1
Изобретение относится к штамму одноклеточной зеленой водоросли Chlorella vulgarisA, предназначенной для получения зеленой биомассы.
Известен штамм одноклеточной зеленой водоросли Chlorella vulgaris ЛАРГ-3, который используется для получения биомассы зеленых водорослей. Недостатком штамма Chlorella vulgaris ЛАРГ-3 является длительный световой период (12 ч), что снижает его продуктивность в весенние и осенне-зимние месяцы.
Предлагается штамм одноклеточной зеленой водоросли Chlorella vulgaris А.
Исходным для селекции штамма Chlorella vulgaris А был штамм хлореллы № 174 из коллекции ПОГен. Исходный штамм подвергли действию высокой температуры в условиях короткого светового дня, в результате чего по количеству автоспор отобрали несколько промежуточных штаммов. Последние были обработаны тритированным тимидином с активностью 5 мкКи/мл в течение 3 сут. После отмывки и отбора по продуктивности получено несколько высокопродуктивных штаммов хлореллы, среди которых лучший Chlorella vulgaris А.
Морфологические признаки. Клетки шаровидные, диаметром 4-10 мкм на твердой и 3-7,2 мкм на жидкой питательной среде Тамийя. Окраска темно-зеленая, оседают на жидкой среде медленно, легко взмучиваются. Автоспоры круглые. Колонии на агаризованной среде Тамийя крупные, плотные, гладкие, круглые, темно-зеленого цвета, край резко очерчен. Диаметр колонии зависит от интенсивности освещения.
Физиологические признаки. Делится на 16- 32 автоспоры. Штамм автотрофный. Растет на водопроводной воде с добавлением минеральных солей (среда Тамийя). В полупроизводствеииой установке хорошо растет на водопроводной воде с добавлением минеральных удобрений. Добавление в среду мочевины не
оказывает суш,ествениого влияния на развитие культуры. Продолжительность цикла развития в оптимальных условиях 19,5 ч. Продолжительность светового периода в цикле развития 9 ч. Оптимальный режим освеш;еНИН - 8 ч света, затем 1 ч темноты и опять свет в течение 1 ч. В условиях естественного (солнечного) освещения затемнение в течение I ч достигается осаждением суспензии. Опти.мальная температура культивирования 35-
, переносит кратковременный (несколько часов) перегрев до 45-48°С. Интенсивность освещения 100 000 лк. В лабораторных условиях температура культивирования 36-37°С, интенсивность освещения 30000 лк; среда
Тамийя, биомасса Chlorella vulgaris А содерЖИ1 45,6% белка в расчёте на абсолютно сухой вес. При культивировании в лабораторных условиях (без продувки) на третьи сутки достигается плотность клеток 13-15 млн/ /мл при исходной плотности 1 млн/мл.
в полупроизводствеииых условиях количество белка в биомассе измепяется в течение суток и колеблется в пределах 52-64% на абсолютно сухой вес.
В полупроизводственных условиях в период апрель- ноябрь 1973 г. средняя продуктивность с 1 м освещаемой поверхности составляла 29,1 г абсолютно сухого веса в сутки, а продуктивность в световой час - 3,2 г. Таким образом, среднемесячная продуктивность биомассы в полупроизводственной установке с 1 м2 освещаемой поверхности на 50-60% больше, чем у производственного штамма ЛАРГ-3 при сокращении светового периода с 12 до 9 ч.
Более высокая продуктивность полученного штамма обусловлена укорочением светового периода в цикле развития до 9 ч (против 12 ч у штамма ЛАРГ-3) и увеличением количества автоспор до 16-32 (против 8-16 у штамма ЛАРГ-3).
Формула изобретения
Штамм одноклеточной зеленой водоросли Chlorella vulgaris А, предназначенный для получения зеленой биомассы.
Хранится во Всесоюзном научно-исследовательском биотехническом институте. Регистрационный номер HV А-1.
Морфологические признаки. Клетки шаровидные, диаметром 4-10 мкм на твердой и 3-7,2 мкм на жидкой питательной среде Тамийя. Окраска темно-зеленая, оседают на жидкой среде медленно, легко взмучиваются.
Автоспоры круглые. Колонии на агаризованной среде Тамийя крупные, плотные, гладкие, круглые, темно-зеленого цвета, край резко очерчен. Диаметр колоний зависит от интенсивности освещения.
Физиологические признаки. Делится на 16-32 автоспоры. Штамм автотрофный. Растет на водопроводной воде с добавлением минеральных солей (среда Тамийя). В полупроизводственной установке хорошо растет на водопроводной воде с добавлением минеральных удобрений. Добавление в среду мочевины не оказывает существенного влияния на развитие культуры. Продолжительность цикла развития в оптимальных условиях 19,5 ч. Продолжительность светового периода в цикле развития 9ч. Оптимальный режим освещения - 8ч света, затем 1 ч темноты и -опять свет в течение 1 ч. В условиях естественного
(солнечного) освещения затемнение в течение 1 ч достигается осаждением суспензии. Оптимальная температура культивирования 35-38°С, переносит кратковременный (несколько часов) перегрев до 45-48°С. Интенсивность освещения 100 000 лк. При культивировании в лабораторных условиях (без продувки) на третьи сутки достигается плотность клеток 13-15 млн/мл при исходной плотности 1 млн/мл. Среднемесячная продуктивность
биомассы в полупроизводствеиной установке с 1 м освещаемой поверхности на 50-60% больше, чем у производственного шта.мма ЛАРГ-3 при сокращении светового периода с 12 до 9 ч.
Источник информации, принятый во внимание при экспертизе:
1. Ваулина Э. П. Селекция продуктивных форм водорослей, сб. «Генетические основы селекции микроорганизмов. М., «Наука,
1969.
