Штамм водоросли СнLоRеLLа VULGaRIS - продуцент зеленой биомассы Советский патент 1989 года по МПК C12N1/12 

(21)4306762/31-13

(22)18.09.87

(46) 23.12.89 Бюл. № 47

(71)Институт физиологии растеншЧ им.К.А.Тимирязева

(72)В.Е.Семененко, М.Г.Владимирова, З.М.Рамазаиов и М.Э.Лойде

(53)636.085:639.64(088,8)

(56) Авторское свидетельство СССР № 644140, кл. С 12 N 1/12, 1974.

Авторское свидетельство CCCI № 237779, кл. С 12 N 1/12, 1967.

(54)ШТА1111 ВОДОРОСЛИ CHLORELLA WLGA- RIS - ПРОДУЦЕНТ ЗЕЛЕНОП БИОМАССЫ

(57) Изобр -тение относится к биотехнологии и, а частности, к получению зе: ной биомассы путем культивирова- иил фэтоавтотрофных водорослей. Целью изобретения является получение новою штамма водоросли, обладающего более высокой продуктивностью. Штамм Chlorella vutRaris отселектирован из штамма Chlorella -.-algaris ЛАРГ-3 де-;1сгвием выс;.1кои темперагурм (46 C)j дспокирован в коллекции одпоклеточ- li .rx водорослей ;1ФР под ;icMepi;M С-66. Срел, есуточный прирост числа клеток 670-680 м п;/м;1, а известн1гх 400-600. 3 таол.

Изобретение относится к биотехнологии и, в частности, к получению зеленой биомассы путем культивирования фотоавтотрофных водорослей. Целью изобретения является получение нового штамма водоросли, обладающего более высокой продуктивностью. Штамм CHLORELLA VUDGARIS отселектирован из штамма CHLORELLA VULGARIS ЛАРГ-3 действием высокой температуры (46°С)

депонирован в коллекции одноклеточных водорослей ИФР под номером С-66. Среднесуточный прирост числа клеток 670-680 млн/мл, а известных 400-600. 3 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к получению зеленой биомассы путем культивирования фотоавтотрофных водорослей, а именно к новому штамму водоросли.

Целью изобретения является получение нового штамма водоросли, обладак;- щего более высокой продуктивностью. Штамм Chlorella vulgaris получен в Институте физиологии растений им. К.А.Тимирязева АН СССР и депонирован в коллекции одноклеточных водорослей под номером С-66, отселекти- рован из штамма ЛАРГ-3 действием высокой температуры (46 С) и характеризуется следующими признаками.

Морфологические признаки штаг-ма. Темно-зеленые клетки Г1аровидной формы, размер клеток на агаризованной питательной среде Тамия 3-4 мкп,, на жидкой питательной среде Тамия и на

среде с мочениной 2,7-7 мкм. Автоспоры эллипсоидные. Особенности морфологии 3 условиях оптимального роста: др.чение на 4-8 автоСпор. Колонии на агаризованной среде Тамик крупные, ПЛОТНЫ /, гладкие, темно-зеленого цвета,

изиологическис- признаки штамма. Оптимад ьными условиями для вьфаш{ ва- ния являются; Тамия следующего состава г/л: , 2,5; , 1,.25; FeSO. ,003; ЭДТА О,037.раствор микрозлементов, г/л: Н,ВОя 2,86, MnClj 1,81; ZnS04 7H20 0,22,-МоОз 176,4 мг/10 л, NH4V03229,6, питателт-.ная среда след тощего с остава, г/.ггг мочевина 1,3, аммофос 0,5, ка- 0,4, NaHCOj 1,5; раствор микроэлементов 1 мл, п,

3 качество источника неорганического углерода используют СО/,, бикарбоСП

со о а со

нат, мочевину. Состав газовоздушной

Источник азо- Оптимальсмеси: воздух с 2% СО та: нитрат калия, мочевина. ный рост при 35-38 С, освещение круглосуточное искусственное, люминесцентные лампы ЛБ-80 и ксеноновая лампа ЛКСТВ-6000 40-100Вт/м.

При описанных условиях продуктивность штамма в накопительном режиме 7 г сухой массы/л суспензии или 680- 700 млн клеток/мл суспензии на линейной стадии роста за сутки. Культура имеет оптимум рН 7,8-8, однако культура хорошо растет при значении рН 6,5-8,5. Биомасса в условиях интенсивного культивирования следукицего состава, %: белки , углеводы 18-20; липиды 19-24; хлорофилл ,3; каротин 0,5.

Итамм устойчив к контаминациям, не агглютинирует при периодь-ческом разбавлении, автолиз не наблюдается,

Штамм поддерживрг - на среде Таьшя при 20-25°С, освещенно -.ти 2000 лк , штамм хранится при 10-i2°C на агари- зованной среде Тами ., которая и является минимальной температурой роста

Пример 1. Водоросли Chiorelia vulgaris С-66 и Ghlorella vulgaris ЛАРГ-3 культивируют в условиях интен- сивного роста в плоскопараллельных сосудах при круглосуточном освещении люминесцентными лампакти ЛБ-80 (50 Вт/м ) и барботировании суспензии

газовоздушной смесью с 2% Cf) и температуре 36 С на среде Тамия и среде с мочевиной.

Среда Тамия, г/л: KNO 5; fgS04 7niO 2,5; 1,25; 0,003; ЭДТА 0,037, раствор микроэлементов 1 мл/л, г/л: , ,В6, linClj 1,81-, JH.iO 0,22; MoO, 176,4 мг/10 л, , 229,6.

Среда с мочевиной, г/л: мочевина 1,8 аммофос 6,5, калимагмезия 0,-ij NaHCOj l,5j раствор микроэлементов 1 мл/л.

Сравнительная характеристика роста и накопления биомассы Clilorella vulparis С-66(1) и Chlorulla ris ЛАРГ-3(2) в условиях инт-енсивно го культивирования на среде Таьгая дан в табл.1.

Сравнительная характерИ , : ост- и накопления биомассы Chlor ;;1Ta vulgaris С-66(1) и Chlorella vulgaris ЛАРГ-3(2) в условиях интенсивного культивирования на среде с мочевиной дана в табл.2.

Полученные данные свидетеллствуют о том, что Chlorella С-66 более продуктивна, чем Chlorella vulgaris ЛАРГ-3. Продолжительность лаг- периода 12 ч. Продуктивность за этот промежуток культивирования составляет около 25-30 млн кл./кп или 0,01- 0,03 мг/мп. Экспоненциальная фаза роста составляет около 60 ч. Продуктивность за этот период 900 млн кл./мл или 0,9 мг/мл. nocjie 72 ч культивирования продуктивность штамма выходит на плато.

Приме р 2. Культивирование клеток водорослей Chlorella vulgaris С--66 и Chlorella vulgaris ЛАРГ-3 проводят в условиях интенсивного накопительного выращивания при круглосуточном освещении 50 Вт/м и барботировании суспензии газовоздушной смесью с 2% СО, температуре 36 С на среде с мочевиной. По достижении плотности культуры около 900 млн кл./мл суспензию разбавляют каждые 24 ч до плотности 200 млн кл./мл. В условиях квазинепрерывного культивирования Chlorella vulgaris С-66 быстрее восстанавливает первоначальную продуктивность по сравнению с Chlorella vul.qp. 1АРГ-3.

Сравнительная характеристика роста и накопления биомассы Chlorella vulgaris С-66(1) и Chlorella vul, ЛАРГ-3(2) в условиях ква-Эинепрерывно- го культивирования дана в тлбл.З.

Таким образом, предлагаемы штамм Chlorella vulgaris С-66 является бо лее продуктивным по сравнению с lin- вестным.

Формула изобретения

Ilтaм водоросли Chlorella vulgaris Beijer -ИФР (К;-66 - продуцент зеленой биомассы.

Таблица 1