Устройство анализа кристаллических белково-липидных соединений Советский патент 1984 года по МПК G01N21/70 

Изобретение относится к технике люминесцентного анализа кристашлических проб и может быть использовано в биологии, медицине и фармации. Известно устройство для анализа белковых соединений, содержащее измерительную светонепроницаемую камеру, источник возбуждающего излучения, оптический тракт, термостат, поворачивающуюся юовету с исследуемым образцом, фотоприемник, -соединенный с блоком регистрации Г . Однако известное устройство не обеспечивает высокой точности измер ний из-за нестабильности источника возбуждающего излучения, фоновой люминесценции примесей образца и деталей установки. Наиболее близким техническим решением к предлагаемому является уст ройство для определения,кристаллических белковолипидных соединений, содержащее светонепроницаемую камеру с установленным в ней кондиционером, фотоприемником, подключенным к 5локу регистрации, оптически проз рачной кюветой., (из отожженног.о стек ла) для исследуемого образца и возбуждающим зондом (в виде стеклянных шаров), имеющих механический контак с кюветой и исследуемым образцом, Возбуждение люминесценции про.водят путем вибрации устройства 2 . Однако известное устройство для эна ЛИЗ а кристаллических соединений харак теризуется недостаточной правильностью измерений. Недостатки устройства обусловлены тем,что в процессе вибрации стеклянные шары, из мельчающие иссл дуемый образец, соударяются с образ цом и стеклянной кюветой в стохасти ческой последовательности и с разно силой, в результате чего возникают вспышки люминесценции различной инт сивности, что и снижает правильност измерений. Целью изобретения является повышение правильности измерений. Указанная цель достигается тем, что в устройстве для анализа кристал лических белково-липидных соединений, содержащем светонепроницаемую камеру с установленными в ней кондиционером, фотоприемником, подключенным к блоку регистрации, оптически прозрачной кюветой для исследуемого образца и возбуждающим зондом, кювета выполнена из органического стекла а возбуждаквдий зонд выполнен из фторопласта в виде диска, укреплен на валу электродвигателя и установлен с зазором относительно стенок кюветы На чертеже представлена схема устройства для анализа кристаллических белково-липидных соединений. Устройство имеет светонепроницаему камеру 1, электродвигатель 2 с закрепленными на его валу возбуждающим зондом 3 в виде фторопластового диска, они вставлены в кювету из органического стекла 4 и между ними засыпан исследуемый образец 5. Кроме этого, имеется электровакуумнь1й или твердотельный .фотоприемник 6 (с чувствительностью не хуже 10 квант/с -- с кондиционер 7 и блок регистрации светового сигнала 8. Устройство работает следующим образом. При вращении электродвигателя 2 крутящий момент передается фторопластовому диску 3 и частично - далее исследуемому образцу 5, толщина которого составляет 1,5 мм, В результате трения в месте контактов фторопластового диска 3 с исследуемым образцом 5,а также кюветы из органического стекла 4 с исследуемглм образ цом 5 образуются различные слои элек,трических зарядов. Кроме того, в результате трибоэлектризации фтороплас-тового диска и дна кюветы из органического .стекла об образец последний дополнительно поляризуется в поле образованного конденсатора с плоскопараллельными электродами из фторопласта и органического стекла. Вследствие появления на поверхностях эл;ектрических зарядов возникает люминесценция, которая регистрируется фотоприемником б и блоком регистрации светового сигнала 8, Кондиционер 7 поддерживает стабильную среду и температуру исследуемого образца 5 и фотоприемника 6, С помощью предложенного устройства проводился анализ кристаллических белково-липидных со-, единений. Для этого 1г кристгшлического вещества (предварительно вьадержанного в течение двух часов в тем- ноте) пойещали в кювету при , Затем включали электродвигатель, производили в течение 10 с трибоэлектризацию образца двумя разньлми диэлектриками (фторопластом и оргстеклом) на блоке регистрации и в тёчешие 10 с измеряли величину люминесценции методом счета фотонов с помощью фотоприемника , Для получения сравнительных данных параллельно проводился анализ белковых соединений с помощью известного устройства. Полученные.данные приведены в таблице, Как видно из таблигды, при использовании известного устройства люминесценция регистрируется только у кристаллов сывороточного альбумина и величина ее сравнительно невелика/в то время как использование предлагаемого устройства для анализа кристаллических белково-липидных соединений позволяет более точно анализировать кристаллические соединения, так как при использовании предлагаемого устройства альбумин и триптофан не светятся, а липиды наоборот имеют при этом сильное свечение.

В известном устройстве для анализа белковых соединений правильность результатов равна 5%. Описываемое устройство для анализа белково-липидных соединений позволяет получить результаты с правильностью 1,8%, т.е. предложенное устройство повьпиает правильность определения состава соединения на 3,2%.

Повышение правильности измерения с помощью предложенного устройства обусловлено тем, что при трибоэлектризации белка фторопластовый диск и органическое стекло заряжаются однополярно, а при трибоэлектризации липидов разнополярно, вследствие чего при определении белков не происходит электрического разряда и

поляризации, а, следовательно, не возбуждается люминесценгхия. При определении лкпидов происходит электрический разряд и поляризация, возбуждающие мощное световое излуче ние. В белкоБо-липидных соединениях интенсивность возбужденной люминесценции зависит от количества в неп липидов.

0 Применение предлагаемого устройства анализа кристаллических белковолипидных соединений обеспечивает по сравнению с известными устройствами возможность получения с большой пра5 вильностью информации о составе соединения по предварительно составленнЫм калибровочным графикам,а также экспрессное получение информации, время одного анализа менее 1 мин.

0 Кроме того,предлагаемое устройство универсально и может быть-применено во многих областях народного хозяйства.

УСТРОЯСТВО ДЛЯ АНАЛИЗА КРИСТАЛЛИЧЕСКИХ БЕЛКОВО-ЛИПИДНЫХ СОЕДИНЕНИЙ, содержащее светонепроницаемую камеру с установленными в ней кондиционером, фотоприемником, подключенным кблоку регистрации, оптически прозрачной кюветой для исслелуемого образца и возбуждающим зондом, отличающееся тем/ что, с целью повышения правильности измерений, кювета выполнена из органического стекла, зонд выполнен из фторопласта в виде диска, укреплен на валу электродвигателя и установлен с зазором относительно стенок кюветы.

Сывороточн альбумин

Триптофан Холестерин

Бегеновая кислота

Холестерин + альбумин

895

108322 5923

183

381

1422

18000

36000