Способ выявления холодоустойчивых самоопыленных линий кукурузы Советский патент 1989 года по МПК A01G7/00 

И.зобретение относится к области сельского хозяйства, а именно к селекции и семеноводству, и может быть использовано научными учреждениями при создании холодоустойчивых сортов и гибридов кукурузы.

Ие.лью изобретения является ускорение диагностики и повышение надежности оценки самооныленных линий кукурузы на хо- . юдоусгойчивость.

Пример. Используют самоопыленные .пинии раз. 1ичной холодостойкости: ВИР 158 ЗТ; 04787; Р2465; Грушевская 380; 0634; 04732; Р 215, Р1320; 04299; Р2568; ВИР 133 ЗТ, Р148.

Зерна в количестве 4-5 шт. каждой линии замачивают в дистиллированной воде ни 17 ч при комнатной температуре, промывают 1%-ным раствором перекиси водорода и помешают в чашки Петри на влажную фильтровальную бумагу. Последние ставят в термостат и проращивают при

постоянной температуре в течение 7 сут с ежедневным девятичасовым освеп1ением мопиюстью 5000 лк. После этого отрезают часть листа одного из растений, а чашки Петри с проростками переносят в xo,io- дильную камеру и выдерживают там при 8--9°С. в течение 4 сут. По прои1ествии 4 ч опять отрезают часть листа и третью пробу берут в конце охлаждения (4 сут). Отрезанные листья измельчают каждый в отдельности, отвешивают по 100 мкг каждой пробы, приливают по 500 мкл холодного буфера, содержащего 5 мм триста, 38 глицина, 30% сахарозы, р П 8,3, растирают в фарфоровой ступке и ставят в хо.юдиль- ник на 0,5 ч. После этого гомогенат центрифугируют при 10000 в течение 20 мин и надосадочную жидкость испо,1ьзуют д, 1Я электрофорети чес кого разделения.

Электрофорез в катодном направлении проводят в 5%-ном концентрирующем и

сд

со ел

00

ел

1(1, ill) м |);i ( u . 1ЯН)||Ц М IK), I n;i кри I a i ИЛ1И

ir.U , IK lll) 11))уЯ i lU Tl MV Л :1ИИСП, и U . lOliblX

II, ам III-:K;I pa )( I2I)12()2 MM, lla ло;iu,KK наносят no .)f) MK,I no, i MC iiiioi o

(ipa имка, ). 1гк p(,)ptM lu iyr 0,Г) ч

i pM на II )я, К1 111111 20(1 И и rii, u юка 51) i Л

н,1 ПК и, кк i и нки, а iaicM viiu л.Г) ч при

на iipn/K(ЧИП 1)1)0 П II 1 и, ioka 1 Г)0 мЛ, I Iov ,4c

i4 oi| a4ii /i -j, R K 1 po(j)opf ;а rr,ii (г на

) ч I 0,02%-11ЫИ )аг нор голянокис. ки о

| ич1(илина, :i ри го loB. iriiiioro на ,iiu-ia Ho i

Глфгрг р11 -1,7, (П К М 0,1,| иор

nrnt KM, II 1))лор(1л;|, - ian M :ч ,П1 niiMcaiaioT и

I, ч ijii, м, aiK на 17 ч н П н чг viiiio (Ччани

)1 V- ( iiiu.K) , la ii piiDi I) U4ir, (ч pa ,

I ii- III hviHiiisOM cm л a (., i с, ( лк оноиьи

2С

i:|-, г.ХКХрХ 1Ы FI v4Ui ill в ICM, Ч Ю И КаЧес 1Ве

м,, 1,ер11 i.ix и (онсроксила i асно, 1Ы ю i ся in niniH.ii и и)(|)е|)ПчЧГ1 ы, н меюипн ся у всех гено- iiiiioH ку ку (Ы (/еа inav-, 1.), на (iiij)rie ,ieiii:c хо, юлос MiMKOi i а пс иак,1ал111иакм ся факюры I енетиче ко: о la (нообра (пя р , 1,1,

; ,1 U р1Ч( IMh, . ,: Л а j si pH Ы X i; I , ., , ,,,, Ь; . ), Л. ; , ;; П,| , ( ЬП I ро

Mai |iiip i ,ii::.i:i II (офсрмеп I с (1Ппч11Л ль- MI III , |1Чч 1 ji( lijii ijH : ическои нол ж поел ыо (().-) 1 / ,) I I h 11 ipi III ха pa к I ерн Mil и ) |lЧl : I I ) ч| id, pat iio, lo/Kcii iii.iii u срелпеп Mc Л ;, ,| II , : ; ,,iu II ii ,кеала ил

,,, I I ; ; i ,1 ( к I l . 410 ч II I- ,141) I ,, я BCtVX

111 l j , 1 , , i, Is K, p ,bi ; 1 с M ч i, I ,, -4 M о I I оЫ I I, M,u4i л фи ;iii;i(iBa 111,1 на i ч- рофорс pa мм, x 25

,ПОСОО ИЫЯ1, 1СЧ1 ч яхо,ЮЛОХЧ 1 0|1ЧИ|1Ы X

са моонылешап X iiinini ,1, ик,К) UII1I; нрора п:ч ita мне нчлм при онти ма, ibiii.ix , .м|1,),1Г pa , . ,1Чил i iir ,1 1);ил1ЧП1е ini,, ixiiMii ( p.iMii, iiu, i 4i ,4iU пс,;к1,,ьых

- i ,,l 1 Ч/КСК II ,111СГ1,ГК н ), ; I I роф()рг 1ПКЧ KI ч

j a ; If. i4ilti и foiic poni H la , .144nxnii iiiii

Iем, 410, с ill , ibi i X I KO|:i , оПЧ l liori ч Isl;

II;ii liiiii шечня и.ч ii , i ;i :, , ,11Л- с,-1мо,::л,

, 1Ч1ПЫ X ,111111111 К К pV .:,, 1,1 ХО И i 1: . i i i i,iMIII, i II,, , 1,1Я i|o I 441 И V Г | i I-,,I ),i X i; , л ,i ,

H П , |11 рИ( | : ,, ,iio4 Be, I и 411 Hill. - HCIio, I 1) iy O I ,1Н1ЛЧ,Я , ( UK iMU)IX llpOpoCiKOB,

о 14 Mi Mix i|iopM о| к чечо посте-a ;ii-,,/Ke ,Ис11,я , upopi ч Лхов

40 ;pac : .лчН ,IK i и г,Ч(ц reiiiiO . К 4 ,)-часового и ,i 4 с ючном) ox

1ажлен11Я, :1,-1ек1 ро(|1ор(, з в 11олнакрн, ном |г,1с ,1Я 1 в каголном нанра :i,i(.4i и и

| кур u-il 4 1:, Ч1ачеч1 п toiiepoi снла -, 1 ( )И 1 ЗО II 7Г) ск la.iMBaioi и n|Mii;o i с|)авнен1К н оора та ло ох,1ажлеп; я обра И;,1 iioc,k 4 4 ох, |,чжле41ИЯ о()|)а,л; 1,1 пос,|е4 с 1 I ;х, la/1,1еп11Я I 1)Н хо юло- 4-To 1-4ч iii.ix , III HHi t к к )узы HOI ,11- 4 4 ох, 1аж ичп14 проасхолн IU . 11141411К i: ю

4;а ;14 | Л1К04 а К I II В Н ОС I 11 ) Л1-И. X NMplxepliblX

,,,, П la 1. Koiop,4, к . I с i н,1лает

,1, ,iiO

,ii nepokcaiai, BITIOIB ло 4 ох,|а/кле- ,ич, a IK XI), 10 ,1JC I iJiiKHx об)азпов П()с,и

I,) 4 ox ичжлепп - нронсхолп спа l «лммы 49 и HO лчпамике ншенення ,i ач:ив 4 :л-1чвн()сич1 ,111н ы X и iO(, ко-кч п ипк рокечма с о niocin e,ii iioii - ieK |ii

I1}4,1г за гем н а чн наел во ip-ч i i а л,,ф| il -e i п чее кои иол ы /к носпао .V.1 i 14/,

i ы ,ч I ы и вменения 1,, ii,ioiua,n4iле,ЯК)| у с тончи iUiK к xo,io.i обра i,и,:, . -,

никои ( а к 1 ипос I сч1 1, католпых н ioiu роксн 1,1 ; с (),- I ,VJ н 7,) ,П1сТ1,г|-; i ророс

11.В,1Я, 410 они Ха рак 14 рИ IN || II I я П; -КИЧ

||о|51,1П1еннем сумм1)1 фе а тии,4ои aKinii

к,,1 НОЛ ,U4iciBHeM ох, la/клен I; ности: л,чя ,и1Нных н,«11И роксила i нос, ,

|| ||вел41Ы в таб лпи } , 4 ох,1ажл1чп1Я с нос, К лу loaiii м i50ii-,,alipi 1, ia I :ил1 Bill июсоб вв1яв, ICH a Я xo,io-iiU4iiie : к исхолному -niaHeiiiiH) к Kiii::i nx |H -,; X aiiiMH оечюван на рез-,чаж,нч1ИЯ па , i -1 cyiKH,

Koil I paiiei()op iauHii жник ниькх функций (.лои11Й через iiecK(),ibk(j часов iioc.ie к(Ул- ле1илиия низко гем11е)атурн(И о ст|)есса е посмел юшими алиитаииоииыми изменениями li снсл еме окислит(мы101и)естановите.)1 peaKiuiit. что конечном счете на,олиг ciioi выражение и из кч1ен11и активностей ,N ти||ичн1), и,1О11ерокеилаз листьев иро- рос 1ч ов, Измешчшя , процессов у , uiHnii ра,(, 1ИЧНОЙ ,хололоус I О11чииоети происхолит

ио разному,

С

Ие11о, 1ьзова 1П(, 11рел,1а1 аемого споеооа ,1е11ия хо, И)Л I- I оичивых caM(K,iiii)i,ieH iiiiix ,11П1НЙ ы iHj ерааненик) с нз1ич ТИ1)1м по,)во,-|яет на П1нималыи)м чис, 1е iepeii (-4 Г) 11Г1 ) в течсчше ,) К) лнсл; oiifH - ,;ел111, хо oiiKoi л I, (, К)Н1Ихся оора , г.ХКХрХ 1Ы FI v4Ui ill в ICM, Ч Ю И КаЧес 1Ве

м,, 1,ер11 i.ix и (онсроксила i асно, 1Ы ю i ся in niniH.ii и и)(|)е|)ПчЧГ1 ы, н меюипн ся у всех гено- iiiiioH ку ку (Ы (/еа inav-, 1.), на (iiij)rie ,ieiii:c хо, юлос MiMKOi i а пс иак,1ал111иакм ся факюры I енетиче ко: о la (нообра (пя р , 1,1,

11.В,1Я, 410 они Ха рак 14 рИ IN || II I я П; -КИЧ

||о|51,1П1еннем сумм1)1 фе а тии,4ои aKinii

ности: л,чя ,и1Нных н,«11И роксила i нос, ,

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано при создании холодоустойчивых сортов и гибридов кукурузы. Цель - ускорение диагностики и повышение надежности оценки самоопыленных линий кукурузы на холодоустойчиволсть. Поставленная цель достигается тем, что для получения белковых вытяжек используют листья 7-8-дневных проростков, а также листья таких же проростков после 4-5-часового и 3-4-суточного охлаждения, электрофорез в полиакриламидном геле проводят в катодном направлении и по динамике изменения суммы активностей изопероксидаз с относительной электрофоретической подвижностью (ОЭП) 30 и 75 определяют устойчивые к холоду образцы, которые характеризуются резким повышением суммы ферментивной активности для указанных изопероксидаз после 4-5 ч охлаждения с последующим возвращением к исходному значению к концу охлаждения на 3-4 сут. 1 табл.

iillP 1 j3 jT Холодостойкая

Л4787

P246S-

510 400 1 100

) о

Среднехолодостонкая

Ср ед Fieхглслое тонкая Нехолодостойкая

Продолжение таблицы

400 500 480 300 500 370 150

230 280

620 600 580 37(1 630 47П 280