Способ диагностики болезни Виллебранда Советский патент 1984 года по МПК A61B10/00 G01N33/48 

Изобретение относится к медицине в частности к лабораторным способам диагностики болезни Виялебранда. Известен способ диагностики боле ни Виллебранда путем исследования активности УШ фактора Cl3 Однако исследование уровня УШ фа тора позволяет выявить лишь патологию плазменного звена гемостаза, но не определяет функциональную активность тромбоцитов. В связи с этим определение только УШ фактора не позволяет с достоверностью говорить о наличии болезни Биллебранда. Цель изобретения - повышение точ ности способа. Поставленная цель достигается тем, что согласно способу диагности ки болезни Виллебранда путем исслед вания активности фактора УШ свертывающей системы крови дополнительно цитохимически в тромбоцитах определяют содержание гликогена, активнос ферментов лактатдегидрогеназы (ЛДГ) глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г-бФД сукцинатдегидрогеназы (СДГ),ot-глицерофосфатдегидрогеназы ) и кислой фосфатазы (КФ), активность п леднего фермента определяют до и через 58-62 мин после выдерживания крови при температуре от 36,8 до 37, и при снижении одного из определяемых показателей в сравнении с нормой диагностируют болезнь Виллебранда. Пример 1. Саша М., 13 лет, находился в клинике по поводу межмышечной гематомы и носового кровотечения. С 1 года на коже отмечались многочисленные .экхимозы, посттравматические гематомы. В 1,5 года впервые после травмы возникло irocoBoe кровотечение. В 4 года на основании снижения уровня УШ фактора (1%) и ди намических свойств тромбоцитов предварительно установлен диагноз болез ш Виллебранда. Кровотечения неоднократно повторялись: носовые, из миндалин, дважды кровоизлияния в суставы. Раннее развитие без особенностей Отец клинически здоров, лабораторнотромбоцитопатия (снижение активности ЛДГ пластинок, уровень Ж фактора 235%) . У матери в молодости обильные и длительные месячные, лабораторно - болезнь Виллебранда. У брата геморрагических проявлении нет, лабораторно - тромбоцитопатия. Поступление в клинику связано с появлением межмьппечной гематомы в области левой ягодицы после падения. На 4 день госпитализации спонтанно возникло носовое кровотечение. Было проведено цитохимическое исследование содержания гликогена, активности дегидрогеназ тромбоцитов и показателей тромбоцитокинетики. У больного выявлено снижение активности всех исследуемых дегидрогеназ тромбоцитов: ЛДГ 3,4 гр/тр (при норме 6,99+0,003 гр/тр)-, Г-6ФД 3,03 гр/тр (при норме 6,49±0, 18 гр/тр); об-ГФД 2,63 гр/тр (при норме 5,54+ +0,13 гр/тр)-, СДГ 2,15 гр/тр (при норме 4,57+0,27 гр/тр). Результаты исследования показали снижение количества гликогена в тромбоцитах до 59%. У больного до инкубации тромбрцитов выявлено 59% фосфатазоположительных тромбоцитов, после - 9%. Затем по формуле вычисляли тромбоцитопоэз: Р t(to - t)- 4 N4(t о - t-,) . 100042 ; 279000 (59 - 9) 332,142 тыс/сут (при норме 125,4t5,6 тыс/сут), где Р - тромбоцитопоэз (тыс/сут); tjj - доля фосфатазоположительныХ тромбоцитов до инкубации-, t - доля фосфатазоположительных тромбоцитов после инкубации;N - общее количество тромбоцитов в 1 мм крови в тыс. в момент исследования. Таким образом, выявлена функциоальная неполноценность тромбоцитов, иагноз болезни Виллебранда подтвержен. Установлена тяжелая форма забоевания, тяжелый геморрагический риз. Ребенок получил следующую терапию: 6 доз криопрецилитата, 900 мл антиемофильной плазмы, 800 мл Е-аминоапроновой кислоты, прямые гемотрансузии от отца по 100 мл трижды, ТФ в/м по 1,0 ежедневно, жженую агнезию 0,5-3, витамины аа ,(Ю53, Bfe 0,02-3, С 0,1-3 в течеие госпитализации. На 12-й день кровотечение прекратилось и на 14 де мапьчик вьтисан в удовлетворительно состоянии с выходом из геморрагичес кого криза. Пример 2. Оля Л., 13 лет, поступила в клинику с носовым крово течением для выяснения его гёнеза. У отца - периодически носовые кровотечения, лабораторно - болезнь Виллебранда. У матери в детстве носовые кровотечения, по настоящее вр мя обильные месячные, лабораторно тромбоцитопатия. Раннее развитие девочки без особ ностей. Страдает кровоточивостью с 4 лет, когда появились частые (прак тически ежедневные) носовые кровоте чения длительностью от 25 до 30 мни до нескольких часов. С 12 лет длительные (10 дней), обильные месячные. При обследовании выявлен умеренно сниженный уровень УЩ фактора (33%), функциональная активность тромбоцитов снижена также умеренно, что позволило предположить наличие болезни Виллебранда. Однако клиническая тяжесть заболевания не вполн соответствовала лабораторным показа телям. При цитохимическом обследовании методами, описанными в примере 1, удалось выявить значительное снижение содержания гликогена в тро боцитах (73% гликогенполо-стгтельных тромбоцитов, показатель интенсивнос ти реакции на гликоген 117 гр), активности их ферментов - ЛДГ до 3,65 гр(тр, Г-6ФД до 3,53 гр/тр, оС-ГФД до 2,8 гр/тр, СДГ до 2,94 гр/тр, КФ до 75% (исследование активности кислой фосфатазы проводилось при 36,8 С в течение 58 мин) что позволило установить заболева1 ние -Биллебранда и скоррегировать терапию. Девочка получила внутривен но 3 дозы криопреципитата, 100 мл Е-АКК, в/м вводилась АТФ по 10 ежедневно, per OS получила жлсеную магнезию 1,0-3, витамины аа 0,005-3, Bf,0,023, С 0,1-3. На 2-й день кровотечение прекратилось, а на 4-й день с выходом из геморрагического криза девочка выписана домой в удовлетворительном состоянии П р и м е-р 3. Больной Саша 3., 3 года б мес, страдает кровоточивостью с года в виде экхимозов на ко же и носовых кровотечений (редко). При обследовании согласно предлагаемому способу выявлено снижение уровня yUJ фактора до 1,03%, умеренное снижение динамических свойств тромбоцитов, уменьшение активности ЛДГ пластинок до 5,42 гр/тр, Г-бФД до 5,3 гр/тр, до 4,28 гр/тр, СДГ до 4,29 гр/тр, количества гликогенположительных тромбоцитов до 85%, показателя интенсивности реакции на гликоген до 232 гр. Количество фосфатазоположительных тромбоцитов и длительность их жизни были нормальными (95% и 1,99 сут соответственно). Поставлен диагноз: болезнь Виллебранда, легкая форма. Отец, 27 лет, клинически здоров. При обследовании выяв1ген сниженный уровень yiU фактора (49%) . НарушеН1гй со стороны динамических свойств тромбоцитов не выявлено. При цитохимическом исследовании выявлено снижение количества гликогенположительных тромбоцитов до 76% и активности ЛДГ пластинок до 5,9 .гр/тр, что говорило о качественной неполноценности тромбоцитов (фермеитопатия) и позволило поставить диагноз: болезнь Бнллебранда, латентная форма. Мать, 28 лет, в детстве отмечались носовые кровотечения, лабораторно -- тpo 5бoцитoпaтия. У всех обследованных членов этой семьи при исследовании активности кислой фосфатазы инкубация тромбоцитов проводилась в течент;е 62 мин при 37,2 С. У всех детей в период криза и ре гиссии от::ечается снижение активности фep ;sнтoв тромбоцитов . Наибольшие изменения выявлены в период криза, и ре.иссии они имеют тенденцию к повышению, но без нормализации. Вьшвпела прямая зависнr-iOCTb ме;к;1у активностью фop eнтoв и динамическими свойствами тромбоцитов, от стсиенн карушен1- я активности ферментов завнсит тяжесть болезни Виллебраи.па . Таким ооразом, цитохимическое исследование содержания гликогена, активности ЛДГ, Г-6ФД, , СДГ, Ф тромбоцитов и тромбоцитокинетики при болезни Виллебранда позволяет более точно выявлять дисфункщ-гю тромбоцитов и повысить точность диагностики в случае легких и скрытых форм на 32%, установить тяжесть заболеваHiTH, глуб1 ну геморрагического криза, прогнозировать его течение и, еле510824006

доватеяьно, проводить коррекцию те-и даче рекомендаций. Выявление скрырапии.тых форм заболения также имеет знаКроме того, выявление скрытых формчение при предоперационном обследовазабопевания у родителей имеет ке-нии различных больных и выработке

маловажное значение при проведении 5адекватной до- и послеоперационной

медикогенетического консультированиятерапии.

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ БОЛЕЗНИ БИЛЛЕБРАНДА путем исследования активности фактора yUJ свертывающей системы крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, дополнительно цитохимически в тромбоцитах определяют содержание гликогена, активность ферментов лактатдегидрогеназы, глюкозо- -гЬосфатдегидрогеназы, сукцинатдегидрогеназы, о6-глицерофосфатдегидрогеназы и кислой фосфатазы, активность последнего фермента определяют до и через 58-62 мин поате вьщерживания крови при тe fflepaтype от 36,8 до 37, и при снижении одного из определенных показателей в сравнении с нормой диагностируют болезнь Виллебранда.