Способ лечения субклинического мастита у лактирующих коров Российский патент 2024 года по МПК A61K33/38 A61P31/00 A61D99/00 

Изобретение относится к области ветеринарной медицины, в частности к ветеринарному акушерству, и может быть использовано для лечения субклинического мастита у коров в период лактации.

21 января 2020 года была утверждена Доктрина продовольственной безопасности РФ. Успех ее осуществления напрямую зависит от наращивания поголовья здоровых животных. Молочная продуктивность коров значительно возросла за последние годы, что сделало молочную железу еще более подверженной заболеванию маститом, особенно субклиническому течению, которое у коров регистрируется повсеместно. Степень распространения его находится в прямой зависимости от условий кормления, содержания, эксплуатации животных, санитарного состояния окружающей среды, доильного оборудования, сезона года, морфофункциональных особенностей вымени, генетических факторов, состояния защитных сил организма, квалификации обслуживающего персонала [Студенцов А.П. Ветеринарное акушерство и гинекология / А.П. Студенцов. - М. : Колос, 1986. - 480 с., Слободяник В.И. Практическое руководство по борьбе с маститами коров : руководство / В.И. Слободяник, Н.Т. Климов. - Воронеж, 2012. - 87 с., Родин И.А. Маститы коров : этиология, лечение, профилактика : монография / И.А Родин. - Краснодар, 1999. - С. 29-102, Конопельцев И.Г. Воспаление вымени у коров : учебное пособие / И.Г. Конопельцев, В.Н. Шулятьев. - Киров-Санкт-Петербург : ВГСА, 2010. - 353 с.].

Из-за отсутствия клинических признаков субклинический мастит своевременно не диагностируют. Субклиническое и длительное течение болезни приводит к атрофии пораженных долей вымени. В результате животные теряют хозяйственную ценность, что приводит к преждевременной выбраковке коров. [Иммунологические аспекты физиологии и патологии молочной железы коров : монография / под общ. ред. В.И. Слободяник. - Таганрог : Издательский центр ТГПИ, 2009. - 375 с.].

Основной причиной субклинического мастита является разнообразная условно патогенная и патогенная микрофлора. Из секрета пораженных долей вымени выделено более 100 видов различных микроорганизмов. Указанная микрофлора непосредственно участвует и в возникновении, развитии и проявлении неспецифического воспаления матки у коров, а также при желудочно-кишечных болезнях у новорожденных телят [Роль микробного фактора в возникновении и развитии мастита у коров / Н.Т. Климов [и др.] // Ветеринария. - 2008. - № 12. - С. 33-36, Петров В.А. Роль микробного фактора в этиопатогенезе и частота одновременно протекающих субклинического мастита и эндометрита у коров / В.А. Петров, А.В. Парахин // Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях : Матер. Междунар. науч.- практ. конф. - Воронеж, 2002. - С. 483-485].

Еще в 2017 году ВОЗ был опубликован первый в истории список наиболее устойчивых бактерий к антибиотикам. В каталог вошло 12 патогенных микробов, представляющих потенциальную угрозу жизни человека. Публикация списка антибиотикорезистентных бактерий была направлена на стимуляцию проведения исследований и разработок новых противомикробных препаратов.

Применяемые и новые разрабатываемые способы и средства лечения маститов у лактирующих коров содержат антибиотики, сульфаниламиды, нитрофураны и их сочетания, что на сегодняшний день является недопустимым, т.к. антибиотики длительное время выделяются с секретом леченых долей и могут попадать в общий удой, вызывать у потребителей молока дисбактериозы, аллергические реакции, снижать качество изготавливаемой продукции из молока.

Известен способ лечения мастита у коров в период лактации, содержащий два антибиотика группы пенициллинов, один из которых клоксациллина натриевая соль, и основу, отличающийся тем, что в качестве второго антибиотика используют амоксициллина тригидрат, в качестве основы - эмульгатор Рикэн ДМГ и моноглицерид дистилированный, и дополнительно содержит противовоспалительное средство преднизолон [патент RU (11) 2 698 820 (13) C1, 2019 г.]

Недостатком данного способа терапии является риск формирования резистентности микрофлоры к антибиотикам группы пенициллинов, выделение их с молоком.

Известен способ лечения субклинического мастита у коров с подкожным введением плаценты денатурированной эмульгированной в дозе 20 мл на животное. Дополнительно вводят 15,0% раствор АСД 2Ф на тетрагидровите по следующей схеме: плацента денатурированная эмульгированнная на 1, 3 и 5 дни лечения, 15,0% раствор АСД 2Ф на тетрагидровите в дозе 10,0 мл внутримышечно на 2, 4 и 6 дни лечения [патент RU (11) 2 441 660 (13) C1, 2012г]. Недостатком данного способа лечения мастита у коров является невысокая его эффективность.

Известен способ лечения субклинического мастита у коров, где в качестве лекарственных препаратов используются Риботан и Лексофлон в половинных суточных дозах и вводятся интранодулярно в надвыменные лимфатические узлы 1 раз в сутки, наружно наносят Травма-гель 2 раза в сутки, при этом терапию проводят в течение 3 дней [патент RU (11) 2 652 354 (13) C1, 2018 г.].

Недостатки способа в том, что процесс трудоемкий, необходимо умение и навыки правильного определения местоположения надвымянных лимфоузлов и что лекарственные препараты вводятся в большом объеме через одну иглу.

Известен способ терапии мастита коров комплексным препаратом, [патент РФ 2 763998 от 12.01.2022 Бюл. №2] который включает интрацистернальное введение препарата, в качестве действующих веществ содержит наночастицы серебра арговит, димексид в виде 10,0% и 5,0 % водных растворов, вводимых интрацистернально в дозе 10,0 мл 1 раз в сутки в течение 2-3 дней. Недостатком известного способа лечения мастита является синтетический компонент – димексид, который способствует усовершенствованию лечебных мероприятий, но во время терапии обнаруживаются ингтбирующие вещества в молоке и попадают в системный кровоток коров, большой объем вводимого препарата, что может вызвать раздражение вымени.

Наиболее близким техническим решением, взятым за прототип, является препарат для лечения коров с субклиническим маститом [патент РФ 3 2532407 от 10.11.2014 Бюл. №31] которое включает интрацистернальное введение препарата, в качестве действующих веществ содержит наночастицы серебра. Стабилизированные субмикронными частицами диоксид титана, поли – N- винилпирролидона-2, воду полученные электрохимическим способом. Препарат вводят в молочный канал дозе 10,0 мл дважды в сутки с интервалом 12 часов в течение 2-4 дней.

Недостатком известного способа лечения мастита является, низкая терапевтическая эффективность, большая кратность введения и большой объем вводимого препарата, что может вызвать раздражение вымени, высокая стоимость препарата, связанная со способом его изготовления.

Задачей изобретения является устранение вышеуказанных недостатков при терапии субклинического мастита у лактирующих коров.

Технический результат изобретения - повышение эффективности лечения и сокращение сроков излечения животных.

Технический результат достигается тем, что в способе лечения мастита у лактирующих коров, включающем интрацистернальное введение раствора восстановленного наносеребра (1,0 мл), разведенного 1:4 на теплом стерильном изотоническом растворе натрия хлорида (4,0 мл) с соблюдением правил асептики, в дозе 5,0 мл один раз в сутки в течение 3-5 дней и трансдермальное нанесение бальзама с наночастицами серебра «Серебряная помощь» ежедневно в течение 5 дней.

Раствор восстановленного наносеребра представляет собой коллоидную форму восстановленного серебра – это мельчайшие частицы металлического серебра нано размеров, которые на своей поверхности несут активные ионы серебра, полученного из нитрата серебра комбинированным физико-химическим способом. Способ включает растворение нитрата серебра, удаление нитрат-ионов и восстановление ионов серебра 1,0%-ным раствором глюкозы в ультразвуковом поле. Раствор обладает широким спектром антимикробного действия в отношении грамположительных и грамотрицательных азробных и анаэробных. Спорообразующих в виде монокультур и микробных ассоциаций.

Стерильный изотонический раствор натрия хлорида - препарат для регидратации и дезинтоксикации для парентерального применения, является растворителем. Ионы натрия и хлора являются важнейшими неорганическими компонентами внеклеточной жидкости, поддерживающими соответствующее осмотическое давление плазмы крови и внеклеточной жидкости. Изотонический раствор восполняет дефицит жидкости в организме при дегидратации [Описание препарата Натрия хлорид (Sodium chloride) основано на официально утвержденной инструкции по применению и утверждено компанией–производителем. Натрия хлорид (Sodium chloride) - описание и инструкция предоставлены справочником лекарственных средств «Видаль»].

Бальзам с наночастицами серебра «Серебряная помощь» характеризуется следующими свойствами: дезинфицирующими, противомикробными и противовирусными. Отсутствие токсичности. (Сертификат соответствия рег.номер ROCC RU 32001.04ИБФ1.ОСП18.10802).

Новизна заявляемого способа лечения субклинического мастита обусловлена тем, что частицы серебра коллоидного, входящие в раствор и крем «Серебрянная помощь» подавляют деятельность ферментов, обеспечивающих кислородный обмен у микроорганизмов, нарушают целостность клеточных стенок бактерий и грибов, что приводит к их гибели, применяемые в оптимальных количествах, обеспечивают сокращение сроков лечения и применение его в период лактации у коров.

Способ лечения мастита у коров осуществляют следующим образом.

Предварительно готовят рабочий раствор восстановленного наносеребра (1,0 мл), разведенного 1:4 на теплом стерильном изотоническом растворе натрия хлорида (4,0 мл) с соблюдением правил асептики. Для приготовления раствора берут компоненты при следующем соотношении 1:4:

-1,0 мл 1,0% - ного раствора восстановленного наносеребра;

-4,0 мл раствор натрия хлорида.

После удаления секрета из пораженной доли вымени применяют интрацистернально в дозе 5, 0 мл через 24 часа в течение 3-5 дней, до выздоровления и тонким слоем применяют наружно в виде растираний Бальзам с наночастицами серебра «Серебряная помощь» один раз в сутки, в течение 5 дней.

Сущность технического решения поясняется примерами.

Пример 1. Проведены исследования действия раствора восстановленного наносеребра на ткани здоровой молочной железы при применении раствора в соотношении 1:4.

Для опыта отобрали 10 здоровых коров по принципу пар-аналогов черно-пестрой породы. Испытуемую дозу раствора с соблюдением правил асептики применяли внутрицистернально пятикратно в здоровые доли вымени. Контролем служили симметричные здоровые доли вымени, в которые раствор не вводили. О действии раствора восстановленного наносеребра на ткани молочной железы судили по наличию (отсутствию) местной воспалительной реакции, изменению органолептических свойств секрета, изменению содержания соматических клеток в секрете, которое определяли по методу Прескотта-Брида в следующие сроки: до введения и через 24, 48, 72, 96 и 240 ч после интацистернального введения. Полученный в ходе опыта цифровой материал обобщен в таблице 1.

Таблица 1 - Динамика соматических клеток в молоке здоровых коров

Состояние
долей
вымени Количество
долей Содержание соматических клеток (млн./мл) до введения раствора После интацистернального введения раствора спустя, ч 24 48 72 96 240 Здоровая
(опытная гр.) 10 0,280±
0,066^* 0,300±
0,084 0,228±
0,077 0,192±
0,075 0,156±
0,035 0,122±
0,044^* Здоровая
(контроль) 10 0,250±
0,072^* 0,260±
0,055 0,232±
0,077 0,244±
0,063 0,266±
0,038 0,214±
0,047^*

^*р> 0,05

^**р< 0,001

Подсчет количества соматических клеток в 1,0 мл секрета до введения раствора показал, что в секрете здоровых долей вымени среднее содержание клеток не превышало 280 тыс./мл. Интрацистельнальное применение испытуемого раствора ни в одном случае не вызывало местной воспалительной реакции и изменения органолептических свойств секрета. На протяжении опыта количество соматических клеток в секрете здоровых опытных и контрольных долей вымени оставалось в пределах нормы (р›0,05), хотя абсолютное их содержание снизилось по отношению к исходному уровню. Таким образом, раствор восстановленного наносеребра, не оказывает раздражающего действия на молочную железу и может быть рекомендован для интрацистернального введения.

Пример 2. Для определения оптимальной лечебной дозы раствора восстановленного наносеребра и кратности применения отобрали 30 лактирующих коров, больных субклиническим маститом. Из них сформировали 3 группы по принципу пар-аналогов численностью по 10 голов каждая.

В группы включили коров одинакового возраста, продуктивности, периода лактации. Животным опытных групп внутрицистернально вводили раствор восстановленного наносеребра (1,0 мл), разведенного в соотношении 0,5:4,5; 1,0:4,0; 2,0:3,0 на теплом стерильном изотоническом растворе натрия хлорида с соблюдением правил асептики. В ходе опыта учитывали состояние долей вымени и характер секрета. Результаты лечения учитывали путем постановки реакции молока из леченых долей с KerbaTest на 10-е сутки после нанесения препарата. Полученные результаты обобщены в таблице 2, из материалов которой следует, что лучший терапевтический эффект получен после интрацистернального введения раствора в соотношении 1,0:4,0.

Таблица 2 - Влияние дозы препарата на его лечебную эффективность при субклиническом мастите коров

Группы
коров Доза
препарата (соотношение) Подвергнуто
лечению Излечено коров долей коров долей кол-во % кол-во % Первая 0,5:4,5 10 10 5 50,0 5 50,0 Вторая 1,0:4,0 10 10 7 70,0 7 70,0 Третья 2,0:3,0 10 10 7 70,0 7 70,0

Уменьшение дозы вводимого раствора привело к снижению на 20,0% количества выздоровевших животных и количества излеченных долей. Увеличение дозы раствора до соотношения 2,0:3,0 не привело к увеличению числа излеченных животных и пораженных долей.

Таблица 3 – Сроки лечения коров при применении раствора восстановленного наносеребра

Группа коров Дни лечения 1 день, излечено 3 день, излечено 5 день, излечено коров долей коров долей коров долей коров долей кол-во % кол-во % кол-во % кол-во % кол-во % кол-во % 10 14 - - - - 6 50,0 7 50,0 5 50,0 7 50,0

Выздоровление коров наступило при ежедневном трех и пятикратном внутрицистернальном применение раствора восстановленного наносеребра.

Пример 3. Для изучения сравнительной терапевтической эффективности заявленного способа лечения коров, больных маститом, для опыта сформировали по принципу пар-аналогов две группы по 10 голов каждая. В группы включили коров одинакового возраста, продуктивности, периода лактации с одинаковым количеством пораженных долей вымени.

В качестве базового препарата был выбран АРГУМИСТИН® 0,005%, который используют при лечении субклинической формы мастита у крупного рогатого скота. Коров первой группы, больных маститом, лечили с препаратом АРГУМИСТИН® 0,005%, который вводят интрацистернально, предварительно освободив пораженную долю от содержимого и обработав сосок 70,0% спиртовым раствором или специальными салфетками, в дозе 10,0 мл на долю вымени, 1-2 раза/сут после доения. Процедуру повторяли 3 раза.

Животных второй группы, больных субклиническим маститом, лечили путем применения интрацистернально раствора восстановленного наносеребра (1,0 мл), разведенного 1,0:4,0 на теплом стерильном изотоническом растворе натрия хлорида (4,0 мл) с соблюдением правил асептики в пораженные доли в дозе 5,0 мл рабочего раствора в течение 3-5 дней до выздоровления.

Результаты лечения учитывали спустя 5,7,10,12 суток после последнего нанесения мази путем постановки реакции с KerbaTest. Для постановки реакции с KerbaTest первые три струйки выдаивали в отдельную посуду, а затем из каждой доли молочной железы по 2,0 мл молока выдаивали в соответствующие луночки лопатки и при помощи пипетки-автомата добавляли 2,0 мл готовый раствор KerbaTest. Данные, полученные в процессе проведения исследования, обобщены в таблице 4.

Таблица 4 - Лечебная эффективность раствора восстановленного наносеребра при мастите коров

Препарат
(группа животных) Кратность
введения Доза
препарата
(мл) Подвергнуто
лечению Выздоровело коров долей коров долей кол-во % кол-во % Раствор восстановленного наносеребра 1,0% (опытная) 3-5
1 раз в сутки 5,0 10 14 7 70,0 12 85,7 АРГУМИСТИН® 0,005% (контрольная) 3
2 раза в сутки 10,0 10 16 6 60,0 11 68,75

Интрацистернальное применение раствора восстановленного наносеребра позволило излечить на 10,0% больше коров и на 17,0% больше пораженных субклиническим маститом долей вымени по сравнению с базовым препаратом, объем вводимого препарата в 2 раза меньше, по сравнению с базовым и при одинаковом курсе лечения существенно снизить трудовые затраты.

Пример 4. Для повышения эффективности способа лечения субклинического мастита у лактирующих коров с применением раствора восстановленного наносеребра (1,0 мл), разведенного 1:4 на теплом стерильном изотоническом растворе натрия хлорида (4,0 мл) с соблюдением правил асептики в пораженные доли в дозе 5,0 мл рабочего раствора восстановленного наносеребра в течение 5 дней до выздоровления - коровы первой группы (10 голов, 14 пораженных долей) и вторая группа (10 голов, 14 пораженных долей) раствор + бальзам с наночастицами серебра «Серебряная помощь». Изучили совместное влияние раствора и бальзама на показатели естественной резистентности молочной железы и микробной обсемененности кожи у больных маститом лактирующих коров.

У всех животных пробы секрета отбирали из пораженных долей с соблюдением правил асептики и антисептики до нанесения бальзама (вторая группа, первой не наносили) и на десятый день после втирания. Определение бактерицидной активности кожи осуществляли путем посевов-отпечатков с поверхности кожи и затем рассчитывали индекс бактерицидности по формуле, провели бактериологические посевы с кожи вымени коров.

После применения внутрицистернально раствора восстановленного серебра, в секрете молочной железы на десятый день у всех коров первой группы количество соматических клеток уменьшилось в 20,8 раз, при этом индекс бактерицидности увеличился на 1,17, а бактериальная обсемененность понизилась в 1,04 раза. У коров, леченных комплексным способом - раствор восстановленного серебра + бальзам с наночастицами серебра «Серебряная помощь», количество соматических клеток снизилось почти в 36,3 раза, при этом индекс бактерицидности увеличился в 1,7 раза, а бактериальная обсемененность понизилась в 2,82 раза и сократился срок выздоровления на 2 дня (таблица 5).

Таблица 5 - Показатели бактерицидности и обсемененности кожи вымени больных субклиническим маститом коров до и после лечения

Показатели Больные субклиническим маститом до лечения Больные субклиническим маститом после лечения Пораженные доли (1) Пораженные доли (2) Пораженные доли(1) Пораженные доли(2) Количество соматич. клеток, тыс./мл 7273,0±143,2 7266±119,4 350±141,2 200,1±111,9 Индекс бактерицидности, % 54,4±4,3 54,2±5,2 63,5±5,5 90,2±2,7 Обсемененность, тыс., КОЕ 918,0±140,0 930±141,0 880,5±150,7 330,0 ±140,8

Таким образом, заявленный способ терапии коров, больных субклиническим маститом, обеспечивает сокращение сроков лечения, не оказывает раздражающего действия на ткани молочной железы, позволяет получить экологически чистую продукцию, улучшить санитарное качество молока, снижает медикаментозную нагрузку на молочную железу при интрацистернальном и трансдермальном применении лекарственных средств, содержащих наночастицы серебра.

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к ветеринарному акушерству, а именно к способу лечения субклинического мастита у лактирующих коров. Способ включает интрацистернальное введение раствора восстановленного наносеребра, содержащего восстановленное наносеребро и изотонический раствор натрия хлорида в соотношении 1:4 - 1,0 мл 1,0%-ного раствора восстановленного наносеребра и 4,0 мл раствора натрия хлорида, ежедневно в больную четверть молочной железы в дозе 5,0 мл 3-5 дней подряд и трансдермальное нанесение бальзама «Серебряная помощь» ежедневно в течение 5 дней. Изобретение обеспечивает сокращение сроков лечения и повышение эффективности способа лечения коров, больных субклиническим маститом. 5 табл., 4 пр.

Способ лечения субклинического мастита у лактирующих коров, включающий интрацистернальное введение раствора восстановленного наносеребра, содержащего восстановленное наносеребро и изотонический раствор натрия хлорида в соотношении 1:4 - 1,0 мл 1,0%-ного раствора восстановленного наносеребра и 4,0 мл раствора натрия хлорида, ежедневно в больную четверть молочной железы в дозе 5,0 мл 3-5 дней подряд и трансдермальное нанесение бальзама «Серебряная помощь» ежедневно в течение 5 дней.