Перекрестная ссылка на родственные заявки
Настоящая заявка испрашивает приоритет по предварительной заявке на патент США № 62/785,373, поданной 27 декабря 2018 г., описание которой включено в настоящий документ путем данной ссылки.
Предпосылки создания изобретения
Дегенеративное заболевание митрального клапана у животного из семейства собачьих (DMVD) характеризуется медленно прогрессирующей дегенерацией клапанов, которая вызывает митральную регургитацию, а у некоторых собак — застойную сердечную недостаточность (CHF). Хотя собаки на ранней стадии, как правило, имеют длительный доклинический период, после достижения стадии CHF заболевание прогрессирует с большей скоростью, и средний срок выживания составляет менее 12 месяцев. Таким образом, большой интерес представляет вмешательство на ранней, доклинической стадии, и увеличение продолжительности жизни заболевших собак. В последние годы консенсусным комитетом, основанным Американским колледжем ветеринарной медицины внутренних болезней (ACVIM), была принята схема классификации DMVD у собак. Собаки, подверженные риску развития DMVD, но в остальном здоровые, считают стадией А; собак с шумом в сердце, обусловленным митральной регургитацией, но без клинических признаков CHF, относят к стадии B; собак с явными клиническими признаками CHF относят к стадии C. Собаки на стадии B далее разделяются на стадии В1 или В2 в зависимости от отсутствия или наличия ремоделирования сердца.
В настоящее время единственным лекарственным препаратом, имеющим доказанную эффективность при раннем доклиническом DMVD, является пимобанден, который, как и любое фармацевтическое лекарственное средство, имеет побочные эффекты. В настоящее время золотым стандартом для диагностики DMVD является эхокардиограмма, которая является не только дорогостоящей, но и требует участия узкого специалиста — ветеринарного кардиолога. Таким образом, сохраняется необходимость в поиске эффективных способов диагностики и лечения, лишенных недостатков существующих способов и видов лечения.
Изложение сущности изобретения
Настоящее описание, по существу, относится к композициям и способам диагностики и лечения дегенеративного заболевания митрального клапана у животного из семейства собачьих. В одном варианте осуществления способ диагностики ранней стадии дегенеративного заболевания митрального клапана у животного из семейства собачьих может включать измерение нормализованной относительной численности биомаркера, выбранного из группы, состоящей из Erysipelatoclostridium, Ruminococcaceae UCG014, Butyricicoccus, Faecalibacterium и их комбинаций, и определение наличия у животного из семейства собачьих ранней стадии дегенеративного заболевания митрального клапана, если Erysipelatoclostridium имеет нормализованную относительную численность от 0 до 0,5, Ruminococcaceae UCG014 имеет нормализованную относительную численность от 0 до 0,1, Butyricicoccus имеет нормализованную относительную численность от 0 до 0,1 или Faecalibacterium имеет нормализованную относительную численность от 0 до 0,1.
В другом варианте осуществления способ лечения или замедления прогрессирования дегенеративного заболевания митрального клапана у животного из семейства собачьих может включать введение животному из семейства собачьих композиции, причем композиция содержит пробиотик, выбранный из группы, состоящей из Butyricicoccus и Faecalibacterium.
В другом варианте осуществления корм для домашних животных может содержать белок, жир, углевод, волокна и пробиотик, выбранный из группы, состоящей из Butyricicoccus, Faecalibacterium и их комбинаций.
Дополнительные признаки и преимущества описаны в настоящем документе и будут очевидны после прочтения следующего подробного описания.
Подробное описание
Определения
При применении в настоящем описании и прилагаемой формуле изобретения формы единственного числа включают ссылки на множественное число, если из контекста явным образом не следует иное. Таким образом, например, упоминание «композиции» включает две или более композиций. Термин «и/или», применяемый в контексте «X и/или Y», следует интерпретировать как «X», или «Y», или «X и Y». В настоящем документе термины «пример» и «такой как», особенно если за ними следует перечисление терминов, имеют только примерный и иллюстративный характер и не являются исключающими или исчерпывающими.
Используемый в данном документе термин «приблизительно» следует понимать как относящийся к числам в числовом диапазоне, например в диапазоне от -10% до +10% от указанного числа, в пределах от -5% до +5% от указанного числа или в одном аспекте в пределах от -1% до +1% от указанного числа и в определенном аспекте в пределах от -0,1% до +0,1% от указанного числа. Помимо этого, следует понимать, что все числовые диапазоны в настоящем документе включают в себя все числа, целые и дробные, в пределах диапазона. Более того эти числовые диапазоны следует рассматривать как подтверждающие пункт формулы изобретения, относящийся к любому числу или подгруппе чисел в данном диапазоне. Например, описание «от 1 до 10» следует рассматривать как включающее диапазон «от 1 до 8», «от 3 до 7», «от 1 до 9», «от 3,6 до 4,6», «от 3,5 до 9,9» и т.д.
Если особо не указано иное, все процентные значения, приведенные в настоящем документе, выражены в расчете на сухое вещество композиции. Специалисту в данной области будет понятно, что термин «в расчете на сухое вещество» означает, что концентрацию или процентное значение ингредиента в композиции измеряли или определяли после удаления всей свободной влаги из композиции. При ссылке на pH значения соответствуют pH, измеренному при 25°C с помощью стандартного оборудования. «Количество» может представлять собой общее количество указанного компонента на порцию композиции или на определенную единицу композиции и/или может являться массовым процентным содержанием указанного компонента по массе в сухом состоянии. Кроме того, «количество» включает в себя нуль; например, упоминание количества соединения не обязательно означает то, что соединение присутствует, если только далее не следует диапазон, который исключает нуль.
Термины «продукт», «кормовой продукт» и «композиция корма» означают продукт или композицию, которые предназначены для приема внутрь животным и обеспечивают животное по меньшей мере одним питательным веществом. Дополнительно с этой целью данные термины означают, что продукт или композиция находятся в готовой к употреблению форме и не являются исключительно промежуточным продуктом, из которого готовят потребляемый продукт или композицию, хотя в некоторых вариантах осуществления могут быть добавлены другие пищевые композиции. Термин «корм для домашних животных» означает любую композицию корма, предназначенную для употребления домашним животным. Термин «домашнее животное» означает любое животное, которое может получать пользу или удовольствие от композиций, представленных в настоящем описании. Например, домашним животным может быть представитель птиц, бычьих, собачьих, лошадиных, кошачьих, козьих, волчьих, мышиных, овечьих и свиней, но домашним животным также может быть любое подходящее животное.
Термин «полноценная и сбалансированная» в отношении пищевой композиции означает пищевую композицию, которая содержит все известные необходимые питательные вещества в соответствующих количествах и пропорциях согласно рекомендациям признанных авторитетов в области питания животных и которая, следовательно, может служить единственным источником питания для поддержания жизни или стимуляции продуктивности без добавления дополнительных источников питания. Корм для домашних животных и пищевые композиции для животных со сбалансированным содержанием питательных веществ широко известны и широко применяются в данной области, например, полноценные и сбалансированные пищевые композиции, составленные в соответствии со стандартами, установленными Американской ассоциацией государственных инспекторов по качеству кормов для животных (AAFCO).
Термин «животное-компаньон» означает собаку или кошку. В одном варианте осуществления композиции и способы, описанные в настоящем документе, предназначены для собаки старшего возраста. Собаками старшего возраста считаются собаки в последние 25% их жизни. Продолжительность жизни собаки зависит от ее размера и/или ее породы, но для настоящего описания под собакой старшего возраста подразумевается собака, возраст которой составляет по меньшей мере 5 лет (например, по меньшей мере 6 лет, по меньшей мере 7 лет или по меньшей мере 8 лет).
В настоящем документе термин «нормализованная относительная численность» относится к количеству каждого микроорганизма, рассчитанному путем деления каждого количества на общее число последовательностей в каждом образце и извлечения квадратного корня.
Используемый в настоящем документе термин «ранняя стадия дегенеративного заболевания митрального клапана» относится к стадии B дегенеративного заболевания митрального клапана.
Используемый в настоящем документе термин «стадия А» относится к собакам, которые подвержены риску развития дегенеративного заболевания митрального клапана, но в остальном имеют здоровое сердце.
В настоящем документе термин «стадия B» относится к собакам с шумом в сердце, обусловленным митральной регургитацией, но без клинических признаков застойной сердечной недостаточности. «Стадия B» включает стадию В1 (отсутствие ремоделирования сердца и стадию В2 (наличие ремоделирования сердца).
В настоящем документе стадия C» относится к собакам, имеющим застойную сердечную недостаточность.
В настоящем документе термины «дегенеративное заболевание митрального клапана», «DMVD», «миксоматозное заболевание митрального клапана» и «MMVD» могут использоваться взаимозаменяемо и относятся к прогрессирующей дегенерации клапанов, которая вызывает митральную регургитацию и/или застойную сердечную недостаточность (CHF), и включают в себя стадию A, стадию B и стадию C.
«Смешанная» композиция имеет по меньшей мере только два компонента, имеющих по меньшей мере одну отличную для них характеристику, предпочтительно по меньшей мере влагосодержание и активность воды в контексте настоящего описания. Таким образом, описание композиции как «смешанной» не предполагает, что смешанная композиция была подвергнута обработке, иногда называемой «смешиванием», а именно смешиванию компонентов таким образом, чтобы они были неотличимы друг от друга, и в одном аспекте такой обработки избегают при смешивании одного компонента с другими компонентами с образованием смешанной композиции (например, смешивание сухого компонента с влажным или полувлажным компонентом). Дополнительно в связи с этим в смешанной композиции каждый из по меньшей мере двух компонентов, обладающих по меньшей мере одной отличной для них характеристикой, предпочтительно сохраняет свою отчетливую идентичность и внешний вид.
«Влажный корм» означает корм для домашних животных, имеющий влагосодержание от приблизительно 50% до приблизительно 90%, а в одном аспекте — от приблизительно 70% до приблизительно 90%. «Сухой корм» означает корм для домашних животных, имеющий влагосодержание менее приблизительно 20%, а в одном аспекте — менее приблизительно 15%, а в конкретном аспекте менее приблизительно 10%. Термин «полувлажный корм» означает корм для домашних животных, имеющий влагосодержание от приблизительно 20% до приблизительно 50%, а в одном аспекте — от приблизительно 25% до приблизительно 35%.
В настоящем документе «гранулы» используются в качестве синонима «ломтиков», при этом оба термина означают куски сухого или полувлажного корма для домашних животных, которые могут иметь форму пеллет или любую другую форму и могут быть изготовлены путем разрезания композиции корма на отдельные куски. Не имеющие ограничительного характера примеры гранул включают частицы, пеллеты, куски корма для домашних животных, обезвоженного мяса, аналога мяса, овощей и их комбинаций, а также снеки для домашних животных, такие как вяленое мясо или овощи, сыромятная кожа и печенье. «Аналог мяса» представляет собой мясной эмульсионный продукт, который по внешнему виду, консистенции и физической структуре напоминает куски натурального мяса.
Термин «эффективное количество» или «терапевтически эффективное количество» означает количество составного продукта настоящего изобретения, которое (i) лечит или предотвращает конкретное заболевание, патологическое состояние или расстройство, (ii) уменьшает, ослабляет или устраняет один или более симптомов конкретного заболевания, патологического состояния или расстройства, или (iii) предотвращает или отсрочивает появление одного или более симптомов конкретного заболевания, патологического состояния или расстройства, описанных в настоящем документе. В некоторых аспектах конкретное заболевание, состояние или расстройство может представлять собой дегенеративное заболевание митрального клапана.
Термин «диетическая добавка» означает продукт, который предполагается употреблять в дополнение к обычному рациону питания животного. Диетические добавки могут быть представлены в любой форме, например, в твердой, жидкой форме, в виде геля, таблеток, капсул, порошка и т.п. В одном аспекте они могут быть представлены в удобных дозированных формах. В некоторых вариантах осуществления они могут быть представлены в потребительских упаковках большого объема, например, в виде насыпных порошков, жидкостей, гелей или масел. В других вариантах осуществления добавки могут быть представлены в больших количествах для включения в другие виды продуктов, например в снеки, лакомства, батончики с добавками, напитки и т.п.
Термин «длительное введение» означает периоды многократного введения или потребления, превышающие один месяц. В определенных вариантах осуществления можно применять периоды, превышающие два, три или четыре месяца. Кроме того, можно применять более длительные периоды, которые превышают 5, 6, 7, 8, 9 или 10 месяцев. Можно также применять периоды более 11 месяцев или 1 года. В изобретение включены более длительные сроки применения, превышающие 1, 2, 3 или более лет. Что касается определенных стареющих животных, животное будет продолжать потребление на регулярной основе до конца своей жизни. Это также может называться потреблением в течение «продолжительных» периодов.
Термин «регулярная основа» означает по меньшей мере ежемесячную дозировку композиций или потребление композиций, а в одном аспекте означает по меньшей мере еженедельную дозировку. В определенных вариантах осуществления возможны более частые дозировка или потребление, например, два или три раза в неделю. Однако в других вариантах осуществления можно применять режимы, которые включают в себя по меньшей мере одно ежедневное потребление.
Дозы, выраженные в настоящем изобретении, представлены в миллиграммах на килограмм массы тела в сутки (мг/кг/сутки), если не указано иное.
Композиции, описанные в настоящем документе, могут не содержать любой элемент, который конкретно не описан в настоящем документе. Таким образом, описание варианта осуществления с применением термина «содержащий» включает в себя описание вариантов осуществления, «состоящих, по существу, из» и «состоящих из» указанных компонентов. Аналогичным образом способы, описанные в настоящем документе, могут не включать любую стадию, которая конкретно не описана в настоящем документе. Таким образом, описание варианта осуществления с применением термина «содержащий» включает в себя описание вариантов осуществления, «состоящих, по существу, из» и «состоящих из» указанных стадий. Любой вариант осуществления, описанный в настоящем документе, можно комбинировать с любым другим вариантом осуществления, описанным в настоящем документе, если непосредственно и явным образом не указано иное.
Если не определено иное, все технические и научные термины и любые сокращения в настоящем документе имеют общепринятое значение, понятное среднему специалисту в области применения изобретения. Хотя любые композиции, способы, изделия или другие средства или материалы, аналогичные или эквивалентные описанным в настоящем документе, могут применяться при реализации настоящего изобретения на практике, в настоящем документе описаны предпочтительные композиции, способы, изделия или другие средства или материалы.
Все патенты, заявки на патенты, публикации и другие ссылки, приведенные или упомянутые в настоящем документе, включены в настоящий документ путем ссылки в объеме, разрешенном законодательством. Описание этих ссылок служит только для обобщения утверждений, сделанных в настоящем документе. Никакие из таких патентов, заявок на патенты, публикаций, ссылок или каких-либо их частей не представляют собой предшествующий уровень техники в отношении настоящего изобретения, и право оспаривать точность и применимость таких патентов, заявок на патенты, публикаций или других ссылок специально защищено.
Варианты осуществления
В одном варианте осуществления способ диагностики ранней стадии дегенеративного заболевания митрального клапана у животного из семейства собачьих может включать измерение нормализованной относительной численности биомаркера, выбранного из группы, состоящей из Erysipelatoclostridium, Ruminococcaceae UCG014, Butyricicoccus, Faecalibacterium и их комбинаций, и определение наличия у животного из семейства собачьих ранней стадии дегенеративного заболевания митрального клапана, если Erysipelatoclostridium имеет нормализованную относительную численность от 0 до 0,5, Ruminococcaceae UCG014 имеет нормализованную относительную численность от 0 до 0,1, Butyricicoccus имеет нормализованную относительную численность от 0 до 0,1 или Faecalibacterium имеет нормализованную относительную численность от 0 до 0,1.
Как правило, диагностика ранней стадии дегенеративного заболевания митрального клапана может быть основана на измерении любого из Erysipelatoclostridium, Ruminococcaceae UCG014, Butyricicoccus и Faecalibacterium. Однако в одном аспекте диагностику можно проводить на основе Erysipelatoclostridium. В другом аспекте диагностику можно проводить на основе Ruminococcaceae UCG014. В еще одном аспекте диагностику можно проводить на основе Butyricicoccus. В еще одном аспекте диагностику можно проводить на основе Faecalibacterium. Кроме того, в одном варианте осуществления диагностику можно проводить на основании двух биомаркеров. В другом варианте осуществления диагностику можно проводить на основе трех биомаркеров. В еще одном варианте осуществления, диагностику можно проводить на основе всех четырех типов биомаркеров.
Как правило, такие биомаркеры могут включать в себя любые виды данного рода. Однако в одном аспекте Butyricicoccus может представлять собой Butyricicoccus spp. В другом аспекте Faecalibacterium может представлять собой Faecalibacterinm prausnitzii.
В другом варианте осуществления способ лечения или замедления прогрессирования дегенеративного заболевания митрального клапана у животного из семейства собачьих может включать введение животному из семейства собачьих композиции, причем композиция содержит пробиотик, выбранный из группы, состоящей из Butyricicoccus и Faecalibacterium. Как описано в настоящем документе, в одном аспекте Butyricicoccus может представлять собой Butyricicoccus spp. В другом аспекте Faecalibacterium может представлять собой Faecalibacterium prausnitzii.
По существу, пробиотик присутствует в терапевтически эффективном количестве. В одном аспекте пробиотик может присутствовать в количестве от 105 до 1012 колониеобразующих единиц (КОЕ). В других аспектах пробиотик может присутствовать в количестве от 105 до 109, от 107 до 109, от 109 до 1011 или даже от 109 до 1012. Как правило, композицию можно вводить достаточно для того, чтобы лечение было эффективным. В одном аспекте введение можно осуществлять на регулярной основе. В другом аспекте введение может быть длительным.
Введение композиции может включать любой способ доставки. В одном варианте осуществления композицию можно вводить в сочетании с композицией корма для домашних животных. В другом варианте осуществления композиция представляет собой корм для домашних животных. В еще одном варианте осуществления композиция может представлять собой саше или добавку, вводимую в сочетании с кормом для домашних животных. В еще одном варианте осуществления композиция может представлять собой саше или добавку, которые вводят отдельно от других композиций корма.
В другом варианте осуществления корм для домашних животных может содержать белок, жир, углевод, волокна и пробиотик, выбранный из группы, состоящей из Butyricicoccus, Faecalibacterium и их комбинаций. Как описано в настоящем документе, в одном аспекте Butyricicoccus может представлять собой Butyricicoccus spp. В другом аспекте Faecalibacterium может представлять собой Faecalibacterium prausnitzii. Как описано в настоящем документе, пробиотик, по существу, присутствует в терапевтически эффективном количестве. В одном аспекте пробиотик может присутствовать в количестве от 105 до 1012 колониеобразующих единиц (КОЕ). В других аспектах пробиотик может присутствовать в количестве от 105 до 109, от 107 до 109, от 109 до 1011 или даже от 109 до 1012.
Как описано в настоящем документе, корм для домашних животных может содержать пробиотик в виде одной композиции или может быть представлен в виде множества композиций, которые можно вводить в сочетании или по отдельности. В одном варианте осуществления композиция корма для домашних животных может содержать упакованный корм для домашних животных и упакованный пробиотик, которые можно добавлять в корм для домашних животных. В другом варианте осуществления корм для домашних животных может содержать пробиотик, введенный в его состав как единой композиции.
Настоящие композиции корма для домашних животных, по существу, представляют собой полные и сбалансированные корма для домашних животных из семейства собачьих. В различных вариантах осуществления композиции корма для домашних животных могут содержать от приблизительно 15% до приблизительно 50% неочищенного белка. Неочищенные белковые материалы могут содержать растительные белки, например, соевую муку, соевый белковый концентрат, кукурузную глютеновую муку, пшеничный глютен, муку из жмыха семян хлопчатника или арахисовую муку, или животные белки, например казеин, альбумин или мясной белок. Примеры мясного белка, используемого в целях настоящего изобретения, включают свинину, баранину, конину, мясо птицы, рыбу и их смеси.
Дополнительно композиции могут содержать от приблизительно 5% до приблизительно 40% жира. Композиции могут дополнительно содержать источник углеводов. Композиции могут содержать от приблизительно 15% до приблизительно 60% углеводов. Примеры подходящих углеводов включают зерно или крупы, такие как рис, кукуруза, майло, сорго, люцерна, ячмень, соевые бобы, канола, овес, пшеница и их смеси. Композиции могут необязательно содержать другие материалы, такие как сухая молочная сыворотка и другие побочные продукты переработки молока.
В некоторых вариантах осуществления содержание золы в композиции входит в диапазон от менее 1% до приблизительно 15%, а в одном из аспектов — от приблизительно 5% до приблизительно 10%.
Влагосодержание может варьироваться в зависимости от характера композиции. В одном из вариантов осуществления композиция может представлять собой полноценный корм для домашних животных со сбалансированным содержанием питательных веществ. В этом варианте осуществления корм для домашних животных может представлять собой «влажный корм», «сухой корм» или корм со средним влагосодержанием. «Влажным кормом» называют корм для домашних животных, который, как правило, продается в банках или в пакетах из пленки и имеет влагосодержание, как правило, в диапазоне от приблизительно 50% до приблизительно 90% и в одном аспекте от 70% до 90%. «Сухим кормом» называют корм для домашних животных, по композиции похожий на влажный корм, но имеющий ограниченное влагосодержание, как правило, в диапазоне от приблизительно 5% до приблизительно 15% или 20%, который, следовательно, представлен, например, в форме небольших гранул, похожих на галеты. В одном варианте осуществления композиции могут иметь влагосодержание от приблизительно 5% до приблизительно 20%. Сухие пищевые продукты включают разные продукты с различным влагосодержанием, благодаря чему они относительно долго хранятся и являются устойчивыми к бактериальному и грибковому повреждению и инфицированию. Также включены сухие пищевые композиции, представляющие собой экструдированные продукты питания, например, корма для домашних животных или снеки для человека или животных-компаньонов. «Полувлажный корм» означает корм для домашних животных, имеющий влагосодержание от приблизительно 20% до приблизительно 50% и в одном аспекте — от приблизительно 25% до приблизительно 35%.
Композиции также могут содержать один или более источников клетчатки. Термин «клетчатка» включает в себя все источники так называемых «балластных веществ» в продуктах, независимо от того, перевариваются они или нет, растворяются или нет, сбраживаются или нет. Клетчатку можно получать из растительных источников, таких как морские растения, но могут применяться и микробиологические источники. Может применяться множество растворимых и нерастворимых типов пищевых волокон, которые известны специалистам в данной области. Источниками пищевых волокон могут служить свекловичный жом (из сахарной свеклы), аравийская камедь, камедь талха, псиллиум, рисовые отруби, камедь рожкового дерева, цитрусовый жом, пектин, фруктоолигосахарид, олигофруктоза с короткой цепью, маннанолигофруктоза, соевые пищевые волокна, арабиногалактан, галактоолигосахарид, арабиноксилан или их смеси.
В альтернативном варианте осуществления источником пищевых волокон могут служить сбраживаемые пищевые волокна. Ранее было описано, что сбраживаемые пищевые волокна благотворно влияют на иммунную систему животного-компаньона. Сбраживаемая клетчатка или другие композиции, известные специалистам в данной области, которые содержат пребиотики для улучшения роста пробиотиков в кишечнике, также могут вводиться в состав композиции для увеличения пользы, которую представляет настоящее изобретение для иммунной системы животного.
В каждой из этих композиций и способов композиция корма для домашних животных может представлять собой влажный, полувлажный или сухой корм. В варианте осуществления композиция корма для домашних животных может представлять собой один или более компонентов смешанной композиции. В некоторых вариантах осуществления композиция корма для домашних животных представляет собой гранулу, а в других вариантах осуществления композиция корма для домашних животных представляет собой аналог мяса.
Описанные в настоящем документе композиции корма для домашних животных могут содержать растительное масло, ароматизатор, краситель и воду. Подходящие растительные масла включают в себя соевое масло, кукурузное масло, хлопковое масло, подсолнечное масло, масло канолы, арахисовое масло, сафлоровое масло и т.п. Примеры подходящих ароматизаторов включают в себя дрожжи, твердый жир, переработанную муку животного происхождения (например, из мяса птицы, говядины, баранины и свинины), вкусоароматические экстракты или смеси (например, запеченную говядину), животные дигесты и т.п. Подходящие красители включают в себя красители для пищевой, фармацевтической и косметической промышленности (FD&C), такие как синий № 1, синий № 2, зеленый № 3, красный № 3, красный № 40, желтый № 5, желтый № 6 и т.п.; натуральные красители, такие как карамельный краситель, аннато, хлорофиллин, кошениль, бетанин, куркума, шафран, паприка, ликопин, сок бузины, пандан, клитория и т.п.; диоксид титана; и любой подходящий пищевой краситель, известный специалисту в данной области.
Описанная в настоящем документе композиция корма для домашних животных может необязательно включать в себя дополнительные ингредиенты, такие как другие зерна и/или другие крахмалы в качестве дополнения или альтернативы муке, аминокислоты, пищевые волокна, сахара, животные масла, ароматические вещества, другие масла в качестве дополнения или альтернативы растительному маслу, увлажнители, консерванты, многоатомные спирты, соли, ингредиенты для ухода за полостью рта, антиоксиданты, витамины, минеральные вещества, пробиотические микроорганизмы, биологически активные молекулы или их комбинации.
Подходящие крахмалы включают в себя зерно, такое как кукуруза, рис, пшеница, ячмень, овес, соя и т.п., а также смеси этих зерен, и они могут быть по меньшей мере частично включены в любую муку. Подходящие увлажнители включают в себя соль, сахара, пропиленгликоль и многоатомные гликоли, такие как глицерин и сорбит, и т.п. Подходящие ингредиенты для ухода за полостью рта включают в себя питательный концентрат люцерны, содержащий хлорофилл, бикарбонат натрия, фосфаты (например, трикальцийфосфат, кислые пирофосфаты, тетранатрийпирофосфат, метафосфаты и ортофосфаты), перечную мяту, гвоздику, петрушку, имбирь и т.п. Примеры подходящих антиоксидантов включают в себя бутилированный гидроксианизол (ВНА) и бутилированный гидрокситолуол (BHT), витамин Е (токоферолы) и т.п.
Не имеющие ограничительного характера примеры витаминов, которые можно применять, включают в себя витамин A, комплекс витаминов B (например, B1, B2, B6 и B12), витамины C, D, E и K, ниацин и кислотные витамины, такие как пантотеновая кислота, фолиевая кислота и биотин. Не имеющие ограничительного характера примеры подходящих минеральных веществ включают в себя кальций, железо, цинк, магний, йод, медь, фосфор, марганец, калий, хром, молибден, селен, никель, олово, кремний, ванадий, бор и т.п.
Как описано в настоящем документе, композиции могут дополнительно содержать пребиотики или другие пробиотики. Пробиотики — это живые микроорганизмы, которые благотворно влияют на профилактику и лечение конкретных медицинских состояний при пероральном приеме. Считается, что пробиотики оказывают биологическое действие в результате явления, известного как колонизационная резистентность. Пробиотики ускоряют процесс, во время которого местная анаэробная флора ограничивает концентрацию потенциально вредных (большей частью аэробных) бактерий в пищеварительном тракте. Другие принципы действия, например, снабжение ферментами или влияние на активность ферментов в желудочно-кишечном тракте, также могут объяснить некоторые другие функции, которые приписывают пробиотикам. Пребиотики — это неперевариваемые пищевые ингредиенты, которые оказывают благотворное влияние на организм-хозяина путем выборочного стимулирования роста и/или активности бактерий в толстой кишке. К пребиотикам относятся фруктоолигосахариды (ФОС), ксилоолигосахариды (КОС), галактоолигосахариды (ГОС) и манноолигосахариды (как правило, в кормах для домашних животных, но не для питания человека). Пребиотик фруктоолигосахарид (ФОС) в натуральном виде встречается во многих продуктах питания, например, в пшенице, репчатом луке, бананах, меде, чесноке и луке-порее. ФОС также можно выделять из корня цикория или ферментативным путем синтезировать из сахарозы. Сбраживание ФОС в толстой кишке оказывает разнообразное физиологическое воздействие, включая увеличение количества бифидобактерий в толстой кишке, повышение поглощения кальция, увеличение веса фекальных масс, сокращение времени прохождения пищи по желудочно-кишечному тракту и, возможно, снижение уровня липидов в крови. Пробиотики усиливают системный клеточный иммунный ответ и могут использоваться в качестве диетической добавки для повышения природного иммунитета у взрослых, не имеющих других заболеваний, или обеспечивать другие преимущества, описанные в настоящем документе. Общеизвестные пробиотики включают многие типы бактерий, но в большинстве случаев их выбирают из четырех родов бактерий: Lactobacillus acidophillus, Bifidobacteria, Lactococcus и Pediococcus. К полезным видам также относятся Enterococcus и Saccharomyces. Специалист в данной области определяет количество пробиотиков и пребиотиков для введения животному на основании типа и характеристик пребиотика и пробиотика, а также типа и характеристик животного, например, с учетом возраста, массы, общего состояния здоровья, пола, степени микробного истощения, наличия вредных бактерий и рациона питания животного. Как правило, для поддержания здорового состояния кишечной микрофлоры пробиотики вводят животному в количестве от приблизительно одного до приблизительно двадцати миллиардов колониеобразующих единиц (КОЕ) в сутки, а в одном аспекте — от приблизительно 5 миллиардов до приблизительно 10 миллиардов живых бактерий в сутки. Как правило, пребиотики вводят в количествах, достаточных для положительного стимулирования полезной микрофлоры в кишечнике и обеспечения размножения этих благоприятных бактерий. Типичные количества составляют от приблизительно одного до приблизительно 10 грамм на порцию или от приблизительно 5 до приблизительно 40% рекомендованной для животного ежедневной дозы клетчатки. Пробиотики и пребиотики можно вводить в состав композиции любыми подходящими способами. Например, эти вещества можно смешивать с композицией или наносить на поверхность композиции, например, путем опрыскивания или посыпания. Если эти вещества входят в состав комплекта, их можно смешивать с другими материалами или добавлять в их собственную упаковку.
Не имеющие ограничительного характера примеры подходящих консервантов включают сорбат калия, сорбиновую кислоту, метилпарагидроксибензоат натрия, пропионат кальция, пропионовую кислоту и их комбинации.
Определенные количества каждого дополнительного ингредиента в описанных в настоящем документе композициях корма для домашних животных будут зависеть от разнообразных факторов, таких как ингредиент, включенный в первый пищевой материал и любой второй пищевой материал, вид животного, возраст, масса тела, общее состояние здоровья, пол и рацион животного, норма потребления для животного, цель, с которой кормовой продукт дают животному, и т.п. Таким образом, компоненты и их количества могут значительно варьироваться.
Например, количество любого из вышеупомянутых ингредиентов может быть уменьшено или увеличено на основании предполагаемого влияния на дегенеративное заболевание митрального клапана.
Примеры
Приведенные ниже примеры, не имеющие ограничительного характера, иллюстрируют варианты осуществления настоящего описания.
Пример 1. Исследование MMVD у животных из семейства собачьих
Собирали образцы кала у четырех групп собак: группа 1 — собаки без признаков сердечного заболевания; группа 2 — собаки с миксоматозным заболеванием митрального клапана стадии В1 (MMVD); группа 3 — собаки с MMVD стадии В2; и группа 4 — собаки с MMVD стадии C. Собак обследовали и классифицировали на основании врачебного осмотра и эхокардиограммы, проведенных сертифицированными ветеринарными кардиологами в соответствии с консенсусными положениями Американского колледжа ветеринарной медицины внутренних болезней (ACVIM). Собаки в четырех группах соответствовали по возрасту, полу или балльной оценке физического состояния (BCS). Исключали собак со следующими состояниями: 1) получавшие антибиотики в течение последних 60 дней, 2) с активной диареей или рвотой, 3) с серьезными системными заболеваниями, такими как рак, сахарный диабет, почечная недостаточность или системная гипертензия, 4) с врожденными заболеваниями сердца и другими отклонениями со стороны сердца, 5) значением BCS, большим или равным 8 или меньшим или равным 3, 6) моложе 7 лет. Регистрировали историю приема лекарственного препарата.
Свежие фекалии собирали в течение 30 минут после дефекации и доставляли в лабораторию в течение 6 часов. По три аликвоты 1–2 грамма от каждой собаки хранили в морозильной камере при -80°C до использования.
Фекальную ДНК экстрагировали с использованием набора для выделения ДНК PowerFecal (MO BIO Laboratories, Inc, Carlsbad, CA, США) в соответствии с протоколом производителя и количественно оценивали с использованием анализа PicoGreen (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, США). Получение библиотеки 16S рДНК проводили в соответствии с руководством Illumina по получению библиотеки метагеномного секвенирования 16S. Последовательности прямого и обратного праймеров для ПЦР 16S-ампликона были следующими:
5’TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAGCCTACGGGNGGCWGCAG и 5’ GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAGGACTACHV GGGTATCTAATCC соответственно. Секвенирование проводили с использованием секвенатора Illumina MiSeq с набором реагентов v2 и формата 500 циклов с получением парных концевых прочтений размером 2 x 250 пар оснований (п. о.).
Всего для 43 образцов было получено 11 498 568 прочтений с медианным покрытием 54 127. Все парные концевые прочтения объединяли и собирали в одно прочтение с помощью программного обеспечения PEAR с настройками по умолчанию. В результате получали 11 434 008 собранных прочтений, что давало коэффициент сборки 99,4%. Собранные последовательности с менее чем 350 основаниями или более чем 475 основаниями отбрасывали. Все последовательности из разных образцов объединяли с получением единого файла. Избыточные последовательности удаляли с получением 3 250 951 уникальных последовательностей. Дереплицированные последовательности сортировали и кластеризовали в операбельные таксономические единицы (OTU) на основе минимальной 97% идентичности с применением алгоритма кластеризации UPARSE-OTU. Химерные последовательности обнаруживали и отбрасывали с использованием алгоритма UCHIME (версия 4.2.40). Таблица OTU была построена с использованием 952 OTU.
Назначение таксономии выполняли с использованием алгоритма поиска K ближайших соседей на основе K-меров, реализованного в программном обеспечении Mothur (версия 1.39.5), путем поиска файла эталонной последовательности в базе данных Greengenes (выпуск от августа 2013 г.).
Выравнивание последовательностей проводили с использованием программы PyNAST. Филогенетическое дерево строили из выровненных последовательностей с использованием программы FastTree. Для назначения таксономии, таблицы OTU и филогенетического дерева вызывали функции QIIME (версия 1.9.1).
Предполагаемые бактериальные метагеномные функции присваивали с использованием PICRUSt (Phylogenetic Investigation of Communities by Reconstruction of Unobserved States — филогенетическое исследование сообществ путем реконструкции ненаблюдаемых состояний) по данным о численности генов 16S рРНК. Перед прогнозированием метагеномных функций таблицу OTU нормализовали путем деления каждого OTU на известную или прогнозируемую численность копий 16S. Таблицу OTU нормализовали путем расчета относительной численности, в ходе которой количество каждого признака делили на общее число последовательностей в каждом образце и извлекали квадратный корень. Удаляли таксоны с 90% или более нулей или относительной численностью менее 0,01% во всех образцах.
Индексы как альфа-, так и бета-разнообразия рассчитывали в QIIME. Таблицу OTU сначала очищали путем субдискретизации полной таблицы OTU на глубину покрытия 20 000 последовательностей на образец со 100 итерациями. Для каждой субдискретизованной таблицы OTU рассчитывали индекс филогенетического разнообразия Фейта и брали среднее по выборке значение каждого показателя.
Дифференциально многокопийные пути по Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) идентифицировали с помощью программного обеспечения для определения размера эффектов линейным дискриминантным анализом (LDA) (LEfSe). Дифференциально многокопийные таксоны идентифицировали с помощью непараметрического рангового критерия. Рассчитывали коэффициенты ранговой корреляции Спирмена между ключевыми эхокардиографическими показателями и дифференциально многокопийными таксонами.
Разнообразие и богатство кишечной микробиоты
Филогенетическое разнообразие (PD) является филогенетическим аналогом таксонного богатства. Собаки на стадии А имеют отличающийся индекс PD по сравнению с собаками на стадиях В1, В2 или С. Кроме того, соответственно, собаки на стадии А имеют большее количество родов (116), чем собаки на стадиях В1, В2 и С (99, 81 и 90 соответственно).
Дифференциально многокопийные таксоны
Четыре рода, Erysipelatoclostridium, Ruminococcaceae UCG014, Butyricicoccus и Faecalibacterium, демонстрировали более высокую численность у собак на здоровой стадии А, чем у собак с различными стадиями DMVD (таблица 1). Интересно, что их численность характеризовалась обратной корреляцией с размером левой стороны сердца, что указывает на то, что при увеличении сердца численность бактерий уменьшается.
Таблица 1
* Нормализованная относительная численность
Численность Erysipelatoclostridium уменьшалась при увеличении диаметра левого желудочка.
Численность Butyricicoccus характеризовалась обратной корреляцией с отношением левого предсердия к корню аорты и диаметром левого желудочка.
Численность Faecalibacterium prausnitzii уменьшалась при увеличении диаметра левого желудочка.
Ruminococcaceae UCG014 (неохарактеризованный род — https://www.arb-silva.de/browser/ssu/silva/X98011/) имел высокую численность у здоровых собак (стадия А) по сравнению с собаками с DMVD. Численность демонстрировала обратную корреляцию с диаметром левого предсердия, отношением левого предсердия к корню аорты и диаметром левого желудочка.
Прогнозирование метагеномных функций
Два метагеномных пути, биосинтез кардиолипина и разложение валина, были избыточно представлены у собак с DMVD стадии В2 по сравнению со здоровыми собаками стадии А, тогда как биосинтез глутамина/глутамата и биосинтез триптофана были недостаточно представлены у здоровых собак по сравнению с собаками стадии В2.
В совокупности разнообразие кишечной микробиоты в кишечнике здоровых собак выше, чем у собак с DMVD. Четыре рода бактерий, Erysipelatoclostridium, Ruminococcaceae UCG014, Butyricicoccus, и Faecalibacterium, имели большую численность у здоровых собак, чем у собак с DMVD.
Следует понимать, что специалистам в данной области будут очевидны различные изменения и модификации предпочтительных на данный момент вариантов осуществления, описанных в настоящем документе. Такие изменения и модификации можно вносить без отступления от сущности и объема настоящего объекта изобретения и без уменьшения его предполагаемых преимуществ. Следовательно, предполагается, что прилагаемая формула изобретения охватывает такие изменения и модификации.
Настоящее изобретение относится к способу для диагностики дегенеративного заболевания митрального клапана у животного из семейства собачьих. Способ включает измерение нормализованной относительной численности Faecalibacterium в качестве биомаркера и по меньшей мере еще одного биомаркера, выбранного из группы, состоящей из Erysipelatoclostridium, Butyricicoccus, Ruminococcaceae UCG014 и их комбинаций; и определение наличия у животного из семейства собачьих ранней стадии DMVD, если Faecalibacterium имеет нормализованную относительную численность от 0 до 0,1, а если указанное значение равно 0, то определяют у животного стадию застойной сердечной недостаточности (CHF), и дополнительное определение указанной ранней стадии DMVD на основании дополнительных биомаркеров, выбранных из группы, состоящей из Ruminococcaceae UCG014, Butyricicoccus и Erysipelatoclostridium, где Ruminococcaceae UCG014 имеет нормализованную относительную численность от 0 до 0,1 и при этом животное не имеет клинических симптомов стадии CHF, где Butyricicoccus имеет нормализованную относительную численность от 0 до 0,1 и при этом животное не имеет клинических симптомов стадии CHF и где Erysipelatoclostridium имеет нормализованную относительную численность от 0 до 0,5 и при этом животное не имеет клинических симптомов стадии CHF. Изобретение ползволяет эффективно диагностировать на ранней стадии заболевание митрального клапана у животного семейства собачьих. 2 з.п. ф-лы, 1 табл., 1 пр.
1. Способ диагностики ранней стадии дегенеративного заболевания митрального клапана (DMVD) у животного из семейства собачьих, включающий:
измерение нормализованной относительной численности Faecalibacterium в качестве биомаркера и по меньшей мере еще одного биомаркера, выбранного из группы, состоящей из Erysipelatoclostridium, Butyricicoccus, Ruminococcaceae UCG014 и их комбинаций; и
определение наличия у животного из семейства собачьих ранней стадии DMVD, если Faecalibacterium имеет нормализованную относительную численность от 0 до 0,1, а если указанное значение равно 0, то определяют у животного стадию застойной сердечной недостаточности (CHF), и
дополнительное определение указанной ранней стадии DMVD на основании дополнительных биомаркеров, выбранных из группы, состоящей из:
где Ruminococcaceae UCG014 имеет нормализованную относительную численность от 0 до 0,1 и при этом животное не имеет клинических симптомов стадии CHF,
где Butyricicoccus имеет нормализованную относительную численность от 0 до 0,1 и при этом животное не имеет клинических симптомов стадии CHF
и где Erysipelatoclostridium имеет нормализованную относительную численность от 0 до 0,5 и при этом животное не имеет клинических симптомов стадии CHF.
2. Способ по п.1, в котором определение основано на трех биомаркерах.
3. Способ по п.1, в котором определение основано на всех четырех биомаркерах.
| US 20180064140, 08.03.2018 | |||
| СПОСОБЫ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ КЛАПАНОВ | 2013 |
|
RU2667634C2 |
| US 20160237495 A1, 18.08.2016. | |||
