СПОСОБ ОЦЕНКИ РАДИАЦИОННОЙ БЕЗОПАСНОСТИ РАДИОФАРМПРЕПАРАТА "МИКРОСФЕРЫ АЛЬБУМИНА, МЕЧЕННЫЕ RE" ПРИ ПРОВЕДЕНИИ РАДИОСИНОВЭКТОМИИ КОЛЕННОГО СУСТАВА Российский патент 2025 года по МПК G01N33/49 A61K47/42 A61M36/00 A61P19/02 

Способ оценки относится к медицине, а именно к ревматологии и радиофармацевтике, в частности к оценке радиационной безопасности пациентов при проведении радиосиновэктомии (РСЭ) коленных суставов радиофармацевтическим лекарственным препаратом (РФЛП) «Микросферы альбумина 5-10 мкм, меченные ¹⁸⁸Re» при внутрисуставном введении.

РСЭ представляет собой метод лучевой терапии, состоящий во внутрисуставном введении РФЛП, обычно содержащих β-излучающие радионуклиды, например, ¹⁹⁸Аu, ⁹⁰Y, ³²Р, ¹⁶⁹Er, ¹⁶⁶Но, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re и ряд других. Принцип терапевтического действия РФЛП основан на локальном облучении синовиальной оболочки сустава. Введенный препарат захватывается путем фагоцитоза клетками поверхностного эпителия синовиальной оболочки, оказывая тем самым повреждающее действие на воспаленную ткань. За счет местного облучения воспаленной синовиальной оболочки сустава в ней возникает процесс абляции и гибели функционально активных клеток, ответственных за поддержание воспаления. В результате достигается снижение, как болевого синдрома, так и проявлений активного воспаления [Kampen et al 2022]. В настоящее время частота использования РСЭ в клинической практике разных стран сильно различается, что связано как с доступностью метода, так и с традициями национальных ревматологических служб. В отличие от отечественной практики, где РСЭ в настоящее время применяется только в одном центре (МРНЦ им. А.Ф. Цыба), зарубежом подобное лечение хотя и широко распространено, но достаточно неравномерно. Так в Великобритании за год выполняется всего около 100 процедур РСЭ, а в Германии - 40-60 тыс. [Merashli et al 2016].

При проведении РСЭ РФЛП вводится непосредственно в полость воспаленного сустава. В результате радиоактивные частицы фагоцитируются синовиоцитами синовиальной оболочки. Идеальный РФПЛ для РСЭ должен обеспечивать лучевое поражение синовиальной оболочки при минимальном побочном воздействии или без него, иметь короткий период полураспада, высокую химическую чистоту при отсутствии токсических свойств, быть полностью биоразлагаемым и иметь приемлемое соотношение стоимости и эффективности [Ahmad et al 2018]. Благодаря избирательному накоплению препарата в зоне поражения обеспечивается интенсивное лучевое воздействие на клеточные элементы, расположенные вблизи от скопления РФЛП, которые участвуют в развитии хронического воспалительного процесса. Непосредственным результатом облучения синовиальной оболочки является развитие лучевого синовита.

Таким образом, РСЭ представляет собой разновидность лучевой терапии и является признанным методом лечения персистирующего синовита при воспалительном заболевания суставов уже более 50 лет [Knut 2015, Gazda et al. 2021]. РСЭ обычно применяют, когда другие локальные и системные методы не имеют ожидаемой эффективности. Такая необходимость возникает при лечении больных, не ответивших должным образом на проводимую терапию, включая локальную терапию глюкокортикоидами. При применении локальной лучевой терапии может быть получен благоприятный и стойкий результат, поскольку в результате лучевого воздействия обычно возникает поверхностный фиброз синовии, что определяет эффект на длительное время [Балабанова и др. 2019, Knut et al 2013].

Показаниями к РСЭ являются различные ревматические заболевания, сопровождающиеся синовитом (ревматоидный артрит, псориатический артрит, болезнь Бехтерева, остеоатроз с синовитом и др.), а также виллонодулярный синовит, гемофилический артрит, состояние после эндопротезирования сустава с хроническим образованием выпота. По эффективности РСЭ сопоставима с хирургическим вмешательством, однако она значительно менее травматична и более проста в выполнении, поскольку не требует сложных и длительных послеоперационных реабилитационных мероприятий, а также экономически более оправдана.

Лучевое повреждение синовии отличается по своим последствиям от ее хирургического удаления. Так, при хирургическом лечении воспаленная ткань полностью удаляется почти на всей площади капсулы сустава, после чего начинается ее регенерация. Однако уже через 2 мес. после операции во вновь сформировавшейся синовии нередко можно обнаружить признаки воспаления [Ostergaard et al 2001]. При РСЭ через 2 недели после внутрисуставного введения РФЛП в синовии отмечается формирование воспалительного инфильтрата, содержащего плазматические клетки, гистиоциты и фибробласты. Наряду с этим развиваются окклюзия множества капилляров синовиальных ворсин и очаговая пролиферация покровного слоя синовиоцитов. Через 4 недели воспалительные изменения уменьшаются, возрастает количество фиброцитов. Через 12 недель клеточная инфильтрация субсиновиального слоя значительно уменьшается, наблюдаются фиброзированные сосуды и увеличение количества интерстициальной фиброзной ткани. Определяется частичная регенерация разрушенного покровного слоя. Через 24 недели можно видеть нарастание субсиновиального склероза и процесс регенерации покровного слоя синовии. В то же время суставной хрящ остается интактным.

Ионизирующее воздействие β-излучения ¹⁸⁸Re при внутрисуставном введении РФЛП является строго локальным, ограничиваясь областью конкретного сустава, в который вводится препарат, с формированием максимальной поглощенной дозы в синовиальной оболочке. Однако, учитывая тот факт, что пациенты, получающие РСЭ, в отличие от онкологических больных с низким периодом дожития, в среднем живут значительно дольше, дополнительное исследование радиационной безопасности предлагаемого метода вызывает пристальный интерес. Доказательное обоснование безопасности процедуры РСЭ в плане лучевого воздействия на весь организм в целом, важно для дальнейшего внедрения этого метода в широкую практику. Поскольку методы лучевой терапии в отечественной ревматологии, не являются рутинной процедурой, исследование радиационной безопасности предлагаемого метода является востребованным и актуальным.

Метод биологической дозиметрии на основе анализа хромосомных аберраций в лимфоцитах крови пациентов является одним из наиболее перспективных и предпочтительных подходов. Структурные хромосомные изменения являются наиболее тщательно изученными биологическими параметрами радиационно-индуцированного повреждения клеток. В частности, повышенная частота дицентрических хромосом в периферических лимфоцитах считается чувствительным и специфичным биоиндикатором радиационного воздействия на человека. Используя частоту радиационно-индуцированные хромосом в лимфоцитах человека в качестве общепринятого показателя индивидуальной эквивалентной дозы облучения всего тела возможно достаточно точно оценить побочную дозу у пациентов после РСЭ при условии, что используется соответствующая калибровочная дозовая зависимость [IAEA, 2011].

В отношении аналогов предлагаемого в данной заявке способа оценки радиационной безопасности пациентов при проведении РСЭ коленных суставов различными РФЛП при внутрисуставном введении известно следующее.

Известен способ оценки побочного действия РФЛП на основе ¹⁸⁶Re и ¹⁶⁹Er путем анализа наличия дицентрических хромосом в лимфоцитах периферической крови пациентов после РСЭ. Образцы крови брали до введения и от 17 до 19 дней после введения у 10 пациентов [Klett et al, Nuklearmedizin, 2012, 51(1):17-25]. Одновременно оценивали утечку РФЛП из суставной сумки на третий день после введения методом сцинтиграфии всего тела. В результате не было обнаружено статистически значимого увеличения частоты дицентрических хромосом в 46 образцах крови пациентов. Оценка побочной дозы на основе утечки активности РФЛП из суставной сумки составила от 2.8 до 13.8 мЗв. Заключение констатирует, что РСЭ может быть классифицирована как безопасная терапевтическая процедура без существенного радиационного риска.

Основным недостатком указанного способа является отсутствие возможности оценить побочную дозовую нагрузку на пациента непосредственно по частоте хромосомных аберраций. Фактически анализ аберраций используется лишь для сравнения их анализа со спонтанным уровнем, а дозы оценивались независимо по величине утечки активности РФЛП из суставной сумки. Кроме того, результаты применения РФЛП на основе ¹⁸⁸Re не анализировались. Калибровочная зависимость частоты аберраций от дозы не была приведена.

Известен способ оценки побочного действия РФЛП на основе ⁹⁰Y при РСЭ стойкого синовита коленного сустава по частоте хромосомных аберраций в лимфоцитах крови [Voth et al, Nuklearmedizin. 2006; 45(5): 223-228]. В работе были проанализированы образцы крови 10 пациентов до РСЭ и через 11-13 дней после введения РФЛП. Наличие дицентрических хромосом в лимфоцитах крови производилось в метафазах первого клеточного цикла. Кроме того, оценивали утечку РФЛП из суставной сумки после введения методом сцинтиграфии всего тела. В результате не было обнаружено статистики достоверного прироста дицентрических аберраций хромосом по результатам анализа 20 образцов крови пациентов. Лишь у одного из обследованных пациентов удалось оценить общую поглощенную дозу величиной 130 мГр при введении РФЛП в количестве 6 МБк.

Основным недостатком указанного способа является использование калибровочной зависимости для β-частиц, полученной в другой лаборатории. Кроме того, результаты применения РФЛП на основе ¹⁸⁸Re не анализировались.

Известен способ оценки побочного действия РФЛП на основе ⁹⁰Y при анализе результатов облучения донорской крови для обоснования биологической дозиметрии в результате РСЭ при персистирующих синовитах в случае внутрисуставного введения РФЛП на основе ⁹⁰Y [Schmid et al. Radiat Environ Biophys. 2006, 45(2): 93-98]. Для получения калибровочной дозовой зависимости в указанной работе поглощенные дозы были рассчитаны при воздействии ⁹⁰Y на образцы крови с активностью от 40 до 400 кБк с использованием метода Монте-Карло и аналитической модели. В результате была предложена линейная зависимость доза-дицентрики (α = 0,0229 ± 0,0028, на клетку на Гр) в диапазоне доз 0,22-2,2 Гр.

Основным недостатком указанного способа является использование калибровочной зависимости для β-частиц, полученной путем моделирования методом Монте Карло и аналитическим расчетом. Кроме того, результаты применения РФЛП на основе ¹⁸⁸Re не анализировались.

Известен способ оценки побочного действия РФЛП на основе ⁹⁰Y при введении активности в пределах 3-5 мКи [Lloyd DC et al. The Lancet. 1978, 311(8064): 617]. В работе были проанализированы образцы крови 20 пациентов до РСЭ и через 6 недель после введения РФЛП. В результате было получено несущественное превышение частоты дицентрических аберраций вследствие РСЭ. Авторы сделали заключение, что иммобилизация суставов после РСЭ приводит к снижению частоты хромосомных аберраций в лимфоцитах крови.

Основным недостатком указанного способа является отсутствие возможности оценить побочную дозовую нагрузку на пациента непосредственно по частоте хромосомных аберраций. Кроме того, результаты применения РФЛП на основе ¹⁸⁸Re не анализировались.

Известен способ оценки побочного действия РФЛП на основе ¹⁸⁶Re и ¹⁶⁹Er [Manil et al. Nuclear Med Comm. 2001; 22(4): 405-416]. В работе была применена физическая и биологическая дозиметрия у 45 больных ревматоидным артритом, получавших РСЭ при проблемах с суставами средних размеров и с суставами пальцев. Биологическая дозиметрия заключалась в анализе дицентриков в лимфоцитах крови, культивируемых в образцах, взятых непосредственно до ведения РФЛП и через 6 ч, 24 ч и 7 дней после терапии. Для РФПЛ на основе ¹⁸⁶Re были проанализированы данные о 23 суставов запястья, девять локтей, три плеча и два лодыжки, введенные 24 пациентам, максимум в три сустава на пациента (70 МБк на сустав). В результате 20 пациентов (из 24) и 10 (из 10) были признаны пригодными для биологической и физической дозиметрии соответственно, и восемь (из 10) для обоих методов. Для РФПЛ на основе ¹⁸⁶Re биологические результаты были отрицательными у 16 пациентов (из 20), при этом было оценено облучение порядка 200 мГр. Был отмечен значимый рост частоты дицентриков через 7 дней после инъекции (16/10 000 по сравнению с 5/10 000 до терапии, p<0,04). Анализ данных по γ-излучению показал, что доза на кровь составила 23,9+19,8 мГр/70 МБк, а эффективная доза составила 26,7+5,1 мГр/70 МБк, т.е. около 380 μГр×МБк. Утечка ¹⁸⁶Re оказалось повышенной, о чем свидетельствует высокая активность крови и индукция дицентриков лимфоцитов крови.

Недостатком указанного способа является отсутствие возможности оценить побочную дозовую нагрузку на пациента непосредственно по частоте хромосомных аберраций. Кроме того, результаты применения РФЛП на основе ¹⁸⁸Re не анализировались.

Самым близким прототипом предложенного способа является метод оценки побочного действия РФЛП на основе ⁹⁰Y при РСЭ стойкого синовита коленного сустава по частоте хромосомных аберраций в лимфоцитах крови [Voth et al. Nuklearmedizin. 2006; 45(5): 223-228]. Авторы осуществляли забор периферической крови, получали образцы суспензии, содержащие лимфоциты, затем на цитогенетических препаратах, приготовленных из суспензий, определяли частоту радиационных маркеров. При частоте, превышающей спонтанный уровень, подтверждали возможность опасного побочного облучения.

Недостатком указанного способа является использование калибровочной зависимости для β-частиц, полученной в другой лаборатории. Кроме того, результаты применения РФЛП на основе ¹⁸⁸Re не анализировались.

Все перечисленные выше аналоги предлагаемого способа оценки радиационной безопасности РСЭ предложены и реализованы за рубежом. Российские аналоги отсутствуют полностью.

Техническим результатом заявляемого способа является создание нового, простого в исполнении, с достаточно высокой чувствительностью, точностью, специфичностью и недорогостоящего метода оценки радиационной безопасности пациентов при проведении РСЭ коленных суставов РФЛП «Микросферы альбумина 5-10 мкм, меченные ¹⁸⁸Re» при внутрисуставном введении.

Технический результат достигается тем, что также как и в известном прототипе из периферической крови получают образец суспензии, содержащий лимфоциты и проводят цитогенетический анализ хромосомных аберраций на световом микроскопе.

Особенностью заявляемого способа является то, что до введения радиофармацевтического лекарственного препарата (РФЛП) у пациента делают забор периферической крови по 10 мл - «день 0», затем на 3 сутки после введения РФЛП «день 3», приготавливают цитогенетические препараты для биологической дозиметрии методом анализа аберраций хромосомного типа: парных фрагментов, центрических колец и дицентриков при общем числе проанализированных метафаз на один образец не менее 300, что является количественным показателем радиационного воздействия в форме индукции суммы аберраций хромосомного типа за период: «день 0» - «день 3», для чего частоту аберраций F вычисляют по формуле:

F = 100*(ace+rc+dic)/Cells,

где:

ace - парные фрагменты;

rc - центрические кольца;

dic - дицентрики;

Cells - число проанализированных метафаз,

далее индукцию радиационных маркеров, ΔF, вычисляют как разность частот на «день 3» и «день 0», а также выполняют биологическую дозиметрию с оценкой побочной дозы общего внутреннего облучения, D, и если прирост ΔF за счет введения РФЛП статистически не отличается от нуля, равно как и рассчитанная доза D, то обследованный пациент не относится к группе радиационного риска от побочного воздействия РФЛП.

Предлагаемый способ поясняется подробным описанием, клиническими примерами и иллюстрациями, на которых изображено:

Фиг. 1 - Фотоиллюстрация аберрантной метафазы с аберрациями хромосомного типа при стандартном анализе: 1 - дицентрик, 2, 3 - ацентрические парные фрагменты.

Фиг. 2 - Диаграмма: калибровочная дозовая зависимости частоты радиационных маркеров (ace+dic+rc) для расчета побочного радиационного воздействия РФЛП с учетом эффекта мощности дозы.

Первым этапом предлагаемого способа является стандартный цитогенетический анализ, согласно рекомендациям [МАГАТЭ, 2011]. Такой анализ является «золотым стандартом» биологической дозиметрии и широко применяется, хотя сам по отдельности не может являться предметом патентования. В рамках предлагаемого способа оценки радиационной безопасности РФЛП стандартный анализ представляет собой следующую процедуру.

В период клинических обследований у пациентов забирают по 10 мл периферической крови до введения РФЛП на день 0 и через 3 суток на день 3 при помощи вакуумной системы, содержащей Li-гепарин в концентрации 20 МЕ на 1 мл крови.

На основе полученных образцов крови приготавливают цитогенетические препараты для микроскопического анализа и последующей биологической дозиметрии. Для этого в условиях стерильности готовят культуральную среду на основе питательной среды RPMI-1640. Культуральную среду разливают в стерильные пробирки, добавляют по 1 мл цельной крови и 0,15 мл фитагеммаглютинина в концентрации 1 мг/мл. Содержимое пробирок культивируют при температуре 37°C в течение 48 часов. За 2 часа до окончания культивирования добавляют демеколцин из расчета 0,2 мкг/мл среды. Культуру клеток из флаконов переливают в 15 мл пробирки и центрифугируют 15 минут при 1000 об/мин. Надосадочную жидкость удаляют и ресуспензируют осадок. Далее проводят гипотонизацию клеток, для чего добавляют к осадку 10 мл гипотонического раствора КСl, 0,75 М при температуре раствора 37°C и выдерживают при данной температуре в термостате 30 мин. Затем пробы вновь центрифугируют и удаляют надосадочную жидкость. Фиксацию осадка проводят смесью ледяной уксусной кислоты и метилового спирта в объемном соотношении 1:3 путем 4-х кратной заливки с последующим ресуспендированием осадка.

Для приготовления цитогенетического препарата 40 мкл суспензии раскапывают на предметное стекло, смоченное безворсовой салфеткой. Стекло подписывают и высушивают при комнатной температуре. Для проведения гидролиза стёкла ставят в ванночку и заливают 5N нормальной соляной кислотой и выдерживают 4 мин. Высушенные стекла окрашивают раствором в составе: красителя 0,1 % раствора эозина (Serva, США), 0,1% раствора азура (Merck, Германия) и дистиллированной воды, соответственно, в объемном соотношении 1:2:3,5 и 5 капель 5% раствора соды. После высыхания готовые препараты анализируют на бинокулярном микроскопе под иммерсией при увеличении 90х10. Пригодными для анализа признаются: клетки 1-го митоза; равномерно и хорошо окрашенные, лежащие свободно метафазные пластинки, с хорошо расправленными хромосомами. Недопустимо наличие в пластинке большого числа наложений хромосом, особенно продольных, т.к. в этом случае можно ложно определить избыточное число обменных аберраций.

Для биологической дозиметрии детектируют аберрации хромосомного типа: парные фрагменты, центрические кольца и дицентрики, см. Фиг. 1, при общем числе проанализированных метафаз на один образец не менее 300 (практический максимум до 1000), что является количественным показателем радиационного воздействия в форме индукции суммы аберраций хромосомного типа за период: «день 0» - «день 3», для чего частоту аберраций F вычисляют по формуле:

F = 100*(ace+rc+dic)/Cells, где:

ace - парные фрагменты;

rc - центрические кольца;

dic - дицентрики;

Cells - число проанализированных метафаз.

Далее индукцию радиационных маркеров ΔF вычисляют как разность частоты на день 3 и день 0, а также выполняют биологическую дозиметрию по вычисленной индукции ΔF с оценкой побочной дозы общего внутреннего облучения, D, согласно калибровочной дозовой зависимости, представленной на Фиг.2.

В том случае, когда прирост ΔF за счет введения РФЛП статистически не отличается от нуля, равно как и рассчитанная доза D, то обследованный пациент не относится к группе радиационного риска от побочного воздействия РФЛП.

Клинические примеры выполнения.

Пример 1

Пациент З., 39 лет. Находился на лечении в отделении радиохирургического лечения открытыми радионуклидами МРНЦ им. А.Ф. Цыба по причине рецидивирующего синовита коленного сустава, резистентного к стандартной терапии. В апреле 2022 г проходил РСЭ препаратом РФЛП «Микросферы альбумина 5-10 мкм, меченные ¹⁸⁸Re» путем однократного внутрисуставного введения РФЛП с активностью 370 МБк.

Было проведено цитогенетическое обследование предложенным способом, а именно: взяли у пациента по 10 мл периферической крови до введения РФЛП на день 0 и через 3 суток на день 3, приготовили цитогенетические препараты для биологической дозиметрии с анализом аберраций хромосомного типа: парных фрагментов, центрических колец и дицентриков при общем числе проанализированных метафаз на один образец по 300 метафаз.

В результате были получены следующие результаты:

День 0: 300 клет., 5 ace, 0 rc, 0 dic.

День 3: 300 клет., 3 ace, 0 rc, 2 dic.

Критерий 1. Частота аберраций на:

день 0 - F₀=1,67±0,74;

день 3 - F₃=1,67±0,74;

ΔF = F₃ - F₀ = 0,0±1,48.

Вывод 1. Побочное радиационное воздействие не выявлено, поскольку индукция аберраций значимо не отличается от нуля (p<0,05).

Критерий 2. Индукция (прирост) частоты хромосомных аберраций (ace+rc+dic) составил ΔF = 0,0±1,48, что соответствует общей дозе D = 0,0±360 мГр.

Вывод 2. Побочное радиационное воздействие безопасно, поскольку доза значимо не отличается от нуля (p<0,05).

Пример 2

Пациентка Л., 43 года. Находилась на лечении в отделении радиохирургического лечения открытыми радионуклидами МРНЦ им. А.Ф. Цыба по причине рецидивирующего синовита коленного сустава, резистентного к стандартной терапии. В апреле 2022 г проходила РСЭ препаратом РФЛП «Микросферы альбумина 5-10 мкм, меченные ¹⁸⁸Re» путем одноразового внутрисуставного введения РФЛП с активностью 370 МБк.

Было проведено цитогенетическое обследование предложенным способом, а именно: взяли у пациентки по 10 мл периферической крови до введения РФЛП на день 0 и через 3 суток на день 3, приготовили цитогенетические препараты для биологической дозиметрии с анализом аберраций хромосомного типа: парных фрагментов, центрических колец и дицентриков при общем числе проанализированных метафаз на один образец по 300 метафаз.

В результате цитогенетического обследования были получены следующие результаты:

День 0: 300 клет., 2 ace, 0 rc, 0 dic.

День 3: 300 клет., 0 ace, 1 rc, 7 dic.

Критерий 1. Частота аберраций на:

- день 0 - F₀=0,67±0,47;

- день 3 - F₃=2,67±0,94;

ΔF = F₃ - F₀ = 2,00±1,41.

Вывод 1. Побочное радиационное воздействие незначимо, поскольку прирост частоты хромосомных аберраций статистически не отличается от нуля (p<0,05).

Критерий 2. Индукция (прирост) частоты хромосомных аберраций (ace+rc+dic) составил ΔF = 2,00±1,41, что соответствует общей дозе D = 412±496 мГр.

Вывод 2. Побочное радиационное воздействие безопасно, поскольку доза значимо не отличается от нуля и в среднем существенно меньше нормативного предела в 2000 мГр.

Пример 3

Пациентка П., 62 года, Находилась на лечении в отделении радиохирургического лечения открытыми радионуклидами МРНЦ им. А.Ф. Цыба по причине рецидивирующего синовита коленного сустава, резистентного к стандартной терапии, В июле 2022 г проходила РСЭ препаратом РФЛП «Микросферы альбумина 5-10 мкм, меченные ¹⁸⁸Re» путем одноразового внутрисуставного введения РФЛП с активностью 740 МБк.

Было проведено цитогенетическое обследование предложенным способом, а именно: взяли у пациента по 10 мл периферической крови до введения РФЛП на день 0 и через 3 суток на день 3, приготовили цитогенетические препараты для биологической дозиметрии с анализом аберраций хромосомного типа: парных фрагментов, центрических колец и дицентриков при общем числе проанализированных метафаз на один образец по 300 метафаз.

В результате цитогенетического обследования были получены следующие результаты:

День 0: 300 клет., 1 ace, 0 rc, 1 dic.

День 3: 300 клет., 2 ace, 1 rc, 1 dic.

Критерий 1, Частота аберраций на:

- день 0 - F₀=0,67±0,47 ;

- день 3 - F₃=1,33±0,67.

Прирост частоты ΔF = F₃ - F₀ = 0,66±1,14.

Вывод 1. Побочное радиационное воздействие незначимо, поскольку прирост частоты хромосомных аберраций статистически не отличается от нуля (p<0,05).

Критерий 2. Индукция (прирост) частоты хромосомных аберраций (ace+rc+dic) составил, ΔF = 0,66±1,14, что соответствует общей дозе D = 147±358 мГр.

Вывод 2. Побочное радиационное воздействие безопасно, поскольку доза значимо не отличается от нуля и в среднем существенно меньше нормативного предела в 2000 мГр.

Предлагаемый способ обеспечивает при использовании следующий технико-экономический эффект:

- может осуществляться в условиях стандартной цитогенетической лаборатории, без использования специального дорогостоящего оборудования;

- обладает высокой чувствительностью и специфичностью, позволяет объективно и своевременно прогнозировать риск побочного радиационного воздействия РФЛП в постклинический период наблюдения за пациентом и предпринимать адекватные лечебные мероприятия.

Способ относится к медицине и биотехнологии. Предложен способ оценки радиационной безопасности радиофармпрепарата «Микросферы альбумина, меченные ¹⁸⁸Re» при проведении радиосиновэктомии коленного сустава, включающий до введения радиофармацевтического лекарственного препарата (РФЛП) у пациента забор периферической крови по 10 мл - «день 0», затем на 3 сутки после введения РФЛП «день 3»; далее приготавливают цитогенетические препараты для биологической дозиметрии методом анализа аберраций хромосомного типа на световом микроскопе: парных фрагментов, центрических колец и дицентриков при общем числе проанализированных метафаз на один образец не менее 300, и вычисляют частоту аберраций F по заданной формуле; индукцию радиационных маркеров ΔF вычисляют как разность частот на «день 3» и «день 0», выполняют биологическую дозиметрию с оценкой побочной дозы общего внутреннего облучения D, и если прирост ΔF за счет введения РФЛП статистически не отличается от нуля, равно как и рассчитанная доза D, то обследованный пациент не относится к группе радиационного риска от побочного воздействия РФЛП. Изобретение обеспечивает расширение арсенала методов оценки радиационной безопасности пациентов при проведении радиосиновэктомии коленных суставов РФЛП «Микросферы альбумина 5-10 мкм, меченные ¹⁸⁸Re» при внутрисуставном введении. 2 ил., 3 пр.

Способ оценки радиационной безопасности радиофармпрепарата «Микросферы альбумина, меченные ¹⁸⁸Re» при проведении радиосиновэктомии коленного сустава, включающий забор периферической крови, получение образца суспензии, содержащей лимфоциты первого митоза и проведение цитогенетического анализа хромосомных аберраций на световом микроскопе, отличающийся тем, что до введения радиофармацевтического лекарственного препарата (РФЛП) у пациента делают забор периферической крови по 10 мл - «день 0», затем на 3 сутки после введения РФЛП «день 3», приготавливают цитогенетические препараты для биологической дозиметрии методом анализа аберраций хромосомного типа: парных фрагментов, центрических колец и дицентриков при общем числе проанализированных метафаз на один образец не менее 300, что является количественным показателем радиационного воздействия в форме индукции суммы аберраций хромосомного типа за период: «день 0» - «день 3», для чего частоту аберраций F вычисляют по формуле

F = 100*(ace+rc+dic)/Cells,

где ace - парные фрагменты;

rc - центрические кольца;

dic - дицентрики;

Cells - число проанализированных метафаз,

далее индукцию радиационных маркеров ΔF вычисляют как разность частот на «день 3» и «день 0», а также выполняют биологическую дозиметрию с оценкой побочной дозы общего внутреннего облучения D, и если прирост ΔF за счет введения РФЛП статистически не отличается от нуля, равно как и рассчитанная доза D, то обследованный пациент не относится к группе радиационного риска от побочного воздействия РФЛП.