Способ количественного определения агрегационной и дезагрегационной способности эритроцитов Советский патент 1989 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для количественной оценки агрегации и дез- агрегации эритроцитов, имеющих важное значение для диагностики нарушений реологических свойств крови при ря-- де патологических состояний, в том числе и ишемической болезни сердца (ИБС), а также для оценки эффективности проводимого лечения.

Цель - повышение точности способа при исследовании плазмы с высоким содержанием липидов.

Способ осуществляют следующим образом.

Забор крови посредством пункции локтев ой вены в количестве 9 мл. 9 мл крови стабилизируют добавлением 1 мл 3,8%-ного раствора цитрата натрия.

Стабилизированную кровь центрифугируют при 1000 об/мин 10 мин. Затем отделяют обогащенную тромбоцитами плазму и центрифугируют ее повторно при 3000 об/мин 15 мин. При помощи . пипетки отсасывают плазму, не содержащую форменных элементов крови.

Эритроцитарную взвесь приготавливают в соотношении 1:400 в плазме;не содержащей форменных элементов крови, предварительно трижды отмьш эритроциты в физиологическом растворе. Количество эритроцитов в полученной суспензии контролируют на электронном счетчике для подсчета форменных элементов крови Picoscale PS-4 (количество эритроцитов) 4300000 + + 200000 в 1 мл).

Приготовление 5%-ного раствора фибриногена: 90 мг сухого фибринoreI на, приготовленного из человеческой i крови, разбавляют 2,5 мл дистиллированной воды.

102-ный раствор у-глобулина выпускается Киевским заводом бактерийных препаратов. Изменение вязкости плазмы в количестве 2,7 мл на микро- : электрореометре ВИР-79 МЭ в диапазоне скорости сдвига 0,7-121 с .

После измерения вязкости плазмы ;В нее добавляют 0,1 мл эритроцитарно суспензии 0,2 мл 5%-ного раствора фибриногена и 0,2 мл 10%-ного раст- вора, у -глобулина и измеряют вязкость полученной суспензии в диапазоне скоростей сдвига 0,7-121,0 . 1

Расчет показателей проводят по формуле

(а-в)

в

АЭ

100%,

где АЭ - агрегагдаонная способность

эритроцитов в процентах; а - -вязкость суспензии эритро- цитов в плазме с добавлением фибриногена и У -гло- ; : . булина;

в - вязкость плазмы. Определение Скорости сдвига, характеризующей гидродинамическую дегзацию эритроцитов.

Скорость сдвига, при которой происходит разрушение эритроцитарных агрегатов, можно определить расчетным или графическим методом.

Расчетный метод заключается в вычислении процента прироста вязкости суспензии агрегировавших эритроцитов на всех фиксированных скоростях сдвиQ га в диапазоне 0,7-121,0 (т.е. при 0,7; 1,8; 3,8; 6,3; 8; 13; 17; 28; 35; 58; 121 ). Скорость сдвига, при которой различие в величинах равно 6%, свидетельствует о на5 стуштении дезагрегации.

Графический метод за-ключается в построении графика зависимости вязкости от скорости сдвига (на оси абсцисс откладываются величины вязд кости, на оси ординат - величины скорости сдвига). Скорость сдвига, при которой различие вязкости плазмы, лишенной форменных элементов, и вязкости плазмы с агрегировавшими

5 эритроцитами будет несущественным

(порядка 6%), указывает на дезагрега-. .

Пример 1. Больной А. Вязкость плазмы при скорости сдвига 0,7

0 2,07 спз.

Вязкость плазмы с агрегировавшими эритроцитами при скорости сдвига 0, 2,48 спз.

Изобретение относится к медицине. Цель изобретения - повышение точности способа при исследовании плазмы с .высоким содержанием липидов. Регистрируют вязкость плазмы крови и вязкость плазмы после добавления эритроцитов, раствора фибриногена и гаммаглрбулина. Затем рассчитьгоают. агрегационную способность эритроцитов и определяют скорость сдвига, характеризующую гидродинамическую дезагрегацию эритроцитов. Способ позволяет изучать реологические свойства крови с учетом поведения клеток в потоке.

АЭ

i2Z2llI222 .)х 100%

Таким образом, агрегационная способность эритроцитов равна 20%.

При построении графика зависимости вязкости чистой плазмы и вязкости плазмы с агрегировавимми эритроцитами от скорости сдвига отмечено что при 58 . с различие вязкости дв проб равно 6%. Таким образом, при 58 с произошла гидро/данамическая дезагрегация эритроцитов.

Пример 2. вольной Л.

Вязкость плазмы при скорости сдвига 0,7 равна 1,68 спз.

Вязкость плазмы с. агрегировавшими эритроцитами при скорости сдвига 0,7 с равна 1,9 спз.

АЭ

Отсюда

в ( спз) 100%

. Т,

20%.

Агрегационная способность эритроцитов равна 24%.

При построении графика зависимости вязкости чистой плазмы и вязкости плазмы с агрегировавшими эритроцитами от скорости сдвига отмечено, что при 13 отличие вязкости двух проб равно 6%. Это свидетельствует о том что при 13 произошла гидродинамическая дезагрегация эритроцитов,

П р и м е р 3. Больной Ч.

Вязкость плазмы при скорости сдвига 0,7 с равна 1,45 спз.

Вязкость плазмы с агрегировавшими эритроцитами при скорости сдвига 0,7 с равна 2, 1 спз.

Э

Отсюда . (а-в),- 100%

- спз) 100% ./„ , 51

Агрегационная способность эритроцитов равна 44%.

При построении графика sasiiCHMo- сти вязкости бестромботдитарной плазмы и вязкости плазмы с агрегировавшими эритроцитами от скорости сдвига отмечено, что при скорости сдвига 58 с различие в вязкости двух сред равно 6%, т.е. скорость сдвига 58 характеризует гидродинамическую дезагрегацию эритроцитов.

Предлагаемый способ позволяет с достаточной точностью количественно определять агрегационную способность и дезагрегационные свойства эритроцитов с учетом поведения клеток в потоке. Способ прост, не только не требует дополнительных материальных затрат, и дорогостоящей аппаратуры, но и позволяет с большой экономической эффективностью использовать ротационный вязкозиметр, расширив сферу его применения при изучении реологических свойств крови.

62196

Формула

изобретения

Способ количественного определения агрегационно и девагрегационной способности эритроцитов, включающий отделение плазмы и добавление в нее эритроцитарной взвеси, обработку полученной смеси растворами фибриногена и )Г -глобулина, отличаю , щ и и с я тем, что, с целью повышения точности способа при исследовании плазмы с высоким содержанием липидов, регистрируют вязкость плазмы и полученной смеси и агрегационную способность эритроцитов определяют по проценту увеличения вязкости агрегированной суспензии по отношению к вязкости бестромбоцитарной плазмы

при скоростях сдвига 0,7-13 с , а дезагрегационную способность эритроцитов - по величине скорости сдвига, вызывающей гидродинамическую дезагрегацию клеток.