Штамм @ @ РА-7,используемый для получения анатоксина Советский патент 1986 года по МПК A61K39/104 C12P1/06 C12P1/06 C12R1/385 

iNd ю

о Изобретение относится к области медицины, в частности медицинской микробиологии, и может быть использо вано в производстве вакцинных препаратов. Целью изобретения является получе ние высокоиммунногенного анатоксина. Штамм Pseudomonas .aeruginosa: PA- вьщелен из ожоговой раны больно го в Москве. Штамм РА-7 депонирован в музее ГИСКа им, Л.А. Тарасевича и имеет культурально-морфологические признаки, типичные для Pseudomonas aeriginosa. При выращивании па бульоне Мартен имеет высокую продукцию экзотоксина А. АДФР - трансферазная активность (имп/мин) 9512. ДНК - азной и лецити назной активностью не обладает, обладает невысокой протеазной актив- ностью. Отмечено наличие гемолизина. Относится ко 2-му серотипу схемы Fiche Cevein LDjg/мл 276. Штамм РА-7 является высокоактивны продуцентом экзотоксина А. Средняя биологическая активность экзотоксина А 276 LDyjj/мл. Штамм Pseudomonas aeriginosa PA-7 используют следующим образом. Пример. Шта1Ф1 РА-7 вырапшва ют в бульоне Мартена в ферментере в течение 20 ч при скорости вращения мешалки 800 об./мин и оксигенации, равной 500 м /ч. По окончании срока культивирования бульонную культуру центрифугирую фильтруют и подвергают детоксикации 0,5% формалина и 0,1 Met-лизина (концентрация общего белка в супернатан- те составляет 7,5 мг/мл) при рН 6,2 температуре инкубации 22 либр в 092 течение 48 ч. Затем проводят очистку препарата на колонке с сефадексом G-IOO, концентрирование его фиколом (60 мкг/мл) и розлив в ампулы по 1,0 мл с последующим воздействием на препарат ионизирующего излучания в дозе 10-5 кГр (последний режим в случае лиофильно высушенных образцов препаратов). Обработка препарата в дозе 10-15 кГр обеспечивает получение полностью безвредного, необратимого, специфически антигенного анатоксина Р. aeruginosa. Кроме того, полученный таким образом анатоксин стерилен, апирогенен, стабилен в отношении реверсии к токсичности при хранении его при температурах 4, 22 и 37°С. Высокая иммуногенность облученного образца анатоксина была продемонстрирована в тесте активной иммунизации экспериментальных животных. Однократное внутрибрюшинное введение препарата в дозе 15 мкг/мл обеспечивает создание мощного антибактериального и антитоксического иммунитета на протяжении 50 дней наблюдения за животными. 100% выживаемость иммунизированных животных отмечалась при заражении их как токсигенными штаммами синегнойной палочки (РА-7, РА-103), токсигенным и продуцируюи1им протеазу штаммом (РА-4), так и нетоксигенными, но продуцирующими большое количество протеазы (РА-286) в дозе от 2 до 4,8 LDyg. При введении экзотоксина А в дозе 25-50 LD /мл также наблюдалась 100% выживаемость животных по сравнению с контрольной группой (неиммунизированные мыши), где была отмечена 100% гибель животных в первые сутки наблюдения.

ШтаиФ Psieudomonas aerrigiAosa PA-7 (музей ГИСК им. Л.А. Тарасевича) используемый для получения анатоксина.