)-5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(метилсульфинил)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез (3,4-дифторфенил)(метил)сульфана (2)
К перемешиваемому раствору 3,4-дифторбензолтиола (1; 8,0 г; 54,74 ммоль) в ДМФА (25 мл) добавляют K2CO3 (9,08 г; 65,68 ммоль), а затем MeI (8,5 г; 60,21 ммоль) при 0°С в герметичной пробирке и перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения (ТСХ) реакционную массу вливают в ледяную воду и экстрагируют диэтиловым эфиром. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая указанное в заголовке соединение. Неочищенный продукт используют на следующей стадии без очистки (8,05 г, 88,1%).
Стадия 2: Синтез 1,2-дифтор-4-(метилсульфинил)бензола (3)
К перемешиваемому раствору (3,4-дифторфенил)(метил)сульфана (2; 8,0 г; 49,94 ммоль) в ДХМ (120 мл) добавляют м-хлорнадбензойную кислоту (mCPBA) (8,6 г; 49,94 ммоль) при 0°С и перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч. После завершения реакции (ТСХ) реакционную массу гасят насыщенным раствором бикарбоната натрия и экстрагируют ДХМ. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией с получением указанного в заголовке соединения (5,0 г, 55,6%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 176.01; наблюдаемое: 177.0 (М+1).
Стадия 3: Синтез трет-бутил 4-(2-фтор-4-(метилсульфинил)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (4, 5)
К перемешиваемому раствору трет-бутил-пиперазин-1-карбоксилата (5,3 г; 28,38 ммоль) в ДМФА (50 мл) при 0°С добавляют K2CO3 (7,8 г; 56,76 ммоль), а затем 1,2-дифтор-4-(метилсульфинил)-бензол (3; 5,0 г; 28,38 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 145°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную массу гасят водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией с получением указанного в заголовке соединения (2,2 г, 22,7%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 342.14; наблюдаемое; 343.0 (М+1).
Рацемическую смесь (0,22 г) подвергали хиральному разделению методом СФХ (0,22 г образца растворяли в 3 мл метанола), колонка-Lux А1, подвижная фаза: 70:30 (А: В), А = жидкий CO2, В = метанол, скорость потока: 3,0 мл / мин; длина волны: 220 нм) для получения 810 мг пика 1 (4) и 820 мг пика 2 (5), соответственно.
Примечание: пик 1, полученный в результате очистки методом СФХ, произвольно рассматривался в качестве (S)-изомера, а пик 2 - в качестве (R)-изомера.
Стадия 4: Синтез (S)-1-(2-фтор-4-(метилсульфинил)фенил)пиперазина (6)
К перемешиваемому раствору трет-бутил (S)-4-(2-фтор-4-(метилсульфинил)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (4; 800 мг; 0,292 ммоль) в ДХМ (18 мл) добавляют ТФУК (1,3 г; 11,68 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Соль растворяют в метаноле и нейтрализуют, используя полимерсвязанную п-толуолсульфоновую кислоту (Tosic acid scavenger resin), чтобы получить указанное в заголовке соединение в виде свободного основания (510 мг, 88,2%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 242.09; наблюдаемое: 243.1 (М+1).
Стадия 5: Синтез (S)-5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(метилсульфинил)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 120)
К перемешиваемому раствору (S)-1-(2-фтор-4-(метилсульфинил)фенил)пиперазина (6; 200 мг; 0,825 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляют DIPEA (426,7 мг; 3,302 ммоль) с последующим добавлением 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-c]пиримидин-3(2Н)-ил)этилметансульфоната (294 мг; 0,743 ммоль) в герметичной пробирке и перемешивают при 120°С в течение 16 часов. После завершения (ТСХ и ЖХМС) растворитель удаляют при пониженном давлении. Реакционную массу гасят водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией с получением указанного в заголовке соединения (180 мг, 37,7%); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 94.08%; ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 542.13; наблюдаемое: 543.2 (М+1); 1H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.30 (brs, 2Н), 7.95 (m, 1H), 7.48-7.39 (m, 2H), 7.24 (d, J=3.60 Гц, 1Н), 7.15 (t, J=8.40 Гц, 1H), 6.74-6.73 (m, 1H), 4.09 (m, 2H), 3.04 (m, 4H), 2.72 (s, 3H), 2.67 (m, 4H).
Пример 119: (S)-5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(метилсульфинил)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез (R)-1-(2-фтор-4-(метилсульфинил)фенил)пиперазина (7)
К перемешиваемому раствору трет-бутил (R)-4-(2-фтор-4-(метилсульфинил)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (5; 800 мг; 0,292 ммоль) в ДХМ (18 мл) добавляют ТФУК (1,3 г; 11,68 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Соль растворяют в метаноле и нейтрализуют, используя полимерсвязанную п-толуолсульфоновую кислоту (Tosic acid scavenger resin), с получением указанного в заголовке соединения в виде свободного основания (510 мг, 88,8%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 242.09; наблюдаемое: 243.1 (М+1).
Стадия 2: Синтез (R)-5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(метилсульфинил)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 119)
К перемешиваемому раствору (R)-1-(2-фтор-4-(метилсульфинил)фенил)пиперазина (7; 200 мг; 0,825 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляют DIPEA (426,7 мг; 3,302 ммоль) с последующим добавлением 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2H)-ил)этилметансульфоната (294 мг; 0,743 ммоль) в герметичной пробирке и перемешивают при 120°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ и ЖХМС) растворитель удаляют при пониженном давлении. Реакционную массу обрабатывают водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищают колоночной хроматографией с получением указанного в заголовке соединения (120 мг, 25,1%); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 93.75%; ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 542.13; наблюдаемое: 541.0 (М-1); 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.32 (brs, 2Н), 7.96 (s, 1Н), 7.49-7.40 (m, 2H), 7.25 (d, J=3.16 Гц, 1Н), 7.16 (t, J=8.52 Гц, 1Н), 6.74-6.73 (m, 1H), 4.09 (m, 2H), 3.04 (m, 4H), 2.76-2.66 (m, 9H).
Примеры 121 и 122: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(((1s,4s)-1-оксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он и 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(((1r,4r)-1-оксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез тетрагидро-2Н-тиопиран-4-ола (11)
К охлажденному льдом раствору тетрагидротиопиран-4-она (10; 5 г; 0,043 моль) в метаноле (40 мл) медленно добавляют 5 н. раствор гидроксида натрия (10 мл). Затем порциями добавляют боргидрид натрия (0,488 г; 0,013 моль). После добавления, реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры. После завершения реакции (~ 1 ч) реакционную смесь вливают в воду и экстрагируют дихлорметаном. Объединенный органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4 и концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией с использованием 5% метанола в ДХМ для получения чистого продукта (4 г; 51,90%). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 4.69 (d, J=4.24 Гц, 1Н), 3.41-3.47 (m, 1H), 2.65-2.70 (m, 2H), 2.50-2.54 (m, 1H), 2.47 (d, J=2.76 Гц, 1H), 2.00-2.02 (m, 2H), и 1.96-1.99 (m, 2H).
Стадия 2: Синтез тетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил метансульфоната (12)
К охлажденному льдом раствору тетрагидротиопиран-4-ола (11; 3,5 г; 0,030 моль) в дихлорметане (40 мл) добавляют триэтиламин (5,982 г; 0,059 моль) и метансульфонилхлорида (0,727 г; 0,006 моль). Через 3 ч реакционную смесь выливают в воду и экстрагируют дихлорметаном. Объединенный органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, и концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный остаток подвергают колоночной хроматографии с использованием 2% метанола в ДХМ в качестве элюента с получением продукта (6 г, 98,07%).
Стадия 3: Синтез трет-бутил 4-(2-фтор-4-((тетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил)окси)фенил)-пиперазин-1-карбоксилата (2)
К раствору трет-бутил 4-(2,4-дифтор-5-гидроксифенил)пиперазин-1-карбоксилата (1; 1,6 г; 5,399 ммоль) и тетрагидротиопиран-4-ил метансульфоната (12, 1,272 г; 6,479 ммоль) в ДМФА (20 мл) добавляют K2СО3 (1,490 г; 10,80 ммоль). Полученную смесь нагревают до 100°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Объединенный органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией (50% этилацетат / гексан в качестве элюента) с получением продукта в виде твердого вещества грязно-белого цвета (1,5 г, 69%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 396.52; наблюдаемое; 397.1 (М+1).
Стадия 4: Синтез трет-бутил 4-(2-фтор-4-((1-оксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил)окси)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (3, 4)
К охлажденной льдом смеси трет-бутил-4-(2-фтор-4-тетрагидротиопиран-4-илокси-фенил)-пиперазин-1-карбоксилата (1,650 г; 4,161 ммоль, 1 экв) в этановой кислоте (25 мл) добавляют по каплям перекись водорода (1 мл) и смесь перемешивают при неизменной температуре в течение 1 часа. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь вливают в 4 н. раствор гидроксида натрия (20 мл) и экстрагируют этилацетатом. Объединенный органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией (80% этилацетат / гексан в качестве элюента) с получением продукта в виде твердого вещества грязно-белого цвета (1,4 г; 80,7%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 412.52; наблюдаемое; 413.2 (М+1).
Рацемическую смесь (1,4 г) разделяли методом хиральной СФХ (1,4 г образца растворяли в 10 мл метанола), колонка - YMC Amylose-SA, подвижная фаза: 70:30 (А : В), А = жидкий CO2, В = 0,5% DEA в метаноле, скорость потока: 3 мл/мин; длина волны: 210 нм. Выход: 600 мг пика 1 (3) и 500 мг пика 2 (4).
Стадия 5: Синтез (1s,4s)-4-(3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенокси)тетрагидро-2Н-тиопиран-1-оксида (5)
К охлажденному льдом раствору трет-бутил-4-(2-фтор-4-(((1s,4s)-1-оксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил)окси)фенил)-пиперазин-1-карбоксилата (3; 0,5 г; 1,212 ммоль) в дихлорметане (10 мл) [добавляют] трифторэтановую кислоту (0,207 г; 0,002 моль). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и температуре окружающей среды. Полученный остаток растирают с диэтиловым эфиром. Затем его растворяют в метаноле, пропускают через Si-Carbonate с получением свободного основания, которое непосредственно используется на следующей стадии (0,38 г, 99,35%). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.02 (d, J=9.20 Гц, 1Н), 6.90-6.98 (m, 1H), 6.76-6.79 (m, 1Н), 4.40-4.43 (m, 1Н), 3.18 (s, 1Н), 3.05 (t, J=2.40 Гц, 4Н), 2.93-2.99 (m, 4Н), 2.85 (t, J=11.20 Гц, 1Н), 2.79 (d, J=2.40 Гц, 2H), 2.12 (t, J=10.00 Гц, 2H), и 1.96 (d, J=12.40 Гц, 2H).
Стадия 6: Синтез 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(((1s,4s)-1-оксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]-триазоло-[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 121)
К смеси 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этилметансульфоната (7; 0,385 г; 0,971 ммоль) и (1s,4s)-4-(3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенокси)тетрагидро-2Н-тиопиран-1-оксида (0,334 г; 1,068 ммоль) в ДМФА (4 мл) добавляют DIPEA (0,626 г; 4,856 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 90°С в течение 16 часов. После завершения реакционную смесь разбавляют водой (10 мл) и экстрагируют этилацетатом. Объединенный органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют, концентрируют. Неочищенный продукт очищают препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, получая искомый продукт в виде твердого вещества грязно-белого цвета (0,045 г, 7,5%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 612.70; наблюдаемое; 613 (М+1). Чистота, ВЭЖХ (XB_0595TF): 99.21%. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (broad s, 2H), 7.95 (s, 1Н), 7.24 (d, J=3.20 Гц, 1Н), 6.88-6.93 (m, 2H), 6.73-6.77 (m, 2H), 4.59 (s, 1Н), 4.08 (t, J=5.60 Гц, 2H), 3.50 (d, J=12.80 Гц, 2H), 2.86-2.95 (m, 6H), 2.63-2.71 (m, 6H), 2.27-2.33 (m, 2H) и 1.80-1.83 (m, 2H).
Пример 122: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(((1r,4r)-1-оксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 5: Синтез (1r,4r)-4-(3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенокси)тетрагидро-2Н-тиопиран-1-оксида (6)
К охлажденному льдом раствору трет-бутил 4-(2-фтор-4-((((1r,4r)-1-оксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил)окси)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (4; 0,5 г; 1,212 ммоль) в дихлорметане (10 мл) [добавляют] трифторэтановую кислоту (0,207 г; 0,002 моль). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и температуре окружающей среды. Полученный остаток растирают с диэтиловым эфиром. Затем его растворяют в метаноле, пропускают через Si-Carbonate с получением свободного основания, которое непосредственно используют на следующей стадии (0,375 г, 98,05%). 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.02 (d, J=9.20 Гц, 1Н), 6.90-6.98 (m, 1H), 6.76-6.79 (m, 1H), 4.40-4.43 (m, 1H), 3.18 (s, 1H), 3.05 (t, J=2.40 Гц, 4H), 2.93-2.99 (m, 4H), 2.85 (t, J=11.20 Гц, 1H), 2.79 (d, J=2.40 Гц, 2H), 2.12 (t, J=10.00 Гц, 2H), и 1.96 (d, J=12.40 Гц, 2H).
Стадия 6: Синтез 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(((1r,4r)-1-оксидотетрагидро-2Н-тиопиран-4-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]-триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 122)
К смеси 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этилметансульфоната (7; 0,235 г; 0,593 ммоль) и (1s,4s)-4-(3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенокси)тетрагидро-2Н-тиопиран-1-оксид (0,204 г; 0,652 ммоль) в ДМФА (2 мл) добавляют DIPEA (0,382 г; 2,964 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 90°С в течение 16 часов. После завершения реакции реакционную смесь разбавляют водой (10 мл) и экстрагируют этилацетатом. Объединенный органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют, концентрируют. Неочищенный продукт очищают препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, получая искомый продукт в виде твердого вещества грязно-белого цвета (0,031 г, 8,4%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 612.70; наблюдаемое; 613.1 (М+1). Чистота, ВЭЖХ (XB_0595TF): 98.46%. 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (широкий s, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.24 (d, J=3.20 Гц, 1H), 6.88-6.93 (m, 2H), 6.73-6.77 (m, 2H), 4.39 (t, J=9.20 Гц, 1H), 4.08 (t, J=6.00 Гц, 2H), 3.50 (d, J=12.40 Гц, 2H), 2.72-2.95 (m, 6H), 2.63-2.70 (m, 6H), 2.13-2.33 (m, 2H) и 1.85-1.99 (m, 2H).
Пример 126: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(1-оксидотиоморфолино)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез 4-бром-2-фторанилина (2)
К перемешиваемому раствору 4-бром-2-фтор-1-нитробензола (1; 9,0 г; 13,64 ммоль) и этановой кислоты (11,5 г; 0,57 моль) в этаноле (60 мл) добавляют порошок железа (15,9 г; 0,285). моль). Реакционную смесь перемешивают при 80°С в течение 1 часа. После завершения реакции реакционную смесь разбавляют этилацетатом и фильтруют через слой целита. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении, чтобы получить неочищенное соединение, которое непосредственно используют на следующей стадии (6,0 г, 76,5%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 188.96; наблюдаемое: 192.0 (М+1).
Стадия 2: Синтез 1-(4-бром-2-фторфенил)пиперазина (3)
К перемешиваемому раствору 4-бром-2-фторанилина (2; 6,0 г; 31,58 ммоль) в диглиме (4,8 мл) добавляют бис(2-хлорэтил)амин гидрохлорид (6,7 г; 37,89 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при 160°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и обрабатывают холодным ацетоном. Осажденное твердое вещество отфильтровывают и непосредственно используют на следующей стадии (5,0 г, 61%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 258.02; наблюдаемое: 259.0 (М+1).
Стадия 3: Синтез трет-бутил 4-(4-бром-2-фторфенил)пиперазин-1-карбоксилата (4)
К перемешиваемому раствору 1-(4-бром-2-фторфенил)пиперазина (3; 4,0 г; 15,4 ммоль) и ТЭА (3,1 г; 30,9 ммоль) в ДХМ (30 мл) при 0°С добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (5,04 г; 23,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь обрабатывают водой и экстрагируют ДХМ. Отделенный органический слой промывают раствором NaHCO3, солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4 и концентрируют при пониженном давлении, получая неочищенный продукт, который очищают колоночной хроматографией с получением указанного в заголовке соединения (4,0 г, 72,2%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 358.07; наблюдаемое: 259.0 (М-99+1).
Стадия 4: Синтез трет-бутил 4-(2-фтор-4-тиоморфолинофенил)пиперазин-1-карбоксилата (5)
К перемешиваемому раствору трет-бутил 4-(4-бром-2-фторфенил)пиперазин-1-карбоксилата (4; 4,0 г; 11,1 ммоль) и тиоморфолина (1,3 г; 12,3 ммоль) в толуоле (30 мл) добавляют XPhos (530 мг; 1,11 ммоль), а затем трет-бутилат натрия (NaOtBu) (2,34 г; 24,4 ммоль) в герметичной пробирке. Реакционную смесь продувают газообразным N2 и добавляют Pd(OAc)2 (250 мг; 1,11 ммоль). Реакционную смесь нагревают при 110°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь обрабатывают водой и экстрагируют этилацетатом. Отделенный органический слой промывают раствором NaHCO3, солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4 и концентрируют при пониженном давлении, получая неочищенный продукт. Неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией с получением указанного в заголовке соединения (1,53 г, 33,9%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 381.19; наблюдаемое: 382.1 (М+1).
Стадия 5: Синтез трет-бутил 4-(2-фтор-4-тиоморфолинофенил)пиперазин-1-карбоксилата (6)
К перемешиваемому раствору трет-бутил 4-(2-фтор-4-тиоморфолинофенил)пиперазин-1-карбоксилата (5; 1,8 г; 4,7 ммоль) в этановой кислоте (20 мл) при 0°С добавляют перекись водорода (160,48 мг; 4.7 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь обрабатывают 10%-ным раствором NaOH (водн.) и экстрагируют ДХМ. Отделенный органический слой промывают раствором NaHCO3, солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4 и концентрируют при пониженном давлении, получая неочищенный продукт. Неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией с получением указанного в заголовке соединения (1,2 г, 62,6%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 397.18; наблюдаемое: 398.1 (М+1).
Стадия 6: Синтез 4-(3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенил)тиоморфолин-1-оксида (7)
К перемешиваемому раствору трет-бутил 4-(2-фтор-4-(1-оксидотиоморфолино)фенил)пиперазин-1-карбоксилата (6; 1,2 г; 3,0 ммоль) в ДХМ (15 мл) при 0°С добавляют ТФУК (330 мг; 9,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Остаток растворяют в метаноле и нейтрализуют, используя полимерсвязанную п-толуолсульфоновую кислоту (Tosic acid scavenger resin), чтобы получить свободное основание (750 мг, 82,2%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 297.13; наблюдаемое: 298.1 (М+1).
Стадия 7: Синтез 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(1-оксидотиоморфолино)фенил)-пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 126)
К перемешиваемому раствору 1-(3-фтор-4-(пиперазин-1-ил)фенил)пиперидин-4-она (350 мг; 1,26 ммоль) в ДМФА (5 мл) добавляют 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло [4,5-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-1(2Н)-ил)этилметансульфонат (500 мг; 1,26 ммоль) и DIPEA (815 мг; 6,31 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 120°С в течение 16 часов. После завершения реакционную массу концентрируют при пониженном давлении и перекристаллизовывают с ацетонитрилом и диэтиловым эфиром, чтобы получить чистый 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(1-оксидотиоморфолино)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]-триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он (Соединение 126) (150 мг, 19%); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 95.08%; ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 597.17; наблюдаемое: 598.2 (M+1); 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (brs, 2Н), 7.95 (s, 1Н), 7.24 (d, J=3.2 Гц, 1Н), 6.92-6.85 (m, 2Н), 6.73-6.71 (m, 2Н), 4.08-4.05 (m, 2Н), 3.70-3.66 (m, 2Н), 3.53-3.50 (m, 2Н), 2.93-2.86 (m, 7H), 2.74-2.63 (m, 7H).
Пример 127: (S)-5-амино-3-(2-(4-(5-(2,3-дигидроксипропокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез (S)-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метил метансульфоната (7)
К перемешиваемому раствору (R)-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метанола (6; 2,5 г; 19 ммоль) в ДХМ (30 мл) добавляют триэтиламин (9,6 г; 95). ммоль) и метансульфонилхлорид (4,33 г; 38 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивают в течение 3 ч при 0°С. Реакцию контролируют при помощи ТСХ и после завершения реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют ДХМ. Объединенный органический слой промывают рассолом, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют, затем концентрируют при пониженном давлении, получая указанное в заголовке соединение в виде вязкой жидкости желтого цвета (3,0 г, 75,4%); 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ 4.39-4.43 (m, 1Н), 4.25 (d, J=5.20 Гц, 2Н), 4.11-4.15 (m, 1H), 3.84-3.87 (m, 1H), 3.09-3.15 (m, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.43 (s, 3H).
Стадия 2: Синтез бензил (R)-4-(5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-карбоксилата (2)
К перемешиваемому раствору бензил 4-(2,4-дифтор-5-гидроксифенил)пиперазин-1-карбоксилата (1; 1 г; 2,9 ммоль) и (S)-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метилметансульфоната (7; 1,15 г; 5,8 ммоль) в ДМФА (20 мл) добавляют карбонат калия (1,19 г; 8,7 ммоль) и реакционную смесь нагревают до 90°С в течение 16 часов. Ход реакции контролируют при помощи ТСХ. После завершения реакции реакционную массу разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Объединенный органический слой промывают рассолом, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и затем концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией (30% этилацетат / гексан), получая бензил (R)-4-(5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-карбоксилат (2) в виде твердого вещества светло-коричневого цвета (800 мг, 56,8%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 462.20; наблюдаемое: 463.0 (М+1).
Стадия 3: Синтез (R)-1-(5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2,4-дифтор-фенил)пиперазина (3)
К перемешиваемому раствору бензил (R)-4-(5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-карбоксилата (2; 0,8 г; 1,73 ммоль) в этилацетате (20 мл) добавляют в атмосфере азота 10% Pd/C (0,2 г). Реакционную смесь перемешивают в атмосфере Н2 в течение 16 часов. Ход реакции контролируют при помощи ТСХ. После завершения реакции реакционную смесь фильтруют с использованием целита для удаления Pd/C. Объединенный органический слой сушат над безводным Na2SO4 и концентрируют при пониженном давлении, получая (R)-1-(5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин (3) в виде вязкого коричневого материала (0,45 г, 76,2%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 328.16; наблюдаемое: 329.1 (M+1).
Стадия 4: Синтез (R)-5-амино-3-(2-(4-(5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (4)
К перемешиваемому раствору (R)-1-(5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2,4-дифторфенил)пиперазина (3; 0,45 г; 1,4 ммоль) и 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этилметансульфоната (0,48 г; 1,2 ммоль) в N,N-диметилформамиде (6 мл) добавляют DIPEA (0,71 г; 5,5 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при 120°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ и ЖХМС) растворитель удаляют при пониженном давлении. Реакционную массу обрабатывают водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией (14-16% Метанол / ДХМ) и обогащают путем промывания 50%-й смесью ацетонитрила/ диэтилового эфира, чтобы получить (R)-5-амино-3-(2-(4)-(5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он (4) в виде твердого вещества светло-желтого цвета (100 г, 13,1%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 628.20; наблюдаемое; 629.0 (M+1);
Стадия 5: Синтез (S)-5-амино-3-(2-(4-(5-(2,3-дигидроксипропокси)-2,4-дифторфенил)-пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 127)
К перемешиваемому раствору (R)-5-амино-3-(2-(4-(5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (4; 50 мг; 0,08 ммоль) в 1,4-диоксане (4 мл) при 0°С, добавляют 4 н. HCl в диоксане (20 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 1 часа при комнатной температуре. Ход реакции контролировалуют при помощи ТСХ. После завершения реакции реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении для удаления растворителя. Неочищенный продукт перекристаллизовывают с ацетонитрилом с получением (S)-5-амино-3-(2-(4-(5-(2,3-дигидроксипропокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 127) в виде твердого вещества светло-коричневого цвета (35 мг, 67,3%); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 92.58%; ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 588.17; наблюдаемое: 589.2 (М+1); 1H-ямр (400 МГц, ДМСО-d6): δ 9.67 (brs, 1Н), 8.42 (brs, 2H), 7.97 (s, 1H), 7.35-7.26 (m, 2H), 6.86 (t, J=8.40 Гц, 1Н), 6.75-6.74 (m, 1Н), 4.31 (m, 2H), 4.09-4.05 (m, 1Н), 3.97-3.92 (m, 3H), 3.77 (t, J=5.20 Гц, 1Н), 3.43 (m, 2H), 3.29 (m, 2H), 3.06-2.99 (m, 2H).
Пример 128: (R)-5-амино-3-(2-(4-(5-(2,3-дигидроксипропокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он
Стадия 1: Синтез 5-амино-2,4-дифторфенола (2)
К перемешиваемому раствору 2,4-дифтор-5-нитрофенола (1; 25 г; 0,143 моль) в этилацетате (200 мл) добавляют 10% Pd/C (4,55 г; 0,043 моль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ) реакционную смесь фильтруют через слой целита, промывают этилацетатом (1 000 мл) и концентрируют при пониженном давлении, получая 5-амино-2,4-дифторфенол (2) в виде коричневатого твердого вещества (20,10 г, 94,6%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 145.03; наблюдаемое: 146.2 (М+1).
Стадия 2: Синтез 2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)фенола (3)
К перемешиваемому раствору 5-амино-2,4-дифторфенола (2; 20 г; 0,131 моль) в сульфолане (30 мл) добавляют бис(2-хлорэтил)амин гидрохлорид (31 г, 0,170 моль). Полученную смесь перемешивают при 150°С в атмосфере азота в течение 16 часов. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и к неочищенной реакционной смеси добавляют ацетон и перемешивают при 0°С в течение 1 часа. Через 1 ч выпавшее в осадок твердое вещество отфильтровывают и промывают охлажденным ацетоном в атмосфере азота. Твердый материал сушат в вакууме, получая 2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)фенол (3) в виде твердого вещества грязно-белого цвета (23 г, 80,3%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 214.09; наблюдаемое: 215.1 (М+1).
Стадия 3: Синтез бензил 4-(2,4-дифтор-5-гидроксифенил)пиперазин-1-карбоксилата (4)
К перемешиваемому раствору 2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)фенолгидрохлорида (3; 25 г; 0,117 моль) в ТГФ (250 мл) добавляют NaHCO3 (14,7 г; 0,175 моль) и карбобензоксихлорид (Cbz-Cl) (16,66 мл; 0,117 моль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов. Ход реакции контролируют при помощи ТСХ. Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом и объединенные органические слои промывают рассолом, сушат над безводным Na2SO4 и затем концентрируют при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией (30% этилацетат / гексан в качестве элюента) с получением бензил 4-(2,4-дифтор-5-гидроксифенил)пиперазин-1-карбоксилата в виде белого твердого вещества (20 г, 45,8%). ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 348.13; наблюдаемое: 349.2 (М+1).
Стадия 4: Синтез (R)-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метилметансульфоната (10)
К перемешиваемому раствору (S)-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метанола (9; 12 г; 0,091 моль) в ДХМ (100 мл) добавляют триэтиламин (37,76 мл; 0,272 моль) и метансульфонилхлорид (8,4 мл; 0,109 моль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивают в течение 3 ч при 0°С. Ход реакции контролируют при помощи ТСХ и после завершения реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют ДХМ. Объединенный органический слой промывают солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют, затем концентрируют при пониженном давлении, получая указанное в заголовке соединение в виде вязкой светло-желтой жидкости (21,8 г, 77,8%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 210.06; наблюдаемое: 211.0 (М+1).
Стадия 5: Синтез бензил (S)-4-(5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-карбоксилата (5)
К перемешиваемому раствору бензил 4-(2,4-дифтор-5-гидроксифенил)пиперазин-1-карбоксилата (4; 10 г; 0,029 моль) и (R)-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метилметансульфоната (10; 27 г; 0,034 моль) в ДМФА (70 мл) добавляют карбонат калия (11,9 г; 0,086 моль) и реакционную смесь нагревают до 90°С в течение 16 часов. Ход реакции контролируют при помощи ТСХ. После завершения реакции реакционную массу разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Объединенный органический слой промывают рассолом, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и затем концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией (30% этилацетат / гексан) с получением бензил (S)-4-(5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-карбоксилата (5) в виде твердого вещества светло-коричневого цвета (13 г, 70,50%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 462.20; наблюдаемое: 463.1 (М+1).
Стадия 6: Синтез (S)-1-(5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2,4-дифтор-фенил)пиперазина (6)
К перемешиваемому раствору бензил (S)-4-(5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-карбоксилата (5; 13 г; 0,028 моль) в этилацетате (100 мл) добавляют в атмосфере азота 10% Pd/C (4 г). Реакционную смесь перемешивают в атмосфере H2 в течение 16 часов. Ход реакции контролируют с помощью ТСХ. После завершения реакции реакционную смесь фильтруют с использованием целита для удаления Pd/C. Объединенный органический слой сушат над безводным Na2SO4 и концентрируют при пониженном давлении, получая (S)-1-(5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин (6) в виде вязкого материала коричневого цвета (8,55 г, 93,0%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 328.16; наблюдаемое: 329.2 (М+1).
Стадия 7: Синтез (S)-5-амино-3-(2-(4-(5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (7)
К перемешиваемому раствору (S)-1-(5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2,4-дифторфенил)пиперазина (6; 7 г; 0,021 моль) и 2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло-[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этилметансульфоната (7,6 г; 0,019 моль) в N,N-диметилформамиде (50 мл) добавляют DIPEA (11,12 мл; 0,064 моль) и реакционную смесь перемешивают при 120°С в течение 16 часов. После завершения реакции (ТСХ и ЖХМС) растворитель удаляют при пониженном давлении. Реакционную массу обрабатывают водой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают колоночной хроматографией (14-16% метанол/ДХМ) и обогащают путем промывания 50%-й смесью ацетонитрила/диэтилового эфира, чтобы получить (S)-5-амино-3-(2-(4-(5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он (7) в виде твердого вещества светло-желтого цвета (2,6 г; 17,8%); ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 628.20; наблюдаемое; 629.2 (М+1).
Стадия 8: Синтез (R)-5-амино-3-(2-(4-(5-(2,3-дигидроксипропокси)-2,4-дифторфенил)-пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 128)
К перемешиваемому раствору (S)-5-амино-3-(2-(4-(5-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (7; 1,4 г; 2,23 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) при 0°С добавляют 4 н. HCl в диоксане (20 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 1 часа при комнатной температуре. Ход реакции контролируют при помощи ТСХ. После завершения реакции реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении для удаления растворителя. Неочищенный продукт перекристаллизовывают с ацетонитрилом для получения (R)-5-амино-3-(2-(4-(5-(2,3-дигидроксипропокси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-она (Соединение 128) в виде твердого вещества белого цвета (1,2 г; 87%); чистота, ВЭЖХ (АМ9010А3): 95.05%; ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 588.17; наблюдаемое: 589.2 (М+1); 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.34 (brs, 1Н), 8.40 (brs, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.33-7.24 (m, 2H), 6.87-6.82 (m, 1H), 6.73 (s, 1H), 4.31 (m, 2H), 4.08-4.05 (m, 1H), 3.96-3.91 (m, 3H), 3.76 (m, 1H), 3.59 (m, 2H), 3.51-3.48 (m, 2H), 3.42-3.38 (m, 2H), 3.29-3.27 (m, 2H), 3.14-3.08 (m, 2H).
Следующие примеры были получены в соответствии с процедурами, аналогичными описанным в Примерах выше:
Пример 9: 5-амино-8-(фуран-2-ил)-3-(2-(4-(4-(2-гидроксиэтокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 522.18; наблюдаемое: 523.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 97.0%; 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7.79 (s, 1H), 7.28 (d, J=3.2 Гц, 1H), 7.01 (d, J=8.1 Гц, 2H), 6.93 (d, J=9.2 Гц, 2H), 6.69 (dd, J=1.6 & 3.2 Гц, 1Н), 4.49 (m, 2H), 4.01 (t, J=4.4 Гц, 2Н), 3.86 (t, J=4.4 Гц, 2H), 3.67 (m, 4H).
Пример 10: 2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)фенокси)этановой кислоты гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 536.16; наблюдаемое: 536.8 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 93.00%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 12.92 (brs, 1Н), 9.72 (brs, 1Н), 8.44 (brs, 2H), 7.97 (t, J=0.8 Гц, 1Н), 7.26 (dd, J=0.6 & 3.2 Гц, 1Н), 6.96-6.94 (m, 2H), 6.88-6.84 (m, 2H), 6.75 (dd, J=1.6 & 3.2 Гц, 1Н), 4.60 (s, 2H), 4.32 (m, 2H), 3.92-3.90 (m, 2H), 3.72-3.69 (m, 2H), 3.27-3.24 (m, 2H), 2.92 (m, 2H).
Пример 11: 2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)фенокси)ацетамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 535.58; наблюдаемое: 535.8 (М+); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 92.65%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (brs, 2H), 7.94 (m, 1Н), 7.44 (m, 1Н), 7.36 (m, 1Н), 7.23 (d, J=3.20 Гц, 1Н), 6.85 (t, J=4.40 Гц, 4H), 6.73 (s, 1Н), 4.31 (s, 2H), 4.08 (m, 1Н), 2.95 (m, 4H), 2.68 (d, J=6.00 Гц, 2H), 2.61 (m, 3H), и 2.30 (s, 2H).
Пример 12: 5-амино-3-(2-(4-(4-(2,3-дигидроксипропокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 552.19; наблюдаемое: 552,8 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 91.20%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 9.7 (brs, 1Н), 9.0 (brs, 1Н), 8.41 (brs, 2H), 7.98 (dd, J=0.8 & 1.6 Гц, 1Н), 7.27 (m, 1Н), 6.87 (m, 2H), 6.76-7.68 (m, 3H), 4.39 (m, 3H), 3.28 (m, 3H), 2.85 (m, 4H).
Пример 13: 5-амино-3-(2-(4-(4-(2-аминоэтокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 521.6; наблюдаемое: 522.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 96.52%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.41 (brs, 2H), 8.23 (brs, 3Н), 7.96 (dd, J=2 Гц, 1Н), 7.25 (d, J=3.2 Гц, 1Н), 6.99 (d, J=9.20 Гц, 2H), 6.93 (d, J=2.40 Гц, 2H), 6.74 (t, J=1.60 Гц, 1Н), 4.33 (t, J=5.60 Гц, 2H), 4.12 (t, J=5.20 Гц, 2H), 3.88 (d, J=10.80 Гц, 2H), 3.69 (d, J=12.00 Гц, 2H), 3.58 (m, 2H), и 3.14-3.20 (m, 6H).
Пример 14: 4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)бензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 505.56; наблюдаемое: 506.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 99.08%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.32 (brs, 2H), 7.95 (brs, 1Н), 7.73 (brs, 3Н), 7.24 (brs, 1Н), 6.91-7.01 (m, 3Н), 6.73 (brs, 1Н), 4.09 (brs, 2H), 3.19 (brs, 4H), и 2.69 (brs, 6H).
Пример 15: 4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-N-метилбензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 519.58; наблюдаемое: 520.8 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 95.07%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.33 (brs, 2H), 8.13 (d, J=4.40 Гц, 1Н), 7.95 (s, 1Н), 7.70 (d, J=8.60 Гц, 2H), 7.24 (d, J=3.32 Гц, 1H), 6.91(d, J=8.64 Гц, 2H), 6.73 (d, J=1.72 Гц, 1Н), 4.09 (t, J=6.16 Гц, 2H), 3.18 (m, 4H), 2.72-2.74 (m, 5H), и 2.62-2.70 (m, 4H).
Пример 16: 5-амино-8-(фуран-2-ил)-3-(2-(4-(4-(2-морфолиноэтокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 591.24; наблюдаемое: 592.3 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 99.39%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.32 (brs, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.24 (d, J=3.2 Гц, 1H), 6.85-6.79 (m, 4H), 6.73-6.72 (m, 1H), 4.08 (t, J=6.0 Гц, 2H), 3.99 (t, J=5.6 Гц, 2H), 3.57 (t, J=4.0 Гц, 4H), 2.94 (m, 4H), 2.71-2.62 (m, 8H), 2.46 (m, 4H).
Пример 17: 5-амино-3-(2-(4-(4-(2-(диметиламино)этокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 549.22; наблюдаемое: 549.8 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 92.54%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (brs, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.24 (d, J=2.8 Гц, 1H), 6.85-6.79 (m, 4H), 6.73 (m, 1H), 4.08 (t, J=6.00 Гц, 2H), 3.95 (t, J=6.0 Гц, 2H), 2.94 (m, 4H), 2.69 (m, 2H), 2.61 (m, 4H), 2.56 (t, J=6.0 Гц, 2H), 2.19 (s, 6H).
Пример 18: 4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)бензолсульфонамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 541.13; наблюдаемое: 542.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 90.64%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (brs, 2H), 7.94 (d, J=0.40 Гц, 1H), 7.60 (d, J=8.4 Гц, 2H), 7.23 (d, J=3.6 Гц, 1H), 7.07-6.98 (m, 4H), 6.72 (m, 1H), 4.08 (m, 2H), 3.20 (m, 4H), 2.70-2.61 (m, 6H).
Пример 19: 4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-N-метилбензолсульфонамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 555.15; наблюдаемое: 556.3 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 93.45%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.33 (brs, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.55 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.24 (d, J=3.2 Гц, 1H), 7.11 (q, J=4.80 Гц, 1H), 7.03 (d, J=8.8 Гц, 2H), 6.73 (m, 1H), 4.10 (t, J=5.6 Гц, 2Н), 3.24 (m, 4H), 2.73-2.62 (m, 6H), 2.34 (d, J=5.20 Гц, 3Н).
Пример 20: 5-амино-8-(фуран-2-ил)-3-(2-(4-(4-(метилсульфонил)фенил)пиперазин-1-ил)этил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС: (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 540.62; наблюдаемое: 541.3 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 98.58%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (brs, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.67 (d, J=8.80 Гц, 2Н), 7.24 (d, J=3.20 Гц, 1Н), 7.05 (d, J=8.80 Гц, 2H), 6.73 (q, J=2.00 Гц, 1H), 4.11-4.05 (m, 2H), 3.27 (m, 4H), 3.08 (m, 3H), 2.71 (t, J=6.00 Гц, 2H), и 2.51 (m, 4H).
Пример 21: 5-амино-8-(фуран-2-ил)-3-(2-(4-(4-(метилсульфинил) фенил)пиперазин-1-ил)этил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 524.14; наблюдаемое: 525.1; чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 98.99%; 1H ЯМР: (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.32 (brs, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.49 (d, J=8.8 Гц, 2H), 7.24 (d, J=3.2 Гц, 1H), 7.06 (d, J=8.8 Гц, 2H), 6.73 (dd, J=1.6 & 3.2 Гц, 1H), 4.09 (t, J=6.0 Гц, 2H), 3.18 (m, 4H), 2.72-2.62 (m, 9H).
Пример 22: 3-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)бензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 505.16; наблюдаемое: 506.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 90.01%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.33 (brs, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.26-7.23 (m, 4H), 7.05 (m, 1H), 6.73 (m, 1H), 4.10 (t, J=6.0 Гц, 2H), 3.12 (m, 4H), 2.73-2.63 (m, 6H).
Пример 23: 5-амино-8-(фуран-2-ил)-3-(2-(4-(3-(2-гидроксиэтокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 522.18; наблюдаемое: 522.8 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 92.67%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 9.98 (brs, 1H), 8.43 (brs, 2H), 7.96 (t, J=0.8 Гц, 1H), 7.26 (d, J=0.8 Гц, 1H), 7.16 (t, J=8.0 Гц, 1H), 6.74 (dd, J=1.6 & 3.2 Гц, 1H), 6.57-6.52 (m, 2H), 6.46 (dd, J=2.0 & 8. 0 Гц, 1H), 4.31 (t, J=5.6 Гц, 2H), 3.97-3.85 (m, 6Н), 3.70 (t, J=5.2 Гц, 2H), 3.60 (m, 2Н), 3.03 (m, 2Н).
Пример 24: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(2-охо-2-(пиперазин-1-ил)этокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он гидрохлорид.
ЖХМС: (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 622.68; наблюдаемое: 623.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 98.01%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.90 (brs, 2Н), 8.41 (brs, 2Н), 7.97 (d, J=0.80 Гц, 1Н), 7.26 (t, J=5.20 Гц, 1H), 7.00 (d, J=8.40 Гц, 1H), 6.90 (d, J=13.60 Гц, 1H), 6.75-6.74 (m, 2H), 4.86 (m, 2H), 4.30 (b s, 2H), 3.94 (b s, 2H), 3.64 (t, J=4.80 Гц, 4H), 3.49 (t, J=5.20 Гц, 2H), 3.22 (m, 4H), 3.18 (brs, 2H), 3.1 (brs, 2H), и 2.94 (brs, 2H).
Пример 25: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(пиперидин-4-илметокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с] пиримидин-2(3Н)-он гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 593.23; наблюдаемое: 594.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 96.25%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.25 (brs, 1Н), 8.85 (brs, 1Н), 8.55 (brs, 1Н), 8.41 (brs, 2Н), 7.96 (s, 1H), 7.26 (d, J=3.2 Гц, 1H), 7.03 (t, J=9.60 Гц, 1H), 6.88 (dd, J=2.4 & 14.0 Гц, 1H), 6.74 (m, J=2Н), 4.32 (m, 2Н), 4.06 (m, 4Н), 3.62 (m, 2Н), 3.39 (m, 2Н), 3.28 (m, 4Н), 3.05 (t, J=12.4 Гц, 2Н), 2.90 (m, 2Н), 2.01 (m, 1H), 1.89 (m, 2Н), 1.47 (m, 2Н).
Пример 26: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(пиперазин-1-карбонил)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с] пиримидин-2(3Н)-он гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 592.21; наблюдаемое: 592.9 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 95.39%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.30 (brs, 1H), 9.22 (brs, 2Н), 8.42 (brs, 2Н), 7.96 (s, 1H), 7.34 (dd, J=1.6 & 12.8 Гц, 1H), 7.28 (m, 2Н), 7.14 (t, J=8.8 Гц, 1Н), 6.74 (dd, J=1.6 & 3.2 Гц, 1H), 4.33 (m, 2H), 3.96-3.88 (m, 2H), 3.17 (m, 6H), 2.32 (m, 6H).
Пример 27: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(2-(пиперазин-1-ил)этокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с] пиримидин-2(3Н)-он гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 608.24; наблюдаемое: 609.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 91.12%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.52 (brs, 1Н), 9.71 (brs, 2Н), 8.42 (brs, 2Н), 7.97 (s, 1Н), 7.26 (d, J=3.6 Гц, 1H), 7.10-6.99 (m, 2Н), 6.84-6.74 (m, 2Н), 4.40 (t, J=4.4 Гц, 2Н), 4.33 (t, J=4.8 Гц, 2Н), 3.92 (m, 2Н), 3.45-3.40 (m, 4Н), 3.24 (m, 3Н), 3.11 (m, 3Н).
Пример 28: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(пиперазин-1-илсульфонил)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с] пиримидин-2(3Н)-он гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 628.18; наблюдаемое: 628.8 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 90.55%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.91 (brs, 1Н), 9.26 (brs, 2H), 8.42 (brs, 2H), 7.96 (s, 1H), 7.64-7.54 (m, 2H), 7.3 (t, J=8.4 Гц, 1H), 7.25 (m, 1H), 6.74 (s, 1H), 4.33 (m, 2H), 4.07 (m, 8H), 3.95 (m, 2H), 3.76 (m, 2H), 3.60 (m, 2H), 3.33 (m, 4H).
Пример 29: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(метилсульфонил)фенил) пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с] пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС: (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 558.61; наблюдаемое: 559.8 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 97.88%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (brs, 2Н), 7.95 (s, 1Н), 7.62 (t, J=8.40 Гц, 2H), 7.24 (d, J=3.20 Гц, 1H), 7.16 (t, J=8.40 Гц, 1H), 6.73 (s, 1H), 4.11-4.04 (m, 2H), 3.18 (s, 3H), 3.12 (brs, 4H), и 2.73-2.65 (m, 6H).
Пример 30: 4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-N-(2-аминоэтил)-3-фторбензамида гидрохлорид.
ЖХМС: (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 566.62; наблюдаемое: 567.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 99.16%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.92 (brs, 1H), 8.79 (t, J=5.60 Гц, 1H), 8.41 (brs, 2H), 8.10 (s, 3H), 7.97-7.96 (m, 1H), 7.79-7.75 (m, 2H), 7.26-7.25 (m, 1H), 7.16 (t, J=9.20 Гц, 1H), 6.74 (q, J=1.60 Гц, 1H), 4.33 (t, J=5.20 Гц, 2H), 3.94-3.92 (m, 2H), 3.69-3.66 (m, 2H), 3.59 (m, 2H), 3.53-3.49 (m, 2H), 3.26 (m, 4H), и 2.97 (m, 2H).
Пример 31: 4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фтор-N-(2-(метиламино)этил)бензамида гидрохлорид.
ЖХМС: (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 580.21; наблюдаемое: 581.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 98.97%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.81 (b s, 1Н), 8.94 (brs, 2H), 8.83 (t, J=4.80 Гц, 1H), 8.41 (br s, 2H), 7.97 (s, 1H), 7.80-7.76 (m, 2H), 7.26 (d, J=3.20 Гц, 1H), 7.16 (t, J=8.80 Гц, 1H), 6.74 (q, J=1.20 Гц, 1H), 4.33 (m, 2H), 3.93 (d, J=9.20 Гц, 2H), 3.68 (m, 6H), 3.26 (t, J=11.60 Гц, 4H), 3.09-3.08 (m, 2H), и 2.563 (t, J=4.8 Гц, 3Н).
Пример 32: 4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-N-(2-(диметиламино)этил)-3-фторбензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 594.23; наблюдаемое: 595.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF.M): 96.47%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.30 (m, 3Н), 7.95 (d, J=1.20 Гц, 1H), 7.62-7.57 (m, 2H), 7.24 (d, J=3.20 Гц, 1H), 7.02 (t, J=8.80 Гц, 1H), 6.73 (dd, J=1.6 & 3.2 Гц, 1H), 4.09 (t, J=6.40 Гц, 2H), 3.04 (m, 4H), 2.72 (d, J=6.0 Гц, 2H), 2.66 (m, 4H), 2.42 (t, J=6.00 Гц, 2H), 2.19 (s, 6H).
Пример 33: 4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4] триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фтор-N-(2-гидроксиэтил)бензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 567.18; наблюдаемое: 567.8 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 98.37%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.34 (brs, 2Н), 7.95 (s, 1H), 7.63 (s, 2Н), 7.24 (m, 1H), 7.01-6.95 (m, 1Н), 6.73 (m, 1Н), 4.72 (m, 2Н), 4.57 (m, 2Н), 4.09 (m, 2Н), 3.48 (m, 6Н), 3.03 (m, 4Н).
Пример 34: 4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-N-(2,3-дигидроксипропил)-3-фторбензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 597.19; наблюдаемое: 597.8 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 95.11%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.36-8.31 (m, 4Н), 7.95 (s, 1H), 7.64-7.60 (m, 2Н), 7.24 (d, J=3.2 Гц, 1Н), 7.02 (m, 1H), 6.73 (dd, J=1.6 & 3.2 Гц, 1H), 4.80 (m, 1H), 4.59 (m, 2Н), 4.09 (t, J=6.0 Гц, 2Н), 3.61 (m, 4Н), 3.10 (m, 4Н), 2.65 (m, 4Н).
Пример 35: 2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси) этановая кислота.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 554.15; наблюдаемое: 555.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 98.30%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.20 (brs, 1H), 8.42 (brs, 2Н), 7.97 (t, J=0.8 Гц, 1Н), 7.26 (d, J=3.6 Гц, 1Н), 7.03 (t, J=9.2 Гц, 1Н), 6.88 (dd, J=2.8, 14.0 Гц, 1H), 6.75-6.74 (m, 2Н), 4.67 (s, 2Н), 4.31 (m, 2Н), 3.91 (m, 2Н), 3.60 (m, 2Н), 3.42 (m, 2Н), 3.28 (q, J=10.0 Гц, 2Н), 3.05 (t, J=12.00 Гц, 2Н).
Пример 36: 2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3,5-дифторфенокси)этановая кислота.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 572.14; наблюдаемое: 572.8 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 95.07%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 9.83 (brs, 1H), 8.41 (brs, 2Н), 7.97 (dd, J=0.8 & 2.0 Гц, 1H), 7.26 (dd, J=0.80 & 3.2 Гц, 1Н), 6.78-6.74 (m, 3Н), 4.72 (s, 2Н), 4.31 (m, 2Н), 3.88 (m, 2Н), 3.60 (m, 2Н), 3.25 (m, 4Н).
Пример 37: 2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)пропановая кислота.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 568.17; наблюдаемое: 568.8 (М+1); ВЭЖХ (XB0595TF): 95.55%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.15 (brs, 1H), 8.41 (brs, 2Н), 7.96 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.03 (t, J=9.60 Гц, 1Н), 6.82 (d, J=14.00 Гц, 1Н), 6.74 (d,J=1.60 Гц, 1Н), 6.67 (d, J=8.40 Гц, 1Н), 4.83 (q, J=6.80 Гц, 1H), 4.32 (m, 2Н), 3.91 (m, 2Н), 3.59 (m, 2Н), 3.40 (m, 2Н), 3.28 (m, 2Н), 3.04 (m, 2Н), 1.48 (t, J=6.4 Гц, 3Н);
Примеры 38 и 53: (S)-2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)пропановая кислота и (R)-2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)пропановая кислота
Рацемическую смесь продуктов, приготовленную, как описано в Примерах выше (135 мг), подвергли хиральному разделению (образец массой 0,08 г был растворен в 10 мл этанола), колонка Phenomenex Lux С4, подвижная фаза: 0,1% ТФУК в н-гексане: этанол (30:70), скорость потока: 1.0 мл/мин; чтобы получить выход 13 мг пика 1 (S)-2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)пропановая кислота и 13 мг пика 2 ((R)-2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)пропановая кислота), соответственно. Примечание: пик 1 произвольно рассматривался в качестве (S)-изомера, а пик 2 -в качестве (R)-изомера.
(S)-2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с] пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси) пропановая кислота.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 568.17; наблюдаемое: 568.9 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 95.79%; хиральная чистота, ВЭЖХ: 100%; 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 13.03 (brs, 1Н), 9.21 (brs, 1Н), 8.41 (brs, 2Н), 7.96 (s, 1Н), 7.26 (s, 1H), 7.04 (m, 1Н), 6.82 (m, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.67 (m, 1H), 4.82 (q, J=5.2 Гц, 1Н), 4.31 (m, 2Н), 3.97 (m, 2Н), 3.63 (m, 2Н), 2.93 (m, 2Н), 1.48 (d,J=5.60 Гц, 3Н).
(R)-2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси) пропановая кислота.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 568.17; наблюдаемое: 569.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 98.05%; хиральная чистота, ВЭЖХ: 95.46%; 1H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 13.03 (brs, 1H), 9.25 (brs, 1Н), 8.41 (brs, 2Н), 7.97 (s, 1H), 7.26 (s, 1Н), 7.03 (m, 1Н), 6.82 (m, 1Н), 6.75 (s, 1H), 6.67 (m, 1H), 4.82 (q, J=6.4 Гц, 1Н), 4.30 (m, 2Н), 3.96 (m, 2Н), 3.62 (m, 2Н), 3.30 (m, 2Н), 2.93 (m, 2Н), 1.48 (d, J=6.0 Гц, 3Н).
Пример 39: 2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)-2-метилпропановой кислоты гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 582.61; наблюдаемое: 582.8 (М+); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 90.46%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.9 (br s, 1H), 8.40 (brs, 2Н), 7.96 (d, J=1.20 Гц, 1Н), 7.25-7.26 (m, 1H), 7.01 (t, J=10.00 Гц, 1H), 6.75-6.73 (m, 2H), 6.65-6.63 (m, 1H), 4.32 (t, J=5.60 Гц, 2H), 3.88 (d, J=11.20 Гц, 2H), 3.57 (d, J=4.00 Гц, 2H), 3.41 (t, J=8.80 Гц, 2H), 3.25 (t, J=9.60 Гц, 2H), 3.13 (t, J=11.60 Гц, 2H), и 1.48 (s, 6Н).
Пример 40: 3-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенил)пропановая кислота.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 553.18; наблюдаемое: 552.9; чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 93.92%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 9.62 (brs, 1Н), 8.41 (brs, 2Н), 7.96 (m, 1Н), 7.25 (m, 1Н), 7.10 (m, 1H), 6.99 (m, 2Н), 6.74 (dd, J=2.0 & 3.6 Гц, 1Н), 4.32 (m, 2Н), 3.95 (m, 2Н), 3.28 (m, 2Н), 2.99 (m, 2Н), 2.32 (m, 2Н).
Пример 41: 4-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)бутановой кислоты гидрохлорид.
ЖХМС: (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 582.61; наблюдаемое: 582.3 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 96.04%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.31 (br s, 1H) 8.41 (brs, 2H), 7.97 (d, J=0.80 Гц, 1H), 7.26 (d, J=3.20 Гц, 1H), 7.02 (t, J=9.60 Гц, 1H), 6.87 (q, J=2.40 Гц, 1H), 6.75-6.72 (m, 2H), 4.32 (m, 2H), 3.96-3.89 (m, 4H), 3.59 (m, 2H), 3.40 (d, J=11.60 Гц, 2H), 3.28 (d, J=10.00 Гц, 2H), 3.06-3.03 (m, 2H), 2.36 (t, J=7.20 Гц, 2H), и 1.91 (t, J=6.80 Гц, 2H).
Пример 42: 2-(3-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,6-дифторфенокси)этановой кислоты гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 572.55; наблюдаемое: 573.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 93.35%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.41 (brs, 1Н), 8.42 (brs, 2Н), 7.97 (t, J=0.96 Гц, 1H), 7.27 (d, J=4.04 Гц, 1H), 7.07 (t, J=9.40 Гц, 1H), 6.81-6.78 (m, 1H), 6.75-6.74 (m, 1Н), 4.77 (m, 2Н), 4.32 (d, J=5.20 Гц, 2Н), 3.92 (d, J=8.84 Гц, 2Н), 3.60 (m, 2Н), 3.46 (d, J=12.04 Гц, 2Н), 3.29 (d,J=9.16 Гц, 2Н), и 3.10 (t, J=11.28 Гц, 2Н).
Пример 43: 2-(5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)этановой кислоты гидрохлорид.
ЖХ-МС: (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 572.55; наблюдаемое: 573.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 96.60%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 13.06 (brs, 1Н), 10.23 (brs, 1H), 8.40 (brs, 2Н), 7.96-7.96 (m, 1Н), 7.33 (t, J=11.60 Гц, 1H), 7.25 (d, J=3.20 Гц, 1Н), 6.82 (t, J=8.80 Гц, 1Н), 6.73-6.75 (m, 1Н), 4.79 (s, 2Н), 4.32 (m, 2Н), 3.89-3.92 (m, 2Н), 3.60 (brs, 2Н), 3.49-3.46 (m, 2Н), 3.30-3.27 (m, 2Н),), и 3.07 (t, J=11.6 Гц, 2Н).
Пример 44: 4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-бензойная кислота.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 524.14; наблюдаемое: 525.0; чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 89.07%; 1Н ЯМР:(400 МГц, ДМСО-d6): δ 12.80 (brs, 1Н), 8.30 (brs, 2Н), 7.95 (dd, J=0.8 & 1.6 Гц, 1H), 7.66 (dd, J=2.0 & 8.4 Гц, 1Н), 7.54 (dd, J=2.0 & 14.0 Гц, 1H), 7.23 (dd, J=0.8 & 3.2 Гц, 1Н), 7.04 (t, J=8.8 Гц, 1Н), 6.73 (dd, J=1.6 & 3.2 Гц, 1Н), 4.08 (t, J=6.0 Гц, 2Н), 3.08 (m, 4Н), 2.73-2.65 (m, 6Н).
Пример 45: 2-((2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)этил)амино)ацетамида гидрохлорид.
ЖХМС: (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 596.64; наблюдаемое: 597.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 94.28%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.62 (brs, 1H), 9.12 (brs, 2Н), 7.96 (t, J=0.80 Гц, 1H), 7.92 (s, 1Н), 7.58 (brs, 1H), 7.26 (d, J=3.20 Гц, 1Н), 7.07 (t, J=9.60 Гц, 1Н), 6.96 (dd, J=2.80, 13.60 Гц, 1Н), 6.81-6.78 (m, 2H), 4.33-4.32 (m, 2H), 4.24 (t, J=5.20 Гц, 2H), 3.76-3.77 (m, 2H), 3.59 (s, 2H), 3.42-3.35 (m, 8H), и 3.118 (m, 2Н).
Пример 46: 2-((2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)этил)(метил)амино)ацетамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 610.22; наблюдаемое: 611.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 99.25%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.30 (brs, 2Н), 7.95 (d, J=0.8 Гц, 1Н), 7.24 (m, 1Н), 7.16 (brs, 1H), 7.11 (brs, 1H), 6.93 (d, J=9.6 Гц, 1Н), 6.79 (dd, J=2.8 & 14.0 Гц, 1Н), 6.73 (dd, J=1.6 & 3.2 Гц, 1H), 6.67 (m, 1Н), 4.08-4.02 (m, 4Н), 2.96 (s, 2Н), 2.85 (m, 4Н), 2.75-2.63 (m, 8Н), 2.31 (s, 3Н).
Пример 47: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(пиперидин-4-илокси)фенил) пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с] пиримидин-2(3Н)-он гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 579.22; наблюдаемое: 580.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 95.3%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.29 (brs, 1Н), 8.89 (brs, 2Н), 8.42 (brs, 2Н), 7.97 (s, 1Н), 7.26 (d, J=3.2 Гц, 1Н), 7.06-6.97 (m, 2Н), 6.82-6.75 (m, 2Н), 4.60 (m, 1Н), 4.32 (m, 2Н), 3.92 (m, 2Н), 3.60 (m, 2Н),3.41 (m, 2Н), 3.29-3.20 (m, 4Н), 3.06 (m, 4Н), 2.06 (m, 2Н), 1.81 (m, 2Н).
Пример 48: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(пирролидин-3-илокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с] пиримидин-2(3Н)-он гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 565.20; наблюдаемое: 566.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 97.96%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.72 (brs, 1Н), 9.72 (brs, 1H), 9.50 (brs, 1Н), 8.42 (brs, 2Н), 7.97 (s, 1H), 7.26 (d, J=3.6 Гц, 1Н), 7.05 (t, J=9.2 Гц, 1H), 6.95 (dd, J=2.4 & 13.6 Гц, 1Н), 6.80-6.74 (m, 2Н), 5.10 (m, 1Н), 4.33 (m, 2H), 3.90 (m, 2H), 3.59 (m, 2H), 3.42 (m, 3H), 3.28 (m, 5H), 3.13 (m, 2H), 2.14 (m, 2H).
Пример 49: 3-(2-(4-(4-((1Н-1,2,4-триазол-3-ил)метокси)-2-фторфенил)пиперазин-1-ил)этил)-5-амино-8-(фуран-2-ил)тиазоло[[5,4-е][1,2,4] триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 577.17; наблюдаемое: 578.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 93.44%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 14.09 (brs, 1Н), 8.56 (brs, 1H), 8.31 (brs, 3Н), 7.96 (s, 1Н), 7.24 (d, J=3.20 Гц, 1Н), 6.96-6.90 (m, 2Н), 6.79-6.74 (m, 2Н), 5.08 (s, 2Н), 4.08 (t, J=6.0 Гц, 2Н), 2.86 (m, 4Н), 2.72-2.68 (m, 6Н).
Пример 50: 2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)-N-(2-(метиламино)этил)ацетамида гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 610.22; наблюдаемое: 611.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 99.20%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.36 (brs, 1H), 8.79 (brs, 2Н), 8.42 (brs, 3Н), 7.97 (t, J=0.8 Гц, 1H), 7.26 (d, J=3.2 Гц, 1H), 7.06 (t, J=9.6 Гц, 1H), 6.96 (dd, J=2.4 & 13.6 Гц, 1Н), 6.80 (m, 1Н), 6.74 (t, J=1.6 Гц, 1Н), 4.50 (s, 2Н), 4.33 (m, 2Н), 3.59 (m, 2Н), 3.46-3.40 (m, 4Н), 3.28 (m, 2Н), 3.10-2.99 (m, 4Н), 2.55 (s, 3Н).
Пример 51: 2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)-N-(2-(диметиламино)этил)ацетамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 624.24; наблюдаемое: 625.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 97.22%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (brs, 2Н), 7.95 (m, 2Н), 7.24 (d, J=3.2 Гц, 1Н), 6.94 (t, J=9.6 Гц, 1H), 6.83 (d, J=14.0 Гц, 1H), 6.74-6.69 (m, 2Н), 4.42 (s, 2Н), 4.08 (m, 2Н), 3.20 (q, J=6.4 Гц, 2Н), 2.86 (m, 4Н), 2.70-2.63 (m, 6Н), 2.29 (t, J=6.4 Гц, 2Н), 2.13 (s, 6Н).
Пример 52: 2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)-N-(2-аминоэтил)ацетамида гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 596.21; наблюдаемое: 597.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 93.18%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.40 (brs, 1Н), 8.39 (brs, 3Н), 7.97 (m, 3Н), 7.26 (dd, J=0.8 & 3.2 Гц, 1H), 7.06 (t, J=9.6 Гц, 1Н), 6.95 (dd, J=2.4 & 13.6 Гц, 1H), 6.81-6.78 (m, 2Н), 4.49 (s, 2Н), 4.32 (t, J=5.2 Гц, 2Н), 3.90 (m, 2Н), 3.60 (m, 2Н), 3.40 (m, 4Н), 3.28 (a, J=10.00 Гц, 2Н), 3.08 (m, 2Н), 2.90 (m, 2Н).
Пример 54: 2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)ацетамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 553.16; наблюдаемое: 554.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 95.07%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 9.43 (brs, 1H), 8.41 (brs, 2Н), 7.97 (s, 1Н),7.52 (brs, 1H), 7.40 (brs, 1H), 7.27 (m, 1Н), 7.05 (t, J=9.20 Гц, 1Н), 6.91-6.87 (m, 1Н), 6.75 (m, 2Н), 4.41 (s, 2Н), 4.31 (m, 2Н), 3.97 (m, 2Н), 3.31 (m, 4Н), 2.96 (m, 4Н).
Пример 55: 4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фтор-N-метил-N-(2-(метиламино)этил)бензамида гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 594.23; наблюдаемое: 595.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 93.61%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.13 (brs, 1H), 8.63 (brs, 2Н), 8.42 (brs, 2Н), 7.97 (s, 1H), 7.40 (m, 1H), 7.32-7.26 (m, 2Н), 7.14 (t, J=8.80 Гц, 1Н), 6.75 (dd, J=0.8 & 3.2 Гц, 1H), 4.35 (m, 2Н), 3.98 (m, 2Н), 3.67 (m, 6Н), 3.15 (m, 6Н), 2.96 (s, 3Н).
Пример 56: 4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-N-(2-(диметиламино)этил)-3-фтор-N-метилбензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 608.70; наблюдаемое: 609.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 99.46%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (s, 2Н), 7.95 (s, 1H), 7.24 (d, J=3.36 Гц, 1H), 7.18-7.12 (m, 2Н), 7.00 (t, J=8.48 Гц, 1Н), 6.74-6.73 (m, 1H), 4.09 (t, J=12.60 Гц, 2Н), 3.37-3.30 (m, 2Н), 3.01-2.93 (m, 4Н), 2.91 (s, 3Н), 2.73-2.62 (m, 8Н), 2.22 (m, 3Н), и 2.02 (m, 3Н).
Пример 57: (R)-4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-N-(1-(диметиламино)пропан-2-ил)-3-фторбензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 608.24; наблюдаемое: 609.3 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 98.79%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.32 (brs, 2Н), 8.02 (m, 1Н), 7.95 (s, 1H), 7.62-7.59 (m, 2Н), 7.24 (d, J=3.2 Гц, 1H), 7.02 (t, J=8.8 Гц, 1H), 6.74 (m, 1H), 4.09 (m, 3Н), 3.04 (m, 4Н), 2.73-2.66 (m, 6Н), 2.15 (m, 6Н), 1.11 (d, J=6.4 Гц, 3Н).
Пример 58: 2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)-N-метил-N-(2-(метиламино)этил)ацетамида гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 624.24; наблюдаемое: 625.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 92.37%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.10 (brs, 1H), 8.63 (brs, 2Н), 8.41 (brs, 1Н), 7.96 (dd, J=0.8 & 1.6 Гц, 1H), 7.35 (d, J=2.4 Гц, 1H), 7.06-6.90 (m, 2Н), 6.78-6.74 (m, 2Н), 4.81 (s, 2Н), 4.32 (m, 2Н), 3.91 (d, J=10.80 Гц, 2Н), 3.59 (m, 4Н), 3.30 (m, 2Н), 3.06 (m, 3Н), 3.00 (s, 3Н), 2.60-2.55 (m, 3Н).
Пример 59: 2-(5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)-2-метилпропановой кислоты гидрохлорид.
ЖХМС: (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 600.60; наблюдаемое: 601.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 97.84%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.30 (brs, 1Н), 8.40 (brs, 2Н), 7.96 (brs, 1H), 7.34 (t, J=11.20 Гц, 1H), 7.26 (d, J=3.20 Гц, 1H), 6.80 (t, J=8.40 Гц, 1H), 6.79-6.73 (m, 1Н), 4.32 (m, 2Н), 3.93-3.90 (m, 2Н), 3.60 (t, J=6.40 Гц, 2Н), 3.46-3.43 (m, 2Н), 3.30-3.28 (m, 2Н), 3.03 (t, J=11.20 Гц, 2Н), и 1.45 (s, и 6Н).
Примеры 60 и 61: (S)-2-(5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло [[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)пропановая кислота и (R)-2-(5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил) пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)пропановая кислота
Рацемическую смесь продуктов, приготовленную, как описано в Примерах выше (0,08 мг), подвергли хиральному разделению (образец массой 0,08 г был растворен в 10 мл этанола), колонка chiralpak AD-H, подвижная фаза: 0,1% диэтиламин в н-гексане: этанол (70:30), скорость потока: 1.0 мл/мин; чтобы получить выход 10 мг пика 1 ((S)-2-(5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)пропановая кислота) и 13 мг пика 2 ((R)-2-(5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)пропановая кислота), соответственно. Примечание: пик 1 произвольно рассматривался в качестве (S)-изомера, а пик 2 - в качестве (R)-изомера.
(S)-2-(5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4] триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)пропановая кислота.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 586.16; наблюдаемое: 587.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 99.69%; хиральная чистота, ВЭЖХ: 100%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 13.03 (brs, 1H), 8.29 (brs, 2Н), 7.94 (s, 1Н), 7.24-7.18 (m, 2Н), 6.72 (m, 1H), 6.67 (t, J=8.8 Гц, 1H), 4.90 (q, J=6.80 Гц, 1H), 4.07 (m, 2Н), 2.86 (m, 4Н), 2.70-2.62 (m, 6Н), 1.47 (d, J=6.80 Гц, 3Н).
(R)-2-(5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4] триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)пропановая кислота.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 586.16; наблюдаемое: 587.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 94.42%; хиральная чистота, ВЭЖХ: 98.71%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 12.98 (brs, 1Н), 8.30 (brs, 2Н), 7.95 (s, 1Н), 7.25-7.19 (m, 2Н), 6.73-6.68 (m, 2Н), 4.91 (q, J=6.40 Гц, 1H), 4.07 (m, 2Н), 2.90 (m, 4Н), 2.70-2.67 (m, 6Н), 1.48 (d, J=6.40 Гц, 3Н).
Пример 62: 2-(5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)-N-(2-(метиламино)этил)ацетамида гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 628.21; наблюдаемое: 629.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 95.15%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.40 (brs, 1H), 8.66 (brs, 2Н), 8.42 (brs, 2Н), 8.33 (t, J=6.0 Гц, 1Н), 7.97 (d, J=1.2 Гц, 1H), 7.38 (t,J=11.60 Гц, 1Н), 7.26 (m, 1Н), 6.90 (t, J=8.40 Гц, 1Н), 6.75 (dd, J=2.00 & 3.6 Гц, 1Н), 4.63 (s, 2Н), 4.33 (m, 2Н), 3.92 (m, 2Н), 3.52-3.41 (m, 6Н), 3.30 (m, 2Н), 3.11 (m, 2Н), 3.00 (t, J=6.0 Гц, 2Н), 2.56 (s, 3Н).
Пример 63: 2-(5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)-N-(2-(диметиламино)этил)ацетамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 642.23; наблюдаемое: 643.3 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 96.98%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.29 (brs, 2Н), 7.95-7.91 (m, 2Н), 7.24 (m, 2Н), 6.67-6.74-6.67 (m, 2Н), 4.53 (s, 2Н), 4.07 (t, J=6.40 Гц, 2Н), 3.19 (q, J=6.40 Гц, 2Н), 2.88 (m, 4Н), 2.71 (t, J=6.40 Гц, 2Н), 2.63 (m, 4Н), 2.27 (t, J=6.0 Гц, 2Н), 2.07 (s, 6Н).
Пример 64: 5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-N-(2-(диметиламино)этил)-2,4-дифтор-N-метилбензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 626.69; наблюдаемое: 627.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 92.93%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.32 (m, 2Н), 7.95 (s, 1H), 7.33-7.24 (m, 2Н), 6.94-6.88 (m, 1Н), 6.74-6.73 (m, 1H), 4.09-4.06 (m, 2Н), 3.53-3.49 (m, 1Н), 3.33 (m, 1Н), 2.97-2.56 (m, 13Н), 2.34-2.29 (m, 5Н), и 1.90 (s, 3Н).
Пример 65: 4-(5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)бутановая кислота.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 600.17; наблюдаемое: 601.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 90.64%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 9.90 (brs, 1H), 8.42 (brs, 2Н), 7.96 (s, 1Н), 7.35-7.26 (m, 2Н), 6.84 (t, J=9.60 Гц, 1Н), 6.75 (dd, J=1.6 & 3.6 Гц, 1Н), 4.32 (m, 2Н), 4.06 (t, J=6.40 Гц, 2Н), 3.91 (m, 2Н), 3.51 (m, 2Н), 3.29 (m, 2Н), 3.07 (t, J=12.00 Гц, 2Н), 2.39 (m, 2Н), 1.93 (t, J=6.80 Гц, 2Н).
Пример 66: 3-(2-(4-(5-((1Н-тетразол-5-ил)метокси)-2,4-дифторфенил) пиперазин-1-ил)этил)-5-амино-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4] триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 596.16; наблюдаемое: 596.8 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 92.14%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.32 (brs, 2Н), 7.95 (s, 1H), 7.28-7.24 (m, 2Н), 6.98 (t, J=8.0 Гц, 1H), 6.73 (d, J=1.20 Гц, 1Н), 5.48 (s, 2Н), 4.10 (m, 2Н), 2.95 (m, 4Н), 2.78-2.67 (m, 4Н).
Пример 67: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-((1-метил-1Н-1,2,4-триазол-3-ил) метокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4] триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 591.63; наблюдаемое: 592.8 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 98.87%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.43 (s, 1H), 8.30 (m, 2Н), 7.95 (m, 1H), 7.24 (m, 1Н), 7.01-6.73 (m, 4Н), 4.99 (s, 2Н), 4.09-4.03 (m, 2Н), 3.90 (s, 3Н), 2.98-2.86 (m, 4Н), и 2.72-2.67 (m, 6Н).
Пример 68: 5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-((1-метил-1Н-1,2,4-триазол-3-ил)метокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[[5,4-е][1,2,4] триазол о [1,5-с] пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 609.62; наблюдаемое: 610.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 90.03%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.70 (широкий s, 1H), 8.49 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.32-7.07 (m, 3Н), 6.72 (m, 1H), 5.15 (m, 2Н), 4.35-4.31 (m, 2Н), 3.91-3.86 (m, 5Н), 3.69 (m, 4Н), и 3.08 (m, 4Н).
Пример 69: 4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4] триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фтор-N-(2-(метил (оксетан-3-ил)амино)этил)бензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 636.24; наблюдаемое: 637.3 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 97.10%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.34 (brs, 2Н), 7.96 (s, 1Н), 7.60 (m, 2Н), 7.24 (m, 1H), 7.03 (m, 1H), 6.73 (m, 1H), 4.51 (m, 2H), 4.37 (m, 2H), 4.09 (m, 2H), 3.55 (m, 1H), 3.05 (m, 4H), 2.68 (m, 6H), 2.11 (s, 3H).
Пример 70: 4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4] триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фтор-N-(2-((2-гидроксиэтил)амино)этил)бензамида гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 610.22; наблюдаемое: 611.3 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 96.51%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.25 (brs, 1Н), 8.72 (brs, 3Н), 8.40 (brs, 2Н), 7.95 (t, J=0.8 Гц, 1H), 7.72 (m, 2Н), 7.25 (d, J=3.2 Гц, 1Н), 7.16 (t, J=7.6 Гц, 1H), 6.73 (dd, J=1.6 & 3.2 Гц, 1Н), 5.26 (brs, 1H), 4.32 (m, 2Н), 3.94 (d, J=10.8 Гц, 2Н), 3.68-3.56 (m, 8Н), 3.16-3.03 (m, 6Н).
Пример 71: 2-амино-N-(2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)этил)ацетамида гидрохлорид.
ЖХМС: (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 596.64; наблюдаемое: 597.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 94.31%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (brs, 1H), 8.22 (d, J=5.20 Гц, 1Н), 7.95 (t, J=0.40 Гц, 1H), 7.24 (t, J=0.80 Гц, 1H), 6.95-6.91 (m, 1H), 6.81 (dd, J=2.80, 14.00 Гц, 1H), 6.73-6.74 (m, 1H), 6.69 (dd, J=2.00, 8.80 Гц, 1H), 5.00 (brs, 1H), 4.08 (t, J=6.40 Гц, 2H), 3.95 (t, J=5.60 Гц, 2H), 3.45 (q, J=5.60 Гц, 2H), 3.24 (brs, 2H), 2.85 (brs, 4H), 2.70-2.67 (m, 2H), и 2.63 (m, 4H).
Пример 72: (S)-2-амино-N-(2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)этил)-3-метилбутанамида гидрохлорид.
ЖХМС: (ESI, положительный ион); m/z: расчетное: 638.72; наблюдаемое: 639.1 (М+1); чистота, ВЭЖХ (АМ9010А3): 98.36%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.44 (brs, 1H), 8.30 (brs, 2Н), 7.94 (s, 1H), 7.23 (d, J=3.20 Гц, 1Н), 6.92 (t, J=9.60 Гц, 1H), 6.80-6.73 (m, 3Н), 4.05-4.08 (m, 4H), 3.56-3.53 (m, 1H), 3.41-3.40 (m, 1H), 2.84 (m, 4H), 2.71-2.671 (m, 3H), 2.62 (m, 3H), 2.33 (m, 1H), 1.94-1.99 (m, 1H), и 0.894-0.853 (m, 6H).
Пример 73: этил-2-(5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло [1,5-с] пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)ацетат.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 600.17; наблюдаемое: 601.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 96.15%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (brs, 2Н), 7.96 (s, 1H), 7.24 (m, 2Н), 6.72 (m, 2Н), 4.85 (s, 2Н), 4.16 (q, J=6.80 Гц, 2Н), 4.08 (m, 2Н), 2.89 (m, 4Н), 2.71-2.63 (m, 6Н), 1.19 (t, J=6.80 Гц, 3Н).
Пример 74: 2-(5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)ацетонитрил.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 553.14; наблюдаемое: 554.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 96.92%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (brs, 2Н), 7.95 (d, J=0.80 Гц, 1Н), 7.33 (t, J=10.80 Гц, 1H), 7.24 (d, J=3.2 Гц, 1H), 6.94 (t, J=8.4 Гц, 1H), 6.73 (dd, J=1.6 & 3.2 Гц, 1Н), 5.22 (s, 2Н), 4.09 (t, J=5.6 Гц, 2Н), 2.93 (m, 4Н), 2.74-2.64 (m, 6Н).
Пример 75: 5-амино-8-(фуран-2-ил)-3-(2-(4-(пиридин-4-ил)пиперазин-1-ил)этил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 463.15; наблюдаемое: 464.1 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 93.77%; 1H ЯМР:(400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.30 (brs, 2Н), 8.13 (d, J=6.40 Гц, 2Н), 7.94 (d, J=0.80 Гц, 1H), 7.23 (d, J=3.60 Гц, 1H), 6.77 (d, J=6.40 Гц, 2Н), 6.72 (dd, J=1.6 & 3.2 Гц, 1Н), 4.08 (t, J=6.00 Гц, 2Н), 3.23 (m, 4Н), 2.71-2.67 (m, 2Н), 2.58 (m, 4Н).
Пример 76: 5-амино-8-(фуран-2-ил)-3-(2-(4-(пиримидин-4-ил)пиперазин-1-ил)этил)тиазоло[5,4-е][1,2,4] триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 464.15; наблюдаемое: 465.1 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 95.02%; 1Н ЯМР:(400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.47 (s, 1Н), 8.31 (brs, 2Н), 8.16 (d, J=6.40 Гц, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.23 (d, J=2.8 Гц, 1Н), 6.79 (dd, J=0.8 & 6.0 Гц, 1Н), 6.73 (dd, J=1.6 & 3.2 Гц, 1Н), 4.08 (t, J=6.00 Гц, 2Н), 3.53 (m, 4Н), 2.69 (t, J=6.80 Гц, 2Н), 2.55 (m, 4Н).
Пример 79: 5-амино-3-(2-(4-(6-фтор-2-оксоиндолин-5-ил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло [5,4-е][1,2,4] триазоло [1,5-с] пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 535.16; наблюдаемое: 536.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 82.71%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.26 (s, 1H), 8.30 (brs, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.24 (d,J=3.60 Гц, 1H), 6.94 (d, J=8.40 Гц, 1H), 6.73-6.74 (m, 1H), 6.60 (d, J=12.00 Гц, 1H), 4.08 (t, J=5.60 Гц, 2H), 3.39 (s, 2H), 2.84 (m, 4H), 2.72-2.63 (m, 6H).
Пример 82: 5-амино-3-(2-(4-(5-фтор-2-метилпиридин-4-ил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 495.54; наблюдаемое: 496.1(М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 93.17%; Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (broad s, 2Н), 8.08 (d, J=5.60 Гц, 1Н), 7.95 (s, 1H), 7.24 (t, J=2.40 Гц, 1H), 6.72-6.79 (m, 2H), 4.06-4.11 (m, 2H), 3.16 (t, J=6.00 Гц, 4H), 2.68-2.72 (m, 2H), 2.62 (s, 4H), и 2.33 (s, 3H).
Пример 85: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропокси) фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-c] пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 568.20; наблюдаемое: 569.3 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 92.42%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): 88.31 (brs, 2Н), 7.95 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.92 (t, J=9.60 Гц, 1Н), 6.79-6.66 (m, 3Н), 4.60 (s, 1Н), 4.07 (m, 2Н), 3.65 (s, 2Н), 2.85 (m, 4Н), 2.70-2.63 (m, 6Н), 1.17 (s, 6Н).
Пример 86: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(2-гидроксипропан-2-ил)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 538.60; наблюдаемое: 539.2(М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 94.02%; 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (bs, 2Н), 7.95 (s, 1Н), 7.24 (s, 1Н), 7.15 (m, 2Н), 6.90 (m, 1H), 6.73 (m, 1Н), 4.08 (t, J=6.00 Гц, 2Н), 2.92 (широкий s, 4Н), 2.64-2.71 (m, 6Н), и 1.38 (s, 6Н).
Пример 87: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(3,3,3-трифтор-2-гидроксипропокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 608.16; наблюдаемое: 609.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 95.69%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.30 (brs, 2Н), 7.95 (dd, J=0.8 Гц и 1.6 Гц, 1Н), 7.24 (dd, J=0.8 Гц и 3.2 Гц, 1H), 6.94 (t, J=9.60 Гц, 1Н), 6.85 (dd, J=2.80 Гц и 14.00 Гц, 1Н), 6.74-6.71 (m, 2Н), 6.63 (d, J=6.80 Гц, 1Н), 4.35-4.33 (m, 1H), 4.10-3.99 (m, 4Н), 2.86 (m, 4Н), 2.70 (t, J=6.40 Гц, 2Н), 2.63 (m, 4Н).
Пример 89: 5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(морфолин-2-ил-метокси) фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 613.64; наблюдаемое: 614.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB_0595TF): 96.82%; 1H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.95 (brs, 1Н), 9.71 (m, 1H), 9.51-9.49 (m, 1H), 8.40 (brs, 2H), 7.96 (s, 1H), 7.36 (t, J=11.6 Гц, 1H), 7.25-7.24 (m, 1H), 6.89 (t, J=8.4 Гц, 1H), 6.74-6.73 (m, 1H), 4.33-4.31 (m, 2H), 4.18-4.11 (m, 3H), 4.01-3.79 (m, 2H), 3.58-3.48 (m, 2H), 3.29-3.31 (m, 4H), 3.15-2.96 (m, 6H), 2.95-2.93 (m, 2H).
Пример 92: 5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(((3S,4S)-4-фторпирролидин-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4] триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 601.61; наблюдаемое: 602.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB_0595TF): 96.09% 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.50 (s, 1Н), 9.92 (s, 2H), 8.40 (s, 2H), 7.96 (d,J=0.8 Гц, 1H), 7.46 (t, J=11.6 Гц, 1H), 7.26-7.25 (m, 1H), 7.13-7.08 (m, 1H), 6.75-6.74 (m, 1H), 5.42 (s, 1H), 5.26-5.24 (m, 1H), 4.33(m, 2H), 3.93-3.90 (m, 2H), 3.70-3.54 (m, 8H), 3.41-3.36 (m, 2H), 3.30-3.16 (m, 2H).
Пример 93: 5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(((3R,4S)-4-фторпирролидин-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4] триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 601.61; наблюдаемое: 602.1 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB_0595TF): 95.74%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.60 (s, 1Н), 9.83-9.75 (m, 2H), 8.41 (s, 2H), 7.97 (s, 1H), 7.41 (t, J=11.60 Гц, 1H), 7.26 (d, J=3.20 Гц, 1H), 7.02 (t, J=8.40 Гц, 1H), 6.74 (q, J=1.60 Гц, 1H), 5.45 (m, 1H), 5.21-5.15 (m, 1H), 4.42 (s, 2H), 3.91 (d, J=10.80 Гц, 2H), 3.69-3.64 (m, 2H), 3.61 (s, 4H), 3.38 (s, 4H), 3.16 (d, J=8.80 Гц, 2H).
Пример 94: 5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(((3S,4R)-4-фторпирролидин-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 601.61; наблюдаемое: 602.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (PG_AM9010.M): 91.76%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.31 (s, 2Н), 7.95 (s, 1Н), 7.26-7.23 (m, 2Н), 6.83 (d, J=8 Гц, 1Н), 6.74 (d, J=5.6 Гц, 1Н), 5.24-5.15 (m, 1H), 4.73-4.71 (m, 1H), 4.09 (t, J=6 Гц, 2Н), 2.91 (m, 5Н), 2.73-2.63 (m, 8Н), 1.92 (s, 4Н),
Пример 97: 2-(5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)-N-(2-морфолиноэтил)ацетамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 684.24; наблюдаемое: 685.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 90.92%; 1Н ЯМР(400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.30 (brs, 2Н), 7.95 (d, J=0.80 Гц, 1Н), 7.90 (d, J=5.60 Гц, 1H), 7.29-7.18 (m, 2Н), 6.76-6.70 (m, 2Н), 4.55 (s, 2Н), 4.08 (t, J=6.40 Гц, 2Н), 3.53 (m, 4Н), 3.23 (t, J=6.00 Гц, 2Н), 2.90 (m, 4Н), 2.72 (m, 2Н), 2.67 (m, 4Н), 2.35 (m, 6Н).
Пример 98: 5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифтор-N-(морфолин-3-илметил)бензамида гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 640.67; наблюдаемое: 641.1 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB_0595TF): 95.86%; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.57 (s, 1Н), 9.50 (d, J=7.60 Гц, 1H), 9.29 (d, J=8.00 Гц, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.41 (s, 2H), 7.97 (s, 1H), 7.44 (m, 2H), 7.26 (d, J=3.20 Гц, 1H), 6.75 (q, J=1.60 Гц, 1H), 4.33 (m, 2H), 3.90 (m, 4H), 3.49-3.57 (m, 8H), 3.11-3.33 (m, 7H).
Пример 103: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(((3R,4S)-4-фторпирролидин-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 583.62; наблюдаемое: 584.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 90.29%; 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.27 (широкий s, 1H), 9.69-9.82 (m, 2Н), 8.41 (широкий s, 2Н), 7.97 (m, 1Н), 7.26-7.27 (m, 1H), 7.05-7.10 (m, 2Н), 6.87-6.90 (m, 1H), 6.75 (t, J=1.60 Гц, 1H), 5.49 (m, 1Н), 5.07-5.13 (m, 1Н), 4.32 (d, J=5.20 Гц, 2Н), 3.73-3.93 (m, 2Н), 3.49-3.66 (m, 2Н), 3.40-3.44 (m, 3Н), 3.30-3.39 (m, 3Н), 3.25-3.30 (m, 3Н), 3.07-3.10 (m, 2Н).
Пример 104: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(((3S,4R)-4-фторпирролидин-3-ил)окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 583.62; наблюдаемое: 584.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 96.80%; 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.40 (широкий s, 1Н), δ 9.94 (m, 2Н), 8.42 (широкий s, 2Н), 7.97 (s, 1H), 7.26 (d, J=3.60 Гц, 1H), 7.06-7.10 (m, 2Н), 6.87 (d, J=8.40 Гц, 1Н), 6.74-6.76 (m, 1Н), 5.49 (d, J=4.00 Гц, 1Н), 5.07-5.13 (m, 1H), 4.32 (s, 2Н), 3.90 (m, 2Н), 3.62 (d, J=5.20 Гц, 2Н), 3.39 (m, 6Н), и 3.02-3.33 (brs, 4Н).
Пример 105: 2-(4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4] триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фторфенокси)-N-(2-морфолиноэтил)ацетамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 666.25; наблюдаемое: 667.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 92.35%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.30 (brs, 2Н), 7.95-7.90 (m, 2Н), 7.24 (dd, J=0.8 Гц и 3.2 Гц, 1H), 6.94 (t, J=10.00 Гц, 1Н), 6.85-6.80 (m, 1H), 6.74-6.69 (m, 2Н), 4.43 (s, 2Н), 4.08 (t, J=6.00 Гц, 2Н), 3.53 (m, 4Н), 3.22 (m, 2Н), 2.90 (m, 4Н), 2.72-2.63 (m, 6Н), 2.37-2.34 (m, 6Н).
Пример 106: 4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4] триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фтор-N-(2-морфолиноэтил)бензамид. ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 636.71; наблюдаемое: 637.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 92.87%; 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.29-8.32 (широкий s, 2Н), 7.95 (s, 1Н), 7.59 (m, 2Н), 7.24 (s, 1H), 7.02 (m, 1H), 6.73 (m, 1H), 4.07-4.10 (m, 2Н), 3.55-3.57 (m, 4Н), 3.33 (m, 2Н), 3.04 (m, 4Н), 2.72 (m, 2Н), 2.67-2.68 (m, 4Н), и 2.51 (m, 6Н).
Пример 107: 4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фтор-N-(морфолин-3-илметил)бензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 622.68; наблюдаемое: 623.3 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 95.43%; 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): 10.58 (широкий s, 1Н), 9.52 (d, J=8.80 Гц, 1H), 9.33 (d, J=8.40 Гц, 1H), 8.81 (d, J=5.20 Гц, 1H), 8.42 (широкий s, 2Н), 7.97 (s, 1Н), 7.75-7.79 (m, 2Н), 7.26 (d, J=3.20 Гц, 1H), 7.17 (t, J=8.80 Гц, 1Н), 6.74-6.75 (m, 1H), 4.33 (широкий s, 2Н), 3.86-3.96 (m, 3Н), 3.71 (s, 1Н), 3.58 (t, J=11.60 Гц, 2Н), 3.46-3.51 (m, 4Н), 3.44 (d, J=5.60 Гц, 1H), 3.41 (d, J=9.60 Гц, 1H), 3.18-3.32 (m, 6Н), и 3.05-3.08 (m, 1H).
Пример 108: 5-амино-3-(2-(4-(4-(азетидин-3-ил-окси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 533.20; наблюдаемое: 534.1 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 88.50%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.17 (brs, 1Н), 9.22 (brs, 1H), 9.09 (brs, 1H), 8.41 (brs, 2H), 7.96 (s, 1H), 7.25 (d, J=3.56 Гц, 1H), 6.95 (d, J=8.80 Гц, 2H), 6.80 (d, J=8.92 Гц, 2H), 6.73 (t, J=1.64 Гц, 1H), 4.98 (m, 1H), 4.41-4.32 (m, 4H), 3.94-3.90 (m, 4H), 3.72 (m, 2H), 3.24-3.21 (m, 2H), 2.97 (m, 2H).
Пример 109: (S)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(метилсульфинил)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 560.12; наблюдаемое: 561.1 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 99.33%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.32 (brs, 2Н), 7.95 (s, 1H), 7.45 (dd, J=9.2 Гц и 12.0 Гц, 1Н), 7.29-7.24 (m, 2Н), 6.73 (dd, J=1.6 Гц и 3.2 Гц, 1H), 4.08 (t, J=8.0 Гц, 2Н), 2.99 (m, 4Н), 2.80 (s, 3Н), 2.73-2.67 (m, 6Н).
Пример 110: (R)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(метилсульфинил) фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло [1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 560.12; наблюдаемое: 561.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 98.18%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.32 (brs, 2Н), 7.95 (s, 1H), 7.47-7.42 (dd, J=9.2 Гц и 12.0 Гц, 1H), 7.29-7.23 (m, 2Н), 6.74-6.73 (dd, J=1.6 Гц и 3.2 Гц, 1H), 4.08 (t, J=8.0 Гц, 2Н), 2.99-2.98 (m, 4Н), 2.8 (s, 3Н), 2.73-2.67 (m, 6Н).
Пример 113: (S)-5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифтор-N-(2-(метилсульфинил)этил)бензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 631.68; наблюдаемое: 632.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 95.04%; 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) 8.52 (d, J=2.00 Гц, 1Н), 8.32 (broad s, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.28-7.34 (m, 1H), 7.20-7.25 (m, 2H), 6.73-6.74 (m, 1H), 4.07 (d, J=6.40 Гц, 2H), 3.58-3.64 (m, 2H), 2.99-3.06 (m, 4H), 2.84-2.93 (m, 2H), 2.69-2.72 (m, 2H), 2.65-2.69 (m, 4H), и 2.60 (s, 3H).
Пример 114: (R)-5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифтор-N-(2-(метилсульфинил)этил)бензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 631.68; наблюдаемое: 632.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 96.65%; 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 8.52 (d, J=2.00 Гц, 1Н), 8.32 (широкий s, 2Н), 7.95 (s, 1H), 7.28-7.34 (m, 1H), 7.20-7.25 (m, 2Н), 6.73-6.74 (m, 1Н), 4.07 (d, J=6.40 Гц, 2Н), 3.58-3.64 (m, 3Н), 3.30 (m, 2Н), 2.99-3.06 (m, 4Н), 2.84-2.93 (m, 2Н), 2.69-2.72 (m, 2Н), 2.65-2.69 (m, 4Н), 2.60 (s, 3Н).
Пример 115: (S)-5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифтор-N-метил-N-(2-(метилсульфинил)этил)бензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 645.70; наблюдаемое: 646.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 99.10%; 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.13 (br s, 1H), 7.85 (br s, 1H), 7.37 (t, J=9.28 Гц, 1H), 7.01-7.10 (m, 3H), 6.64-6.66 (m, 1H), 4.17 (t, J=9.08 Гц, 2H), 3.87 (m, 1H), 3.72-3.78 (m, 2H), 3.39-3.66 (m, 2H), 3.08-3.17 (m, 10H), 2.89-3.01 (m, 2H), и 2.60-2.67 (m, 3H).
Пример 116: (R)-5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифтор-N-метил-N-(2-(метилсульфинил)этил)бензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 645.7; наблюдаемое: 646.1(М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 93.418%; 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.29 (br s, 2Н), 7.94 (s, 1H), 7.22-7.32 (m, 2H), 6.95 (t, J=7.72 Гц, 1H), 6.72 (d, J=1.28 Гц, 1H), 4.06 (t, J=5.92 Гц, 2H), 3.50-3.54 (m, 1H), 3.06-3.11 (m, 1H), 2.96-3.02 (m, 2H), 2.86-3.00 (m, 4H), 2.78-2.86 (m, 2H), 2.68-2.71 (m, 2H), 2.62 (s, 6H), и 2.47-2.50 (m, 2H).
Пример 117: 5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(1-оксидотиоморфолине-4-карбонил)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4] триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 643.69; наблюдаемое: 644.1(М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 92.78%; 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.85-7.88 (m, 2Н), 7.38-7.44 (m, 1H), 7.18-7.22 (m, 1H), 7.04-6.98 (m, 1Н), 6.81 (s, 1H), 6.65-6.71 (m, 1H), 4.35 (широкий s, 1Н), 4.16 (t, J=9.20 Гц, 2Н), 3.79-4.01 (m, 1H), 3.51-3.77 (m, 3Н), 3.41-3.49 (m, 4Н), 3.17-3.39 (m, 2Н), 2.95-3.07 (m, 4Н), и 2.75-2.90 (m, 3Н).
Пример 118: 5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(1-оксидотиоморфолино) фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с] пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 615.68; наблюдаемое: 616.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595NHC): 93.08%; 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.32 (широкий s, 2Н), 7.95 (s, 1Н), 7.24 (s, 1Н), 7.16 (m, 1Н), 6.72 (m, 2Н), 4.06-4.10 (m, 2H), 3.49-3.54 (m, 2H), 3.14-3.18 (m, 2H), 2.93-3.00 (m, 6H), 2.82-2.85 (m, 2H), 2.67-2.72 (m, 2H), и 2.50-2.63 (m, 4Н).
Пример 123: (S)-4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фтор-N-(2-(метилсульфинил)этил)бензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 613.17; наблюдаемое: 612.0 (М-1); чистота, ВЭЖХ (XB0595NHC): 99.46%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.32 (brs, 2Н), 8.09 (m, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.58 (t, J=8.8 Гц, 1H), 7.24 (d, J=3.6 Гц, 1H), 6.79-6.71 (m, 3H). 4.09 (t, J=6.0 Гц, 2H), 3.61 (q, J=6.0 Гц, 2H), 3.22 (m, 4H), 3.07-3.00 (m, 1H), 2.90-2.85 (m, 1H), 2.72-2.69 (m, 2H), 2.60 (m, 7H).
Пример 124: (R)-4-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-фтор-N-(2-(метилсульфинил)этил)бензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 613.17; наблюдаемое: 614.1 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595NHC): 98.08%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.32 (brs, 2Н), 8.09 (m, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.58 (t,J=8.8 Гц, 1H), 7.24 (m, 1H), 6.79-6.70 (m, 3H). 4.09 (t,J=6.0 Гц, 2H), 3.61 (q, J=6.0 Гц, 2H), 3.22 (m, 4H), 3.05-3.00 (m, 1H), 2.90-2.85 (m, 1H), 2.72-2.68 (m, 2H), 2.60 (m, 7H).
Пример 125: 5-амино-3-(2-(4-(2-фтор-4-(1-оксидотиоморфолине-4-карбонил)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[[5,4-е][1,2,4] триазол о [1,5-с] пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 625.17; наблюдаемое: 626.0 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 95.09%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.30 (brs, 2Н), 7.94 (s, 1Н), 7.24 (m, 2Н), 6.79-6.72 (m, 3Н), 4.36-4.35 (m, 1Н), 4.08 (t, J=6.04 Гц, 2Н), 3.78-3.62 (m, 2Н), 3.55-3.46 (m, 1Н), 3.17 (m, 4Н), 2.83 (m, 3Н), 2.71-2.66 (m, 3Н), 2.59 (m, 4Н).
Пример 129: (S)-5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-N-(2,3-дигидроксипропил)-2,4-дифторбензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 615.62; наблюдаемое: 616.1 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595NHC): 97.60%; 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): при исследовании методом 1Н ЯМР наблюдались широкие пики.
Пример 130: (R)-5-(4-(2-(5-амино-8-(фуран-2-ил)-2-оксотиазоло[[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-3(2Н)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-N-(2,3-дигидроксипропил)-2,4-дифторбензамид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 615.62; наблюдаемое: 616.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595NHC): 95.00%; 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.32 (широкий m, 2Н), 8.09 (s, 1H), 7.95 (s, 1Н), 7.24-7.42 (m, 3Н), 6.73 (s, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.60 (s, 1Н), 4.32 (s, 1Н), 3.96-4.08 (m, 2Н), 3.56 (t, J=2.80 Гц, 2Н), 3.17 (t, J=6.04 Гц, 2Н), 2.94 (s, 4Н), 2.65-2.71 (m, 6Н).
Пример 131: 5-амино-3-(2-(4-(4-(азетидин-3-ил-окси)-2-фторфенил) пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с] пиримидин-2(3Н)-он гидрохлорид.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 551.19; наблюдаемое: 552.2 (М+1); чистота, ВЭЖХ (XB0595NHC): 90.50%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 10.33 (brs, 1Н), 9.33 (brs, 1H), 9.21 (brs, 1H), 8.42 (brs, 2H), 7.97 (s, 1H), 7.26 (d, J=3.2 Гц, 1H), 7.05 (t, J=9.6 Гц, 1H), 6.87 (d, J=13.6 Гц, 1H), 6.74-6.73 (m, 1H), 6.67 (d, J=8.4 Гц, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.44-4.32 (m, 4H), 3.93 (m, 4H), 3.60 (m, 2H), 3.43-3.06 (m, 6H).
Пример 132: 5-амино-3-(2-(4-(5-(азетидин-3-ил-окси)-2,4-дифторфенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с] пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 569.18; наблюдаемое: 570.0 (М-1); чистота, ВЭЖХ (XB0595TF): 94.68%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.32 (brs, 2Н), 7.95 (s, 1Н), 7.27-7.21 (m, 2Н), 6.74 (s, 1Н), 6.43 (t, J=8.40 Гц, 1Н), 5.01 (m, 1Н), 4.07 (t, J=5.60 Гц, 2Н), 3.71 (t, J=7.20 Гц, 2Н), 3.53-3.47 (m, 2Н), 2.90 (m, 4Н), 2.72-2.63 (m, 6Н).
Пример 133: (S)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(3-(метилсульфинил) пропокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-2(3Н)-он.
ЖХМС (ESI, положительный ион) m/z: расчетное: 618.16; наблюдаемое: 617.2 (М-1); чистота, ВЭЖХ (XB0595NHC): 97.91%; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.30 (brs, 2Н), 7.94 (s, 1H), 7.23-7.18 (m, 2H), 6.77-6.73 (m, 2H), 4.14-4.07 (m, 4H), 2.89 (m, 5H), 2.77-2.55 (m, 10Н), 2.05 (m, 2H).
II. Примеры в области билогии
II.1. Анализ функциональной активности А2А-рецептора
Цель двух нижеприведенных анализов - показать, что соединения по настоящему изобретению эффективно ингибируют А2А-рецептор, продемонстрировав, что они ингибируют его функциональную активность.
II.1.A. Ингибирование продуцирования цАМФ в клетках почки эмбриона человека (HEK)
Цель. При активации А2А-рецептора он индуцирует образование цАМФ. Настоящий анализ, таким образом, направлен на то, чтобы показать, что продуцирование цАМФ ингибируется в клетках HEK, подвергнутых воздействию соединений по настоящему изобретению.
Метод. Клетки HEK-293 со стабильной трансфекцией А2А-рецептора приобретены у компании PerkinElmer ® (# ES-011-C). Клетки культивировали в среде ЕМЕМ (Lonza, # BE 12-611F), обогащенной 10% ФБС (Lonza, # DE14-801F) и 200 мкг/мл G418 (Tocris, # 4131) при 37°С и в атмосфере 5% CO2. Свежую среду без селективного маркера добавляли в день, непосредственно предшествующий эксперименту, чтобы остановить селекционное давление.
Для оценки ингибирования цАМФ и определения показателя IC 50 для антагониста использовали набор LANCE ® Ultra сАМР компании PerkinElmer ® (# TRF0262) на белых 96-луночных микропланшетах с половинным объемом лунок (PerkinElmer ®, # 6005560). Анализы проводили в двух различных стимулирующих буферах:
a) нормальный с 1X HBSS (Gibco®, #141750-95), 5 мМ HEPES (Lonza, #ВЕ17-737Е), 0.1% БСА и 25 мкМ Rolipram, и
b) ЧСА с 1X HBSS (Gibco®, #141750-95), 5 мМ HEPES (Lonza, #ВЕ17-737Е), 2% человеческий сывороточный альбумин (Sigma-Aldrich® - А1653), 30 мкМ EHNA (Tocris - # 1261)и 100 мкМ Rolipram. Стимулирующий буфер b) имитирует ситуацию у человека путем увеличения количества присутствующего в анализе альбумина.
Соединения по настоящему изобретению разбавляли стократно (100Х) в одном из буферов в зависимости от проводимого анализа. В общей сложности 1 000 клеток на лунку предварительно инкубировали в течение 10 минут с соединениями по настоящему изобретению перед добавлением агониста А2А-рецепторов в эффективной концентрации (ЕС80) (3 нМ NEC А в нормальном буфере и 5 нМ NECA в буфере ЧСА) или 5 мкМ аденозина; общее время реакции составляло 30 минут. Общий объем реакции составлял 20 мкл (10 мкл клеток, 5 мкл антагониста и 5 мкл агониста). Реакцию завершали добавлением 10 мкл рабочего раствора индикатора 4Х ЕС-цАМФ и 10 мкл рабочего раствора 4Х ULight-анти-цАМФ. Сигнал TR-FRET измеряли через 1 час с помощью Spectramax Paradigm (Molecular Devices).
Результаты. Как свидетельствуют данные, приведенные в Таблице 2 ниже, соединения по настоящему изобретению ингибируют образование цАМФ в ответ на стимуляцию клеток HEK со сверхэкспрессией А2А-рецепторов агонистом А2А-рецепторов или аденозином, в различных условиях.
II.1.В. Восстановление продуцирования Т-клетками человека провоспалительных цитокинов
Цель. При активации Т-клеток они продуцируют провоспалительные цитокины. Когда А2А-рецептор активируется в Т-клетках, количество цитокинов, продуцируемых в ответ на стимуляцию Т-клеток, уменьшается. Таким образом, цель настоящего анализа - показать, что продуцирование провоспалительных цитокинов Т-клетками может быть восстановлено в результате воздействия соединений по настоящему изобретению.
Выделение мононуклеарных клеток периферической крови (МКПК) и CD3+ Т-клеток. Венозная кровь от здоровых волонтеров, подписавших информированное согласие, одобренное Комитетом по этике (FOR-UIC-BV-050-01-01 ICF_HBS_HD Version 5.0), была получена через компанию ImmuneHealth (Centre Hospitalier Universitaire Tivoli, Ла-Лувьер, Бельгия). Мононуклеарные клетки собирали центрифугированием в градиенте плотности, с использованием пробирок SepMate-50 (StemCell Technologies, Гренобль, Франция) и градиентоплотной среды Lymphoprep (Axis-shield, Осло, Норвегия) в соответствии с инструкциями производителя. CD3+ Т-клетки изолировали методом иммуномагнитной сепарации с отрицательной селекцией, используя набор EasySep для выделения Т-клеток человека (StemCell Technologies) в соответствии с инструкциями производителя. CD3+ Т-клетки хранили в термически инактивированной фетальной бычьей сыворотке (hiFBS; Gibco, ThermoFisher Scientific, Мерельбек, Бельгия), содержащей 10% ДМСО в жидком азоте.
Анализ IL-2 Т-клеток человека. Очищенные CD3+ Т-клетки оттаивали и промывали дважды в среде RPMI1640 (с UltraGlutamine; Lonza, Вервье, Бельгия), обогащенной заменимыми аминокислотами (разведение 1x; Lonza), 2% Pen/Strep (Lonza) и 1 мМ пируватом натрия (Gibco) (полная среда), содержащей 10% термоинактивированную фетальную бычью сыворотку (hiFBS). Клетки суспендировали либо в полной среде, содержащей 20% термоинактивированную фетальную бычью сыворотку, или в 100% термоинактивированной сыворотке человека (hiHS; Sigma-Aldric4, Diegem, Belgium). Клетки активировали добавлением микробусин, покрытых анти-CD3 и анти-CD28 (Dynabeads human Т-activator CD3/CD28; Life Technologies, Пейсли, Великобритания), суспендированных либо в полной среде, содержащей 20% термоинактивированную фетальную бычью сыворотку, или в 100% термоинактивированной сыворотке человека. Селективный агонист А2А-рецепторов CGS-21680 (Sigma-Aldrich; маточный раствор 10 мМ в ДМСО) добавляли в конечной концентрации 0,5 или 5 мкМ. Готовили серийные разведения соединений по настоящему изобретению и добавляли в лунки. Лунки помещали во влажный инкубатор для тканевых культур с 5% СО2 при 37°С на 72 часа. Через 72 часа отбирали пробы супернатантов и проводили количественное определение IL-2, используя для этого набор AlphaLISA Biotin-Free Detection Kit (AL333F; Perkin-Elmer, Завентем, Бельгия) для IL-2 человека, в соответствии с инструкцией производителя.
Результаты. Добавление селективного агониста А2А-рецепторов CGS-21680 к CD3+ Т-клеткам снижает количество цитокинов, продуцируемых в ответ на стимуляцию с помощью микробусин, покрытых анти-CD3 и анти-CD28. Соединения по настоящему изобретению дозозависимо восстанавливают выделение провоспалительных цитокинов IL2 в Т-клетках человека, обработанных CGS-21680, со значениями активности, указанными в Таблице 3 ниже.
II.1.С. Восстановление продуцирования провоспалительных цитокинов в цельной крови человека
Подготовка пробирок для теста. В компании Myriad RBM были приобретены пробирки, содержащие выбранные стимуляторы (SEB, LPS, зимозан, анти-CD3/CD28) и среду TruCulture (номера по каталогу 782-001124, 782-001087, 782-001259 и 782-001125, соответственно), добавлены агонисты А2А-рецепторов (CGS-21680 и NECA), и пробирки были незамедлительно заморожены при -20°С до использования в экспериментах с участием клеточных культур.
Соединение 7 растворили в ДМСО в концентрации 10 мМ и затем приготовили разведения с использованием среды ТС. Растворы исследовали под микроскопом с целью исключить наличие частиц. Свежеприготовленные растворы, содержащие Соединение 7, добавили в размороженные пробирки с ТС, содержащие стимуляторы и 1 мкМ CGS-21680, в соответствующих случаях.
Клеточная культура. Кровь была получена от здоровых доноров из прошедшего предварительную проверку пула доноров компании НОТ Screen GmbH (возраст: 20-65 years, обеих полов). Гепаринизированную периферическую цельную кровь (1 мл) от 3 здоровых доноров добавили в размороженные пробирки с ТС и инкубировали в термостате при 37°С в течение 24 часов (стимуляция LPS и зимозаном), или 48 часов (стимуляция SEB и анти-CD3/CD28). В конце периода культивирования для сбора супернатанта были введены фильтры Seraplas. Супернатанты были аккуратно собраны, смешаны, аликвотированы и заморожены при -20°С.
Количественное определение медиаторов. Количественный анализ цитокинов и хемокинов, содержащихся в супернатантах с ТС, проводился с использованием панели Human Cytokine MAP А для анализов Luminex. Был проведен анализ следующих медиаторов: GM-CSF, IFNg, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10, IL-18, МСР-1, MIP-1a, MIP-1b, TNF-a, TNF-b.
Анализ данных. Для оценки биологической активности CGS-21680 и NECA был проведен анализ изменения секреции цитокинов и хемокинов в супернатантах с ТС, вызываемой возрастающими дозами агонистов А2А-рецепторов. Процентное изменение концентраций растворимых медиаторов (РМ) рассчитывалось для каждого вида стимуляции следующим образом:
% изменение = 100 × [РМТС + агонист А2А-рецептора] / [РМТС-агонист А2А рецептора].
Для оценки биологической активности Соединения 7 был проведен анализ вызываемого данным соединением восстановления секреции цитокинов и хемокинов в среде ТС, обогащенной CGS-21680, до базового уровня (то есть, стимуляция ТС без добавления CGS-21680).
Восстановление секреции цитокинов оценивалось путем расчета процентного контроля для каждого вида стимуляции цельной крови в ТС следующим образом:
% контроль = 100 × [PMTC+CGS+ Соединение 7] / [PMTC-CGS- Соединение 7].
Результаты. LPS, зимозан, SEB и анти-CD3/CD28 вызывают секрецию нескольких цитокинов и хемокинов в культурах клеток цельной крови. Была оценена биологическая активность двух агонистов А2А-рецепторов (CGS-21680 и NECA) на примере клеточных культур цельной крови, стимулированных LPS, зимозаном, SEB или анти-CD3/CD28. Оба агониста дозозависимо изменяли секрецию нескольких цитокинов и хемокинов. Эффект являлся воспроизводимым для всех трех исследованных доноров, хотя степень изменений была различной для каждого из испытуемых.
При добавлении 1 мкМ CGS-21680 или NECA к культурам клеток цельной крови, стимулированным LPS или зимозаном, влияние на выделение как провоспалительных, так и противовоспалительных цитокинов стабилизировалось. В частности, содержание провоспалительных цитокинов IFNg и TNFa снижалось более чем на 50%, в то время как содержание противовоспалительных цитокинов IL-8 и IL-10 удваивалось.
Была проведена оценка способности Соединения 7 к реверсу изменений в секреции цитокинов и хемокинов, вызываемых действием CGS-21680 на культуры клеток цельной крови, стимулированные LPS, зимозаном или анти-CD3/CD28. Как показано на Фиг. 1А и 1В, Соединение 7 дозозависимо восстанавливало изменения в секреции цитокинов и хемокинов, вызванные CGS-21680, с полным восстановлением при концентрациях соединения, составлявших 100-1000 нМ, в зависимости от условий теста. Эффект являлся воспроизводимым для всех трех исследованных доноров, хотя степень изменений была различной для каждого из испытуемых.
Секреция IFNg, TNFa, IL-8 и IL-10 в культурах клеток цельной крови в среде ТС, стимулированных LPS и зимозаном, зависела, главным образом, от воздействие CGS-21680, и полностью восстанавливалась в результате действия Соединения 7 в концентрациях 40-100 нМ.
II.2. Модуляция pCREB
II.2.A. Модуляция pCREB в иммунных клетках человека
Цель. Известно, что А2А-рецептор играет роль посредника в фосфорилировании CREB. Цель настоящего анализа - показать, что соединения по настоящему изобретению эффективно ингибируют А2А-рецептор, продемонстрировав, что форфорилирование CREB может быть ингибировано в результате воздействия на иммунные клетки человека соединений по настоящему изобретению.
Метод. Венозная кровь здоровых волонтеров, каждый из которых подписал информированное согласие, утвержденное Комитетом по этике (FOR-UIC-BV-050-01-01 ICF_HBS_HD Version 5.0), была получена через компанию ImmuneHealth (Centre Hospitalier Universitaire Tivoli, Ла-Лувьер, Бельгия). Клетки периферической крови обработали агонистами А2А-рецепторов CGS-21680 или NECA (Sigma-Aldrich, Дигем, Бельгия) и серийным разведением соединений по настоящему изобретению (для всех использовались маточные растворы с концентрацией 10 мМ в ДМСО). Все разведения были приготовлены в среде RPMI1640 (с UltraGlutamine; Lonza, Вервье, Бельгия) и клетки инкубировали с соединениями по настоящему изобретению во влажном инкубаторе для тканевых культур с 5% СО2 при 37°С. После стимуляции клетки фиксировали и вызывали нарушение проницательности мембраны, после чего проводили внутриклеточное окрашивание с использованием мышиных антител к pCREB человека (Clone J151-21; BD Biosciences) при комнатной температуре. Данные были получены с помощью проточного цитометра LSRFortessa (BD Biosciences) и проанализированы с использованием программного обеспечения FlowJo (FlowJo, LLC, Ашленд, Орегон).
Результаты. Было установлено, что соединения по настоящему изобретению ингибируют фосфорилирование CREB, медиатором которого выступает А2А-рецептор. Например, Соединение 4 демонстрирует концентрацию IC50, равную 20 нМ, в лимфоцитах периферической крови, активированных NECA, как показано на Фиг. 2.
II.2.В. Модуляция pCREB у мышей ex vivo
Цель. Известно, что А2А-рецептор играет роль посредника в фосфорилировании CREB. Цель настоящего анализа - показать, что соединения по настоящему изобретению эффективно ингибируют А2А-рецептор, продемонстрировав, что форфорилирование CREB может быть ингибировано у мышей в результате введения мышам доз соединений по настоящему изобретению.
Метод. Была приготовлена смесь, включающая Соединение 7, 10% ДМСО, 10% солютола, 80% воды, рН 3 для получения гомогенного раствора. Был рассчитан объем с целью введения конечной дозы в 100 мкл перорально (ПО). Самки мышей линии BALB/cAnNCrl были приобретены в компании Charles River Laboratories. Мышам перорально вводили однократную дозу антагониста А2А-рецептора. В конкретный момент времени животные подвергались анестезии путем интраперитонеальной инъекции 200 мкл кетамина 10% / ксилазина 0,1% в фосфатно-солевом буфере (ФСБ; PBS) и проводился отбор крови из ретроорбитального синуса в пробирки с ЭДТА. Кровь помещали в мастер-блок из расчета 45 мкл крови на лунку. Приготовляли раствор агониста А2А-рецептора NECA (Tocris) концентрацией 3 мкМ в RPMI 1640 (Lonza) с добавлением среды 2% пенициллина/стрептомицина (Lonza) и 50 мкМ 2-меркаптоэтанола (Sigma). 50 мкл приготовленного раствора агониста добавляли в лунки и инкубировали с 5% CO2 в течение 45 минут при 37°С во влажном инкубаторе для клеточных культур. Конечная концентрация ДМСО в исследовании составляла 0,125%. Клетки фиксировали добавлением в каждую лунку 1 мл предварительно подогретого буфера Lyse/Fix (BD Biosciences), аккуратно перемешивали и инкубировали в течение 10 минут при 37°C с 5% CO2 во влажном инкубаторе для клеточных культур. Клетки осаждали центрифугированием при 600xg в течение 5 минут. После промывания в 1 мл фосфатно-солевого буфера Дюккельбекко (DPBS) с Ca2+Mg2+ (Lonza) клетки пермеабилизировали добавлением 200 мкл охлажденного льдом буфера Perm Buffer II (BD Biosciences) и инкубировали 30 минут на льду. Во время пермеабилизации клетки переносили в 96-луночный планшет с U-образным дном. Клетки осаждали и промывали дважды буфером для флуоресцентного сортинга (FACS), состоящим из ФСБ (Lonza), 0,1% БСА (VWR), 2 мМ ЭДТА (Ambion). Окрашивание для FACS проводилось ресуспендированием клеток в буфере FACS, содержащем Fc-блок (моноклональные антитела к CD16/CD32 (93), eBioscience); после 5 минутного инкубирования при комнатной температуре добавляли смесь антител и клетки инкубировали 1 час при комнатной температуре. Клетки промывали буфером FACS и ресуспендировали в нем же для анализа с помощью BD Fortessa (BD Biosciences).
Для анализа полученных данных проточной цитометрии использовалось программное обеспечение FlowJo 10.4. MFI (медианная интенсивность флуоресценции) интересующего нас маркера, pCREB, была оценена, нормализована к соответствующему контролю ДМСО (соотношение) и представлена в виде графика. Анализ данных о зависимости между дозой и эффектом осуществлялся с помощью программного обеспечения GraphPad Prism 7.0 с использованием нелинейной регрессии применительно к сигмоидальной модели зависимости доза-эффект. Данные были получены с применением проточного цитометра LSRFortessa (BD Biosciences) и проанализированы с помощью программного обеспечения FlowJo (FlowJo, LLC, Ashland, Oregon).
Результаты. Соединение 8а полностью ингибирует сигнальный путь А2А-рецептора в CD4+ Т-клетках через 30 минут после перорального приема в дозе 0,1 мг/кг (Таблица 4). При дозе, составляющей 1 мг/кг, по-прежнему наблюдается более чем 70%-е ингибирование сигнального пути А2А-рецептора через 12 часов после введения дозы. Аналогичные данные получены для CD8+ Т-клеток (Таблица 5).
II.3. Анализ цитотоксичности
Цель. Активация А2А-рецептора обеспечивает иммуносупрессивный сигнал, который ингибирует цитотоксичность. Цель настоящего анализа - показать, что соединения по настоящему изобретению эффективно ингибируют А2А-рецептор, продемонстрировав, что цитотоксичность может быть увеличена в результате воздействия соединений по настоящему изобретению.
Метод. Было проведено исследование цитотоксичности для оценки антиген-специфической цитотоксической активности клеток OT-I CD8 в отношении OVA-сенсибилизированных клеток-мишеней и способности соединений по настоящему изобретению снижать ингибирование цитотоксичности, медиируемое А2А-рецепторами: клетки ОТ1 выделяли из селезенки мышей C57BL/6-Tg(TcraTcrb)1100Mjb/Crl (Charles River). Клетки ОТ1 были примированы OVA-пептидом, 1 мкг/мл (Овальбумин (257-264) цыпленка (S7951-1MG), Sigma Aldrich), в присутствии CGS-21680, 5 мкМ (Sigma-Aldrich), и возрастающих концентраций соединений по настоящему изобретению в течение 3 дней во влажном инкубаторе для тканевых культур в атмосфере 5% CO2 при 37°С. На третий день клетки объединили и подсчитали. Для исследования цитотоксичности в третий день, клетки-мишени Panc02 сенсибилизировали OVA (1 мкг/мл). Клетки-мишени и несенсибилизированные клетки Panc02 (фоновые клетки, не являющиеся мишенями) пометили с помощью CFSE (С 1157 (ThermoFisher)) и CellTrace™ Far Red Cell Proliferation Kit (C34564, ThermoFisher), соответственно, согласно инструкции производителя. Стимулированные клетки ОТ-1 добавили в качестве эффекторных клеток в соотношении «эффектор-цель», равном 10:1. Совместную культуру инкубировали в 5% CO2 при 37°С во влажном инкубаторе для тканевых культур. Через 24 часа клетки промыли и окрасили с использованием набора для окрашивания Live/dead fixable violet dead cell staining kit (Molecular Probes, L34955). Затем измерили показатель цитотоксического уничтожения клеток путем отслеживания изменений в соотношении количества живых клеток-мишеней и клеток, не являвшихся мишенями, при помощи проточной цитометрии (MACSQuant® Analyzer 10 - Miltenyi Biotec).
% цитотоксичности рассчитывали следующим образом: % цитотоксичности = (1-R1/R2)*100
где R1 = (% клеток-мишеней)/(% клеток, не являющихся мишенями)* 100 в присутствии эффекторных клеток, и R2 = (%клеток-мишеней)/(% клеток, не являющихся мишенями)* 100 в отсутствие эффекторных клеток.
Результаты. Добавление к среде агониста А2А-рецепторов CGS-21680 приводит к уменьшению цитотоксичности; данный эффект дозозависимо ослабляется соединениями по настоящему изобретению (Таблица 6). В качестве примера, это проиллюстрировано на ФИГ. 3 для соединений 4 и 31 по настоящему изобретению.
III. Примеры в области фармакокинетики
III.1. Определение способности к проникновению в ЦНС и эффлюкса в клетках Сасо-2
Цель. Как упомянуто во введении, соединения по настоящему изобретению должны демонстрировать ограниченную, если вообще какую-либо, способность к проникновению в ЦНС, чтобы избежать вредных побочных эффектов, которые могут возникнуть, если эти соединения будут проникать в мозг в значительных количествах.
Цель настоящего анализа - показать, что соединения по настоящему изобретению не обладают какой-либо значительной способностью к проникновению в ЦНС, продемонстрировав, что они являются субстратами транспортеров, которые выводят их из мозга.
Действительно, в данной области техники хорошо известно, что ксенобиотики, которые являются субстратами транспортеров, например, Р-гликопротеина, не могут эффективно проникать через гематоэнцефалический барьер и, таким образом, обладают пониженной эффективностью в центральной нервной системе (Alfred H. Schinkel, "P-Glycoprotein, a gatekeeper in the blood-brain barrier". Advanced Drug Delivery Reviews 36 (1999) 179-194).
Цель настоящего анализа, таким образом, состоит в том, чтобы показать, что соединения по настоящему изобретению являются субстратами для подобных транспортеров, имеющихся в клеточной линии Сасо-2, и, следовательно, не проникают через гематоэнцефалический барьер.
Материалы. В качестве буфера переноса (БП, рН 7.4) в данном исследовании использовался сбалансированный солевой раствор Хенкса (HBSS, Gibco, Cat# 14025-076) с 10 мМ HEPES при рН 7.4. Остальная бычья сыворотка (ФБС) (Corning, Cat # Сorning-35-076-СV, или другие поставщики), минимальная поддерживающая среда (MEM) (Gibco, Cat # 41500-034), а также добавки к ней, приобретены у компании Invitrogen (Карлсбад, Калифорния, США). Клеточная линия Сасо-2 (Cat # НТВ-37) приобретена в компании АТСС (Роквилл, Мэриленд, США). Органические растворители, использованные в исследовании, приобретены у компании Sigma Aldrich (Сент-Луис, Миссури, США).
Приготовление рабочих растворов. Для эталонных соединений (фенотерол, пропранолол и дигоксин) и исследуемых соединений промежуточные растворы концентрацией 0,4 мМ получают разбавлением ДМСО маточных растворов на основе ДМСО, имеющих концентрацию 10 мМ или другие соответствующие концентрации. Дозировочные растворы концентрацией 2 мкМ для эталонных соединений и исследуемых соединений получают путем добавления соответствующего объема промежуточного раствора к БП с 1 мкМ зосукидаром и без него. Конечная концентрация ДМСО - не больше, чем 1% (об/об).
Культура клеток Сасо-2. Клетки Сасо-2 выращивают в минимальной поддерживающей среде (MEM), обогащенной L-глутамином (2 мМ), 10%-й ФБС, пенициллином-G (100 Ед/мл) и стрептомицином (100 мкг/мл). Клетки инкубируют в атмосфере 5% СО2 при 37°С и относительной влажности насыщения. По достижении 80-90%-й конфлюентности клетки осторожно отделяют с помощью 0,05% раствора трипсин-ЭДТА. Клетки с пассажем 30-50 высевают на 96-луночный планшет BD insert system (Cat # 359274) при плотности 1×105 клеток/см2 и культивируют в течение 21-28 дней, меняя среду каждые 4-5 дней.
Процедуры по исследованию переноса. БП и дозировочные растворы предварительно подогрели до 37°С перед проведением исследования переноса. Монослой клеток дважды промыли HBSS, содержащим 10 мМ HEPES. Для исследования переноса в направлении от апикальной к базальной стороне (А-Б), 75 мкл дозировочного раствора добавляли в лунку, расположенную на верхней стороне системы (апикальную). В каждую лунку на нижней стороне (базальную) помещали 250 мкл БП. Для исследования переноса в направлении от базальной к апикальной стороне (Б-А), 250 мкл дозирующего раствора добавляли в базальную лунку после заполнения каждой апикальной лунки 75 мкл БП. Исследуемые соединения и дигоксин тестировали в концентрации 2 мкМ, в присутствии зосукидара (1 мкМ) или без него, в обоих направлениях, в двух повторностях. Атенолол и пропранолол тестировали в концентрации 2 мкМ без зосукидара, в направлении А-Б, в двух повторностях. Планшеты инкубировали в течение 120 минут при 37°С и влажности насыщения, в атмосфере 5% СО2. Нулевые образцы получали путем смешивания 50 мкл исходного дозировочного раствора испытуемого соединения или эталонного соединения с 100 мкл БП и 250 мкл блокирующего раствора (квенч-раствора) (ацетонитрил (АЦН) или другой соответствующий растворитель, имеющий внутренний стандарт (стандарты), согласно данному биоаналитическому методу). Через 120 минут из каждой лунки, служившей приемником в ходе переноса в направлении А-Б, отбирали 150 мкл раствора, добавляя затем 250 мкл блокирующего раствора для получения образца реципиента переноса А-Б. Для получения других образцов (донора переноса А-Б, донора переноса Б-А и реципиента переноса Б-А) 50 мкл раствора отбирали из каждой соответствующей лунки с последующим добавлением 250 мкл блокирующего раствора и 100 мкл БП. Все образцы перемешивали при помощи вихревой мешалки и центрифугировали при 3220 g в течение 20 мин. Далее супернатант разводили сверхчистой водой для ЖХ-МС/МС анализа. Концентрации исследуемого соединения во всех образцах определялись методами ЖХ-МС/МС и выражались через отношение площади пика аналита к внутреннему стандарту.
Концентрация образцов выражена через отношение площади пика Аналита к Внутреннему стандарту (Аналит/ВС).
Расчет коэффициента видимой проницаемости (Рарр) проводился по следующей формуле:
Рарр = VR/(Площадь*Время)*(CR/С0)
где VR это объем раствора в камере-приемнике (0,075 мл на апикальной стороне, 0,25 мл на базальной стороне); площадь это площадь поверхности переноса, то есть, 0,0804 см2 для площади монослоя; время это время инкубирования, выраженное в секундах, 2 ч = 2×3600 сек; С0 это исходная концентрация в камере-доноре; CR это исходная концентрация в камере-приемнике.
Расчет коэффициента эффлюкса проводился по следующей формуле:
Коэффициент эффлюкса = Рарр (А-В)/Рарр(В-А)
где Рарр (А-В) и Рарр (В-А) - значения Рарр соединения для переноса в направлении от апикальной к базальной стороне и в направлении от базальной к апикальной стороне, соответственно.
Результаты. Согласно устоявшейся практике, соединения считаются субстратами Р-гликопротеина, когда значение коэффициента эффлюкса > 3. Соединения по настоящему изобретению, как правило, имеют коэффициент эффлюкса > 3, как видно из Таблицы 7 ниже.
III.2. Определение концентрации антагонистов А2А-рецепторов в головном мозге и спинномозговой жидкости по сравмению с плазмой
Цель. Цель настоящего исследования - показать, что соединения по настоящему изобретению не демонстрируют какой-либо значительной способности проникать в ЦНС, путем определения концентрации этих соединений в головном мозге и спинномозговой жидкости (СМЖ) по сравнению с плазмой.
Метод. 7-9-недельным самкам мышей Balb-c (приобретенным в компании SLAC Laboratory Animal Co. Ltd., Шанхай, Китай, или в компании SIPPR-B&K Laboratory Animal Co. Ltd., Шанхай, Китай) осуществляли пероральное введение в дозе 10 мг/кг в виде суспензии концентрацией 1,00 мг/мл в 10% ДМСО + 10% солютол + 80% вода, с показателем рН, доведенным до 3-4 (гомогенная контрастная суспензия).
Животных не кормили, по меньшей мере, в течение 12 часов перед введением дозы. Через 4 часа после введения всем животным предоставлялся неограниченный доступ к специальному питанию для грызунов (Certified Rodent Diet; Catalog # M01-F, SLAC Laboratory Animal Cl. Ltd., Шанхай, Китай). Серийный отбор крови (приблизительно 30 мкл в каждый контрольный момент времени) производился из подчелюстной или подкожной вены. Образцы переносили в предварительно охлажденные пробирки для микроцентрифуги, содержащие в качестве антикоагулянта 2 мкл K2EDTA (0,5М) и помещали в жидкий лед для дальнейшей обработки. Сразу после забора крови в назначенные моменты времени производилось изъятие головного мозга. В определенные моменты времени после введения дозы из мозжечково-мозговой цистерны (cistema magna) производился отбор спинномозговой жидкости.
В течение получаса после отбора образцов крови из них получали плазму центрифугированием при приблизительно 4°С и 3000g в течение 15 мин. Образцы плазмы в полипропиленовых пробирках подвергали быстрой заморозке на сухом льду и хранили при -70°С до проведения анализа методами ЖХ-МС/МС. Образцы мозга взвешивали, промывали холодной дистиллированной водой для удаления крови и гомогенизировали с использованием предварительно охлажденной воды в соотношении 1:4 (1 г мозга на 4 мл воды). Гомогенизат хранили при -70°С до проведения анализа методами ЖХ-МС/МС. Спинномозговую жидкость подвергали быстрой заморозке на сухом льду и хранили при -70°С до проведения анализа методами ЖХ-МС/МС.
Результаты. Например, в отношении соединения 4 по настоящему изобретению, в головном мозге и в спинномозговой жидкости мышей при данных условиях не обнаружено измеримых количеств указанного соединения.
Индивидуальная и средняя концентрации Примера 4 после перорального введения (10 мг/кг) представлены в Таблице 8 ниже.
III.3. Определение активности ЦНС путем анализа двигательной активности
Цель. Было установлено, что, в дополнение к иммуносупрессивному эффекту, аденозин модулирует нейронные функции, взаимодействуя с А2А-рецепторами в центральной нервной системе. Данное взаимодействие медиирует часть дофаминового пути, который участвует в обеспечении движений. Было продемонстрировано, что блокирование передачи сигналов на этом участке в головном мозге в результате действия соединений, являющихся антагонистами А2А-рецептора и обладающих способностью проникать в мозг, таких, например, как Преладенант (изначально синтезированный для профилактики развития болезни Паркинсона), вызывает у животных повышенную двигательную активность. Это являлось потенциальной проблемой при использовании соединений, предназначенных для лечения болезни Паркинсона (например, Преладенант), которые были перепрофилированы для иммунотерапии онкологических заболеваний.
Цель настоящего анализа - показать, что соединения по настоящему изобретению не обладают какой-либо значительной активностью в ЦНС, используя метод, опубликованный Ходсоном и др. авторами (Hodgson et al. J. Pharma. And Exp.Thera. 2009). Принцип настоящего анализа состоит в том, что CGS21680 - обладающий специфичностью к А2А-рецепторам и высокой способностью проникать в мозг аналог аденозина, вызывает у мышей обездвиженность (пониженную двигательную активность) в течение нескольких минут после подкожного введения. Следовательно, у мыши, которой до введения CGS21680 был введен антагонист А2А-рецептора, обладающий способностью проникать в головной мозг, снижение двигательной активности развиваться не будет.
Преладенант, используемый в качестве эталона соединения, обладающего высокой способностью проникать в мозг, рассматривали в сравнении с соединениями по настоящему изобретению в различных концентрациях при пероральном введении (per os) с точки зрения их влияния на неподвижность, вызываемую CGS21680.
Методы. Соединения вводились за 30 мин до начала мониторинга содержания CGS21680 и двигательной активности, который продолжался в течение 30 мин. Степень подвижности мышей оценивалась в баллах (Таблица 9) с использованием шкалы, представленной в Таблице 10.
Результаты. Введение одного только CGS21680 в дозе 1 мг/кг (подкожно) через 30 минут вызывало полную неподвижность. Преладенант ингибировал иммобилизующее действие CGS21680 при введении перорально в дозе 10 мг/кг, в то время как соединения по настоящему изобретению, введенные в эквивалентных дозах, не устраняли в полной мере возникающую неподвижность. Указанные данные согласуются с данными фармакокинетического исследования мозга и спинномозговой жидкости, подтверждая вывод о том, что соединения по настоящему изобретению имеют пониженную способность к проникновению в ЦНС и сниженную активность в ЦНС по сравнению с Преладенантом.
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
ИНГИБИТОРНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ | 2013 |
|
RU2673079C2 |
Соединение формулы (I), фармацевтическая композиция, применение соединения формулы (I) для лечения гематологических и/или пролиферативных нарушений | 2016 |
|
RU2758259C2 |
ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ | 2015 |
|
RU2667498C2 |
ОКТАГИДРО КОНДЕНСИРОВАННЫЕ АЗАДЕКАЛИНОВЫЕ МОДУЛЯТОРЫ ГЛЮКОКОРТИКОИДНОГО РЕЦЕПТОРА | 2014 |
|
RU2674983C1 |
СПИРОЦИКЛИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ | 2016 |
|
RU2745069C2 |
СОЕДИНЕНИЯ ИМИДАЗОТРИАЗИНОНА | 2011 |
|
RU2603140C2 |
СОЕДИНЕНИЯ ДИГИДРОПИРИМИДИНА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТАХ | 2013 |
|
RU2655914C9 |
ЗАМЕЩЕННЫЕ СОЕДИНЕНИЯ ПИРИДИН АЗОЛОПИРИМИДИН-5-(6Н)-ОНА | 2013 |
|
RU2653054C2 |
ТРИАЗОЛОПИРИДИНОВЫЕ СОЕДИНЕНИЯ-ИНГИБИТОРЫ JAK И СПОСОБЫ | 2009 |
|
RU2561104C2 |
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ | 2005 |
|
RU2422449C2 |
Изобретение относится к соединению формулы (Ia) или к его фармацевтически приемлемой соли, где R1 представляет собой 5-членный гетероарил; предпочтительно R1 представляет собой фурил; X1 и X2 представляют собой каждый независимо C или N; R1’ отсутствует, когда X1 представляет собой N; или, когда X1 представляет собой C, R1’ представляет собой H, галоген, алкил, гетероциклил, алкокси, гетероциклилокси, аминокарбонил, гидроксикарбонил, гетероциклилкарбонил, алкилсульфоксид, алкилсульфонил, аминосульфонил, гетероциклилсульфонил или алкилсульфонимидоил; причём указанные заместители необязательно замещены от одного дo четырех заместителeй, выбранных из оксо, галогена, гидрокси, алкила, гетероциклилалкила, гидроксиалкила, дигидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил) аминокарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила и алкилсульфонила; R2’ представляет собой H, алкил, гетероциклил, алкокси, гетероциклилокси, аминокарбонил, гетероциклилкарбонил или алкилсульфоксид; причём указанные заместители необязательно замещены одним или двумя заместителями, выбранными из оксо, галогена, гидрокси, циано, алкила, гетероциклилалкила, дигидроксиалкила, диалкиламиноалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила и алкилсульфонила; или R1’ и R2’ образуют вместе с атомами, к которым они присоединены, 5-членное гетероциклильное кольцо; замещенное оксо; R3’ отсутствует, когда X2 представляет собой N; или, когда X2 представляет собой C, R3’ представляет собой H или галоген, предпочтительно H или F; R4’ представляет собой H или галоген, предпочтительно H или F; и R5’ представляет собой H; и где алкильная группа, как таковая или часть другого заместителя, содержит от 1 до 4 атомов углерода; гетероциклильная группа, как таковая или часть другого заместителя, содержит от 4 до 6 атомов кольца и включает 1 или 2 гетероатома, выбранных из N, O и/или S; и гетероарильная группа, как таковая или часть другого заместителя, содержит 5 атомов кольца и включает от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из N и/или O. Изобретение также относится к фармацевтической композиции и лекарственному средству, ингибирующим аденозиновый рецептор типа A2A, на основе указанных соединений, способу их получения и промежуточным соединениям для их получения. Технический результат – получены новые соединения и фармацевтическая композиция на их основе, которые могут найти применение в медицине для лечения или профилактики онкологических заболеваний. 7 н. и 13 з.п. ф-лы, 4 ил., 10 табл., 132 пр.
1. Соединение формулы (Ia)
или его фармацевтически приемлемая соль,
где R1 представляет собой 5-членный гетероарил; предпочтительно R1 представляет собой фурил;
X1 и X2 представляют собой каждый независимо C или N;
R1’ отсутствует, когда X1 представляет собой N; или, когда X1 представляет собой C, R1’ представляет собой H, галоген, алкил, гетероциклил, алкокси, гетероциклилокси, аминокарбонил, гидроксикарбонил, гетероциклилкарбонил, алкилсульфоксид, алкилсульфонил, аминосульфонил, гетероциклилсульфонил или алкилсульфонимидоил;
причём указанные заместители необязательно замещены 1-4 заместителями, выбранными из оксо, галогена, гидрокси, алкила, гетероциклилалкила, гидроксиалкила, дигидроксиалкила, гидроксиалкиламиноалкила, аминоалкила, алкиламиноалкила, диалкиламиноалкила, (гетероциклил)(алкил)аминоалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил) аминокарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила и алкилсульфонила;
R2’ представляет собой H, алкил, гетероциклил, алкокси, гетероциклилокси, аминокарбонил, гетероциклилкарбонил или алкилсульфоксид;
причём указанные заместители необязательно замещены одним или двумя заместителями, выбранными из оксо, галогена, гидрокси, циано, алкила, гетероциклилалкила, дигидроксиалкила, диалкиламиноалкила, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, гидроксикарбонила, алкилоксикарбонила, аминокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, алкилсульфоксида, алкилсульфоксидалкила, и алкилсульфонила;
или R1’ и R2’ образуют вместе с атомами, к которым они присоединены, 5-членное гетероциклильное кольцо; замещенное оксо;
R3’ отсутствует, когда X2 представляет собой N; или, когда X2 представляет собой C, R3’ представляет собой H или галоген, предпочтительно H или F;
R4’ представляет собой H или галоген, предпочтительно H или F; и
R5’ представляет собой H;
и где
алкильная группа, как таковая или часть другого заместителя, содержит от 1 до 4 атомов углерода;
гетероциклильная группа, как таковая или часть другого заместителя, содержит от 4 до 6 атомов кольца и включает 1 или 2 гетероатома, выбранных из N, O и/или S; и
гетероарильная группа, как таковая или часть другого заместителя, содержит 5 атомов кольца и включает от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из N и/или O.
2. Соединение по п. 1, имеющее Формулу (Ia-1)
(Ia-1),
или его фармацевтически приемлемая соль, где R1, R1’, R2’, R3’, R4’ и R5’ соответствуют определению, приведенному в п. 1.
3. Соединение по п. 1, имеющее Формулу (Ia-1a)
(Ia-1a),
или его фармацевтически приемлемая соль,
где R1 и R3’ соответствуют определению, приведенному в п. 1; и
R1” представляет собой алкильную или гетероциклильную группу, замещенную одной или более группами, выбранными из оксо, галогена, гидрокси, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, амино, диалкиламино, аминоалкилкарбониламино, аминокарбонилалкиламино, (аминокарбонилалкил)(алкил)амино, гидроксикарбонила, аминокарбонила, аминоалкиламинокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, (алкиламиноалкил)(алкил)аминокарбонила, гетероциклилкарбонила, алкилсульфоксида и алкилсульфонила.
4. Соединение по п. 1 имеющее Формулу (Ia-1b)
(Ia-1b),
или его фармацевтически приемлемая соль,
где R1 и R3’ соответствуют определению, приведенному в п. 1;
R1’ представляет собой H или галоген, предпочтительно H или F; и
R2” представляет собой алкильную или гетероциклильную группу, замещенную одной или более группами, выбранными из оксо, галогена, гидрокси, циано, гетероциклила, гетероарила, алкилгетероарила, гидроксикарбонила, алкилоскикарбонила, аминокарбонила, алкиламиноалкиламинокарбонила, диалкиламиноалкиламинокарбонила, гетероциклилалкиламинокарбонила, алкилсульфоксида и алкилсульфонила.
5. Соединение по п. 1, имеющее Формулу (Ia-1c) или (Ia-1d)
(Ia-1c),
(Ia-1d),
или его фармацевтически приемлемая соль,
где R1 и R3’ соответствуют определению, приведенному в п. 1;
R1’ представляет собой H или галоген, предпочтительно H или F;
R2’ представляет собой H или галоген, предпочтительно H или F;
R1i и R1ii представляют собой каждый независимо водород, алкил, гетероциклилалкил, гидроксиалкил, дигидроксиалкил, гидроксиалкиламиноалкил, аминоалкил, алкиламиноалкил, диалкиламиноалкил, (гетероциклил)(алкил)аминоалкил, алкилсульфоксидалкил; и
R2i и R2ii представляют собой каждый независимо водород, алкил, гетероциклилалкил, дигидроксиалкил, диалкиламиноалкил, алкилсульфоксидалкил.
6. Соединение по п. 1 имеющее Формулу (Ia-2) или (Ia-3)
(Ia-2),
(Ia-3),
или его фармацевтически приемлемая соль, где R1, R2’, R3’, R4’ и R5’ соответствуют определению, приведенному в п 1.
7. Соединение по п. 1 выбранное из группы, в состав которой входят:
[1,5-c]пиримидин-3(2H)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)ацетамид;
[1,2,4]триазоло[1,5-c]пиримидин-3(2H)-ил)этил)пиперазин-1-ил)-2,4-дифторфенокси)-N-(2-(метиламино)этил)ацетамид;
и их фармацевтически приемлемые соли.
8. Соединение по п. 1, которое является (+)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-e][1,2,4]триазоло[1,5-c]пиримидин-2(3H)-он или его фармацевтически приемлемая соль.
9. Соединение по п. 1, которое является (+)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-e][1,2,4]триазоло[1,5-c]пиримидин-2(3H)-он.
10. Соединение по п. 1, которое является (S)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-e][1,2,4]триазоло[1,5-c]пиримидин-2(3H)-он или его фармацевтически приемлемая соль.
11. Соединение по п. 1, которое является (S)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-e][1,2,4]триазоло[1,5-c]пиримидин-2(3H)-он.
12. Соединение по п. 1, которое является (R)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-e][1,2,4]триазоло[1,5-c]пиримидин-2(3H)-он или его фармацевтически приемлемая соль.
13. Соединение по п. 1, которое является (R,S)-5-амино-3-(2-(4-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин-1-ил)этил)-8-(фуран-2-ил)тиазоло[5,4-e][1,2,4]триазоло[1,5-c]пиримидин-2(3H)-он или его фармацевтически приемлемая соль.
14. Фармацевтическая композиция, ингибирующая аденозиновый рецептор типа A2A, содержащая эффективное количество соединения по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемой соли и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.
15. Лекарственное средство, ингибирующее аденозиновый рецептор типа A2A, содержащее эффективное количество соединения по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемой соли.
16. Применение соединения по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемой соли в лечении или профилактике онкологических заболеваний.
17. Применение соединения по п. 16, где онкологическое заболевание выбрано из онкологических заболеваний молочной железы, карциномы, онкологических заболеваний шейки матки, эндометрия, колоректальных онкологических заболеваний, глиомы, онкологических заболеваний головы и шеи, печени, легких, меланомы, онкологических заболеваний яичников, поджелудочной железы, предстательной железы, почек, желудка, щитовидной железы и уротелия.
18. Применение соединения по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемой соли в качестве ингибитора рецепторов типа A2A.
19. Способ получения соединения Формулы (Ia) по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемой соли, характеризующийся тем, что включает реакцию сочетания между промежуточным амином Формулы (A)
(A),
где X1, X2, R1’, R2’, R3’, R4’ и R5’ соответствуют определению, приведенному в п. 1,
и промежуточным соединением Формулы (B)
,
где R1 соответствует определению, приведенному в п. 1, а Y представляет собой галоген, алкилсульфонилокси, имеющий от 1 до 6 атомов углерода, или арилсульфонилокси, имеющий от 6 до 10 атомов углерода.
20. Соединение Формулы (A), выбранное из группы, в состав которой входят:
1-(2-фтор-4-(проп-2-ин-1-ил-окси)фенил)пиперазин;
2-(2,4-дифтор-5-(пиперазин-1-ил)фенокси)ацетамид;
(S)-1-(2-фтор-4-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин;
(R)-1-(2-фтор-4-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин;
(R,S)-1-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин;
(S)-1-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин;
(R)-1-(2,4-дифтор-5-(2-(метилсульфинил)этокси)фенил)пиперазин;
и их соли.
HODGSON R | |||
A | |||
et al., Characterization of the Potent and Highly Selective A2A Receptor Antagonists Preladenant and SCH 412348 [7-[2-[4-2,4-Difluorophenyl]-1-piperazinyl]ethyl]-2-(2-furanyl)-7H-pyrazolo[4,3-e][1,2,4]triazolo[1,5-c]pyrimidin-5-amine] in Rodent Models of Movement Disorders and Depression, Journal of Pharmacology and Experimental |
Авторы
Даты
2024-07-12—Публикация
2018-03-30—Подача