Способ оценки пригодности тромбоцитов для использования при лечении Российский патент 2024 года по МПК G01N33/49 G01N15/10 G01N21/29 G01N1/34 

Изобретение относится к медицине, касается исследования компонентов крови человека. Способ дифференциальной оценки характеристик донорских тромбоцитов используемых в процессе лечения, их качественные характеристики. Предлагается применение данного способа у пациентов в среднем и тяжелом состоянии. В результате получаем оптимизацию лечебного процесса, уменьшение сроков пребывания в стационаре, снижение летальности.

В рутинной практике в больницах применяют визуальную оценку концентрата тромбоцитов перед применением, отсутствие видимых сгустков, включений, осадка, определенная прозрачность. Строго контролируются сроки хранения, температура, герметичность упаковки. Содержание тромбоцитов, консервантов стандартизировано в лабораторных условиях.

Известны способы оценки свойств компонентов крови методом микрофильтрации, в частности «Способ оценки деформируемости эритроцитов» (RU 2173461 С1, 2000 г.), включающий нанесение на обеззоленный фильтр пятен 60%-ной суспензии отмытых эритроцитов (Дэр) и физиологического раствора (Дфр) и расчет их диаметров, отличающийся тем, что проводят визуальную оценку интенсивности окрашивания пятна 60%-ной суспензии отмытых эритроцитов и в случае наличия признаков неравномерной деформируемости составляющих его эритроцитов, а именно в центре пятна имеется округлая зона наибольшей интенсивности окрашивания, окруженная более светлым периферическим кольцом и четко выделяющейся границей между латеральным кольцом и центральной зоной пятна эритроцитарной суспензии, определяют ширину периферического кольца суспензии эритроцитов, представленного незначительным количеством наиболее деформированных эритроцитов (ШПКэр), и показатель деформируемости эритроцитов (Z) рассчитывают по формуле.

Недостатком данного способа является низкая точность при оценке размера зоны пятна, связанная с визуальной оценкой.

Также известен «Способ коррекции деформируемости эритроцитов» (RU 2155607 С2, 1998 г.), включающий проведение курса лечебного плазмафереза, а затем производится экстракорпоральное трехкратное прерывистое отмывание 50% объема циркулирующих эритроцитов в 0,85% растворе хлорида натрия в соотношении 1 ч. эритроцитов к 10 ч. отмывающего раствора при температуре 37°С, после чего эритроциты возвращаются в кровяное русло пациента.

Недостатком данного способа является низкая точность при оценке размера зоны пятна, связанная с визуальной оценкой.

Наиболее близким, взятый в качестве прототипа, к заявленному изобретению является «Способ дифференциальной оценки и выбора тактики коррекции деформируемости эритроцитов», патент RU 2197726 C2, G01N 33/48, Российская Федерация, Закутский А.В., Ильин В.В.; заявитель А.В. Закутский, В.В. Ильин, патентообладатель А.В. Закутский. - № 2000128833; заявл. 17.11.00; опубл. 27.01.03 // Бюл.- №3. - 2 с.», заключающийся в сопоставлении внешнего вида максимально растекшихся и высохших пятен 60%-ных суспензий трижды отмытых в физиологическом растворе и не отмытых эритроцитов одного больного, нанесенных в количестве 0,02 мл на бумажные обеззоленные фильтры в центры растекшихся на данных фильтрах пятен 0,02 мл физиологического раствора, результаты сопоставления внешнего вида пятен эритроцитарных суспензий квалифицируются как одно из четырех состояний деформируемости эритроцитов: нормальное, патологическое I-а степени, патологическое I-b степени и патологическое II степени, и в зависимости от степени патологического состояния деформируемости эритроцитов рекомендуется путь коррекции данного свойства эритроцитов.

Недостатком прототипа является недостаточная точность оценки и достоверность, связанная с тем, что ширина зон оценивается миллиметровой линейкой, интенсивность окрашивания, кайма и насыщенность определяется на глаз, а также узкая направленность данного метода только для одного типа компонентов крови.

Цель изобретения: увеличить точность оценки и достоверность при исследовании компонентов крови. Разработать способ оценки характеристик, подходящий для тромбоцитов.

Применение предлагаемого способа оценки форменных элементов возможно не только у донорских компонентов крови, но и непосредственно у пациентов с самыми различными заболеваниями, в частности имеется опыт применения авторами у пациенток с тяжелыми осложнениями беременности: «Метод оценки ангиопатии у беременных с сахарным диабетом в отделении реанимации перинатального центра / В.А. Марфин [и др.] // Воронежская областная клиническая больница №1: сб. статей, посвященных 40-летию открытия нового комплекса БУЗ ВО ВОКБ №1. -Воронеж, 2016. - С. 276-278.», «Новые методы оценки тяжести преэклампсии и эффективности медикаментозной терапии в отделении реанимации перинатального центра / В.А. Марфин [и др.] // Воронежская областная клиническая больница №1: сб. статей, посвященных 40-летию открытия нового комплекса БУЗ ВО ВОКБ №1. - Воронеж, 2016. - С. 328-329.».

Реализация способа оценки характеристик тромбоцитов осуществляется следующим образом: На бумажный фильтр строго вертикально наносится физиологический раствор в объеме, достаточном для размещения пятна компонента крови, а именно используют тромбоциты доноров в количестве 0,04 мл, так как используется готовая тромбоцитарная масса лабораторного приготовления, этап центрифугирования не нужен.

На фиг 1. Изображено пятно тромбоцитов, где:

1 - центр пятна

2 - периферия пятна

После нанесения тромбоцитов крови на бумажный фильтр, получаем неравномерное пятно тромбоцитов, на целлюлозе с диаметром, расположением, расстоянием межу ними от 2 до 15 мкм и ориентировкой волокон близким к самым маленьким сосудам человека, распределение к периферии и насыщенность цвета которого изменялась в зависимости от свойств тромбоцитов. Далее ведут визуальную оценку пятна тромбоцитов, затем анализируют под микроскопом с небольшим увеличением и рассеянным освещением. В зависимости от характера цветовой характеристики пятна, мы видим разное распределение тромбоцитов на разных участках. Затем выполняют оцифровку пятна тромбоцитов офисным сканером, получаем «цифровое пятно» тромбоцитов, что значительно повышает точность способа, в связи с тем, что анализ насыщенности цвета ведется посредством ЭВМ. На полученном изображении пятна тромбоцитов далее ведут анализ насыщенности цвета (другое название - сатурация или интенсивность цвета) с помощью программы для ЭВМ в центре 1 и на периферии 2, далее оценивают качественные показатели, сравнивая центр 1 с периферией 2. У используемой программы максимальная насыщенность цвета 255 условных единиц. Если соотношение между центром 1 пятна тромбоцитов и периферией 2 отличается до 15%, то делают вывод, что тромбоциты не пригодны для использования. В случае если соотношение между центром 1 пятна тромбоцитов и точкой периферии 2 отличается более 15%, то делают вывод о пригодности тромбоцитов для использования. Полученные результаты пятна тромбоцитов можно хранить длительное время в памяти ЭВМ, возможна повторная оценка через много лет и анализ собственных тромбоцитов пациента.

Примеры реализации способа:

Пример №1: В стационар БУЗ ВО ВОКБ №1 г. Воронеж, поступила пациентка N, 24 лет, с диагнозом: Беременность 33 недели, отслойка плаценты, кровотечение. Состояние тяжелое. Общая кровопотеря 4000 мл. Выполнена операция - кесарево сечение в экстренном порядке. Проводилось комплексное, многокомпонентное интенсивное лечение. В связи с кровопотерей у пациентки резко снизилось количество тромбоцитов в крови. По жизненным показания их нужно было экстренно восстановить. В отделении переливания крови были заказаны тромбоциты крови для переливания.

Предлагаемым способом выполнена оценка характеристик донорских тромбоцитов. Вначале были нанесены тромбоциты крови на бумажный фильтр, получили неравномерное пятно тромбоцитов размером около 15 мм. Далее произвели визуальный осмотр полученного пятна тромбоцитов, затем под микроскопом с увеличением в 60 раз определили свойства тромбоцитов. Полученный результат говорил о хорошем качестве и свойствах донорских тромбоцитов. Позже выполнена оцифровка пятна тромбоцитов офисным сканером, получена цифровое пятно тромбоцитов. С помощью программы для ЭВМ выполнен анализ насыщенности цвета пятна тромбоцитов в центре пятна и на периферии, после оценки получен результат, что соотношение между центром пятна тромбоцитов и точкой периферии отличается на 28%, что позволило сделать вывод о пригодности тромбоцитов для использования при лечении пациентки N. Были подтверждены и значительно уточнены полученные ранее результаты исследования пятна тромбоцитов. Вид модели патологии тромбоцитов на фиг. 1. Через двое суток пациентка была переведена из отделения интенсивной терапии в общее отделение с хорошей положительной динамикой.

Пример №2: Пациентка F, 37 лет, диагноз: гипотоническое кровотечение, показания к переливанию тромбоцитов.

Предлагаемым способом выполнена оценка характеристик донорских тромбоцитов. Вначале были нанесены тромбоциты крови на бумажный фильтр, получили неравномерное пятно тромбоцитов размером около 17 мм. Далее произвели визуальный осмотр полученного пятна тромбоцитов, затем под микроскопом с увеличением в 60 раз определили свойства тромбоцитов. Полученный результат говорил о неудовлетворительном качестве, а именно отмечена монотонность цвета пятна тромбоцитов, также отмечена деформированность края пятна тромбоцитов. Позже выполнена оцифровка пятна тромбоцитов офисным сканером, получена цифровое пятно тромбоцитов. С помощью программы для ЭВМ выполнен анализ насыщенности цвета пятна тромбоцитов в центре пятна и на периферии, после оценки получен результат, что соотношение между центром пятна тромбоцитов и точкой периферии отличается на 12%, что позволило сделать вывод о непригодности тромбоцитов для использования при лечении пациентки F, принято решение об утилизации предложенных тромбоцитов, далее были заказаны другие донорские тромбоциты с пригодными характеристиками, подтвержденными предложенным способом. Вид пятна непригодных тромбоцитов изображен на фиг. 2.

Предлагаемый способ позволяет увеличить точность оценки и достоверность при исследовании компонентов крови, а именно тромбоцитов, за счет того, что анализ насыщенности пятна тромбоцитов осуществляют с помощью программы для ЭВМ. Также данный способ оценки характеристик подходит для собственных тромбоцитов пациента.

Изобретение относится к медицине, а именно к трансфузиологии, и может быть использовано для оценки пригодности тромбоцитов для использования при лечении. Проводят сопоставление внешнего вида максимально растекшихся и высохших пятен 60%-ных суспензий трижды отмытых в физиологическом растворе и не отмытых тромбоцитов одного больного, нанесенных в количестве 0,02 мл на бумажные обеззоленные фильтры в центры растекшихся на данных фильтрах пятен 0,02 мл физиологического раствора. На бумажный фильтр строго вертикально наносят физиологический раствор в объеме, достаточном для размещения пятна тромбоцитарной массы объемом 0,04 мл, после получают неравномерное пятно тромбоцитов, на целлюлозе с диаметром, расположением, расстоянием межу ними от 2 до 15 мкм. Далее ведут визуальную оценку пятна тромбоцитов, затем анализируют под микроскопом. Затем выполняют оцифровку пятна тромбоцитов офисным сканером, получают «цифровое пятно» тромбоцитов. Анализ насыщенности цвета ведут посредством программы для ЭВМ в центре и на периферии. Оценивают качественные показатели, сравнивая центр с периферией. Если соотношение между центром пятна тромбоцитов и периферией отличается до 15%, то делают вывод, что тромбоциты не пригодны для использования. В случае если соотношение между центром пятна тромбоцитов и периферией отличается более 15%, то делают вывод о пригодности тромбоцитов для использования. Способ обеспечивает возможность увеличить точность оценки и достоверность при исследовании пригодности тромбоцитов для использования при лечении за счет сравнения насыщенности цвета в центре и на периферии высохшего пятна тромбоцитарной массы. 2 ил., 2 пр.

Способ оценки пригодности тромбоцитов для использования при лечении, включающий сопоставление внешнего вида максимально растекшихся и высохших пятен 60%-ных суспензий трижды отмытых в физиологическом растворе и не отмытых тромбоцитов одного больного, нанесенных в количестве 0,02 мл на бумажные обеззоленные фильтры в центры растекшихся на данных фильтрах пятен 0,02 мл физиологического раствора, отличающийся тем, что на бумажный фильтр строго вертикально наносят физиологический раствор в объеме, достаточном для размещения пятна тромбоцитарной массы объемом 0,04 мл, после получают неравномерное пятно тромбоцитов, на целлюлозе с диаметром, расположением, расстоянием межу ними от 2 до 15 мкм, далее ведут визуальную оценку пятна тромбоцитов, затем анализируют под микроскопом, затем выполняют оцифровку пятна тромбоцитов офисным сканером, получают «цифровое пятно» тромбоцитов, анализ насыщенности цвета ведут посредством программы для ЭВМ в центре и на периферии, далее оценивают качественные показатели, сравнивая центр с периферией, если соотношение между центром пятна тромбоцитов и периферией отличается до 15%, то делают вывод, что тромбоциты не пригодны для использования, в случае если соотношение между центром пятна тромбоцитов и периферией отличается более 15%, то делают вывод о пригодности тромбоцитов для использования.