Способ определения устойчивости растений хлопчатника к фактору внешней среды Советский патент 1989 года по МПК A01G7/00 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к области физиологии растений, и может быть использовано в селекции растений, устойчивых к различным видам специфического и неспецифического поражений.

Целью изобретения является упрощение процесса и повышение точности, анализа.

На фиг,1 представлена кинетика изменения dA в зависимости от времени возде1 ствия фитопатогенов; на фиг.2 - то же, при воздействии

ультрафиолетом (1-4 - сорта хлопчатника, отличающиеся от устойчивости). Пример 1 о Определяют устойчивость растений хлопчатника 4 различных сортов 175-Ф, 108-Ф, Л-340, С-2607 к вертициллезу. Опытные растения 2-месячного возраста инфицируют среднеагрессивным штаммом гриба Verticillium dahliae Kl. биотип 2 (концентрация 3 -10 спор/мл). Ежедневно в течение четырех дней в 10-11 ч утра отбирают навески листьев контрольных и опытных растений (5 г), замораживают в ясидком азоте и опресл

о

N9 СЛ

(ik

деляют содержание водорастворимых ан тиаксидантов (ЗАО) сульфгндрильногп типа.

Ятя этого навеску листьев растира ют в ступке с жидким азотом до порошкообразного состояния и переносят с дистиллированной водой в мерную копбу на 100 мл, взбалтывают 10 мил. В смесь при постоянном помешивании добавляют 2,5 мл 1 М раствора суль- фосали1Ц1повой кислоты. Содержание колбы доводят водой до метки и ос-- тавляют после встряхивания на ЗСмин,. Пипеткой отбирают в кониче1-КУю колбу 50 мл фильтрата, 25 мл и 2,5 мл 4%-ного раствора сульфогалици ловой кислоты, 2,5 1Л 5%-ного раст зора К1, 10 капель 1%-ного раствора крахмала, встряхивают и 1итруют 0,001 н. раствором КЮ до появления устойчивой синей окраски.

Количество водорастворипьгх анти- оксидантов в условном пересчете :;а мг% восстанавливаемого глютатиока вычисляют по формуле

А (V Vo )-1,23/р,

де V V объем 0,001 н. КЮ, , заягра па трчтров 1нио npo6) объем 0,001 н. К1(1. затраченный на титрование контрольной пробы - при фильтрата равным объемом дистиллированной воды; 1,23 - коэффициент пересчета на содержание SH-глутатиона. мг%, 1 rj р - навескаi i. В табл,1 приведены данные по количесгну водорасгворимых антиксидантов у х:1опчатнпка.

По данным анализов опытных и конт рольнь1Х образцов в течение четьфех дней после воздействия фактора составляется табл,1 и вычисляется дифференциальный показатель dA Ад-Ац, где Ар- концентрация антиоксидан- тов в опытных образцах; А , - концентрация антиоксидантов в контрольных образцах. По данным табл.1 строится график кинетики изменения Л А в зависимости от времени для каждо- , го сорта (фиг.1). Устойчивость или I восприимчивость определяется знаком изменения лА в первые сутки, Количе ственный показатель устойчивости определяется точкой пересечения ккне0

5

тической кривой с абсциссой времени в области компенсации первичного сдвига в концентрации антиоксидантов ( -Г ,,ол1прнг)Для сортов 175-Ф и J1-340 по отри- дательному сдвигу 4 Л в первые сутки и пос- тецу1011ей компепсацни убьши ВДО в течение 1,5 и 4 сутпк построены кривые 2 и 1 на фиг. 1. Дня сортов 1()8-Ф и С--2607 }1аблюдается Bocnpsi- имчивсють к патогену, сопряженная с полоя:ительным слвигом (- Л А) в пер вые сутки 1 опредрпяемая временем компенсации (+ /lA) (1,4 и 2,6 суток - кривые 3 и 4 на фиг.),

В 1абл.2 причедены резу,;т;.таты кинетического аь ааиза.

Пример

9

Определяют

, СТоИ

5

0

5

0

чивость растений хлопчатника 4 сор- 1 ов : K/iLL i-PaijaT, iVauKeiii -1 , 108-Ф, С-4727 к УФ-облучению. Надземную часть опытных расченм) 2-месячного жгэраста подвергают УФ-облучению (ртутнокварцеваут лампа ПРК-7;30 с), После облучения ежедневно в течение 4 дней, в 1 1 ч утра отбирают образцы листьев контрольных и опытсых pacTi НИИ ( - 5 г) , заморажиилют в жидком аэоге и определ гют 1;одержанис Li/-() в pat-чете на 1 г навески (А р и А ц) и дифферен1у1альный показатель cuBvira в ко11центрации антиоксндантов.

В таОл.З приведены данные кинетического анагп-1за. Л А А (. А для каждого дня. Строят график кинетики изменения Л А/время дпя каждого сор та (фиг.2), из которого определяют по пересечению абсциссы кинетиче- (-КОЙ кривой момент компенсации отрицательного сдвига л А д. 1я ка/едогп испытуемого сорта ().

Наибольшую устойчивость к УФ-облучению показали растения сорта Кзьи-Рават (3,6 сут.), наименьшую - -108-Ф (1,6 сут.). Неустойчивость к испытуемой дозе УФ-облучения показали растения сорта С-4727, для котор з1х компенсация убьши антиоксидантов отсутствовала в интервале 4 сут,

Предлагаемый способ позволяет в кротчайший срок определить кине- -гические показатели, количественно оценить устойчивость и отобрать для селекции устойчивые к анализируемому фактору сорта растений.

Формула изобретения

Способ определения, устойчивости растений хлопчатника к фактору внешней среды, включающий Еоздействие на растение фактора внешней среды и определение антиокисаительной активности в образцах опытных и контрольных растений, отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса л повышения точности анализа, после воздействия фактора среды в 4 суток ежесуточно определяют концентрацию :эо- дорастБОримых антиоксидантов сульф- гидрильного типа и по знаку разности А , на первые сутки после

воздействия, где А, А , - количество антиоксидантов в опытных и контрольных образцах соответственно,

г растение относят к устойчивым, если АО Ац , или к восприимчивым, если Ац А,, при этом степень устойчивости или восприимчивости прямо пропорционально зависит от времени

10 компенсации сдвига Л А, при которой АС А, и тогда количественным критерием устойчивости является диапазон времени компенсации Л А для устойчивых растений, а к неустойчи15 вым относят растения, для которых в интервале А суток от начала опыта компенсация сдвига полностью отсутствует и JA / 0.

Таблица 1

Таблица 2

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к физиологии растений, и может быть использовано в селекции растений, устойчивых к различным видам спецефического и неспицифического поражений. Цель - упрощение процессса и повышение точности анализа. Для реализации способа после воздействия фактора среды в течение 4 сут 4 раза ежесуточно определяют концентрацию водорастворимых антиоксидантов сульфгидрильного типа. По знаку разности ΔА=Ао-А_к на первые сутки после воздействия, где А_о,А_к - количество антиоксидантов в опытных и контрольных образцах соответственно, растение относят к устойчивым или восприимчивым, если А_оΑ_K или A_OΑ_к соответственно. При этом учитывают, что степень устойчивости и восприимчивости тем больше, чем больше время от начала воздействия, при котором эта разность обращается в нуль, а к неустойчивым относят такие образцы, для которых в интервале 4 сут от начала опыта 98Д А не обращается в нуль. Количественным критерием устойчивости является диапазон времени компенсации Δ А для устойчивых растений. 2 ил.

сутки

Г компенсации, сут.1,5 Устойчивость +

( + ) - устойчивость; (-) - восприимчивость.

Таблица 3

л А t1

.

-1.

-2

Сатни

г

Фае1

3,8 1,А

-f 2,6

-3Сутии