Способ определения индивидуальной чувствительности к препаратам тимуса у больных бронхиальной астмой Советский патент 1985 года по МПК G01N33/48 

СО

со ел 00 ел , Изобретение относится к клиничес кой биохимии, а именно к способу определения индивидуальной чувствительности к препаратам тимуса у бол ных бронхиальной астмой. Цель изобретения - повьпиение точности и ускорение способа. . Способ осуществляют.следующим образом. Лимфоциты вьщеляют из венозной крови обследуемого центрифугировани ем в градиенте плотности фиколл-уро раста (или -гипака, -верографина, -урографина и т.д.), дважды отмываю средой 199 или раствором Хенкса (500 G - 10 .мин), ресуспендируют в

ЛДГ-1 + 0 75 ЛДГ-2 + 0 5 ЛДГзЗ Од 25 ЛДГ-4

Н/М ЛДГ-5 ,75 ЛДГ-4 ,5 ЛДГ-3 ,25 ЛДГ-2

В норме этот показатель колебался от 1,48 до 1,88, бып достаточно стабилен при исследовании в динамике и составлял в среднем 1,68tO,04. Пределы колебаний нормальных значений были ограничены двумя сигмами в соответствии с чем диагностически значимыми для исходной культуры лимфоцитов считают значения Н/М-коэффициентов менее 1,42. В случае определения изоферментов в популяциях лимфоцитов, обогащенных Т- и В-клетками, исходную клеточную суспенцию нано.сят наколонки с нейлоновой ватой. Проведенные исследования на популяциях лимфоцитов, обогащенных Ти В-клетками, выявили близость значений Н/М-коэффициентов и параллелизм их изменений (при наблюдении в динамике) для исходной и Т-обогащенной популяций (1,6810,04 и 1,8610,05 соответственно).

Пример. Больной 64 года. Диагноз : бронхиальная астма, смешанная форма (инфекционно-аллергическая, атопическая), средней тяжести течения, фаза обострения. Страдает бронхиальной астмой около 10 лет, последние 5 лет - течение средней тяжести с повторными госпитализациями, практически постоянным ощущением затрудненного дыхания , периодически достигающим степени приступа удушья. Госпитализирован в связи с очередным обост1рением заболевания, которое проявлялось в нарастании затруднения дыхания, прекращении отхождения мокроты.

снижении эффективности обычных бронхолитических средств (сальбутамол, беротек). При физикальном, лабораторном и инструментальном исследовании - отчетливая картина бронхиальной обструкции на фоне активности воспалительного процесса в бронхиальном дереве. При наблюдении .в динамике - отсутствие эффекта от обычной антибактериальной и бронхолитической терапии.

Исследование изоферментного спектра лимфоцитов периферической крови выявило выраженное снижбние

значений Н/М-коэффициента как Для исходной популяции лимфоцитов (1,18) так и для Т-обогащенной фракции (1,27). На фоне терапии препаратом тимуса (тималином) в течение

5 дней (ежедневно, внутримышечно,

по 10 мг в день) было получено некоторое нарастание исследуемого показателя (до 1,28 и 1,35 для исходной и Т-обогащенной популяций соответетвённо) , что, однако., сопровождалось незначительным улучшением клинического состояния. С учетом лишь частичного нарастания значений Н/М-коэффициента, лечение тималином

быпо продолжено (проведено еще

5 инъекций по 10 мг), после чего значения Н/М-показателя практически нормализовались (1,48 для общей популяции и ,56 для Т-обогащенной).

iJa фоне повторного курса после первых инъекций появилось бурное отхождение мокроты, постепенно исчезло ощущение затрудненного дыха852трис-HCI буфере (50 мМ, рН 7,4) и разрушают одним из распространенных способов (гомогенизацией, озвучиванием, повторным замораживанием - оттаиванием). Супернатант от центрифугирования гомогената (1000 Q -10 мин) подвергают электрофорезу в агаровом геле с последующим гистохимическим выявлением изоферментов согласно стандартной методике. Учет энзимограмм осуществляется денситометрически или фотометрически. Для интегральной оценки изоферментных спектров рассчитывают отношение сумм Н- и Мсубъединиц (Н/М-коэффициент) по формуле, учитьшающей содержание субъединиц в каждом из изоферментов

31193585 4

ния, отпала необходимость ислользо-процесса, при исследовании функхщи

вания беротека, отчетливо улучши-внешнего дыхания - улучшение вентилось общее самочувствие, появилосьляционной-функции легких за счет

ощущение бодрости. При бронхоскопи-снижения обструктивного компонента,

ческом исследовании отмечено умень-, Больной вьтисан в удовлетворительном

шение активности воспалительногосостоянии.

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИВДИВИДУАЛЬНОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К ПРЕПАРАТАМ ТИМУСА У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ путем исследования лимфоцитов крови, отличающийся тем, что,с целью повышения точности и ускорения Способа, определяют уровен активности изоферментов лактатдегидрогеназы лимфоцитов, по полученному уровню рассчитьшают Н/М-коэффициент и при снижении его ниже 1,42 определяют чувстви -ельность больного к. препаратам тимуса.