Способ консервации амниотической оболочки Советский патент 1985 года по МПК A01N1/02 

а со сл

00

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии и трансплантологии, и может быть использовано для лечения трофических язв нижних конечностей.

Целью изобретения является увеличение срока хранения.

Способ консервации амниотической оболочки осуществляют следующим образом.

Амниотическая оболочка заготавливается в нестерильных условиях в родзале путем отсечения ее от последа. Оболочка тщательно отмывается в проточной воде от крови. Затем материал погружается в стерильный сосуд с конверсирующей смесью, состоящей из 3540 процентов димексида и .60-65 процетов спермацета, которая заранее расплавляется до жидкого состояния в во дяной бане при 30-35 С. Затем герметически закрытый сосуд с оболочкой охлаждается и хранится ч условиях бытового холодильника при на весь срок консервации.

Соедршение, полученное из 35-40% димексщца и 60-65% спермацета, представляет собой стойкую восковидную массу, легко расплавляющуюся в водяной бане при 30-35 С. Уменьшение спер мацета менее 60% ведет к разжижению смеси, что не позволяет получить стокую восковидную массу. Масса становится более текучей, что нарушает условия конвервации. Увеличение cnepMa цета более 65% не позволяет получить однородность массы. Подобная картина наблюдается при изменении содержания димексида: увеличение его свьппе 40% приводит к большей текучести смеси; уменьшение его менее 35% не позволяе создать однородную смесь. Все эти состояния нарушают условия создания стойкой смеси.

Применение смеси димексид-спермацет основано на том, что димексид обладает бактериостатическим, бактерицидным, противовоспалительным и анестезирующим свойствами. Кроме того, известна его способность быстро проникать через неповрежденную кожу, слизистые, переносить и депонировать при этом различные растворенные в нем вещества, усиливая их действие. В результате применения димексида повьшзается обмен белка в коже, что является одной из причин его терапевтического эффекта.

Спермацет, представляя собой сложное природно-комплексное соединение, содержащееся в головных мешках кашалота, содержит витамиты А и Е, обладает бактерицидным и бактериостатическим дейстёием, имеет выраженную биологическую активность, повышая местные защитные реакции, что сказывается на течении раневого процесса, развитии грануляций и эпителизации.

При консервации в смеси димексидспермацет стерильность оболочки наступает спустя 1 сут и регистрируется в течение всего срока консервации.

Для оценки качества консервации амниотической оболочки произведены гистологические исследования в различные сроки консервации.

В течение первой недели консервации нарастают дегенеративные изменения во всех слоях оболочки, проявляющееся в набухании клеток и из вакуолизации. Ядра клеток становятся светлыми, гомогенными. Компактный слой разволокняется. В фибробластах нарастают дистрофические изменения. Межуточное вещество становится рыхлым, выглядит разволокненным.

Через 12 сут после начала консервации в смеси димекс1Зд-спермацет эпителиальный слой представляется вакуолизиробанным, отечным. Компактный слой представлен участками гомогенного слабо зозинофильного вещества. Слой фибробластов становится широким,, слабо окрашенным. Спонгиозньш слой становится рыхлым, слабо окрашенным.

Затем Процесс дистрофии клеточных элементов заметно ослабевает и через 30 дней гистологическая картина примерно соответствует изменениям, наступившим -за первые две недели. Клеточные элементы сохраняют слабую окрашиваемость. В них выражена белковая дистрофия и тем не менее четко определяются клеточные структуры, фибробласты сохраняют овальную форму, се клетки имеют выраженные межлеточные границы. Слои становятся ирокими, содержат прослойки гомогенной массы. Через 2 мес резкий сдвиг гистологической картины отсутствует.

Макроскопически по прошествии вух недель после начала консервациисмеси димексид-спермацет амниотиеская оболочка выглядит утолщенной, сохраняя свою эластичность и проч3ность в процессе хранения в течение 1 года. Преимуществом указанной консервации является отсутствие необходимости смены консерванта через промежутки времени. Амниотическая оболочка, консервированная по данному способу, применена в клинике при лечении 20 больных с трофическими язвами нижних конечностей. При этом исходили из того, что эмбриональные клетки амнио тической оболочки ускоряют развитие грануляций и эпителизацию, являясь биогенным стимулятором. Кроме того оболочка создает условия влажной камеры в области язвы, способствуя лучшему заживлению язв. Учитывали также, что вместе с оболочкой, кон84сервированной в смеси димексид-спермацет, в область трофргческих рас- стройств вносятся вещества (димексчц и спермацет), способствукщие сниже-. нию местного воспалительного процесса, улучшению течения метаболических и репаративных процессов, что сказывается на ускорении роста грануляций и эпителизации. Предлагаемый способ консервации амниотической оболочки позволяет увеличить срок хранения оболочки с сохранением ее биологических свойств. Кроме того, применение амниотической оболочки, консервированной по предложенному способу, при лечении трофических язв Н1ШНИХ конечностей позволяет сократить сроки пребьшания больных в стационаре.

СПОСОБ КОНСЕРВА1ЩИ АМНИОТИЧЕСКОЙ ОБОЛОЧКИ путем помещения ее в жидкую среду и последующего хранения при 2 - 4 С, о т л и ч а ющ и и с я тем, что, с целью увеличения срока хранения, в качестве средьГ используют смесь димексида и спермацета при 30-35 с при следующих соот- . ношениях компонентов, мас.%: Димексид35,0-40,0 Спермацет60,0-65,0