Способ лечения субклинического мастита у лактирующих коров Российский патент 2022 года по МПК A61K38/21 A61P31/04 A61D99/00 

Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к ветеринарному акушерству, и может быть использовано для терапии субклинического мастита у лактирующих коров.

Актуальность предлагаемого способа определяется высокой частотой заболеваемости лактирующих коров маститом, которая в последнее время имеет тенденцию к росту и составляет до 80% [Распространение и профилактика мастита коров / Е.Н. Новикова, А.А. Лысенко, Ю.В. Козлов, М.Б. Решетка // Ветеринария Кубани. 2018. №3. С. 3-6].

Основными факторами, способствующими возникновению и развитию мастита, являются техническое несовершенство доильных установок, нарушение технологии и правил машинного доения коров. Вначале возникает раздражение, которое при многократном повторении переходит в асептическое воспаление - скрытый мастит. Снижается общая и локальная резистентность, создаются условия для проникновения и размножения различной условно-патогенной и патогенной микрофлоры, которая обусловливает воспаление вымени в различных формах от субклинической, приводящей на протяжении одной-двух лактаций к атрофии доли, до клинически выраженной (серозный, катаральный) мастит и др. [Этиологические и патогенетические аспекты мастита у коров, методы и средства его профилактики и терапии / В.А. Париков, В.И. Слободяник, Н.Т. Климов, О.Г. Новиков // Эколого-адаптационная стратегия защиты здоровья и продуктивности животных в современных условиях / Российская академия сельскохозяйственных наук. - Воронеж: Воронежский государственный университет, 2001. С. 105-113].

В настоящее время для лечения больных маститом коров выпускают различные препараты, включающие, как правило, антимикробные вещества - антибиотики, сульфаниламиды, фторхинолоны и другие. Но не все они дают желаемый эффект, что, прежде всего, объясняется снижением чувствительности к ним микрофлоры, вызывающей мастит [Антибиотикорезистентность штаммов Staphylococcus aureus, выделенных из молока высокопродуктивных коров / О.А. Артемьева, Д.А. Никанова, Е.Н. Котковская [и др.] // Сельскохозяйственная биология. 2016. Т. 51. №6. С. 867-874]. Кроме того, использование антибиотиков снижает пищевую ценность молока, связанную с наличием ингибирующих веществ, что снижает экономическую рентабельность молочного скотоводства. В связи с этим, возникает необходимость создания новых способов лечения субклинического мастита у коров, включающих применение химиотерапевтических препаратов, сокращающих браковку молока до минимума.

В настоящее время альтернативой антибиотикам при лечении и профилактике мастита у коров служит применение препаратов, оказывающих иммуномодулирующее действие на организм животных и, повышающих общую и локальную резистентность молочной железы к неблагоприятным факторам внешней среды.

Известен способ лечения мастита у коров, предусматривающий введение тканевого препарата, в качестве которого используют фильтрат экстракта молочной железы здоровых животных, стабилизированных маннитом. С профилактической целью препарат вводят двукратно за 30-20 и на 10 день до отела, подкожно в дозе 0,1-0,2 мл на кг массы тела. С лечебной целью дополнительно вводят бактериофунгицид в надвымянное пространство в дозе 25-30 мл двукратно с интервалом 24 часа [RU №2201758 С2, A61K 35/48, А61Р 15/00, опубл. 10.04.2003. Бюл. №10].

Недостатком данного способа лечения мастита у коров является отсутствие регистрации тканевого препарата в качестве лекарственного средства и длительный курс лечения.

Известен способ лечения мастита у коров, предусматривающий введение комплексного препарата, содержащего в мас.%: раствор новокаина 2% - 20-40; антисептик-стимулятор Дорогова фракция 2-1-3, димексид - 13-15 и раствор глюкозы 40% - остальное. Препарат нагревают до 37-38°С и вводят внутрибрюшинно со стороны правой голодной ямки в дозе 100-150 мл один раз в день 2-3-кратно с интервалом 48 часов [RU №2320325 С1, A61K 31/00, А61Р 23/02, А61Р 31/02, опубл. 27.03.2008. Бюл. №9].

Недостатком данного способа лечения мастита у коров является многокомпонентность предложенного комплексного препарата и в связи с этим сложность в приготовлении, а также трудоемкость, обусловленная большим объемом введения.

Известен аналог - способ терапии мастита у коров с применением двух биогенных веществ: плаценты денатурированной эмульгированной (ПДЭ) и 15%-ного раствора антисептика-стимулятора Дорогова (АСД) фракция-2 (Ф2) на тетрагидровите. На 1, 3, 5 дни лечения больным субклиническим маститом животным подкожно вводят ПДЭ в дозе 20 мл на животное, а на 2, 4 и 6 дни - внутримышечно 15% раствор АСД 2Ф на тетрагидровите в дозе 10 мл [RU №2441660 C1, A61K 35/50, A61K 35/12, опубл. 10.02.2012. Бюл. №4].

Недостатком данного способа лечения мастита у коров является его невысокая эффективность и длительный курс.

Известен способ лечения, который включает интрацистернальное введение лекарственного препарата в пораженную долю вымени в дозе 10,0 мл с 12-часовым интервалом 2-4 раза. Препарат содержит в мас.%: янтарная кислота - 1,0, АСД Ф2 - 2,0, йод - 0,1, йодистый калий - 0,5, новокаин - 0,5, спирт поливиниловый - 1,0, дистиллированная вода - остальное. Препарат вводят интрацистернально в пораженные доли вымени в дозе 10,0 мл с 12-часовым интервалом [RU №2622017 C1, A61K 31/00, A61K 31/194, A61K 31/245, опубл. 08.06.2017. Бюл. №16].

Недостатком данного способа лечения мастита у коров является многокомпонентность комплексного препарата и в связи с этим сложность в приготовлении, а также высокая вероятность развития раздражения тканей вымени.

Известен способ комплексной терапии мастита у коров, включающий подкожное введение витамина Активин в дозе 0,25 мг/10 кг живой массы 2 раза в день, пробиотик «Субтилис» в дозе 300 г/тонну корма или воды ежедневно, а также Миксоферон (смесь белков интерферона альфа 2b) в дозе 5 мл (50 доз) два раза в сутки внутримышечно в течение 7 дней [Сафонов Михаил Михайлович. Влияние иммуномодулятора "Миксоферон" на иммунитет коров при субклиническом мастите: диссертация… кандидата ветеринарных наук: 06.02.06 / Сафонов Михаил Михайлович; [Место защиты: Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина]. - Москва, 2015. - 118 с.].

Недостатком данного способа лечения мастита у коров является его невысокая эффективность и длительный курс.

Наиболее близким техническим решением, принятым за прототип, является способ лечения субклинического мастита у лактирующих коров, предусматривающий совместное применение тканевого препарата Аминоселетон на 1, 3 и 5 дни лечения, который вводят подкожно в верхнюю треть шеи в нарастающей дозе 40-45-50 мл и бычьи рекомбинантные α- и γ-интерфероны в дозе 10 мл внутримышечно на 2, 4, 6 дни лечения [RU №2619862 C1, A61K 35/12, A61K 38/21, А61Р 15/00, опубл. 18.05.2017. Бюл. №16].

Недостатком данного способа является длительный курс лечения мастита у коров.

Технический результат изобретения - сокращение сроков лечения субклинического мастита у лактирующих коров и повышение эффективности лечения.

Технический результат достигается тем, что в способе лечения субклинического мастита у лактирующих коров, включающем парентеральное введение иммунокоррегирующих средств, согласно изобретению, в качестве средств иммунокоррегирующей терапии используют препарат Биферон-Б и рекомбинантный интерферон-λ внутримышечно в 1, 2 и 3 дни лечения в дозе по 10 мл каждого с активностью 1,0×10⁴МЕ/мл.

Биферон-Б - зарегистрированный ветеринарный препарат. Производится в ООО «НПЦ ПроБиоТех» (Республика Беларусь). Содержит смесь бычьих рекомбинантных α- и γ-интерферонов (1,0×10⁴ МЕ/мл суммарной антивирусной активности) в растворителе с добавлением стабилизаторов (в пролонгирующей основе). Биферон-Б обладает антивирусной, антибактериальной и иммуностимулирующей активностью. Эффект биопрепарата определяется суммарным действием экзогенных белков непосредственно на пораженные вирусом клетки, быстрой индукцией системы эндогенных цитокинов, клеточного и гуморального иммунитета. Смесь α- и γ-интерферонов бычьих рекомбинантных выступает в качестве индуктора бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови, оказывает противовоспалительное действие, повышает резистентность организма животных к воздействию ДНК- и РНК-содержащих вирусов и патогенных микроорганизмов, проявляет антистрессовый эффект, усиливает напряженность иммунитета и снимает поствакцинальный синдром при вакцинациях. Присутствие в препарате интерферонов I-го (α-) и II-го (γ-) типа обусловливает синергизм действия на организм. Без сроков выдержки по молоку и мясу [Инструкция по применению ветеринарного биопрепарата «Биферон-Б»; per. номер 4957-10-15-БПХ].

Интерферон-лямбда (ИФН-λ) разработан в ООО «НПЦ ПроБиоТех» (Республика Беларусь) и представляет собой раствор для инъекций, содержащий рекомбинантные λ-интерфероны 1,0×10⁴ МЕ/мл. Интерферон III-го типа (ИФН-λ) представлен интерферонами λ1, λ2 и λ3 (известными также как интерлейкины IL-29, IL-28A и IL-28B) и функционально тесно связан с ИФН I-го типа. Мишенью ИФН-λ, являются, прежде всего, эпителиальные клетки дыхательных путей и легких, желудочно-кишечного тракта, половых органов, кожи, гепатоциты печени и плазмоцитарные дендритные клетки [Mordstein М., Neugebauer Е. et al. Lambda Interferon reders epithelial cells of respiratory and gastrointestinal tracts resistant to viral infections // J. Virol. 2010. Vol. 11. P. 5670-5677]. Антивирусное действие ИФН III-го типа дополняет и даже преобладает над таковым ИФН I-го типа во входных воротах инфекции и не вызывает характерных для ИФН I-го типа системных побочных эффектов. Все три типа интерферонов выполняют роль первой линии защиты организма не только при вирусных, но и бактериальных, и паразитарных заболеваниях [Levy D.E., Marie I.J., Durbin J.E. Induction and function of type I and III interferon in response to viral infection // Curr Opin Virol. 2011. Vol. 1(6). P. 476-86].

Эффективность способа лечения субклинического мастита у лактирующих коров подтверждена примерами.

Пример 1. Терапевтическая эффективность применения иммунокоррегирующих препаратов при субклиническом мастите у коров.

Испытания выполнены на 32 коровах симментальской породы 2-3 лактации, принадлежащих ООО «Агротех Гарант» Ростошинский Воронежской области.

Диагноз на субклинический мастит ставили комплексно, с учетом анамнеза, клинического осмотра и результатов анализа молока. Проведение реакции с диагностическим реактивом осуществлялось с использованием молочно-контрольной пластинки МКП-2. С этой целью из каждой доли молочной железы выдаивали в соответствующие лунки по 1 мл молока, затем с помощью дозатора добавляли по 1 мл реактива Масттест-АФ, перемешивали путем вращения пластины в горизонтальной плоскости 10-15 секунд. Учет реакции проводили в течение 10-15 секунд по образованию желеобразного сгустка или изменению цвета смеси.

Животные первой группы (n=16) были подвергнуты лечению с использованием аминоселетона и бычьих рекомбинантных α- и γ-интерферонов (базовый способ). В 1, 3 и 5 день подкожно вводили аминоселетон в нарастающих дозах 40-45-50 мл, а на 2, 4, 6 дни лечения инъецировали внутримышечно по 10 мл препараты α- и γ-интерферонов (с активностью по 1,0×10⁴ МЕ/мл).

Животным второй группы (n=16) в 1, 2 и 3 дни лечения внутримышечно вводили рекомбинантный интерферон-λ, в дозе 10,0 мл (с активностью 1,0×10⁴ МЕ/мл) и Биферон-Б в дозе 10,0 мл (с суммарной активностью 1,0×10⁴ МЕ/мл) на животное.

Оценку эффективности способа проводили на основании исследования молока из пораженных долей молочной железы, отобранного до лечения и через 7 дней после его завершения, с 2% раствором Масттеста-АФ, бактериологических исследований и определения содержания соматических клеток (СК).

Результаты клинических исследований представлены в таблице 1, из которой следует, что эффективность базового способа лечения составила 81,3%. Наилучший терапевтический эффект достигнут при применении заявляемого способа - 93,8%, что на 12,4% больше, чем при использовании базового варианта.

Пример 2. Влияние применения иммунокоррегирующих препаратов на показатели секрета вымени до и после лечения субклинического мастита.

Результаты бактериологического исследования секрета вымени коров до и после лечения субклинического мастита (таблица 2) свидетельствуют о том, что через 7 дней по окончании лечения базовым способом степень микробной контаминации снизилась в 11,4 раза, инфицированность - в 2,6 раза. При использовании заявленного способа степень микробной контаминации снизилась в конце опыта в 20,9 раза, инфицированность - в 5,9 раз. Содержание соматических клеток при этом у животных обеих групп через 7 дней по окончании лечения было приблизительно одинаковым и соответствовало показателям здоровых животных.

Таким образом, заявленный способ лечения коров больных субклиническим маститом, предусматривающий совместное применение рекомбинантного интерферона-λ, в дозе 10,0 мл и Биферона-Б, содержащего бычьи рекомбинантные α- и γ-интерфероны, в 1, 2 и 3 дни лечения в дозе 10,0 мл на животное обеспечивает выздоровление 93,8% коров, больных субклиническим маститом, способствует снижению микробной контаминации молока и нормализации в нем содержания соматических клеток.

Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к ветеринарному акушерству, и может быть использовано для терапии субклинического мастита у лактирующих коров. Для этого в 1, 2 и 3 дни лечения внутримышечно вводят препарат Биферон-Б и рекомбинантный интерферон-λ, каждого в дозе по 10 мл на животное с активностью 1,0×10⁴ МЕ/мл. Изобретение обеспечивает сокращение сроков лечения субклинического мастита у лактирующих коров и повышение эффективности лечения. 2 табл., 2 пр.

Способ лечения субклинического мастита у лактирующих коров, включающий парентеральное введение иммунокоррегирующих средств, отличающийся тем, что в качестве средств иммунокоррегирующей терапии используют препарат Биферон-Б и рекомбинантный интерферон-λ внутримышечно в 1, 2 и 3 дни лечения в дозе по 10 мл каждого с активностью 1,0×10⁴МЕ/мл.