Способ определения устойчивости растений к фитопатогенным поражениям Советский патент 1980 года по МПК A01G7/06 

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ УСТОЙЧИВОСТИ

РАСТЕНИЙ К ФИТОПАТОГЕННЫД ПОРАЖЕНИЯМ

1

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к общим вопросам ботаники, и может быть использовано для определения устойчивости растений к фитопатогеттым поражениям в селекционной работе.

Известен способ выведидия и испытания устойчивых к патогенным поражениям растений, при котором весь селективный материал выращивают в полевых услвиях в течение всего периода вегетации З

Однако такой способ связан с большими затратами труда и времени и визуальная реакция на патоген проростков или молодых растений не всегда позво.„ляет предугадать реакцию целого растения.

Известен способ определения устойчивости растений к неблагоприятным условиям внешней среды, в том числе к фитопатогенным поражениям, по котором определяют количество токсических веществ, появлял щихся в липидах растени под дейстпием неблагоприятных факторов и зависящих от степени устойчивости растений к тем или иным внешним воздействиям и поражениям 2 .

Однако такой способ достаточно трудо€э 1кий, длительный и не дает точных данных.

Цель изобретения - повышение точности опенки устойчивости растений к пато-гену и ускорение определения.

Это достигается тем, что в качестве биохимического показателя используют показатель антиокислительной активности липидпигментного комплекса через неделю после инфицирования, по сравнению с неинфицированным растением.

5

На чертеже изображен график зависимости антиокислптельной активности.

Способ осуществляется следующим образом.

Определяют антиокислительную ак0тивность липидпигментного комплекса (ЛПК), выделенного из листьев определенного яруса инфиштрованного растения, и сравнивают его с тем же показателем 3 неипфишфованного растения. Антнокисля 7«ельную актиыгость (АОА) огфеделягот методом термическогх) окисления метил олсатной модели. Для этого ЛПК экстр гируют ис, листьев смесью хлорО(юрмметанол (1:2), растворяют в 3-4 мл метилолеата с концентрацией ЛПК .1Q-20 мг/мл и размещают в окислительных ячейках с капиллярной трубтой помвценной в термостат. Температура окисления 80, ток кислорода не менее 6 л/час на каждую ячейку. Одновременно с началом обесцвечивания зеленого пигмента - хлорофилла ( BggoВ аце-гоне 0,3) из ячеек отбирают пробы для определения гидро перёкй(ёй. Количество гидроперекисей определяется йодометрическим титрованием. Для этого точное весовое количество окисляющегося субстрата ( « 2ОО мг) заливают 1О мл смеси хлороформ ледяная уксусная кислота (1:1), мз сосуда удаляют воздух путем продува1ш углекислым газом и прибавляют 1 мл насыщенного раствора КЗ в метаноле. Сосуд закрывают притертой пробкой и оставляют на 10-24 час в темном месте. Количество выделившихся гидроперекисей определяется по формуле: N-V Р - взятая навеска окисляюще:го ся субстрата; N nV - титр и объем раствора тиосульфата натрия. При построении кинетических кривы накопления перекисей при окислении стандартного метилолеата и метилолеа с ЛПК в зависимости от времени за величину периода индукции принимается время, в течение которого концентраци гидроперекисей станет выще О,1 ммол Величина АОА определяется по с)Ормуле -С,-to где to - пцтиод индукции ггри окислении стандартного метилолеата;. t: - период индукции п|эи окислении метилолеата с ЛПК; С - коицентрация ЛПК в метилолеате, г/мл. При из чении АОЛ ЛПК листьев растений, разли шых по устойчивости к заболевангао в норме (АОА.) и при заражении (АОА), характер изменения д -АСАц на 2-й, 5-й и 7-й дни после заражения разливши. Для устойчивых растений на 2-й день наблюдается снижение А АОА, на 5-й день - резкое увашстение, на 7-й дет-пь - устанавливается выше контроля. Для воспри1О-{Ч ;Гоых растений на 2-й день наблюдается повышешш ь АОА, на 5-й - некоторый спад, на 7-й снижение уровня л АОА шгже контрольного. Устойчивость сорта определяют по положительной величхгае v АОА ЛПК, измеренной па 7-й день после инфицирования растения патогеном, воспри1смчивость - по аналогичной отрицательной вел1тчине д АОА. Пример, 1-1сследуют АОА Л ПК листьев хлопчат шка сортов С-4727 и Кзыл-Рават двухК1есячногчэ возраста {стадия бутопизацш-О, вьфащеиных в одинаковых условиях теплицы Института экспери лентальной бз1ологии АП УзССР. Опытные растения инфицируют среднеагрессивным штаммом гриба Vert. .ioie КС,. биотип 2 (ЗЮ спор/мл), контрольные растения инъецируют равным объемом дистиллированной воды. Данные по АОА и д АОА, измеренные на 2-й, 5-й и 7-й дни после инфишфовапия, приведенные в таблице, подтверждают вилтоустоотивость сорта Кзыл-Рават (дА.ОА/7/ 5ОО) и восприимчивость сорта С 4727 ( АОА/ 7 / .400). Использование предлагаемого способа значитет1ьно сократит сроки и повысит эффективность диагностики устойч:явости растений к фитопатогенным поражениям. 572 изобретения Способ опрелеления устойчивости растений к фи1Х)патогенпым поражениям, включа1аций инфицирование растений фитопатогенами, извлечение липидпигментного комплекса и определение его биохимических показателей, отличающийся тем, что, с целью повышения точности оценки усто п1ивости растения к патогену и ускорения опрелеления, в качестве биохимического показателя используют

3показатель антиокисяитсльной активности яипилпигментного комплекса через НОЛ ОЛЮ после инфицирования, по сравнепшо с не шфишфованным растением. Источники информашш, принятые во внимание при экспертизе 1.Тарр С. Основы патологии растений. - М,: Мир, 1.975, с. 512-514. 2.Авторское свидетельство СССР Ki ЗОЗО23, вд. Л 01 Н 1/04, 1970 (прототуш).