СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕАГЕНТА НА ОСНОВЕ 1-ТИО -D-ГЛЮКОЗЫ ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ МЕЧЕННОГО ТЕХНЕЦИЕМ-99м РАДИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА И СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ МЕЧЕННОГО ТЕХНЕЦИЕМ-99м РАДИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА Российский патент 2024 года по МПК A61K51/04 A61K103/10 

Изобретения относятся к области фармацевтической химии, в частности к способам получения и составам радиофармацевтических препаратов медицинского назначения для радионуклидной диагностики.

Известен способ получения реагента для радионуклидной диагностики на основе меченной технецием-99m 1-тио-D-глюкозы [RU 2644744 C1, МПК A61K 51/04 (2006.01), A61K 103/10 (2006.01), опубл. 13.02.2018], выбранный в качестве прототипа, включающий приготовление реакционной смеси, последовательно добавляя к 1 мл водного раствора, содержащего 2,5 мг 1-тио-D-глюкозы, 50 мкл водного раствора аскорбиновой кислоты с концентрацией 10 мг/мл (0,5 мг) и 25 мкл свежеприготовленного раствора олова (II) хлорида дигидрата с концентрацией 7 мг/мл (0,175 мг). Полученный раствор пропускают через стерилизующий фильтр с размером пор 0,22 мкм в отдельный флакон, который без предварительного замораживания в жидком азоте помещают в холодильную камеру лиофилизатора и проводят процесс лиофилизации в автоматическом режиме при заданных параметрах: Р=0,2 Па, t=-50°С в течение 24 часов. Затем реагент во флаконе герметизируют.

Полученный этим способом реагент для приготовления меченного технецием-99м препарата пригоден для проведения гамма-сцинтиграфических исследований в онкологии и обеспечивает получение радиофармацевтического препарата ^99mTc-1-тио-D-глюкозы с радиохимической чистотой 97,5%.

К недостаткам данного способа можно отнести фиксированное и достаточно высокое содержание 1-тио-D-глюкозы - 2,5 мг, недостаточно высокую радиохимическую чистоту радиофармацевтического препарата, меченного технецием-99м - не более 97,5%, хотя в основном для препаратов на основе технеция-99м радиохимическая чистота составляет более 99%, и сложность процесса лиофилизации при достаточно низкой температуре - минус 50°C.

Также недостатком является отсутствие возможности хранения готового реагента, хотя обычно коммерчески доступные реагенты для приготовления радиофармацевтических препаратов на основе технеция-99м имеют срок хранения не менее 1 года.

Также недостатком является использование водных растворов 1-тио-D-глюкозы и олова (II) хлорида дигидрата без добавления кислот, которые при использовании снижают показатель рН растворов и снижают вероятность образования коллоидных примесей, что в свою очередь связано с небольшим временем хранения готового реагента, при котором получение радиофармацевтического препарата на основе 1-тио-D-глюкозы осуществляют сразу после его приготовления, хотя обычно коммерчески доступные реагенты для приготовления радиофармацевтических препаратов на основе технеция-99м имеют срок хранения не менее 1 года в течение которого с их помощью можно готовить радиофармацевтический препарат в любой момент времени.

Известен способ изготовления меченного технецием-99м радиофармацевтического препарата [RU 2644744 C1, МПК A61K 51/04 (2006.01), A61K 103/10 (2006.01), опубл. 13.02.2018], включающее введение во флакон с указанным выше реагентом на основе 1-тио-D- глюкозы для изготовления меченного технецием-99м радиофармацевтического препарата 4 мл элюата ^99mTc с активностью 3,7-5,0 ГБк (100-135 мКи) и инкубацию в ультразвуковой ванне в течение 30 мин.

Недостатком данного способа является использование высокой активности ^99mTc и применение ультразвука при инкубации, что в свою очередь увеличивает продолжительность приготовления радиофармпрепарата и требует дополнительных мер безопасности для персонала медучреждений от ионизирующего излучения при инкубации в ультразвуковой мойке с использованием дополнительных радиационно-защитных средств для оборудования.

Таким образом, до настоящего времени остается нерешенной задача радиационно-безопасного и экспрессного приготовления меченного технецием-99м радиофармацевтического препарата с высокой радиохимической чистотой более 99% с использованием стерильного реагента в лиофилизированной форме на основе 1-тио-D-глюкозы, который может храниться не менее 18 месяцев.

Способ получения реагента на основе 1-тио-D-глюкозы для изготовления меченного технецием-99м радиофармацевтического препарата, также как в прототипе, включает приготовление раствора, содержащего 1-тио-D-глюкозу, олово дихлорид дигидрат и аскорбиновую кислоту, фильтрующую стерилизацию полученного раствора, последующую лиофилизацию и герметизацию реагента во флаконе.

Согласно изобретению, готовят раствор, последовательно добавляя во флакон 1 мл 0,003-0,006 М солянокислого раствора 1-тио-D-глюкозы с концентрацией 1-2,5 мг/мл, 0,05 мл водного раствора аскорбиновой кислоты с концентрацией 8-10 мг/мл и 0,025-0,030 мл солянокислого 0,02М раствора дихлорида дигидрата олова с концентрацией 7 мг/мл. После фильтрующей стерилизации во флакон лиофилизируют с предварительной заморозкой при температуре минус 28-30°C и досушивают при температуре плюс 25°C до полного удаления влаги. Закрывают флакон резиновой пробкой и укупоривают алюминиевым колпачком.

Способ получения реагента на основе 1-тио-D-глюкозы для изготовления меченного технецием-99м радиофармацевтического препарата, включающий приготовление раствора, содержащего 1-тио-D-глюкозу, олово дихлорид дигидрат и аскорбиновую кислоту, фильтрующую стерилизацию полученного раствора, последующую лиофилизацию и герметизацию реагента во флаконе, отличающийся тем, что готовят раствор последовательно добавляя во флакон 1 мл 0,003-0,006 М солянокислого раствора 1-тио-D-глюкозы с концентрацией 1-2,5 мг/мл, 0,05 мл водного раствора аскорбиновой кислоты с концентрацией 8-10 мг/мл и 0,025-0,030 мл солянокислого 0,02М раствора дихлорида дигидрата олова с концентрацией 7 мг/мл, после фильтрующей стерилизации во флакон, лиофилизируют с предварительной заморозкой при температуре минус 28-30°C и досушивают при температуре плюс 25°C до полного удаления влаги, закрывают флакон резиновой пробкой и укупоривают алюминиевым колпачком.

Способ изготовления меченного технецием-99м радиофармацевтического препарата, так же как в прототипе, включает введение 4 мл элюата технеция-99м во флакон с реагентом на основе 1-тио-D-глюкозы для изготовления меченного технецием-99м радиофармацевтического препарата, полученным с использованием раствора из 1-тио-D-глюкозы, олова дихлорида дигидрата и аскорбиновой кислоты, последующую инкубацию.

Согласно изобретению, во флакон с реагентом на основе 1-тио-D-глюкозы для изготовления меченного технецием-99м радиофармацевтического препарата, полученного по п. 1, вводят стерильным шприцем раствор натрия пертехнетата, содержащего 500-1000 МБк технеция-99м, интенсивно перемешивают и инкубируют при комнатной температуре.

Существенное уменьшение содержания 1-тио-D-глюкозы в совокупности с использованием слабых солянокислых растворов 1-тио-D-глюкозы в реагенте для изготовления меченного технецием-99м радиофармацевтического препарата снижает эффекты конденсации, которые возникают при более высоких концентрациях 1-тио-D-глюкозы и повышенных значениях рН ближе к щелочным, которую дает в свою очередь сама 1-тио-D-глюкоза при ее растворении в водной среде. Данный подход практически исключает объединение молекул гидратированных соединений реагента в агрегаты коллоидной степени дисперсности, что позволяет повысить радиохимиченскую чистоту радиофармпрепарата и исключить радиационноопасную стадию диспергирования ультразвуком, как в прототипе.

По сравнению с прототипом увеличение температуры лиофилизации с минус 50 до минус 28 градусов существенно упрощает и автоматизирует процедуру лиофилизации реагента и позволяет использовать практически любые коммерческие установки лиофилизации. Время же процессов предварительной заморозки, лиофилизации и досушивания реагента индивидуально в зависимости от характеристик сублимационнгой сушки и ее загрузки флаконами с реагентом.

Предлагаемые способы позволяют получить стерильный реагент на основе 1-тио-D-глюкозы с возможностью его хранения 18 месяцев и меченый технецием-99м радиофармацевтический препарат с радиохимической чистотой более 99% и возможностью накоплением в опухоли головного мозга более, чем в 2 раза по сравнению с накоплением в окружающих тканях (показатель опухоль/фон).

Таким образом, предложенные изобретения обеспечивают повышение радиохимической чистоты меченного технецием-99м радиофармацевтического препарата, уменьшение времени и количество операций при его приготовлении, а также увеличение срока хранения реагента на основе 1-тио-D-глюкозы.

На фиг. 1 представлена сцинтиграмма пациента с диагнозом анапластическая астроцитома затылочной области, Grade III, полученная путём регистрации гамма-излучения на однофотонном эмиссионном компьютерном томографе после внутривенного введения радиофармпрепарата на основе 1-тио-D-глюкозы.

В таблице 1 представлены результаты определения радиохимической чистоты в меченом технецием-99м радиофармацевтическом препарате с использованием реагента на основе 1-тио-D-глюкозы в зависимости от концентрации компонентов и условий приготовления.

В таблице 2 представлены результаты определения радиохимической чистоты в меченом технецием-99м радиофармацевтическом препарате с использованием реагента на основе 1-тио-D-глюкозы в зависимости от срока его хранения.

Осуществление заявленного способа рассмотрим на конкретных примерах.

Пример 1. Приготовление реагента.

Во флакон последовательно добавляли 1 мл 0,005 М солянокислого раствора 1-тио-D-глюкозы с концентрацией 1 мг/мл, 0,05 мл водного раствора аскорбиновой кислоты с концентрацией 10 мг/мл и 0,03 мл солянокислого 0,02М раствора дихлорида дигидрата олова с концентрацией 7 мг/мл. Полученную смесь фильтровали через стерилизационный фильтр в отдельный флакон, лиофилизировали с предварительной заморозкой при температуре минус 30°C и досушивали при температуре плюс 25°C до полного высушивания. Флакон с лиофилизированным реагентом закрыли резиновой пробкой и укупорили алюминиевым колпачком. Получили стерильный реагент.

Пример 2. Приготовление радиофармацевтического препарата.

Во флакон с реагентом, приготовленным по примеру 1, ввели стерильным шприцем 4 мл стерильного раствора натрия пертехнетата, содержащего 1000 МБк технеция-99м, интенсивно перемешивали и инкубировали при комнатной температуре в течение 10 минут. Радиохимическую частоту определяли радиометрически методом тонкослойной хроматографии. Показатель опухоль/фон у пациентов с опухолями головного мозга определяли методом спектрометрии на однофотонном эмиссионном компьютерном томографе.

Пример 3.

Реагент готовили также, как и в примере 1, но с тем отличием, что добавляли 1 мл 0,006 М солянокислого раствора 1-тио-D-глюкозы с концентрацией 2 мг/мл, раствор аскорбиновой кислоты с концентрацией 9 мг/мл, 0,025 мл солянокислого раствора дихлорида дигидрата олова и полученную смесь лиофилизировали при температуре минус 29°C.

Радиофармацевтический препарат готовили также, как в примере 2, но с тем отличием, что использовали раствор натрия пертехнетата, содержащего 500 МБк технеция-99м.

Пример 4.

Реагент готовили также, как и в примере 1, но с тем отличием, что добавляли 1 мл 0,003 М солянокислого раствора 1-тио-D-глюкозы с концентрацией 2,5 мг/мл, раствор аскорбиновой кислоты с концентрацией 8 мг/мл, 0,028 мл солянокислого раствора дихлорида дигидрата олова и полученную смесь лиофилизировали при температуре минус 28°C.

Радиофармацевтический препарат готовили также, как в примере 2, но с тем отличием, что использовали раствор натрия пертехнетата, содержащего 800 МБк технеция-99м.

Пример 5

Реагент готовили также, как и в примере 1 и оставляли на хранение в защищенном от света месте при температуре от +2°С до +5°С в течение 6 месяцев.

Радиофармацевтический препарат готовили также, как в примере 2, но через 6 месяцев после приготовления реагента.

Пример 6

Реагент готовили также, как и в примере 1 и оставляли на хранение в защищенном от света месте при температуре от +2°С до +5°С в течение 12 месяцев.

Через 12 месяцев после приготовления реагента готовили радиофармацевтический препарат также, как в примере 2.

Пример 7

Реагент готовили также, как и в примере 1 и оставляли на хранение в защищенном от света месте при температуре от +2°С до +5°С в течение 18 месяцев. Р

Через 18 месяцев после приготовления реагента готовили радиофармацевтический препарат также, как в примере 2

Результаты определения радиохимической частоты в радиофармацевтических препаратах, приготовленных по примерам 1-4 представлены в таблице 1, из которых видно, что радиохимическая частота не меньше 99,0% и функциональная пригодность по показателю опухоль/фон у пациентов с опухолями головного мозга составляет 2,3-2,8.

Результаты изучения срока хранения реагента при определении радиохимической частоты и функциональной пригодности по показателю опухоль/фон в радиофармацевтических препаратах, приготовленных по примерам 5-7 представлены в таблице 2, из которых видно, что реагент остается стабилен в течение не менее 18 месяцев.

Меченый технецием-99м радиофармацевтический препарат на основе 1-тио-D-глюкозы, полученный в примере 3, вводили внутривенно в кубитальную вену больной с диагнозом анапластическая астроцитома затылочной области и через 40 минут проводили сцинтиграфическое исследование на однофотонном эмиссионном компьютерном томографе. На полученной сцинтиграмме (фиг. 1) в проекции затылочной области слева отчетливо визуализируется очаг патологической гиперфиксации радиофармпрепарата, а интактная (здоровая) ткань мозга не накапливает радиофармпрепарат. После математической обработки сцинтиграммы был рассчитан показатель опухоль/фон, который оказался равен 2,5. Все это подтверждает эффективность использования полученного радиофармацевтического препарата на основе 1-тио-D-глюкозы в онкологической практике.

Таблица 1

№ образца Масса 1-тио-D-глюкозы, мг Концентрация солянокислого раствора 1-тио-D-глюкозы, моль/л Концентрация водного раствора аскорбиновой кислоты,
мг/мл Объем вводимого 0,02М солянокислого раствора олова дихлорида дигидрата,
мл Температура лиофилизации полученного раствора или смеси,
°С Температура досушивания до полного высыхания,
°С Содержание технеция-99м в растворе натрия пертехнетата,
МБк Радиохимическая чистота,
% Показатель опухоль/фон у пациентов с опухолями головного мозга 1 1,0 0,005 10 0,030 -30 +25 1000 99,5 2,3 2 2,0 0,006 9 0,025 -29 +25 500 99,3 2,5 3 2,5 0,003 8 0,028 -28 +25 800 90,0 2,8

Таблица 2

№ образца Срок хранения,
мес. Радиохимическая чистота, % Показатель опухоль/фон у пациентов с опухолями головного мозга 1 6 99,3 2,8 2 12 98,5 3,2 3 18 99,1 2,4

Группа изобретений относится к области фармацевтической химии, в частности к способам получения и составам радиофармацевтических препаратов медицинского назначения для радионуклидной диагностики. Предложен способ получения реагента на основе 1-тио-D-глюкозы для изготовления меченного технецием-99м радиофармацевтического препарата, включающий приготовление раствора последовательно добавляя во флакон 1 мл 0,003-0,006 М солянокислого раствора 1-тио-D-глюкозы с концентрацией 1-2,5 мг/мл, 0,05 мл водного раствора аскорбиновой кислоты с концентрацией 8-10 мг/мл и 0,025-0,030 мл солянокислого 0,02М раствора дихлорида дигидрата олова с концентрацией 7 мг/мл, после фильтрующей стерилизации во флакон, лиофилизацию с предварительной заморозкой при температуре минус 28-30°C и досушивание при температуре плюс 25°C до полного удаления влаги, затем закрывают флакон резиновой пробкой и укупоривают алюминиевым колпачком. Способ изготовления меченного технецием-99м радиофармацевтического препарата заключается в том, что во флакон с полученным реагентом на основе 1-тио-D-глюкозы вводят стерильным шприцем 4 мл раствора натрия пертехнетата, содержащего 500-1000 МБк технеция-99м, интенсивно перемешивают и инкубируют при комнатной температуре. Технический результат изобретения заключается в повышении радиохимической чистоты препарата, уменьшении количества операций при приготовлении, обеспечении стерильности и увеличении срока хранения. 2 н.п. ф-лы, 1 ил., 2 табл., 7 пр.

1. Способ получения реагента на основе 1-тио-D-глюкозы для изготовления меченного технецием-99м радиофармацевтического препарата, включающий приготовление раствора, содержащего 1-тио-D-глюкозу, олово дихлорид дигидрат и аскорбиновую кислоту, фильтрующую стерилизацию полученного раствора, последующую лиофилизацию и герметизацию реагента во флаконе, отличающийся тем, что готовят раствор, последовательно добавляя во флакон 1 мл 0,003-0,006 М солянокислого раствора 1-тио-D-глюкозы с концентрацией 1-2,5 мг/мл, 0,05 мл водного раствора аскорбиновой кислоты с концентрацией 8-10 мг/мл и 0,025-0,030 мл солянокислого 0,02М раствора дихлорида дигидрата олова с концентрацией 7 мг/мл, после фильтрующей стерилизации во флакон, лиофилизируют с предварительной заморозкой при температуре минус 28-30°C и досушивают при температуре плюс 25°C до полного удаления влаги, закрывают флакон резиновой пробкой и укупоривают алюминиевым колпачком.

2. Способ изготовления меченного технецием-99м радиофармацевтического препарата, включающий введение 4 мл элюата технеция-99м во флакон с реагентом на основе 1-тио-D-глюкозы для изготовления меченного технецием-99м радиофармацевтического препарата, полученным с использованием раствора из 1-тио-D-глюкозы, олова дихлорида дигидрата и аскорбиновой кислоты, последующую инкубацию, отличающийся тем, что во флакон с реагентом на основе 1-тио-D-глюкозы, полученный способом по п. 1, вводят стерильным шприцем раствор натрия пертехнетата, содержащего 500-1000 МБк технеция-99м, интенсивно перемешивают и инкубируют при комнатной температуре.