СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ИСХОДА ТЯЖЕЛОГО ОТРАВЛЕНИЯ ПСИХОАКТИВНЫМИ ВЕЩЕСТВАМИ (ПАВ) Российский патент 2024 года по МПК G01N33/49 G01N33/53 

Изобретение относится к области патофизиологии, иммунологии, нейроиммунологии, лабораторной диагностики и касается способа быстрого прогнозирования развития постгравматических осложнений при тяжелом отравлении психоактивными веществами (ПАВ) у людей в условиях Арктики.

Устойчивое развитие российских арктических территорий возможно лишь в том случае, если наряду с политическими и экономическими вопросами будет обеспечен значительный прогресс в условиях жизни и состоянии здоровья населения. Климатические изменения и рост социально-значимых заболеваний выступают в качестве фактора риска социально-экономического развития Арктики [Ревич Б.А., Харькова Т.Л., Подольная М.А. Динамика смертности и ожидаемой продолжительности жизни населения арктического / приарктического региона России в 1999-2014 годах // Экология человека. - 2017. - № 9. - С. 48-58]. В настоящее время в Российской Федерации остается напряженной эпидемиологическая ситуация, связанная с ростом числа заболеваний социального характера [Белишева Н.К., Петров В.Н. Проблема здоровья населения в свете реализации стратегии развития Арктической зоны Российской Федерации // Труды Кольского научного центра РАН. 2013. № 4. С. 151-173]. Заболевания данной группы представляют угрозу и имеют огромное значение для общества (Постановление Правительства РФ от 01.12.2004 N715). Отдельное внимание в настоящее время требуется для молодых лиц с заболеваниями, связанными с зависимостью употребления психоактивных веществ (Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 24 декабря 2012 г. № 1443н (F10-F19)) [10.1080/10550887.2021.1905589. Starzer М.S.К., Nordentoft М., Rates and predictors of conversion to schizophrenia or bipolar disorder following substance-induced psychosis // American Journal of Psychiatry. 2018, 175 (4). pp.343-350]. На данный момент в литературе широко представлены сведения, в основном характеризующие диагностику, клиническую картину, способы лечения [Зиновьева О.Е., Ващенко Н.В., Мозговая О.Е., Янакаева Т.А., Емельянова А.Ю. Поражение нервной системы при алкогольной болезни. Неврология, нейропсихиатрия, психосоматика. 2019. 11 (2S). С. 83-88; Булатова Р.А. Терапевтические стратегии при синдроме зависимости, вызванном сочетанным употреблением ПАВ: обзор литературных данных. Профилактическая медицина. 2018. №2. С. 61-67], профилактику и способы реабилитации зависимых лиц [Day, А.М., Metrik, J., Spillane, N.S., & Kahler, С.W. Working memory and impulsivity predict marijuana-related problems among frequent users. Drug and Alcohol Dependence. 2013, 131(1-2), pp. 171-174. DOI:10.1016; Hooper, S. R., Woolley, D., De Bellis, M.D. Intellectual, neurocognitive, and academic achievement in abstinent adolescents with cannabis use disorder. Psychopharmacology, 2014, pp. 1467-1477; Meier, M.H., Caspi, A., Ambler, A., Harrington, H., Houts, R., Keefe, R.S. Persistent cannabis users show neuropsychological decline from childhood to midlife. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2012, vol. 109, pp. 2657-2664; Thames, A.D., Arbid, N., Gayegh, P. Cannabis use and neurocognitive functioning in a nonclinical sample of users. Addictive Behaviors, 2014, vol. 39, pp. 994-9994; Tiwari J., Bajpai K., Gupta G., Sharma R., Verma RK., Dua K. Tetrahydrocannabinol: a drug of interest. Panminerva Med, 2018, vol. 60(4), pp.228-230], включая социально- психологическую поддержку семьи, скорейшее восстановление трудоспособности пострадавшего и др. Однако имеющиеся многочисленные исследования практически не содержат иммунологической составляющей. Выяснение характера адаптивного иммунного ответа с поражением мозга токсического генеза тяжелой степени необходимо для профилактики осложнений токсической энцефалопатии, прогноза исхода отравления ПАВ.

Известно, что больные с диагнозом «отравление», в среднем составляют до 1/5 всех экстренно поступающих в стационары. Причем большинство веществ наиболее часто вызывающих отравление, можно отнести к психоактивным (ПАВ). Структура острых отравлений такими веществами по данным различных токсикологических центров широко варьирует: от 40 до 74% случаев и представлена отравлениями медикаментами, преимущественно психотропного действия, кофеином, табаком и другими ПАВ, входящими в коды МКБ F10-F19; от 6 до 49% - этиловым алкоголем и его суррогатами и от 12 до 20% - наркотиками (Москвичев В.Г., Волохова Р.Ю. с соавт. «Отравление ПАВ: клиника, диагностика, лечение на догоспитальном этапе, «Независимый психиатрический журнал, № 3, с. 38-40, 2004).

На данный момент известен ряд изобретений, относящихся к области реаниматологии и токсикологии, предназначенных для лечения интоксикационных психозов при острых отравлениях психоактивными веществами (Патент РФ 2717939 С1, опубл. 27.03.2020 «Способ лечения интоксикационных психозов по типу делириозного помрачения сознания» https://www.elibrary.ru/item.asp?id-37348877), где указано, что лечение интоксикации психозов на основе фармакологической коррекции нарушений метаболизма головного мозга заключается во введении больному цитофлавина в дозе 0,57 мл/кг массы тела со скоростью 20 капель в минуту (1 мл/мин) два раза в сутки (утром и вечером) ежедневно, в течение 7 дней. Изобретение обеспечивает уменьшение времени лечения интоксикационного психоза за счет быстрого восстановления регулирующей функции головного мозга, предотвращение угрожающих жизни осложнений вследствие длительного нахождения больного в состоянии делирия с гипоксией и уменьшение использования седативных средств, традиционно применяемых в системах лечения делирия.

Известен «Способ лечения интоксикационных психозов при отравлениях психооактивными веществами» (Лодягин А.Н., Рахманова Е.А. с соавт. Патент RU 2676698 С1, 10.01.2019. Заявка № 2017138049 от 31.10.2017), где определено, что для лечения интоксикационных психозов при острых отравлениях психоактивными веществами проводят ингаляционную седацию севофлураном в дозе 3-5 мл в час с помощью системы AnaConDa на аппарате SERVO-s - Maquet в течение 10-12 часов до достижения целевой степени седации по RASS -2 -3 балла. Использование данного изобретения позволяет уменьшить время пребывания больных в состоянии интоксикационного психоза за счет максимально быстрого и эффективного подавления патологической психической активности и восстановления регулирующей функции головного мозга; предотвратить угрожающие жизни осложнения, вследствие длительного нахождения больного в состоянии психоза с гипоксией; уменьшить использование седативных средств, традиционно применяемых в схемах лечения интоксикационных психозов, а также позволяет сократить время пребывания больных в реанимационном отделении.

Важно отметить, что крайне серьезной проблемой являются осложнения, отягощающие течение острых отравлений. Наибольшую опасность представляют токсико-гипоксические энцефалопатии (ТГЭ) и госпитальные пневмонии (ГП). При анализе клинического течения экзогенных отравлений продуктами термодеструкции установлено, что изменения со стороны центральной нервной системы (ЦНС) сохраняются и после выхода больных из состояния комы. У выживших больных наблюдаются длительно протекающие психоневрологические расстройства, которые рассматриваются как варианты ТГЭ. Формирование ТГЭ напрямую связано со снижением режима кислородного обеспечения коры головного мозга. При исследовании больных с тяжелыми отравлениями, сопровождающимися респираторным синдромом, тяжелой энцефалопатией и комой, продолжительностью более двух суток, пневмонию диагностировали в 50% случаев наблюдений на первой неделе после госпитализации и еще 30-40% пациентов на второй неделе. Смертность от пневмонии в соматической стадии составляет 2/3 всех случаев летальных исходов. В настоящее время основным подходом в лечении острых отравлений являются: проведение активных методов детоксикации, направленных на быстрейшее выведение яда из организма, снижение эндотоксикоза, антидотная терапия. На основании указанных наблюдений получено изобретение, которое касается использования ацизола в качестве профилактического и лечебного средства при отравлениях нейротоксическими веществами. Для заявленного изобретения показана высокая эффективность ацизола в комплексной терапии токсико-гипоксической энцефалопатии и пневмонии (нормализация показателей гомеостаза, снижение смертности и инвалидизирующих осложнений). Изобретение позволяет существенно понизить риск возникновения осложнений при отравлениях нейротоксическими веществами, RU2331417C1 «Средство для лечения отравлений и их осложнений» (Бабаниязов Х.Х., Ильяшенко К.К. с соавторами, 20.08.2028).

Представленные способы и изобретения напрямую касаются лечения отравлений психоактивными веществами (ПАВ) и/или купирования и лечения осложнений после тяжелого отравления, но не менее важно иметь ранний прогноз на возможное развитие осложнения после тяжелого отравления ПАВ.

Известные способы оценки риска развития осложнений чаще всего представлены в гинекологии (оценка риска невынашивания беременности), в педиатрии (оценка прогноза частоты заболеваемости у детей), оценка прогноза развития сердечно-сосудистой патологии у мужчин с длительным стажем работы в суровых профессиональных (вахтовый метод от 16 до 256 суток) условиях экстремального климата Арктики и др.

Наш способ подразумевает прогнозирование развития посттравматических осложнений при тяжелом отравлении психоактивными веществами (ПАВ), иными словами, раннюю диагностику (прогноз) риска развития осложнения после тяжелого отравления ПАВ, что также может быть ранним прогнозом (благоприятного/неблагоприятного) исхода заболевания. Особенно важно то, что способ подразумевает исключительно иммунологическую составляющую.

Известен способ оценки риска невынашивания беременности у женщин с привычным невынашиванием [Патент РФ № 2657433, опубл. 13.06.2018], отличающийся тем, что у пациентки определяют цитотоксическую активность NK-клеток периферической крови в секреторной фазе менструального цикла в отношении клеток трофобласта линии Jeg-3 с применением 3 математических формул. Если значение цитотоксической активности NK-клеток у данных женщин превышает предварительно определенное значение цитотоксической активности NK-клеток у здоровых фертильных женщин в секреторной фазе менструального цикла (36%), оценивают высокий риск невынашивания беременности. Нужно отметить, что в ходе реализации указанного способа применяют современные и точные методы исследования, однако достаточно трудоемкие и долговременные по выполнению. Так, измерение цитотоксической активности NK-клеток для каждого пациента нужно проводить не менее чем в 4 повторах, а порядок лабораторной работы включает 40 пунктов пробоподготовки перед итоговым анализом на проточном цитофлюориметре. Помимо указанного прибора в перечне оборудования также необходимо иметь ламинарно-потоковый шкаф, набор механических дозаторов, центрифугу, термостат, вортекс, холодильник и CO2 инкубатор. Кроме того, использование данного способа ограничено только случаями невынашивания беременности у женщин с привычным невынашиванием.

Известен способ прогнозирования частой заболеваемости у детей раннего возраста с перинатальными поражениями ЦНС [Патент РФ № 2338196, опубл. 10.11.2008], включающий определение относительного содержания CD16⁺ лимфоцитов в периферической венозной крови у ребенка после 1 года. При значении CD16⁺, равном 10,1% или более, прогнозируют частую заболеваемость ОРВИ у детей до 3-х лет. Данный способ учитывает прогнозирование частой заболеваемости только у детей раннего возраста с перинатальными поражениями ЦНС и не рассматривает вероятность повышения клеточно-опосредованной цитотоксичности лимфоцитов у практически здоровых людей трудоспособного возраста, проживающих и работающих в условиях Арктики, а также у молодых лиц с отравлениями ПАВ.

Наиболее близким считаем способ раннего прогнозирования у практически здоровых мужчин, работающих вахтовым методом в Арктическом регионе возможной сердечно-сосудистой патологии [Патент РФ 2687067, опубл. 7.05.2019https://elibrary.ru/item.asp?id=38146455], включающий забор крови из вены у практически здоровых моряков-вахтовиков, определение фенотипов лимфоцитов периферической крови, определение иммунологического показателя и прогнозирование течения болезни, отличающийся тем, что выявляют риск формирования сердечнососудистой патологии у лиц со стажем работы в экстремальных профессиональных и климатических условиях Арктики более 5 лет, в периферической венозной крови определяют содержание цитотоксических лимфоцитов (CD8⁺), лимфоцитов с рецепторами к трансферрину (CD71⁺) и антигенам гистосовместимости II класса (HLA-DR), при содержании CD8⁺более 0,40⋅10⁹ кл/л, CD71⁺и HLA-DR⁺менее 0,50⋅10⁹ кл/л прогнозируют раннюю высокую вероятность развития сердечно-сосудистой патологии.

Также близким способом при раннем прогнозе исхода черепно-мозговых травм различной степени тяжести применяется метод определения фенотипов иммунокомпетентных клеток, отличающийся тем, что суждение о дефиците активности иммунокомпетентных клеток и прогноз развития посттравматических осложнений осуществляют у пострадавших в первые сутки с момента получения черепно-мозговой травмы, в сыворотке периферической венозной крови у пострадавших лиц с высокой цитотоксической активностью определяют содержание цитокина интерлейкин-2 (ИЛ 2) и концентрацию иммуноглобулина IgE, при содержании ИЛ 2 более 50,00 пк/мл и IgE более 100,00 МЕ/мл прогнозируют высокую вероятность риска развития осложнения [Патент РФ 2685552 https://elibrary.ru/item.asp?id=41021248. Опубл. 22.04.2019]. Заявленный способ осуществляется следующим образом. Кровь для исследования берется из локтевой вены в минимальном объеме 1-3 мл до 10 часов утра, натощак. Для количественного определения ИЛ2 и иммуноглобулина Е используется сыворотка или плазма крови, анализируемая иммуноферментным методом с применением диагностического набора для ИФА и прибора Stat Fax 2100. Результаты реакции определяются по оптической плотности ячеек планшета согласно инструкции производителя. Кроме того, данный метод занимает не менее 5-6 часов и каждая планшета рассчитана не менее, чем на 80 человек, что весьма удорожает исследование и индивидуальный анализ.

Предложенное нами изобретение можно осуществить в течение 2 часов рабочего времени одного лаборанта-исследователя с применением лишь стандартного гематологического анализатора и микроскопа. Это позволяет экономить производственные ресурсы диагностических медицинских учреждений, а также дает возможность определить в первые сутки с момента острого отравления (ПАВ) и экстренного поступления пострадавшего минимальное количество иммунологических показателей наиболее информативных для прогноза исхода травмы головного мозга токсического генеза.

Наиболее близким по достигаемому техническому результату можно считать способ оценки цитотоксической активности лимфоцитов натуральных киллеров (НК) [Патент РФ № 2514019, опубл. 27.04.2014]. При этом рассматриваемый способ включает иное техническое решение поставленной задачи, нежели предложенное нами изобретение. Так, в ходе реализации прототипа из периферической крови обследуемых людей в градиенте плотности фиколл-верографина выделяют взвесь мононуклеарных клеток с последующей постановкой цитотоксического теста. Тест основан на инкубации НК-лимфоцитов и клеток-мишеней К-562 с дальнейшим подсчетом числа оставшихся, не деградированных клеток-мишеней. Учет производится на автоматическом анализаторе, настроенном на выявление клеток диаметром от 15 до 40 мкм, после чего по формуле рассчитывают индекс цитотоксичности. То есть фактически в прототипе осуществляется постановка клеточной реакции in vitro и на основании инструментального анализа ее результатов фиксируется относительный уровень цитотоксической активности НК-лимфоцитов.

Предложенный нами способ не предполагает подобных действий, происходит лишь регистрация уже существующего in vivo уровня содержания лимфоцитов с последующим суждением о наличии либо отсутствии повышенной клеточно-опосредованной цитотоксичности CD8⁺ и повышенной активности клеток с рецепторами к антигенам гистосовместимости II класса HLA- DR⁺. Изобретение позволяет в обычных условиях гематологической лаборатории без дополнительных затрат выявить повышенную клеточно-опосредованную цитотоксичность CD8⁺ и уровень активированных В-клеток с маркером HLA- DR⁺.

Задачей настоящего изобретения является разработка способа, позволяющего определить минимальное число иммунологических параметров, позволяющих быстро выявить пострадавших с токсической энцефалопатией, имеющих риск повышенной клеточно-опосредованной цитотоксичности CD8⁺ и высокий уровень В-клеточной активности HLA- DR⁺в первые сутки с момента острого отравления (ПАВ) и экстренного поступления в медицинское учреждение в экстремальных условиях Арктического региона, а также с целью профилактики развития осложнений после развития тяжелой энцефалопатии токсического генеза.

Технический результат состоит в том, что способ позволяет проводить быструю скрининговую диагностику, сократить время и упростить методику прогнозирования риска формирования повышенной клеточно-опосредованной цитотоксичности CD8⁺, чреватой нарушением адаптивного иммунного ответа, проявляющегося ранним развитием осложнений, склонности к хроническому течению заболевания, а также выявления критически высокого уровня содержания клеток с антигенами гистосовместимости II класса HLA- DR⁺.

Технический результат достигается тем, что способ прогнозирования осложнения при травме головного мозга токсического генеза (отравление ПАВ), включающий забор крови из вены, согласно изобретению, позволяет определить содержание фенотипов лимфоцитов и судить о содержании Т-супрессоров CD8⁺ и клеток с антигенами гистосовместимости II класса HLA- DR⁺.

Поставленная цель достигается тем, что в крови пострадавших, проживающих в условиях Арктики, определяют содержание Т-супрессоров CD8⁺и В-клеток с антигенами гистосовместимости II класса HLA- DR⁺. При содержании Т-супрессоров CD8⁺ более l,56±0,03⋅10⁹ кл/л и HLA-DR⁺ 1,02±0,03⋅10⁹ кл/л судят о повышенной клеточно- опосредованной цитотоксичности лимфоцитов и критически высокой активности клеток с рецепторами к антигенам гистосовместимости II класса HLA- DR⁺, что сочетается с увеличением в крови содержания циркулирующих Т-клеток CD8⁺ более 0,6×10⁹ кл/л и активированных В⁺-клеток HLA- DR⁺0,5×10⁹ кл/л.

Заявленный нами способ осуществляется следующим образом. Кровь для исследования берется из локтевой вены в объеме 3 мл в момент поступления пострадавшего с тяжелой энцефалопатией токсического генеза вследствие отравления ПАВ в вакуумные пробирки Vacuette с антикоагулянтом K3EDTA. Общее содержание лимфоцитов выявляется на стандартном гематологическом анализаторе. Фенотипы лимфоцитов с маркерами клеток CD8⁺и HLA-DR⁺определяют в непрямой иммунопероксидазной реакции типа «Высушенная капля». Учет количества лимфоцитов осуществляется при помощи микроскопа с иммерсионным увеличением объектива ×100 и окуляра ×10, с подсчетом 100 клеток на клавишных лабораторных счетчиках.

Предлагаемым способом обследовано 83 человека мужского пола в возрасте 20-40 лет с отравлением ПАВ тяжелой степени на базе 1 городской клинической больницы им. Е.Е. Волосевич, г. Архангельск. Комплекс иммунологического обследования людей включал изучение содержания в периферической крови протеина S-100"B, лейкоцитов, лимфоцитов и их фенотипов (CD3⁺, CD4⁺, CD5⁺, CD8⁺, CD10⁺, CD16⁺, CD25⁺, CD71⁺, HLA-DR⁺, CD95⁺). Содержание протеина S - 100β определяли в сыворотке крови иммуноферментным, твердофазным, неконкурентным методом, основанном на использовании двух видов мышиных моноклональных антител, специфически распознающих два разных эпитопа молекулы S - 100β. Кровь для исследования брали из локтевой вены в объеме 6 мл при госпитализации. Процентное содержание субпопуляций Т-лимфоцитов определяли методом непрямой иммунопероксидазной реакции с использованием моноклональных антител («МедБиоСпектр», г. Москва) на препаратах лимфоцитов типа «высушенная капля», подсчет проводили на микроскопе Nicon Eclipse 50i. Результаты исследования обработаны статистически с определением средних величин и представлены как средняя арифметическая ± ошибка средней (М±m), достоверность различий оценивали с помощью t-критерия Стьюдента. Тип исследования ретроспективный, выборки случайные, одномоментные. Проведен корреляционный анализ. Корреляционный анализ проводился с определением непараметрического коэффициента ранговой корреляции Спирмена (r) и оценкой его достоверности (р). Статистическая достоверность присваивалась при значении р<0,05. Использовался пакет компьютерной программы Statistica 6.0. Работа выполнена в лаборатории физиологии иммунокомпетентных клеток ФГБУН ФИЦКИА УрО РАН, номер Государственной регистрации темы № АААА-А19-119120990059-4 и № 122011700267-5 «Физиологическая значимость особенностей иммунного гомеостаза, функциональной и рецепторной активности иммунокомпетентных клеток у людей в экстремальных меняющихся условиях среды с учетом профессионального статуса и социально-значимых заболеваний у жителей Приарктического региона».

Все полученные результаты статистически обработаны с использованием пакета прикладных программ «MICROSOFT EXCEL МХ» и «STATISTICA 6.0» («StatSoft», США) FOR WINDOWS 7. Уровень дисбалансов иммунологических показателей рассчитывался по данным частоты регистрации повышенных и пониженных их концентраций относительно нормативных пределов физиологических колебаний. При этом соблюдались нормы биомедицинской этики в соответствии с документом «Этические принципы проведения медицинских исследований с участием людей в качестве субъектов исследования» (Хельсинская декларация Всемирной медицинской ассоциации 1964 г. (с изменениями и дополнениями 2013 г.). Для проведения исследования получено заключение этического комитета ФГБУН ФИЦКИА РАН (Протокол № 4 от 10.02.2022 г.).

Обследуемые с токсическим повреждением головного мозга были экстренно доставлены с первую городскую клиническую больницу по скорой помощи им. Е. Волосевич г. Архангельск (ГБУЗ АО «Архангельская городская клиническая больница им. Е. Волосевич) с диагнозом «отравление ПАВ» (в соответствии с кодом МКБ F10-F19). Из анамнеза известно, что все эти люди ранее неоднократно доставлялись в состоянии наркотического опьянения (преимущественно стимуляторы, запрещенные для употребления на территории РФ, алкоголь) и страдали наркотической зависимостью (в 26 случаях обследуемые признались в систематическом употреблении ПАВ на протяжении не менее 6 лет). Пациенты с отравлением ПАВ тяжелой степени доставлялись с нарушением сознания до сопора и комы (по ШКГ 10-3 б) и госпитализировались в ОАРИТ, иной генез поражения головного мозга исключался клинически и по данным СКТ. Клинически острая интоксикация обследованных на момент поступления в стационар характеризовалась нарушениями речи и расстройствами в двигательной сфере, сердечно-сосудистой и дыхательной недостаточности, комы, соматовегетативными расстройствами (покраснение склер, тахикардия и повышение артериального давления, головокружение, диспноэ и др.). Всем больным, доставленным с диагнозом «отравление ПАВ» и с угнетением сознания по ШКГ от 10 Б и ниже выполнено КТ головного мозга с целью исключения патологии ЦНС. При этом, чем ярче выражены клинические проявления отравления ПАВ у пациентов, тем более сильный тотальный отек головного мозга наблюдался. В качестве лабораторного объективного маркера факта и степени повреждения мозговой ткани использовался уровень протеина S-100β в венозной крови. Получены данные, что средний уровень протеина S-100β у лиц с тяжелой степенью отравления ПАВ составил 217,3± 0,03нг/л, при этом повышенные значения регистрируются в 89,00% случаев пациентов. Проведенное уникальное комплексное иммунологическое обследование молодых мужчин с токсической энцефалопатией показало, что максимальное повышение протеина S-100β (574,1 нг/л) выявлено у пациента 24 лет, с 16 лет страдающего наркоманией, алкоголизмом, токсикоманией и доставленном в тяжелом наркотическом опьянении, кома 2 (ШКГ 5Б). Известно из наших предыдущих исследований, что наибольшее значение протеина S-100β при тяжелой черепно-мозговой травме составляло 690,4 нг/л (пациент доставлен в крайне тяжелом состоянии, после клинической смерти, сердечно-легочной реанимации в течение 20 минут, ШКГ 3Б), следовательно, при токсическом поражении головного мозга повреждение на клеточном уровне оказывается не менее сильным, чем при механической травме (ЧМТ) [Поповская Е.В. Иммунные реакции при черепно-мозговых травмах у мужчин-северян трудоспособного возраста / Е.В. Поповская, Л.С. Щеголева, Е.Ю. Шашкова, В.Г. Порохин // Вестник Северного (Арктического) Федерального университета, серия «Медико-биологические науки». 2016. № 1. С. 102-109; Поповская Е.В., Щеголева Л.С, Шашкова Е.Ю., Филиппова О.Е., Сергеева Т.Б. Состояние клеточного иммунитета у мужчин г. Архангельска с поражением мозга, вызванным употреблением психоактивных веществ / Журнал Медико-биологических исследований. - 2022. - Т. 10. - №4. - С.329-337. DOI: 10.37482/2687-1491-Z121].

Среди обследуемых лиц, поступивших с отравлением ПАВ, выявлены повышенные значения уровней лейкоцитов - 11,44±0,01⋅10⁹ кл/л. При этом лейкоцитоз зарегистрирован у 57,70% обследуемых людей, а лейкопении только в 11,50% случаев. Средний уровень содержания клеток CD3⁺ в группе мужчин с токсической энцефалопатией возраста 20-40 лет составил 1,26±0,02 10⁹ кл/л. Повышенные значения отмечались в 20,70%, а дефицит зрелых функционально активных клеток составил 31,00%.

В 86,70% случаев среди лиц с отравлением ПАВ отмечается спад уровня содержания клеток общей Т-клеточной популяции CD5⁺. Повышенных значений не выявлено. Средний уровень концентрации клеток с маркером CD5⁺ установлен на отметке 1,48±0,01-10⁹ кл/л.

Показатель CD 10⁺, отражающий уровень лимфопролиферации, в группе обследуемых лиц с токсической энцефалопатией 20-40 лет в среднем составил l,82±0,04⋅l0⁹ кл/л. Повышенные значения отмечены в 28,10% случаев, низких уровней активности лимфопролиферации не зафиксировано.

Уровень содержания супрессоров CD8⁺в среднем составил 1,56±0,03⋅10⁹ кл/л, наряду с этим частота дисбалансов в сторону повышенных значений зафиксирована в 28,10%. Исходя из полученных данных, хелперно-супрессорное (CD4/CD8) соотношение составляет 0,92, что более, чем в 2 раза ниже нормы за счет выраженной иммуносупрессии.

Концентрации нормальных киллеров CD 16⁺для группы поступивших с диагнозом отравление ПАВ тяжелой степени в возрасте 20-40 лет составляет 0,85±0,06⋅10⁹ кл/л, что превышает нормальные значения в 2 раза в 18,20% случаев. Уровень активности апоптоза, отражаемый концентрациями клеток с рецепторами CD95⁺ определен в среднем 1,11±0,05⋅10⁹ кл/л, что превышает физиологическую норму в 2,2 раза, особенностью данного показателя является то, что частота дисбалансов составила 100% в сторону повышенных значений.

Клетки с рецепторами HLA-DR⁺зафиксированы в среднем на уровне 1,02±0,03⋅10⁹ кл/л, что превышает границу общепринятой физиологической нормы в 2 раза. Возрастание концентрации показателя отмечалось в 95,60% случаев, в то время как его понижение зафиксировано только в 5,60%.

Иными словами, у мужчин 20-40 лет с тяжелой токсической энцефалопатией регистрируется выраженный дефицит дифференцированных Т-лимфоцитов CD3⁺ (31,00%), хелперов-индукторов CD4⁺ (48,40%), CD5⁺ (86,70%), CD71⁺ (71,00%), что свидетельствует не только о сокращении резервного пула лимфоидных популяций, но и о возможной тканевой гипоксии, и, возможно, о развитии аутоиммунных реакций.

Крайне высокая активность апоптоза, отражаемая маркером CD95⁺(100%), высокая цитотоксическая активность CD8⁺ (38,10%) на фоне дефицита пула клеток CD5⁺ (86,70%) и CD4⁺ (48,40%) косвенно свидетельствуют не только о напряжении адаптивного клеточного иммунитета, но и о срыве резервных возможностей иммунного гомеостаза, способствуют развитию осложнения.

У молодых мужчин с поражением мозга токсического генеза выявлены опасно высокие концентрации иммунокомпетентных клеток, отражающих цитотоксическую иммуносупрессию CD8⁺ (38,10%), уровни лимфопролиферации CD10⁺ (48,10%), цитокиновую активность через интерлейкин-2 CD25⁺ (68,80%) на фоне высокой концентрации антигенов гистосовместимости II класса HLA-DR⁺ (95,60%), что свидетельствует о состоянии аллостаза, чреватом неблагоприятным прогнозом исхода травмы головного мозга токсического генеза, токсической энцефалопатии.

Нами приведены частные примеры использования заявленного способа.

Пример 1. Больной К., 30 лет.

Диагноз. Flx.05x

Основной: Отравление ПАВ тяжелой степени (синтетический наркотик «Спайс»).

Место проживания: Приарктический регион.

В первые сутки после получения травмы токсического генеза при лабораторном исследовании периферической венозной крови: уровень содержания Т-супрессоров CD8⁺ 1,59±0,04⋅10⁹ кл/л и активированных В-клеток HLA-DR⁺1,10±0,02⋅10⁹ кл/л

Сделано заключение о большом риске развития посттравматических осложнений

Осложнение: Кома 1. Прогноз верен.

Пример 2. Больной А., 26 лет

Диагноз. Flx.06x

Основной: Отравление ПАВ средней степени тяжести (синтетический наркотик «Спайс»).

Место проживания, г. Архангельск.

В первые сутки после получения травмы токсического генеза при лабораторном исследовании периферической венозной крови: уровень содержания Т-супрессоров CD8+ 1,67±0,04⋅10⁹ кл/л и активированных В-клеток HLA-DR⁺1,11±0,04⋅10⁹ кл/л

Сделано заключение о возможном риске развития посттравматических осложнений

Осложнение: Острая токсическая энцефалопатия. Судорожный синдром. Прогноз верен.

Пример 3. Больной С. 40 лет.

Диагноз. F15.2+G61

Основной: Синдром зависимости от ПАВ. Отравление ПАВ средней степени тяжести (синтетический наркотик «Спайс»).

Место проживания: Крайний Север.

В первые сутки после получения травмы токсического генеза при лабораторном исследовании периферической венозной крови: уровень содержания Т-супрессоров CD8⁺ 1,61±0,01⋅10⁹ кл/л и активированных В-клеток HLA-DR⁺1,15±0,05 -10⁹ кл/л

Сделано заключение о возможном риске развития посттравматических осложнений

Осложнение: Токсическая полинейропатия. Токсическая энцефалопатия, субкомпенсация.

Прогноз верен.

Пример 4. Больной У., 35 лет.

Диагноз. F 15.4

Основной: Синдром зависимости от ПАВ. Отравление ПАВ средней степени тяжести

(синтетический наркотик «Спайс»).

Место проживания: Приарктический регион. НАО.

В первые сутки после получения травмы токсического генеза при лабораторном исследовании периферической венозной крови: уровень содержания Т-супрессоров CD8⁺ 1,59±0,03 10⁹ кл/л и активированных В-клеток HLA-DR⁺1,18±0,03 -10⁹ кл/л

Сделано заключение о возможном риске развития посттравматических осложнений

Осложнение: Абстинентное состояние с делирием. Прогноз верен.

Пример 5. Больной И., 22 года

Диагноз. F.15.2+J69.0

Основной: Синдром зависимости от ПАВ. Отравление ПАВ тяжелой степени

(синтетический наркотик «Спайс»).

Место проживания: Крайний Север.

В первые сутки после получения травмы токсического генеза при лабораторном исследовании периферической венозной крови: уровень содержания Т-супрессоров CD8⁺ 1,62±0,01⋅10⁹ кл/л и активированных В-клеток HLA-DR⁺1,39±0,04⋅l0⁹ кл/л

Сделано заключение о крайне высоком риске развития посттравматических осложнений.

Осложнение: Кома 2. Аспирация рвотными массами. Двусторонняя аспирационная пневмония. ДН 1-2. Полиорганная недостаточность, летальный исход. Прогноз верен.

Пример 6. Больной О., 35 лет.

Диагноз. Синдром зависимости от ПАВ (крепкий алкоголь). Отравление легкой степени.

Место проживания: Крайний Север.

В первые сутки после получения травмы токсического генеза при лабораторном исследовании периферической венозной крови: уровень содержания Т-супрессоров CD8⁺ 0,60±0,02⋅10⁹ кл/л и активированных В-клеток HLA-DR⁺ 0,50±0,01⋅10⁹ кл/л

Сделано заключение об отсутствии риска развития посттравматических осложнений.

Осложнений нет. Пациент выписан в удовлетворительном состоянии. Приступил к работе. Прогноз верен.

Изобретение относится к медицине, а именно к патофизиологии, иммунологии, нейроиммунологии, лабораторной диагностике, и может быть использовано для прогнозирования развития осложнений при тяжелом отравлении психоактивными веществами (ПАВ) в экстремальных условиях Арктики. Осуществляют забор крови из вены, определение отдельных фенотипов иммунокомпетентных клеток периферической крови у пострадавших в первые сутки с момента острого отравления ПАВ. При содержании Т-супрессоров CD8⁺ более 1,56±0,03⋅10⁹ кл/л и активированных В-клеток HLA-DR⁺ более 1,02±0,03⋅10⁹ кл/л прогнозируют высокую вероятность риска развития осложнения. Способ обеспечивает возможность проведения быстрой скрининговой диагностики, сокращения времени за счет упрощения методики прогнозирования риска формирования повышенной клеточно-опосредованной цитотоксичности CD8⁺, чреватой нарушением адаптивного иммунного ответа, проявляющегося ранним развитием осложнений, склонности к хроническому течению заболевания, а также выявления критически высокого уровня содержания клеток с антигенами гистосовместимости II класса HLA-DR⁺. 6 пр.

Способ прогнозирования развития осложнений при тяжелом отравлении психоактивными веществами (ПАВ) в экстремальных условиях Арктики, включающий забор крови из вены, определение отдельных фенотипов иммунокомпетентных клеток периферической крови у пострадавших в первые сутки с момента острого отравления ПАВ, отличающийся тем, что при содержании Т-супрессоров CD8⁺ более 1,56±0,03⋅10⁹ кл/л и активированных В-клеток HLA-DR⁺ более 1,02±0,03⋅10⁹ кл/л прогнозируют высокую вероятность риска развития осложнения.