СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ МНОГООЧАГОВОГО РАКА Российский патент 2024 года по МПК A61K38/00 A61P35/00 

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

По этой заявке испрашивается приоритет заявки на патент США, серийный № 16/528,390, поданной 31 июля 2019 г., объект которой полностью включен в настоящий документ посредством ссылки.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

1. Область вариантов осуществления

Варианты осуществления включают способы лечения многоочагового рака у млекопитающих, страдающих многоочаговым раком, и, более конкретно, способы профилактики и/или уменьшения развития и прогрессирования многоочагового рака во всем пораженном органе или организме путем прямого введения в одну (одноочаговую) раковую опухоль композиции, содержащей фармацевтически активный ингредиент, способный вызывать некроз опухоли, и фармацевтически приемлемый носитель. В одном варианте осуществления, фармацевтически активным ингредиентом является фексапотид трифлутат («FT»), и многоочаговым раком является рак предстательной железы. Способы включают, но не ограничены ими, введение композиций внутримышечно, перорально, внутривенно, внутрибрюшинно, внутрь предстательной железы, интрацеребрально (интрапаренхимально), интрацеребровентрикулярно, внутриочагово, интраокулярно, интраартериально, интратекально, интратуморально, интраназально, местно, чрескожно, подкожно или интрадермально пациентам, нуждающимся в этом, где таргетное введение композиций в одноочаговую раковую опухоль снижает или предотвращает возникновение многоочагового рака, степень многоочагового рака и прогрессирование (ухудшение) многоочагового рака.

2. Описание известного уровня техники

Суть многих медицинских методов лечения и процедур включает удаление или разрушение вредных или нежелательных тканей. Примеры таких методов лечения включают хирургическое удаление раковых или предраковых новообразований, разрушение метастатических опухолей с помощью химиотерапии и уменьшение гиперплазии желез (например, предстательной железы). Другие примеры включают удаление нежелательных волос на лице, удаление бородавок и удаление нежелательной жировой ткани.

Существует потребность в эффективной композиции, которая будет разрушать и, следовательно, либо способствовать удалению, либо ингибировать дальнейший рост вредных или нежелательных клеток и тканей, но будет иметь в основном местные эффекты и минимальную или отсутствующую системную токсичность. Также существует потребность в снижении потребности в инвазивном хирургическом вмешательстве, радиационной терапии и/или химиотерапии, и других инвазивных процедурах.

Некоторые агенты, которые, как известно, обладают способностью разрушать и, следовательно, либо способствовать удалению, либо ингибировать дальнейший рост вредных или нежелательных клеток и тканей, описаны в заявке на патент США № 14/808,713, поданной 24 июля 2015 г., озаглавленной: METHODS OF REDUCING THE NEED FOR SURGERY IN PATIENTS SUFFERING FROM BENIGN PROSTATIC HYPERPLASIA; заявке на патент США № 14/606,683, поданной 27 января 2015 г., озаглавленной: METHOD OF TREATING DISORDERS REQUIRING DESTRUCTION OR REMOVAL OF CELLS, заявки на патент США № 14/738,551, поданной 12 июня 2015 г., озаглавленной: COMBINATION COMPOSITIONS FOR TREATING DISORDERS REQUIRING REMOVAL OR DESTRUCTION OF UNWANTED CELLULAR PROLIFERATIONS, публикации заявок на патент США №№ 2007/0237780 (в настоящее время отпавшей); 2003/0054990 (в настоящее время патент США № 7,172,893); 2003/0096350 (в настоящее время патент США № 6,924,266); 2003/0096756 (в настоящее время патент США № 7,192,929); 2003/0109437 (в настоящее время патент США № 7,241,738); 2003/0166569 (в настоящее время патент США № 7,317,077); 2005/0032704 (в настоящее время патент США № 7,408,021); и 2015/0148303 (в настоящее время патент США № 9,243,035), описание каждой из которых полностью включено в настоящий документ посредством ссылки.

Одним из агентов, описанных в этих документах, является фексапотид трифлутат или FT. Было показано, что FT уменьшает гландулоциты предстательной железы, облегчает или уменьшает LUTS и лечит BPH у мужчин с увеличением предстательной железы. Также было описано, что FT полезен для снижения случаев возникновения рака предстательной железы путем лечения BPH у млекопитающего, страдающего BPH, при котором композиции, содержащие FT, вводят млекопитающему в переходную зону (центральную часть) предстательной железы. См., например, патент США № 10,183,058, описание которого полностью включено в настоящий документ посредством ссылки. FT также является предметом клинического испытания для оценки эффективности FT при лечении локализованной опухоли предстательной железы низкой степени с низким риском (T1c), где исследование предназначено для оценки эффективности FT в устранении локализованной опухоли в течение 45 дней после лечения.

Рак предстательной железы известен как заболевание с чрезвычайно высокой распространенностью относительно его клинической заболеваемости в популяции. Рак предстательной железы характеризуется высокой бессимптомной заболеваемостью и длительным бессимптомным течением. Рак предстательной железы имеет в среднем интервал от 7 до 14 лет, в течение которого рак присутствует, но является доклиническим, поскольку не выявляется при типовых клинических или лабораторных исследованиях (см. Etzioni, R et al., Am J Epidemiol. Vol. 148, pp. 775-85 (1998); и Gulati, R, et al., Cancer Epidemiol Biomarkers Prev; Vol. 20(5), pp. 740-50 (2011)).

Рак предстательной железы часто считают многоочаговым заболеванием, при котором предстательная железа включает множественные очаги аденокарциномы различной гетерогенности. Это затрудняет эффективное лечение рака, что часто приводит к радикальной простатэктомии, которая вызывает многочисленные проблемы, изменяющие жизнь мужчины, включая эректильную дисфункцию и недержание мочи. Некоторые виды рака предстательной железы, однако, считаются локализованным раком предстательной железы низкой степени с низким риском (T1c), о котором сообщалось примерно в 20-35% образцов радикальной простатэктомии. Mazzucchelli, et al., “Pathology of Prostate Cancer and Focal Therapy (‘Male Lumpectomy’),” Anticancer Research, Vol. 29, pp. 5155-5162 (2009); Ibeawuchi, et al., “Genome-Wide Investigation of Multifocal and Unifocal Prostate Cancer - Are They Genetically Different?” Int. J. Mol. Sci., Vol. 14, ppp. 11816-11829 (2013).

Из-за тяжести радикальной простатэктомии в недавних исследованиях сообщалось о фокальной терапии, при которой сохраняется часть предстательной железы, хотя эффективность фокальной терапии рака предстательной железы и профилактика прогрессирования рака остается неопределенной. Quann, et al., “Current prostate biopsy protocols cannot reliably identify patients for focal therapy;…”, Int. J. Clin. Exp. Pathol., Vol. 3(4), pp. 401-407 (2010). Выявление, таргетирование и фокальное уничтожение конкретной опухоли еще предстоит реализовать (Mazzucchelli, 5159), и на сегодняшний день фокальная терапия включает абляцию больших участков (например, всей доли или гемиаблацию) предстательной железы. Таким образом, до сих пор не было известно или ожидаемо, что лечение одноочаговой опухоли предстательной железы низкой степени с низким риском путем таргетирования только одноочаговой опухоли будет эффективным для снижения заболеваемости раком, степени рака и прогрессирования рака (ухудшения) по всей предстательной железе. Как следствие, клинические испытания, в которых оценивалась эффективность FT для лечения только одноочагового рака предстательной железы, не были разработаны, и не ожидалось, что они будут эффективны при лечении всей предстательной железы.

Обычным методом, используемым для выявления и мониторинга рака предстательной железы, является оценка уровней PSA в сочетании с оценкой биопсии. Типовая биопсия предстательной железы обычно включает взятие многочисленных образцов через предстательную железу и оценку ткани с использованием оценки Глисона. Оценка Глисона измеряет, насколько аномальной выглядит раковая клетка под микроскопом, и является хорошим индикатором того, насколько быстро клетки могут расти и распространяться. Оценка Глисона рассчитывается путем сложения двух степеней рака, которые составляют самые большие участки биоптата ткани, и часто представляется в виде двух чисел, например 3+3, вместе с общей оценкой, например 6. Первичный тип оценки Глисона указан первым, а вторичный - вторым. Биопсия, имеющая степень по Глисону 3+4 (всего 7) считается менее тяжелой, чем биопсия, имеющая степень по Глисону 4+3 (всего 7), потому что первичный тип выше 3. Соответственно, клиницисты оценивают не только общую оценку Глисона, но значения первичного и вторичного типа при оценке тяжести опухоли(ей). В следующей таблице представлена классификация групп рака предстательной железы и связанных с ними рисков:

Группа риска Группа оценки ISUP Оценка Глисона Низкая Группа 1 Оценка Глисона ≤ 6 Промежуточная Благоприятная Группа 2 Оценка Глисона 7 (3+4) Промежуточная Неблагоприятная Группа 3 Оценка Глисона 7 (4+3) Высокая Группа 4 Оценка Глисона 8 Высокая Группа 5 Оценка Глисона 9-10

Для локализованного рака предстательной железы низкой степени с низким риском (T1c), при котором оценка Глисона составляет ≤6, обычным курсом лечения является активный надзор (AS). Это связано с тем, что, хотя некоторые случаи могут благополучно созреть до рака высокого риска, требующего радикальной простатэктомии (например, оценка Глисона ≥8), во многих случаях это не происходит. Как отмечалось выше, примерно до 35% хирургически удаленных предстательных желез имеют только локализованный рак предстательной железы низкой степени с низким риском (T1c). Соответственно, те пациенты, у которых предстательная железа была удалена хирургическим путем, но у которых все еще не было раковых опухолей высокого риска, без необходимости страдали от пагубных последствий радикальной хирургической простатэктомии. Соответственно, типовым стандартом лечения является то, что если оценка Глисона равна 7 или выше, особенно если при первичным типом является 4, предпринимаются корректирующие меры либо путем удаления большой части предстательной железы, химиотерапии или радиации, либо радикальной простатэктомии. Поэтому было бы желательно найти безопасный и эффективный способ лечения пациентов с раком предстательной железы в группах низкого и/или низкого и промежуточного риска путем фокусного лечения отдельных очагов, при котором лечение эффективно для облегчения, уменьшения и/или или профилактики прогрессирования рака во всей предстательной железе.

Известно, что аналогично раку предстательной железы, другие виды рака являются многоочаговыми по своей природе, и им предшествуют и они ассоциированы с одноочаговыми опухолями или небольшими раковыми опухолями, которые не являются достаточно значительными, чтобы требовать лечения. Такие многоочаговые виды рака включают, но не ограничены ими, один или несколько из следующих: плоскоклеточный рак головы и шеи (HNSCC), плоскоклеточный рак кожи (SCC кожи), рак молочной железы, аденокарцинома и SCC легкого, рак пищевода, рак желудка, рак толстой кишки, рак мочевого пузыря, рак шейки матки, меланома, рак головного мозга, рак поджелудочной железы, рак яичников, рак костного мозга и лейкоз.

В настоящем описании, включая приведенное выше описание известного уровня техники, любые и все общедоступные документы, описанные в настоящем документе, включая любые и все опубликованные патентные заявки США, специально включены в настоящий документ посредством ссылки во всей их полноте. Приведенное выше описание известного уровня техники никоим образом не предназначено для признания того, что любой из документов, описанных в нем, включая находящиеся на рассмотрении заявки на патенты США, является известным уровнем техники для настоящего описания. Кроме того, описание в настоящем документе любых недостатков, связанных с описанными продуктами, способами и/или аппаратами, не предназначено для ограничения вариантов осуществления. Действительно, аспекты вариантов осуществления могут включать в себя определенные особенности описанных продуктов, способов и/или аппаратов, не страдая от описанных недостатков.

СУЩНОСТЬ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ

В данной области техники сохраняется потребность в новых, менее токсичных и менее частых и по существу неинвазивных методах лечения для профилактики или уменьшения прогрессирования или заболеваемости многоочаговым раком. В данной области также сохраняется потребность в таких методах лечения, которые снижают заболеваемость многоочаговыми раками. Варианты осуществления удовлетворяют этим требованиям.

Предпосылкой этого описания частично является открытие того, что фармацевтически активные ингредиенты, способные индуцировать некроз одноочаговой раковой опухоли, можно вводить в опухоль, но при этом они обладают неожиданным эффектом снижения заболеваемости многоочаговым раком, снижения степени многоочагового рака и уменьшения многоочагового прогрессирования (ухудшения) во всем пораженном органе или организме. Подходящие фармацевтически активные ингредиенты, способные индуцировать некроз таких опухолей, включают, например, фексапотид трифлутат (FT), пептид, описываемый аминокислотной последовательностью Ile-Asp-Gln-Gln-Val-Leu-Ser-Arg-Ile-Lys-Leu-Glu-Ile-Lys-Arg-Cys-Leu, Зутига (абиратерон ацетат), Апалутамид, абазитаксел, Касодекс (Бикалутамид), Элигард и Лупрон, (Лейпролид Ацетат), Эрлеада (Апалутамид), Фирмагон (Дегареликс), Флутамид, Гозерелин Ацетат, Джевтана (Кабазитаксел), Митоксантрона Гидрохлорид, Ниландрон (Нилутамид), Провендж (Сипулейцел-T), Сипулейцел-T, Таксотере (Доцетаксел), Ксофиго (Дихлорид Радия 223), Кстанди (Энзалутамид), Золадекс (Гозерелин Ацетат) и их смеси и комбинации. После нескольких лет непрерывного наблюдения неожиданно было обнаружено, что такое введение эффективно для снижения заболеваемости многоочаговым раком, снижения степени многоочагового рака и уменьшения многоочагового прогрессирования (ухудшения) во всем пораженном органе или организме, и не ограничивается местной эффективностью. Таким образом, варианты осуществления способны значительно улучшить качество жизни многих мужчин, страдающих многоочаговым раком, которые в противном случае подверглись бы более агрессивному лечению, такому как абляция большой части органа, химиотерапия, радиотерапия или полное удаление железы (например, радикальная простатэктомия, колонэктомия, удаление или трансплантация легкого и подобные.

Некоторые варианты осуществления направлены на способы снижения заболеваемости многоочаговым раком, снижения степени многоочагового рака и уменьшения прогрессирования (ухудшения) многоочагового рака у млекопитающих с низкой степенью или низким риском многоочагового рака (т.е. рака предстательной железы, имеющего оценку Глисона ≤6) путем введения млекопитающему терапевтически эффективного количества композиции, содержащей, по меньшей мере, один фармацевтически активный ингредиент, способный индуцировать некроз локализованной раковой опухоли низкой степени с низким риском. Способ включает введение терапевтически эффективного количества композиции в один раковый очаг (одноочаговую опухоль) и снижение доли млекопитающих, у которых обнаруживается ≥1 нового очага во всем органе или организме.

В некоторых вариантах осуществления, способ включает введение терапевтически эффективного количества FT в один раковый очаг (одноочаговую опухоль) в предстательной железе млекопитающего и снижение доли млекопитающих, демонстрирующих ≥1 нового очага с увеличением степени по Глисону (нового многоочагового с повышением по Глисону) во всей предстательной железе на величину от примерно 40% до примерно 100% по сравнению с активным надзором, при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения или от примерно 30% до примерно 90% по сравнению с активным надзором, при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения или от примерно 5% до примерно 85% по сравнению с активным надзором при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения. Способы также включают введение терапевтически эффективного количества композиции в единичные раковые очаги (одноочаговые опухоли) в предстательной железе млекопитающего и снижение доли млекопитающих, демонстрирующих ≥1 нового очага во всей предстательной железе с повышением первичного типа степени по Глисону (нового многоочагового с первичным типом по Глисону ≥4) на величину от примерно 40% до примерно 100% по сравнению с активным надзором, при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения или от примерно 30% до примерно 100% по сравнению с активным надзором, при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения или от примерно 20% до примерно 100% по сравнению с активным надзором при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения.

Композиции могут быть введены внутримышечно, перорально, внутривенно, внутрибрюшинно, интрацеребрально (интрапаренхимально), интрацеребровентрикулярно, интратуморально, внутриочагово, интрадермально, подоболочечно, интраназально, внутриглазно, внутриартериально, местно, чрескожно, с помощью аэрозоля, инфузии, болюсной инъекции, устройства для имплантации, системы замедленного высвобождения и т. д.

В другом варианте осуществления, композиция включает терапевтически эффективное количество FT, которое вводят в количестве от примерно 2,0 мг до примерно 20 мг.

В другом варианте осуществления, способ включает введение терапевтически эффективного количества FT в один раковый очаг (одноочаговую опухоль) в предстательной железе млекопитающего и снижение доли млекопитающих, проходящих обычное лечение рака (хирургическое, радиационное или химиотерапевтическое), и демонстрирующих ≥1 нового очага во всей предстательной железе с повышением степени по Глисону (новый многоочаговый с повышением по Глисону) на величину от примерно 50% до примерно 100% по сравнению с активным надзором, при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения или от примерно 40% до примерно 90% по сравнению с активным надзором, при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения или от примерно 35% до примерно 8,5% по сравнению с активным надзором при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения. Способы также включают введение терапевтически эффективного количества FT в единичный раковый очаг (одноочаговую опухоль) в предстательной железе млекопитающего и снижение доли млекопитающих, получающих традиционное лечение рака (хирургическое, радиационное или химиотерапевтическое) и демонстрирующих ≥1 нового очага во всей предстательной железе с увеличением первичного типа степени по Глисону (новый многоочаговый с первичным типом по Глисону ≥4) на величину от примерно 70% до примерно 100% по сравнению с активным надзором, при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения или от примерно 60% до примерно 100% по сравнению с активным надзором, при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения или от примерно 50% до примерно 100% по сравнению с активным надзором при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения.

Как предыдущее общее описание, так и последующее подробное описание являются иллюстративными и пояснительными и предназначены для обеспечения дополнительного пояснения заявленных вариантов осуществления. Другие цели, преимущества и особенности будут очевидны специалистам в данной области техники из следующего подробного описания вариантов осуществления.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ

Перед описанием настоящих белков, нуклеотидных последовательностей, пептидов, композиций, активных агентов и т.д. и способов следует понимать, что данное изобретение не ограничивается конкретной описанной методологией, протоколами, клеточными линиями, векторами и реагентами, поскольку они могут варьироваться. Также следует понимать, что используемая в настоящем документе терминология предназначена только для целей описания конкретных вариантов осуществления и не предназначена для ограничения объема настоящих вариантов осуществления, которые будут ограничены только прилагаемой формулой изобретения.

Термины и фразы, используемые в настоящем документе, определяются так, как указано ниже, если не указано иное. В настоящем описании, формы единственного числа «a», «an» и «the» включают ссылку на множественное число, если контекст явно не требует иного. Таким образом, например, ссылка на «клетку-хозяин» включает множество таких клеток-хозяев, и ссылка на «антитело» является ссылкой на одно или несколько антител и их эквивалентов, известных специалистам в данной области, и так далее.

Аминокислоты и аминокислотные остатки, описанные в настоящем документе, могут обозначаться в соответствии с принятым однобуквенным или трехбуквенным кодом, приведенным в таблице ниже.

Таблица 1

Трехбуквенная аминокислота Однобуквенный символ Символ Аланин A Ala Аргинин R Arg Аспарагин N Asn Аспарагиновая Кислота D Asp Цистеин C Cys Глютамин Q Gln Глютаминовая Кислота E Glu Глицин G Gly Гистидин H His Изолейцин I Ile Лейцин L Leu Лизин K Lys Метионин M Met Фенилаланин F Phe Пролин P Pro Серин S Ser Треонин T Thr Триптофан W Trp Тирозин Y Tyr Валин V Val

Выражение «фармацевтически активные ингредиенты, способные индуцировать некроз таких опухолей» означает, например, фексапотид трифлутат (FT), пептид, описываемый аминокислотной последовательностью Ile-Asp-Gln-Gln-Val-Leu-Ser-Arg-Ile-Lys-Leu-Glu-Ile-Lys-Arg-Cys-Leu, Зутига (абиратерон ацетат), Апалутамид, абазитаксел, Касодекс (Бикалутамид), Элигард и Лупрон, (Лейпролид Ацетат), Эрлеада (Апалутамид), Фирмагон (Дегареликс), Флутамид, Гозерелин Ацетат, Джевтана (Кабазитаксел), Митоксантрон Гидрохлорид, Ниландрон (Нилутамид), Провендж (Сипулейцел-T), Сипулейцел-T, Таксотере (Доцетаксел), Ксофиго (Дихлорид Радия 223), Кстанди (Энзалутамид), Золадекс (Гозерелин Ацетат) и их смеси и комбинации. Фексапотид Трифлутат («FT»), используемый в настоящем документе, обозначает 17-mer пептид, имеющий аминокислотную последовательность: Ile-Asp-Gln-Gln-Val-Leu-Ser-Arg-Ile-Lys-Leu-Glu-Ile-Lys-Arg-Cys-Leu (SEQ ID NO. 1). FT описан в патентах США №№ 6,924,266; 7,241,738; 7,317,077; 7,408,021; 7,745,572; 8,067,378; 8,293,703; 8,569,446; и 8,716,247, и публикациях заявок на патент США №№ 2017/0360885; 2017/0020957; 2016/0361380; и 2016/0215031. Описание этих патентов и опубликованных заявок полностью включено в настоящий документ посредством ссылки.

FT представлен:

SEQ ID NO.1: IDQQVLSRIKLEIKRCL или Ile-Asp-Gln-Gln-Val-Leu-Ser-Arg-Ile-Lys-Leu- Glu-Ile-Lys-Arg-Cys-Leu.

Термин «фрагмент» относится к белку или полипептиду, который состоит из непрерывной подпоследовательности аминокислотной последовательности белка или пептида, и включает встречающиеся в природе фрагменты, такие как варианты сплайсинга и фрагменты, возникающие в результате существующей в природе протеазной активности in vivo. Такой фрагмент может быть усечен на амино конце, карбокси конце и/или внутри (например, естественным сплайсингом). Такие фрагменты могут быть получены с или без амино концевого метионина. Термин «фрагмент» включает фрагменты, одинаковые или разные, из одного и того же белка или пептида, с непрерывной аминокислотной последовательностью в общем или нет, соединенные вместе либо прямо, либо через линкер. Специалист в данной области техники сможет выбрать подходящий фрагмент для использования в вариантах осуществления без ненужных экспериментов, используя рекомендации и процедуры, изложенные в настоящем документе.

Термин «вариант» относится к белку или полипептиду, в котором присутствуют одна или несколько аминокислотных замен, делеций и/или вставок по сравнению с аминокислотной последовательностью белка или пептида, и включает встречающиеся в природе аллельные варианты или альтернативные варианты сплайсинга белка или пептида. Термин «вариант» включает замену одной или нескольких аминокислот в пептидной последовательности аналогичной или гомологичной аминокислотой(ами) или отличной аминокислотой(ами). Существует множество шкал, по которым аминокислоты можно классифицировать как аналогичные или гомологичные. (Gunnar von Heijne, Sequence Analysis in Molecular Biology, p. 123-39 (Academic Press, New York, N.Y. 1987.) Предпочтительные варианты включают аланиновые замены в одном или нескольких положениях аминокислот. Другие предпочтительные замены включают консервативные замены, которые оказывают незначительное или не оказывают действие на общий суммарный заряд, полярность или гидрофобность белка. Консервативные замены приведены в таблице 2 ниже.

Таблица 2

Консервативные замены аминокислот

Основные: аргинин
лизин
гистидин Кислотные: глютаминовая кислота
аспарагиновая кислота Не заряженные полярные: глутамин
аспарагин
серин
треонин
тирозин Не полярные: фенилаланин
триптофан
цистеин
глицин
аланин
валин
пралин
метионин
лейцин
изолейцин

В таблице 3 представлена другая схема аминокислотных замен:

Таблица 3

Исходный остаток Замены Ala gly; ser Arg lys Asn gln; his Asp glu Cys ser Gln asn Glu asp Gly ala; pro His asn; gln Ile eu; val Leu ile; val Lys arg; gln; glu Met leu; tyr; ile Phe met; leu; tyr Ser thr Thr ser Trp tyr Tyr trp; phe Val ile; leu

Другие варианты могут состоять из менее консервативных аминокислотных замен, таких как выбор остатков, которые более существенно отличаются по своему влиянию на сохранение (а) структуры полипептидного остова в области замены, например, в виде листовой или спиральной конформации, (b) заряда или гидрофобности молекулы в сайте-мишени или (c) объема боковой цепи. Замены, которые в целом, ожидаемо будут иметь более значительное влияние на функцию, являются заменами, при которых (а) глицин и/или пролин заменены на другую аминокислоту или удалены или вставлены; (b) гидрофильный остаток, например, серил или треонил, заменен на гидрофобный остаток, например, лейцил, изолейцил, фенилаланил, валил или аланил; (c) цистеиновый остаток заменен на любой другой остаток; (d) остаток, имеющий электроположительную боковую цепь, например, лизил, аргинил или гистидил, заменен на остаток, имеющий электроотрицательный заряд, например, глутамил или аспартил; или (e) остаток, имеющий объемную боковую цепь, например, фенилаланин, заменен на остаток, не имеющий такую боковую цепь, например, глицин. Другие варианты включают варианты, предназначенные либо для создания новых сайтов гликозилирования и/или фосфорилирования, либо для удаления существующих сайтов гликозилирования и/или фосфорилирования. Варианты включают, по меньшей мере, одну аминокислотную замену в сайте гликозилирования, сайте протеолитического расщепления и/или цистеиновом остатке. Варианты также включают белки и пептиды с дополнительными аминокислотными остатками до или после аминокислотной последовательности белка или пептида на линкерных пептидах. Например, цистеиновый остаток может быть добавлен как к амино, так и к карбокси концу пептида, чтобы сделать возможной циклизацию пептида путем образования дисульфидной связи. Термин «вариант» также охватывает полипептиды, которые имеют аминокислотную последовательность пептида с, по меньшей мере, одной и вплоть до 25 или более дополнительных аминокислот, фланкирующих либо 3', либо 5' конец пептида.

Термин «производное» относится к химически модифицированному белку или полипептиду, который был химически модифицирован либо естественными процессами, такими как процессинг и другие посттрансляционные модификации, либо методами химической модификации, например, путем добавления одной или нескольких молекул полиэтиленгликоля, сахаров, фосфатов и/или других подобных молекул, где молекула или молекулы не присоединены естественным образом к белкам или пептидам дикого типа. Производные включают соли. Такие химические модификации хорошо описаны в основных текстах и в более подробных монографиях, а также в обширной исследовательской литературе, и они хорошо известны специалистам в данной области техники. Следует понимать, что один и тот же тип модификации может присутствовать в одинаковой или различной степени на нескольких сайтах данного белка или полипептида. Также, данный белок или полипептид может содержать множество типов модификаций. Модификации могут происходить в любом месте белка или полипептида, включая пептидный остов, аминокислотные боковые цепи и амино или карбоксильные концы. Модификации включают, например, ацетилирование, ацилирование, ADP-рибозилирование, амидирование, ковалентное присоединение флавина, ковалентное присоединение группы гема, ковалентное присоединение нуклеотида или производного нуклеотида, ковалентное присоединение липида или производного липида, ковалентное присоединение фосфотидилинозита, поперечное сшивание, циклизацию, образование дисульфидной связи, деметилирование, образование ковалентных поперечных связей, образование цистеина, образование пироглутамата, формилирование, гамма-карбоксилирование, гликозилирование, образование GPI якоря, гидроксилирование, йодирование, метилирование, миристоилирование, окисление, протеолитический процессинг, фосфорилирование, пренилирование, рацемизацию, гликозилирование, присоединение липидов, сульфатирование, гамма-карбоксилирование остатков глутаминовой кислоты, гидроксилирование и ADP-рибозилирование, селеноилирование, сульфатирование, опосредованное транспортной РНК присоединение аминокислот к белкам, такое как аргинилирование и убиквитинирование. См., например, Proteins--Structure And Molecular Properties, 2nd Ed., T. E. Creighton, W. H. Freeman and Company, New York (1993) и Wold, F., "Posttranslational Protein Modifications: Perspectives and Prospects," pgs. 1-12 in Posttranslational Covalent Modification Of Proteins, B. C. Johnson, Ed., Academic Press, New York (1983); Seifter et al., Meth. Enzymol. 182:626-646 (1990) и Rattan et al., "Protein Synthesis: Posttranslational Modifications and Aging," Ann. N.Y. Acad. Sci. 663: 48-62 (1992). Термин «производные» включает химические модификации, в результате которых белок или полипептид становятся разветвленными или циклическими, с или без разветвления. Циклические, разветвленные и кольцевые разветвленные белки или полипептиды могут быть результатом посттрансляционных естественных процессов, и также могут быть получены полностью синтетическими способами.

Термин «гомолог» относится к белку, который, по меньшей мере, на 60 процентов идентичен в своей аминокислотной последовательности пептиду, как определено стандартными методами, которые обычно используются для сравнения сходства положений аминокислот двух полипептидов. Степень сходства или идентичности между двумя белками можно легко вычислить известными способами, включая, но не ограничиваясь ими, описанные в Computational Molecular Biology, Lesk, A. M., ed., Oxford University Press, New York, 1988; Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith, D. W., ed., Academic Press, New York, 1993; Computer Analysis of Sequence Data, Part I, Griffin, A. M., and Griffin, H. G., eds., Humana Press, New Jersey, 1994; Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinje, G., Academic Press, 1987; Sequence Analysis Primer, Gribskov, M. and Devereux, J., eds., M Stockton Press, New York, 1991; и Carillo H. and Lipman, D., SIAM, J. Applied Math., 48:1073 (1988). Предпочтительные способы определения идентичности предназначены для получения наибольшего совпадения между тестируемыми последовательностями. Способы определения идентичности и сходства кодифицированы в общедоступных компьютерных программах.

Предпочтительные компьютерные программные средства, применимые для определения идентичности и сходства между двумя последовательностями, включают, но не ограничены ими, программный пакет GCG (Devereux, J., et al., Nucleic Acids Research, 12(1): 387 (1984)), BLASTP, BLASTN и FASTA, Atschul, S. F. et al., J. Molec. Biol., 215: 403-410 (1990). Программа BLAST X общедоступна в NCBI и других источниках (BLAST Manual, Altschul, S., et al., NCBI NLM NIH Bethesda, Md. 20894; Altschul, S., et al., J. Mol. Biol., 215: 403-410 (1990). В качестве примера, используя компьютерный алгоритм, такой как GAP (Genetic Computer Group, University of Wisconsin, Madison, Wis.), два белка или полипептида, для которых должна быть определена доля идентичности последовательности, могут быть выровнены для оптимального типирования их соответствующих аминокислот («длины совпадения», как определено алгоритмом).

Штраф за открытие гэпа (который рассчитывается как 3-кратное среднее значение диагонали; где «средней диагональю» является среднее значение диагонали используемой матрицы сравнения; «диагональю» является балл или число, присвоенное каждому идеальному аминокислотному совпадению по конкретной матрице сравнения), а также штраф за продление гэпа (который обычно составляет {долю (1/10)}, умноженную на штраф за открытие гэпа), а также матрицу сравнения, такую как PAM 250 или BLOSUM 62, используют в сочетании с алгоритмом. Стандартная матрица сравнения (см. Dayhoff et al. in: Atlas of Protein Sequence and Structure, vol. 5, supp.3 для матрицы сравнения PAM250; см. Henikoff et al., Proc. Natl. Acad. Sci USA, 89:10915-10919 для матрицы сравнения BLOSUM 62) также может использоваться алгоритмом. Затем по алгоритму рассчитывают долю идентичности. Гомологи обычно будут иметь одну или несколько аминокислотных замен, делеций и/или вставок по сравнению со сравниваемым белком или пептидом, в зависимости от обстоятельств.

Термин «слитый белок» относится к белку, в котором один или несколько пептидов рекомбинантно слиты или химически конъюгированы (в том числе ковалентно и не ковалентно) с белком, таким как (но не ограничиваясь ими) антитело или фрагмент антитела, такой как Fab-фрагмент или короткоцепочечный Fv. Термин «слитый белок» также относится к мультимерам (т.е. димерам, тримерам, тетрамерам и более высоким мультимерам) пептидов. Такие мультимеры включают гомомерные мультимеры, содержащие один пептид, гетеромерные мультимеры, содержащие более одного пептида, и гетеромерные мультимеры, содержащие, по меньшей мере, один пептид и, по меньшей мере, один другой белок. Такие мультимеры могут быть результатом гидрофобных, гидрофильных, ионных и/или ковалентных ассоциаций, связей или звеньев, могут быть образованы перекрестными связями с использованием линкерных молекул или могут быть связаны косвенно, например, путем образования липосом.

Термин «пептидный миметик» или «миметик» относится к биологически активным соединениям, которые имитируют биологическую активность пептида или белка, но более не являются пептидными по химической природе, то есть они больше не содержат никаких пептидных связей (то есть, амидных связей между аминокислотами). В настоящем документе, термин «пептидный миметик» используется в более широком смысле и включает молекулы, которые уже не являются полностью пептидными по природе, такие как псевдопептиды, полупептиды и пептоиды. Примеры пептидных миметиков в этом более широком смысле (где часть пептида заменена структурой, лишенной пептидных связей) описаны ниже. Независимо от того, являются ли они полностью или частично не пептидами, пептидные миметики в соответствии с вариантами осуществления обеспечивают пространственное расположение реакционноспособных химических групп, которое близко напоминает трехмерное расположение активных групп в пептиде, на котором основан пептидный миметик. В результате подобной геометрии активного центра, пептидный миметик оказывает действие на биологические системы, аналогичное биологической активности пептида.

Пептидные миметики вариантов осуществления предпочтительно являются по существу аналогичными, как по трехмерной форме, так и по биологической активности, пептидам, описанным в настоящем документе. Примеры способов структурной модификации пептида, известных в данной области техники для создания пептидного миметика, включают инверсию хиральных центров основной цепи, приводящую к структурам D-аминокислотных остатков, которые могут, особенно на N-конце, приводить к повышенной стабильности для протеолитической деградации без отрицательного влияния на активность. Пример приведен в статье «Tritriated D-ala₁-Peptide T Binding», Smith C. S. et al., Drug Development Res., 15, pp. 371-379 (1988). Вторым способом является изменение циклической структуры для обеспечения стабильности, такой как N - C межцепочечные имиды и лактамы (Ede et al. in Smith and Rivier (Eds.) "Peptides: Chemistry and Biology", Escom, Leiden (1991), pp. 268-270). Примером этого являются конформационно ограниченные тимопентин-подобные соединения, такие как описаны в патенте США № 4,457,489 (1985), Goldstein, G. et al., описание которого полностью включено в настоящий документ посредством ссылки. Третий способ заключается в замене пептидных связей в пептиде на псевдопептидные связи, которые придают резистентность к протеолизу.

Описан ряд псевдопептидных связей, которые в целом не влияют на структуру и биологическую активность пептида. Одним примером такого подхода является замена ретро-инверсных псевдопептидных связей («Biologically active retroinverso analogues of thymopentin», Sisto A. et al in Rivier, J. E. and Marshall, G. R. (eds) «Peptides, Chemistry, Structure and Biology», Escom, Leiden (1990), pp. 722-773) and Dalpozzo, et al. (1993), Int. J. Peptide Protein Res., 41:561-566, включены в настоящий документ посредством ссылки). В соответствии с этой модификацией, аминокислотные последовательности пептидов могут быть идентичны последовательностям пептида, описанным выше, за исключением того, что одна или несколько пептидных связей заменены ретро-инверсной псевдопептидной связью. Предпочтительно, заменяется наиболее N-концевая пептидная связь, поскольку такая замена будет придавать резистентность к протеолизу экзопептидазами, действующими на N-конце. Дальнейшие модификации также могут быть сделаны путем замены химических групп аминокислот другими химическими группами аналогичной структуры. Другой подходящей псевдопептидной связью, которая известна как повышающая резистентность к ферментативному расщеплению без потери биологической активности или с небольшой потерей биологической активности, является псевдопептидная связь с восстановленной изостерой (Couder, et al. (1993), Int. J. Peptide Protein Res., 41:181-184, полностью включенной в настоящий документ посредством ссылки).

Таким образом, аминокислотные последовательности этих пептидов могут быть идентичны последовательностям пептида, за исключением того, что одна или несколько пептидных связей заменены изостерной псевдопептидной связью. Предпочтительно, заменяется наиболее N-концевая пептидная связь, поскольку такая замена придаст резистентность к протеолизу экзопептидазами, действующими на N-конце. Синтез пептидов с одной или несколькими восстановленными изостерными псевдопептидными связями известен в данной области техники (Couder, et al. (1993), указано выше). Другие примеры включают введение кетометиленовых или метилсульфидных связей для замены пептидных связей.

Пептоидные производные пептидов представляют собой еще один класс пептидных миметиков, которые сохраняют важные структурные детерминанты биологической активности, но удаляют пептидные связи, тем самым придавая резистентность к протеолизу (Simon, et al., 1992, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:9367-9371, полностью включенной в настоящий документ посредством ссылки). Пептоидами являются олигомеры N-замещенных глицинов. Описан ряд N-алкильных групп, каждая из которых соответствует боковой цепи природной аминокислоты (Simon, et al. (1992), указано выше). Некоторые или все аминокислоты пептидов могут быть заменены N-замещенным глицином, соответствующим замененной аминокислоте.

Термин «пептидный миметик» или «миметик» также включает обратные D-пептиды и энантиомеры, как определено ниже.

Термин «обратный D-пептид» относится к биологически активному белку или пептиду, состоящему из D-аминокислот, расположенных в обратном порядке по сравнению с L-аминокислотной последовательностью пептида. Таким образом, карбокси концевой остаток L-аминокислотного пептида становится амино концом D-аминокислотного пептида и так далее. Например, пептид ETESH становится H_dS_dE_dT_dE_d, где E_d, H_d, S_d и T_d являются D-аминокислотами, соответствующими L-аминокислотам, E, H, S и T соответственно.

Термин «энантиомер» относится к биологически активному белку или пептиду, в котором один или несколько L-аминокислотных остатков в аминокислотной последовательности пептида заменены соответствующими D-аминокислотными остатками.

Используемый в настоящем документе термин «композиция» в широком смысле относится к любой композиции, содержащей указанную пептидную или аминокислотную последовательность и, необязательно, дополнительный активный агент. Композиция может содержать сухой состав, водный раствор или стерильную композицию. Композиции, содержащие пептиды, могут применяться в качестве гибридизационных зондов. Зонды могут храниться в лиофилизированной форме и могут быть связаны со стабилизирующим агентом, таким как углевод. При гибридизации, зонд может быть помещен в водный раствор, содержащий соли, например, NaCl, детергенты, например, додецилсульфат натрия (SDS), и другие компоненты, например, раствор Денхардта, сухое молоко, ДНК спермы лосося и т. д.

Выражение «рак предстательной железы низкой степени» обозначает рак предстательной железы, представляющий биоптат ткани предстательной железы, т.е. единичный очаг или множественные очаги, имеющий наивысшую степень по Глисону ≤6 или 3+3, которая была обнаружена при биопсии. Следует понимать, что процедуры биопсии, при которых часто берут многочисленные образцы из предстательной железы, не являются отбором образца всей железы и, следовательно, могут присутствовать другие очаги, которые не были обнаружены. Выражение «одноочаговый рак предстательной железы низкой степени» означает единичный раковый очаг, имеющий степень по Глисону ≤6 или 3+3. Выражение «прогрессирование рака предстательной железы» обычно обозначает более высокую степень по Глисону в любом отдельном очаге (самая высокая оценка во всех биоптатах, взятых вместе, является оценкой), но также означает большее количество рака в биоптате (т. е. более высокую долю рака в данном очаге биоптата, если он превышает 50%, например или больше очагов, положительных на рак). Например, если пациент в какой-то момент времени переходит от одного положительного образца пробы, имеющего 5% опухоли, к более позднему моменту времени, имеющему 5 проб, каждая из которых имеет опухоль 40% (все с одинаковой степенью по Глисону), это будет считаться прогрессированием, хотя это не будет «прогрессированием степени по Глисону». С другой стороны, «прогрессирование степени по Глисону» будет иметь место, если пациент перешел от 4 проб с оценкой 6, каждая с 40% опухолью, и затем впоследствии имел только одну положительную пробу с 5% опухолью, но со степенью по Глисону 7, тогда это прогрессирование будет считаться «прогрессированием степени по Глисону».

Говоря о «биопсии», специалисты в данной области техники поймут, что типовая биопсия состоит из нескольких «квадрантных» образцов, как правило, по меньшей мере 10 или 12, из всех областей железы (левой и правой; верха, середины и низа для каждой; медиальная и латеральная для каждой, и переход L и R), что равняется 14 зонам. Поэтому ссылка на «биопсию» или «биоптат» означает 10-15 биопсий одновременно, о каждой из которых сообщается отдельно.

В данном описании выражение «многоочаговый рак» обозначает один или несколько раков, выбранных из рака предстательной железы, плоскоклеточного рака головы и шеи (HNSCC), плоскоклеточного рака кожи (SCC кожи), рака молочной железы, аденокарциномы и SCC легкого, рака пищевода, рака желудка, рака толстой кишки, рака мочевого пузыря, рака шейки матки, меланомы, рака головного мозга, рака поджелудочной железы, рака яичников, рака костного мозга и лейкоза. В данном описании, термин «профилактика» или его варианты не обязательно означают полную профилактику во всех случаях, но вместо этого относятся к профилактике развития или заболеваемости многоочаговым раком по сравнению с контролем, таким как активный надзор. Например, предположим, что у 60% группы пациентов с одноочаговым раком или раком низкой степени с низким риском развивается многоочаговый рак без лечения (или лечения с контролем) в течение 36 месяцев, но только у 20% развивается многоочаговый рак в течение 36 месяцев при лечении в соответствии с вариантами осуществления. Таким образом, лечение, описанное в настоящем документе, будет эффективным для профилактики развития многоочагового рака у большого числа пациентов, у которых в противном случае развился бы многоочаговый рак, если бы его не лечили в соответствии с вариантами осуществления.

В варианте осуществления, в котором дополнительный активный агент используется вместе с композицией, выражение «активный агент» используется для обозначения любого агента, способного удалять нежелательную клеточную пролиферацию и/или рост ткани. Подходящие активные агенты могут включать, но не ограничиены ими: (i) противораковые активные агенты (такие как алкилирующие агенты, ингибиторы топоизомеразы I, ингибиторы топоизомеразы II, антиметаболиты РНК/ДНК и антимитотические агенты); (ii) активные агенты для лечения доброкачественных новообразований, такие как активные агенты против угрей и бородавок; (iii) антиандрогенные соединения (ацетат ципротерона (1α,2β-метилен-6-хлор-17α-ацетокси-6-дегидропрогестерон), тамоксифен, ингибиторы ароматазы); (iv) блокаторы альфа1-адренергического рецептора (тамсулозин, теразозин, доксазозин, празозин, буназозин, индорамин, альфулзозин, силодозин); (v) ингибиторы 5 α-редуктазы (финастерид, дутастерид); (vi) ингибиторы фосфодиэстеразы 5 типа (PDE5) (тадалафил) и их комбинации.

Некоторые варианты осуществления относятся к способам введения в локализованную раковую опухоль предстательной железы низкой степени с низким риском композиции, содержащей, по меньшей мере, один фармацевтически активный ингредиент, способный индуцировать некроз локализованной раковой опухоли предстательной железы низкой степени с низким рискома, и снижение заболеваемости раком предстательной железы, снижение степени рака предстательной железы и уменьшение прогрессирования рака предстательной железы (ухудшения) во всей предстательной железе, где была локализована и лечилась первоначальная одноочаговая опухоль. Подходящие фармацевтически активные ингредиенты, способные индуцировать некроз таких опухолей, включают, например, фексапотид трифлутат (FT), пептид, описываемый аминокислотной последовательностью Ile-Asp-Gln-Gln-Val-Leu-Ser-Arg-Ile-Lys-Leu-Glu-Ile-Lys-Arg-Cys-Leu, Зутига (абиратерон ацетат), Апалутамид, абазитаксел, Касодекс (Бикалутамид), Элигард и Лупрон, (Лейпролид Ацетат), Эрлеада (Апалутамид), Фирмагон (Дегареликс), Флутамид, Гозерелин Ацетат, Джевтана (Кабазитаксел), Митоксантрона Гидрохлорид, Ниландрон (Нилутамид), Провендж (Сипулейцел-T), Сипулейцел-T, Таксотере (Доцетаксел), Ксофиго (Дихлорид Радия 223), Кстанди (Энзалутамид), Золадекс (Гозерелин Ацетат) и их смеси и комбинации. В одном варианте осуществления, композиции вводят более одного раза. Таким образом, варианты осуществления представляют способ снижения заболеваемости, степени и прогрессирования рака предстательной железы не инвазивным способом путем введения композиций млекопитающим, которых обычно не подвергают лечению. Общепризнанно, что млекопитающие с одноочаговым или многоочаговым раком предстательной железы низкой степени со степенью по Глисону ≤6 подвергают активному надзору (AS) или не лечат. См., например, Ahmed, et al., “Do Low-Grade and Low-Volume Prostate Cancers Bear the Hallmarks of Malignancy,” www.thelancet.com/oncology, Vol. 13, pp e509-e517 (2012).

Изобретатель неожиданно обнаружил, что введение таких композиций в один очаг многоочагового рака значительно снижает заболеваемость многоочаговым раком, степень рака и прогрессирование рака во всем органе или организме. Таким образом, способы по вариантам осуществления представляют не инвазивный способ уменьшения многоочагового рака по сравнению с удалением или трансплантацией органов или даже очаговой абляцией, иссечением, химиотерапией или радиацией. Даже активный надзор требует многократных и повторных биопсий предстательной железы и оценки, и ложится большим бременем на систему здравоохранения. Соответственно, способы, описанные в настоящем документе, полезны для замедления заболеваемости, возникновения и прогрессирования многоочагового рака не инвазивным способом.

Что касается рака предстательной железы, то, в отличие от опубликованной литературы, млекопитающие, получавшие лечение композициями по настоящему изобретению, демонстрировали резкое снижение заболеваемости многоочаговым раком предстательной железы, резкое снижение увеличения многоочаговой степени по Глисону и резкое уменьшение прогрессирования многоочагового рака предстательной железы во всей предстательной железе. Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить многоочаговый рак всей предстательной железы с повышением по Глисону (пациенты с ≥1 новым очагом во всей предстательной железе с повышенной степенью по Глисону) по сравнению с контрольными группами активного надзора при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения, на величину от примерно 40% до примерно 100% или от примерно 50% до примерно 90% или от примерно 50% до примерно 80% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить многоочаговый рак всей предстательной железы с повышением по Глисону по сравнению с контрольными группами активного надзора при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения, на величину от примерно 30% до примерно 90% или от примерно 45% до около 90% или от около 47% до около 80% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить многоочаговый рак всей предстательной железы с повышением по Глисону по сравнению с контрольными группами активного надзора при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения на величину от примерно 5% до примерно 85% или от примерно 10% до около 70% или от около 12% до около 65% или любое значение между ними.

Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить многоочаговый рак всей предстательной железы с первичный типом оценки степени по Глисону ≥4 (пациенты с ≥1 новым очагом во всей предстательной железе с увеличением первичного типа степени по Глисону) по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения, на величину от примерно 40% до примерно 100% или от примерно 70% до примерно 100% или от примерно 80% до примерно 100% или на любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить многоочаговый рак всей предстательной железы с первичным типом степени по Глисону ≥4 по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения, на величину от примерно 30% до примерно 100% или от примерно 70% до примерно 100% или от примерно 80% до примерно 100% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить многоочаговый рак всей предстательной железы с первичным типом степени по Глисону ≥4 по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения, на величину от 20% до примерно 100% или примерно от 50% до примерно 100% или от примерно 60% до примерно 100% или любое значение между ними.

Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить многоочаговый рак предстательной железы в доле (или половине предстательной железы), в которой очаги изначально лечили с повышением по Глисону (пациенты с ≥1 новым очагом в обработанной доле или половине предстательной железы с повышенной степень. по Глисону), по сравнению с контрольными группами активного наблюдения при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения, на величину от примерно 40% до примерно 100% или от примерно 50% до примерно 90% или от примерно 60% до примерно 80% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить многоочаговый рак половины предстательной железы с повышением по Глисону, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения на величину от примерно 50% до примерно 90% или примерно на 50%. до примерно 85% или от примерно 50% до примерно 80% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить многоочаговый рак половины предстательной железы с повышением по Глисону, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения, на величину от около 15% до около 80% или от около 15% до примерно 75% или от примерно 16% до примерно 72% или любое значение между ними.

Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить многоочаговый рак предстательной железы в доле (или половине предстательной железы), в которой очаги изначально лечили с первичной типом по Глисону ≥4 (пациенты с ≥1 новым очагом в обработанной доле или половине предстательной железы с увеличением первичного типа степени по Глисону) по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения, на величину от примерно 50% до примерно 100% или от примерно 70% до примерно 100% или от примерно 75% до примерно 100% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить многоочаговый рак половины предстательной железы с первичным типом по Глисону ≥4 по сравнению с контрольными группами активного надзора при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения, на величину от примерно 45% до примерно 100% или от примерно 70% до примерно 100% или от примерно 75% до примерно 100% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить многоочаговый рак половины предстательной железы с повышением по Глисону (пациенты с ≥1 новым очагом во всей предстательной железе с повышенной степенью по Глисону) по сравнению с контрольными группами активного надзора при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения, на величину от 45% до примерно 100% или от примерно 60% до примерно 100% или от примерно 70% до примерно 100% или любое значение между ними.

Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю млекопитающих, проходящих обычное лечение рака (хирургическое вмешательство, радиационную терапию или химиотерапию), и демонстрирующих ≥1 нового очага во всей предстательной железе с увеличением степени по Глисону (лечение рака с новым многоочаговым с повышением по Глисону), по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения, на величину от примерно 50% до примерно 100% или от примерно 55% до примерно 90% или от примерно 60% до примерно 80% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить лечение рака с новым многоочаговым с повышением по Глисону во всей предстательной железе, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения, на величину от примерно 40% до примерно 90% или от примерно 45% до примерно 90% или от примерно 50% до примерно 80% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить лечение рака с новым многоочаговым с повышением по Глисону во всей предстательной железе, по сравнению с контрольными группами активного наблюдения, при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения на величину от примерно 35% до примерно 85% или от примерно 40% до примерно 85% или от примерно 48% до примерно 84% или любое значение между ними.

Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю млекопитающих, проходящих обычное лечение рака (хирургическое вмешательство, радиационную терапию или химиотерапию) и демонстрирующих многоочаговый рак всей предстательной железы с первичным типом степени по Глисону ≥4 (лечение рака с новым многоочаговым и увеличением первичного типа степени по Глисону), по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения, на величину от примерно 70% до примерно 100% или от примерно 70% до примерно 100% или от примерно 80% до примерно 100% или любого значения между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить лечение рака с новым многоочаговым и увеличением первичного типа степени по Глисону, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения, на величину от примерно 60% до примерно 100% или от примерно 70% до примерно 100% или от примерно 80% до примерно 100% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить лечение рака с новым многоочаговым и увеличением первичного типа степени по Глисону, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения на величину от 50% до примерно 100% или от примерно 70% до примерно 100% или от примерно 80% до примерно 100% или любое значение между ними.

Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю млекопитающих, проходящих обычное лечение рака (хирургическое вмешательство, радиационную терапию или химиотерапию), и страдающих многоочаговым раком предстательной железы в доле (или половине предстательной железы), где очаги первоначально подвергались лечению с повышением по Глисону (лечение рака с новым многоочаговым с повышенной степенью по Глисону в половине предстательной железы), по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения, на величину от примерно 40% до примерно 100% или от примерно 50% до около 90% или от около 60% до около 75% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить лечение рака с новым многоочаговым с повышенной степенью по Глисону в половине предстательной железы, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения, на величину от примерно 50% до примерно 90% или от примерно 55% до примерно 75% или от примерно 50% до примерно 80% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить лечение рака с новым многоочаговым с повышенной степенью по Глисону в половине предстательной железы, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения, на величину от примерно 15% до примерно 80% или от примерно 35% до примерно 75% или от примерно 40% до примерно 75% или любое значение между ними.

Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю млекопитающих, проходящих обычное лечение рака (хирургическое вмешательство, радиационную терапию или химиотерапию), и имеющих многоочаговый рак предстательной железы в доле (или половине предстательной железы), в которой очаги первоначально лечили с первичным типом по Глисону ≥4 (лечение рака с новым многоочаговым и увеличением первичного типа степени по Глисону в половине предстательной железы), по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения, на величину от примерно 65% до примерно 100% или от примерно 70% до примерно 100% или от примерно 75% до примерно 100% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить лечение рака с новым многоочаговым и увеличением первичного типа степени по Глисону в половине предстательной железы, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения, на величину примерно от 65% до примерно 100% или от примерно 70% до примерно 100% или от примерно 75% до примерно 100% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может уменьшить лечение рака с новым многоочаговым и увеличением первичного типа степени по Глисону в половине предстательной железы, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения на величину от 60% до около 100% или от около 65% до около 100% или от около 75% до около 100% или любое значение между ними.

Варианты осуществления включают способ лечения млекопитающего, страдающего одноочаговым раком предстательной железы низкой степени, включающий введение один или более раз композиции, содержащей FT, в один очаг рака предстательной железы низкой степени с низким риском, присутствующий в предстательной железе млекопитающего, либо отдельно, либо в сочетании с введением дополнительного активного агента. Способ включает, но не ограничен ими, введение композиции внутримышечно, перорально, внутривенно, внутрибрюшинно, интрацеребрально (интрапаренхимально), интрацеребровентрикулярно, внутриочагово, интраокулярно, внутриартериально, подоболочечно, интратуморально, интраназально, местно, чрескожно, подкожно или интрадермально, либо отдельно, либо конъюгированной с носителем.

Любое млекопитающее может получить пользу от использования изобретения, включая людей, мышей, кроликов, собак, овец и другой домашний скот, любое млекопитающее, леченное или подвергающееся лечению у ветеринара, работника зоопарка или работника заповедника дикой природы. Предпочтительными млекопитающими являются люди, овцы и собаки. В настоящем описании млекопитающие и пациенты используются взаимозаменяемо.

Специалисту в данной области должно быть очевидно, что другие более мелкие фрагменты FT могут быть выбраны так, чтобы эти пептиды обладали такой же или аналогичной биологической активностью. Другие фрагменты FT могут быть выбраны специалистом в данной области техники таким образом, чтобы эти пептиды обладали такой же или аналогичной биологической активностью. Таким образом, термин «FT», используемый в вариантах осуществления, охватывает эти другие фрагменты. Как правило, пептиды по вариантам осуществления содержат, по меньшей мере, 4 аминокислоты, предпочтительно, по меньшей мере, 5 аминокислот, и более предпочтительно, по меньшей мере, 6 аминокислот.

Вариант осуществления также охватывают способы лечения, включающие введение композиции, содержащей FT, которая включает две или несколько последовательностей FT, соединенных вместе, вместе с дополнительным активным агентом. Постольку, поскольку FT обладает желаемой биологической активностью, можно сделать вывод, что две или несколько последовательностей FT также будут обладать желаемой биологической активностью.

FT и его фрагменты, варианты, производные, гомологи, слитые белки и их миметики, охватываемые данным вариантом осуществления, могут быть получены с использованием способов, известных специалистам в данной области техники, таких как технология рекомбинантной ДНК, синтез белка и выделение встречающихся в природе пептидов, белков, вариантов, производных и гомологов. FT и его фрагменты, варианты, производные, гомологи, слитые белки и миметики могут быть получены из других пептидов, белков и их фрагментов, вариантов, производных и гомологов с использованием способов, известных специалистам в данной области техники. Такие способы включают (но не ограничены ими) использование протеаз для расщепления пептида или белка до FT. Любой способ, описанный, например, в патентах США №№ 6,924,266; 7,241,738; 7,317,077; 7,408,021; 7,745,572; 8,067,378; 8,293,703; 8,569,446; и 8,716,247, и публикациях заявок на патент США №№ 2017/0360885; 2017/0020957; 2016/0361380; и 2016/0215031, может применяться для получения описанного в настоящем документе FT пептида. Описания этих патентных документов полностью включены в настоящее описание посредством ссылки.

Дополнительным активным агентом, если он используется в дополнение к одному или нескольким фармацевтически активным ингредиентам, может быть один или несколько активных агентов, выбранных из (i) противораковых активных агентов (таких как алкилирующие агенты, ингибиторы топоизомеразы I, ингибиторы топоизомеразы II, антиметаболиты РНК/ДНК и антимитотические агенты); (ii) активных агентов для лечения доброкачественных новообразований, таких как активные агенты против угрей и бородавок (салициловая кислота); (iii) антиандрогенных соединений (ацетата ципротерона (1α,2β-метилен-6-хлор-17α-ацетокси-6-дегидропрогестерона)) тамоксифена, ингибиторов ароматазы); (iv) блокаторов альфа1-адренергических рецепторов (тамсулозина, теразозина, доксазозина, празозина, буназозина, индорамина, альфулзозина, силодозина); (v) ингибиторов 5 α-редуктазы (финастерида, дутастерида); (vi) ингибиторов фосфодиэстеразы типа 5 (PDE5) (тадалафила) и их комбинаций. Предпочтительно, дополнительным агентом является противораковый агент и, в частности, агент, полезный для лечения рака предстательной железы.

Описанные в настоящем документе терапевтические композиции могут содержать некоторое количество фармацевтически активного ингредиента в смеси с фармацевтически приемлемым носителем. В некоторых альтернативных вариантах осуществления, дополнительный активный агент можно вводить в одной композиции с фармацевтически активным ингредиентом, и в других вариантах осуществления, композицию, содержащую фармацевтически активный ингредиент, вводят в виде инъекции, тогда как дополнительный активный агент вводят в пероральной форме (гель, капсула, таблетка, жидкость и т.д.). Материалом-носителем может быть вода для инъекций, предпочтительно дополненная другими материалами, обычно используемыми в растворах для введения млекопитающим. Как правило, когда фармацевтически активным ингредиентом является FT, его вводят в форме композиции, содержащей очищенный пептид FT (или химически синтезированный пептид FT) в сочетании с одним или несколькими физиологически приемлемыми носителями, эксципиентами или разбавителями. Типовыми подходящими носителями являются нейтральный забуференный физиологический раствор или физиологический раствор, смешанный с сывороточным альбумином. Предпочтительно, продукт составляют в виде лиофилизата с использованием соответствующих эксципиентов (например, сахарозы). Другие стандартные носители, разбавители и эксципиенты могут быть включены по желанию. Композиции по вариантам осуществления также могут содержать буферы, известные специалистам в данной области, с соответствующим диапазоном значений рН, включая Tris буфер с рН примерно 7,0-8,5 или ацетатный буфер с рН примерно 4,0-5,5, который может дополнительно включать сорбит или его подходящий заменитель.

Твердые дозированные формы для перорального введения включают, но не ограничены ими, капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых дозированных формах, дополнительный активный агент и/или фармацевтически активный ингредиент можно смешивать, по меньшей мере, с одним из следующих: (а) одним или несколькими инертными эксципиентами (или носителями), такими как цитрат натрия или дикальцийфосфат; (b) наполнителями или разбавителями, такие как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и кремниевая кислота; (c) связующими агентами, такими как карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и аравийская камедь; (d) увлажнителями, такими как глицерин; (e) разрыхлителями, такими как агар-агар, карбонат кальция, картофельный или тапиоковый крахмал, альгиновая кислота, некоторые комплексные силикаты и карбонат натрия; (f) замедлителями растворения, такими как парафин; (g) ускорителями абсорбции, такими как соединения четвертичного аммония; (h) смачивающими агентами, такими как ацетиловый спирт и моностеарат глицерина; (i) адсорбентами, такими как каолин и бентонит; и (j) смазывающими агентами, такими как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия или их смеси. Для капсул, таблеток и пилюль, дозированные формы могут также содержать буферные агенты.

Жидкие дозированные формы для перорального введения включают фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. В дополнение к активным соединениям, жидкие дозированные формы могут содержать инертные разбавители, обычно используемые в данной области техники, такие как вода или другие растворители, солюбилизирующие агенты и эмульгаторы. Примерами эмульгаторов являются этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла, такие как хлопковое масло, арахисовое масло, масло зародышей кукурузы, оливковое масло, касторовое масло и кунжутное масло, глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли, сложные эфиры жирных кислот и сорбитана или смеси этих веществ, и подобные.

Помимо таких инертных разбавителей, композиция также может включать адъюванты, такие как смачивающие агенты, эмульгирующие и суспендирующие агенты, подсластители, ароматизаторы и отдушки.

Фактические уровни дозировки активных ингредиентов в композициях вариантов осуществления могут варьироваться для получения количества фармацевтически активного ингредиента и дополнительного активного агента, эффективного для получения желаемого терапевтического ответа на конкретную композицию. Таким образом, выбранный уровень дозировки зависит от желаемого терапевтического эффекта, пути введения, желаемой продолжительности лечения и других факторов.

Млекопитающим, включая человека, эффективные количества можно вводить в зависимости от площади поверхности тела. Взаимосвязь дозировок для животных различных размеров, видов и человека (в пересчете на мг/м² поверхности тела) описана E. J. Freireich et al., Cancer Chemother. Rep., 50 (4):219 (1966). Площадь поверхности тела можно приблизительно определить по росту и весу индивидуума (см., например, Scientific Tables, Geigy Pharmaceuticals, Ardsley, N.Y. pp. 537-538 (1970)).

Следует понимать, что конкретный уровень дозы для любого конкретного пациента будет зависеть от множества факторов, включая массу тела, общее состояние здоровья, пол, диету, время и способ введения, активность вводимого лекарственного средства, скорость всасывания и выведения, сочетание с другими лекарственными средствами и тяжесть конкретного заболевания, которое лечат.

Способ введения композиции, содержащей фармацевтически активный ингредиент согласно вариантам осуществления, включает, но не ограничен ими, введение композиций внутримышечно, перорально, внутривенно, внутрибрюшинно, интрацеребрально (интрапаренхимально), интрацеребровентрикулярно, интратуморально, внутриочагово, внутрикожно, интратекально, интраназально, внутриглазно, внутриартериально, местно, трансректально, трансперитонеально, чрескожно, через аэрозоль, инфузией, болюсной инъекцией, имплантацией устройства, системой с замедленным высвобождением и т.д. Можно использовать любой способ введения, описанный, например, в патентах США №№ 6,924,266; 7,241,738; 7,317,077; 7,408,021; 7,745,572; 8,067,378; 8,293,703; 8,569,446; и 8,716,247, и публикациях заявок на патент США №№ 2017/0360885; 2017/0020957; 2016/0361380; и 2016/0215031.

Использование FT является предпочтительным вариантом осуществления. FT является новым молекулярным веществом, которое in vitro стимулирует каспазные пути (активация каспаз 7, 8 и 10, доменов рекрутинга каспаз 6, 11 и 14 и DIABLO), пути фактора некроза опухоли (активацию TNF1, TNFSF6, TNFSF8, TNFSF9, лигандов CD70 и рецепторов TNFRSF19L, TNFRSF25, TRAF2, TRAF3, TRAF4, TRAF6) и пути BCL (активацию BIK, HRK, BCL2L10 и BCL3) в клетках железистого эпителия предстательной железы, на основе данных генетического массива культуры тканей. FT селективно вызывает потерю целостности клеточной мембраны, остановку митохондриального метаболизма, истощение РНК, лизис и агрегацию ДНК, и фрагментацию и потерю клеток. Процесс апоптоза приводит к типовым ультраструктурным прогрессивным изменениям разрыва и набухания мембраны, прогрессивно углубляющихся ядерных инвагинаций с возможным образованием мембранных пузырьков и гибелью клеток, и фрагментацией в апоптотические тельца. Гистологически, типовые апоптотические изменения с положительным иммуногистохимическим окрашиванием маркеров апоптоза обнаруживаются во всех областях инъекций в течение нескольких недель после лечения.

FT в значительных масштабах был протестирован у пациентов с BPH. Соединение и плацебо контроли вводят трансректальным путем в ходе более чем 1700 процедур в 9 клинических испытаниях на людях. В этих крупных долгосрочных клинических испытаниях у мужчин с BPH, FT вводят в концентрации 0,25 мг/мл (2,5 мг FT, в размере введения примерно 15-20% железы по объему). См., например, Shore, et al., “The potential for NX-1207 in benign prostatic hyperplasia: an update for clinicians,” Ther Adv. Chronic Dis., 2(6), pp. 377-383 (2011). Поэтому предпочтительно, чтобы композиции, содержащие FT, содержат, по меньшей мере, 2,5 мг FT и могую вводиться в количестве до 25 мг FT за одно введение. В другом варианте осуществления, FT вводят в количестве в диапазоне от примерно 2,5 мг до примерно 20 мг или от примерно 2,5 мг до примерно 15 мг. В одном варианте осуществления, FT вводят в количестве 15 мг.

Следующие примеры представлены для иллюстрации настоящих вариантов осуществления. Однако следует понимать, что варианты осуществления не должны ограничиваться конкретными условиями или деталями, описанными в этих примерах. Во всем описании, любые и все ссылки на общедоступный документ, включая патент США, специально включены посредством ссылки. В частности, варианты осуществления прямо включают посредством ссылки примеры, содержащиеся в патентах США №№ 66,924,266; 7,241,738; 7,317,077; 7,408,021; 7,745,572; 8,067,378; 8,293,703; 8,569,446; и 8,716,247, и публикациях заявок на патент США №№ 2017/0360885; 2017/0020957; 2016/0361380; и 2016/0215031, каждая из которых раскрывает, что определенные пептиды, указанные в ней, являются эффективными агентами, вызывающими гибель клеток in vivo в нормальной мышечной ткани, подкожной соединительной ткани, дерме и других тканях грызунов.

Примеры

В серии клинических исследований всего 146 мужчин с раком предстательной железы низкой степени (степень по Глисону ≤6) лечат следующим образом. Пациентов рандомизируют и лечат трансректальной интрапростатической однократной инъекцией композиции, содержащей 2,5 мг FT (n=49) или композиции, содержащей 15 мг FT (n=48) или подвергают контрольному активному надзору (n=49). После первой контрольной биопсии через 45 дней после рандомизации, 18 пациентов в контрольной группе активного надзора переводят на однократное введение композиции, где 10 пациентов получают 2,5 мг FT, а 8 пациентов получают15 мг FT. Пациентов наблюдают в течение 5 лет, включая биопсии на дату начала, через 45 дней, 18, 36 и 48 месяцев и урологическую оценку уровня PSA каждые 6 месяцев. Пациенты с повышением степени по Глисону или выбравшие хирургическое или радиотерапевтическое вмешательство выбывают из исследования и по-прежнему включены в анализ данных. Оценивают долю нормальных биопсий в исходном квадранте фокуса и среднюю степень и объем опухоли; прогрессирование измеряют по клиническим и патологическим результатам, включая степень по Глисону и первичный тип степени по Глисону во всей взятой пробе предстательной железы, а также в обработанной доле предстательной железы. Оценивают вмешательства, связанные с повышением степени по Глисону, а также общую частоту любого традиционного хирургического вмешательства (например, операции, радиационной терапии и/или химиотерапии).

Пример 1

В этом примере оценивают долю пациентов, у которых наблюдается более одного нового очага (т. е. переход от одноочагового к многоочаговому) во всей предстательной железе, где новый очаг имеет увеличение общей оценки степени по Глисону («новый мультифокальный с увеличением по Глисону»). Данные в таблицах ниже для периодов наблюдения представляют долю пациентов, у которых наблюдалось прогрессирование или ухудшение. Результаты представлены в Таблице 3 ниже:

Таблица 3

Лечение Время от лечения и % улучшения ≤18 мес. % улучш. ≤36 мес. % улучш. ≤48 мес. % улучш. FT 15 мг 5,7 (р=0,025) 79,5 9,1 (р=0,13) 79,2 20 (р=0,039) 65 FT 2,5 мг 13,5 51,4 23,1 47,2 50 12,4 Объединенный FT 9,7 (р=0,044) 65,1 16,7 (р=0,027) 61,9 35,5 37,8 Контроль 27,8 43,8 57,1

Результаты из примера 1 показывают, что варианты осуществления могут снизить долю пациентов, у которых был выявлен новый многоочаговый рак всей предстательной железы с повышением по Глисону, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения, на величину от примерно 40% до примерно 100% или от примерно 50% до примерно 90% или от примерно 50% до примерно 80% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю пациентов, у которых был выявлен новый многоочаговый рак всей предстательной железы с увеличением по Глисону, по сравнению с контрольными группами активного надзора при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения на величину от примерно 30% до примерно 90%. или от примерно 45% до примерно 90% или от примерно 47% до примерно 80% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю пациентов, у которых был выявлен новый многоочаговый рак всей предстательной железы с повышением по Глисону, по сравнению с контрольными группами активного надзора при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения, на величину от примерно 5% до примерно 85% или от примерно 10% до примерно 70% или от примерно 12% до примерно 65% или любое значение между ними.

Пример 2

В этом примере оценивают долю пациентов, у которых наблюдалось более одного нового очага (т. е. переход от одноочагового к многоочаговому) во всей предстательной железе, в котором новый очаг имел увеличение первичного типа по Глисону ≥4 («новый многоочаговый с увеличением первичного типа по Глисону»). Результаты показаны в Таблице 4 ниже:

Таблица 4

Лечение Время от лечения и % улучшения ≤18 мес. % улучш. ≤36 мес. % улучш. ≤48 мес. % улучш. FT 15 мг 2,9 82,6 4,5 82 13,3 62,7 FT 2,5 мг 0 (р=0,17) 100 0 (р=0,074) 100 0 (р=0,009) 100 Объединенный FT 1,4 (р=0,049) 91,6 2,1 (р=0,0031) 91,6 6,5 (р=0,012) 81,8 Контроль 16,7 25 35,7

Результаты из примера 2 показывают, что варианты осуществления могут снизить долю пациентов, у которых был обнаружен новый многоочаговый рак всей предстательной железы с увеличением первичного типа по Глисону, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения, на величину от примерно 40% до примерно 100% или от примерно 70% до примерно 100% или от примерно 80% до примерно 100% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю пациентов с многоочаговым раком всей предстательной железы с увеличением первичного типа по Глисону, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения на величину от примерно 30% до примерно 100% или от примерно 70% до примерно 100% или от примерно 80% до примерно 100% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю пациентов, у которых был многоочаговый рак всей предстательной железы с увеличением первичного типа степени по Глисону, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения, на величину от 20% до примерно 100% или от примерно 50% до примерно 100% или от примерно 60% до примерно 100% или любое значение между ними.

Пример 3

В этом примере оценивают долю пациентов, у которых наблюдалось более одного нового очага (т. е. переход от одноочагового к многоочаговому) в половине предстательной железы, где лечили первоначальную одноочаговую опухоль, где новый очаг имел увеличение общей оценки степени по Глисону («многоочаговый рак половины предстательной железы с повышением по Глисону»). Результаты показаны в Таблице 5 ниже:

Таблица 5

Лечение Время от лечения и % улучшения ≤18 мес. % улучш. ≤36 мес. % улучш. ≤48 мес. % улучш. FT 15 мг 5,7 69,7 9,1 (р=0,049) 74,5 13,3 70,8 FT 2,5 мг 8,6 54,26 16,7 53,2 42,9 5,7 Объединенный FT 7,1 62,2 13,0 (р=0,0549) 63,6 27,6 39,3 Контроль 18,8 35,7 45,5

Результаты из примера 3 показывают, что варианты осуществления могут снизить долю пациентов с многоочаговым раком предстательной железы в доле (или половине предстательной железы), где очаги изначально лечат с повышением по Глисону (пациенты с ≥1 новым очагом в обработанной доле или половине предстательной железы с повышенной степенью по Глисону) по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения, на величину от примерно 40% до примерно 100% или от примерно 50% до примерно 90% или от примерно 60% до примерно 80% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю пациентов с многоочаговым раком половине предстательной железы с повышением по Глисону по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения на величину от примерно 50% до примерно 90% или от примерно 50% до примерно 85% или от примерно 50% до примерно 80% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю пациентов с многоочаговым раком половине предстательной железы с повышением по Глисону по сравнению с контрольными группами активного надзора при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения на величину от примерно 15% до примерно 80% или от примерно 15% до примерно 75% или от примерно 16% до примерно 72% или любое значение между ними.

Пример 4

В этом примере оценивают долю пациентов, у которых наблюдалось более одного нового очага (т.е. переход от одноочагового к многоочаговому) в половине предстательной железы, где лечат первоначальную одноочаговую опухоль, в которой новый очаг имеет увеличение первичного типа степени по Глисону ≥4 («многоочаговый рак половины предстательной железы с увеличением первичного типа по Глисону»). Результаты показаны в Таблице 6 ниже:

Таблица 6

Лечение Время от лечения и % улучшения ≤18 мес. % улучш. ≤36 мес. % улучш. ≤48 мес. % улучш. FT 15 мг 2,9 76,8 4,5 79 6,7 75,5 FT 2,5 мг 0 (р=0,033) 100 0 (р=0,018) 100 0 (р=0,037) 100 Объединенный FT 1,4 (р=0,03) 88,8 2,2 (р=0,011) 89,7 3,4 (р=0,025) 87,5 Контроль 12,5 21,4 27,3

Результаты из примера 4 показывают, что варианты осуществления могут снизить долю пациентов, у которых был мультифокальный рак половины предстательной железы с увеличением первичного типа по Глисону, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения, на величину от примерно 50% до примерно 100% или от примерно 70% до примерно 100% или от примерно 75% до примерно 100% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю пациентов, у которых был многоочаговый рак половины предстательной железы с увеличением первичного типа по Глисону, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения, на величину от около 45% до около 100% или от около 70% до около 100% или от около 75% до около 100% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю пациентов, у которых был многоочаговый рак половины предстательной железы с увеличением первичного типа по Глисону, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения, на величину от 45% до примерно 100% или от примерно 60% до примерно 100% или от примерно 70% до примерно 100% или любое значение между ними.

Пример 5

В этом примере оценивают долю пациентов, у которых было традиционное лечение рака (например, хирургическое вмешательство, радиационная терапия и/или химиотерапия), и у которых было выявлено более одного нового очага (т.е. переход от одноочагового к многоочаговому) во всей предстательной железе, где новый фокус имел увеличение общей оценки степени по Глисону («лечение рака с новым многоочаговым с повышением по Глисону»). Результаты показаны в Таблице 7 ниже:

Таблица 7

Лечение Время от лечения и % улучшения ≤18 мес. % улучш. ≤36 мес. % улучш. ≤48 мес. % улучш. FT 15 мг 5,1 (р= 0,02) 80,6 7,1 (р=0,17) 79,9 8,3 (р=0,003) 83,4 FT 2,5 мг 9,8 62,7 16,7 52,7 26 48 Объединенный FT 7,5 (р=0,02) 71,5 12,1 (р=0,026) 65,7 17 (р=0,009) 66 Контроль 26,3 35,3 50

Результаты из примера 5 показывают, что варианты осуществления могут снизить долю пациентов, которым проводилось лечение рака с новым многоочаговым с повышением по Глисону во всей предстательной железе, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения, на величину от примерно 50% до примерно 100% или от примерно 55% до примерно 90% или от примерно 60% до примерно 80% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю пациентов, у которых проводилось лечение рака с новым многоочаговым с повышением уровня по Глисону во всей предстательной железе, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения, на величину от примерно 40% до примерно 90% или от примерно 45% до примерно 90% или от примерно 50% до примерно 80% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю пациентов, у которых проводилось лечение рака с новым многоочаговым с повышением по Глисону во всей предстательной железе, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения, на величину примерно от 35% до примерно 85% или от примерно 40% до примерно 85% или от примерно 48% до примерно 84% или любое значение между ними.

Пример 6

В этом примере оценивают долю пациентов, которым проводилось традиционное лечение рака (например, хирургическое вмешательство, радиационная терапия и/или химиотерапия), и у которых было выявлено более одного нового очага (т.е. переход от одноочагового к многоочаговому) во всей предстательной железе, где новый фокус имел увеличение первичного типа степени по Глисону ≥4 («лечение рака с новым многоочаговым и увеличением первичного типа степени по Глисону»). Результаты показаны в Таблице 8 ниже:

Таблица 8

Лечение Время от лечения и % улучшения ≤18 мес. % улучш. ≤36 мес. % улучш. ≤48 мес. % улучш. FT 15 мг 2,6 (р=0,06) 83,5 3,6 (р=0,04) 84,7 4,2 (р=0,019) 86,6 FT 2,5 мг 0 (р=0,001) 100 0 (р=0,006) 100 0 (р=0,0040) 100 Объединенный FT 1,3 (р=0,04) 91,8 1,7 (р=0,002) 92,8 2,1 (р=0,001) 93,3 Контроль 15,8 23,5 31,3

Результаты из примера 6 показывают, что варианты осуществления могут снизить долю пациентов, получающих лечение рака с новым многоочаговым и увеличением первичного типа степени по Глисону во всей предстательной железе по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, в течение 18 месяцев после лечения на величину от примерно 70% до примерно 100% или от примерно 75% до примерно 100% или от примерно 80% до примерно 100% или на любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю пациентов, у которых проводилось лечение рака с новым многоочаговым и увеличением первичного типа степени по Глисону во всей предстательной железе по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения на величину от примерно 60% до примерно 100% или от примерно 70% до примерно 100% или от примерно 80% до примерно 100% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю пациентов, у которых проводилось лечение рака с новым многоочаговым и увеличением первичного типа степени по Глисону во всей предстательной железе, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения, на величину от 50% до примерно 100% или от примерно 70% до примерно 100% или от примерно 80% до примерно 100% или любое значение между ними.

Пример 7

В этом примере оценивают долю пациентов, которым проводилось традиционное лечение рака (например, хирургическое вмешательство, радиационная терапия и/или химиотерапия), и которые имели многоочаговый рак предстательной железы в доле (или половине предстательной железы), в которой очаги первоначально лечат с повышением по Глисону (лечение рака с новым многоочаговым с повышенной степенью по Глисону в половине предстательной железы). Результаты показаны в Таблице 9 ниже:

Таблица 9

Лечение Время от лечения и % улучшения ≤18 мес. % улучш. ≤36 мес. % улучш. ≤48 мес. % улучш. FT 15 мг 5,1 67,7 7,1 69,8 8,3 73,5 FT 2,5 мг 4,9 69 10 57,4 17,4 44,4 Объединенный FT 5 68,4 8,6 63,4 12,8 59,1 Контроль 15,8 23,5 31,3

Результаты из примера 7 показывают, что варианты осуществления могут снизить долю пациентов, получающих лечение рака с новым многоочаговым с повышением по Глисону в половине предстательной железы, по сравнению с активным контрольным надзором, при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения, на величину от примерно 40% до примерно 100% или от примерно 50% до примерно 90% или от примерно 60% до примерно 75% или на любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю пациентов, получающих лечение рака с новым мультифокальным с повышением по Глисону в половине предстательной железы, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения, на величину от примерно от 50% до примерно 90% или от примерно 55% до примерно 75% или от примерно 50% до примерно 80% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю пациентов, получающих лечение рака с новым многоочаговым с повышением по Глисону в половине предстательной железы, по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения, на величину от примерно от 15% до примерно 80% или от примерно 35% до примерно 75% или от примерно 40% до примерно 75% или любое значение между ними.

Пример 8

В этом примере оценивают долю пациентов, получавших традиционное лечение рака (хирургическое вмешательство, радиационную терапию или химиотерапию) и страдающих многоочаговым раком предстательной железы в доле (или половине предстательной железы), где очаги изначально лечили с первичным типом по Глисону ≥4. (лечение рака с новым многоочаговым и повышением первичного типа степени по Глисону в половине предстательной железы). Результаты показаны в Таблице 10 ниже:

Таблица 10

Лечение Время от лечения и % улучшения ≤18 мес. % улучш. ≤36 мес. % улучш. ≤48 мес. % улучш. FT 15 мг 2,6 75,2 3,6 79,5 4.2 77,7 FT 2,5 мг 0 (р=0,025) 100 0 (р=0,017) 100 0 (р=0,031) 100 Объединенный FT 1,3 (р=0,034) 87,6 1,7 (р=0,01) 90,3 2,1 (р=0,019) 88,8 Контроль 10,5 17,6 18,8

Результаты из примера 8 показывают, что варианты осуществления могут уменьшить долю пациентов, получающих лечение рака с новым многоочаговым с увеличением первичного типа степени по Глисону в половине предстательной железы, по сравнению с активным контрольным контролем, при измерении, по меньшей мере, через 18 месяцев после лечения, на величину от примерно 65% до примерно 100% или от примерно 70% до примерно 100% или от примерно 75% до примерно 100% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю пациентов, получающих лечение рака с новым многоочаговым и увеличением первичного типа степени по Глисону в половине предстательной железы по сравнению с контрольными группами активного надзора, при измерении, по меньшей мере, через 36 месяцев после лечения на величину от примерно 65% до примерно 100% или от примерно 70% до примерно 100% или от примерно 75% до примерно 100% или любое значение между ними. Способ в соответствии с вариантами осуществления может снизить долю пациентов, получающих лечение рака с новым многоочаговым и увеличением первичного типа степени по Глисону в половине предстательной железы по сравнению с контрольными группами активного надзора при измерении, по меньшей мере, через 48 месяцев после лечения на величину от 60% до примерно 100% или от примерно 65% до примерно 100% или от примерно 75% до примерно 100% или любое значение между ними.

Результаты из приведенных выше примеров иллюстрируют неожиданно превосходный эффект фармацевтически активных ингредиентов и, в частности, FT в снижении заболеваемости многоочаговым раком, снижении степени многоочагового рака и уменьшении прогрессирования (ухудшения) многоочагового рака во всей предстательной железе или в половине предстательной железы, где была локализована и пролечена первоначальная опухоль низкой степени. Специалистам в данной области техники будет очевидно, что в способах и композициях настоящих вариантов осуществления могут быть сделаны различные модификации и вариации без отклонения от сущности или объема вариантов осуществления.

Группа изобретений относится лечению многоочагового рака предстательной железы. Раскрыто применение фексапотида трифлутата (FT) в способе снижения заболеваемости многоочаговым раком, снижения степени рака и уменьшения прогрессирования (ухудшения) рака во всей предстательной железе млекопитающих, страдающих одноочаговым раком предстательной железы, где способ включает выявление млекопитающего с одноочаговой раковой опухолью предстательной железы; и введение млекопитающему композиции, содержащей фексапотида трифлутат (FT), путем инъекции непосредственно в одноочаговую раковую опухоль предстательной железы. Также раскрыт способ снижения заболеваемости многоочаговым раком предстательной железы, снижения степени рака предстательной железы и уменьшения прогрессирования (ухудшения) рака предстательной железы у млекопитающего, с одноочаговой раковой опухолью предстательной железы. Группа изобретений обеспечивает снижение заболеваемости многоочаговым раком, степень рака и прогрессирование рака. 2 н. и 7 з.п. ф-лы, 10 табл., 8 пр.

1. Применение фексапотида трифлутата (FT) в способе снижения заболеваемости многоочаговым раком, снижения степени рака и уменьшения прогрессирования (ухудшения) рака во всей предстательной железе млекопитающих, страдающих одноочаговым раком предстательной железы, где способ включает:

(а) выявление млекопитающего с одноочаговой раковой опухолью предстательной железы; и

(b) введение млекопитающему, указанному в (а) выше, композиции, содержащей фексапотида трифлутат (FT), путем инъекции непосредственно в одноочаговую раковую опухоль предстательной железы.

2. Применение по п.1, где FT присутствует в количестве в диапазоне от 2,5 мг до 20 мг.

3. Применение по п.1, где FT присутствует в количестве в диапазоне от 2,5 мг до 15 мг.

4. Применение по п.1, где FT присутствует в количестве 15 мг.

5. Способ снижения заболеваемости многоочаговым раком предстательной железы, снижения степени рака предстательной железы и уменьшения прогрессирования (ухудшения) рака предстательной железы у млекопитающего, с одноочаговой раковой опухолью предстательной железы, включающий:

введение в одноочаговую раковую опухоль предстательной железы композиции, содержащей терапевтически эффективное количество фексапотида трифлутата (ФТ).

6. Способ по п.5, где композицию вводят путем инъекции непосредственно в одноочаговую раковую опухоль.

7. Способ по п.5, в котором терапевтически эффективное количество FT находится в диапазоне от 2,5 мг до 20 мг.

8. Способ по п.5, в котором терапевтически эффективное количество FT находится в диапазоне от 2,5 мг до 15 мг.

9. Способ по п.5, где терапевтически эффективное количество FT составляет 15 мг.