Применение ферментной кормовой добавки для кормления лошадей Российский патент 2025 года по МПК A23K50/20 A23K10/12 

Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной медицины, в частности к применению ферментной кормовой добавки для лошадей.

Способ включает использование штаммов бактерий Bacillus subtilis 2СП и Bacillus subtilis 5СП в качестве кормовой добавки. Способ позволяет повысить среднесуточный привес живой массы молодняка лошадей.

Аналоги изобретения

Известно изобретение (патент РФ №2669299, опубл. 09.10.2018 г., бюл. № 28), представляющее собой биологически активную кормовую добавку для животных и птиц, содержащую диатомит, алюмосиликат, бактерии Bacillus subtilis и Bacillus licheniformis, дрожжи Saccharomyces cerevisiae, расторопшу, лимонную и янтарную кислоты. Способ изготовления включает измельчение и смешивание компонентов с последующим распылением и перемешиванием. Изобретение направлено на увеличение прироста массы, снижение падежа и улучшения иммунитета и пищеварения у животных и птиц. Недостатком данного изобретения является сложность производства многокомпонентной кормовой добавки, требующей точного соблюдения технологического процесса измельчения, смешивание и нанесение компонентов. Также отсутствует данные о конкретных штаммах бактерий и дрожжей, что затрудняет обеспечение стабильности и эффективности продукта.

Известен штамм мицелиального гриба Trichoderma Longibrachiatum TW- 14-220T (патент РФ №2654564, опубл. 21.05.2018 г., бюл. № 15) - продуцент комплекса ферментов: КМЦ-аза 280 ед./мл, β-глюканаза 245 ед./мл и ксиланаза 470 ед./мл. Изобретение имеет недостатки, связанные с процессами культивирования, центрифугирования, фильтрации, ультрафильтрации и лиофилизации культуральной жидкости, что требует значительных затрат на оборудование и энергию и делает производство кормового комплексного ферменного препарата дорогостоящим.

Известно использование штамма Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП для обеззараживания птичьего помета и навоза от патогенных микроорганизмов, который был выделен из мерзлотной почвы Якутии (патент РФ №2105810, опубл. 27.02.1998 г.). Кроме того, известны штаммы Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП, используемые для профилактики диарейных болезней у новорожденных телят и поросят (патент РФ №2218924, опубл. 20.12.2003 г.). Эти штаммы были предложены для лечения желудочно-кишечных заболеваний у телят и поросят. Кроме того, штаммы Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП применяются для санации вымени коров (патент РФ №2694204, опубл. 09.07.2019 г., бюл. №19) и для дезинфекции животноводческих помещений в присутствии животных при низких положительных температурах (патент РФ №2694253, опубл. 11.07.2019 г., бюл. №20). Однако в этих патентах нет сведений о штаммах бактерий Bacillus subtilis 2СП ВКПМ В-14405 и Bacillus subtilis 5СП ВКПМ В-14406 и их ферментных свойствах.

Известен штамм бактерий Bacillus subtilis ВКПМ-В-5790 (патент РФ №2046141, опубл. 20.10.1995 г.), культивирование которого происходит на питательной среде, содержащей пивную дробину, БВК и 1% KH₂PO₄, имеющий комплекс гидролитических ферментов: 1,3-1,4 β-глюконаза 60-70 ед./мл, 1,3-1,4 β-глюкозида 55-60 ед./мл, β-1,4 эндоглюканаза 4-6 ед./мл, β-1,4 маннаназа 8-10 ед./мл, ксиланаза 21-27 ед./мл, β- амилаза 15-20 ед./мл, протеаза нейтральная 1-3 ед./мл. Наиболее близким к заявляемому объекту является Bacillus subtilis ВКПМ-В-5790. Однако недостатками известных способов, в том числе и ближайшего аналога, является многокомпонентность питательной среды для культивирования, высокие экономические затраты на составные части и их труднодоступность.

В основу изобретения положена задача разработки применения ферментной кормовой добавки.

Технический результат изобретения

Для изготовления ферментной кормовой добавки используют равные части штаммов бактерий Bacillus subtilis 2СП ВКПМ В-14405 и Bacillus subtilis 5СП ВКПМ В-14406, выращенные в питательной среде, содержащей 3% овсяного отвара в 1%-ном растворе хлористого натрия. Введение в зимний рацион ослабленному молодняку лошадей ферментной кормовой добавки повышает среднесуточные привесы живой массы на 620 г.

В качестве компонента ферментной кормовой добавки используют культуры штамма бактерий Bacillus subtilis 2СП ВКПМ В-14405 и штамма бактерий Bacillus subtilis 5СП ВКПМ В-14406, депонированных в Биоресурсном центре - Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (БЦР ВКПМ) национального исследовательского центра «Курчатовский институт». Справки о депонировании от 20 июля 2023 г. Регистрационный номер ВКПМ В-14405 и ВКПМ В-14406.

Штамм бактерий Bacillus subtilis 2СП выделен из пристеночной микробиоты толстого отдела кишечника дикой косули (Capreolus pygargus) из местности Усть-Алданского р-на Республики Саха (Якутия). Штамм обладает амилолитической и ксиланазной активностью, также антагонистической активностью в отношении возбудителей стафилококовой и стрептококовой инфекции.

Штамм бактерий Bacillus subtilis 5СП выделен из просветной микробиоты тонкого отдела кишечника бурого медведя (Ursus arctos L.) из местности Намского р-на Республики Саха (Якутия). Штамм обладает амилолитической и ксиланазной активностью, также антагонистической активностью в отношении сальмонелл.

Штаммы бактерий Bacillus subtilis 2СП и Bacillus subtilis 5СП выращивают в жидкой питательной среде, содержащей 3% овсяного отвара и 1% NaCl, в течение 72 часов при температуре 37°С и скорости вращения шейкер-инкубатора 230 об/мин. Питательную среду предварительно подогревают стерилизацией при 1,1 атм в течение 20 минут. Для посева бактерий в данной питательной среде используют культуру штаммов бактерий Bacillus subtilis 2СП и Bacillus subtilis 5СП, выращенных на мясо-пептонном агаре и разведенных до достижения оптической плотности 10 МЕ (международная единица), что соответствует 1,86×10⁹ в физрастворе. Данную суспензию добавляют в питательную среду в соотношении 0,1:100 мл. Водородный показатель (ph) данных культуральных жидкостей составляет 6,15 на первый день посева, а затем варьируется в пределах 6,93-7,29 со 2-го по 5-й день, что обеспечивает оптимальные условия для роста и размножения данного вида бактерий.

Для изобретения ферментной кормовой добавки берут равные части культуры штаммов бактерий Bacillus subtilis 2СП и Bacillus subtilis 5СП, в концентрации 5×10⁹ КОЕ/мл.

В целях определения эффективности ферментной кормовой добавки отбирают 10 голов ослабленного молодняка 10-11-месячного возраста. Первой (опытной) группе из 10 голов ослабленных жеребят назначают на 1 голову 15 мл ферментной кормовой добавки с овсом 50 граммов в течение 10 дней, а второй группе (10 голов клинически здоровых жеребят) добавку не дают и в дальнейшем используют в качестве контроля. Рацион опытного к контрольной группы составляет в день 2 кг овса и 4 кг сена.

До назначения кормовой добавки, также через 10 и 30 дней определяют живую массу взвешиванием.

До назначения добавки живая масса опытной группы жеребят составляет в среднем 154,7±7,2 кг, через 10 дней - 162,3±8,6 кг. Прибавка средней живой массы за 10 дней применения кормовой добавки составляет 7,6±1,5 кг. Среднесуточные привесы - 760 г.

В контрольной группе живая масса до опыта составляет в среднем 188,8±19,5 кг, через 10 дней - 190,2±20,1 кг. Прибавка живой массы за 10 дней составляет 1,4±0,6 кг. Среднесуточные привесы - 140 г.

В течение 30 дней наблюдения живая масса опытной группы составляет 169,7±9,4 кг. Прибавка живой массы за 30 дней составляет 15 кг, среднесуточные привесы - 500 г.

В контрольной группе живая масса через 30 дней - 195,8±22,4 кг. Прибавка живой массы за 30 дней составляет 7 кг. Среднесуточные привесы - 233,3 г.

Таким образом, кормовая добавка из штаммов бактерий Bacillus subtilis 2СП и Bacillus subtilis 5СП повышает живую массу ослабленного молодняка лошадей в зимний период и может быть использована в качестве ферментной кормовой добавки для молодняка лошадей.

Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной медицины, в частности к применению ферментной кормовой добавки для лошадей. Ферментная кормовая добавка состоит из равных частей штаммов бактерий Bacillus subtilis 2СП ВКПМ В-14405 и Bacillus subtilis 5СП ВКПМ В-14406 в концентрации 5×10⁹ КОЕ, выращенных в жидкой питательной среде, содержащей 3% овсяного отвара в 1%-ном растворе хлористого натрия. Ферментную кормовую добавку назначают по 15 мл в течение 10 дней. Использование изобретения позволит повысить среднесуточные привесы живой массы ослабленного молодняка лошадей.

Применение ферментной кормовой добавки, состоящей из равных частей штаммов бактерий Bacillus subtilis 2СП ВКПМ В-14405 и Bacillus subtilis 5СП ВКПМ В-14406 в концентрации 5×10⁹ КОЕ, выращенных в жидкой питательной среде, содержащей 3% овсяного отвара в 1%-ном растворе хлористого натрия, для кормления лошадей, причем ферментную кормовую добавку назначают по 15 мл в течение 10 дней.