Способ определения зараженности семян фитопатогенами Советский патент 1988 года по МПК C12Q1/00 A01C1/04 

при температуре 20-23 С. 3 табл.

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к способу определения зараженности семян фито- патогенами,,и может быть использовано при подготовке семян к посеву. Целью изобретения является повьшение достоверности способа за счет выявления скрытой формы заражения. Проращивают семена в рулоне из гигроскопического материала, затем внешне здоровые проростки отбирают и выращивают на свету в стерильной дистиллированной воде в течение 2-10 сут

(Л С

Од 00

1

H o6ptrre}i fе относится к сельском хозяйству, а именно к способам определения зараженности семян фитопато jfeHaMHj и может быть использовано фри подготовке семян к посеву с де- Лью отбраковки инфивдрованньк семян Цель изобретения - повьшение до- ётоверкссти способа за счет выявления скрытой формы заражения. ; П р и м е р 1, Установление степ ИИ зараженности семян подсолнечника с( учетом наличия скрытой пато г|енов.

I Для определения лабораторной век жести и зараженности патогенами сем jja подсолнечника раскладьшашт вдоль З влаженных дистиллированной водой г олосок фильтровальной бумаги заро- вниз 5 отступая от края на 2-- 3| см. Расстояние между семенами 1,5 2| см. Сверху их накрйвают узкой по- л)ской бумаги. Все это заворачивают в рулоны к устанавливают ,в стеклянн сЬсуды., заполненные дистиллированно в|рдой на 2-3 см„ Сосуды с рулонами в щеря ивают в термостате до появле- н|ня боковых корешков на цектра льном KbpHe.illpH температуре они пЬявляются на декь после че- гЬ подсчитывают количество проросии сЬмян здоровых и пораженных патогенми И устанавливают степень заражен- Н0СТИ их наружной и внутренней ин- фикцией Вид возбудителя на больных Семенах и проростках уточняют микро С1сопическим просмотром затем подсчтывают количество семян пораженных или иньм возбудителем и выводя средний процент зараженности по отдельным видам. Полученные внешне зд poBbie проросчгки вынимают из рулонов про 4ывают в стерильной воде и продожают выращивать в условиях,, обаспеч ваклцих им процесс фотосинтеза,, но устраняющих полностью минеральное питание,, необходимое для дальнейшег развития проростков сразу же после нйпользования запасов, имевшихся в семенах.

Во внешне здоровьп-; проростках.;, содержавших патогены в скрытой форме к этому времени уже устанавлршаются пСевдосимбиотические взаимоотношени и для выявления патогенов необходим нлрушлть их. Осуществляют это устра нйнием у ве.гетирующих проростков вс элементов минерал ьного питания, для чего погру-лают корневую систему и часть гипокотиля в дистиллнровлнну

5 п 5 л 5 0 5

воду и оставляют кх рагтн в течение 210 ди, при комн.чтной температуре .на Сгзету. Комнатная температура 20- 23 С является оптимальной для роста больших грибов. Образование у проростков углеводов - продукта фотосинтеза, но отсутствие минерального питания вынуткдает патогены/ развиваю- Ещеся в них в скрытой форме; добывать мин еральное питание для своего дальнейшего .развития из тканей растения, для чего патогены пускают в ход свою ферментативную систему.

Появление перетяжки или побурения тканей на гипокотиле вытпе поверхности воды свидетельствует об этом. Начинается патологический процесс, Этот процесс у исследуемых проростков наступает не одновременно. У одних он проявляется уже через 2 дн. а у дру- r ix -- через 8-10 дн. Максимальное количество проростков, имеющих патогенов в скрытой форме, погибают в течение 6 дн. Проростки, HG содержащие патогенных организмов в скрытой форме, продолжают вегетировать в таких условиях свыше 20 дн,

I

Так как для проявления патологического процесса некоторым проросткам достаточно 2 дн, то учет и удаление пораженных проростков из сосуда проводят через каждые 2 дн, после рйзмещения их в сосуды. При этом у остав1.шхся :эдоровых проростков промывают корневую систему и меняют дистиллированную воду в связи с тем что бактериир вышедшие из проростков в воду, используя продукты их обмена, вызывают процесс брожения. Передача инфекции от пораженного проростка к здоровому в течение 2 дн, (интервал между проявлением заболевания и удалением пораженного проростка не происходит, так как мицелий патогенов и органы спороногаения формируются только через 3-4 дн. после проявления патологического процесса в условиях влажной камеры. У некоторых проростков на семядольных листьях после снятия лузги имеются небольшие бурые пятна5 которые свидетельствуют о наличии патогенов Такие проростки размещают в сосудах свободно чтобы ке происходила передача инфекции от одного проростка к другому через семядольные листг ч при их соприкосновении ,

31Л010

Для onpeju- juninn гтопеии ч.цшжоиия и видового состарл патогенов, находящихся в семенах п скрытой форме, поражениьм участок изнлечениых из сосудов проростков размещают чашки Петри на увлажиетшую фильтровальную бумагу так, чтобы они не соприкасались друг с другом. Чашки Петри выдерживают в термостате при 22-2А С

в течение 3-4 дн. .до проявления спо- роношения у патогенов. Видовую принадлежность патогенов уточняют при микроскопическом просмотре. Общую зараженность семян патогенами с уче- том наличия их в скрытой форме устанавливают путем суммирования зараженности, обнаруженной при определении лабораторной всхожести, с зараженностью проростков скрытой формой патогенов.

В табл« 1 представлены результаты определения степени зараженности семян подсолнечника, сорт Харьковский 101. урожай 1984 года. При определе- НИИ лабораторной всхожести указанной партии семян установлено, что 11% их погибло от наличия наружной и внутренней инфекции патогенов. При дальнейшем росте полученных внешне ровых проростков на свету без досту- па минерального питания через два дня после размещения их в сосуды удалено 3,25% проростков с перетяжкой на гипокотиле. Максимальное количество гибели внешне здоровых про- ростков (23,0 и 30,75%) отмечено на А-й и 6-й дни. На 8-й и 10-й день степень проявления заболеваний уменьшается до 7,5 и 2,25%. В последующие дни (12-й и 14-й) гибели проростков не отмечают.

Суммируя зараженность семян патогенами, обнаруженную при определении лабораторной вхожести (11%), и зараженность патогенами, развивающимися в скрытой форме (66,5%) устанавливаю общую зараженность семян (77,5%). При посеве таких семян в прохладную и влажную почву получают сильно изре- женные всходы, что вызвано гибелью проростков от скрытой инфекции еще до выхода их на поверхность почвы, а у выживших вегетирующих растений листь нижнего яруса суммируют уже в фазах футонизапии и цнетеяия. Все это оказывает отрицательное влияние на уро- жай подсолнечника.

В табл. 2 представлены результаты обследования степени зпражениости -се

с

К

мни n,rrf i (.1. .lлoпиы.ч линий,

Г ИГ РИЛПП п ropi .in По;и ОЛ11ечНИКЯ с

учотом наличия г.крыгсм формы. Услоппя и тфоряшиияния семян, определения таражетиюсти проростков той формоГ, патогенов такие же, как в примере 1, При определении лабораторной всхожести ыяснилось, что зараженность патогенами исследуемых партий семян различна и составляет 3-20%.

0

с

c 5 0

5

Зараженность BHennie здоровых проростков патогенами, находящимися в скрытой форме, значительно выше (15- 64%). Суммируя пораженность семян подсолнечника наружной и внутренней инфекцией, обнаруженной при определении лабораторной всхожести, с по- раженностью внешне здоровых проростков скрытой формой патогенов, получают общую зараженность семян. У исследуемых партий она составляет 22-84%. П р и м е р 2, Установление видового состава патогенов, находяш 1хся в скрытой форме в семенах подсолнечника.

Для анализа используют три партии семян подсолнечника (сорт Х-101, урожай 1985 года): кондиционные семена, собранные из пораженных корзинок белой гнилью и пораженньпс корзинок серой гнилью. Условия и режимы проращивания семян, определение зараженности их патогенами, выявление скрытой формы патогенов в проростках такие же, как в примере 1. Лабораторная всхожесть кондиционных семян составляет 90%, а собранных из пораженных корзинок белой и серой гнилями на. 20-30% ниже. Полученные внешне здоровые проростки во всех трех вариантах помещают в сосуды с дистиллированной водой, которые выдерживают на свету при 20-23°С. Через каждые 2 дн. удаляют из сосудов проростки с проявлением заболевания. Пораженные участки из них вырезают и размещают в чашках Петри на увлажненную фильтровальную бумагу в асептических условиях таким образом, чтобы они не соприкасались друг с другом. Чашки Петри выдерживают в термостате в течение 3-4 дн. при 22-24 с. Оставшиеся в сосудах еще здоровые проростки после каждого удаления пораженных промывают в дистиллированной воде и заменяют воду в сосудах. Микроскопическому осмотру подноргаю1 каждый пораженный участо1с проростков.

Подсчитывают количество проростков, пораженных тем или иным возбудителем, и выводят средний процент за- раженнос ти по отдельному виду. При анализе выяснилось, что гибель проростков происходит не от одного пато

гена, а от комплекса их ().

Видовая принадлежность и степень зараженности проростков патогенами, вьщелеиными с помощью предлагаемого способа, представлены в табл. 3.

Внешне здоровые проростки во втором и третьем вариантах заражены патогенами в скрытой форме на 100%. Вццелены возбудители белой, серой, сухой гнилей подсолнечника, ложной мучнистой росы, альтернариоза и фуза риоэа. Проростки кондиционных семян (И класс) также заражены патогенами

и1 )

в скрытой форме, но степень заражения их составляет 13,8%, что в 4-5 раз меньше, чем во втором и третьем вариантах.

- оS

Формула изобретения

Способ определения зараженности семян фитопатогенами, предусматривающий проращивание семян в рулоне из гигроскопичного материала с последующей оценкой результатов и отбором внешне здоровых проростков, о т л и- чающийся тем, что, с целью повьшения достоверности способа за счет выявления скрытой формы заражения, внешне здоровые проростки выращивают на свету в стерильной дистиллированной воде в течение 2-10 сут при 20-23°С.

I а О я к п I

Таблица

i CnwM к мфптнми («««шва бело пюян 60,6 .39,

3 С«мам tia

iHiftjttfimat

BnOniiioK

«рой гяклмв 70,829,2

ton1,114,Яг,О (5,5,4,

70,в 10012,270,870,8 18,9 17,J,