СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ УСТОЙЧИВОСТИ КРОЛИКОВ К ТОКСИЧЕСКОМУ ДЕЙСТВИЮ КИСЛОРОДА Российский патент 2025 года по МПК A61B5/87 A61B5/113 G01N33/49 G09B23/28 

Изобретение относится к области медицины, в частности авиационной, космической, морской медицины и может быть использовано в экспериментальных исследованиях в области биологии и водолазной медицины для повышения точности определения степени устойчивости кроликов к токсическому действию кислорода, путем оценки динамики тяжести симптомов заболевания и биохимических показателей крови животных.

В биологических исследованиях, а также исследованиях в области авиационной и экспериментальной медицины известны способы определения индивидуальной устойчивости кроликов и других мелких лабораторных животных к гипобарической гипоксической гипоксии (Патент 2563059 С2, Российская Федерация, МПК G09B 23/28. Способ определения степени устойчивости к гипобарической гипоксии мелких лабораторных животных / Г.А. Байбурина, Е.А. Нургалеева, Д.З. Шибкова, С.А. Башкатов; №2014137731/14; заявл. 17.09.2014; опубл. 20.09.2015 // Изобретения. Полезные модели: офиц. бюл. - М.: ФИПС, 2015. - №26; Шустов Е.Б., Каркищенко Н.Н., Каркищенко В.Н., Семенов Х.Х. Анализ параметров индивидуальной устойчивости лабораторных животных к гипоксии в интересах биологического моделирования нейропротекторного и антигипоксического действия лекарственных средств // Биомедицина, 2013, №4, с. 149-157). В водолазной медицине известны способы определения устойчивости лабораторных животных к циркуляторной гипоксии, развивающейся при декомпрессионной болезни (Патент 2449380 С2, Российская Федерация, МПК G09B 23/28. Способ определения степени устойчивости мелких лабораторных животных к циркуляторной гипоксии / А.Ю. Шитов, A.А. Мясников, Б.Л. Макеев; №2010122952/14; заявл. 04.06.2010; опубл. 27.04.2012 // Изобретения. Полезные модели: офиц. бюл. - М.: ФИПС, 2012. - №12). При токсическом действии кислорода развивается гипероксическая (тканевая) гипоксия, что обусловливает актуальность проведения исследований в данной области.

При этом адекватных и простых способов определения устойчивости кроликов к токсическому действию кислорода в настоящее время не существует. В то же время в практике водолазной медицины известны способы определения устойчивости людей к токсическому действию кислорода (Патент 2709477 С1, Российская Федерация, МПК G01N 33/493. Способ определения степени индивидуальной устойчивости водолазов к токсическому действию кислорода по показателям функций почек / А.Ю. Шитов; - №2019131340; заявл. 03.10.2019; опубл. 18.12.2019 //Изобретения. Полезные модели: офиц. бюл. - М.: ФИПС, 2019. - №35; Патент 2417788 С1, Российская Федерация, МПК A61G 10/02; А61В 5/026. Способ определения степени устойчивости человека к гипероксической гипоксии / А.Ю. Шитов, В.И. Кулешов, Б.Л. Макеев; №2009140796/14; заявл. 03.11.2009; опубл. 10.05.2011 // Изобретения. Полезные модели: офиц. бюл. - М.: ФИПС, 2011. - №13). Данные способы основаны на определении физиологических функций организма человека в условиях повышенного давления газовой среды и используются для профессионального отбора водолазов (Семенцов В.Н., Иванов И.В. Функциональные тесты для профессионального отбора водолазов и кессонщиков (обзор литературы)//Известия Российской Военно-медицинской академии, 2019, №3, с. 207-216; Семенцов B.Н., Иванов И.В. Использование нагрузочных тестов при экспертной оценке состояния здоровья и надежности труда водолазов//Медицина труда и промышленная экология, 2019, №59 (12), с. 1000-1008). Также у человека для определения устойчивости к токсическому действию кислорода может использоваться анализ вариабельности сердечного ритма (Самойлов А.С., Никонов Р.В., Пустовойт В.И., Ключников М.С. Применение методики анализа вариабельности сердечного ритма для определения индивидуальной устойчивости к токсическому действию кислорода // Спортивная медицина: наука и практика, 2020, т. 10, №3, с. 73-80). У кроликов применение таких методик невозможно из-за технических и организационных сложностей, а также из-за необходимости применения сложного оборудования. В то же время в исследованной литературе встречаются способы диагностики состояний функций организма кроликов по биохимическим показателям в ходе воздействия пониженного и повышенного давления окружающей среды (Старовойт А.В. Клинико-лабораторная оценка метаболических нарушений при воздействии повышенного и пониженного давления и подходы к их коррекции // Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата мед. наук, 14.03.10, 14.03.08, СПб, ВМедА, 2011, 23 с.). Исследование клинических и биохимических показателей организма кроликов на наш взгляд является наиболее перспективными методиками для оценки их устойчивости к факторам гипо- и гипербарии.

Таким образом, большинство способов определения устойчивости к токсическому действию кислорода используется в исследованиях с участием человека, а их результаты не могут быть прямо экстраполированы на кроликов. Поэтому явных прототипов способа определения устойчивости кроликов к токсическому действию кислорода в исследованной литературе нами обнаружено не было.

Ближайшим аналогом предлагаемого нами способа является «Способ определения степени устойчивости к гипобарической гипоксии мелких лабораторных животных» (Патент 2563059 С2, Российская Федерация, МПК G09B 23/28. Способ определения степени устойчивости к гипобарической гипоксии мелких лабораторных животных/ Г.А. Байбурина, Е.А. Нургалеева, Д.З. Шибкова, С.А. Башкатов; №2014137731/14; заявл. 17.09.2014; опубл.20.09.2015// Изобретения. Полезные модели: офиц. бюл. - М.: ФИПС, 2015. - №26). Также близким по физиологической направленности будет «Способ определения степени устойчивости человека к гипероксической гипоксии» (Патент 2417788 С1, Российская Федерация, МПК A61G 10/02; А61В 5/026. Способ определения степени устойчивости человека к гипероксической гипоксии / А.Ю. Шитов, В.И. Кулешов, Б.Л. Макеев; №2009140796/14; заявл. 03.11.2009; опубл. 10.05.2011 // Изобретения. Полезные модели: офиц. бюл. - М.:ФИПС, 2011. - №13).

Однако методики, представленные в данных способах, предназначены для моделирования либо хронической нормобарической гипоксической гипоксии, либо проводятся с участием человека, что требует проведения исследований на кроликах. Эти способы не учитывают биохимические показатели организма, подвергаемого токсическому действию кислорода. Указанные обстоятельства не способствуют повышению точности исследований по определению устойчивости кроликов к токсическому действию кислорода.

Целью изобретения является повышение точности определения степени устойчивости кроликов к токсическому действию кислорода.

Цель достигается тем, что используется способ определения степени устойчивости кроликов к токсическому действию кислорода, включающий биохимическое исследование крови животных, размещение кроликов в барокамере, герметизацию барокамеры, повышение давления в барокамере медицинским кислородом, оценку динамики тяжести симптомов кислородной интоксикации, отличающийся тем, что в барокамере за одну минуту повышают давление медицинским кислородом до величины 40 м вод.ст., через 15 мин давление кислорода снижают до атмосферного в течение 5 мин, причем во время нахождения кроликов в барокамере и в течение 30 минут после извлечения оттуда, наблюдают за их состоянием и каждые 10 минут определяют выраженность и время наступления симптомов кислородной интоксикации и на 30 минуте определяют выраженность нарушений биохимического статуса организма, а затем по формуле определяют оценку динамики тяжести симптомов кислородной интоксикации и выраженность нарушений биохимического статуса организма U:

где:

А - максимальная степень выраженности симптомов кислородной интоксикации в течение первых 5 минут нахождения в гипероксической дыхательной газовой среде;

при этом отсутствие симптомов кислородной интоксикации оценивают в 1 балл;

изменения дыхания, в том числе учащение, прерывистость, участие в дыхании брюшной стенки, признаки беспокойства кроликов оценивают в 24 балла;

клонические подергивания головы, запрокидывания ее, нарушения координации движений, падение и неподвижное положение на полу барокамеры оценивают в 36 баллов;

возникновение судорог различных частей тела оценивают в 42 балла;

возникновение непрерывных клонических судорог всего тела оценивают в 52 балла;

возникновение опистотонуса оценивают в 78 баллов;

В - максимальная степень выраженности симптомов кислородной интоксикации с 6-й по 15-ю минуты нахождения в гипероксической дыхательной газовой среде;

при этом отсутствие симптомов кислородной интоксикации оценивают в 1 балл;

изменения дыхания, в том числе учащение, прерывистость, участие в дыхании брюшной стенки, признаки беспокойства кроликов оценивают в 12 баллов;

клонические подергивания головы, запрокидывания ее, нарушения координации движений, падение и неподвижное положение на полу барокамеры оценивают в 24 балла;

возникновение судорог различных частей тела оценивают в 28 баллов;

возникновение непрерывных клонических судорог всего тела оценивают в 36 баллов;

возникновение опистотонуса оценивают в 52 балла;

С - максимальная степень выраженности симптомов кислородной интоксикации с 1-й по 10-ю минуты после извлечения кроликов из барокамеры;

при этом отсутствие симптомов кислородной интоксикации оценивают в 1 балл;

изменения дыхания, в том числе учащение, прерывистость, участие в дыхании брюшной стенки, признаки беспокойства кроликов оценивают в 6 баллов;

клонические подергивания головы, запрокидывания ее, нарушения координации движений, падение и неподвижное положение на полу барокамеры оценивают в 12 баллов;

возникновение судорог различных частей тела оценивают в 16 баллов;

возникновение непрерывных клонических судорог всего тела оценивают в 24 балла;

возникновение опистотонуса оценивают в 36 баллов;

D - максимальная степень выраженности симптомов кислородной интоксикации с 11-й по 20-ю минуты после извлечения кроликов из барокамеры;

при этом отсутствие симптомов кислородной интоксикации оценивают в 1 балл;

изменения дыхания, в том числе учащение, прерывистость, участие в дыхании брюшной стенки, признаки беспокойства кроликов оценивают в 4 балла;

клонические подергивания головы, запрокидывания ее, нарушения координации движений, падение и неподвижное положение на полу барокамеры оценивают в 8 баллов;

возникновение судорог различных частей тела оценивают в 12 баллов;

возникновение непрерывных клонических судорог всего тела оценивают в 16 баллов;

возникновение опистотонуса оценивают в 24 балла;

Е - максимальная степень выраженности симптомов кислородной интоксикации с 21-й по 30-ю минуты после извлечения кроликов из барокамеры;

при этом отсутствие симптомов кислородной интоксикации оценивают в 1 балл;

изменения дыхания, в том числе учащение, прерывистость, участие в дыхании брюшной стенки, признаки беспокойства кроликов оценивают в 2 балла;

клонические подергивания головы, запрокидывания ее, нарушения координации движений, падение и неподвижное положение на полу барокамеры оценивают в 4 балла;

возникновение судорог различных частей тела оценивают в 8 баллов;

возникновение непрерывных клонических судорог всего тела оценивают в 10 баллов;

возникновение опистотонуса оценивают в 12 баллов;

F - степень выраженности нарушений перекисного окисления липидов на 30 минуте после извлечения кроликов из барокамеры по содержанию малонового диальдегида в их крови;

при этом увеличение концентрации малонового диальдегида до 5% от исходного уровня оценивают в 2 балла;

увеличение концентрации малонового диальдегида от 5 до 10% от исходного уровня оценивают в 4 балла;

увеличение концентрации малонового диальдегида от 10 до 20% от исходного уровня оценивают в 8 баллов;

увеличение концентрации малонового диальдегида от 20 до 30% от исходного уровня оценивают в 20 баллов;

увеличение концентрации малонового диальдегида от 30 до 40% от исходного уровня оценивают в 45 баллов;

увеличение концентрации малонового диальдегида от 40 до 50% от исходного уровня оценивают в 65 баллов;

увеличение концентрации малонового диальдегида более 50% от исходного уровня оценивают в 75 баллов;

G - степень выраженности степень выраженности нарушений работы антиоксидантной системы на 30 минуте после извлечения кроликов из барокамеры по содержанию супероксиддисмутазы в их крови;

при этом увеличение концентрации супероксиддисмутазы до 5% от исходного уровня оценивают в 2 балла;

увеличение концентрации супероксиддисмутазы от 5 до 10% от исходного уровня оценивают в 4 балла;

увеличение концентрации супероксиддисмутазы от 10 до 20% от исходного уровня оценивают в 8 баллов;

увеличение концентрации супероксиддисмутазы от 20 до 30% от исходного уровня оценивают в 20 баллов;

увеличение концентрации супероксиддисмутазы от 30 до 40% от исходного уровня оценивают в 45 баллов;

увеличение концентрации супероксиддисмутазы от 40 до 50% от исходного уровня оценивают в 65 баллов;

увеличение концентрации супероксиддисмутазы более 50% от исходного уровня оценивают в 75 баллов;

суммированием определяют индекс устойчивости кроликов к токсическому действию кислорода U в баллах,

кроликов, набравших U 14 и менее баллов, относят к группе высокоустойчивых, 15-64 баллов - к группе устойчивых, с 65-135 баллов - к группе среднеустойчивых, 136-240 баллов - к группе неустойчивых, а получивших более 240 баллов - к группе крайне неустойчивых к токсическому действию кислорода, при этом кролики, у которых отмечается летальный исход от кислородной интоксикации, признавались крайне неустойчивыми к токсическому действию кислорода.

Способ реализуется следующим образом: Используется способ определения степени устойчивости кроликов к токсическому действию кислорода, включающий биохимическое исследование крови животных, размещение кроликов в барокамере, герметизацию барокамеры, повышение давления в барокамере медицинским кислородом, оценку динамики тяжести симптомов кислородной интоксикации, отличающийся тем, что в барокамере за одну минуту повышают давление медицинским кислородом до величины 40 м вод.ст., через 15 мин давление кислорода снижают до атмосферного в течение 5 мин, причем во время нахождения кроликов в барокамере и в течение 30 минут после извлечения оттуда, наблюдают за их состоянием и каждые 10 минут определяют выраженность и время наступления симптомов кислородной интоксикации и на 30 минуте определяют выраженность нарушений биохимического статуса организма, а затем по формуле определяют оценку динамики тяжести симптомов кислородной интоксикации и выраженность нарушений биохимического статуса организма U:

где:

А - максимальная степень выраженности симптомов кислородной интоксикации в течение первых 5 минут нахождения в гипероксической дыхательной газовой среде;

при этом отсутствие симптомов кислородной интоксикации оценивают в 1 балл;

изменения дыхания, в том числе учащение, прерывистость, участие в дыхании брюшной стенки, признаки беспокойства кроликов оценивают в 24 балла;

клонические подергивания головы, запрокидывания ее, нарушения координации движений, падение и неподвижное положение на полу барокамеры оценивают в 36 баллов;

возникновение судорог различных частей тела оценивают в 42 балла;

возникновение непрерывных клонических судорог всего тела оценивают в 52 балла;

возникновение опистотонуса оценивают в 78 баллов;

В - максимальная степень выраженности симптомов кислородной интоксикации с 6-й по 15-ю минуты нахождения в гипероксической дыхательной газовой среде;

при этом отсутствие симптомов кислородной интоксикации оценивают в 1 балл;

изменения дыхания, в том числе учащение, прерывистость, участие в дыхании брюшной стенки, признаки беспокойства кроликов оценивают в 12 баллов;

клонические подергивания головы, запрокидывания ее, нарушения координации движений, падение и неподвижное положение на полу барокамеры оценивают в 24 балла;

возникновение судорог различных частей тела оценивают в 28 баллов;

возникновение непрерывных клонических судорог всего тела оценивают в 36 балла;

возникновение опистотонуса оценивают в 52 балла;

С - максимальная степень выраженности симптомов кислородной интоксикации с 1-й по 10-ю минуты после извлечения кроликов из барокамеры;

при этом отсутствие симптомов кислородной интоксикации оценивают в 1 балл;

изменения дыхания, в том числе учащение, прерывистость, участие в дыхании брюшной стенки, признаки беспокойства кроликов оценивают в 6 баллов;

клонические подергивания головы, запрокидывания ее, нарушения координации движений, падение и неподвижное положение на полу барокамеры оценивают в 12 баллов;

возникновение судорог различных частей тела оценивают в 16 баллов;

возникновение непрерывных клонических судорог всего тела оценивают в 24 балла;

возникновение опистотонуса оценивают в 36 баллов;

D - максимальная степень выраженности симптомов кислородной интоксикации с 11-й по 20-ю минуты после извлечения кроликов из барокамеры;

при этом отсутствие симптомов кислородной интоксикации оценивают в 1 балл;

изменения дыхания, в том числе учащение, прерывистость, участие в дыхании брюшной стенки, признаки беспокойства кроликов оценивают в 4 балла;

клонические подергивания головы, запрокидывания ее, нарушения координации движений, падение и неподвижное положение на полу барокамеры оценивают в 8 баллов;

возникновение судорог различных частей тела оценивают в 12 баллов;

возникновение непрерывных клонических судорог всего тела оценивают в 16 баллов;

возникновение опистотонуса оценивают в 24 балла;

Е - максимальная степень выраженности симптомов кислородной интоксикации с 21-й по 30-ю минуты после извлечения кроликов из барокамеры;

при этом отсутствие симптомов кислородной интоксикации оценивают в 1 балл;

изменения дыхания, в том числе учащение, прерывистость, участие в дыхании брюшной стенки, признаки беспокойства кроликов оценивают в 2 балла;

клонические подергивания головы, запрокидывания ее, нарушения координации движений, падение и неподвижное положение на полу барокамеры оценивают в 4 балла;

возникновение судорог различных частей тела оценивают в 8 баллов;

возникновение непрерывных клонических судорог всего тела оценивают в 10 баллов;

возникновение опистотонуса оценивают в 12 баллов;

F - степень выраженности нарушений перекисного окисления липидов на 30 минуте после извлечения кроликов из барокамеры по содержанию малонового диальдегида в их крови;

при этом увеличение концентрации малонового диальдегида до 5% от исходного уровня оценивают в 2 балла;

увеличение концентрации малонового диальдегида от 5 до 10% от исходного уровня оценивают в 4 балла;

увеличение концентрации малонового диальдегида от 10 до 20% от исходного уровня оценивают в 8 баллов;

увеличение концентрации малонового диальдегида от 20 до 30% от исходного уровня оценивают в 20 баллов;

увеличение концентрации малонового диальдегида от 30 до 40% от исходного уровня оценивают в 45 баллов;

увеличение концентрации малонового диальдегида от 40 до 50% от исходного уровня оценивают в 65 баллов;

увеличение концентрации малонового диальдегида более 50% от исходного уровня оценивают в 75 баллов;

G - степень выраженности степень выраженности нарушений работы антиоксидантной системы на 30 минуте после извлечения кроликов из барокамеры по содержанию супероксиддисмутазы в их крови;

при этом увеличение концентрации супероксиддисмутазы до 5% от исходного уровня оценивают в 2 балла;

увеличение концентрации супероксиддисмутазы от 5 до 10% от исходного уровня оценивают в 4 балла;

увеличение концентрации супероксиддисмутазы от 10 до 20% от исходного уровня оценивают в 8 баллов;

увеличение концентрации супероксиддисмутазы от 20 до 30% от исходного уровня оценивают в 20 баллов;

увеличение концентрации супероксиддисмутазы от 30 до 40% от исходного уровня оценивают в 45 баллов;

увеличение концентрации супероксиддисмутазы от 40 до 50% от исходного уровня оценивают в 65 баллов;

увеличение концентрации супероксиддисмутазы более 50% от исходного уровня оценивают в 75 баллов;

суммированием определяют индекс устойчивости кроликов к токсическому действию кислорода U в баллах,

кроликов, набравших U 14 и менее баллов, относят к группе высокоустойчивых, 15-64 баллов - к группе устойчивых, с 65-135 баллов - к группе среднеустойчивых, 136-240 баллов - к группе неустойчивых, а получивших более 240 баллов - к группе крайне неустойчивых к токсическому действию кислорода, при этом кролики, у которых отмечается летальный исход от кислородной интоксикации, признавались крайне неустойчивыми к токсическому действию кислорода.

Например, необходимо определить устойчивость 3-х кроликов к токсическому действию кислорода. Для этого у кроликов производят забор крови, проводят ее биохимический анализ, затем помещают в барокамеру, герметизируют ее, повышают давление медицинским кислородом до величины 40 м вод.ст., через 15 мин давление кислорода снижают до атмосферного в течение 5 мин, причем во время нахождения кроликов в барокамере и в течение 30 минут после извлечения оттуда, наблюдают за их состоянием и каждые 10 минут определяют выраженность и время наступления симптомов кислородной интоксикации и на 30 минуте определяют выраженность нарушений биохимического статуса организма, а затем по формуле определяют оценку динамики тяжести симптомов кислородной интоксикации и выраженность нарушений биохимического статуса организма.

У кролика №1 до 23 минуты после извлечения из барокамеры симптомы кислородной интоксикации отсутствовали, а затем отмечались изменения дыхания (учащение, прерывистость), которые регистрировались до окончания наблюдения. При проведении биохимического анализа крови кролика оказалось, что уровень малонового диальдегида увеличился на 7%, а супероксиддисмутазы на 4% от исходного уровня. При этом животное выжило. Используя формулу, получаем:

Следовательно, такого кролика мы отнесем к группе высокоустойчивых к токсическому действию кислорода.

У кролика №2 до 15-й минуты выдержки в барокамере симптомы кислородной интоксикации отсутствовали, на 15-й минуте появились изменения в дыхании, на 9-й минуте после извлечения из барокамеры появились клонические подергивания головы, на 13-й минуте после извлечения из барокамеры развился генерализованный судорожный приступ, который к 23 минуте наблюдения перешел в опистотонус. При проведении биохимического анализа крови кролика оказалось, что уровень малонового диальдегида увеличился на 25%, а супероксиддисмутазы на 35% от исходного уровня. При этом животное выжило. Используя формулу, получаем:

Следовательно, такое животное мы отнесем к группе среднеустойчивых к токсическому действию кислорода.

У кролика №3 до 7-й минуты выдержки в барокамере симптомы кислородной интоксикации отсутствовали, на 7 минуте появились признаки беспокойства, была зарегистрирована рвота, на 13-й минуте выдержки появились клонические подергивания головы, на 3-й минуте после извлечения из барокамеры развился генерализованный судорожный приступ, на 14 минуте после извлечения из барокамеры развился опистотонус, проявления которого регистрировались до конца наблюдения. При проведении биохимического анализа крови кролика оказалось, что уровень малонового диальдегида увеличился на 35%, а супероксиддисмутазы на 45% от исходного уровня. Используя формулу, получаем:

При этом животное выжило после проведения эксперимента. Следовательно, такое животное мы отнесем к группе неустойчивых к токсическому действию кислорода.

Проведенные нами экспериментальные исследования на 43 животных убедительно доказали надежность использования данной формулы и высокую точность определения устойчивости кроликов к токсическому действию кислорода (Кулешов В.И. Общетоксическое действие гипербарического кислорода / Кулешов В.И., Мясников А.А., Повзун С.А., Чернов В.И., Шитов А.Ю., Казаков А.Ю., Федоров К.С.// Баротерапия в комплексном лечении раненых, больных и пораженных. Материалы VI Всеармейской научно-практической конференции / Под ред. А.А. Мясникова. - СПб.: ВМедА, 2006. - С. 41-42; Кулешов В.И. Общетоксическое действие гипербарического кислорода / Кулешов В.И., Мясников А.А., Повзун С.А., Чернов В.И., Шитов А.Ю., Казаков А.Ю., Федоров К.С.// Гипербарическая физиология и медицина. - №3, 2006. - С. 24-25). Если проводить сравнение с ближайшими аналогами - методиками, предложенными Байбуриной Г.А. с соавторами и Шитовым А.Ю. с соавторами (Патент 2563059 С2, Российская Федерация, МПК G09B 23/28. Способ определения степени устойчивости к гипобарической гипоксии мелких лабораторных животных/Г.А. Байбурина, Е.А. Нургалеева, Д.З. Шибкова, С.А. Башкатов; №2014137731/14; заявл. 17.09.2014; опубл. 20.09.2015 // Изобретения. Полезные модели: офиц. бюл. - М.: ФИПС, 2015. - №26; Патент 2417788 С1, Российская Федерация, МПК A61G 10/02; А61В 5/026. Способ определения степени устойчивости человека к гипероксической гипоксии / А.Ю. Шитов, В.И. Кулешов, Б.Л. Макеев; №2009140796/14; заявл. 03.11.2009; опубл. 10.05.2011// Изобретения. Полезные модели: офиц. бюл. - М.: ФИПС, 2011. - №13), то при использовании нашего способа, точность определения устойчивости кроликов токсическому действию кислорода увеличивается более чем на 18%. Об этом свидетельствуют результаты проведенных нами экспериментов. Так, при проведении нами исследований по ранней методике А.Ю. Шитова, предназначенной для исследований с участием людей, и разделении кроликов на группы по параметрам частоты сердечных сокращений и расчетному минутному объему крови, степень устойчивости кроликов к токсическому действию кислорода распределилась следующим образом: устойчивые - 7%, среднеустойчивые - 75%, неустойчивые - 18%. При проведении авторами экспериментов на 43 животных, первично установленная степень тяжести заболевания, в связи с появлением групп высокоустойчивых и крайне неустойчивых животных была изменена у 18% кроликов за счет перехода в эти группы животных со средней устойчивостью. Кролики распределились следующим образом: высокоустойчивые - 5%, устойчивые - 10%, среднеустойчивые - 57%, неустойчивые - 18% и крайне неустойчивые - 10%. Таким образом, точность определения устойчивости кроликов к токсическому действию кислорода повысилась на 18%.

Таким образом, используя способ определения устойчивости кроликов к токсическому действию кислорода, путем оценки динамики тяжести симптомов кислородной интоксикации и биохимических показателей крови, лицо, проводящее исследования в области водолазной медицины, сможет повысить точность определения устойчивости, а значит, возрастет точность всего экспериментального исследования.

Изобретение относится к медицине, а именно к авиационной, космической, морской медицине. Кроликов размещают в барокамере, затем барокамеры герметизируют. Давление медицинским кислородом повышают до величины 40 м вод.ст., через 15 мин давление кислорода снижают до атмосферного в течение 5 мин. Во время нахождения кроликов в барокамере и в течение 30 минут после извлечения оттуда, наблюдают за их состоянием и каждые 10 минут определяют выраженность и время наступления симптомов кислородной интоксикации и на 30 минуте определяют выраженность нарушений биохимического статуса организма. Определяют оценку динамики тяжести симптомов кислородной интоксикации и выраженность нарушений биохимического статуса организма. По оригинальной формуле (U) определяют степень устойчивости кроликов к токсическому действию кислорода. Способ позволяет определить устойчивость кроликов к токсическому действию кислорода путем оценки динамики тяжести симптомов кислородной интоксикации и биохимических показателей крови, что, в свою очередь, позволяет повысить точность определения устойчивости и точность всего экспериментального исследования. 3 пр.

Способ определения степени устойчивости кроликов к токсическому действию кислорода, включающий биохимическое исследование крови животных, размещение кроликов в барокамере, герметизацию барокамеры, повышение давления в барокамере медицинским кислородом, оценку динамики тяжести симптомов кислородной интоксикации, отличающийся тем, что в барокамере за одну минуту повышают давление медицинским кислородом до величины 40 м вод.ст., через 15 минут давление кислорода снижают до атмосферного в течение 5 минут, причем во время нахождения кроликов в барокамере и в течение 30 минут после извлечения оттуда, наблюдают за их состоянием и каждые 10 минут определяют выраженность и время наступления симптомов кислородной интоксикации и на 30 минуте определяют выраженность нарушений биохимического статуса организма, а затем по формуле определяют оценку динамики тяжести симптомов кислородной интоксикации и выраженность нарушений биохимического статуса организма U:

U=A+B+C+D+E+F+G,

где:

А - максимальная степень выраженности симптомов кислородной интоксикации в течение первых 5 минут нахождения в гипероксической дыхательной газовой среде;

при этом отсутствие симптомов кислородной интоксикации оценивают в 1 балл;

изменения дыхания, в том числе учащение, прерывистость, участие в дыхании брюшной стенки, признаки беспокойства кроликов оценивают в 24 балла;

клонические подергивания головы, запрокидывания ее, нарушения координации движений, падение и неподвижное положение на полу барокамеры оценивают в 36 баллов;

возникновение судорог различных частей тела оценивают в 42 балла;

возникновение непрерывных клонических судорог всего тела оценивают в 52 балла;

возникновение опистотонуса оценивают в 78 баллов;

В - максимальная степень выраженности симптомов кислородной интоксикации с 6-й по 15-ю минуты нахождения в гипероксической дыхательной газовой среде;

при этом отсутствие симптомов кислородной интоксикации оценивают в 1 балл;

изменения дыхания, в том числе учащение, прерывистость, участие в дыхании брюшной стенки, признаки беспокойства кроликов оценивают в 12 баллов;

клонические подергивания головы, запрокидывания ее, нарушения координации движений, падение и неподвижное положение на полу барокамеры оценивают в 24 балла;

возникновение судорог различных частей тела оценивают в 28 баллов;

возникновение непрерывных клонических судорог всего тела оценивают в 36 баллов;

возникновение опистотонуса оценивают в 52 балла;

С - максимальная степень выраженности симптомов кислородной интоксикации с 1-й по 10-ю минуты после извлечения кроликов из барокамеры;

при этом отсутствие симптомов кислородной интоксикации оценивают в 1 балл;

изменения дыхания, в том числе учащение, прерывистость, участие в дыхании брюшной стенки, признаки беспокойства кроликов оценивают в 6 баллов;

клонические подергивания головы, запрокидывания ее, нарушения координации движений, падение и неподвижное положение на полу барокамеры оценивают в 12 баллов;

возникновение судорог различных частей тела оценивают в 16 баллов;

возникновение непрерывных клонических судорог всего тела оценивают в 24 балла;

возникновение опистотонуса оценивают в 36 баллов;

D - максимальная степень выраженности симптомов кислородной интоксикации с 11-й по 20-ю минуты после извлечения кроликов из барокамеры;

при этом отсутствие симптомов кислородной интоксикации оценивают в 1 балл;

изменения дыхания, в том числе учащение, прерывистость, участие в дыхании брюшной стенки, признаки беспокойства кроликов оценивают в 4 балла;

клонические подергивания головы, запрокидывания ее, нарушения координации движений, падение и неподвижное положение на полу барокамеры оценивают в 8 баллов;

возникновение судорог различных частей тела оценивают в 12 баллов;

возникновение непрерывных клонических судорог всего тела оценивают в 16 баллов;

возникновение опистотонуса оценивают в 24 балла;

Е - максимальная степень выраженности симптомов кислородной интоксикации с 21-й по 30-ю минуты после извлечения кроликов из барокамеры;

при этом отсутствие симптомов кислородной интоксикации оценивают в 1 балл;

изменения дыхания, в том числе учащение, прерывистость, участие в дыхании брюшной стенки, признаки беспокойства кроликов оценивают в 2 балла;

клонические подергивания головы, запрокидывания ее, нарушения координации движений, падение и неподвижное положение на полу барокамеры оценивают в 4 балла;

возникновение судорог различных частей тела оценивают в 8 баллов;

возникновение непрерывных клонических судорог всего тела оценивают в 10 баллов;

возникновение опистотонуса оценивают в 12 баллов;

F - степень выраженности нарушений перекисного окисления липидов на 30 минуте после извлечения кроликов из барокамеры по содержанию малонового диальдегида в их крови;

при этом увеличение концентрации малонового диальдегида до 5% от исходного уровня оценивают в 2 балла;

увеличение концентрации малонового диальдегида от 5 до 10% от исходного уровня оценивают в 4 балла;

увеличение концентрации малонового диальдегида от 10 до 20% от исходного уровня оценивают в 8 баллов;

увеличение концентрации малонового диальдегида от 20 до 30% от исходного уровня оценивают в 20 баллов;

увеличение концентрации малонового диальдегида от 30 до 40% от исходного уровня оценивают в 45 баллов;

увеличение концентрации малонового диальдегида от 40 до 50% от исходного уровня оценивают в 65 баллов;

увеличение концентрации малонового диальдегида более 50% от исходного уровня оценивают в 75 баллов;

G - степень выраженности нарушений работы антиоксидантной системы на 30 минуте после извлечения кроликов из барокамеры по содержанию супероксиддисмутазы в их крови;

при этом увеличение концентрации супероксиддисмутазы до 5% от исходного уровня оценивают в 2 балла;

увеличение концентрации супероксиддисмутазы от 5 до 10% от исходного уровня оценивают в 4 балла;

увеличение концентрации супероксиддисмутазы от 10 до 20% от исходного уровня оценивают в 8 баллов;

увеличение концентрации супероксиддисмутазы от 20 до 30% от исходного уровня оценивают в 20 баллов;

увеличение концентрации супероксиддисмутазы от 30 до 40% от исходного уровня оценивают в 45 баллов;

увеличение концентрации супероксиддисмутазы от 40 до 50% от исходного уровня оценивают в 65 баллов;

увеличение концентрации супероксиддисмутазы более 50% от исходного уровня оценивают в 75 баллов;

суммированием определяют индекс устойчивости кроликов к токсическому действию кислорода U в баллах,

кроликов, набравших U 14 и менее баллов, относят к группе высокоустойчивых, 15-64 баллов - к группе устойчивых, с 65-135 баллов - к группе среднеустойчивых, 136-240 баллов - к группе неустойчивых, а получивших более 240 баллов - к группе крайне неустойчивых к токсическому действию кислорода, при этом кролики, у которых отмечается летальный исход от кислородной интоксикации, признавались крайне неустойчивыми к токсическому действию кислорода.